ANALISIS LIPID

Kelompok 1Florensia Indan Stepani (0806321575 )Nurhafizah Putri (0806460540) Pauline Leon Artha (0806460553)Prima Anggreni (0806460566)

Pokok Pembahasan

1. Lipid2. Jenis Uji pada Lipid3. Analisis Kualitatif4. Analisis Kuantitatif

Apa itu Lipid?Lipid merupakan senyawa organik berminyak atau berlemak yang tidak larut dalam air, yang dapat diekstrak dari sel dan jaringan oleh pelarut nonpolar, seperti kloroform, benzol atau eter.Lipid disimpan didalam tubuh dalam bentuk trigliserida

Struktur molekulnya kaya akan rantai unsur karbon(-CH2-CH2-CH2-)sehingga lemak mempunyai sifat hydrophob.

Fungsi Lipid• Penyimpan energi• Transportasi metabolik

sumber energi• Sumber zat untuk sintese bagi

hormon, kelenjar empedu serta menunjang proses pemberian signal signal transducing

• Struktur dasar atau komponen utama membran semua jenis sel.

• Pelindung organ tubuh dan Alat angkut vitamin larut lemak

• Pembentukan sel dan Sumber asam lemak esensial

Klasifikasi Lipid berdasarkan kelas dari lemak

Lipid berdasarkan Struktur

• Lipid dengan rantai hidrokarbon terbuka.asam lemak, TAG, spingolipid, fosfoasilgliserol, glikolipid

• Lipid dengan rantai hidorkarbon siklissteroid (kolesterol)

Menurut Bloor, lipid dapat diklasifikasikan sebagai berikut :

• Lipid sederhana :– lemak netral (monogliserida, digliserida, trigliserida),– ester asam lemak dengan alkohol berberat molekul tinggi

• Lipid majemuk (kompleks)– Fosfolipid : Fosfolipid + H2O menghasilkan asam lemak +

alkohol + asam fosfat + senyawa nitrogen.– Glikolipid : Glikolipid + H2O menghasilkan asam lemak +

karbohidrat + sfingosin.

• Lipid turunan: senyawa-senyawa yang dihasilkan bila lipid sederhana dan lipid kompleks mengalami hidrolisis. – asam lemak, sterol (kolesterol, ergosterol,dsb), alkohol

padat, aldehid, keton bodies.

FOSFOLIPIDFosfolipid merupakan golongan senyawa lipid

dan merupakan bagian dari membran sel

makhluk hidup bersama dengan protein,

glikolipid, dan gliserol.Fosfolipid terdiri atas empat

komponen:•Asam lemak•Gugus fosfat•Alkohol yang mengandung nitrogen, dan•Suatu kerangka ( gliserol dan 2 gugus asil)

Fungsi Fosfolipid yaitu bahan

penyusun membran sel , sebagaisurfaktan

paru-paru yang mencegah perlekatan

dinding alveoli paru-paru sewaktu ekspirasi

Kelompok molekul polar, di perlihatkan dengan warna merah.U dindikasi mengandung bagian molekul hidrofobik, di perlihatkan dengan warna biru.

2. Jenis Uji pada LIPID

Tujuan :• Mengetahui sifat yang terdapat pada

lipid ( kelarutan, kepolaran, kejenuhan lipid dan ketengikan lipid)

• Analisis lipid mempunyai 2 metode, yaitu :

1.Analisis Kualitatif2.Analisis Kuantitatif

Analisis Kualitatif

• Analisis kualitatif merupakan analisis kimia ada/tidaknya komponen radikal, ion kation/molekul Analisis kualitatif lipid, dilakukan dengan 4 cara, yaitu :

Uji kelarutan lipidUji AkroleinUji ketidakjenuhan lipidUji ketengikan

Uji kelarutan LIPID

Tujuan • Pengujian kepolaran LIPID

Parameter • Lipid bersifat polar ( larut dalam air

dan alkohol )• Lipid bersifat nonpolar ( larut dalam

kloroform dan eter )

Uji Kelarutan LIPID

• Hampir semua minyak dan lemak larut pada pelarut nonpolar

( kloroform dan eter )

Uji Akrolein

Tujuan : • Menentukan keberadaan

gliserin/lemakParameternya :• Bau akrolein ( seperti abu alkohol )

Uji Akrolein

Uji Ketidakjenuhan LIPID

Parameter pengujian • Adanya reaksi positif ( berupa

timbulnya warna merah saat ditetesi ion Hubs )

• Asam lemak tidak jenuh adanya timbul warna merah yang semakin lama pudar.

