Albumin - BCG Dye Cara Binding PengenalanSerum albumin terdiri dari satu spesies protein yang mewakili sekitar 60% dari total protein. Hal ini disintesis secara eksklusif dalam hati dan berfungsi sebagai pengatur tekanan darah onkotik, sebagai pembawa untuk kation banyak dan zat yang tidak larut air, dan sebagai kolam aminoacids untuk tujuan kalori atau sintetis.

Prinsip dari metode iniAlbumin mengikat secara kuantitatif dengan hijau Bromocresol pada pH 4,15 mengakibatkan pembentukan warna hijau yang dapat diukur pada saringan 630nm/red.

Jenis spesimen, pengumpulan dan penyimpananEntah serum atau plasma dapat digunakan, tetapi serum lebih disukai. Sebuah spesimen puasa tidak diperlukan, tetapi mungkin diinginkan untuk mengurangi lipaemia. Hindari hemolisis. Sampel erat tutup stabil selama 24 jam pada suhu kamar (25-35 0 C), satu minggu pada 2-8 0 C dan selama 3 bulan pada -20 0 C.

ReagenSemua bahan kimia harus kelas Analar

Natrium hidroksida 1 M:Timbang 4.0 g natrium hidroksida (NaOH), larut dan membuat hingga 100ml dengan air suling. Solusi ini stabil selama beberapa bulan pada suhu kamar (25-35 0 C) dalam wadah polypropylene.

Brij - 35 ........... 30g/dlTersedia pada konsentrasi di atas dari bahan kimia SD Rupa atau Perusahaan Loba Kimia, di India . Brij padat juga dapat diperoleh dari Sigma Co Dalam hal ini, 30g Brij hangat solid dalam sebuah gelas kimia dalam volume kecil air suling untuk membubarkan dan membuat hingga 100ml dengan air suling.

Bromo kresol Green (BCG) pewarna solusiMentransfer 25ml IM NaOH ke dalam labu ukur satu liter yang berisi 600 ml air suling. Tambahkan asam suksinat 5.6g dan kemudian menambahkan 56 mg bubuk BCG. Campur dan kemudian membuat hingga 1 liter dengan air suling. Periksa pH. Jika kurang dari 4,15, sesuaikan dengan 4,15 + 0,05 dengan penambahan tetes demi tetes dari 1 M NaOH. Tambahkan 100 mg natrium azida dan 3.5ml 30 g / dl Brij-35 untuk reagen. Periksa absorbansi reagen pada 630 nm / filter merah terhadap air suling. Ini harus kurang dari 0,2. Jika lebih besar dari 0,2, tambahkan Brij lagi untuk menurunkan absorbansi. Toko ina polyethlyene kontainer. Stabil selama 6 bulan pada suhu kamar (25-35 0 C).

StandarDalam estimasi biokimia banyak standarisasi langsung digunakan, misalnya, glukosa urea dan kreatinin yang tersedia dalam bentuk murni, dan dapat langsung ditimbang dan digunakan, sedangkan, dalam kasus albumin manusia, ini tidak tersedia. Laboratorium dapat memperoleh standar albumin dari perusahaan komersial atau mempersiapkan standar di rumah.

Metode in-house penyusunan standar ini dijelaskan di bawah ini: Siapkan dikumpulkan serum seperti yang dijelaskan pada Bagian 1 Pendahuluan Umum bawah 'Persiapan Kolam QC. Laboratorium harus sera kolam harian sisa pasien. Untuk standar albumin, hanya penggunaan serum manusia dianjurkan, karena telah didokumentasikan bahwa afinitas BCG pada albumin sapi berbeda dengan afinitas pada albumin manusia luar 3g/dI. Setelah aliquoting dan pembekuan serum dikumpulkan, menganalisis albumin dalam Aliquot harian untuk jangka waktu 20 hari menggunakan standar albumin dapat diandalkan (sumber komersial atau non-komersial sumber seperti WHO). Hitung nilai rata-rata dan menetapkan ini sebagai nilai standar. Catatan: Selalu ada risiko infeksi dari bahan ini.

Peralatan, gelas dan aksesoris lainnyaLihat Bagian A (2), Pengantar SOP.

ProsedurProtokol dari prosedur ini dijelaskan di bawah.

