Distribution and Characterization of Bacillus thuringiensis on the Phylloplane of Species of Piper...

10
Distribution and Characterization of Bacillus thuringiensis on the Phylloplane of Species of Piper Piperaceae) in Three Altitudinal Levels P. Maduell, 1 R. Callejas, 2 K.R. Cabrera, 3 G. Armengol, 1 S. Orduz 1 1 Unidad de Biotecnologõ Âa y Control Biolo Âgico, Corporacio Ân para Investigaciones Biolo Âgicas, Medellõ Ân, Colombia 2 Instituto de Biologõ Âa, Universidad de Antioquia, Medellõ Ân, Colombia 3 Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia, Sede Medellõ Ân, Medellõ Ân, Colombia Received: 21 January 2002; Accepted: 29 April 2002; Online Publication: 28 June 2002 A B S T R A C T Bacillus thuringiensis is found naturally on the phylloplane. In this study 35 samples from 13 species of the genus Piper Piperaceae) were collected from three altitudinal levels located be- tween 1800 and 2900 m above sea level in the Colombian Andean forest of Central Cordillera. Two hundred and ®fty-six isolates of B. thuringiensis were obtained from 74% of the samples studied. B. thuringiensis index number of isolates of B. thuringiensis/number of isolates of sporulated bacilli) was 0.2. The isolates were characterized by crystal morphology, the presence of cry genes by PCR, and toxicity against insects. Fifty-®ve percent of the isolates found pre- sented bipyramidal-crystal morphology, and 42% had round-crystal morphology. Seventy per- cent of the isolates ampli®ed cry1 [cry one] genes generally toxic to lepidopterans); 41.4% ampli®ed cry4 and/or cry11 [cry eleven] genes generally toxic to dipterans), and none of the isolates ampli®ed cry3 genes generally toxic to coleopterans). The most abundant genotype of cry genes 54.7% of the total) was cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1Ad, and cry1B. From the total isolates found, 7.8% presented both cry1 and cry11 genes, and ®ve isolates 2.0%) harbored cry1, cry4, and cry11 genes; all these isolates were toxic to Culex quinquefasciatus Diptera) but not to Spodoptera frugiperda Lepidoptera). To our knowledge, these genotypes have not been previ- ously reported. Overall, almost 60% of the isolates were toxic to S. frugiperda, and a little more than 40% of the isolates were toxic to C. quinquefasciatus. The populations of viable vegetative cells and spores per unit area were estimated and studied statistically. No signi®cant differences in the number of B. thuringiensis isolates per cm 2 of leaf among the three altitudinal levels were found, nor were they found among the different Piper species evaluated. This study increases the knowledge of the ecology of B. thuringiensis. Microb Ecol 2002) 44:144±153 DOI: 10.1007/s00248-002-1018-z Ó 2002 Springer-Verlag New York Inc. Correspondence to: S. Orduz; Carrera 72A No. 78B-141, Medellõ Ân, Colombia; Phone: 57 4 4410855; Fax: 57 4 4415514; E-mail: [email protected]

Transcript of Distribution and Characterization of Bacillus thuringiensis on the Phylloplane of Species of Piper...

����������� � � ���������� �� �������� ������ ���� � � �� ������� �� ������� �� ��� ���������� � � ������������ ������

�� ������� �� ����� ��� ���� �������� �� �������� �� �����

������ �� ��� �!�����"#� $ ��� ��� �����#��!� ���%���!��#� %��� &�'�� ���!����� �����#��!�� ������"#�

��������� &�� � � � �� ������"#� ���'������� �� �� ��(��� ������"#� ��������� )�!�� �� �� ����!��� ���'������� *�!����� �� �������� ���� ������"#� ������"#� ��������

��!��'��+ � ,�����$ �--�. �!!�% ��+ �/ �%��� �--�. ������ �����!� ���+ �0 ,��� �--�

� � � � � � � �

�������� ������ ���� �� 1���� �� �����$ �� 2� %2$���%����� &� 2�� � ��$ �3 ���%��� 1��� �

�%�!��� �1 2� ����� ��� 4��%���!���5 6��� !����! �� 1��� 2��� �� � ������ ��'��� ��!� �� ��7

6��� 0-- ��� �/-- � ���'� ��� ��'�� �� 2� ��������� ������ 1���� �1 ��� ��� �����������

86� 2������ ��� 91 $7��: ����� �� �1 �� ������ ���� 6��� �� ����� 1��� ;<= �1 2� ���%���

� ������ �� ������ ���� ����: 4������ �1 ����� �� �1 �� ������ ����������� �1 ����� �� �1

�%����� �� ��!����5 6�� -��� 82� ����� �� 6��� !2���! ������ �$ !�$� �� ���%2����$ 2� %�����!�

�1 �� ����� �$ ��� ��� �:�!� $ ������ ����! �� )�1 $79'� %��!�� �1 2� ����� �� 1���� %��7

��� �� ��%$�������7!�$� �� ���%2����$ ��� <�= 2�� �����7!�$� �� ���%2����$� ��'�� $ %��7

!�� �1 2� ����� �� ��%��9�� ��� >�� ���? ����� 4��������$ �:�! � ��%���% �����5. <�<=

��%��9�� ��� ���@�� ���� >�� ���'��? ����� 4��������$ �:�! � ��% �����5 ��� ���� �1 2�

����� �� ��%��9�� ��� ����� 4��������$ �:�! � !����% �����5� 82� ��� ������� ���� $%� �1

�� ����� 43<�;= �1 2� � ��5 6�� ����� ����� ����� ����� ��� ����� )��� 2� � ��

����� �� 1���� ;�0= %����� �� �� 2 ��� ��� ���� ����� ��� 9'� ����� �� 4��-=5 2������� ���

��� ��� ���� �����. ��� 2��� ����� �� 6��� �:�! � ��� � ������ ��������� 4A�% ���5 �� �� �

������� � ����� �� 4B�%���% ���5� 8� ��� C��6����� 2��� ���� $%�� 2�'� �� ���� %��'�7

����$ ��%�� ��� �'����� ����� D-= �1 2� ����� �� 6��� �:�! � �� ����� ��� ��� � �� �� ����

2�� <-= �1 2� ����� �� 6��� �:�! � �� ������ ���������� 82� %�%��� ���� �1 '����� '��� � �'�

