i

INDUKSI PERTUMBUHAN TUNAS DARI EKSPLAN

ANGGREK Dendrobium heterocarpum Lindl. DENGAN

PEMBERIAN HORMON ZEATIN DAN NAA

Skripsi

Sebagai tugas akhir untuk memenuhi syarat mencapai derajat Sarjana S-1

Program Studi Biologi FMIPA Universitas Udayana

Oleh

Ni Luh Putu Kayika Febryanti

1208305023

PROGRAM STUDI BIOLOGI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS UDAYANA

BALI

2016

ii

SKRIPSI

INDUKSI PERTUMBUHAN TUNAS DARI EKSPLAN ANGGREK

Dendrobium heterocarpum Lindl. DENGAN PEMBERIAN HORMON

ZEATIN DAN NAA

Oleh

Ni Luh Putu Kayika Febryanti

1208305023

Telah dipertahankan di depan Tim Penguji dan telah dinyatakan lulus pada

tanggal 4 Mei 2016

Menyetujui

Pembimbing I Pembimbing II

Ir. Ida Ayu Astarini, M.Sc., Ph.D Dr. Ir. Made Ria Defiani, M.Sc (Hons)

NIP. 19680327 199302 2 001 NIP. 19660820 199303 2 002

Mengesahkan

Ketua Program Studi Biologi

FMIPA Universitas Udayana

Dwi Ariani Yulihastuti, S.Si., M.Si

NIP. 19730711 199802 2 002

iii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena atas

berkat dan rahmat-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul

“Induksi Pertumbuhan Tunas dari Eksplan Anggrek Dendrobium

heterocarpum Lindl. dengan Pemberian Hormon Zeatin dan NAA” sebagai

tugas akhir untuk memenuhi syarat mencapai derajat Sarjana S-1 di Program Studi

Biologi FMIPA Universitas Udayana.

Selama penyusunan skripsi ini, penulis banyak mengalami hambatan tetapi

berkat dorongan berbagai pihak penulis dapat menyelesaikannya. Untuk itu pada

kesempatan yang baik ini penulis menyampaikan ucapan terimakasih kepada:

1. Yth. Ibu Ir. Ida Ayu Astarini, M.Sc., Ph.D. selaku pembimbing I atas ide-ide,

serta bimbingan dan semangat selama persiapan proposal, penelitian hingga

penyelesaian skripsi ini.

2. Dr. Ir. Made Ria Defiani, M.Sc (Hons) selaku dosen pembimbing II atas

masukan, saran, dan bimbingan serta semangat selama penulisan skripsi ini.

3. Yth. Ibu Dr. Dra. Eniek Kriswiyanti, M.Si., Ibu Ni Luh Arpiwi S.Si, M.Sc.,

Ph.D., dan Ibu Dr. Ni Luh Suriani, S,Si., M,Si selaku penguji I, penguji II dan

penguji III yang telah memberikan masukan, kritik dan saran selama

penyusunan hingga penyelesaian skripsi ini.

4. Yth. Ibu Dr. Dra. Ni Putu Adriani Astiti, M.Si. selaku dosen pembimbing

akademik atas bimbingan dan nasehatnya.

5. Yth. Ibu Dwi Ariani Yulihastuti, S.Si., M.Si., dan Ibu Ni Made Suartini, S.Si.,

M.Si selaku ketua dan sekretaris Program Studi Biologi atas bantuannya

dalam kelancaran administrasi selama persiapan, penelitian hingga

penyelesaian skripsi ini.

6. Yth. Drs. Ida Bagus Suaskara M.Si. selaku Dekan FMIPA Universitas

Udayana atas bantuannya dalam kelancaran administrasi selama penyusunan

hingga penyelesaian skripsi ini.

iv

7. Ayah I Ketut Renaya, Ibu Desak Putu Wardani, Adik Made Dimas Adi Krisna

dan Komang Surya Adi Reinaya atas bantuan, dukungan dan semangat selama

penelitian hingga penyelesaian skripsi ini.

8. Vemy Claudia, S.Si., Yuli Setiawati, S.Si., Ni Putu Yuni Astriani, S.Si., M.Si,

Lucia Emy Octavia S.Si dan Kadek Desi Kartika S.Si atas bantuan, dukungan,

nasehat dan masukan selama penelitian hingga penyelesaian skripsi ini.

