Post on 20-Jan-2016
description
perbandingan non - parametrik Kruskal- Wallis digunakan untuk mengukur hubungan antara
bakteri dan tingkat keparahan telinga untuk populasi gabungan . Karena hanya tiga anak
dalam kelompok Aborigin memiliki diagnosis OM, dan dua anak-anak di non – Aborigin
Kelompok memiliki OM diagnosis supuratif , analisis terpisah dalam kelompok tidak dapat
dilakukan . S. pneumoniae , diukur dengan jumlah koloni pengenceran serial atau RTQPCR ,
adalah positif berhubungan dengan telinga ( P = 0,0001 - 0,0016 ; Gambar 4 ) seperti H.
influenzae dan M. Catarrhalis ( data tidak ditampilkan ) . Jumlah beban bakteri hidung diukur
dengan RTQ - PCR juga positif terkait dengan keadaan telinga ( P = 0,0001 ) , seperti rasio
patogen pernafasan terhadap total beban bakteri ( P = 0,0032 ). Dalam rangka untuk menilai
kegunaan dari beban bakteri sebagai prediktor hasilnya , probabilitas dari OM diagnosis
supuratif di berbagai jumlah bakteri ditentukan . Hasil analisis menunjukkan bahwa
probabilitas supuratif OM meningkat dengan kepadatan S. pneumoniae , H. influenzae , atau
M. catarrhalis , beban patogen gabungan , dan beban total bakteri sebagaimana ditentukan
oleh RTQ - PCR ( Gambar 5 ) .
Dibandingkan dengan M. catarrhalis , baik S. pneumoniae dan H. influenzae dikaitkan
dengan probabilitas yang lebih tinggi OM supuratif pada jumlah yang lebih rendah . Kedua
gabungan beban patogen dan beban total bakteri hanya terkait dengan probabilitas yang lebih
besar dari supuratif OM di jumlah tinggi ( Gambar 5 ) . Untuk penyeka - negatif dan RTQ -
PCR – positif untuk S. pneumoniae ( 18 dari 103 penyeka ) dan H. Influenzae ( 24 dari 103
penyeka ) , ada hubungan statistik yang signifikan tanpa OM atau OME ( P = 0,0001 ) . untuk
sejenis sampel M. catarrhalis ( 6 dari 103 penyeka ) tidak ada hubungan dengan telinga .
Sebuah perbandingan lebih lanjut dibuat dengan rutinitas semi-kuantitatif penilaian beban
bakteri didirikan di laboratorium kami . Meskipun presisi rendah metode sederhana,
hubungan yang signifikan ditunjukkan untuk semua bakteri diuji dan keberadaan dan tingkat
keparahan penyakit telinga ( Chi2 tepat, S. pneumoniae , P = 0,003 , H. influenzae , P = 0,012
, M. catarrhalis , P = 0,013 ) .
Pemilihan beban ambang batas untuk memprediksi OM
Menggunakan sensitivitas dan spesifisitas tindakan, ambang batas bakteri nilai beban yang
bisa mengidentifikasi anak-anak yang paling mungkin memiliki OM supuratif dari mereka
yang kurang mungkin yang terkena dampak diperkirakan. Misalnya, sensitivitas dari RTQ-
PCR perkiraan 105 sel (ml sampel) -1 untuk memprediksi supuratif OM adalah 79% sampai
96% bagi individu spesies patogen, dan 82% untuk pernapasan gabungan patogen (Gambar
6a). Spesifisitas berkisar dari 49% menjadi 61% bagi individu, dan 52% untuk gabungan
patogen (Gambar 6b). Analisis ini menunjukkan bahwa tingginya jumlah patogen pernafasan
hidung terjadi pada anak-anak tanpa OM, tapi hitungan rendah itu tidak mungkin pada anak
dengan supuratif OM. Analisis koloni seri pengenceran menghitung data dan RTQ-PCR data
untuk memprediksi supuratif OM atau OM menunjukkan hasil yang sama.
diskusi
Korelasi positif antara beban bakteri hidung dan telinga
Dalam penelitian ini, korelasi positif antara jumlah bakteri hidung dan keadaan telinga (ada
OM, OME, atau supuratif OM) yang diamati. Hubungan ini diadakan untuk satuan dan
gabungan patogen pernafasan bakteri (S. pneumoniae, H. influenzae, M. catarrhalis atau),
beban total bakteri, dan proporsi patogen pernafasan terhadap total bakteri.
Muatan bakteri Nasal sebagai penanda diagnostik
muatan bakteri patogen pernafasan hidung adalah sangat sensitif dari supuratif OM, tetapi
memiliki kekhususan yang rendah, dan karenanya bukan merupakan alat diagnostik yang
dapat diandalkan. Namun demikian, sensitivitas tinggi mendukung pandangan bahwa rendah
muatan bakteri membuat kehadiran supuratif OM menjadi mungkin.
Perbandingan muatan bakteri hidung di Aborigin dan non - anak Aborigin
Perbandingan anak-anak Aborigin dan non – Aborigin dengan OME menunjukkan secara
signifikan lebih tinggi dari S. pneumoniae dan M. catarrhalis dalam kelompok Aborigin .