!���� ��� �%���� %�� ��� ���� 6��� �� ��� �� ��� � ����� � � �� �!���$� *� �����9!�� ��11����!��

�� 2� ������ �1 �� ������ ���� ����� �� %�� !�� �1 ���1 ����� 2� 2��� �� � ������ ��'��� 6���

1���� ��� 6��� 2�$ 1���� ����� 2� ��11���� ��� �%�!��� �'���� ��� 82�� � ��$ ��!������ 2�

C��6����� �1 2� �!����$ �1 �� ������ �����

��!��� E!�� 4�--�5 <<+<<F3�

A�&+ -�--;@�--�<07--�7-07�

� �--� �%������7G����� *�6 H��C &�!�

�� ����� �� �� �� �����. ������� ;�� *�� ;0�7< ������"#�

��������. �2���+ 3; < <<-033. )�:+ 3; < <<33<. E7����+

������I�%���� �!�

�����������

�������� ������ ���� �� � �%���71������ ����7%��� �'�

��! ������ & 2�� � %�� �!���� !2���! ���� �! 2� ��11����7

�� �� 2�� �%�!��� 1��� � 2��� �1 2� �������� ����% &&

4!2���! ������ �$ ����%������ �%���� 2� �� �� �6��� 2�

�� 2�� !���5+ 2� 1���� ��� �1 � %�� ��! !�$� �� � �%���7

�� ��� >�D?. ���� �1 2� %�� ���� ��� �:�! 1�� � �����

������ �1 ����! �� 82�� !2���! ���� �! 2�� ���� �� ��!

���� ���� 2� ��� � ����� ��� � ������ ��! ����� �� 2�

�������!�� !�� ��� �1 %�� � �� ����!�� ��� 1���� �$ ���

������� '�! ��� >�3 <�?�

)��� �� �!�����!�� %��� �1 '��6 2� �� ���� 2��� � �1

�� ������ ���� �� �� C��6� �:�! �$� J�� ���!���$ � 2��

���� 1���� �� ���� ��!C �� ���� ����! � ��� � ���� %���7

�! � ��!2 �� ���!!� K��� ��� ����� >� � � ;F�- ��

�; �0? �� 2���2 � 2�� ���� ���� �� �! �� �� ��� %�� �!���

�� ���%������ �� %��� ���'�� �� 1��� ������ �C�� ���

�'�� �� ������ ������� � > � < �D �/ �/ <-?�

82��� ��� '��$ 1�6 �� �!��� �� 2� �!��� �9! �� ��� ���

���!������ 2� �!�����!�� ��!2� �1 �� ������ ���� ��� 2�

���� 2� 2�� ��! ����� %��$� �� 2� �� ���� ��'������� �

��� �� ��� 8��'��� >�0? 62� !����! �� �� ������ ����

1��� ����� ������ 2� 6���� !��!����� 2� 2� ���� �1

�� ������ ���� �� 2� ��'������� 6�� �� ������� &�

// ��� 2 ��� ���!2� ><-? %�����2�� 2� 9�� � ��$ ��

2� ����!2 1�� �� ������ ���� �� ���'�� �1 '��!���� %��� �

��� 2�$ ����� �� �� ������ ���� 1��� 3- � ;-= �1 2�

���'�� ���%���� &� 2��� !��!������� 2�$ ������ �� 2�

2� ���� �1 �� ������ ���� �� 2� ��'������� �2���� ��

��!���������� �1 ��6��� �2�� >��? ��� A������� � ���

>3? !��!����� 2� 2� ������ �1 �� ������ ���� %�%���7

���� �� ���'�� 6�� �� ��� �����$ � �� ������ ����

%�%��� ���� �� 2� ���� 62��� 2��� %��� � ���6� ���!� 2��

� ����� �� 2� ����!2 1�� �� ������ ���� �� %��� ���'��

2�'� !�� ������ 82� ������!2��� 2�'� ���� � ������ ���

�� ��% 2 2� ���� �1 2�� �������� �� 2�� 2��� � >D ��

�- �;?�

82� ��%���!��� 1����$ 4���!C %�%%�� 1����$5 1���� ���

�1 2� ��� ����� !����� �1 2� ������%���� ��� !�� ����$

� �� 2� ��� 2� !�� ���� 2� ��� �%�!���� 82�� ����% �1

%��� � !�� ���� �%%��:��� ��$ �--- �%�!��� ��� �� �����$

!2���! ������ �$ � � �%�!� � ��K����!��!� � � �� ���� �

���'�� ��� � � %������� C�� �� *��� $ %��!�� �1 2�

�%�!��� C��6� ��� ����%�� �� 6� ������+ ��� ���

� � �"�� >D � �?�

82� ��%���!��� �:2��� � %��7 ��%�!�� ��� ���� ��� ��

62�!2 2� ������ !��!�� �� ��� �1 �%�!��� �� ��� ��! �� �

2� ������ ������� �1 ��� 2 �����!�� &� �������� 2�$

��� '��$ !����� �� ��6����� ��� � 2� ���� �1 ���� ���

������ �������$ �!!������ �� 6��� -- ��� �3-- �� ���

���'� ��� ��'�� 4����5 �!!�%$��� %��! �!���$ ��� C���� �1

��1� ����� ��� ��� 2� ��!!������ � ���� >< 3?� 82� 6���

������!� �1 ��'���� 2��� � � 2� �!!�����!� �� � �����

�� � ������ ����� ��� 2� ����� ������ %�����!� �1 ��7

������ �%�!��� �� � %�� �!���� �� � 2�'� ���� 2�� 1����$ �

1�'��� � ��� �! �1 � ��$ �� 1������ � ��� %��� %2$����7

��$ ���� ���%������ �������� ��!2� �! ��� ��� 1�����

!2���� �� 2� ��%�!� >- <3 <;?� ���� 2�� 1����$ ����

�� ��11�� 2� ��!�� ��� $ �1 �����!�� ��� ��� �:����$

� � �������� ��'�� 2� ��������� 2� !�����9!� ��� �1 ��

���$ ����%� �1 %��� � �� 2� ���7 ��%�!�� )�� ��� �1 2�

���'� ������� 2� ��%���!��� �� �� ����� ����% 1�� 2�

� ��$ �1 �� ������ ���� �� 2� %2$���%�����

&� 2�� � ��$ 2� ��� ���� ��� �1 '���� ��� �1 �� ����!

