PROTOKOL

STUDI BIOEKIVALENSI KAPSUL CADEPAN® PREGABALIN 150 mg YANG

DIPRODUKSI OLEH PT. MATAPHARM DIBANDINGKAN TERHADAP

KAPSUL LYRICA® 150 mg YANG DIPRODUKSI OLEH PT. PFIZER

BULAN NOVEMBER 2014 – MARET 2015

Disusun Oleh:

Kelompok IV

Adisty Nida Imanicka 1406524783

Agung Budi Raharjo 1406524796

Aji Sulandi 1406524820

Amanda Prita Katalia 1406598743

Anggun Pramuda Wardhani 1406524884

Erna Pujiningtyas 1406525193

Fibya Indah 1406525243

Nurul Afiani 1406525615

Nurul Nizma 1406525621

Titis Danastri 1406525911

Yessy Khoiriyani 1406526025

Paramitha Nurhuda 1406598863

PROGRAM PROFESI APOTEKER

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS INDONESIA

DEPOK

2014

1. HALAMAN JUDUL

1.1 Judul

Studi Bioekivalensi Kapsul Cadepan® Pregabalin 150 mg yang Diproduksi oleh

PT. Matapharm Dibandingkan Terhadap Kapsul Pregabalin Lyrica® 150 mg yang

Diproduksi oleh PT. Pfizer Bulan November 2014 - Maret 2015

1.2 Nama dan Alamat Sponsor

Nama : PT. Matapharm

Alamat : Jl. Boulevard Bintaro Blok B7/B1

No. 05, Tangerang 15224, Indonesia.

1.3 Nama, Penanggung Jawab dan Alamat Institusi

Nama : Laboratorium BA-BE Fakultas Farmasi Universitas

Indonesia

Penanggung Jawab : Dr. Nurul Afiani, Apt

Alamat Institusi : Kampus UI Depok, Jawa Barat

1.4 Nama dan Alamat Kepala Penelitian

Nama : Dr. Erna Pujiningtyas., M. Farm., Apt.

Alamat : Jl. Jambu No.7 Jatiwaringin-Jakarta Timur

1.5 Nama Peneliti Medis/Klinis

Nama : dr. Anggun Pramuda W, Sp.PD.

Alamat : Jl. Merak no.2 Pondok Gede, Bekasi

1.6 Nama, Penanggung Jawab, dan Alamat Laboratorium Klinik

Penanggung Jawab : Fibya Indah, S. Farm., Apt.

Nama : PRODIA

Alamat : Depok, Jawa Barat, Indonesia

1.7 Nama dan Alamat Penanggung Jawab Laboratorium Analisis

Penanggung Jawab : Dr. Titis Danastri, S.Farm., Apt

Nama : Laboratorium Analisis Fakultas Farmasi UI

Alamat : Kampus UI Depok, Jawa Barat, Indonesia

2

1.8 Nama dan Alamat Penanggung Jawab Manajemen Data, Analisis Farmakokinetik

dan Statistik

Penangung Jawab : Agung Budi R., S.Farm., Apt

Alamat : Kampus UI Depok, Jawa Barat, Indonesia

1.9 Nama dan Alamat Peneliti Lain & Personel Studi

No. Nama Peneliti Alamat

1. Nurul Nizma., S.Farm, Apt. Jl. Sawo no.3 Sunter, Jakarta Utara

2. Aji Sulandi, S.Farm., Apt. Jl. Durian no.45, Pasar minggu-Jakarta

Selatan

3. Adisty Nida I,S.Farm.,Apt. Jl. Manggis no.4 Halim, Jakarta Timur

Personel studi:

1. Paramitha Nurhuda, S.Farm., Apt.

2. Amanda Prita Katalia, S.Farm., Apt.

3. Yessy Khoiriyani, S.Farm., Apt.

1.10 Waktu Mulai dan Berakhir Studi Klinis dan Analisis

Mulai Studi : 30 November 2014

Berakhir Studi : 2 Maret 2015

1.11 Tanda Tangan dan Tanggal Penelitian

3

Tanda Tangan & Tanggal Penelitian

Penanggung Jawab Institusi Kepala Peneliti

(Dr. Nurul Afiani., Apt.) (Dr. Erna Pujiningtyas, M.Pharm., Apt.)

Tanggal : 15 November 2014 Tanggal : 15 November 2014

Dokter Peneliti

(dr. Anggun Pramuda, Sp.PD)

Tanggal : 15 November 2014

4

Nurul afiani

Ernapujiningtyas

Anggun

2. SINOPSIS STUDI

Obat yang Diujikan

Kapsul Cadepan® Pregabalin 150 mg yang diproduksi oleh PT. Matapharm dan

Kapsul Lyrica® 150 mg yang diproduksi oleh PT. Pfizer.

Judul

Studi Bioekivalensi Kapsul Cadepan® Pregabalin 150 mg yang Diproduksi oleh

PT. Matapharm Dibandingkan Terhadap Kapsul Pregabalin Lyrica® 150 mg yang

Diproduksi oleh PT. Pfizer Bulan November 2014 - Maret 2015.

Nomor Protokol

BE-05-014-Reg-a

Tanggal Penerbitan

15 November 2014

5

3. DAFTAR ISI

1. Halaman Judul............................................................................................................ 2

1.1 Judul.................................................................................................................. 2

1.2 Nama dan Alamat Sponsor............................................................................... 2

1.3 Nama, Penanggung Jawab dan Alamat Institusi............................................... 2

1.4 Nama dan Alamat Kepala Peneliti.................................................................... 2

1.5 Nama Peneliti Medis/Klinis.............................................................................. 2

1.6 Nama, Penanggung Jawab, dan Alamat Laboratorium Klinik......................... 2

1.7 Penanggung Jawab Laboratorium Analisis...................................................... 2

1.8 Nama dan Alamat Penanggung Jawab Manajemen Data, Analisis

Farmakokinetik dan Statistik............................................................................ 3

1.9 Nama dan Alamat Peneliti Lain & Personel Studi........................................... 3

1.10 Waktu Mulai dan Berakhir Studi Klinis dan Analisis...................................... 3

1.11 Tanda Tangan dan Tanggal Penelitian............................................................. 3

2. Sinopsis....................................................................................................................... 5

3. Daftar isi...................................................................................................................... 6

4.Singkatan dan Definisi Istilah...................................................................................... 7

5. Pendahuluan................................................................................................................ 8

5.1 Farmakologi..................................................................................................... 8

5.2 Farmakokinetik................................................................................................. 10

5.3 Efek yang Tidak Diinginkan........................................................................... 10

6. Tujuan......................................................................................................................... 11

7. Informasi Produk........................................................................................................ 11

8. Rencana Pemeriksaan................................................................................................. 14

8.1 Desain Studi Klinis......................................................................................... 14

8.2 Perlakuan Uji.................................................................................................. 18

8.3 Catatan Klinis dan Catatan Keamanan.......................................................... 19

8.4 Uji dan Analisis Parameter farmakokinetik................................................... 19

8.5 Analisis Statistik............................................................................................. 21

8.6 Metodologi dan validasi............................................................................... 23

8.7 Data Quality Assurance ................................................................................ 27

Daftar Pustaka................................................................................................................ 28

Informed Consent............................................................................................................ 29

6

4. SINGKATAN DAN DEFINISI ISTILAH

ALT : Alanine Amino Transferase

AUC : Area Under Curve

AUCt : Area di bawah kurva kadar pregabalin dalam plasma darah VS

waktu dari 0 sampai dengan 12 jam diukur secara trapezoidal.

AUC0-∞ : Dihitung sebagai total dari AUCt dan residual area (Ct/ke ),

yang mana Ct adalah konsentrasi akhir yang terukur dan Ke

adalah konstanta eliminasi.

ULN : Upper Limit Normal

BA-BE : Bioavaibilitas - Bioekuivalen

Cmax : Kadar maksimum pregabalin dalam plasma yang teramati.

EKG : Elektrokardiogram

Ekslusi : Individu yang tidak dapat diikutsertakan dalam penelitian

HCV : Hepatitis C

HIV : Human Immuno Virus

HBsAg : Hepatitis B

Inklusi : Individu yang dapat diikutsertakan dalam penelitian

RBC : Red Blood Cell / Sel Darah Merah

sGOT : Serum glutamic oxaloacetic transaminase

sGPT : Serum glutamic pyruvic transaminase

Tmax : Waktu sejak obat diberikan sampai Cmax

T1/2 : Waktu paruh obat (0,693/Ke)

Uji Anova : Suatu metode statistik untuk uji hipotesis lebih dari dua

kelompok data (variasi kelompok).

WBC : White Blood Cells / Sel Darah Putih

7

5. PENDAHULUAN

Gambar 1. Struktur Pregabalin

(S) enantiomer of 3-(aminoethyl)-5-methylhexanoic acid

Rumus empiris : C8H17NO2

BM : 159.23 g/mol

Kategori Ibu Hamil : B3

Rute : Oral

Nama dagang : Lyrica®

Penyimpanan : Suhu 15-30° C

Pregabalin merupakan penemuan baru, sejenis obat yang bekerja pada presinaptik

serabut saraf. Mekanisme kerja dari obat ini didasarkan pada tingginya ambang rangsang

(hyperexcited ) yang menyebabkan meningkatnya produksi neurotransmitter, sehingga

menimbulkan gejala nyeri neuropatik.