9. Teman-teman Angkatan 2012, Ni Ketut Mas Suratniasih, Ni Kadek Losiani, I

Gusti Putu Diah Purnama Sari, Ruth Ellisa Christiani, Wiwik Sinta Devi, Diah

Kharismawati Djereng, Eka Budi Mursafitri dan Ni Wayan Bella Handayani

atas dukungan dan masukan selama penelitian, penyusunan hingga

penyelesaian skripsi ini.

10. Seluruh dosen pengajar, staf pegawai dan rekan- rekan serta semua pihak yang

tidak dapat penulis tuliskan satu persatu, yang telah banyak memberikan

dukungan selama penulis menyelesaikan skripsi ini.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini belum sempurna sehingga penulis

mengharapkan adanya kritik dan saran yang bersifat konstruktif bagi

penyempurnaan skripsi ini. Atas perhatiannya, penulis mengucapkan terimakasih.

Jimbaran, Mei 2016

Penulis

v

ABSTRAK

Anggrek Dendrobium heterocarpum Lindl. kini mulai sulit ditemukan

akibat adanya eksploitasi sehingga kelangkaan anggrek spesies ini merupakan

permasalahan yang harus segera diatasi. Salah satu solusi dalam perbanyakan

anggrek D. heterocarpum Lindl. adalah dengan teknik kultur in vitro. Tujuan

penelitian untuk mengetahui pengaruh kombinasi antara hormon Zeatin dan NAA

pada media dasar Murashige dan Skoog (MS) terhadap multiplikasi tunas

anggrek. Penelitian dilaksanakan pada November 2015 hingga Maret 2016 di

Laboratorium Kultur Jaringan Tumbuhan, Program Studi Biologi, FMIPA,

Universitas Udayana. Percobaan disusun dalam Rancangan Acak Lengkap (RAL)

dengan 20 kombinasi perlakuan dan 3 ulangan. Perlakuan terdiri atas penambahan

Zeatin dan NAA dengan 5 konsentrasi Zeatin (0, 0,1, 0,5, jagung manis dan

jagung hibrida sebagai Zeatin alami); 4 konsentrasi NAA (0, 0,05 , 0,1 dan 0,5).

Data berupa jumlah tunas, jumlah akar dan vigor eksplan. Data kuantitatif berupa

jumlah daun dan tinggi tunas pada umur 12 MST dianalisis dengan Analysis of

Variance (ANOVA) dan jika berbeda nyata diuji lanjut dengan Duncan Multiple

Range Test (DMRT) pada taraf 5%. Media Z5N3 berpengaruh nyata terhadap

pertumbuhan jumlah daun dan tinggi tunas serta media terbaik dalam

pertumbuhan jumlah akar. Kombinasi hormon yang mampu merangsang

multiplikasi tunas baru anggrek terbaik adalah pada media Z4N3 dan Z5N1.

Kata kunci: Multiplikasi tunas, kultur in vitro, D. heterocarpum Lindl., hormon

tumbuh

vi

ABSTRACT

Dendrobium heterocarpum Lindl. is a native orchid in Indonesia. Its

population continue to decline due to unsustainable exploitation. One solution to

increase its population is via in vitro technique propagation. This research aimed

to determine effect of hormone addition (Zeatin and NAA) to induce shoot

multiplication of D. heterocarpum Lindl. grown in Murashige and Skoog (MS)

basic medium. The research was conducted in Tissue Culture Laboratory,

Department of Biology, Faculty of Mathematics and Science, Udayana University

from November 2015 until March 2016. The experiment employed Completely

Randomized Design (CRD) with 20 combinations of treatments, with three

replicates each treatment. The treatment werer addition of Zeatin and NAA, with

five concentrations of Zeatin (0, 0.1, 0,5, sweet corn and hybrids corn as the

natural Zeatin); four NAA concentrations (0, 0,05, 0,1 and 0,5). Variable recorded

include such as the number of shoots, roots and explant’s vigor. The quantitative

data which include number of leaves and shoots after 12 weeks, were analyzed

using Analysis of Variance (ANOVA); and if significantly different, tested further

using Duncan Multiple Range Test (DMRT) at 5% level. Z5N3 medium revealed

significantly different on amount of leaves and shoot height and also the best

medium on amount of roots. Best hormone combination that can induce

multiplication of new shoots are medium Z4N3 and Z5N1.

Key words: Shoots multiplication, in vitro technique, D. heterocarpum Lindl.