�� ���� �� 2� %2$���%���� �1 ��11���� �%�!��� �1 2� ��%7

���!��� 1����$ � �� �� � ������ ����� 1��� 0-- � �/--

���� �� ���!����� �� ����� � ���6�� ���� �1 2� (���7

���� 2� �:�� ������ 2� �!����$ �1 2�� ��! ������

�����

������ �������� ������������ ��� ���������

A����� 2� ������� 2���� �1 2��� ��$� >-@-/@/// -<@-�@�---

��� �D@-3@�--- 4��@��@$$$$5? ���'�� 1��� �3 %��� � ��������� �

� �%�!��� �1 2� ��%���!��� 1����$ 6��� !����! �� 4��� ������"

B� �� ����� �� A�� �� ���� �����" �� A�� �� ������ #��" J�

�� �� �� ���� �!���$�� $�� 8���� �� ��������� �� �� A�� �� �������

�� A�� �� �"� ��� �� A�� �� "� ���� �� J� �� �� �� "������"

�� A�� �� ������" �� A�� �� ������������" H��� ��� �� ��!

� ��� � �� A��5� �����! ���� � ��11���� ���� �1 2� $��� ���

��%%���� �� � �� !�� �!�� � �(�� ����� �� � ����� ��� ���'�� 6���

�C�� 1��� � ���� �- !� 1��� 2� ������ ��'��� G��!2��� 1�� ��!2

�%�!��� 6��� !����! �� ��� ��%��� �� �� 2� ���'���� $ �1 �� ��(���

2�������� 4J��5 ����� �� ����� �� ����������

82� ���%���� 6�� !������ �� �� 2� ��� � ���� �� ���� 2��2

%�� ��� �� 2� ������! ��� �1 2� ����!�%��� ��� �1 ����� ���

����� ��� ������"#� ��!� �� �� 2� ��������� ��� ��� �������7

��� �� 6��� 0-- ��� �/-- ���� ��� �%%��:��� ��$ � 2� !�7

������ �� D� �� �-L * ;3� �0� �-L M� 82� ���%��� ���� ��!�����

����� �1 %��7���� ������ ���� 1���� ��� %��7���� ������ '��$

6� ���� 1���� 6� 2 �'����� ������ %��!�%� � ���� �� 6��� ---

4 2� ��6�� %�� �5 ��� <--- 4 2� 2��2�� %�� �5 �� ��� 6� 2

�'����� ������ ��%��� ���� �� 6��� D ��� �<��� 82�� ���� 6��

��'���� �� � 2��� �� � ������ ��'���+ ��6 40--F/3- ����5 ��7

���� 4/D-F��-- ����5 ��� 2��2 4��-F�/-- ����5� &� 8����

2� ��� ���� ��� �1 2� ���%��� !����! �� �� 2� 2��� ��'��� ��

�2�6�� ���%��� 6��� �C�� 1��� ��� 2��� �� � ���� � ��!2

���%���� ����

�� ������ ���� �� ��%���!��� �� 82��� �� � ������ B�'��� <3

)��� ��!2 %��� � ������� �1 1��� ���'�� 6��� !����! ��

4��%������ �� 2� ���1 ���� �1 ��!2 �%�!���5� M� ����! �� 2��� 2$

���'�� 4�� ���� �1 ������5 � 2��� ��:���� %2$�������!�� ��7

'���%��� �� !�� ����� �� 6� 2 ���� ��� �� �11�! �� �$ ����!

������2 � E�!2 ���1 ���%�� 6�� %��!�� �� � 2���� �!���$ ������

� ����� %��� �! ���� B��'�� 6��� ����%�� �� � <�� � 2� ����7

�� ��$ 62��� 2�$ 6��� !� ����� ���% �! !���� ���� �� � �(����

��! ���� �1 �%%��:��� ��$ -�3 � !�� �� �� � � �� ���� �1 �-

!�� %�� ���%�� 6�� �� ������ 82� ���%��� 6��� 2�� � ���� ��

3 �B �1 ��(��� � 4B�5 ������ >��? 6� 2 �-= ��$!���� � ��-���� �� 2�$ 6��� ����$����

�� ����������� ��������

82� �!2��(�� ���!����� �$ ��� 2 ��� ���!2� ><-? 6�� ����

6� 2 2� 1����6��� ����9!� ����� 82� ���� 6� 2 2� ���%���

6��� ��1��� �� 2�� �2�C�� �� � '�� �: 1�� ��� ��� 2� ��(���

6�� ��!�'����� & 6�� !�� ��1���� 1�� 3 ��� � 3--- �%� ��� 2�

%���� 6�� �����%����� �� �B �1 � ����� ��� ����� 6� ��� & 6��

!�� ��1���� ����� 1�� 3 ��� � �3-- �%� ��� 2� %���� 6��

�����%����� �� �-- �B �1 � ����� 6� ��� ������ ���� ���� �1 2��

���%������ 6��� ���� ��� �%���� %�� �� �� %� �� ���2�� �1 B�

!�� ��� ������� & �� �����'�� 2� 2� ���%�� ��� ��� ���

� ����� ��� �� C��� ��$ '��� � �'� !���� �� !���� ��$ �%���� �

������� � ��1��� 2�$ ���!2�� 2� ���� ���1�!�� �1 �� <0 2 2�

%� �� ���2�� 6��� �����'�� ��� 2� !������� 2� 2�� � �� ��!

