Post on 06-Feb-2018
i
INDUKSI PERTUMBUHAN TUNAS DARI EKSPLAN
ANGGREK Dendrobium heterocarpum Lindl. DENGAN
PEMBERIAN HORMON ZEATIN DAN NAA
Skripsi
Sebagai tugas akhir untuk memenuhi syarat mencapai derajat Sarjana S-1
Program Studi Biologi FMIPA Universitas Udayana
Oleh
Ni Luh Putu Kayika Febryanti
1208305023
PROGRAM STUDI BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS UDAYANA
BALI
2016
ii
SKRIPSI
INDUKSI PERTUMBUHAN TUNAS DARI EKSPLAN ANGGREK
Dendrobium heterocarpum Lindl. DENGAN PEMBERIAN HORMON
ZEATIN DAN NAA
Oleh
Ni Luh Putu Kayika Febryanti
1208305023
Telah dipertahankan di depan Tim Penguji dan telah dinyatakan lulus pada
tanggal 4 Mei 2016
Menyetujui
Pembimbing I Pembimbing II
Ir. Ida Ayu Astarini, M.Sc., Ph.D Dr. Ir. Made Ria Defiani, M.Sc (Hons)
NIP. 19680327 199302 2 001 NIP. 19660820 199303 2 002
Mengesahkan
Ketua Program Studi Biologi
FMIPA Universitas Udayana
Dwi Ariani Yulihastuti, S.Si., M.Si
NIP. 19730711 199802 2 002
iii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena atas
berkat dan rahmat-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
“Induksi Pertumbuhan Tunas dari Eksplan Anggrek Dendrobium
heterocarpum Lindl. dengan Pemberian Hormon Zeatin dan NAA” sebagai
tugas akhir untuk memenuhi syarat mencapai derajat Sarjana S-1 di Program Studi
Biologi FMIPA Universitas Udayana.
Selama penyusunan skripsi ini, penulis banyak mengalami hambatan tetapi
berkat dorongan berbagai pihak penulis dapat menyelesaikannya. Untuk itu pada
kesempatan yang baik ini penulis menyampaikan ucapan terimakasih kepada:
1. Yth. Ibu Ir. Ida Ayu Astarini, M.Sc., Ph.D. selaku pembimbing I atas ide-ide,
serta bimbingan dan semangat selama persiapan proposal, penelitian hingga
penyelesaian skripsi ini.
2. Dr. Ir. Made Ria Defiani, M.Sc (Hons) selaku dosen pembimbing II atas
masukan, saran, dan bimbingan serta semangat selama penulisan skripsi ini.
3. Yth. Ibu Dr. Dra. Eniek Kriswiyanti, M.Si., Ibu Ni Luh Arpiwi S.Si, M.Sc.,
Ph.D., dan Ibu Dr. Ni Luh Suriani, S,Si., M,Si selaku penguji I, penguji II dan
penguji III yang telah memberikan masukan, kritik dan saran selama
penyusunan hingga penyelesaian skripsi ini.
4. Yth. Ibu Dr. Dra. Ni Putu Adriani Astiti, M.Si. selaku dosen pembimbing
akademik atas bimbingan dan nasehatnya.
5. Yth. Ibu Dwi Ariani Yulihastuti, S.Si., M.Si., dan Ibu Ni Made Suartini, S.Si.,
M.Si selaku ketua dan sekretaris Program Studi Biologi atas bantuannya
dalam kelancaran administrasi selama persiapan, penelitian hingga
penyelesaian skripsi ini.
6. Yth. Drs. Ida Bagus Suaskara M.Si. selaku Dekan FMIPA Universitas
Udayana atas bantuannya dalam kelancaran administrasi selama penyusunan
hingga penyelesaian skripsi ini.
iv
7. Ayah I Ketut Renaya, Ibu Desak Putu Wardani, Adik Made Dimas Adi Krisna
dan Komang Surya Adi Reinaya atas bantuan, dukungan dan semangat selama
penelitian hingga penyelesaian skripsi ini.
8. Vemy Claudia, S.Si., Yuli Setiawati, S.Si., Ni Putu Yuni Astriani, S.Si., M.Si,
Lucia Emy Octavia S.Si dan Kadek Desi Kartika S.Si atas bantuan, dukungan,
nasehat dan masukan selama penelitian hingga penyelesaian skripsi ini.