Pada diabetes, rangsangan atau stimuli bersumber dari kelainan metaboli. Khasiat

dari pregabalin adalah menekan produksi dari neurotransmitter dengan cara modulasi

kanal Ca dari neuron saraf presinaptik.

Gambar 2. Modulasi Pregabalin pada kanal Ca dari neuron saraf presinaptik

8

Pregabalin, salah satu first drug yang telah diakui FDA untuk nyeri neuropatik, telah

dibuktikan melalui beberapa studi mengenai efektivitasnya dalam mengatasi nyeri

neuropatik. Disamping itu dikemukakan pula nilai tambahnya yang sekaligus dapat

berkhasiat dalam perbaikan beberapa komorbid yang sering menyertainya seperti

gangguan tidur dan ansietas.

Interaksi pregabalin dengan alkohol dan obat sedasi dapat meningkatkan efek sedasi

pregabalin. Kombinasi pregabalin dengan pioglitazon dan rosiglitazon dapat

meningkatkan efek peningkatan berat badan dan retensi cairan.

Efek samping yang ditimbulkan pregabalin yaitu Pusing, mulut kering, edema,

peningkatan berat badan, dan sulit untuk berkonsentrasi. Efek samping lain yaitu

menurunkan platelet darah dan meningkatkan kreatinin kinase darah. Peningkatan

kreatinin kinase darah dapat menimbulkan sakit pada otot

5.1 Farmakologi

Indikasi

Nyeri neuropatik perifer dan sentral pada dewasa, ansietas, terapi tambahan pada

pengobatan kejang parsial, meredakan nyeri dalam penatalaksanaan fibromialgia.

Kontraindikasi

Laktasi

Dosis

150-600 mg/hari terbagi dalam 2-3 dosis

5.2 Farmakokinetik

Pregabalin diabsorpsi secara cepat setelah digunakan secara oral, dengan

bioavailabilitas absolut sekitar 90%. Jika diminum dalam kondisi puasa maka tmax

dari pregabalin tercapai pada 1,5 jam. Dosis proposional pregabalin meningkat

dalam konsentrasi plasma, terlihat dengan peningkatan dosis antara 25-300 mg

dan dosis ganda 75-900 mg/hari. Kondisi steady state dicapai selama 24-48 jam.

Absorpsi pregabalin turun sampai 25% saat diberikan bersama makanan dan tmax

meningkat sampai 3 jam. Pregabalin tidak berikatan dengan protein plsma.

Volume distribusi Pregabalin sekitar 0,5 L/kg. Pregabalin memiliki waktu paruh

plasma sekitar 6,3 jam pada subjek yang memiliki fungsi renal normal.

Pregabalin diekskresi lebih dari 90% dari dosis sebagai pregabalin utuh

dalam urin. Turunan N-metilasi dari pregabalin, metabolit utama ditemukan dalam

9

urin 0,9% dari dosis. Pregabalin (S-enansiomer) tidak mengalami racemization ke

R-enansiomer. Klirens ginjal diperkirakan 67,0-80,9 mL/menit pada subyek muda

yang sehat. Karena pregabalin tidak terikat pada protein plasma tingkat clearance

ini menunjukkan bahwa ginjal reabsorpsi tubular terlibat.

5.3 Reaksi yang Tidak Diinginkan (Adverse Drug Event)

Pusing, peningkatan nafsu makan, bingung, emosi labil, impotensi, gangguan

penglihatan dan vertigo.

6. TUJUAN

Menentukan bioekuivalensi dari dua tablet yang mengandung pregabalin, Cadepan®

150 mg yang diproduksi oleh PT. Matapharm dibandingkan terhadap tablet Lyrica® 150

mg yang diproduksi oleh Pfizer.

7. INFORMASI PRODUK

7.1 Informasi Produk Uji

- Nama Dagang : Cadepan®

- Zat Aktif, Dosis, Sediaan : Pregabalin Kapsul 150 mg

- Nomor Bets : A912135

- Tanggal Pembuatan : 02 Oktober 2014

- Tanggal Daluwarsa : 02 Oktober 2017

- Ukuran Bets : 100.000 kapsul

- Formulasi Produk :

Formulasi Persentase (%) Jumlah (mg) Fungsi

Pregabalin 30 150 Zat Aktif

Magnesium Stearat 1 5 Lubrikan

Aerosil 0,75 3,75 Glidant

Corn stracth 5 25 Antiadherent

Laktosa 63,5 316,25 Filler

Total 100 500

Spesikasi Produk Akhir : (terlampir)

10

Nama dan Alamat Pembuat : PT. Matapharm

Jl. Boulevard Bintaro Blok B7/B1 No. 05,

Tangerang 15224, Indonesia.

7.2 Informasi Produk Pembanding

Nama Dagang : Lyrica®

Zat Aktif, Dosis, Sediaan : Kapsul Pregabalin 150 mg

Nomor Bets : V 341 1113 21

Tanggal Pembuatan : 27 September 2014

Tanggal Daluwarsa : 27 September 2017

Nama dan Alamat Pembuat : PT. Pfizer Indonesia

Jl. Raya Bogor KM. 28

Jakarta

7.3 Data Ekuivalensi Farmasetik

Perbandingan Zat Aktif / Potensi

Zat uji (kapsul CADEPAN®) dan zat acuan/zat terbanding (kapsul LYRICA®)

mengandung Pregabalin 100 mg per tablet.

- Keseragaman Unit Sediaan

7.4 Perbandingan Profil Disolusi

Tanggal 13 November 2014

MediumLarutan HCl 0,06 N

Waktu (menit)

5 10 15 30 45 60

Vessel Au %D Au %D Au %D Au %D Au %D Au %D

10,23

136,57 0,309

44,58

0,456 57,630,54

477,78 0,635

81,99

0,737 90,63

20,24

236,60 0,318

44,60

0,460 57,600,54

077,70 0,630

82,02

0,730 90,60

30,22

636,57 0,305

44,54

0,458 57,650,54

977,68 0,628

82,05

0,735 90,65

40,23

636,58 0,300

44,59

0,462 57,630,55

077,75 0,632

81,90

0,740 90,70

5 0,24 36,59 0,315 44,5 0,450 57,61 0,55 77,73 0,625 81,9 0,742 90,58

11

0 8 2 5

60,25

036,55 0,299

44,62

0,455 57,660,54

677,65 0,633

81,92

0,732 90,66

70,21

436,60 0,308

44,61

0,457 57,590,54

277,80 0,640

82,10

0,738 90,59

80,22

036,56 0,312

44,55

0,461 57,620,55

577,66 0,634

81,91

0,734 90,64

90,21

736,55 0,303

44,61

0,451 57,640,54

277,64 0,638

81,94

0,731 90,68

100,22

536,61 0,320

44,57

0,462 57,610,55

177,67 0,642

81,96

0,736 90,71

110,24

836,54 0,307

44,59

0,453 57,650,55

377,81 0,641

82,08

0,733 90,64

120,22

936,62 0,305

44,53

0,455 57,600,55

277,83 0,636

82,05

0,741 90,69

X 36,5844,5

857,62 77,73

81,99

90,65

SD 0,03 0,03 0,02 0,07 0,07 0,04RSD 0,07 0,06 0,04 0,08 0,08 0,05

Tanggal 13 November 2014

MediumLarutan buffer asetat pH 6,8

Medium Larutan buffer pH 6,8

Menit ke %Dissolved (Tt)

Cadepan®

150mg

%Dissolved (Rt)

Lyrica®150mg

Rt–Tt (Rt–Tt)2

5 36,58 36,65 0,07 0,0049

10 44,58 44,68 0,10 0,01

15 57,62 57,70 0,08 0,0064

30 77,73 77,86 0,13 0,0169

45 81,99 82,14 0,15 0,0225

60 90,65 90,73 0,08 0,0064

∑(Rt-Tt)2 0,0671

7.5 Surat Pernyataan Sponsor

12

(terlampir)

8. RENCANA PEMERIKSAAN

8.1 Desain Studi Klinis

- Desain Studi

Penelitian ini didesain dengan standard 2-way crossover dengan menggunakan

sistem acak. Standard 2-way crossover yaitu pemberian dua produk obat

(Pregabalin (Cadepan® dan Lyrica®) pada setiap subjek dalam dua periode,

sehingga setiap subjek menjadi kontrolnya sendiri dan hal ini juga memperkecil

jumlah subjek. Kedua periode tersebut dipisahkan dengan periode washout, yaitu

selama satu minggu.

- Puasa

Subjek diminta berpuasa selama 8 jam sebelum obat diberikan dan 4 jam setelah

obat diberikan. Pada pagi hari diberikan 1 kapsul uji (Cadepan® 150 mg dari

Matapharm) atau 1 kapsul dari obat referensi (Lyrica® 150 mg dari Pfizer). Puasa

ini bertujuan agar konsentrasi obat dalam plasma tidak terganggu oleh adanya

makanan dalam saluran sistemik bersama dengan obat.