Pengenceran Standar (S1-S4), Uji & QCPipet berikut ke tepat berlabel 13 x tabung 100mm

S1Air suling (ml) Standar (ml) Uji sampel / QC (ml) Aduk rata 1.9 0.1 -

S21.8 0.2 -

S31.7 0.3 -

S41.6 0.4 -

Uji1.8 0.2

QC1.8 0.2

Warna PengembanganPipet berikut ke dalam satu set tepat berlabel tabung 18 x 50mm

KosongAir suling (ml) Diencerkan Standar (ml) Dilusian Contoh / QC (ml) BCG Solusi (ml) 0.1 Uji 2.5

S10.1 2.5

S20.1 2.5

S30.1 2.5

Uji0.1 2.5

QC0.1 2.5

Campur semua tabung juga. Menetaskan pada suhu kamar (25-35 0 C) selama 10 menit. Mengatur spektrofotometer / fotometer filter untuk menggunakan nol kosong pada 630 nm / filter merah dan mengukur absorbansi standar, tes & QC. Perhitungan dan grafik kalibrasiKarena protokol untuk tabung standar S2 dan uji identik, standar S2 akan mewakili konsentrasi sebenarnya dari serum dikumpulkan digunakan sebagai standar. Standar S1 berisi setengah volume S2, S3 memiliki 1 kali dan S4 memiliki dua kali volume S2. Oleh karena itu konsentrasi albumin diwakili oleh S1, S3 dan S4 akan , 1 dan 2 kali konsentrasi S2 masing-masing. Misalnya, jika konsentrasi S2 adalah 3g/dl, SI akan 1.5g/dl, S3 akan 4.5g/dl dan S4 akan 6g/dI.

Plot nilai absorbansi standar terhadap konsentrasi masing-masing. Kisaran terukur dengan grafik ini adalah 0,56,0 g / dl. Plot nilai absorbansi uji / QC pada grafik kalibrasi dan membacakan konsentrasi. Setelah linieritas terbukti, itu isnot diperlukan untuk mempersiapkan grafik standar setiap kali ketika sampel pasien dianalisis. Ini akan cukup jika standar S2 diambil setiap waktu dan hasil pasien tersebut dihitung dengan menggunakan rumus:

Uji absorbansi -------------------- X Konsentrasi g S2 / dl Standar absorbansi Analisis reliabilitasLihat halaman 7-9 bagian 1 (Pendahuluan Umum) pada penggunaan QC internal dan interpretasi data QC harian (untuk merilis hasil pasien '). Sertakan satu QC internal di setiap batch sampel dianalisis setiap hari terlepas dari jumlah sampel dalam batch. Sejak albumin dianalisis dalam satu batch sekali sehari di laboratorium menengah, tidak akan mungkin untuk menganalisa sampel QC dan menghitung dalam beberapa hari presisi. Namun, bahkan jika hanya sampel QC tunggal dianalisis dalam sehari, nilai ini dapat dikumpulkan dengan 10 atau 20 nilai sebelumnya diperoleh pada hari-hari sebelumnya dan antara hari presisi dapat dihitung dan dinyatakan sebagai CV%. Pastikan bahwa ini adalah juga dalam batas yang dapat diterima, yaitu 6%. Setidaknya seminggu sekali menganalisa lain QC serum dari baik QC rendah atau kolam renang QC tinggi. "Diuji" QC sera dengan nilai-nilai lain (rentang) yang tersedia dari sumber komersial, yaitu Boehringer Mannheim, Biorad & Randox. Jika laboratorium menggunakan serum QC dari sumber komersial, penting bahwa perusahaan menyatakan bahwa bahan QC mereka dapat dilacak pada bahan referensi internasional.

Bahan berbahayaSodium hidroksida digunakan dalam prosedur ini adalah basa kuat dan kaustik. Jangan menelan, dan menghindari kontak dengan kulit dan selaput lendir.

Referensi jangkauan dan interpretasi klinis

Serum albumin - 3,5-5,0 g / dl Tingkat serum albumin digunakan untuk menilai status gizi dan memiliki pengaruh penting pada metabolisme zat endogen seperti kalsium, bilirubin dan asam lemak dan pada efek obat-obatan dan hormon Hyperalbuminemia memiliki sedikit arti diagnostik kecuali dalam dehidrasi. Hipoalbuminemia adalah sangat umum. dalam banyak penyakit seperti gangguan sintesis (penyakit hati), katabolisme meningkat, penyerapan asam amino berkurang, kehilangan protein dalam urin, kekurangan gizi dan protein enteropati kalah, dan pada pasien rumah sakit dengan penyakit akut.

