SKRIPSI

ENDAH FITRIYASTUTI

PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN

SRIKAYA (Annona squamosa Linn.) TERHADAP KADAR

KOLESTEROL LDL PADA TIKUS HIPERLIPIDEMIA

PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2014

Lembor Pengesahan

PENGARTIII PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAT]N SRIKAYA (Annona

squamasa Linn.) TERIIAIIAP KADAR KOLESTEROL LDL PADA TIKUS

HIPBRLIPIDEMIA

SKRIPSI

Dibuat untuk memenuhi syarat mencapi gelar Sarjana Farmasi pada Program

Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang ,.

2014

Oleh:

ENDAH FITRTYASTUTI

NIM : 201010{10311V24

Disetujui Oleh:

Pombimbing I

.Jt^lSiti Rolida" S.Si.. M.Farm.. Aot. Nailis Svifa' S.Farm.. M.S.. ApthtIP IJMM. 1140804{Xa3 I\tIp I]MM. tt4t3tt05x2

Pembimbing II

?r,\

Lembar Pengujian

PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SRIKAYA (Annona

squamoss Linn.) TERHADAP KADAR KOLESTEROL LDL PADA TIKUS

HIPERLIPIDEMIA

SKRIPSI

Telah Diuji Dan Dipertahankan di Depan Tim Penguji

Pada tanggal 19 Agustus 2014

Oleh:

EI{DAH IilTRIYASTUTI

llIM : 2010104103nA24

Disetujui Oleh

Penguji I Penguji II

Nailis Svifa' S.Farm.. M.Sc.. Ant.

NIP UMM. 11413110522

Ju,tSiti Rofida. S.Si.. M.Farm.. Ant.

NIP IIMM.11408040453

Penguii ilI

w-Sovia Anrina Basuki. S.Farm.. M.Si.. Apt

NrP riMM. 11408040452 NIP T]MM. T13(D070469

iv

KATA PENGANTAR

Syukur Alhamdulillah penulis panjatkan atas kehadirat Allah SWT atas segala

rahmat, hidayah serta karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan

skripsi yang berjudul “Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Srikaya

(Annona squamosa Linn.) Terhadap Kadar Kolesterol LDL pada Tikus

Hiperlipidemia” untuk memenuhi salah satu persyaratan akademik dalam

menyelesaikan Program Studi Farmasi Fakutas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang.

Dalam proses penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari berbagai

hambatan dan kesulitan. Namun berkat bimbingan, bantuan serta dukungan dari

berbagai pihak, penulis dapat menyelesaikan penulisan skripsi ini. Untuk itu penulis

ingin mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :

1. Allah SWT, Tuhan semesta alam yang memberikan nikmat, karunia dan

hidayah-Nya kepada kita semua; Rasulullah SAW, yang sudah menuntun

kita menuju jalan yang lurus.

2. Bapak Yoyok Bekti, selaku Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang yang telah memberikan penulis kesempatan

belajar di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.

3. Ibu Siti Rofida, S.Si, M.Si, Apt. selaku dosen pembimbing I yang penuh

kesabaran dalam memberikan pengarahan kepada penulis selama proses

penyusunan skripsi.

4. Ibu Nailis Syifa’, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku dosen pembimbing II dan

Kepala Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang yang telah member motivasi dan kesempatan

kepada penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang.

5. Ibu Sovia Aprina Basuki, S.Si., M.Si., Apt. selaku dosen penguji dan

kepala Laboratorium Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah

v

Malang yang telah membantu penulis sehingga penulis dapat

menyelesaikan penelitian dengan lancar.

6. Bapak Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., MP. selaku dosen penguji yang telah

memberikan motivasi dan saran untuk kemajuan penelitian dan

menjadikan skripsi ini menjadi lebih baik.

7. Ibu Dian Ermawati, S.Farm., Apt. selaku dosen wali saya yang telah

memberikan motivasi dan bimbingan selama penulis belajar di Program

Studi Farmasi Universitas Muhammdiyah Malang.