• Asam lemak jenuh timbul warna merah tetapi tidak pudar

Uji ketidakjenuhan LIPID

SAMPELHASIL KETERANGAN

Minyak kelapa + Warna merah

Asam oleat - Warna merah – pudar

Mentega + Warna merah

Asam palmitat + Warna merah

Margarin + Warna merah

Lemak hewan + Warna merah

Minyak tengik + Warna merah

Keterangan :( - ) TIDAK JENUH( + ) JENUH

Rantai Hidrokarbon

Asam Lemak Jenuh Asam Lemak Tidak Jenuh

Asam Oleat ( struktur kimia )

Uji Ketengikan LIPID

Tujuan • Mengetahui oksidasi lipid

Parameter • Larutan putih = tidak tengik• Larutan merah muda = tengik

Uji Ketengikan Lipid

• Tengiknya suatu larutan karena golongan trigliserida banyak teroksidasi oleh oksigen dalam udara bebas.

KROMATOGRAFI LIPID

• Untuk mengetahui fungsi lipid pd proses biologis

diperlukan mengetahui lipid apa saja yang ada.

• Karena lipid tidak larut dalam air ekstraksi lipiddari jaringan menggunakan pelarut organik

• Secara umum, campuran komplek lipid dipisahkan berdasarkan perbedaan polaritas atau kelarutannya pada pelarut non polar

• Lipid netral TAG, lilin, pigmen mudah diektraksi dari jaringan dengan : etil eter, kloroform, atau benzena

• Membrane lipid lebih mudah diekstrak denganpelarut yang lebih polar etanol atau metanol

Tujuan: Mengurangi interaksi hidrofobik

rantai hidrokarbonMelemahkan ikatan hidrogen dan

interaksi elektrostatik yang mengikat lipid dengan protein membran

• Campuran pelarut yang biasa digunakan :klorofom : metanol : air = 1:2:0.8

• menghasilkan single phaseUntuk mengekstrak semua lipid ditambahkan airMenghasilkan 2 fase : metanol/air dan kloroform

SKEMA ADSORPSI KROMATOGRAFI

Campuran lipid dapat difraksinasi lebih lanjut kromatografi berdasarkan perbedaan polaritassetiap kelas lipid• Adsorbsi kromatografidigunakan material

polartidak larut silika gel yang dipak pada kolomgelas yang panjang dan tipis campuran lipid

dlmpelarut kloroform dituangkan dr ataslipid yang lebih polar akan terikat kuat padamaterial sedangkan lipid yang netral langsungkeluar. Lipid yang polar dikeluarkan dengan caramencuci material tsbt dgn solvent yang lebih

polar. aseton metanol

Kromatografi Lapisan Tipis (TLC)

Digunakan untuk memisahkan komponen-komponen atas dasar perbedaan perbedaan adsorpsi atau partisi oleh fase diam di bawah gerakan pelarut pengembang.

Aplikasi Kromatigrafi Lapisan Tipis

• Monoacyglycerols• Diacyglycerols• Triacyglycerols• Kolesterol• Asam lemak bebas• Ester kolesterol• Fosfolipid

Kromatografi Eksklusi (SEC)

Digunakan untuk memisahkan produk hidrolitik, oksidasi dan pemanasan lemak

Kromatografi Cairan (HPLC)

HPLC digunakan untuk memisahkan lipida non-volatil yang memiliki berat molekul tinggi.

Adsorpsi Kromatografi

• Adsorpsi kromatografi adalah teknik kromatografi tertua dioperasikan berdasarkan retensi terlarut pada permukaan adsorben. Adsorben-adsorben yang umum digunakan adalah silika gel dan alumina karena mereka dimiliki daerah yang besar permukaan dan banyak situs aktif. Zat terlarut dan pelarut dalam cairan cairan dapat bersaing satu sama lain untuk mendapatkan situs yang aktif.