FITOKIMIA isolasi kckt

8/11/2019 FITOKIMIA isolasi kckt

1/25

ISOLASI SENYAWA DENGAN KROMATOGRAFI CAIRKINERJA TINGGI

( KCKT )


2/25

ADITIYA NURYANTO SAPUTRA 17113183AKRISTIAN UBANAYO 17113191A

ATIN WULAN SEPTIYANINGSIH 17113211A

EKO SARWONO 17113215ABELLARAMIN BORIS COBIS 17113221A


3/25

PENGKAJIAN KANDUNGAN FITOSTEROL PADA

TANAMAN KEDAWUNG PARKIA ROXBURGII G.

DON.)


4/25

Kedawung (Parkia timoriana (DC) Merr.,

atau Parkia biglobosa atau Parkia roxburgiiG.Don.) merupakan tumbuhan yang masihtergolong dalam keluarga polong - polonganatau Leguminosae. Tumbuhan ini banyak dimanfaatkan sebagai obat obatan serta bahan

makanan. Bagian yang sering dimanfaatkantersebut adalah bagian bijinya.


5/25

Baru belakangan ini ditemukan beberapasenyawa yang tergantung pada tanamantersebut yakni :

Sitosterol ( beta sitosterol )

Stigmasterol

Campesterol

ketiga senyawa tersebut dapat disebut

fitosterol.


6/25

Dari senyawa senyawa fitosterol tersebut yangmemiliki peran penting adalah sitosterol ,karena dapat menghambat pembentukankolesterol di hati. Sehingga diperlukannyapengkajian pada kandungan fitosterol padatanaman ini.


7/25

Bahan yang digunakan adalah bagian bagian

tanaman kedawung


8/25

1. Identifikasi nama botaniIdentifikasi nama botani dilakukan untukmengetahui nama biologi dari tanamanyang akan diteliti. Identifikasi botanidilakukan di Herbarium Bogoriense

Pusat Penelitian Biologi- LIPI, Bogor


9/25

2. Preparasi sampelBagian tanaman kedawung dipisahmenjadi lima bagian yaitu biji, polong,tangkai daun, anak daun dan kulit

pohon. Bagian - bagian tersebutdikeringkan dibawah sinar matahari, laludihaluskan dengan motor penggilinghingga ukuran + 100 mesh.


10/25

3. Ekstraksi fitosterol

Ekstraksi dilakukan dengan sistem refluk

dimana pelarut n-heksan digunakansebagai pengekstraksi.


11/25

4. Identifikasi awal ekstrak fitosterolIdentifikasi awal untuk mengetahui adanyasenyawa steroid di dalam ekstrak yangdiperoleh dilakukan dengan Kromatografi

Lapis Tipis. Pereaksi warna yang digunakanadalah serium sulfat, dan reagen Lieberman-

Burchard (Goad dan Toshihiro, 1997). KLTdilakukan dengan menggunakan lempeng

silika gel GF254 dan fase gerak n-heksan-etilasetat (4:1). Sebagai standar digunakan beta-

sitosterol (mengandung 35% kampesterol).


12/25

5. Pemurnian ekstrak fitosterolPemurnian fitosterol dilakukan dengankromatografi kolom menggunakan fase diamsilikagel 60 (70-230 mesh) dan eluen n-heksana etil asetat (4:1). Silika gel yang

digunakan + 25-50 kali berat ekstraksampel. Sebelum dimasukan ke dalam kolom,ekstrak sampel ditambahkan celite 345diaduk sampai homogen. Tiap fraksi

ditampung sebanyak 5 ml. Semua fraksi yang

mengandung senyawa dengan Rf berdekatandengan standar dikumpulkan dandipekatkan.


13/25


14/25

Kondisi KCKT yang digunakan :Fase diam : Kolom Bondapak C18

Fase gerak : Metanol-Kloroform(65:35)

Laju alir : 1 mL/menit

Detektor : UV 254 nm

Tekanan : 70-71 kg/cm2

Sistem : Isokratik


15/25


16/25

2. Ekstraksi sterol

Pada tabel tersebut dapat dilihat bahwa kandungansenyawa kimia yang terekstraksi dengan n-heksan

paling tinggi terdapat pada bagian biji, dengan bobot4,3808 g, sedangkan yang terendah terdapat padabagian polong dengan bobot 0,2774 g.


17/25

IDENTIFIKASI

Identifikasi awal untuk mengetahuikandungan fitosterol pada bagian-bagiantanaman kedawung dilakukan dengan metodekromatografi lapis tipis dimana dua pereaksipembentuk warna yaitu Cerium Sulfat dan

reagen Lieberman-Burchard digunakan sebagaipenampak noda.


18/25

Pada gambar tersebut terlihat bahwa setiap bagian tanamanmemberikan warna yang positif, dimana pereaksi warna cerium sulfat

menghasilkan warna merah, sedangkan reagen Lieberman- Burchardmenghasilkan warna hijau.


19/25


20/25

ISOLASI SENYAWA STEROL

Pemurnian atau isolasi senyawa fitosterol darisenyawa lain yang terdapat pada sampeldilakukan dengan metode kromatografi kolom.

Sehingga akan diperoleh data sebagai berikut :


21/25

ANALISIS DENGAN KCKT

Berdasarkan hasil pemisahan melaluikromatografi kolom, diperoleh data bahwabagian kulit pohon memiliki bobot paling tinggidibandingkan bagian tanaman lainnya.


22/25


23/25

Pada tabel tersebut merupakan hasil darianalisis dengan KCKT untuk menentukan kadarfitosterol pada bagian tumbuhan tersebut.

Dapat dilihat bahwa kadar fitosterol tertinggiadalah pada tangkai daunnya yakni sebesar35,24 % yang berarti kadar senyawa senyawa

fitosterol pada bagian tersebut sangat tinggi.


24/25

Kesimpulan berdasarkan hasil penelitianpenetapan kadar fitosterol yang telah dilakukanpada tanaman kedawung, Parkia roxburgii G.Don (Mimosaceae) adalah :

Seluruh bagian tanaman kedawung, P.roxburgii (Mimosaceae) antara lain biji,polong, daun, tangkai daun, kulit pohonmengandung senyawa fitosterol yang cukup

signifikan. Kandungan fitosterol paling tinggi terdapat

pada bagian tangkai daun, 35,24% (b/b).


25/25

TERIMAKASIH

FITOKIMIA isolasi kckt

Documents

Transcript of FITOKIMIA isolasi kckt