9. Teman-teman Angkatan 2012, Ni Ketut Mas Suratniasih, Ni Kadek Losiani, I
Gusti Putu Diah Purnama Sari, Ruth Ellisa Christiani, Wiwik Sinta Devi, Diah
Kharismawati Djereng, Eka Budi Mursafitri dan Ni Wayan Bella Handayani
atas dukungan dan masukan selama penelitian, penyusunan hingga
penyelesaian skripsi ini.
10. Seluruh dosen pengajar, staf pegawai dan rekan- rekan serta semua pihak yang
tidak dapat penulis tuliskan satu persatu, yang telah banyak memberikan
dukungan selama penulis menyelesaikan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini belum sempurna sehingga penulis
mengharapkan adanya kritik dan saran yang bersifat konstruktif bagi
penyempurnaan skripsi ini. Atas perhatiannya, penulis mengucapkan terimakasih.
Jimbaran, Mei 2016
Penulis
v
ABSTRAK
Anggrek Dendrobium heterocarpum Lindl. kini mulai sulit ditemukan
akibat adanya eksploitasi sehingga kelangkaan anggrek spesies ini merupakan
permasalahan yang harus segera diatasi. Salah satu solusi dalam perbanyakan
anggrek D. heterocarpum Lindl. adalah dengan teknik kultur in vitro. Tujuan
penelitian untuk mengetahui pengaruh kombinasi antara hormon Zeatin dan NAA
pada media dasar Murashige dan Skoog (MS) terhadap multiplikasi tunas
anggrek. Penelitian dilaksanakan pada November 2015 hingga Maret 2016 di
Laboratorium Kultur Jaringan Tumbuhan, Program Studi Biologi, FMIPA,
Universitas Udayana. Percobaan disusun dalam Rancangan Acak Lengkap (RAL)
dengan 20 kombinasi perlakuan dan 3 ulangan. Perlakuan terdiri atas penambahan
Zeatin dan NAA dengan 5 konsentrasi Zeatin (0, 0,1, 0,5, jagung manis dan
jagung hibrida sebagai Zeatin alami); 4 konsentrasi NAA (0, 0,05 , 0,1 dan 0,5).
Data berupa jumlah tunas, jumlah akar dan vigor eksplan. Data kuantitatif berupa
jumlah daun dan tinggi tunas pada umur 12 MST dianalisis dengan Analysis of
Variance (ANOVA) dan jika berbeda nyata diuji lanjut dengan Duncan Multiple
Range Test (DMRT) pada taraf 5%. Media Z5N3 berpengaruh nyata terhadap
pertumbuhan jumlah daun dan tinggi tunas serta media terbaik dalam
pertumbuhan jumlah akar. Kombinasi hormon yang mampu merangsang
multiplikasi tunas baru anggrek terbaik adalah pada media Z4N3 dan Z5N1.
Kata kunci: Multiplikasi tunas, kultur in vitro, D. heterocarpum Lindl., hormon
tumbuh
vi
ABSTRACT
Dendrobium heterocarpum Lindl. is a native orchid in Indonesia. Its
population continue to decline due to unsustainable exploitation. One solution to
increase its population is via in vitro technique propagation. This research aimed
to determine effect of hormone addition (Zeatin and NAA) to induce shoot
multiplication of D. heterocarpum Lindl. grown in Murashige and Skoog (MS)
basic medium. The research was conducted in Tissue Culture Laboratory,
Department of Biology, Faculty of Mathematics and Science, Udayana University
from November 2015 until March 2016. The experiment employed Completely
Randomized Design (CRD) with 20 combinations of treatments, with three
replicates each treatment. The treatment werer addition of Zeatin and NAA, with
five concentrations of Zeatin (0, 0.1, 0,5, sweet corn and hybrids corn as the
natural Zeatin); four NAA concentrations (0, 0,05, 0,1 and 0,5). Variable recorded
include such as the number of shoots, roots and explant’s vigor. The quantitative
data which include number of leaves and shoots after 12 weeks, were analyzed
using Analysis of Variance (ANOVA); and if significantly different, tested further
using Duncan Multiple Range Test (DMRT) at 5% level. Z5N3 medium revealed
significantly different on amount of leaves and shoot height and also the best
medium on amount of roots. Best hormone combination that can induce
multiplication of new shoots are medium Z4N3 and Z5N1.
Key words: Shoots multiplication, in vitro technique, D. heterocarpum Lindl.
