Post on 02-Mar-2018
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
1/12
1
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
LAPORAN RESMI
INOKULASI MIKROORGANISME DAN MIKROSKOP
I. Tujuan
I.1. Inokulasi Mikroorganisme
Percobaan ini bertujuan untuk mempelajari teknik-teknik inokulasi biakan mikroorganisme
pada medium steril.
I.. Mikrosko!
Tujuan dari percobaan ini adalah sebagai berikut :
1. Melatih menggunakan mikroskop dengan jalan melihat morphologi jamur,yeast, bakteri, dan
beberapa mikroorganisme.
2. Mengenal bentuk-bentuk mikroorganisme.
3. Melatih membuat preparat.
II. Pengama"an
II.1. Inokulasi Mikroorganisme
Ta#el II. 1 $asil Per%o#aan Inokulasi Mikroorganisme
Ta#ung reaksi
&' jam(
$asil !engama"an
Me)ia N*A &L. plantarum( Me)ia PDA &A. niger(
*lanko
Laboratorium Mikrobiologi
Jurusan Teknik Kimia TI!IT"
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
2/12
2
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
*iakan
Ke"erangan
-Warna :
- epekatan :
Warna putih susu
epekatan merata, tidak terlalu
pekat
Warna putih berbintik hitam
Pekat dibagian tengah
Ta#ung reaksi
&+, jam($asil !engama"an
Me)ia N*A &L. plantarum( Me)ia PDA &A. niger(
*lanko
Laboratorium Mikrobiologi
Jurusan Teknik Kimia TI!IT"
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
3/12
#
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
*iakan
Ke"erangan
-Warna :
- epekatan :
Warna putih susu
!ukup pekat, bateri tumbuh
merata
"itam
Pekat, bakteri tumbuh ban#ak
dan merata
Pe"ri Dis-
&' jam($asil !engama"an
Me)ia N*A &A. Niger( Me)ia PDA &L. Plantarum(
*lanko
Laboratorium Mikrobiologi
Jurusan Teknik Kimia TI!IT"
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
4/12
$
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
*iakan &"am!ak a"as(
Ke"erangan
- Warna :
- epekatan :
- $iameter :
Putih kekuningan
Pekat, belum merata
1.% cm
Putih susu
&arang
'.2% cm*iakan &"am!ak sam!ing(
Ke"erangan
-Warna :
- epekatan :
- $iameter :
Putih kekuningan
Pekat, belum merata
1.% cm
Putih susu
&arang
'.2% cm
Laboratorium Mikrobiologi
Jurusan Teknik Kimia TI!IT"
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
5/12
5
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
Pe"ri Dis-
&+, am(
$asil Pengama"an
Me)ia N*A &A. niger( Me)ia PDA &L. plantarum(
*lanko
*iakan &"am!ak a"as(
Ke"erangan
-Warna :
- epekatan :
- $iameter :
Putih kekuningan
Pekat
2 cm
Putih susu
&arang
'.( cm
Laboratorium Mikrobiologi
Jurusan Teknik Kimia TI!IT"
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
6/12
%
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
*iakan &"am!ak sam!ing(
Ke"erangan
-Warna :
- epekatan :
- $iameter :
Putih kekuningan
Pekat
2 cm
Putih susu
&arang
'.( cm
II.. Mikrosko!
Ta#el II. $asil !engama"an menggunakan mikrosko!
Per#esaran
&'//0(
$asil Pengama"an
Ke"erangan
La%"o#a%illus
!lan"arum
*erkoloni #er#en"uk
sekum!ulan #a"ang
As!ergillus niger*erkoloni #er#en"uk
#ula" &%o%%us(
III. Pem#a-asan
Laboratorium Mikrobiologi
Jurusan Teknik Kimia TI!IT"
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
7/12
&
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
III.1. Inokulasi Mikroorganisme
Tujuan dari percobaan ini adalah untuk mempelajari teknik inokulasi biakan mikroorganisme
pada medium steril.