- Kriteria Inklusi dan Eksklusi

Kriteria inklusi:

a. Jumlah subjek: 20 orang

b. Pria dan wanita berbadan sehat (tidak memiliki penyakit atau hasil

pemeriksaan klinis dan fisik yang normal)

c. Umur: 18-35 tahun

d. Bukan perokok atau merokok kurang dari 10 batang rokok per hari

e. Dapat berpartisipasi dan berkomunikasi dengan baik dan bersedia untuk

mengisi informed consent.

f. BMI: 18-25 kg/m2.

g. Pemeriksaan vital :

Tekanan sistolik : 100-120 mmHg

Tekanan diastol : 60-80 mmHg

Denyut nadi : 60-90 bpm

13

Kriteria eksklusi:

a. Riwayat alergi atau hipersensitivitas atau kontraindikasi dengan obat

Pregabalin atau obat sejenis.

b. Wanita hamil atau ibu menyusui.

c. Memiliki penyakit kronis dan mayor pada kurang dari 90 hari. Contohnya

hipotensi, hiperglikemia, congestive cardiac failure atau gagal jantung, dll

d. Terdapat hasil pemeriksaan klinis yang tidak normal, misalnya tes fungsi hati

(ALT, alkaline phosphatase, total bilirubin >= 1,5 ULN), tes fungsi ginjal

(konsentrasi kreatinin serum> 1,4mg/dL), dll.

e. Positif Hepatitis B (antigen HBsAg, anti HCV, anti HIV)

f. Abnormalitas EKG

g. Riwayat atau keadaan saat ini baik medis maupun bedah yang dapat

memepengaruhi absorpsi, distribusi, metabolisme dan ekskresi obat.

h. Riwayat anafilaksis dan angioedema

i. Riwayat alkohol atau pengobatan lain dalam 12 bulan sebelum skrinning

untuk uji ini.

j. Partisispasi di uji klinis lain dalam 90 hari terakhir

k. Riwayat gangguan pendarahan atau koagulasi

l. Riwayat gangguan neurologis, epilespi, atau kejang.

m. Memiliki riwayat kesulitan dalam donasi darah atau akses ke pembuluh darah

di lengan kanan dan kiri.

n. Hilangnya 300 mL atau lebih darah dalam 3 bulam terakhir sebelum uji ini

dimulai.

o. Menggunakan obat resep atau non resep, obat herbal, suplemen makanan

dalam 14 hari terakhir sebelum uji dimulai.

- Standarisasi Kondisi Uji

Standarisasi Makanan

Makanan standar yang diberikan sebanyak 200 g terdiri dari nasi, tahu,

tempe, dengan minuman (air putih) sebanyak 150 - 200 ml. Karbohidrat adalah

komposisi utama dari makanan standar yang diberikan. Sedangkan selama 12

jam berpuasa, masih diperbolehkan untuk minum air putih maksimal 500 ml,

kecuali 1 jam sebelum dan 2 jam sesudah pemberian obat. Air yang diminum

14

selama berpuasa tidak boleh terlalu banyak dikarenakan dapat mempengaruhi

kecepatan pengosongan lambung.

Interaksi obat dengan makanan dan obat lain

Subjek juga diberikan penjelasan mengenai makanan dan obat yang tidak

boleh dikonsumsi 24 jam sebelum datang ke lokasi pengambilan sampel dan

juga selama periode pengambilan darah (makanan, minuman, dan obat lain yang

dapat berinteraksi dengan fungsi sirkulasi, saluran cerna, hati atau ginjal misal

merokok, minum alkohol, dan obat atau minuman yang mengandung senyawa

xantin, seperti kopi, teh, kola, atau coklat).

Aktivitas subjek selama berpuasa dan pengambilan sampel

Subjek selama kondisi pengambilan sampel tidak boleh melakukan aktifitas

berat yang dapat mempengaruhi waktu transit dalam saluran cerna dan aliran

darah ke usus. Pasien hanya diperbolehkan untuk duduk normal dan berdiri

tanpa melakukan aktivitas berat. Duduk normal, dalam hal ini ialah dalam

ruangan khusus yang diperuntukkan bagi subjek selama menunggu waktu

pemberian obat dan selama periode pengambilan sampel. Selama duduk, subjek

dapat melakukan kegiatan membaca, menonton, dan mengobrol.

Karantina subjek

Subjek akan mengalami masa karantina selama persiapan dan pengambilan

sampel dilakukan. Terdapat masa karantina umum dan masa karantina khusus.

Masa karantina umum adalah masa di mana subjek dapat melakukan kegiatannya

sehari-hari tetapi dibatasi dengan larangan-larangan yang telah ditetapkan dan

disepakati sebelumnya. Larangan tersebut adalah larangan terhadap konsumsi

obat-obatan, teh, kopi, makanan bersantan selama masa penelitian berlangsung.

Selain itu, subjek dilarang melakukan kegiatan berat (seperti: lari, angkat beban,

olahraga berlebihan,dll) atau kegiatan yang dapat menimbulkan kecelakaan.

Masa karantina umum adalah waktu antara masa karantina khusus pertama dan

masa karantina khusus kedua. Masa karantina khusus adalah masa di mana

subjek ditempatkan di suatu tempat karantina selama dua hari. Selama masa

karantina khusus, subjek menerima asupan makanan yang telah diatur jumlah

15

kalorinya. Masa karantina khusus pertama dilakukan selama dua hari (waktu

pengambilan darah pertama) dan masa karantina khusus kedua dilakukan tiga

hari setelah masa karantina khusus pertama (waktu pengambilan darah kedua).

- Pemberian Obat

Setelah berpuasa selama 8 jam, subjek diberi obat dosis tunggal kapsul uji atau

pembanding yang mengandung Pregabalin 150 mg. Kemudian subjek segera diberi

minum sebanyak 200 mL setelah pemberian obat.

- Penghapusan Subjek dari Sistem Penilaian

Subjek yang tidak memenuhi kriteria inklusi dan/atau termasuk ke dalam kriteria

eksklusi.

- Pemeriksaan kesehatan

Pemeriksaan fisik dan laboratorium yang dilakukan meliputi :

Fungsi ginjal

Fungsi hati

Tes darah rutin (Hb, Ht, RCB, platelet, WBC, BUN, bilirubin total, glukosa

puasa, total protein, albumin, alkalin fosfatase, sGPT, sGOT)

Analisis urin (berat jenis, warna, pH, gula, albumin, bilirubin, RBC, WBC)

- Protokol Uji

Perlakuan subjek

1. Semua subjek dilarang menggunakan obat lain minimal dua minggu menjelang

penelitian dan setelah selesai penelitian.

2. Semua subjek juga dilarang mengkonsumsi makanan dan minuman yang

mengandung alkohol, kaefin, cokelat, teh, dan cola sekurang-kurangnya 24 jam

sebelum penggunaan dosis dan hingga pengambilan sampel darah yang

terakhir.

3. Peraturan pola makan subjek

16

Subjek diminta untuk berpuasa selama 8 jam sebelum hingga 4 jam setelah

pemberian obat

Regimen makanan mirip untuk semua subjek pada kedua periode uji yaitu

diberikan 3 makanan standar yang disajikan 4 jam (sarapan), kemudian 8

jam (makan siang), dan 12 jam (makan malam) setelah pemberian obat.

Komposisi utama makanan tersebut adalah karbohidrat.

Pengambilan Sampel

Berikut adalah tahapan setelah pemberian obat uji atau obat referensi:

1. Sampel darah (7 mL) yang diambil dari vena lengan dikumpulkan dalam tabung

vakum yang mengandung heparin kering pada waktu 0 (sesaat sebelum obat

diberikan); 20 menit; 40 menit; 1; 1,5; 2; 2,5; 3; 4; 6; 9; 12; 24; dan 36 jam

setelah pemberian obat.

2. Sampel darah disentrifugasi

3. Plasma dipisahkan dan dibekukan pada -20oC hingga saatnya dianalisis.

Volume pengambilan darah

Volume Sampel darah yang diambil adalah 7 mL

Pengawasan Subjek

Efek samping yang dipantau selama studi didasarkan pada pertanyaan langsung,

laporan spontan, dan parameter klinis diukur pada setiap waktu sampling.

Genetik Fenotip (Bila ada)

(Tidak ada)

8.2 Perlakuan Uji

- Pemilihan dosis – tunggal

Dosis yang diberikan adalah dosis oral tunggal baik formulasi kapsul uji atau

referensi dari kapsul Pregabalin 150 mg.

- Identitas produk penelitian, dosis

17

Obat uji yang digunakan adalah 150 mg kablet kapsul Pregabalin generik (PT

Matapharm) dan sebagai obat pembanding digunakan kapsul dengan nama dagang

Lyrica® (PT Pfizer)

- Randomisasi

Pengacakan dilakukan dengan menggunakan sistem acak berdasarkan nomor meja.

Desain dua arah menyilang yaitu pemberian dua produk obat pada setiap subjek

dalam dua periode secara acak. Obat uji dan obat pembanding diurutkan secara

seimbang.

- Blinding

Blinding dilakukan dengan merahasiakan obat yang diberikan (apakah obat uji atau

obat pembanding).Yang boleh mengetahui adalah hanya staff laboratorium.

- Periode washout

Periode wash out tujuh hari untuk tiap dosis yang diberikan.

