hplc
-
Upload
eka-fitriani -
Category
Documents
-
view
9 -
download
1
Transcript of hplc
Kromatografi Kolom TerbukaKromatografi Kolom Terbuka
ColorColorSistem pemasukan sampel: manual, tidak volumetrik Injector
Waktu analisis lama, mengandalkan gaya grafitasi dan kapiler pompa
Hasil pemisahan kurang baik pengemasan kolom
Kesulitan Pengamatan hasil pemisahan untuk analit tidak berwarna Detektor
Kesulitan penghitungan kadar integrator
KCKT dikembangkan dari kromatografi kolom terbuka untuk menjawab kekurang-kekurangan tersebut
Injector: Sistem pemasukan sampel: sample loop dan robotik injektor, sangat volumetrik
Pompa: Waktu analisis singkat, pengulangan/presisi baik
Kolom: baja, packing kompak, partikel sangat kecil, tekanan dapat dibuat besar Hasil pemisahan baik
Detektor: semua zat dapat diamati (tidak harus berwarna)
Integrator:dilengkapi komputer, bisa menghitung AuC mudah penghitungan kadar
Sehingga disebut: Kinerja Tinggi
Kromatografi partisi cairan-cairan Fase stasioner: cairan yang dilapiskan
pada zat padat penyangga Fase mobil: pelarut/cairan
BAGAN SISTEM KCKT
pompainjektor
kolom
oven
detektor
Wadahsolven
integrator
WADAH FASE GERAK
Merupakan tandon berisi fase gerakMempunyai sistem penyaring
POMPAMerupakan sistem agar fase gerak mengalir.Kinerja pompa yang diinginkan :Tekanan yang dihasilkan tinggi
Fluktuasi tekanan rendah
Kecepatan aliran fase gerak tepat
INJEKTOR: Alat untuk pemasukan sampel ke dalam sistem KCKT
OVEN KOLOM – instrumen pemanasSyarat :1. Keseragaman temperatur yang baik2. Kestabilan temperatur yang baik3. Ketepatan kontrol temperatur yang baik
Kolom pada KCKT
> Penampang: baja tahan karat, tahan tekanan tinggi
Ukuran partikel sangat kecil: pengepakan lebih kompak, hasil pemisahan lebih baik
Dapat dipakai berulang
Waktu retensiWaktu yang dibutuhkan oleh senyawa untuk bergerak melalui kolommenuju detektor disebut sebagai waktu retensi. Ini diukur dariwaktu dimana sampel diinjeksikan sampai titik menunjukkan ketinggian puncak maksimum untuk senyawa itu.Senyawa yang berbeda memiliki waktu retensi yang berbeda. untukbeberapa senyawa, waktu retensi akan bervariasi tergantung pada:tekanan yang digunakan (karena yang mempengaruhi laju alir dari pelarut)sifat dari fase diam (tidak hanya apa bahan itu terbuat dari apa, tetapi juga ukuran partikel)komposisi yang tepat dari pelarutsuhu kolom
Yang umum dipakai Detektor Ultraviolet / Visible (UV/VIS) Detektor Photodiode Array (PDA) Detektor Fluorescence (RF) Detektor Konduktivitas (CDD) Detektor Refraktive Indeks (RID) Detektor Elektrokimia (ECD) Detektor spektrometer massa
DETEKTOR HPLC