Plant hormone

vii

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i

LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................... ii

KATA PENGANTAR ................................................................................... iii

ABSTRAK ..................................................................................................... v

ABSTRACT ................................................................................................... vi

DAFTAR ISI .................................................................................................. vii

DAFTAR TABEL .......................................................................................... ix

DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... x

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xi

I. PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang ............................................................................... 1

1.2. Rumusan Masalah .......................................................................... 3

1.3. Tujuan Penelitian ........................................................................... 3

1.4. Manfaat Penelitian ......................................................................... 4

II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Tanaman Anggrek ......................................................................... 5

2.1.1. Anggrek D. heterocarpum Lindl. ............................................... 7

2.2. Kultur Jaringan .............................................................................. 8

2.3. Subkultur ....................................................................................... 10

2.4. Media Kultur Jaringan.................................................................. . 10

2.5. Hormon .......................................................................................... 11

III. METODE PENELITIAN

3.1. Metode Pengumpulan Data............................................................ 13

3.1.1. Waktu dan tempat penelitian. ..................................................... 13

3.1.2. Pembuatan larutan stok ............................................................... 13

3.1.3. Pembuatan media MS ................................................................. 14

3.1.4. Persiapan penelitian .................................................................... 14

3.1.4.1. Sterilisasi ruangan .................................................................... 14

viii

3.1.4.2. Sterilisasi alat ........................................................................... 14

3.1.5. Penanaman eksplan ..................................................................... 15

3.1.6. Pemeliharaan eksplan ................................................................. 15

3.1.7. Rancangan penelitian .................................................................. 15

3.1.8. Variabel pengamatan .................................................................. 16

3.1.9. Skoring vigor eksplan ................................................................. 17

3.1.10. Pengamatan perkembangan anatomi eksplan ........................... 17

3.2. Metode Pengolahan Data ............................................................... 18

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Pertumbuhan Eksplan Anggrek D. heterocarpum Lindl. pada

Media Murashige and Skoog (MS) dengan Penambahan Hormon

Zeatin dan NAA ............................................................................ 19

4.1.1. Jumlah akar ................................................................................. 19

4.1.2. Jumlah daun ................................................................................ 21

4.1.3. Tinggi tunas ................................................................................ 23

4.1.4. Pengamatan vigor eksplan .......................................................... 25

4.2. Kombinasi Hormon yang Optimum untuk Merangsang

Multiplikasi Tunas Baru Anggrek ................................................. 28

V. KESIMPULAN DAN SARAN

5.1. Kesimpulan .................................................................................... 31

5.2. Saran .............................................................................................. 31

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 32

LAMPIRAN ................................................................................................... 37

ix

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1. Kombinasi konsentrasi Zeatin dan NAA ......................................... 16

Tabel 2. Pengaruh kombinasi hormon Zeatin dan NAA terhadap jumlah

daun pada umur 12 MST.................................................................. 22

Tabel 3. Pengaruh 20 kombinasi hormon Zeatin dan NAA terhadap tinggi

tunas pada umur 12 MST ................................................................. 24

Tabel 4. Frekuensi pertumbuhan individu pada tiap skor eksplan umur

12 MST ............................................................................................ 26

x

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Morfologi bunga anggrek ............................................................. 7

Gambar 2. Tanaman Dendrobium heterocarpum Lindl. (A) dan bunga

Dendrobium heterocarpum Lindl. (B) ........................................ 8

Gambar 3. Eksplan tunas D. heterocarpum Lindl. diukur dengan

millimeter block ............................................................................. 15

Gambar 4. Pengukuran tunas ......................................................................... 16

Gambar 5. Skoring vigor eksplan................................................................... 17

Gambar 6. Akar Dendrobium heterocarpum Lindl. umur 12 MST pada

media Z5N3 .................................................................................... 19

Gambar 7. Daun D. heterocarpum Lindl. umur 12 MST pada media Z3N1

(a) dan media Z5N3 (b)................................................................... 21

Gambar 8. Tinggi tunas D. heterocarpum Lindl. umur 12 MST pada media

Z2N2 (a) dan media Z5N3 (b) ....................................................... 24

Gambar 9. Tunas D. heterocarpum Lind. umur 12 MST............................... 28

xi

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Jadwal penelitian skripsi ............................................................ 37

Lampiran 2. Komposisi media Murashige and Skoog (MS).......................... 38

Lampiran 3. Persentase kontaminasi perlakuan pada media Murashige and

Skoog (MS) ............................................................................... 39

Lampiran 4. Hasil analisa sidik ragam pengaruh kombinasi konsentrasi

Zeatin dan NAA terhadap jumlah daun pada 12 MST ............. 40

Lampiran 5. Hasil analisa sidik ragam pengaruh kombinasi konsentrasi

Zeatin dan NAA terhadap tinggi tunas pada 12 MST .............. 42