8. Seluruh Dosen Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah

Malang yang telah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu

yang sangat bermanfaat.

9. Para laboran Laboratorium Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang, Mbak Susi, Mbak Evi, Mbak Bunga dan Mas

Ferdi serta para staf TU yang telah membantu selama proses penelitian.

10. Para laboran Laboratorium Faal Fakultas Kedokteran Universitas

Brawijaya yang telah membantu proses penelitian.

11. Kedua orang tuaku tercinta, Bapak Purwanto dan Ibu Iluh Indrawati yang

tidak terkira jasanya dalam mendidik penulis dari kecil hingga dewasa

dengan penuh kasih sayang, doa yang selalu dipanjatkan untuk kesuksesan

anak-anaknya, serta dukungan dan semangat yang tidak pernah berhenti

diberikan kepada penulis sehingga penulis dapat menyelesaikan studinya

dengan baik.

12. Sahabat, teman seperjuanganku Rere, Sundari, Eflin, Cahya, Rian, Nuri

terima kasih atas bantuan dan dukungannya selama ini. Terima kasih

untuk hari-hari yang menyenangkan dan kerja samanya sehingga skripsi

ini dapat terwujud.

13. Teman-teman Farmasi angkatan 2010 atas motivasi dan semangat yang

diberikan pada penulis yang tidak bisa penulis sebutkan satu per satu.

vi

14. Adik-adikku Dina dan Dea, mbakku mbak Zhe di kost tempat penulis

bernaung. Terima kasih atas bantuan, dukungan dan rasa kekeluargaan

yang terjalin selama ini.

15. Kakak dan adik-adikku yang selalu memberikan semangat dan dukungan

serta bantuan kepada penulis.

16. Serta semua pihak dari dalam maupun luar yang telah membantu sehingga

terselesaikannya skripsi ini, penulis mohon maaf dan terima kasih sebesar-

besarnya. Semua keberhasilan ini tidak luput dari bantuan dan doa yang

telah kalian semua berikan.

Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan pada penyusunan tugas

akhir ini, sehingga penuis sangat mengharapkan masukan dari berbagai pihak.

Semoga tugas akhir ini dapat memberikan manfaat bagi penulis dan pembaca,

berguna bagi perkembngan ilmu pengetahuan sertadapat bermanfaat bagi semua

pihak.

Malang, 17 Januari 2015

Endah Fitriyastuti

vii

RINGKASAN

PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL DAUN SRIKAYA (Annona squamosa Linn.) TERHADAP KADAR LDL PADA TIKUS HIPERLIPIDEMIA

Hiperlipidemia merupakan faktor risiko penyebab kematian di usia muda. Hiperlipidemia ditandai dengan adanya kenaikan kadar kolesterol total dan kolesterol LDL serta trigliserid serum. Penyakit yang diakibatkan hiperlipidemia merupakan masalah yang serius pada negara-negara maju bahkan saat ini juga muncul sebagai penyebab kematian dini dan ketidakmampuan fisik di negara-negara berkembang. Annona squamosa Linn. (srikaya) tanaman dari keluarga Annonaceae, telah dilaporkan mengandung glikosida, flavonoid, senyawa fenolik, protein, tanin dan lain-lain (Pandey dan Barve, 2011). Beberapa penelitian telah membuktikan bahwa flavonoid dapat menurunkan kadar kolesterol dalam tubuh. Flavonoid dapat mengurangi LDL peroksidasi lipid dengan mengurangi kadar oksigen atau nitrogen reaktif, ikatan ion logam transisi dan hemat antioksidan LDL. Flavonoid juga dapat mengurangi stres oksidatif makrofag dengan menghambat oksigenase seluler atau dengan mengaktifkan antioksidan seluler (seperti sistem glutathione) (Furhman, 2001). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol daun srikaya (Annona squamosa Linn.) terhadap kadar kolesterol LDL tikus hiperlipidemia.