Media #ang digunakan dalam percobaan ini adalah )*+ )utrien *roth +gar dan P$+
Potato $etrose +gar. )*+ )utrient *roth +gar merupakan suatu ekstrak cair jaringan daging
sapi #ang empuk, dikonsentrasikan menjadi pasta. andungan dalam )*+ ini adalah substansi
jaringan he/an #ang dapat larut dalam air, meliputi karbohidrat, sen#a/a nitrogen organik, 0itamin
#ang larut dalam air, dan garam-garaman #ang baik bagi untuk berkembangbiakn#a bakteri.
edangkan media P$+ Potato $etrose +gar digunakan untuk medium penumbuhan jamur
karena P$+ mengandung sumber karbohidrat dalam jumlah cukup #aitu terdiri dari 2' ekstrak
kentang dan 2 glukosa sehingga baik untuk pertumbuhan jamur. Pelcar, 134, 2''5ebelum dimasukkan ke tabung reaksi dan petridish, media dipanaskan terlebih dahulu di
atas hotplate dan diaduk dengan magnetic stirrer agar terjaga tetap cair dan homogen. Media cair
dipindahkan ke petridish dan tabung reaksi dengan sendok. Pemindahan harus dilakukan dengan
cepat agar media tidak mengeras. 6ntuk petridish, media harus rata agar mikroorganisme dapat
berkembang biak dengan baik. &uga perlu disiapkan tabung reaksi dan petridish #ang berisi media
)*+ dan P$+ saja sebagai pembanding blanko.
etelah diisi dengan medium, langkah selanjutn#a #ang dilakukan adalah mensterilisasi
peralatan baik tabung reaksi maupun petridish #ang akan digunakan, beserta medium dan penutup
di dalam autocla0e selama 1% menit pada suhu 121 . uhu tersebut dipilih karena dapat
membunuh spora dan bakteri #ang dapat bertahan /alaupun dididihkan sekalipun. ebelum
dimasukkan ke dalam autocla0e petridish dibungkus menggunakan kertas coklat dan tabung reaksi
disumbat dengan kapas. *agian kertas coklat #ang berplastik berada di bagian luar karena bertujuan
untuk mencegah agar uap air tidak masuk ke petridish #ang akan membuat petridish terkontaminasi.
Proses sterilisasi ditujukan untuk mematikan bakteri #ang terdapat pada peralatan dan medium.
terilisasi dengan autocla0e disebut sterilisasi uap. $/idjoseputro, 71, 2''%
etelah disterilisasi dengan autocla0e maka tabung reaksi berisi media dimiringkan agar
media media mengeras dalam posisi miring. "al ini dimaksudkan agar luas permukaan sentuh #ang
akan digunakan untuk inokulasi lebih luas. ebelum melakukan inokulasi maka semua media baik
pada tabung reaksi maupun petridish dibiarkan mengeras terlebih dahulu.
8nokulasi adalah proses penanaman bakteri pada medium steril dengan kandungan nutrisi
#ang sesuai. Mikroorganisme #ang diinokulasikan pada percobaan ini adalah Lactobacillus
plantarumdanAspergillus niger. Pelcar, 177, 2''5
Laboratorium Mikrobiologi
Jurusan Teknik Kimia TI!IT"
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
8/12
'
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
8nokulasi harus dilakukan di dalam incase suatu kotak kaca atau laminar 9lo/ #ang
bertujuan untuk mengurangi kontaminan mikroorganisme lain dari luar. Pertama-tama ka/at ose
dipegang pada tangan kanan, lalu ujungn#a dipijarkan hingga men#ala, sedang sisa tangkain#a
cukup dile/atkan saja pada pembakar spritus. Prosedur ini bertujuan untuk mensterilisasikan ka/at
ose, teknik ini disebut aseptic. ka/at ose #ang telah dipijarkan dibiarkan sebentar agar kembali
dingin dan kemudian cukup disentuhkan pada suatu koloni. Mulut tabung tempat biakan murni juga
dipanaskan pada pembakar spritus setelah sumbat kapasn#a diambil. etelah pengambilan inokulum
sampel bakteri selesai, mulut tabung kembali dipanaskan dan ditutup dengan sumbat kapas seperti
semula. 6jung ka/at ose #ang memba/a inokulum tersebut digoreskan lurus mulai dasar tabung
reaksi hingga ujung media dan digoreskan ig-ag pada petridish. $/idjoseputro, 77, 2''%
Tabung reaksi dan petridish #ang berisi inokulum lalu dimasukkan ke dalam inkubator.8nkubator adalah alat #ang digunakan untuk menginkubasi mikroba pada suhu terkontrol. Petridish
diletakkan di dalam inkubator dalam posisi terbalik dengan terlebih dahulu dibungkus kertas coklat.