Plant hormone
vii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i
LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................... ii
KATA PENGANTAR ................................................................................... iii
ABSTRAK ..................................................................................................... v
ABSTRACT ................................................................................................... vi
DAFTAR ISI .................................................................................................. vii
DAFTAR TABEL .......................................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... x
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xi
I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang ............................................................................... 1
1.2. Rumusan Masalah .......................................................................... 3
1.3. Tujuan Penelitian ........................................................................... 3
1.4. Manfaat Penelitian ......................................................................... 4
II. TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Tanaman Anggrek ......................................................................... 5
2.1.1. Anggrek D. heterocarpum Lindl. ............................................... 7
2.2. Kultur Jaringan .............................................................................. 8
2.3. Subkultur ....................................................................................... 10
2.4. Media Kultur Jaringan.................................................................. . 10
2.5. Hormon .......................................................................................... 11
III. METODE PENELITIAN
3.1. Metode Pengumpulan Data............................................................ 13
3.1.1. Waktu dan tempat penelitian. ..................................................... 13
3.1.2. Pembuatan larutan stok ............................................................... 13
3.1.3. Pembuatan media MS ................................................................. 14
3.1.4. Persiapan penelitian .................................................................... 14
3.1.4.1. Sterilisasi ruangan .................................................................... 14
viii
3.1.4.2. Sterilisasi alat ........................................................................... 14
3.1.5. Penanaman eksplan ..................................................................... 15
3.1.6. Pemeliharaan eksplan ................................................................. 15
3.1.7. Rancangan penelitian .................................................................. 15
3.1.8. Variabel pengamatan .................................................................. 16
3.1.9. Skoring vigor eksplan ................................................................. 17
3.1.10. Pengamatan perkembangan anatomi eksplan ........................... 17
3.2. Metode Pengolahan Data ............................................................... 18
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1. Pertumbuhan Eksplan Anggrek D. heterocarpum Lindl. pada
Media Murashige and Skoog (MS) dengan Penambahan Hormon
Zeatin dan NAA ............................................................................ 19
4.1.1. Jumlah akar ................................................................................. 19
4.1.2. Jumlah daun ................................................................................ 21
4.1.3. Tinggi tunas ................................................................................ 23
4.1.4. Pengamatan vigor eksplan .......................................................... 25
4.2. Kombinasi Hormon yang Optimum untuk Merangsang
Multiplikasi Tunas Baru Anggrek ................................................. 28
V. KESIMPULAN DAN SARAN
5.1. Kesimpulan .................................................................................... 31
5.2. Saran .............................................................................................. 31
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 32
LAMPIRAN ................................................................................................... 37
ix
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Kombinasi konsentrasi Zeatin dan NAA ......................................... 16
Tabel 2. Pengaruh kombinasi hormon Zeatin dan NAA terhadap jumlah
daun pada umur 12 MST.................................................................. 22
Tabel 3. Pengaruh 20 kombinasi hormon Zeatin dan NAA terhadap tinggi
tunas pada umur 12 MST ................................................................. 24
Tabel 4. Frekuensi pertumbuhan individu pada tiap skor eksplan umur
12 MST ............................................................................................ 26
x
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Morfologi bunga anggrek ............................................................. 7
Gambar 2. Tanaman Dendrobium heterocarpum Lindl. (A) dan bunga
Dendrobium heterocarpum Lindl. (B) ........................................ 8
Gambar 3. Eksplan tunas D. heterocarpum Lindl. diukur dengan
millimeter block ............................................................................. 15
Gambar 4. Pengukuran tunas ......................................................................... 16
Gambar 5. Skoring vigor eksplan................................................................... 17
Gambar 6. Akar Dendrobium heterocarpum Lindl. umur 12 MST pada
media Z5N3 .................................................................................... 19
Gambar 7. Daun D. heterocarpum Lindl. umur 12 MST pada media Z3N1
(a) dan media Z5N3 (b)................................................................... 21
Gambar 8. Tinggi tunas D. heterocarpum Lindl. umur 12 MST pada media
Z2N2 (a) dan media Z5N3 (b) ....................................................... 24
Gambar 9. Tunas D. heterocarpum Lind. umur 12 MST............................... 28
xi
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Jadwal penelitian skripsi ............................................................ 37
Lampiran 2. Komposisi media Murashige and Skoog (MS).......................... 38
Lampiran 3. Persentase kontaminasi perlakuan pada media Murashige and
Skoog (MS) ............................................................................... 39
Lampiran 4. Hasil analisa sidik ragam pengaruh kombinasi konsentrasi
Zeatin dan NAA terhadap jumlah daun pada 12 MST ............. 40
Lampiran 5. Hasil analisa sidik ragam pengaruh kombinasi konsentrasi
Zeatin dan NAA terhadap tinggi tunas pada 12 MST .............. 42