- Volume air yang diberikan

Air sebanyak 200 mL langsung diberikan setelah pemberian obat.

Pengambilan sampel

Sampel darah diambil segera 20 menit, 40 menit sebelum

penggunaan obat, dan 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4, 6, 9, 12, 24, 36 jam

setelah penggunaan obat.

8.3 Catatan Klinis dan Catatan Keamanan

- Kejadian merugikan

Efek samping dipantau selama studi berlangsung berdasarkan

pertanyaan langsung, laporan spontan, dan parameter klinis

(misalnya, tekanan darah, denyut jantung, frekuensi pernafasan,

suhu ketiak, EKG) yang diukur pada setiap waktu sampling. Reaksi

efek samping selama studi atau komplain dari subjek akan diawasi

dan dipelajari oleh dokter. Kejadian yang tidak diinginkan adalah

18

semua ketidaknyamanan yang dirasakan selama pengobatan,

meskipun tidak berhubungan dengan obat. Hal ini meliputi efek

samping, sakit, keracunan atau reaksi hipersensitivitas juga tanda-

tanda klinis yang tidak diinginkan yang tidak umum muncul pada

subjek.

Semua kejadian tersebut akan difollow up oleh peneliti sampai

tuntas.

8.4 Uji dan Parameter Farmakokinetik

Data konsentrasi plasma pada waktu tertentu untuk setiap subjek dan obat

dianalisis dengan metode non-kompartemen. Area di bawah kurva konsentrasi

plasma dari waktu 0 sampai tak hingga ( AUC0−∞) dihitung dengan rumus :

AUC0−∞=AUC0−t+ AUC t−∞

AUC0−t=∑i=0

n−1 t i+1+t i

2(C i+Ci+1)

AUC t−∞=C t

k e

AUC t−∞ dihitung dengan aturan trapezoidal, dimana t adalah waktu

pengukuran kadar terakhir, dalam penelitian ini t = 36 jam. AUC t−∞ merupakan

area residual yang dihitung dengan cara membagi Ct (konsentrasi akhir yang

terukur) dengan konstanta eliminasi (ke).

Nilai-nilai yang didapatkan dari percobaan diantaranya tmax, Cmax, dan t1/2. Nilai

tmax merupakan waktu sejak obat diberikan sampai dicapai Cmax, nilai tmax obat

pembanding adalah 90 menit. Nilai Cmax merupakan kadar maksimum pregabalin

dalam plasma yang teramati, yaitu 2,15µg/mL. Nilai t1/2 waktu paruh obat dalam

plasma, t1/2 dari pregabalin = 6,3 jam.

Nilai AUC0−∞ ,AUC0−t, dan Cmax untuk kedua produk akan dianalisis secara

statistik menggunakan metode Analysis of Variance (ANOVA). Masing-masing

parameter dianalisis dalam bentuk transformasi logaritma. Uji sediaan obat akan

dinyatakan bioekivalen dengan standar/reference jika 90% CI dari rasio parameter

bioavailabilitas berada pada interval 70%-143% untuk Cmax dan 80-125% untuk

AUC. tmax dan t1/2 dianalisis dengan metode nonparametrik (Wilcoxson sign rank

test) tanpa ditransformasi ke bentuk logaritma. Analisis statistik dilakukan dengan

19

EquivTest PK 2.0 statistical programme. Data farmakokinetika obat pembanding

Vd = 0,56l/Kg, absorbsi ≥90%, dan kadar tunak dicapai setelah 24-48 jam

penggunaan secara berulang.

8.5 Analisis Statistik

Tujuan penelitian bioekivalensi adalah untuk menghitung perbedaan

bioavailabilitas antara produk uji dan produk pembanding, dan untuk

menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang bermakna secara klinik. Parameter

bioavailabilitas yang digunakan untuk penilaian bioekivalensi suatu obat adalah

AUC0-∞, Cmax, dan tmax. Data AUC0-∞ dan Cmax diolah secara statistic menggunakan

metode Analysis of Variance (ANOVA).

- ANOVA

Uji ANOVA adalah suatu metode statistik untuk uji hipotesis lebih dari dua

kelompok data (variasi kelompok). Beberapa sumber variasi dalam uji

bioavailabilitas dan bioekivalensi yang diperhatikan dalam penelitian diantaranya

adalah:

(a) variasi inter subyek penelitian antara dua kelompok untuk produk yang

berbeda,

(b) variasi yang diakibatkan oleh jumlah sediaan yang diberi pada subyek

penelitian,

(c) periode pemberian sediaan uji dan referensi,

(d) variasi intra subyek penelitian untuk sediaan yang sama,

(e) residual antara dua sediaan yang berbeda.

(Wagner, 1975)

Berdasarkan Peraturan Kepala badan Pengawas Obat dan Makanan Republik

Indonesia Nomor: HK. 00. 05.3. 1818 Tentang Pedoman Uji Bioekivalensi,hal-

hal yang harus diperhatikan:

1. Penilaian bioavailabilitas suatu obat dari data plasma meliputi parameter

AUC0–36jam, AUC0-∞, Cmax, dan tmax,

2. Cara menghitung AUC0→t, AUC0→∞, ke, t1/2

Data yang bergantung pada kadar, yaitu AUC0–36jam, AUC0-∞, dan Cmax harus

ditransformasi logaritmik (ln) terlebih dahulu sebelum dilakukan analisis

20

statistik, sehingga dalam skala logaritmik akan diperoleh distribusi yang

normal dan varians yang homogen. Selanjutnya nilai-nilai ln AUC kedua

produk dibandingkan menggunakan analisis varians (ANOVA) untuk desain

two-way crossover yang memperhitungkan sumber-sumber variasi berikut:

a. Produk obat yang dibandingkan (test danreference)

b. Periode pemberian obat (I dan II)

c. Subjek

d. Urutan (TR dan RT)

Demikian juga nilai-nilai ln Cmax kedua produk dibandingkan dengan cara yang

sama.

Tabel ANOVA

ANOVA: Data dalam ln

Hasil berikut juga harus diperhatikan:

Perbedaan (difference) = rata-rata ln T – rata-rata ln R

SEdiff = √ MSResid x2n

21

Rasio rata-rata geometrik T/R = anti ln difference x 100%

(90% CI) diff = difference t0,1(n-2) x SE diff

(90% CI) rasio = anti ln (90% CI) diff x 100%

Untuk tmax, biasanya hanya dilakukan statistik deskriptif. Jika perlu dibandingkan,

digunakan statistik non parameter pada data asli (tidak ditransformasikan) dengan

α = 5%.

Untuk ketiga parameter tersebut di atas, selain dihitung 90% confidence intervals

(90% CI) untuk perbandingan kedua produk, juga dihitung statistic ringkasan

seperti nilai rata-rata aristmetrik dan geometrik, untuk AUC dan Cmax atau median

(untuktmax), serta nilai minimum dan maksimum.

Untuk parameter-parameter lainnya seperti Cmin, fluktuasi, dan t1/2, berlaku

pertimbangan-pertimbangan yang sama untuk menggunakan data-data yang

ditransformasi logaritmik (ln) atau yang tidak ditransformasi.

Kriteria bioekuivalen:

o Produk uji (test = T) dan produk pembanding (reference = R) dikatakan

bioekuivalen bila:

o Rasio nilai rata-rata geometrik (AUC)T/(AUC)R = 1,00 dengan 90%CI =

80-125%. Untuk obat dengan indeks terapi sempit, interval ini dipersempit

menjadi 90-111%. Interval yang lebih lebar dapat diterima jika didasari

pertimbangan klinik yang jelas.

o Rasio nilai rata-rata geometrik (Cmax)T/(Cmax)R = 1,00 dengan 90%CI = 80-

125%. Oleh karena Cmax lebih bervariasi dibandingkan AUC, maka interval

lebih lebar mungkin cocok. Interval ini harus ditetapkan sebelumnya,

seperti 75-133% atau 70-143%, dan harus diberikan alasan dengan

mempertimbangkan efikasi dan keamanannya.

o Perbandingan tmax akan dilakukan hanya jika ada klaim yang relevan secara

klinik mengenai pelepasan atau kerja yang cepat, atau tanda-tanda yang

berhubungan dengan efek samping obat. 90% CI dari perbedaan tmax harus

terletak dalam interval yang relevan secara klinik.

8.6. Metodologi dan validasi

8.6.1. Bahan dan Reagen

22

Pregabalin ( > 99%) diperoleh dari Burgeon Pharmaceutical Pvt., Chennai,

India. Gabapentin ( > 99%) sebagai Internal Standar (IS) diperoleh dari Cosmas

Pharmaceuticals, Ludhiana, India. Asam format (98%), asam trikloroasetat (grade

reagen-analisis), metanol (HPLC grade) dibeli dari Merck Pvt., Mumbai, India.

Air dikumpulkan dari Milli-Q sistem gradien dari milipore (Elix 3, Milli-Q A10

akademi). Blanko plasma manusia dengan antikoagulan EDTA-K3 dikumpulkan

dari Clinical Pharmacological Unit (CPU) dari Pusat Studi Bioekivalensi,

Universitas Jadavpur, Kolkata, India.