"al ini bertujuan agar tidak ada uap air #ang menetes ke media agar di petridish sehingga dapat
membuat proses pembiakan terkontaminasi. Tujuan peletakan biakan mikroorganisme adalah agar
mikroorganisme berada pada 9ase ketika mikroorganisme tersebut berkembang biak dengan
optimal. 8nkubasi dilakukan selama 27 jam dan 75 jam pada suhu 3' .
etelah diinkubasikan selama 27 jam, dilakukan pengamatan pada tabung reaksi danpetridish. Pada tabung reaksi berisi medium )*+ dan bakteri Lactobacillus plantarum, mulai
terlihat koloni bakteri /alaupun masih sedikit. oloni ini be/arna putih susu dan belum terlalu
pekat. edangkan pada tabung reaksi berisi medium P$+ dan jamurAspergillus niger mulai terlihat
koloni #ang masih be/arna putih, tetapi telah tampak sedikit bintik-bintik hitam #ang menandakan
keberadaan jamur tersebut.Pada petridish berisi medium )*+ dan jamurAspergillus niger koloni
#ang terbentuk be/arna putih kekuningan. "al ini tidak sesuai dengan ciri-ciri dari jamur
Aspergillus niger#ang ketika membentuk koloni be/arna hitam. ondisi ini disebabkan media
pertumbuhan #ang tidak sesuai. &amur memerlukan glukosa dan karbohidrat untuk tumbuh dengan
baik sementara media )*+ mengandung sen#a/a-sen#a/a nitrogen organik, 0itamin, serta garam-
garam mineral #ang tidak cocok untuk pertumbuhan jamur. Pada petridish berisi medium P$+ dan
bakteri Lactobacillus plantarum koloni #ang terlihat be/arna putih susu, tetapi sangat jarang
sedikit dan berdiameter kecil. "al ini dikarenakan media pertumbuhan #ang tidak sesuai. 6ntuk
pertumbuhann#a bakteri memerlukan karbohidrat, sen#a/a organik, 0itamin, dan garam-garam
Laboratorium Mikrobiologi
Jurusan Teknik Kimia TI!IT"
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
9/12
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
mineral sedangkan P$+ han#a mengandung karbohidrat saja #ang men#ebabkan pertumbuhan
bakteri tidak optimal. Pelcar, 134, 2''5
etelah diinkubasikan selama ( jam, pengamatan dilakukan kembali. Pada tabung reaksi
berisi medium )*+ dan bakteri Lactobacillus plantarum terlihat koloni pekat be/arna putih susu.
edangkan pada tabung reaksi berisi medium P$+ dan jamur Aspergillus niger terlihat koloni
be/arna hitam pekat #ang hamper memnuhi seluruh permukaan medium. "al ini menunjukkan
bah/a bakteri dan jamur tersebut tumbuh baik pada medium #ang sesuai. Pada petridish berisi
medium )*+ dan jamurAspergillus nigerterbentuk koloni putih kekuningan dan luma#an pekat.
ondisi ini berbeda dengan hasil pada tabung reaksi dimana pada medium P$+ jamur Aspergillus
nigerbe/arna hitam dalam kolonin#a. "al ini disebabkan tidak sesuain#a medium #ang digunakan
untuk pemenuhan nutrisi pertumbuhan jamur tersebut. edangkan pada petridish berisi mediumP$+ dan bakteriLactobacillus plantarumterbentuk koloni putih susu #ang tetap sedikit dan sedikit
bintik-bintik hitam #ang menandakan adan#a Aspergillus niger. ondisi ini menunjukkan telah
terjadi kontaminasi pada mediumn#a. "al ini mungkin dikarenakan ka/at ose #ang kurang steril,
pada saat pemijaran tidak sampai membara.
III.. Pengunaan Mikrosko!
Tujuan dari percobaan mikroskop ini adalah untuk melatih menggunakan mikroskop dengan
jalan melihat morphologi jamur, bakteri, dan beberapa mikroorganisme, mengenal bentuk-bentuk
mikroorganisme, dan melatih membuat preparat.
