PRAKTIKUMMEKANISME DASAR PENYAKIT

ASISTENSI PRAKTIKUM

Jenis-Jenis Pewarnaan Bakteri

Pewarnaan Sederhana

Pewarnaan Negatif

Pewarnaan Gram

Pewarnaan Spora

Pewarnaan Kapsul ( Burry-Gins )

PEWARNAAN SEDERHANA

Prinsip : Zat warna basic bermuatan (+) dengan kuat diikat oleh asam nukleat bakteri dan beberapa komponen dinding sel yang bermuatan (-)

1 Zat Warna

-Methylen Blue-Crystal Violet-Carbol Fuchsin

Tujuan : Untuk melihat Morfologi dan Koloni Bakteri

Zat warna yg sering dipakai

Crystal Violet

Carbol Fuchsin

Methylen Blue

Pewarnaan Negatif

Prinsip : Zat warna acidic dgn chromogen bermuatan negatif tidak bisa penetrasi ke dalam sel

- Tidak ada pengaruh bahan kimia dan tidak perlu fiksasi dgn panas Bisa amati ukuran dan bentuk asli bakteri - Bisa warnai bakteri yg sulit diwarnai

Tujuan : Untuk melihat Morfologi dan Koloni Bakteri

Zat Warna : Tinta India atau Negrosin

Tinta India

Pewarnaan Gram

Pewarnaan Differensial

1. Zat warna primer = Crystal Violet 2. Mordant = Lugol atau Gram iodine 3. Zat peluntur = Ethyl alkohol 96% 4.Zat warna kontras = carbol fuchsin atau safranin

Tujuan : Morfologi, Koloni, Sifat gram

4 REAGEN

Prinsip

Struktur dinding sel

Gram Negative Gram Positive

Escherecia coliSalmonella typhiShigella dysenteriaeProteus spPseudomonas sp

Staphylococcus aureusStreptococcus pyogenesStaphyloccocus epidermidisBacillus cereusBacillus subtilis

Pewarnaan Kapsul

Metode Burry-Gins

Tujuan : Morfologi, Koloni, Kapsul

2 REAGEN ZAT WARNA

Pewarnaan Spora

Cara Schaeffer dan Fulton

1. Zat warna primer = Malachite green-> pemanasan2. Zat Peluntur = Air atau Aquades3. Zat warna kontras = Safranin atau larutan fucshin

Tujuan : Untuk melihat spora

3 REAGEN

Medium Kultur

- Menumbuhkan mikroba - Mengisolasi - Memperbanyak jumlah - Menguji sifat-sifat fisiologi dan perhitungan

jumlah mikroba

Nutrien Agar ( NA )

TUJUANDigunakan untuk menumbuhkan semua mikroba dan digunakan untuk pertumbuhan dari mikroorganime yg tdk selektif atau mikroorganisme heterotrof.

KANDUNGANMeat, Pepton, Agar, Aquadest

HASIL INTERPRETASI

- Adanya kekeruhanMenandakan adaPertumbuhan Bakteri

Morfologi pada Agar

Staphylococcus epidermidisStaphylococcus aureus

Medium Selektif

Medium selektif = medium yang hanya menumbuhkan bakteri tertentu saja

Adanya senyawa kimia tertentu pada media selektif akan menghambat pertumbuhan bakteri yang tidak diinginkan sedangkan bakteri yang diinginkan akan tumbuh.

Contoh Medium Selektif

- Mac Conkey Agar ( Selektif Differential ) Untuk menumbuhkan bakteri gram (-), bakteri gram (+) dihambat oleh karna adanya Crystal Violet

Escherecia coli

Klebsiella pnemoniae

Proteus vulgaris Pseudomonas aureginosa

- MSA ( Mannitol Salt Agar ) medium untk menumbuhkan bakteri gram (+) Staphylococcus sp.

Staphyloccous aureus Staphyloccous epidermidis

SS AgarSELECTIVE Hanya gram (-)

(Salmonella sp&Shigellasp)

DIFFERENTIAL Membedakan bakteri yang fermentasikan laktosa dengan yang tidak, serta yang menghasilkan dgn H2S dgn yg tidak hasilkan H2S

TCBS AgarSELECTIVE Hanya gram (-)

( Vibrio cholera )

Vibrio cholerae

Medium Transport

Medium Stuart Medium transport untuk bakteri gram (+) dan gram (-)

Medium Carry and BlairMedium transport untuk bakteri enteropatogen dan vibro utamanya pada spesimen feces

Medium Enrichement Alkaline peptone water-For Vibrio species-Use feces sample

Selenite-Salmonella sp&shigellasp-Use feces sample Bile peptone medium-Salmonella typhii-use blood sample

Tes-tes biokimia/Medium Differensial

- Tes TSI- Tes SIM- Tes MR VP- Tes Urease- Tes Citrat- Tes Fermentasi Gula2

TES TSI- Slant = Asam ( Kuning ) / Alkali ( Merah )- Butt = Asam ( Kuning ) / Alkali ( Merah )- H2S = (+) Endapan Hitam- Gas = (+) Terbentuk celah atau medium terangkat

HASIL TES- Uji Sulfur (H2S) = (+) Hitam- Uji Indol = (+) Pereaksi (Reagen Kovac ) berubah

menjadi merah ( terbentuk cincin ) pada bagian atas media

- Uji Motilitas = (+) ada pergerakan media keruh

MRTes (+) = MerahTes (-) = Kuning

VPTes (+) = MerahTes (-) = Kuning

Tes CitratTes Citrat (+) = BIRUTes Citrat (-) = Tidak berubah warna ( HIJAU )

Tes ureaseTes Urease (+) = PinkTes Urease (-) = Kuning

Tes Fermentasi Gula2- Terdiri atas : Tes Fermentasi Laktosa

Tes Fermentasi SukrosaTes Fermentasi Glukosa – tabung durham (+) gas, terangkat.Manitol

- Prinsip = Fermentasi gula asam indikator fenol red- Hasil tes

(+) Kuning(-) Merah

1. A) Pewarnaan Apa ini ?B ) Reagen apa yang dipakai ?

2. A )Pewarnaan dibawah ini adalah pewarnaan gram sebutkan reagen2 yg dipakai pada pewarnaan tersebut !

B ) Interpretasi dari bakteri yg diwarnai ? Gram (+ )/gram (-)

3. A) Pewarnaan Apa ini ?B) Apa tujuan dari pewarnaan ini ?

4. Medium Apa ini ?

A B

5. A) Sebutkan nama bakteri yg tumbuh pada nutrient agar tersebut !

B) Sebutkan nama medium !

A B

6. A) Nama Bakteri yg tumbuh ?B ) Sebutkan Nama Medium !

• A

A B

8. A ) Sebutkan nama medium dari secara berurut dari E-D-C-B-AB ) Fungi dari medium A dan B ?

A B C D E

9. A) Medium atau Tes Apa ini ?B) Interpretasikan Medium atau Tes SIM dibawah ini !

A B

10. A) Tes Apa ini ?B ) Interpretasi dari tes urease dibawah ini !