���� ����7��C� ���%2����$ 6��� ����! ��� �� ������ ���� !�������

2�'� � ���� �� 1��� �� ����� �%%�����!� ��� �1 �� �� ������ �

������ 1��� 62�!2 �: ����'� �� ���6 2� �� �� ��'���% ><?�

�������� 6��� ��!��� �� �� � ��(���7�%����� ��� ������ >�<?

��� �����'�� �< 2 �� �� ����� %2���7!�� ��� ��!���!�%$� 82�

���%������ �1 !�$� ��� ��� �%���� 6�� ������� �� 9��� 62���

!�� ��� 4)M�5� 82��� ����� �� 2� 2�� %����%���� !�$� ��� 6���

���� �9�� �� �� ������ ���� ��� � ���� � ��-�� 1�� 1�� 2��

����$��� 62��� 2� � 2��� 4��� �1 2�� �%����� �� ��!����5 6���

�� �! ��� 82� �� ������ ���� ����: 6�� !��!��� �� 1�� ��!2

���%�� �� 2� ������ �1 ����� �� �1 �� ������ ����������� �1

����� �� �1 �%����� �� ��!����� 82� �������� %�%��� ��� �1 �%����

���@�� '����� !���� %�� ��� �1 ���1 ���� 6�� ���� �� ��� �� 1���

2� !����$71������ ��� � 4�)�5 �1 2� 6� 2��2�� ���� ���� ��

62�!2 �� ������ ���� 2�� ���� ����� ���

82� 1����6��� ����'��� �1 �� ������ ���� 6��� ���6�+ %�!

���%�� ��$�&��� ��� � ����� " � ����� "������ %� 2�'��� � � !

������� ��"����� ����� ���� �� � ��� ���&��� JA�3� ��� 6���

�� ����� 1��� 2� !����! ��� �1 ��!����������� �1 2� ��� �!27

�����$ ��� �������!�� ��� ��� ��� �1 2� ���%���!��#� %��� &�7

'�� ���!����� �����#��!�� ������"#� �������� � �� ���� ��

!�� ���� ������ ����� � !2���! ����� ����

��� ������� ��� ��� ��������

��� ����� �� 6��� %�� �� �� %� �� ���2�� �1 B� ������� �1 �� 0 2

� ���% 1��� �1 !���� 6�� !����! �� ��� �����%����� �� �-- �B �1

� ����� 6� ��� 82� !������� ���%������� 6��� C�% � ��-�� 1�� � 2

��� 2�� ������� ��$ %��!�� �� � --�� �� 2 1�� - ��� !��7

��1���� 1�� <3 � � �3-- �%� ��� 2� ��%���� �� � !�� ������

� �� A*� 6��� ��!�'����� 82� A*� 6�� 2�� � ���� � ��-�� 1��

1�� 2�� ����$����

������� %������ ����7!�$ ��� A�% ��� ����7!�$ >� ;? 6���

���� � �� �! 2� %�����!� �1 ��� ��� ��� ��� ���� �����

���%�! �'��$� 82� %����� ����%� �,7; �,07� ��� �,<7/ >0 /?

6��� ���� ���� � �� �! 2� %�����!� �1 2� �%�!�9! ��� �����

4����� � � �. ���� � '. ��� ���( ) ��*� ���%�! �'��$5�

82� ��� ��: ���� !�� ����� ��� ��11�� 43- �� ��� - ��

8���7J�� %J 0�05 ��3 �� ����� �-- �� �1 ��!2 �*8� -��F-�<

�� �1 ��!2 %����� -�3F� �B +�� %��$������ ��� F��3 �B �1

A*�. 2� '����� 6�� !��%�� �� � �3 �B 6� 2 � ����� J��� 82�

��%��9!� ��� !���� ���� 6��� 2� 1����6���+ � ���� ��� ��� � �%

���� �� A�� ���� ��� ��� ������ �1 ���1 ���%��� �� ���� ��� � 2� ��� �%�!��� ��� 2� �� � ��� 62��� 2�$ 6��� !����! �� �� 2�

������ ��������� ��� ��� ���������� 4���� �� ��� ���'� ��� ��'��5

�� � ������ ��'���

�%�!���B�6

40--F/3- ����5������

4/D-F��-- ����5J��2

4��-F�/-- ����5

�� ������" �� ����� ��� ���� �����" � � �� ������ #��" � � �� ���� �!���$�� $�� �� ��������� �� � �� ������� �� �"� ��� �� "� ���� �� �� "������" ��� ������" �� ������������" �� ��� ��� � �

8� �� � � -

<D �� ������� � ���

1�� 3 ��� � /<�� �3 !$!��� 41�� 2� ������� %������5 �� <- !$!���

41�� 2� �%�!�9! %������5+ ���� ��� ��� <3 � � /<�� ��������� <3

� � </�� 41�� ����7!�$ ��� �,<7/5 <D�� 4���5 3��� 4A�%5

<3�� 4����7!�$5 �� <0�� 4�,7; ��� �,07�5 ��� � ��� �:7

������ � ;���. 9����$ �� �: �� �: ������ � �% �1 DF- ��� 6��

!������ �� � ;���� �1 �� 2� ��%��9!� ��� A*� 1������ � 6���

��%��� �� �$ ���! ��%2������ �� � = ������� ��� 41�� 2� �������

%������5 �� �� � �= ������� ��� 41�� 2� �%�!�9! %������5 � -- G

1�� <3 ��� 4������� ��� �,<7/ %������5 �� ;- ��� 4�,7; ���

�,07� %������5� �� ������ ���� ����'��� %����%� ��� �� ��!

���� ���� ����'��� ��$�&�� 41�� ����7!�$ �,7; ��� �,07�5 ��

������ ���� ����'��� "������ %� 2�'��� � � ������ 41�� ���5 ��

������ ���� ����'��� ��� � ���� �,,� 41�� A�%5 �� ������ ����

����'��� ��� � ���� �,,� ��� �� ������ ���� ����'��� " � ����

41�� ����7!�$5 ��� �� ������ ���� ����'��� ��"����� ����� ��

������ ���� ����'��� ���� �� ��� �� ������ ���� ����'��� ���!