Selain itu , proporsi swab positif untuk ketiga patogen secara signifikan lebih tinggi untuk
anak-anak Aborigin dibandingkan dengan anak non - Aborigin . Kami percaya bahwa high-
density bakteri pernapasan pada beberapa anak-anak Aborigin adalah hasil dari tingginya
tingkat crossinfection didorong oleh prasarana kesehatan penduduk dan miskin, waktu yang
lama , dan penekanan kekebalan akibat nutrisi yang tidak memadai dan usia dini pertama
Infeksi [ 1,8,9 ] . Selain itu, kami berhipotesis bahwa highdensity pengangkutan S.
pneumoniae , H. influenzae , dan M. catarrhalis memprediksi persistensi OME , dan
pengembangan menjadi supuratif OM .
Pendeteksi unggulan patogen pernafasan bakteri dengan RTQ - PCR
RTQ - PCR terbukti menjadi metode yang lebih sensitif untuk mengukur S. pneumoniae , H.
influenzae , M. catarrhalis dan di penyeka hidung . Untuk S. pneumoniae , ini mungkin
karena diplococci atau rantai diplococci dihitung sebagai koloni tunggal di plate ,
dibandingkan dengan pencacahan lebih tepat dengan PCR [ 19 ] . Kematian bakteri dalam
penyimpanan mungkin faktor penyebabnya . Namun, kami telah mendeteksi hanya perubahan
kecil dalam jumlah yang layak lebih dari 6 tahun penyimpanan . Penjelasan lain mungkin
deteksi dirilis DNA dalam hidung . Namun, bukti menunjukkan bahwa DNA adalah
dibersihkan efisien dari permukaan mukosa melalui kombinasi lisis bakteri dan mekanisme
pembersihan imun , karena DNA bakteri tidak dapat bertahan hidup dalam Bentuk
amplifiable selama lebih dari tiga hari di hadapan dari efusi telinga tengah [ 20 ] .
Penggunaan antibiotik dalam waktu 4 minggu koleksi usap didokumentasikan hanya 3 anak
dan tidak menjelaskan fenomena ini . Jadi Penjelasan yang paling mungkin untuk budaya -
negatif , RTQPCR - hal positif berkaitan dengan metabolisme ditekan negara yang
memungkinkan banyak spesies bakteri yang berbeda untuk bertahan hidup di negara non -
ditanami [ 21,22 ] . beberapa hipotesis ada untuk menjelaskan fenomena ini [ 23 ] .
Relevansi klinis bakteri non - kultur
Bentuk non - kultur dari S. pneumoniae dan H. Influenzae dalam efusi telinga tengah
mendapatkan respon imun dan mungkin memiliki peran penting dalam patogenesis OME [ 24
] . Dalam penelitian kami , kehadiran bakteri ini dalam penyeka hidung dikaitkan dengan ada
atau OM OM non - akut ( OME ) . Orang lain telah menunjukkan bahwa sementara kultur -
negatif, PCR - positif pneumokokus akut OM terjadi, ini pneumokokus klinis kurang parah
daripada kultur positif akut OM [ 19 ] . Yang menarik adalah apakah bakteri non – kultur
dapat timbul kembali atau memiliki peran langsung dalam ketekunan patogen efusi , atau OM
akut berulang . dengan meningkatkan kecenderungan penggunaan diagnostik berbasis PCR ,
penting untuk memperjelas peran non – kultur organisme penyakit .
kesimpulan
Penelitian ini menunjukkan hubungan yang signifikan antara bakteri hidung dan keberadaan
dan tingkat keparahan arus penyakit telinga pada individu . Asosiasi ini bertahan apakah
beban bakteri diukur dengan semiquantitative kultur , jumlah koloni serial, atau RTQ - PCR .
Deteksi bakteri non - kultur oleh RTQPCR mungkin memiliki implikasi untuk patogenesis
OM termasuk kegigihan infeksi meskipun terapi agresif . Swab dengan banyak bakteri yang
lebih tinggi lebih mungkin untuk memiliki diperoleh dari anak-anak Aborigin dengan
supuratif OM . Namun, pengukuran beban bakteri tidak dapat diandalkan cukup pada anak-
anak membedakan dengan supuratif OM untuk digunakan diagnostik . Meskipun rendahnya
spesifisitas beban bakteri sebagai ukuran negara telinga , tinggi sensitivitas mendukung
pandangan bahwa muatan bakteri rendah membuat kehadiran supuratif OM mungkin .
pengamatan ini juga menunjukkan bahwa pengurangan muatan bakteri mungkin penting
sebelum pengurangan dramatis dalam supuratif OM dapat dicapai untuk anak-anak Aborigin
yang tinggal di masyarakat terpencil Australia .
Kontribusi Penulis
HS - V berpartisipasi dalam desain penelitian , dilakukan analisis mikrobiologi , dan
penyusunan naskah . RB dikembangkan dan dilaksanakan dengan analisis molekuler . MN
dikembangkan dan dilaksanakan dengan analisis molekuler , dan berpartisipasi dalam desain
penelitian. NAJ dan NH mengkoordinasikan pengembangan molekul teknik , dan
berpartisipasi dalam desain studi . SH melakukan analisis statistik . AJL dan PSM di
penelitian , adalah kepala peneliti dari studi asli dari mana penyeka berasal , dan
berpartisipasi dalam desain penelitian.