KeterbatasanSera Haemolysed dan lipaemic mengganggu kuat dengan pengukuran albumin. Mengatur kosong yang sesuai untuk sampel tersebut dengan menambahkan 0,1 ml serum menjadi 4,5 ml pengencer natrium klorida (Lihat Protein Total). Absorbansi diperoleh kemudian dikurangi dari absorbansi uji sebelum menghitung hasil tes.

Referensi 1. Spencer K dan Harga CP (1977). Ann Clin.. Biochem 14, 105-115.

Tes Fungsi Hati (LFT)Para hati melakukan berbagai fungsi sintetis, ekskresi dan detoksifikasi, namun hanya sebagian kecil ini dapat diukur dengan tingkat produk dalam darah. Tes fungsi hati (LFT) mengukur konsentrasi protein yang berbeda dan berbagai enzim dalam darah yang baik dihasilkan oleh sel hati atau dilepaskan ketika sel-sel hati yang rusak. Tes fungsi hati adalah investigasi yang sangat umum dilakukan pada orang dengan penyakit hati yang dicurigai. Pola tertentu hasil dapat memberitahu dokter Anda mungkin jenis penyakit hati sehingga mereka dapat memutuskan apakah pemeriksaan lebih lanjut yang diperlukan. Tes fungsi hati juga dapat membantu mengetahui seberapa parah hati rusak dan membantu memantau respons Anda terhadap obatobatan dan perawatan lainnya.

ProsedurThe "tes fungsi hati" istilah ini sebenarnya keliru karena beberapa tes tidak mengukur fungsi hati total pada semua. Tingkat enzim yang dikenal sebagai aminotransferase dan alkaline phosphatase yang digunakan untuk mendeteksi kerusakan sel hati dan obstruksi oleh empedu (zat yang diproduksi oleh sel hati membantu mencerna lemak-lemak) masing-masing. Jadi, tes-tes hati dapat dibagi menjadi langkah-langkah fungsi hati, cedera sel dan obstruksi bilier. Tidak ada tes tunggal mampu menyediakan suatu ukuran keseluruhan fungsi hati. Sebaliknya kelompok nilai yang terukur ditafsirkan secara kolektif untuk menentukan kemungkinan penyakit hati, kemungkinan penyebab dan tingkat keparahan penyakit. Laboratorium tes fungsi hati juga dapat digunakan untuk memantau perkembangan penyakit dan respon terhadap perawatan. LFT dilakukan setelah tes darah sederhana. Persyaratan untuk persiapan berbeda antara laboratorium. Beberapa memerlukan pasien untuk berpuasa semalam tetapi sering tidak ada persiapan khusus yang diperlukan. Koleksi sampel untuk LFT mengikuti prosedur, sederhana aman dan cepat.

Setelah memeriksa nama dan identifikasi, dokter atau phlebotomist terlatih (orang yang mengambil sampel darah) akan menempatkan tourniquet (tali ketat) di lengan Anda untuk membantu mereka mengidentifikasi suatu vena yang cocok, biasanya di depan siku Anda. Anda mungkin harus memompa tangan Anda beberapa kali untuk meningkatkan aliran darah ke daerah ini. Setelah disinfeksi situs dengan alkohol menyapu, mereka akan memasukkan jarum ke pembuluh darah untuk menarik darah. Kadang-kadang aparat kupu-kupu khusus digunakan, terutama jika sampel darah beberapa harus dikumpulkan sekaligus. Setelah darah telah ditarik ke dalam jumlah yang diperlukan tabung, jarum dan tourniquet akan dihapus. Tekanan ini kemudian diterapkan ke daerah untuk menghentikan pendarahan. Biasanya seluruh prosedur ini selesai dalam satu waktu singkat dengan rasa sakit yang minimal atau tidak nyaman bagi pasien. Tabung darah dikirim ke laboratorium yang sesuai di mana nilai berikut diukur. Perhatikan bahwa laboratorium yang berbeda mungkin memiliki berbagai cut-off nilai-nilai untuk setiap tes karena dapat menggunakan metode yang berbeda.