&��� JA�3 41�� �,<7/5 6��� ���� �� %��� �'� !�� �����

���������

82� �:�!� $ �1 ��� �� ������ ���� ����� �� 6�� �������$�� 6� 2

9�� 7��� �� ������� � ����� �� ���'�� 4B�%���% ��� *�! ��7

���5� )��� 2������ �B �1 2� )M� 6�� �%���� �� 2� ���1�!� �1

�� �9!��� ����7����� ��� >�0? �� %��� �! !�%� 4� !� ����� ��5�

82��� 6��� ����6�� � ��� ��$ ��� 9'� �� ����� �� ����� ��

���'�� 6��� ������ �������$ !�%� 6��� %��!�� � �-�� ��� 2�

��� ��� $ 6�� �����'�� ;� 2 �� ��� 82� ����� �1 �:�!� $ �1

�� ������ ���� ����� �� 2� 6��� �:�! 6�� !��!��� �� �$ �����

)M� ������ ���� ���� 4--F-�35 �$ ��%��!� �� �� ������ ����

����'��� %����%� ��� �� ������ ���� ����'��� ��$�&�� 6��� ����

�� %��� �'� !�� ����� ��� 2� ����� �� 6��� ���� �������$�� 6� 2

2���7��� �� ��� � ������ ��������� ���'�� 4A�% ��� ����!����5�

��� 2������ �B �1 )M� 6�� ����� � -- �B �1 6� �� �� %��� �!

!�%� 6� 2 - ���'�� �1 �� ������ ��������� ��� 2�$ 6��� %��!��

� �-��� 82� ��� ��� $ �1 2� ���'�� 6�� �������� �< 2 �� ��� 82�

����� �1 �:�!� $ �1 2� ����� �� 6�� ���� !��!��� �� ����� )M�

������ ���� ���� 4--F-�35 �$ ��%��!� � �� ������ ���� ����'���

��� � ���� �,,� 6�� ���� �� � %��� �'� !�� ���� &� �� 2 �������$�

�� ����� � 6�� !��������� � �� �:�! �1 ��� 2� ���'�� 6��� �����

������� ��������

�� ��� ��� ����$��� 6�� !������ �� � �'���� � 2� ��11����!��

�� 6��� 2� ������� �1 ����� �� �1 �� ������ ���� ����� 2�

2��� �� � ������ ��'��� ��� 2� ��11���� �%�!��� �1 ��� � &� 2��

� ��$ ��!2 ��� �1 2� ���1 ���%��� 6�� ��9��� �� 2� �:%���7

��� �� ��� ��� 2� ������ �1 '����� �� ������ ���� !���� ���@��

�%���� %�� !�� �1 ���1 6�� �C�� �� 2� ��%����� '��������

&� � ��!��� ����$��� 2� ��� 6�� � �����'� �1 2��� 6��� ��$

��11����!�� ��������� 2� !2���! ���� �!� �1 2� �� ������ ����

����� �� 1���� �� 2� 2��� �� � ������ ��'��� ��� �� 2� ��11����

'��� �� �%�!���� 82�� ����$��� 6�� !������ �� �� 6� %2����� &�

2� 9�� ��!2 ��� �1 2� '��� �� ���%��� 6�� !��������� �� 2�

�:%������ �� ��� . �� ��!��� ��!2 ��� �1 2� �� ������ ����

����� �� 6�� !��������� �� 2� �:%������ �� ��� � &� �� 2 %2����

2� ������� �1 '����� �� ������ ���� !���� ���@�� �%���� 2�

2�� ����� !�$� �� ��%$������� !�$� �� �:�!� $ 1�� �� ����� ���

�:�!� $ 1�� �� ������ ���������� %�����!� �1 ��� ����� %�����!�

�1 ��� ����� ��� %�����!� �1 ���� ����� 6��� �C�� �� 2�

��%����� '��������� &� 2� 9�� %2��� �1 2�� ����$��� 2� '����

�1 2� '�������� 6�� 2� %��!�� ��� �1 '����� !���� 2� %����� �� �

��'�� !2���! ���� �! �� ��!2 '��� �� ���%��. �� 2� ��!��� %2���

������ � '����� �1 2� ��%����� '�������� 6��� ����� 82� ��7

��%����� '�������� � ������ �� 2� 6� %2���� 6��� 2� ���� ��

�� 2� 9�� ����$���� 82� ����� � �� ����� 6��� ����$��� �$ ���7

6�$ ����$��� �1 '�����!� 4�*�G�5 1�� ��!2 '������� 6� 2 2�

� � �� �!� 3�- %������ 4� � ��1 &�!�5�

�� ���

���������� �� �� �����������

�� ������ ���� ����� �� 6��� 1���� 1��� �D �� �1 2� �3

%��� � � ����� 4;<��=5� �� ��� 2�� �D/ ����� �� 6���

� ����� �1 62�!2 �3D 6��� !2���! ������ �� �� ������!

���� 4�� ������ ���� ����: �1 -��5� 82� 2��2�� ������ �1

�� ������ ���� ����� �� 6�� 1���� 1��� ���'�� 1���

�� ���� �����" ��!� �� � � ������ �� � ��� 4�- ����5

6� 2 � � �� �1 << ����� �� ��� 6� 2 � �� ������ ���� ����:

�1 -�0� )�'� ���%��� 6��� 1���� 6� 2 � �� ������ ����

����: �(��� � 4���� ��� 2� ����� �� 6��� �� ������ ����5

�� �� ����� �� ������ #��" 4� ���%���5 �� ��������!

� �� ��� �� �"� ��� � 82� ��� ���� ��� �1 �� ������!