Penelitian ini dibagi menjadi empat tahap yaitu, tahap pembuatan ekstrak etanol daun srikaya, penapisan fitokimia ekstrak, tahap pengujian pada hewan coba dan tahap terakhir adalah pengukuran kadar LDL (Low Density Lipoprotein) melalui serum darah. Proses pembuatan ekstrak daun Srikaya (Annona squamosa Linn.) dimulai dari penyerbukan simplisia daun kemudian diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol untuk mendapatkan ekstrak kental. Dari proses maserasi didapatkan ekstrak hijau kehitaman sebanyak 193,41 gram. Ekstrak kemudian diidentifikasi menggunakan metode KLT atau Kromatografi Lapis Tipis. Ekstrak ditotolkan pada fase diam (Kisel gel GF 254) dan dieluasi menggunakan fase gerak kloroform – etil asetat (1:1). Setelah itu plat diamati secara visual menggunakan sinar UV pada panjang gelombang 254 nm dan 360 nm. Sebagai penampak noda digunakan uap ammonia dan didapatkan noda berwarna kuning. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak mengandung senyawa flavonoid.

Pengujian ekstrak etanol daun srikaya sebagai penurun kolesterol LDL dilakukan dengan desain penelitian posttest only controlled group design. Dalam proses ini dilakukan empat tahap, adaptasi hewan coba, penginduksian pakan tinggi kolesterol, pemberian terapi bahan uji, dan pengukuran kadar LDL menggunakan serum darah. Uji ini dilakukan terhadap hewan uji tikus putih jantan. Tikus dibagi menjadi lima kelompok, masing-masing kelompok terdapat 5 ekor tikus.Pembagian kelompok ini dilakukan secara acak (random). Kelompok kontrol negatif diberikan CMC-Na 0,5%, kelompok kontrol positif diberikan simvastatin dengan dosis 0,18mg/gBB, kelompok perlakuan diberikan dosis 0,25mg/gBB, 0,75mg/gBB, dan

viii

1,0mg/gBB. Berikutnya adalah tahap pengukuran kadar LDL menggunakan sampel serum darah. Darah diambil dari aorta sebanyak 500µl kemudian direaksikan dengan reagen dan dibaca absorbansinya menggunakan spektrofotometri pada panjang gelombang 600 nm.

Hasil pengukuran kadar kolesterol LDL kemudian dianalisis menggunakan oneway ANOVA. Analisis menggunakan ANOVA menunjukkan terdapat perbedaan pada setiap kelompok perlakuan dengan nilai p 0,018 (p<0,05). Dari hasil analisis statistik menggunakan oneway ANOVA, analisis kemudian dilanjutkan pada uji post hoc. Pada kelompok perlakuan dosis 0,25mg/gBB, 0,75mg/gBB dan 1,0mg/gBB dibandingan dengan kontrol negatif hanya kelompok perlakuan dosis 0,25mg/gBB yang menunjukkan perbedaan bermakna, dengan nilai p 0,025 (p<0,05). Artinya pada dosis 0,25mg/gBB ekstrak dapat menurunkan kadar kolesterol LDL pada hewan uji. Penurunan kadar kolesterol LDL disebabkan karena flavonoid yang terkandung dalam ekstrak daun srikaya. Flavonoid bersifat selektif terhadap metabolisme kolesterol LDL. Dengan terhambatnya metabolisme kolesterol LDL maka jumlah kolesterol LDL dalam darah akan menurun. Flavonoid juga dapat mengurangi stres oksidatif makrofag dengan menghambat oxygenases seluler [seperti nikotinamida adenin dinukleotida fosfat, bentuk tereduksi (NADPH) oksidase] atau dengan mengaktifkan antioksidan seluler (seperti sistem glutathione). Dengan demikian, flavonoid tanaman merupakan antioksidan alami sebagai ampuh yang melindungi terhadap peroksidasi lipid dalam sel arteri dan lipoprotein, secara signifikan melemahkan perkembangan aterosklerosis.

xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL .......................................................................... i

LEMBAR PENGESAHAN ............................................................... ii

LEMBAR PENGUJIAN .................................................................... iii

KATA PENGANTAR ....................................................................... iv

RINGKASAN .................................................................................... vii

ABSTRAK ......................................................................................... ix

DAFTAR ISI ...................................................................................... xi

DAFTAR TABEL .............................................................................. xiv

DAFTAR GAMBAR ......................................................................... xv

DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................... xvi

BAB I PENDAHULUAN .................................................................. 1

1.1 Latar Belakang ...................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ................................................................. 4

1.3 Tujuan Penelitian .................................................................. 4

1.4 Hipotesis ............................................................................... 4

1.5 Manfaat penelitian ................................................................ 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................ 6

2.1 Uraian Tumbuhan .................................................................. 6

2.1.1 Taksonomi Tumbuhan ................................................... 6

2.1.2 Morfologi Tanaman Srikaya ......................................... 7

2.1.3 Uraian Kandungan Fitokimia Tumbuhan ...................... 7

2.2 Kegunaan ............................................................................... 8

2.2.1 Secara Tradisional ......................................................... 8

2.2.2 Pemeriksaan Farmakologi ............................................. 9

2.3 Ekstraksi ................................................................................ 9

2.4 Hewan Coba .......................................................................... 11

2.5 Kolesterol .............................................................................. 13

2.5.1 Sintesis .......................................................................... 13

2.5.2 Metabolisme .................................................................. 14

xii

2.5.3 Low-Density Lipoprotein (LDL) .................................. 16

2.6 Hiperlipidemia ....................................................................... 18

2.7 Simvastatin ............................................................................ 20

2.8 Pemeriksaan Kadar Kolesterol LDL ..................................... 20

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ............................................ 23

BABI IV METODE PENELITIAN ................................................... 25

4.1 Tempat dan Waktu Penelitian ............................................... 25

4.2 Alat dan Bahan Penelitian ..................................................... 25

4.2.1 Alat ................................................................................ 25

4.2.2 Bahan ............................................................................ 26

4.3 Rancangan Penelitian ............................................................ 26

4.3.1 Desain Penelitian ........................................................... 26

4.3.2 Variabel Penelitian ........................................................ 26

4.3.3 Besar Sampel ............................................................................. 27

4.3.4 Metode Sampling .......................................................... 27

4.4 Pengumpulan Data ................................................................. 27

4.4.1 Ekstraksi ........................................................................ 27

4.4.2 Pengujian Aktivitas ....................................................... 29

4.4.2.1 Persiapan Hewan Uji ........................................... 29

4.4.2.2 Persiapak pakan Hiperkolesterol ......................... 29

4.4.2.3 Persiapan Ekstrak Etanol Daun Srikaya .............. 29

4.4.2.4 Pemberian Ekstrak Etanol Daun Srikaya ............ 30

4.4.2.5 Pengukuran Kadar LDL ...................................... 30

4.5 Analisa Data .......................................................................... 32

BAB V HASIL DAN ANALISA DATA........................................... 33

5.1 Hasil Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Srikaya

(Annona squamosa Linn.) ..................................................... 33

5.2 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol Daun Srikaya

(Annona squamosa Linn.) ..................................................... 34

5.3 Hasil Skrining Kandungan Fitokimia Daun Srikaya

(Annona squamosa Linn.) ..................................................... 35

5.3.1 Kromatografi Lapis Tipis .............................................. 35

xiii

5.4 Hasil Uji Aktivitas Penurunan Kadar Kolesterol LDL

Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona squamosa Linn.) ..... 36

5.5 Analisis Data ......................................................................... 37

BAB VI PEMBAHASAN .................................................................. 38

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN .......................................... 45

