5. Dr. Triratnaningsih - Interpretasi Elektroforesisfinal
-
Upload
safira-aulia-rahma -
Category
Documents
-
view
163 -
download
21
Transcript of 5. Dr. Triratnaningsih - Interpretasi Elektroforesisfinal
INTERPRETASI ELEKTROFORESIS HEMOGLOBIN
TRI RATNANINGSIHBAG. PATOLOGI KLINIK FK UGM
SUB HEMATOLOGI INST. LABORATORIUM KLINIK RS DR SARJITO
WORKSHOP JOGLOSEMAR SOLO18 APRIL 2013
KLASIFIKASI HB PATI2
PRODUKSI HEMOGLOBIN1
PEMERIKSAAN ELEKTROFORESIS PADA HB PATI3
STRATEGI DIAGNOSIS HB PATI 4
TEKNIK ANALISIS GLOBIN LAINNYA5
KLASIFIKASI HB PATI2
PRODUKSI HEMOGLOBIN1
PEMERIKSAAN ELEKTROFORESIS PADA HB PATI3
STRATEGI DIAGNOSIS HB PATI 4
TEKNIK ANALISIS GLOBIN LAINNYA5
Hb pati
SindromThalassemia
Thalassemiaalfa
Silent carrier,trait,
HbH disease, hydrops
Thalassemiabeta
Minor, Mayor, HPFH
Hb varian
Hb S
AS, SS, SC
Hb C
AC, CC
Hb E
AE, EE, Trait β/ βE, β E/βE
homozigot
Hb D
AD, DD
KLASIFIKASI HB PATI2
PRODUKSI HEMOGLOBIN1
PEMERIKSAAN ELEKTROFORESIS PADA HB PATI3
STRATEGI DIAGNOSIS HB PATI 4
TEKNIK ANALISIS GLOBIN LAINNYA5
alkaline acid
Pada pH alkali: Hb bermigrasi pada cellulose acetate membrane dari cathode anode denganurutan sbb:
HbA2, Hb C, Hb E, Hb S, Hb D, Hb Lepore, Hb F, Hb A dan fast moving Hb Bart's dan Hb H
HbA2, Hb C, Hb E, dan O migrasi bersama membentuk single band. Hb S, D dan G juga komigrasi.
Pada pH asam:
Hb C terpisah dari E dan O. Hb S terpisah dari D dan G.
Hb D dan G tetap tidak dapat terpisah.
Hemoglobin (%)
A H (β4) B(4)
pada saat lahir
Constant
spring
Normal 97 0 0 0
α+-Thalassemia silent
-α/αα 98-100 0 (0-2) 0
α0-Thalassemia trait
-α/-α (α+homozigot) 85-95 inklusi (5-15) 0
atau--/αα(α0heterozigot)
ααCS/ααCS
85-95 0 (5-15) 5
Hemoglobin H disease
--/-α (α0/α+) 70-95 5-30 Trace Trace
--/ααCS (α0/αCS) 60-90 5-30 Trace 5-10
Hydrops fetalis
--/-- (α0/α0) 0 5-10 90-95 0
ClinicalSyndrome
Genotype Hb(g/dl)
A F A2
Minor (Trait)
/ +
or / ° 10-13 90-95 1-5 4-7a
Intermedia +/+ 7-10 30-50 50-70 0-5
Major +/° < 7 2-10 >85 1-6
or °/° 0 95-100 0-5
Hb Minor Intermedia Major
Hb A Dec Dec Dec
Hb A2 N to Inc N to Inc Usually Inc
Hb F N to Inc Increased Increased
ClinicalSyndrome
Genotype Hb(g/dl)
A F A2
Minor (Trait)
/ +
or / ° 10-13 90-95 1-5 4-7a
Intermedia +/+ 7-10 30-50 50-70 0-5
Major +/° < 7 2-10 >85 1-6
or °/° 0 95-100 0-5
Hb Minor Intermedia Major
Hb A Dec Dec Dec
Hb A2 N to Inc N to Inc Usually Inc
Hb F N to Inc Increased Increased
Hb Minor Intermedia Major
Hb A Dec Dec Dec
Hb A2 N to Inc N to Inc Usually Inc
Hb F N to Inc Increased Increased
ClinicalSyndrome
Genotype Hb (g/dl) A F A2
Minor (Trait) / +
or / ° 10-13 90-95 1-5 4-7a
Intermedia +/+ 7-10 30-50 50-70 0-5
Major +/° < 7 2-10 >85 1-6
or °/° 0 95-100 0-5
Hemoglobinopati
Hemoglobin
A%
F%
S%
C%
D%
E%
Kelainan klinis
Hb CC 1-7 >90 ringan
Hb AC 50-60 <2 40-50 -
Hb SC 1-7 50 50 Sedang-berat
Hb SS 1-10 80-90 berat
Hb AS 55-70 <2 30-45 ringan
Hb DD <2 95 -
Hb AD 50-65 <2 35-50 -
Hb EE 1-5 95 ringan
Hb AE 60-80 20-40 -
Hbpati
HemoglobinA%
F%
S%
C%
D%
E%
Kelainan klinis
Hb CC 1-7 >90 ringanHb AC 50-60 <2 40-50 -Hb SC 1-7 50 50 Sedang-berat
Hb SS 1-10 80-90 beratHb AS 55-70 <2 30-45 ringanHb DD <2 95 -Hb AD 50-65 <2 35-50 -Hb EE 1-5 95 ringanHb AE 60-80 20-40 -
Hemoglobin
A F A2 E/S/C
Normal 97 <1 2-3 0
Hemoglobin E E
Trait β/ βE 60-65 1-2 2-3 30-35
β E/βE homozigot 0 0 5 95
E/ β Thal βE/β0 0 45 1-5 40-50
E/ α Thal 70 0 2-3 30
Hemoglobin S S
Trait β/ βS 60-70 1-2 2-3 30-40
β S/βS homozigot 0 5-10 - 90-95
S/ β Thal βS/β0 0 5-10 4-7 80-90
βS/β+ 20-30 5-10 4-7 50-70
Hemoglobin C C
Trait β/ βC 55-65 3-5 30-40
β C/βC homozigot 0 5-10 - 90-95
C/ β Thal βC/β0 0 5-10 - 90-95
βC/β+ 20-30 5-10 - 60-75
Pola hemoglobin pada hemoglobinopati kombinasi
Hemoglobin
A F A2 E/S/C