8.6.2. Instrumentasi dan Deteksi

Sistem LC terdiri dari pengiriman pelarut LC 10ADVP, Pengendali LC

10ADVP dan kolom oven CTO10ASVP berasal dari Shimadzu (Kyoto, Jepang).

Injeksi sampel adalah dengan Autosampler Shimadzu SIL HTC. Sistem LC

digabungkan dengan ionspray turbo ionisasi-tiga spektrometer massa quadrupole

API 2000 yang dibuat oleh AB Sciex Instrumen (Toronto, Kanda) untuk deteksi.

Sciex software Analyst versi 1.4.1 digunakan untuk akuisisi dan pengolahan data.

Turbo ionspray sumber ionisasi dioperasikan dalam mode positif untuk deteksi

spektrometri massa.

Energi benturan dan parameter lainnya untuk analit dan Internal Standar

(IS) yang dioptimasi dengan menyuntikkan setiap larutan senyawa dengan

konsentrasi 500 ng/mL dalam air. Multiple Reaction Mode (MRM) digunakan

untuk memperoleh jumlah ion pada titik-titik waktu yang berbeda. Sebuah

tegangan tinggi dari 5,5 kV diaplikasikan pada jarum penyemprotan. Instrumen

yang telah diprogram untuk waktu tinggal scan 200 ms. Suhu sumber ditetapkan

sebesar 550oC, dengan menggunakan nitrogen (grade 5.0) pada 7 L/menit sebagai

gas bantu dan nol kelas udara sebagai gas nebulizer pada tekanan 80 psi (1 p.si =

6894,76 Pa). Pengaturan gas tirai dan aliran benturan gas pada instrumen masing-

masing yaitu 10, 12 (skala acak). Semua gas yang digunakan dalam penelitian ini

dihasilkan dari generator gas Puncak (Chicago, IL, USA).

8.6.3. Sistem Kromatografi

Sistem kromatografi menggunakan kolom Gemini C18, 50 mm x 2 mm, 3

µm. Elusi dicapai pada suhu kamar dengan metanol:air (98:2, v/v), 0,5% v/v asam

23

format sebagai fase gerak. Sistem LC dioperasikan secara isokratik dengan laju

alir 1 mL/menit.

8.6.4. Pembuatan larutan standar kalibrasi dan sampel QC

Larutan stok analit dan IS dibuat pada 1 mg / mL dalam air dengan

divortex sekitar 1 menit. Pengenceran 100 dan 10 µg/mL dibuat dari larutan stok

yang digunakan untuk mempersiapkan kurva kalibrasi dan kontrol kualitas (QC)

sampel. Kurva standar delapan titik disiapkan dengan melakukan spiking blanko

plasma manusia dengan jumlah yang tepat dari larutan kerja untuk mendapatkan

konsentrasi final 100,0; 250,0; 500,0; 1000,0; 1500,0; 2000,0 dan 3000,0 ng/mL

untuk analit. Konsentrasi IS dalam larutan adalah 5.0 µg/mL. Semua larutan stok

dan larutan standar kerja yang disimpan dalam botol polypropylene dalam freezer

– 20oC

Sampel QC dibuat menggunakan larutan stok. Empat kadar sampel QC

dalam plasma 750,0 ng/mL (nilai rendah/QCL), 1500,0 ng/mL (nilai

sedang/QCM), dan 2250,0 ng/mL (nilai tinggi/QCH) untuk analit. Sampel QC

disiapkan di genangan 50 mL kemudian aliquoted menjadi pra-berlabel 2 mL

polypropylene botol dan disimpan pada -20oC.

8.6.5. Penyiapan Sampel

Standar kalibrasi dibuat dengan cara aliquot 0,1 mL untuk setiap larutan

yang telah dilakukan spiking dan dilakukan spiking lagi menjadi 0,9 mL dari

kontrol blanko plasma di dalam tabung polypropylene. Kemudian 0,1 mL larutan

IS kerja ditambahkan ke masing-masing tabung dan semua sampel di vortex

selama 30 detik. Kemudian 0,2 ml asam trikloroasetat (20% larutan v/v dalam air)

yang ditambahkan dilakukan pencampuran dengan cyclomixer selama 10 menit.

Semua sampel disentrifugasi selama 15 menit pada 5.000 rpm. Supernatan larutan

bening kemudian dipisahkan dan disaring dengan membran saringan berukuran

0,45 µm. Sampel yang dihasilkan dipindahkan ke dalam botol kaca 1,0 mL yang

dimuat ke dalam kabinet autosampler dan 20 µL alikuot setiap sampel yang telah

diekstraksi disuntikkan/diinjeksikan ke dalam sistem LC-MS-MS.

8.6.6 Prosedur validasi metode bioanalisis Pregabalin dalam plasma in vitro

a. LLOQ

24

Konsentrasi terendah yang masih dapat memberikan hasil yang akurat dan presisi.

Konsentrasi rendah dari sampel uji diencerkan dengan plasma kosong hingga ½

atau ¼ kalinya dan kemudian diukur. Pengukuran dilakukan menggunakan 5

replikat. LLOQ harus memiliki nilai % diff ≤ 20% dari nilai sebenarnya dan

reprodusibilitas dengan nilai CV ≤ 20%.

Pada penelitian ini dilakukan pengukuran konsentrasi LLOQ pada

konsentrasi 107,5, 53,75, dan 26,88 ng/mL. Dari hasil pengukuran, dihitung nilai

CV dan % diff dan diperoleh LLOQ 100 ng/ml.

b. Kurva kalibrasi dan Uji linearitas

Sampel blanko (plasma tanpa baku dalam), zero sampel (plasma dengan

baku dalam) dan 7 non-zero sample (plasma dengan analit termasuk LLOQ).

Kurva kalibrasi untuk non-zero sample dibuat dengan menspiking plasma darah

manusia dengan larutan standar pregabalin pada konsentrasi 100,0; 250,0; 500,0;

1000,0; 1500,0; 2000,0 dan 3000,0 ng/mL dan baku dalam gabapentin. Kemudian

diekstraksi seperti cara penyiapan sampel dan sebanyak 20 µL aliquot disuntikkan

ke alat LC MS-MS dengan fase gerak dan kecepatan alir terpilih dan dibuat kurva

kalibrasi persamaan garis regresi linear (y = a + bx), dimana x adalah konsentrasi

pregabalin dan y adalah perbandingan luas puncak pregabalin dengan baku dalam.

Setelah itu dapat dihitung koefisien korelasi dari persamaan regresi linear untuk

melihat linearitas memenuhi syarat bila r mendekati atau lebih besar dari 0,9999.

Koefisien korelasi (r2) untuk pregabalin yang diperoleh berturut-turut antara

0,9995-0,9998 (CV 0,01%). Hasil ini masih sesuai dengan kriteria penerimaan,

yaitu penyimpangan LLOQ tidak lebih dari 20%, dan tidak lebih dari 15% untuk

konsentrasi standar di atas LLOQ

c. Presisi dan Akurasi

Akurasi dan presisi dari penguijan ini diukur pada intra dan inter day pada

tiga konsentrasi yaitu 750,0 ng/mL (QCL), 1500,0 ng/mL (QCM), 2250,0 ng/mL

(QCH). Larutan QC disiapkan dengan penambahan baku dalam gabapentin.

Kemudian dilakukan ekstrasi seperti pada cara penyiapan sampel. Sebanyak 20,0

µL aliquot masing-masing larutan disuntikan ke alat pada kondisi terpilih.

25

Prosedur tersebut diulangi sebanyak 6 kali setiap hari (intra-hari) selama 3

hari (inter-hari). Kemudian dihitung selisih nilai terukur dengan nilai sebenarnya

dibandingkan dengan nilai sebenarnya (% diff) dan dihitung pula nilai CV.

% diff =nilai terukur−nilai sebenarnyanilai sebenarnya

×100 %

Batas yang diterima untuk presisi adalah nilai CV ±15% untuk konsentrasi rendah,

medium, dan tinggi, dengan ±20% untuk konsentrasi kuantifikasi batas terendah

(LLOQ). Sedangkan untuk akurasi nilai % diff ±15% untuk konsentrasi rendah,

medium, dan tinggi, dengan ±20% untuk konsentrasi kuantifikasi batas terendah

(LLOQ).

d. Selektivitas dan spesifitas

Selektivitas adalah kemampuan metode analisis untuk membedakan dan

mengukur analit dari keberadaan komponen lain dalam sampel. Uji ini dilakukan

dengan menganalisis sampel plasma blanko dari sumber-sumber berbeda (atau

doners) untuk menguji gangguan pada saat waktu retensi dari pregabalin dan

gabapentin (IS).

26

Bentuk kromatogram MRM dari Studi pregabalin dan gabapentin di plasma

manusia ditunjukkan dalam gambar b. Waktu retensi pregabalin dan gabapentin

(IS) 0.79 dan 0,53 menit. Tidak ada gangguan puncak ditemukan di profil MRM

untuk enam sampel plasma blanko (Gambar a).

e. Perolehan kembali

Perolehan kembali absolut (absolute recovery) diperoleh dengan membandingkan

6 sampel QC pada konsentrasi rendah, medium, dan tinggi (750, 1500 dan 2250

ng/mL pregabalin dan 5.0 µg/mL baku dalam) dalam sampel yang diekstraksi

dengan sampel larutan standar pada 3 konsentrasi QC (750, 1500 dan 2250 ng/mL

27

pregabalin). Hasil yang diperoleh, presisi keterulangan dari ketiga konsentrasi

memenuhi syarat yaitu tidak lebih dari 15%.

f. Carry-over

Uji carry over dilakukan untuk melihat keterikutan analit pada blangko plasma

setelah penyuntikan analit dengan konsentrasi tinggi. Respon analit yang ikut

terbawa dari penyuntikan sebelumnya tidak boleh mengganggu hasil analisis.