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................ 46

LAMPIRAN ....................................................................................... 50

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

II.1 Daftar berbagai kandungan kimia pada bagian

daun Annona squamosa Linn ............................................ 8

II.2 Parameter Normal Tikus ................................................... 12

II.3 Perbedaan Profil Lipid sebelum dan sesudah

pemberian pakan otak sapi ................................................ 12

IV.1 Dosis Pemberian Terapi .................................................... 30

V.1 Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol Daun Srikaya

(Annona squamosa Linn.) ................................................. 34

V.2 Hasil Pengukuran Kadar Kolesterol LDL ......................... 36

xv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Buah dan Daun Srikaya ..................................................... 6

2.2 Metabolisme Lipid ............................................................ 16

2.3 Prinsip Prosedur Pemeriksaan Kadar Kolesterol .............. 22

3.1 Skema Kerangka Konsep .................................................. 23

4.1 Skema Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Srikaya .............. 28

4.2 Skema Design Penelitian ................................................... 31

5.1 Esktrak Etanol Daun Srikaya (Annona squamosa Linn) ... 33

5.2 Larutan Suspensi Ekstrak Etanol Daun Srikaya ................ 34

5.3 Hasil Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Etanol Daun

Srikaya (Annona squamosa Linn.) Menggunakan Fase

Diam Kiesel 245, Fase Gerak Kloroform : Etil Asetat

(1:1) ................................................................................... 35

5.4 Grafik hasil pengukuran kadar kolesterol LDL ................. 36

xvi

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Daftar Riwayat Hidup ............................................................... 49

2 Surat Pernyataan ....................................................................... 50

3 Perhitungan Pemberian Dosis ................................................... 51

4 Data Perkembangan Penelitian ................................................. 56

5 Hasil Pengukuran Kolesterol LDL ........................................... 71

6 Hasil Pengolahan Data SPSS 16.0 ............................................ 72

7 Komposisi Pakan Hewan Uji .................................................... 74

8 Gambar – Gambar Penelitian ................................................... 75

46

DAFTAR PUSTAKA

Adewole, S.O., Ojowole, J.A.O., 2009. Protective Effects Of Annona Muricata Linn. (Annonaceae) Leaf Aqueous Extract On Serum Lipid Profiles And Oxidative Stress In Hepatocytes Of Streptozotocin-Treated Diabetic Rats. Afr. J. Trad. CAM (2009) 6 (1). pp. 30-41.

Ahalya, B., Shankar, K.R., Kiranmayi, G.V.N., 2014. Exploration of Anti-Hyperglycemic and Hypolipidemic Activities of Ethanolic Extract of Annona muricata Bark in Alloxan Induced Diabetic Rats. Int. J. Pharm. Sci. Rev. Res., 25(2), Mar – Apr 2014; Article No. 05. pp 21-27.

Ariyana, R., 2010. Potensi Antihiperkolesterolemia Ekstrak Seduhan Teh Herbal Lempuyang Gajah (Zingiber zerumbet L.). Bogor : Skripsi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Institut Pertanian Bogor.

Asmariani, W.G., 2012. Pengaruh Pemberian Buah Pepaya (Carica papaya L.) Terhadap Kadar Kolesterol LDL dan Kolesterol HDL pada Tikus Sprague dawley dengan Hiperkolesterolemia, Semarang: Artikel Penelitian, Fakultas Kedokteran Program Studi Ilmu Gizi Universitas Dipenogoro.

Dachriyanus, Katrin, D.O., Oktarina, R., Ernas, O.S., dan Mukhtar, M.H., 2007. Uji Efek Α-Mangostin terhadap Kadar Kolesterol Total, Trigliserida, Kolesterol HDL, dan Kolestrol LDL Darah Mencit Putih Jantan serta Penentuan Lethal Dosis 50 (Ld50). J. Sains Tek. Far., 12(2), pp. 64-72.

