BIOGROUTING: Produksi Urease

Dari Bakteri Laut Pengendap Karbonat

Oleh: Sidratu Ainiyah

1510100010

Dosen Pembimbing: Dr. techn. Endry Nugroho Prasetyo, MT. NIP. 19731014 200012 1 001

Surabaya, 24 Juli 2014

PERMASALAHAN, BATASAN MASALAH, TUJUAN

•Permasalahan

•bagaimana mengoptimasi produksi urease dengan melakukan uji aktifitas, mengisolasi, mempurifikasi dan mengkarakterisasi urease serta aplikasinya untuk biogrouting.

• Batasan Masalah • Memvariasikan temperatur, pH dan medium pertumbuhan • Isolasi, purifikasi urease dilakukan hingga tahap protein kasar • Karakterisasi dibatasi pada total protein konten dan berat molekulnya.

• Tujuan • Optimasi produksi urease • Isolasi protein • Karakterisasi protein • Produksi urease • Aplikasi biogrouting

Gambaran Umum Realisasi Penelitian

141.12 unit/ml

Pertumbuhan bakteri biogrouting pada medium B4 Urea optimal pada pH 7 dan temperatur 25°C jam ke- 12, sedangkan pada medium B4 urin optimal pertumbuhannya pada pH 8 temperatur 25° jam ke-13

Semakin optimal pertumbuhan bakteri, diasumsikan semakin optimal bakteri tersebut menghasilkan urease

Aktifitas urease tertinggi pada jam ke- 12 sampai dengan jam ke-13 (144.12 unit/ml)

Presipitasi Protein Menggunakan Amonium Sulfat

Presipitasi urease yang cukup signifikan terjadi pada konsentrasi ammonium antara 40% sampai 90%. Pada konsentrasi ammonium sulfat 90% terjadi pengendapan yang paling besar. Hasil pengukuran aktifitas urease hasil presipitat pada B4 urin 51.74 unit/ml, sedangkan pada B4 urea 70.21 unit/ml

a. Titik Isoelektrik

Titik isoelektrik urease: pH 6

Karakterisasi Protein b. SDS-PAGE

Berat molekul urease adalah 440 kDa

Hubungan Aktifitas Urease dengan Kadar Protein

Kelarutan protein akan terus meningkat sejalan dengan peningkatan konsentrasi garam*. Semakin rendah kelarutan protein, semakin banyak protein presipitat yang dihasilkan, diasumsikan semakin tinggi aktifitas urease.

Produksi Urease

Isolat ditumbuhkan dalam 100 ml medium (B4 urea dan B4 urin)* sesuai dengan hasil uji aktifitas dan optimasi

Sentrifugasi

Presipitasi (pemurnian)

Produk

Aplikasi Sederhana Biogrouting

Injeksi 10 ml urease pada pasir dengan kondisi salin

Kontrol (tanpa injeksi urease)

Urease dari urin

Urease dari urea

Data Parameter Aplikasi

Analisis Data

P value < 0.05. Variasi medium, pH dan temperatur berpengaruh terhadap pertumbuhan bakteri