hplc

11
Kromatografi Kolom Kromatografi Kolom Terbuka Terbuka Color Color Sistem pemasukan sampel: manual, tidak volumetrik Injector Waktu analisis lama, mengandalkan gaya grafitasi dan kapiler pompa Hasil pemisahan kurang baik pengemasan kolom Kesulitan Pengamatan hasil pemisahan untuk analit tidak berwarna Detektor Kesulitan penghitungan kadar integrator

Transcript of hplc

Page 1: hplc

Kromatografi Kolom TerbukaKromatografi Kolom Terbuka

ColorColorSistem pemasukan sampel: manual, tidak volumetrik Injector

Waktu analisis lama, mengandalkan gaya grafitasi dan kapiler pompa

Hasil pemisahan kurang baik pengemasan kolom

Kesulitan Pengamatan hasil pemisahan untuk analit tidak berwarna Detektor

Kesulitan penghitungan kadar integrator

Page 2: hplc

KCKT dikembangkan dari kromatografi kolom terbuka untuk menjawab kekurang-kekurangan tersebut

Injector: Sistem pemasukan sampel: sample loop dan robotik injektor, sangat volumetrik

Pompa: Waktu analisis singkat, pengulangan/presisi baik

Kolom: baja, packing kompak, partikel sangat kecil, tekanan dapat dibuat besar Hasil pemisahan baik

Detektor: semua zat dapat diamati (tidak harus berwarna)

Integrator:dilengkapi komputer, bisa menghitung AuC mudah penghitungan kadar

Sehingga disebut: Kinerja Tinggi

Page 3: hplc

Kromatografi partisi cairan-cairan Fase stasioner: cairan yang dilapiskan

pada zat padat penyangga Fase mobil: pelarut/cairan

Page 4: hplc

BAGAN SISTEM KCKT

pompainjektor

kolom

oven

detektor

Wadahsolven

integrator

Page 5: hplc

WADAH FASE GERAK

Merupakan tandon berisi fase gerakMempunyai sistem penyaring

Page 6: hplc

POMPAMerupakan sistem agar fase gerak mengalir.Kinerja pompa yang diinginkan :Tekanan yang dihasilkan tinggi

Fluktuasi tekanan rendah

Kecepatan aliran fase gerak tepat

Page 7: hplc

INJEKTOR: Alat untuk pemasukan sampel ke dalam sistem KCKT

Page 8: hplc

OVEN KOLOM – instrumen pemanasSyarat :1. Keseragaman temperatur yang baik2. Kestabilan temperatur yang baik3. Ketepatan kontrol temperatur yang baik

Kolom pada KCKT

> Penampang: baja tahan karat, tahan tekanan tinggi

Ukuran partikel sangat kecil: pengepakan lebih kompak, hasil pemisahan lebih baik

Dapat dipakai berulang

Page 9: hplc

Waktu retensiWaktu yang dibutuhkan oleh senyawa untuk bergerak melalui kolommenuju detektor disebut sebagai waktu retensi. Ini diukur dariwaktu dimana sampel diinjeksikan sampai titik menunjukkan ketinggian puncak maksimum untuk senyawa itu.Senyawa yang berbeda memiliki waktu retensi yang berbeda. untukbeberapa senyawa, waktu retensi akan bervariasi tergantung pada:tekanan yang digunakan (karena yang mempengaruhi laju alir dari pelarut)sifat dari fase diam (tidak hanya apa bahan itu terbuat dari apa, tetapi juga ukuran partikel)komposisi yang tepat dari pelarutsuhu kolom

Page 10: hplc

Yang umum dipakai Detektor Ultraviolet / Visible (UV/VIS) Detektor Photodiode Array (PDA) Detektor Fluorescence (RF) Detektor Konduktivitas (CDD) Detektor Refraktive Indeks (RID) Detektor Elektrokimia (ECD) Detektor spektrometer massa

DETEKTOR HPLC

Page 11: hplc