Dalimartha, S., 2007. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid 3. Jakarta: Puspa Swara. pp. 145.

Davey, P., 2005. At a Glace Medicine “Medicine at a Glance”. Jakarta: Erlangga. pp. 140-141.

Departemen Kesehatan. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta : Dirjen POM. pp. 9-12.

Departemen Kesehatan. 2012. Buletin Jendela Data dan Informasi Kesehatan. Penyakit Tidak Menular. Jakarta.

Devanita, L., 2008. Kajian Patologi Hati Kelinci Hiperlipidemia: Dengan dan Tanpa Pemberian Antihiperlipidemia. Bogor: Skripsi Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor.

Dewi, R.S., 2011. Pemberian Ekstrak Ethanol Bawang Putih (Allium Sativum) Dapat Memperbaiki Profil Lipid pada Tikus Jantan Dislipidemia. Bali: Thesis Program Pasca Sarjana Biomedik Universitas Udayana Denpasar.

Fauzi, R., 2009. Efek Jus Buah Anggur Merah (Vitis vinifera Linn.) Terhadap Penghambatan Peningkatan Kadar Ldl Kolesterol Darah Tikus Putih (Rattus norvegicus). Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret.

47

Fuhrman, B., Aviram, M., 2001. Flavonoids protect LDL from oxidation and attenuate atherosclerosis. Current Opinion in Lipidology, Volume 12(1). pp. 41-48.

Fox, J.G., Anderson L.C., Loew F.M,. Quimby F.D., 2002. Laboratory Animal Medicine. Second Edition. USA: American College of Laboratory Animal Medicine Series. Pp. 121-133

Goroahe, E., 2013. Gambaran Kadar LDL Kolesterol Pada Perokok Aktif Usia Diatas 45 Tahun. Semarang: Skripsi, D3 Analis Universitas Muhammadiyah Semarang.

Gupta, R.K.,et al., 2008. In vivo evaluation of anti-oxidant and anti-lipidimic potential of Annona squamosa aqueous extract in Type 2 diabetic models. Journal of Ethnopharmaacology. pp.

Harborne, J.B., 1987. Metode Fitokimia. Penuntun cara modern menganalisis tumbuhan. Terjemahan Padmawinata, K., dan Soediro, I., Cetakan I. Bandung. Penerbit ITB. pp. 6.

Hegele. R.A., 2009. Plasma Lipoproteins : Genetic Influences and Clinical Implications. Article of Nature Reviews Genetic 10. Pp. 109-121.

Holistic Health Solution. 2012. Khasiat Fantastik Sirsak vs Srikaya. Jakarta: Penerbit Gramedia Widiasarana Indonesia. pp. 72-73.

Lamanepa, E.L.M., 2005. Perbandingan Profil Lipid dan Pengembangan Lesi Aterosklerosis pada Tikus Wistar yang diberi Diet Perasan Pare dengan Diet Perasan Pare dan Statin. Semarang: Tesis. Magister Ilmu Biomedik Program Pascasarjana Universitas Dipenogoro Semarang.

Lestari, H., 2013. Pengaruh Ekstrak Biji Anggur Merah (Vitis vinifera) Terhadap Penurunan Rasio LDL/HDL Plasma Tikus Putih Jantan (Rattus norvegicus) Strain Wistar yang Diinduksi Diet Tinggi Kolesterol. Malang: Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang.

Malik, P., 2007. Pharmacognostical,Phytochemical And Antioxidant Studies On Leaves of Annona squamosa Linn. India: Thesis Disertasi Departemen Farmakognosi Universitas Ilmu Kesehatan Rajiv Gandhi.

Mardiharto, E.E., 2012. Pengaruh Pemberian Ekstrak Biji Srikaya (Annona squamosa) terhadap Kadar Kolesterol LDL pada Tikus (Rattus Norvegicus) Model Aterosklerosis. Tugas Akhir. Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya.