$alam percobaan ini, langkah pertama #ang dilakukan adalah mempersiapkan mikroskop
dan membersihkan lensa-lensan#a menggunakan tisu agar debu #ang melekat pada lensa hilang dan
tidak menghalangi pengamatan. ;bject glass dan deck glass #ang akan digunakan terlebih dahulu
dibersihkan dengan menggunakan alkohol 4' untuk menghilangkan pengotor dan
mikroorganisme lain #ang masih menempel.
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
10/12
10
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
selain itu media #ang ikut terambil oleh ka/at ose men#ebabkan mikroorganisme sulit diamati.
ebelum biakan diletakkan diatas object glass, ke atas object glass diberi satu tetes a=uadest #ang
sudah disterilkan. emudian biakan diletakkan pada tetesan a=uadest di atas object glass dan
ditutup dengan deck glass. Penambahan a=uadest dilakukan agar pengamatan dari mikroskop lebih
jelas, sebagai perekat object glass dan deck glass agar mikroorganisme tidak tercecer dan mengenai
lensa.
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
11/12
11
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
Mold dapat berkembang biak secara aseksual melalui pembentukan spora dan pembelahan selA
serta secara seksual melalui isogamet dan heterogamet.
2. ebutkan penggunaan dan arti mold #ang disebut diatas@
Mold adalah jamur multiseluler #ang mempun#ai lebih dari satu inti dan membentuk benang-
benang 9ilamen.
3. +pa #ang disebut h#pha@
"#pha merupakan benang-benang pen#usun tubuh jamur #ang tersusun dari unit multinukleus
dan dinding-dinding #ang mempun#ai lubang agar sitoplasma dapat bergerak diantara sel.
7. *agaimana #east berkembang biak, dan apakah hal ini sesuai dengan preparat #ang
diamati@
Beast berkembang biak dengan cara membelah diri membentuk tunas atau budding cellA
dengan cara membelah diri membentuk 9issionA dan dengan cara membentuk spora.
%. +pakah #ang mempengaruhi akti9itas #east@
- uhu optimum 2% sampai 3' derajat celcius
- andungan nutrisi dalam substrat
- p", pada umumn#a #east ber9ungsi optimal di p" netral atau sedikit asam
(. ebutkan semua pembagian bakteri-bakteri beserta contohn#aC
a. *erdasarkan pe/arnaan gram
- ?ram positi9 A contohn#a D +erococcus
- ?ram negati9 A contohn#a D E. colib. *erdasarkan bentuk tubuh
- okus A contohn#a D . aureus
- *asil A contohn#a D +otobacter
- Fibric A contohn#a D
7/26/2019 Inokulasi Dan Mikroskop
12/12
12
Laporan Resmi Praktikum Mikrobiologi Industri (2015)
*akteri dapat berkembang biak secara aseksual melalui pembelahan binerA serta secara seksual
melalui trans9ormasi, transduksi dan konjugasi.
. Gaktor-9aktor apa saja #ang mempengaruhi pertumbuhan bakteri@
Pertumbuhan bakteri dipengaruhi oleh suhu, nutrisi, media tumbuh, p", ketersediaan oksigen
dan caha#a.
2. Kesim!ulan
2.1. Inokulasi Mikroorganisme
Mikroorganisme dapat dikembangbiakkan pada medium steril dengan menggunakan teknik
inokulasi.
2.. Penggunaan Mikrosko!1. $engan menggunakan mikroskop dapat diamati mor9ologi jamur, bakteri, #east, dan berbagai
macam mikroorganisme.
2. *erdasarkan pengamatan menggunakan mikroskop, diperoleh hasil bah/aLactobacillus
plantarumberbentuk batang basil danAspergillus nigerberbentuk bulat coccus..
3. Pembuatan preparat dilakukan dengan cara meletakkan biakan diatas object glass dan
menutupn#a dengan deck glass setelah diberi setetes a=uadest agar pengamatan dari
mikroskop lebih jelas dan untuk merekatkan object glass dan deck glass agar mikroorganisme
tidak tercecer dan mengenai lensa mikroskop
Da5"ar Pus"aka
$/idjoseputro, $. 2''%.Dasar-dasar Mikrobiologi. &akarta: $jambatan.
"ardiningsih, Hiani. $esember, 2''%. I8solasi dan 6ji Hesistensi *eberapa 8solat