Normal 97 <1 2-3 0
Hemoglobin E E
Trait β/ βE 60-65 1-2 2-3 30-35
β E/βE homozigot 0 0 5 95
E/ β Thal βE/β0 0 45 1-5 40-50
E/ α Thal 70 0 2-3 30
E/ β Thal βE/β0E/ β Thal βE/β+
KLASIFIKASI HB PATI2
PRODUKSI HEMOGLOBIN1
PEMERIKSAAN ELEKTROFORESIS PADA HB PATI3
STRATEGI DIAGNOSIS HB PATI 4
TEKNIK ANALISIS GLOBIN LAINNYA5
ANALISIS GLOBIN
Data hematologi
Manifestasi klinis
Informasiras/etnik
Elektroforesis
HPLC
Capillary electrophoresis
IdentifikasiHb pati dg
Probabilitasterbesar
Mendukung kecurigaanjenis varian yg prevalen
Analisis Globin
Analisis Gena
Darah vena PemeriksaanCBC
MCV <80 fl dan MCH <27 pg MCV >80 fl dan atau MCH >27 pg
SELESAIReview morfologi eritrosit
Eritrosit normositik normokrom, tidak tampak kelainan morfologi eritrosit
Eritrosit mikrositik hipokrom dan/ atau ditemukan kelainan
morfologi eritrosit
Analisis hemoglobin
HbA2 > 8 %
Thalassemia beta trait
HbA2< 3,5% HbF < 1,0%
5%> HbF > 1,0%Thalassemiaheterozigot
ganda
8%> HbA2 >3,5%
Analisis lebihlanjut untuk Hb
varian
HbF >5%
Analisis lebih lanjut untuk HPFH, thalassemia beta intermedia atau
atau Hb varian lain
(PDS Patklin)
Lakukan pemeriksaan analisis hemoglobin dengan metodeHPLC atau capillary electrophoresis sesuai dengan petunjukpemeriksaan dengan masing-masing alat.
Pada setiap run, lakukan pemeriksaan bahan kontrol untukmenilai validitas pemeriksaan.
Untuk metode HPLC, syarat-syarat untuk kalibrasi harusterpenuhi, dan hasil pemeriksaan bahan kontrol masuk dalamrentang nilai kontrol.
Selain itu, total area di bawah kurva harus berkisar antara1.000.000-4.000.000.
Lakukan interpretasi hasil dengan menilai kadar HbA2, HbFdan melihat adanya Hb varian yang mungkin terdeteksi.
Flowchart diagnosis hemoglobinopati berdasarkan indeks eritrositSumber: www.mlo-online.com, 2009
KLASIFIKASI HB PATI2
PRODUKSI HEMOGLOBIN1
PEMERIKSAAN ELEKTROFORESIS PADA HB PATI DAN THALASSEMIA
3
STRATEGI DIAGNOSIS HB PATI 4
TEKNIK ANALISIS GLOBIN LAINNYA5
Retention time dari berbagai varian Hb Retention time A2 dan E sama Ditemukan beberapa kesamaan antara
retention time dan pola pada alkaline electrophoresis
HPLC and Capillary Hb electrophoresis patterns of an adult with HbH disease. The HbH (β4 tetramers) peak elutes from the column as a compressed fraction, and as a fast moving fraction in electrophoresis.
β o thalassemia major (b)β 1 thalassemia homozygous E (c)
terimakasih
HbA2 range Interpretation> 7.0 % Rare, repeat to verify test.
Exclude a structural variant.
Can be due to rare β thal mutations.
3.8 – 7.0 % Beta thal trait or unstable Haemoglobin.
3.4 – 3.7 % Fe deficiency in β thal trait; Δ chain variant with β thal trait.
Interaction of α and β thal traits; rare β thal mutations.
HbS making measurement inaccurate; interaction of α - Hb S.
2.0 – 3.3 % Normal.
Δ and β thal (but HbF should be elevated); alpha thal trait.
Rare cases of β thal trait coexisting with either Δ or α thal trait.
< 2.0 % Δ β thal (but HbF should be elevated).
Alpha thal trait; Hb H disease; Δ variant or delta Thalassemia.
Iron deficiency.
HbA2 range Interpretation
> 7.0 % Rare, repeat to verify test.
Exclude a structural variant.
Can be due to rare β thal mutations.
3.8 – 7.0 % Beta thal trait or unstable Haemoglobin.
3.4 – 3.7 % Fe deficiency in β thal trait; δ chain variant with β thal trait.
Interaction of α and β thal traits; rare β thal mutations.
HbS making measurement inaccurate; interaction of α - Hb S.
2.0 – 3.3 % Normal.
δ and β thal (but HbF should be elevated); alpha thal trait.
Rare cases of β thal trait coexisting with either δ or α thal trait.
< 2.0 % δ β thal (but HbF should be elevated).
Alpha thal trait; Hb H disease; δvariant or delta Thalassemia.
Iron deficiency.