Markham, K.R., 1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid. Penerjemah: K. Padmawinata. Bandung. ITB Press. pp. 15

Marks, D.B., Marks, A.D., Smith, C.M., 2000. Biokimia Kedokteran Dasar: Sebuah Pendekatan Klinis. Jakarta: Penerbit EGC. pp. 516.

Morrell, J., 2007. Simple Guide : Kolesterol. Jakarta: Penerbit Erlangga. pp. 28.

48

Naim, H.Y., 2011. Pengaruh Pemberian Yoghurt Kedelai Hitam (Black Soyghurt) Terhadap Profil Lipid Serum Tikus Hiperkolesterolemia. Semarang : Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Dipenogoro.

Neal, M.J., 2009. At a Glance Farmakologi Medis Edisi Kelima “Medical Pharmacology at a Glance”. Jakarta : Penerbit Erlangga. pp. 47.

Nilawati dkk. 2008. Care Yourself, Kolesterol. Jakarta: Penebar Plus. pp 14-15.

Pandey, N., Barve, D., 2011. Phytochemical and Pharmacological Review on Annona squamosa Linn. International Journal of Research in Pharmaceutical and Biomedical Sciences Vol. 2 (4), pp. 1404-1412.

Pratiwi, E., 2010. Perbandingan Metode Maserasi, Remaserasi, Perkolasi Dan Reperkolasi Dalam Ekstraksi Senyawa Aktif Andrographolide Dari Tanaman Sambiloto (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees). Bogor : Skripsi Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor.

Rubenstein, D., Wayne, D., Bradley, J., 2007. Kedokteran Klinis Edisi Keenam. Jakarta: Penerbit Erlangga. pp. 191.

Saha, R., 2011. Pharmacognosy and pharmacology of Annona squamosa. International Journal Of Pharmacy & Life Sciences Shah, 2(10), pp. 1183-1189.

Tapan, E., 2005. Kesehatan Keluarga Penyakit Degeneratif. Jakarta: PT Elex Medi Komputindo. pp.

Thermo Fisher Scientic Inc. 2010. LDL Cholesterol Reagent. USA

Tjay, T.H., Rahardja, K., 2007. Obat-Obat Penting. Jakarta: PT Elex Media Komputindo. pp. 569.

Tomar, R.S., Sisodia, S.S., 2012. Antidiabetic Activity Of Annona squamosa L. In Experimental Induced Diabetic Rats, International Journal of Pharmaceutical & Biological Archives, 3(6), pp. 1492-1495.

Uneputty, J.P., Yamlean, P.V.Y., Kojong, N.S., 2013. Potensi Infusa Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Kadar Kolesterol Darah Tikus Putih Jantan (Rattus novergicus), PHARMACON Jurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT Vol. 2 No. 02, pp. 56-60.

Vanita, V., Umadevi, K.J., Vijayalakshmi, K., 2011. Determination of Bioactive Components of Annona squamosa L. leaf by GC–MS Analysis. International Journal of Pharmaceutical Sciences and Drugs Research, 3(4), pp. 309-312.

Ortho-Clinical Diagnostics, Inc., 2010. Instructions For Use “VITROS Chemistry Products dLDL Reagent”. United Kingdom.

Wilcox, L.J., Borradaile, N.M., de Dreu L.E., Huff, M.W., 2001. Secretion of hepatocyte apoB is inhibited by the flavonoids, naringenin and hesperetin, via

49

reduced activity and expression of ACAT2 and MTP. Journal of Lipid Research, Volume 42. pp. 725-734.

WHO. 2011. Low Control for High Cholesterol. Geneva: World Health Organization.

WHO. 2013. Cardiovascular Disease (CVDs). Geneva : World Health Organization.

Wijayakusuma, M.H., 2008. Ramuan Herbal Penurun Kolesterol. Jakarta: Pustaka Bunda (Grup Puspa Swara), anggota IKAPI. pp. 7-8.