Keterikutan respon analit masih dapat diterima apabila luas puncak yang teramati

pada plasma blangko setelah penyuntikan plasma dengan konsentrasi tertinggi

tidak lebih besar dari 20% untuk luas puncak analit pada konsentrasi LLOQ dan

tidak lebih besar dari 5% untuk luas puncak baku dalam. Larutan pregabalin

konsentrasi 2250 ng/mL dalam plasma disuntikkan ke alat KCKT, setelah itu

disuntikkan blangko plasma ke alat KCKT. Diamati peak yang muncul pada

blangko plasma di waktu retensi analit dan baku dalam kemudian luas puncak

yang teramati dibandingkan dengan luas puncak pada konsentrasi LLOQ. Dari

hasil uji diperoleh % carry over pregabalin setelah penyuntikan konsentrasi tinggi

terhadap konsentrasi LLOQ sebesar 12,28% dan % carry over baku dalam setelah

penyuntikan konsentrasi tinggi terhadap konsentrasi LLOQ sebesar 0,69%.

g. Efek matriks (Matrix effect)

Sebanyak 5 sampel plasma blanko (1ml) yang berbeda diektraksi, lalu tiap sampel

kering yang diperoleh dispike dengan pregabalin pada kadar QC tengah (1500

ng/ml), sampel divortex dan 20 µL diinjeksikan ke kolom HPLC. Matrix effect

dihitung dengan membandingkan area sampel QC dengan area dari larutan standar

murni. Diperoleh efek matrix 101% yang menandakan adanya peningkatan

ionisasi yang diperngaruhi oleh matriks plasma dengan nilai CV dari kelima

pengujian adalah 3,52%.

h. Stabilitas

Setiap tes stabilitas dilakukan 6 replikasi dari 3 konsentrasi QC sampel (750,0

ng/mL (QCL), 1500,0 ng/mL (QCM), 2250,0 ng/mL (QCH) dalam plasma).

Ketiga sampel Semua hasil stabilitas, serta koefisien korelasi regresi linear kurva

kalibrasi yang dihasilkan dari masing-masing stabilitas uji coba untuk analit yang

disajikan dalam tabel. Sampel QC tiga siklus beku-cair (Freeze-Thaw), sampel

28

QC disimpan di ambien selama 24 jam, dan sampel yang diproses (siap untuk

injeksi) diuji pada kondisi 72 jam di 4ºC di autosampler. Stabilitas penyimpanan

jangka panjang yang dibekukan, penyimpanan diuji di 1 dan 3 bulan pada sampel

yang telah disiapkan dan disimpan pada suhu -20º C. Dilakukan pengambilan

sampel pada bulan pertama dan ketiga. Pada saat akan diinjeksi dilakukan

penambahan larutan baku dalam gabapentin dan dilakukan ekstraksi seperti pada

cara penyiapan sampel. Aliqut diinjeksi sebanyak 20,0 µl. Kemudian dihitung

nilai % CV dan akurasi.

8.7. Data Quality Assurance

Bagian mutu akan melakukan audit studi BA/BE pada interval waktu tertentu

untuk memastikan kesahihan studi dan selalu mencatat dan menandatangani form

pemeriksaan pada setiap inspeksi, menemukan dan megkoordinir masalah yang

berhubungan dengan studi. Jika ada beberapa masalah yang berpengaruh pada pengujian,

akan diberitakan pada peneliti utama maupun sponsor. Selain itu, bagian mutu akan

memastikan bahwa tidak ada penyimpangan dari protokol atau SOP yang telah disetujui

dan akan dilakukan pendokumentasian.

29

Daftar Pustaka

Anonim. (2000). The ASEAN Guideline For The Conduct of Bioavailability/

Bioequivalence (BA/BE) Studies was adopted at the 8th ASEAN Consultative

Committee on Standards and Quality.

Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia. (2011). Kepala Badan

Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia Nomor

HK.03.1.23.12.11.10217 Tentang Obat Wajib Uji Ekivalensi. Jakarta.

Department of Health. (2009). British Pharmacopoeia 2009. London: Crown.

Departemen Farmakologi dan Terapeutik FKUI. (2007). Farmakologi dan Terapi edisi ke-5. Jakarta: UI Press.

European Medicine Agency. (2011). Guideline on bioanalytical method validation (Hlm,

3-10). London: An agency of the European Union.

Gunawan, S.G. (2007). Farmakologi dan Terapi. (Ed. ke-5). Departemen Farmakologi

dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta:Gaya Baru.

Ikatan Apoteker Indonesia. (2011) ISO Indonesia. Jakarta: PT. Isfi Penerbitan Jakarta.

Chhabra, G. (2012). LC-MS-MS Methods Validation of Pregabalin in Human Plasma.

Department of Pharmaceutical Chemistry, School of Pharmacy & Technology

Management, SVKM’s Narsee Monjee Institute of Management Study.

30

INFORMED CONSENT

(UJI BIOEKUIVALENSI TABLET CADEPAN® 150 mg)

Tim penelitian laboratorium BA-BE Fakultas Farmasi Universitas Indonesia sedang

melakukan penelitian uji bioekuivalensi dalam rangka menguji mutu sediaan kapsul

Pregabalin 150 mg yang diproduksi oleh PT. MATAPHARM GROUP INDONESIA.

Dalam tata pelaksanaannya, penilaian mutu produk uji dilakukan dengan jalan

membandingkan kadar obat dalam darah yang dihasilkan oleh produk uji kapsul

Pregabalin CADEPAN® 150 mg terhadap kadar obat dalam darah yang diberikan oleh

suatu produk pembanding kapsul LYRICA® 150 mg yang diproduksi oleh PT. PFIZER

yang memiliki bentuk sediaan dan komposisi zat aktif yang sama.

Pada penelitian ini, digunakan 20 sukarelawan dewasa sehat pria atau wanita berusia 18-

35 tahun dengan indeks massa tubuh 18-25 kg/m2. Setiap sukarelawan akan menerima

masing-masing produk uji dan produk pembanding dengan selang waktu yang ditentukan

(minimal 14 hari) sesuai dengan kecepatan eliminasi atau pembuangan Pregabalin oleh

tubuh. Akan tetapi sebelum diberikan obat dalam rangka pengambilan sampel, anda akan

dipuasakan terlebih dahulu selama 10 jam sebelum obat diberikan. Setiap produk akan

dilakukan pengambilan darah pada menit ke 20 dan 40 sebelum diberikan, selanjutnya

pengambilan darah akan diambil pada jam ke 1; 1,5; 2; 2,5; 3; 4 ; 6; 9; 12; 24; 36 (13

pengambilan). Untuk pengambilan darah dilakukan dengan alat pengambilan khusus

melalui vena antecubital (lipatan siku), dengan volume darah yang diambil tiap kali

kurang lebih 10 ml.

Makanan standar yang diberikan sebanyak 200 gr yang terdiri dari nasi, tahu, tempe

dengan minuman (air putih) sebanyak 150-200 ml. Sedangkan selama 10 jam berpuasa

masih diperbolehkan untuk minum air putih 500 ml kecuali 1 jam sebelum dan 2 jam

sesudah pemberian obat. Selama anda berpartisipasi sebagai subjek, anda harus mematuhi

beberapa peraturan yang berkaitan dengan pelaksanaan penelitian ini (tidak minum obat

apapun selama percobaan berlangsung yang dapat berinteraksi dengan fungsi sirkulasi

saluran cerna, hati atau ginjal, tidak merokok, tidak menkonsumsi minuman yang

mengandung xanthine termasuk teh, kopi, kola, coklat dan alkohol). Subyek dapat

31

dikeluarkan setiap saat dari penelitian ini jika tidak mematuhi peraturan yang telah

ditetapkan. Selama kondisi pengambilan sampel anda tidak boleh melakukan aktivitas

yang berat yang dapat mempengaruhi waktu transit dalam saluran cerna dan aliran darah

ke usus. Anda hanya diperbolehkan untuk duduk biasa (normal), beribadah, atau berdiri

tanpa melakukan aktivitas yang berat. Duduk normal dalam hal ini di dalam ruangan yang

khusus diperuntukkan bagi anda selama menunggu waktu pemberian obat dan selama

pengambilan sampel. Selama duduk anda dapat melakukan kegiatan membaca, menonton

TV dan mongobrol. Untuk menyamakan kondisi-kondisi yang telah ditentukan diatas,

mempermudah pemberian obat dan pengambilan sampel maka anda diharuskan untuk

mengikuti masa karantina, yaitu masa karantina khusus (selama 2 hari) dan masa

karantina umum (selama 3 hari) lalu dilanjutkan dengan masa karantina khusus (selama 2

hari).