Total protein: protein total harus antara 63-80g / L dan mencerminkan fungsi sintetis hati. Albumin: Protein ini hanya diproduksi oleh sel hati, sehingga konsentrasinya mencerminkan fungsi hati sintetis. Tinggal albumin dalam darah untuk jangka waktu yang panjang sehingga perubahan di tingkat hanya terjadi pada penyakit hati kronis (lama). Nilai normal untuk albumin adalah antara 35-50 g / L. Kondisi lain dapat menghasilkan rendahnya tingkat albumin. Malnutrisi dapat menurunkan albumin tidak cukup protein diserap ke dalam tubuh. Kerusakan ginjal dapat menyebabkan hilangnya albumin ke dalam urin. Rendahnya tingkat albumin menyebabkan edema perifer yang bengkak (biasanya mata kaki) karena tingkat rendah garam dan protein dalam darah. Bilirubin: Bilirubin diproduksi dalam pemecahan sel darah merah dalam tubuh. Hati adalah biasanya bertanggung jawab untuk detoksifikasi dan ekskresi bilirubin ke dalam empedu. Peningkatan tingkat bilirubin total menghasilkan gejala yang dikenal sebagai penyakit kuning. kuning pasien memiliki perubahan warna kuning pada kulit dan sclera (putih) dari mata mereka. Bilirubin tidak hanya meningkat pada penyakit hati tapi kondisi lain yang menyebabkan peningkatan kerusakan sel darah merah. Nilai normal untuk bilirubin plasma total dikutip kurang dari 20 umol / L. Alkaline fosfatase (ALP): Enzim ini terutama terlibat dalam diagnosis obstruksi bilier dan biasanya ditemukan di saluran empedu kecil di hati. Ada berbagai jenis enzim ini ditemukan dalam tubuh dalam tulang, hati dan plasenta sehingga peningkatan kadar mungkin karena masalah di luar hati seperti keganasan (kanker). Sebuah ALP normal adalah antara 35-50 g / L. Gamma glutamyl transpeptidase (GGT): enzim GGT ditemukan dalam sel-sel hati dan sel-sel tertentu saluran empedu. Hal ini juga meningkat pada penyakit yang menurunkan atau menghambat aliran empedu. Penyalahgunaan alkohol, warfarin (pengencer darah) dan obat yang digunakan untuk epilepsi dapat meningkatkan tingkat GGT. GGT telah digunakan untuk mendeteksi penyalahgunaan alkohol kronis tetapi meningkat pada berbagai kondisi sehingga tidak selalu benar. GGT harus kurang dari 60U / L pada individu normal. Alanine amino transferase (ALT) & SGOT (AST): Kedua enzim aminotransferase adalah penanda yang baik dari kerusakan sel hati yang terjadi pada gangguan seperti virus . hepatitis AST ditemukan dalam hati, otot jantung, otot rangka, ginjal, otak ,

pankreas, paru-paru, leukosit (sel darah putih) dan eritrosit (sel darah merah) sementara ALT ditemukan terutama di hati. Kedua enzim biasanya hadir pada tingkat yang rendah dalam darah sehingga jika sel-sel hati yang rusak kita akan mengharapkan beberapa enzim bocor ke dalam darah dan meningkatkan. Hampir semua cedera pada sel hati dapat meningkatkan kadar aminotransferase. Namun, tingkat enzim tidak selalu mencerminkan seberapa parah hati rusak. Referensi nilai untuk ALT kurang dari 36U / L sedangkan untuk AST kurang dari 42U / L. Amonia: Amonia adalah produk sampingan dari metabolisme protein dan diproduksi oleh bakteri dalam usus besar. Hati bertanggung jawab untuk detoksifikasi amonia dengan mengubahnya menjadi urea (produk ditemukan dalam air seni). Kadang-kadang kadar amonia akan diukur dalam darah untuk mendapatkan informasi lebih lanjut tentang fungsi hati dan adanya ensefalopati (kondisi dimana racun amonia merusak fungsi otak mengalami kebingungan dan tremor). Namun, amonia darah berkorelasi buruk dengan situasi di atas sehingga pengukuran memiliki keterbatasan mereka. Referensi nilai untuk amonia sangat bervariasi antara laboratorium.

Hasil biasanya datang kembali dari laboratorium segera (sering hari yang sama di rumah sakit). Setelah tes kembali dari laboratorium, kelainan dan artinya akan dibahas dengan pasien.