Pregabalin digunakan untuk mengobati nyeri neuropatik perifer pada dewasa, terapi

tambahan pada pengobatan kejang parsial dengan atau tanpa generalisasi sekunder pada

dewasa, gangguan ansietas dan meredakan nyeri dalam penatalaksaanaan fibromyalgia

pada dewasa. Pada umumnya pregabalin menimbulkan efek samping seperti pusing,

somnolen, peningkatan nafsu makan, bingung, emosi labil, impotensi, iritabilitas,

ganggua penglihatan dan vertigo. Bila timbul efek samping ini, anda akan diberi

pertolongan dan dibebaskan dari biaya yang diperlukan. Bila anda memutuskan ikut serta

sebagai subjek atau sukarelawan, anda bebas untuk mengundurkan diri setiap saat.

Namun, kami sangat mengharapkan anda bersedia menjadi subjek penelitian ini hingga

akhir penelitian.

Atas keikutsertaan anda dalam penelitian ini, anda berhak untuk menerima sejumlah

kompensasi yang wajar terhadap penyediaan waktu yang anda berikan dan

ketidaknyamanan yang anda alami. Untuk penelitian ini, akan diberi Rp. 900.000,-.

Semua data penelitian ini akan diperlakukan secara rahasia sehingga tidak memungkinkan

orang lain untuk menghubungkannya dengan anda. Anda diberi kesempatan untuk

menanyakan hal yang belum jelas sehubungan dengan penelitian ini.

Bila sewaktu-waktu anda merasakan adanya efek samping supaya dilaporkan kepada :

Laboratorium BA-BE, Fakultas Farmasi Universitas Indonesia.

32

Alamat : Kampus Baru UI Depok, Jawa Barat, Indonesia

No. Telpon : (021) 7873910

No. Fax : (021) 7873911

Anda dapat pula menghubungi peneliti utama dan dokter penanggung jawab penelitian

ini:

1. Dr. Erna Pujiningtyas., M. Farm., Apt.

No. telp : 08568070838

2. dr. Anggun Pramuda W, Sp. PD

No. telp : 085692080735

33

SURAT PERNYATAAN PERSETUJUAN UJI KLINIK

Yang bertanda tangan di bawah ini :

Nama :

Umur :

Alamat :

Pekerjaan :

No KTP/Tanda pengenal lainnya :

Setelah mendapat keterangan sepenuhnya dan menyadari tujuan, manfaat, dan

risiko penelitian yang berjudul:

“Studi Bioekivalensi kapsul Pregabalin Cadepan® 150 mg yang diproduksi oleh PT.

Matapharm Indonesia dibandingkan terhadap kapsul Lyrica® 150 mg yang

diproduksi oleh PT. Pfizer sejak bulan November 2014 – Maret 2015”

Dengan sukarela menyetujui diikutsertakan dan bersedia berperan serta dalam

penelitian tersebut diatas, dengan catatan, bila suatu waktu saya merasa dirugikan dalam

bentuk apapun saya akan mengundurkan diri dan membatalkan persetujuan ini.

Depok, November 2014

Mengetahui,

Penanggung jawab, Yang menyatakan,

Dr. Erna Pujiningtyas., M. Farm., Apt. (................................)

Saksi-saksi:

1. ( )

2. ( )

34

RANCANGAN BIAYA PENELITIAN

STUDI BIOEKIVALENSI KAPSUL PREGABALIN CADEPAN® 150 MG YANG

DIPRODUKSI OLEH PT. MATAPHARM INDONESIA DIBANDINGKAN TERHADAP

KAPSUL LYRICA® 150 MG YANG DIPRODUKSI OLEH PT. PFIZER SEJAK BULAN

NOVEMBER 2014 – MARET 2015

Komponen Biaya :

1. Biaya analisa Rp. 70.000.000,-

2. Logistik, meliputi :

a. Konsumsi (20@Rp.40.000,-/hari) x 7 Rp. 5.600.000,-

b. Sarana (fasilitas) Rp. 25.000.000,-

c. Transportasi Rp. 2.500.000,-

3. Biaya kompensasi volunteer, meliputi :

a. Pemeriksaan awal (16@Rp.1.500.000,-) Rp. 24.000.000,-

b. Jasa volunteer (20@Rp.900.000,-) Rp. 18.000.000,-

4. Biaya peneliti, meliputi :

a. Peneliti utama Rp. 4.000.000,-

b. Wakil peneliti (2@Rp.2.500.000,-) Rp. 5.000.000,-

c. Anggota peneliti (3@Rp.1.500.000,-) Rp. 4.500.000,-

d. Dokter Rp. 2.500.000,-

e. Perawat (7@Rp.1.000.000,-) Rp. 7.000.000,-

5. Biaya tidak terduga (10% dari total biaya) Rp. 16.810.000,-

Total Biaya Penelitian Sebesar Rp.184.910.000,-

35

Lampiran-1

PERATURAN KEPALA BADAN PENGAWASAN OBAT DAN MAKANAN

REPUBLIK INDONESIA

NOMER :HK.00.05.1.3682

TENTANG

TATA LAKSANA UJI BIOEKIVALENSI

Kepada Yth :

Kepala Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI

Jln. Percetakan Negara 23

JAKARTA

FORMULIR UB-1

I. INFORMASI UMUM

1. Judul Uji Bioekivalensi : Studi Bioekivalensi kapsul Pregabalin Cadepan® 150 mg yang

diproduksi oleh PT. Matapharm Indonesia dibandingkan terhadap kapsul Lyrica® 150

mg yang diproduksi oleh PT. Pfizer sejak bulan November 2014 – Maret 2015.

2. Nomor Protokol dan Tanggal (Sesuai tanggal persetujuan akhir protokol) :

Nomor Protokol : BE-05-014-Reg-a

Tanggal : 15 November 2014

3. Tujuan Uji Bioekivalensi : menentukan bioekivalensi kapsul Pregabalin Cadepan® 150

mg yang diproduksi oleh PT. Matapharm Indonesia dibandingkan terhadap kapsul

Lyrica® 150 mg yang diproduksi oleh PT. Pfizer

4. Desain Studi: Standard 2-way crossover, sistem acak, dosis tunggal.

5. Jumlah Subyek : Jumlah subyek 20 yang terdiri dari pria dan wanita dengan usia antara

18-35 tahun

36

6. Jumlah Waktu Pengambilan Subyek : waktu 0 (sesaat sebelum obat diberikan): 20 dan

40 menit, dan 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4, 6, 9, 12, 24, 36 jam setelah pemberian obat.

7. Protokol Uji Bioekivalensi dilengkapi Persetujuan Setelah Penjelasan (informed consent)

Ya Tidak

8. Tanggal mulai dan berakhir tiap fase Uji Klinik

Fase I : ………….

Fase II : ………….

II. INFORMASI LABORATORIUM

Nama dan Alamat Laboraturium Tempat Uji Bioekivalensi

Laboratorium BA-BE, Fakultas Farmasi Universitas Indonesia.

Alamat : Kampus Baru UI depok, Jawa Barat, Indonesia

No. Telpon : (021) 7873910

No. Fax : (021) 7873911

Peneliti:

1. Dr. Erna Pujiningtyas., M. Pharm., Apt.

2. Dr. Nurul Nizma, M. Pharm., Apt

3. Nurul Afiani, S. Farm., Apt

4. Fibya Indah, S.Farm., Apt

5. Agung Budi Rahardjo., S.Farm, Apt

6. Adity Nida, S.Farm., Apt

7. Titis Danastri., S.Farm., Apt

Fasilitas Klinik (Nama dan Alamat) :

37

Laboratorium Klinik (Nama dan Alamat):

Laboratorium Analitik (Nama dan Alamat) :

Institusi yang Melakukan Analisa Farmakokinetik/Statistik (Nama dan Alamat) :

38

III. INFORMASI MENGENAI OBAT UJI

Merupakan Obat : Impor

Produk Dalam Negeri

1. Nama Generik : Pregabalin

2. Nama Dagang : Cadepan®

3. Nama Kimia : (S)-3-(aminomethyl)-5-methylhexanoic acid

4. Kelas Farmakologi : Antikonvulsan

5. Bentuk Sedian dan Kekuatan Obat : Kapsul/ 150 mg

6. Kemasan : Blister

7. Cara Pemberian : Oral

8. Tgl. Kadaluarsa : Desember 2018

9. No. Batch : P11112008

10. Sertifikat Analisa : 0275/ QC/ XII/ 2014

11. Sertifikat CPOB : 1234/ CPOB/ A/ XI/ 09

12. Nama dan Alamat Produsen :

PT. Matapharm, Jl. Boulevard Bintaro Blok B7/B1 No. 05, Tangerang 15224,

Indonesia

39

IV. INFORMASI MENGENAI OBAT PEMBANDING

Merupakan Obat : Impor

Produk Dalam Negeri

1. Nama Generik : Pregabalin

2. Nama Dagang : Lyrica ®

3. Nama Kimia : (S)-3-(aminomethyl)-5-methylhexanoic acid

4. Kelas Farmakologi : Antikonvulsan

5. Bentuk Sedian dan Kekuatan Obat : Kapsul/ 150 mg

6. Kemasan : Blister

7. Cara Pemberian : Oral

8. Tgl. Kadaluarsa : Desember 2018

9. No. Batch : A11112008

10. Sertifikat Analisa : 0250/ QC/ XII/ 2014

11. Sertifikat CPOB : 5556/ CPOB/ A/ XI/ 09

12. Nama dan Alamat Produsen :

PT. Pfizer

Jl. Raya bogor KM 28 Jakarta, 13710

40

V. INFORMASI PENDAFTAR ATAU PEMEGANG IZIN EDAR

1. Nama dan Alamat :

PT. Matapharm, Jl. Boulevard Bintaro Blok B7/B1 No. 05, Tangerang 15224, Indonesia

2. Penangung Jawab yang Mewakili Pendaftaran atau Pemegang Izin Edar

(Nama dan Nomor Telepon) :

Dr. Nizma, M.Pharm.,Apt

Telp. (021) 229980

VI. INFORMASI MENGENAI INDUSTRI FARMASI

Kesimpulan Kaji Etik (terlampir)

Persetujuan Komisi Etik (terlampir)

Nomer dan Tanggal Persetujuan :

No. :

Tanggal :

Nama dan Alamat Institusi :

VII. PERNYATAAN PENELITI

41

Saya/kami akan memenuhi ketentuan yang tercantum dalam Peraturan Kepala Badan

Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia Nomer HK.00.05.1.3682 tentang Tata

Laksana Uji Bioekivalensi dan Pedoman Uji Klinik yang baik dalam pelakanaan Uji

Bioekivalensi.

(materai)

Dr. Erna Pujiningtyas, M. Pharm., Apt.

Tanggal 15 November 2014

VIII. PERNYATAAN SPONSOR

Kami akan memenuhi ketentuan-ketentuan yang diatur dalam keputusan Kepala Badan

Pengawas Obat dan Makanan tentang Pedoman CUKB termasuk Tata Laksana Uji

Bioekivalensi.

Kami menyatakan bahwa informasi yang diserahkan adalah benar dan tepat pada tanggal

penyerahan berkas.

Kami akan menginformasikan kepada Komisi Ilmiah, Komisi Etik Kepala Badan setiap

perubahan informasi yang terjadi.

Kami akanmemberi jaminan terhadap klaim yang terjadi berkaitan dengan terjadinya cedera

atau kematian yang terjadi dalam pelaksanaan uji Bioekivalensi.

42

(materai)

Dr. Nizma, M.Pharm.,Apt

15 November 2014

IX. PROTOKOL (Terlampir)

43

LABORATORIUM BIOAVAILABILITAS DAN BIOEKUIVALENSI (BABE)

FAKULTAS FARMASI UI AKAN MELAKUKAN UJI BIOEKIVALENSI KAPSUL

PREGABALIN CADEPAN® 150 MG YANG DIPRODUKSI OLEH MATAPHARM,

INDONESIA DIBANDINGKAN TERHADAP KAPSUL PREGABALIN 150 MG

LYRICA® YANG DIPRODUKSI OLEH PT. PFIZER

Membutuhkan Sukarelawan sebagai berikut:

1. Pria dan wanita berbadan sehat.

2. Umur : 18-35 tahun

3. BMI : 18-25 kg/m2

4. Tidak merokok/minum alkohol/obat-obatan terlarang

5. Tidak mengkonsumsi obat apapun 2 minggu sebelum penelitian dimulai dan selama

penelitian berlangsung

6. Bersedia untuk mematuhi segala aturan yang berkaitan dengan pelaksanaan penelitian

Bila anda berminat untuk ikut berpatisipasi menjadi sukarelawan dalam penelitian ini,

maka dapat menghubungi bagian PPM Fakultas Farmasi UI, dengan alamat:

Kampus Universitas Indonesia, Depok, Jawa Barat dengan No.Telp (021) 78849002, atau

anda dapat menghubungi Dr. Erna Pujiningtyas, M.Pharm, Apt.085692080735.

Atas keikutsetaannya anda dalam penelitian ini, anda berhak menerima jumlah

kompensasi yang wajar terhadap waktu yang anda berikan sebesar Rp 900.000.-

44

Laboratorium Bioavaliabiltas dan Bioekuivalensi (BABE) Fakultas Farmasi UI Kampus Baru Universitas Indonesia, Depok, Jawa Barat. Telp. 021 78849002

No. pengajuan:………………………

PANITIA TETAP ETIK PENELITIAN KEDOKTERAN/KESEHATAN FAKULTAS

KEDOKTERAN UNIVERSITAS INDONESIA/ R.S.Dr.CIPTOMANGUNKUSUMO

FORMULIR ETIK PENELITIAN KEDOKTERAN/KESEHATAN

1. Peneliti Utama (title, unit pelayanan)

Multi senter: Ya Tidak

2. Judul Penelitian:

3. Subyek: Penderita Non Penderita Hewan

Jumlah subyek:

Keterangan:

4. Perkiraan waktu penelitian yang dapat diselesaikan untuk tiap subyek:

5. Ringkasan usulan penelitian yang mencakup obyektif/ tujuan penelitian, manfaat/

relevansi dari hasil penelitian dan alasan/ motivasi untuk melakukan penelitian (ditulis

dalam bahasa yang mudah dipahami oleh orang yang bukan dokter).

Obyektif/ Tujuan:

Manfaat/ Relevansi:

Alasan/ Motivasi:-

45

6. Masalah etik (nyatakan pendapat anda tentang masalah etik yang mungkin akan

dihadapi) :

7. Bila penelitian ini menggunakan subyek manusia, apakah percobaan pada hewan sudah

dilakukan? Bila belum sebutkan alasan untuk memulai penelitian ini langsung pada

manusia.

8. Prosedur eksperimen (frekuensi, interval, dan jumlah total segala tindakan invasif yang

akan dilakukan, dosis dan cara pemberian obat, isotop, radiasi atau tindakan lainnya):

Frekuensi pengambilan darah:

Interval pengambilan darah:

Dosis dan cara pemberian obat:

9. Bahaya potensial langsung atau tidak langsung, segera atau kemudian dan cara-cara

untuk mencegah atau mengatasi kejadian (termasuk rasa nyeri dan keluhan lain) :

10. Pengalaman terdahulu (sendiri atau orang lain) dari tindakan yang hendak diterapkan:

11. Bila penelitian ini menggunakan orang sakit dan dapat memberi manfaat untuk subyek

yang bersangkutan, uraikan manfaat itu:

12. Bagaimana cara memilih penderita/sukarelawan sehat:

46

13. Bila penelitian ini menggunakan subyek manusia, jelaskan hubungan antara peneliti

utama dengan subyek yang diteliti:

Dokter-penderita Guru-murid Majikan-anak buah

14. Bila penelitian ini menggunakan orang sakit, jelaskan diagnosis dan nama dokter yang

bertanggungjawab merawatnya. Bila menggunakan orang sehat jelaskan cara pengecekan

kesehatannya.

15. Jelaskan cara pencatatan selama penelitian, termasuk efek samping dan komplikasi bila

ada.

16. Bila penelitian ini menggunakan subyek manusia, jelaskan bagaimana cara memberitahu

dan mengajak subyek (lampirkan contoh surat persetujuan penderita dan rincian

informasi yang akan diberikan kepada subyek penelitian). Bila pemberitahuan dan

ketersediaan subyek bersifat lisan atau bila karena sesuatu hal tidak dapat atau tidak

perlu dimintakan persetujuan, berilah alasan yang kuat untuk itu.

17. Bila penelitian ini menggunakan subyek manusia, apakah subyek dapat ganti rugi bila

ada gejala efek samping? Berapa banyak?

18. Bila penelitian ini menggunakan subyek manusia, apakah subyek diasuransikan?

Ya Tidak

47

19. Nama dan alamat tim peneliti serta sponsor:

Tim Peneliti :

Laboratorium BA-BE

Fakultas Farmasi Universitas Indonesia

Alamat : Kampus Baru UI Depok, Jawa Barat- Indonesia

No. Telpon : (021) 7873910

No. Fax : (021) 7873911

Sponsor :

PT. Matapharm

Titan Center 3rd Floor, Jl. Boulevard Bintaro Blok B7/B1 No. 05

Tangerang 15224, Indonesia

Phone. (+62-21) 7454 111

Fax. (+62-21) 7454 111

Sebutkan nama rumah sakit, ruang perawatan, poliklinik atau tempat pelayanan

kesehatan lainnya.

20. Data berikut diisi bila penelitian ini menyangkut uji klinik obat.

Obat yang diuji

Nama Dagang

Nama Generik

Rumus Kimia

Kelas Farmakologik

Bentuk sediaan dan Kekuatan

Nomor Pendaftaran untuk sediaan tersebut

Komposisi preparat

Struktur zat kimia

Uji klinik yang diuji sudah dilaksanakan di negara:

Obat yang diuji sedang didaftarkan dinegara:

48

Fase uji klinik:

Fase I Fase II Fase III Fase IV

21. Waktu penelitian direncanakan:

Mulai: 30 November 2014 Selesai: 2 Maret 2015

Jakarta, 15 November 2014

Dr. Erna Pujiningtyas., M.Pharm., Apt Dr. Nizma, M.Pharm.,Apt

Peneliti Utama Sponsor

49