Manfaat dan RisikoManfaat dari tes fungsi hati telah disinggung. Dalam ringkasan ini meliputi: 1. 2. 3. 4. Deteksi penyakit hati Menentukan jenis kemungkinan penyebab penyakit dan mungkin Menentukan tingkat keparahan atau stadium penyakit Pemantauan respon terhadap pengobatan

Resiko dari prosedur yang sebenarnya yang minimal. Beberapa pasien mungkin mengalami perdarahan atau hematoma (memar besar) di lokasi venepuncture (di mana darah diambil). Ini sebenarnya lebih umum pada pasien dengan penyakit hati yang berat sebagai hati adalah tidak dapat menghasilkan faktor pembekuan yang cukup untuk menghentikan pendarahan. Pingsan, pusing dan kepala ringan juga dapat terjadi.

KeterbatasanTes fungsi hati memiliki berbagai keterbatasan dan hanya sebagian kecil dari evaluasi pasien secara keseluruhan. Dokter akan menginterpretasikan hasil setelah mempertimbangkan pasien secara keseluruhan, termasuk riwayat medis dan tanda-tanda dan gejala pada presentasi. Seperti investigasi lainnya, LFT tidak selalu menghasilkan hasil yang dapat diandalkan. Mereka mungkin normal pada pasien dengan penyakit hati yang parah dan abnormal pada pasien tanpa penyakit hati atau penyakit lain yang dapat mengganggu hasil. Tes-tes hati biasanya tidak memberitahu dokter dengan tepat jenis penyakit tetapi memberi mereka petunjuk dari jenis yang mungkin menyebabkan penyakit sehingga mereka dapat melakukan tes yang lebih pasti dan penyelidikan. Sebagai contoh, hasil menunjukkan kerusakan pada sel hati dapat memicu dokter untuk melakukan tes mencari virus dalam darah yang menyebabkan hepatitis. Selain itu,

beberapa obat dan kondisi medis lainnya dapat mengganggu hasil sehingga mereka mungkin tidak memberikan informasi yang dibutuhkan. Pasien mungkin perlu memiliki tes berulang atau telah dilakukan penyelidikan yang berbeda.

Hasil TesDibahas di bawah ini adalah beberapa pola umum dari tes fungsi hati dan interpretasi mereka yang mungkin dibicarakan dengan pasien. Perlu dicatat bahwa tes fungsi hati dapat memiliki nilai yang berbeda bahkan dalam kondisi yang sama. Mereka sering menambahkan hanya sejumlah kecil informasi untuk diagnosis akhir. Peningkatan besar AST atau ALT terjadi dalam kondisi yang ditandai dengan kerusakan pada sel-sel hati termasuk hepatitis virus atau obatinduced cedera. Pada penyakit hati alkoholik, AST seringkali jauh lebih tinggi dari ALT. Untuk Sebaliknya, pada hepatitis virus atau non-alkohol ALT penyakit hati berlemak sering jauh lebih tinggi dari AST. Peningkatan kadar kedua ALP dan GGT sangat sugestif penyakit obstruktif. Namun, nilai-nilai ini seringkali tidak dapat memberi tahu lokasi obstruksi. ALP juga bisa berasal dari tulang bentuk, plasenta atau kanker prostat. Peningkatan kadar GGT saja, mungkin menyarankan alkohol atau penggunaan obat lain. Bilirubin tinggi tanpa LFT abnormal lainnya terjadi dalam kondisi yang memecah sel darah merah dan dalam sindrom Gilbert. Rendahnya tingkat albumin terjadi dalam kondisi kronis seperti sirosis. Kadang-kadang hasil mungkin gambaran beragam kerusakan hati dan obstruksi empedu yang dapat terjadi pada berbagai penyakit hati. Tes fungsi hati adalah hanya sebagian kecil dari hasil pemeriksaan diagnostik. Setelah interpretasi hasil tes khusus beberapa penanda lain dan pencitraan hati dapat dilakukan untuk mendapatkan informasi lebih lanjut tentang etiologi penyakit hati. Jika penyebab gejala dapat ditentukan, perawatan dapat dimulai. Ini mungkin termasuk obat antivirus untuk mengobati virus, saran dan obat untuk membantu mengurangi konsumsi alkohol, obat-obatan untuk melindungi hati dan obat lain untuk mengobati beberapa gejala dari penyakit hati.