���� ����� �� � ��11���� �� � ���� ��� �� ��� �%�!��� ���

�2�6� �� 8����� � ��� �� �� ������ ���� 6�� 1���� �

��!2 �� � ������ ��'�� ��� �� ��� 2� '��� �� �%�!��� 4�:!�%

���5�

�� ����������� � ������!����

82� !2���! ���� �!� �1 �� ������ ���� ����� �� �� �����

1��� 2� ���%��� �1 2� ��� �%�!��� � 2� ��11���� ��7

� ���� !�� �� �����'�� �� 8����� < ��� 3� �1 2� �3D

�� ������ ���� ����� �� <- 43<�;=5 2�� ��%$�������

!�$� ��� -0 4<���=5 ����� !�$� ��� � 4��=5 ����%2���

!�$� ��� ��� 3 4��-=5 %��$���%2�! !�$� ��� !��%���� �1 �

��: ��� �1 ����� ��� ��%$������� !�$� ����

���$ ; ����� �� 4��;=5 ��%��9�� ��� ����� �� 2� ���

�� �� *� ����� �� ��%��9�� ��� ����� 62����� // ����� ��

4�0�;=5 ��%��9�� ���� ������ M� 2 ������ � 2� ��%��7

9!� ��� 6� 2 2� ����7!�$ %������ </ ����� �� �:2��� ��

�� ��%��9!� ��� %����! �(��'���� � 2� %��� �'� !��7

���� ��� � ����� �� �:2��� �� � ��67�� ���� $ ��%��9!�7

��� %����! 62�!2 6��� ���� !��������� �� %��� �'�.

�� ������ ���� �� ��%���!��� �� 82��� �� � ������ B�'��� <;

2���1��� 0- ����� �� 4;-��=5 ��%��9�� ��� ������ )���

2� 0- ����� �� 2� ��%��9�� 6� 2 2� ����7!�$ %������

33 ����� �� 40D�=5 ��%��9�� ���� ����� <0 ����� ��

40���=5 ��%��9�� ���� ����� 3 ����� �� 4��0=5 ��%��9��

���' ����� 62����� ���� ���( ���) �� ��*� �����

6��� �� 1���� �� 2� %�%��� ��� � ������ ���� �- ����� ��

4;�0=5 ��� �� ��%��1$ ��$ �1 2� ���'� ��� ������ )�7

����$ 6� ����� �� 6��� 1���� 2� ��� �� ��%��1$ ��$ �1

2� �'���� �� ����� 4��� ��� ��� ��* ��� ����5

2���2 2�$ C����� �� ����� �� � ��6 ���� ���� 4-��5�

82� �� �1 �� ����� 6� 2�� �� ����'����� �� ������!

���� ����� � �� ��1����� � �� � � �� ���� $%�� 82� ��

���� $%�! 1��(���!��� �1 2� �� ������ ���� ����� �� 1����

�� 2� %2$���%���� �1 ����'������ ��������� � 2� �����

��� ��� ���!����� �� 8���� D� 82� ������ �1 �� �����

%����� �� 2� �� ������ ���� ����� �� 1���� �� 2�� � ��$

'����� �� 6��� ��� ��� 9'�� �'����� 3 !������ ���� �1

�� ����� 4���� $%��5 6��� 1���� ��� ���� 2�� ��� ��

���� $%� 6�� 1���� �� - �� �1 2� �D �� ������ ����7

%��� �'� ���1 ���%��� 4�0=5� ���� %2$���%���� ���%���

!�� ����� �� ������ ���� ����� �� ���%��$��� �� ���$ ��

��: ��11���� �� ���� $%�� �� 2���2 � 2�� ���1 ���%���

!�� ����� ����� �� 6� 2 ��� � 1��� �� ���� $%���

��� 2������ ��� 91 $ �� ������ ���� ����� �� 6���

�:�! � �� ����� ��� 62�!2 ��%����� 30�D= �1 2� %�%7

��� ��� 1����� )�'� �1 2��� %����� �� �:�!� $ ������� �

2� �1 �� ������ ���� ����'��� %����%�� 6����$ ���� ��

!�����!��� %����! �� �� 2� � 2�� 2��� � 6�� �����'��

2� -< ����� �� 4<�-=5 6��� �:�! � 2���7��� �� ��

������ ��������� ���'�� �1 62�!2 �:2��� �� �:�!� $

�(��� � �� 2��2�� 2�� 2� �1 �� ������ ���� ����'���

��� � ����� ��� ����� � 6�� �:�! ������ 2� 6� �%�!���

�'���� �� ��� 6� ����� �� 6��� �� �:�! �� �� 2�� �� ��!

��� �� �� �� ������ ����������

G��$ 2��2 %��!�� ��� ���� ���� 6��� �����'�� �����

�:�!� $ !�$� �� ���%2����$ ��� %�����!� �1 �� ������

��� 2������ %��!�� �1 2� ����� �� 2� 6��� �:�! � 2�

�� ����� �� ���'�� 2�� � ��� ���� ��� /<��= �1 2�

���� �� A�� ���� ��� �1 �������� ������ ���� ����� �� 1��� ��'���� ��� �%�!��� �� 2��� �� � ������ ��'��� �1 2� ������ ���������

��� ��� ����������

�� � ������ ��'������� � 6� 2

�� ������ ����@ � �� 4=5

�� ������ ��������� ��@�%����� ����!���� 4� ����:5

�� ������ ��������� �� %�� %��� 4�A5

E� ��� �� %�%��� ��� �1�� ������ ���� %�� !��

4�A5�

B�6 ;@� 430��5 /-@/; 4-�<35 ;�3 4-�35 /<- 4����5������ @� 40<�D5 �D@/< 4-�<5 -�3 4��5 3<�� 4D3��5J��2 0@- 40-5 �-@� 4-���5 � 4<�5 �-< 4�;D5

8� �� �D@�3 4;<��5 �3D@�D/ 4-��5 ;�� 4-�35 �-�� 4-�/35

� E� ��� ��� �1 2� %�%��� ��� �1 �%���� ���@�� '����� !���� %�� ���� ��� !��!��� �� 1��� 2� �)� �1 2� 6� 2��2�� ���� ���� %��� �'� 1�� �� ������ �����

���� � A�� ���� ��� �1 �������� ������ ���� ����� �� �� ��11���� ��� �%�!��� ���%��� �� 2� ������ ��������� ��� ��� ����������

�%�!���

���� � 6� 2�� ������ ����@

� �� 4=5

�� ������ ��������� ��@�%����� ����!���� 4� ����:5

�� ������ ��������� �� %�� %��� 4�A5

E� ��� �� %�%��� ����1 �� ������ ����

%�� !�� 4�A5�

�� ������" @ 4--5 �@D 4-���5 � 4�5� -�-D 4�5�� ����� �@� 4DD�D5 �@;- 4-�-�5 -�DD 4-�D5 -�-� 4-�-�5�� ���� �����" <@D 4DD�D5 D-@�3 4-�<05 - 4;��5 D�< 4</-5�� ������ #��" <@3 40-5 3@D 4-�0�5 -�� 4<��5 -;� 4��0/5�� ���� �!���$�� $�� �@� 4--5 �D@�;- 4-��5 -�D 4�/5 �<;D 43DD35�� ��������� �� �@< 43-5 �/@��- 4-�-/5 ;��3 4/�35 ��/< 4�;005�� ������� @ 4--5 @; 4-�<5 4�5 -�-� 4�5�� �"� ��� @ 4--5 ;@; 4�-5 ; 4�5 �D 4�5�� "� ���� �� @ 4--5 0@3< 4-�5 0 4�5 D---- 4�5�� "������" �@� 4DD�D5 �@D 4-�35 45 DD0 4/<-5�� ������" -@ 4-5 -@� 4-�-5 - 4�5 - 4�5�� ������������" �@� 4--5 �@�0 4-�-/5 D 4;5 �0 4��35�� ��� ��� � �@< 4;35 �/@� 4-��35 /�;3 40�<5 <<30 4<�35

8� �� �D@�3 4;<��5 �3D@�D/ 4-��5 ;�� 4-�35 �-�� 4-�/<5

� E� ��� ��� �1 2� %�%��� ��� �1 �%���� ���@�� '����� !���� %�� ���� ��� !��!��� �� 1��� 2� �)� �1 2� 6� 2��2�� ���� ���� %��� �'� 1���� ������ ������ 82� �%�!��� 6� 2 ���$ ��� ���%�� �� �� 2�'� �A�

<0 �� ������� � ���

����� �� 2� 6��� �:�! � �� ������ ��������� ��%��9��

��� ���@�� ���� ������ �� 2� � 2�� 2��� //��= �1 2�

����� �� 6� 2 ��%$������� !�$� ��� ��%��9�� ��� ����� ���

/�D= �1 2� ����� �� 2� 2�� ����� !�$� �� ��%��9�� ���

���@�� ���� �����. /���= �1 2� ����� �� 2� 6��� �:�! �

2� �� ����� �� ���'�� 2�� ��%$������� !�$� ��� ���

--= �1 2� ����� �� 2� C����� �� ������ ��������� 2��

����� !�$� ����

������� ��������

*� � � �� �!���$ �����9!�� ��11����!�� 6��� 1���� �� 2�

������ �1 '����� �� ������ ���� !���� ���@�� �%���� %��

!�� ����� 2� 2��� �� � ������ ��'��� �� ����� 2� ��17

1���� '��� �� �%�!��� 4�� � �� �2�6�5�

M� 2 ������ � 2� ����$��� �1 2� �� ������ ����

!2���! ���� �!� 4����� !�$� �� ��%$������� !�$� �� �:�!� $

1�� �� ����� ��� �:�!� $ 1�� �� ������ ���������� %�����!�

�1 ��� ��� ��� ���� �����5 �������� �� 2� %��!�� ���

�1 ����� �� 6� 2 2��� 1�� ���� %�� '��� �� ���%�� �� ���7

��9!�� ��11����!�� 6��� 1���� �� 6��� 2� ��� �%�!���

$� �����9!�� ��11����!�� 6��� 1���� �� 6��� 2� �� � �7

����� ��'���� & 6�� 1���� 2� 2� ������ �1 ����� �� 6� 2 �

����� !�$� �� ���%2����$ ��� 2� ������ �1 ����� �� �:�!

� �� ������ ��������� 6��� �����9!�� �$ 2��2�� �� 2�

������ ��'�� 4� N -�-� �� �� 2 !����5 4�� � �� �2�6�5�

&� 2� ��!��� ����$��� �1 2�� � ��$ ��11����!�� �����

2� !2���! ���� �!� �1 2� ����� �� �������� �� ������ �

'���� 6��� ����2 � *� �����9!�� ��11����!�� 6��� 1����

����� 2� �� � ������ ��'��� �� ����� 2� '��� �� �%�!���

1�� 2� '�������� �'���� �� 4�� � �� �2�6�5�

� �� ��

�� �� � ����� �� 2� ��� �� � � �� ,�%�� A�����C &�7

������� ��� &���� >3 D �� �- �� �; <-? �� ����!

�� ���� 6�� ����� �� 1��� %��� ���'�� �� ��������� &� 2��

���� !� �2���! ����� ��� 4�� %��!�� ���5 �1 �������� ������ ���� ����� �� �!!������ � 2� �� � ������ ��'��� �$ ����� �1 !�$� ��

���%2����$ %�����!� �1 �� ����� ��� �:�!� $ � �� ����� �� ��� �� ������ ��������� ���'��

��$� �� ���%2����$ 4=5 ���� $%�� 4=5 8�:�!� $ 4=5

�� � ������ ��'��� ��%$������� ����� � 2�� ��� ��� ���� �� ����� �� �� ������ ���������

B�6 ;; ; ; /; - � /� D������ �0 D� - <0 - D� �< DDJ��2 D; �� - 0; �D �� D; ��

8� �� 33 <� � ;- � �0 30 <

� *� ����� �� ��%��9�� ��� 2�� ���� ��� ��� ��*�

���� "� �2���! ����� ��� 4�� %��!�� ���5 �1 �������� ������ ���� ����� �� �!!������ � 2� ��� �%�!��� �$ ����� �1 !�$� ��

���%2����$ %�����!� �1 �� ����� ��� �:�!� $ � �� ����� �� ��� �� ������ ��������� ���'��

��$� �� ���%2����$ 4=5 ���� $%�� 4=5 8�:�!� $ 4=5

�%�!��� ��%$������� ����� � 2�� ��� ��� ���� �� ����� �� �� ������ ���������

�� ������" - - -- -- - - -- -�� ����� - -- - - 3- -- - --�� ���� �����" ;3 �3 - /� - �� ;3 �3�� ������ #��" /� 0 - /0 - - /< 0�� ���� �!���$�� $�� � 00 - �� - 0< � 00�� ��������� �� � D/ - <3 - D/ � D/�� ������� - -- - -- - - - -�� �"� ��� -- - - -- - - -- -�� "� ���� �� - -- - ; - -- - --�� "������" -- - - -- - - -- -�� ������" - - - - - - - -�� ������������" 0 /� - 0 - /� 0 /��� ��� ��� � < << 3 /� 0 0 0- 0

8� �� 33 <� � ;- � �0 30 <

� *� ����� �� ��%��9�� ��� 2�� ���� ��� ��� ��*�

�� ������ ���� �� ��%���!��� �� 82��� �� � ������ B�'��� </

� ��$ �� ������ ���� 6�� ����� �� �� ;<= �1 2� ���%���

�'���� �� 62�!2 !��9��� 2� !��!������ 1��� %��'����

� ����� �� 62�!2 � 6�� �����'�� 2� �� ������ ���� �� �

��! ����� �� �����$ �!!������ �� 2� %2$���%���� ><- <D

A������� �J �2A 2����?� 82� %�����!� �1 �� ������!

���� �� ��!2 � 2��2 %��!�� ��� �1 ���%��� !��%���� 6� 2

� 2�� ��%�� � >3 �- ��? !���� �� ��� � 2� �����!� �1

������� �� 2� ��%�!� 62�!2 �'���� 1��(��� %��������

!2����� �1 ��'������� �� !���� ���� ��� 2���1��� 1�7

'��� 2� � ����� $ �1 2� ��! ����� ��!�� ��� �� 82�

�� ������ ���� ����: 1���� �� 2�� � ��$ 4-��5 6�� ����

���� �� 2�� 2� ����:�� �� ����� �� � 2�� � ����� �� 62�!2

�� ������ ���� 6�� ����� �� 1��� %2$���%���� >3 �- ��?

�� 6�� '��$ ������� � 62� ,��� � ��� >��! 2����? 1����

�� � � ��$ ����!2��� 1�� �� ������ ���� �� ���'�� �1 !��%�

���6� �� ��������. �� 2� � ��$ � �� ������ ���� ����:

�1 -��3 6�� 1�����

82� ��� ������� ���� $%� �1 �� ����� 43<�;= �1 2�

� ��5 6�� ����� ����� ����! ����� ��� �����

86�� $ ����� �� 6��� %��� �'� �� 2� ��� 6� 2 ����7!�$

%������ �� ���� �'� 6� 2 ��� �%�!�9! %������ 1�� ���

������ & �� %������� 2� 2��� ����� �� 2�'� ��� 2�� ���

���� 4���- ���. ���/ ���0 �� ���15 ���� �! �� 6� 2

2� �%�!�9! �, %������ �� ���� !���� 2�'� ��6 ���

������ �����'�� �- ����� �� 4;�0=5 2�� �� 2 ��� ���

���� ����� ��� 9'� ����� �� 4��-=5 2�� ��� ��� ���

���� �����. ��� 2��� ����� �� 6��� �:�! � �� ������ !

��������� �� �� � �� ����� ��� 8� ��� C��6����� 2���

���� $%�� 2�'� �� ���� %��'�����$ ��%�� ��� 82���1���

2��� � ����� ���2 �� ���� !������ �� �� 2� ����!2 1��

���!�� ��� ���� � 6� 2 � 6���� �%�! ��� �1 �! ��� ���!�

2�$ !���� %����� ���� �! �'� $ ������ ��% ���� ��� ��%�7

��% ���� 4� 2�� 2�� 2� �%�!��� �� �� 2���5 ����! ��

M2�� 2� �� ���� $%� !��%��� ��� �1 2� �� ������!

���� ����� �� 6�� ����$��� � 6�� 1���� 2� ����

%2$���%���� ���%��� !�� ����� �� ������ ���� ����� ��

6� 2 ���� 2�� 2��� �� ����� ��� ���� � 2�� ��! �����

����� �� 6� 2 ���� !��%��: �� ���� $%�� !�� ������ 1���

�� 9'� �� �����. �� ��� �1 2��� !���� 2� !��%��: ��

���� $%�� 6��� � !������ ��� �1 2� ���%��� �� ����7

$%��� & 2�� ���� �2�6� 2� %������ ����1�� !�� �!!��

�� 6��� ��11���� � ����� �1 �� ������ ���� �� �� ���� ��7

'������� � ��!2 �� ���� ����! � ��� 6� �� ><� <<?.

�����'�� ���� ����1�� 2�� ���� ������ �� �� �� 6���

��11���� � ����� �1 �� ���"���� ������ �� 2� %2$���%����

>�?� & 6���� �� �� ���%������ �1 2� ���� !��%��: ��

������ ���� �� ���� $%�� 1���� �� 2� %����� � ��$ 6���

2� ����� �1 � !�� ��� ��� %��!��� �1 ��! ����� !���� !��7

������ ���%��� �� ���� $%��� &1 2�� 6��� !����! � 6����

!��9�� 2� �� ������ ���� !���� �� 1���� �� � '��� � �'�

!��� �� 2� ���1 !�%���� �1 �:!2������ ���� �! �� ������

82� %�����!� �1 ��� ����� 6�� ����!�� �� 6� 2 ��%$7

������� !�$� �� ���%2����$ ��� �:�!� $ �� 2� ��%���%7

���� �� ����� ��� 62����� ��� ���@�� ���� ����� 6���

����!�� �� 6� 2 ����� ���%2����$ ��� �:�!� $ �� 2�

���(�� � �� ������ ���������� 82�� ���� ����2�% ������

6� 2 2� !��!������ �1 ������� � ��� >;? ��� B���!��� � ���

>�3? 2� 2� $%� �1 �� ����� ���2 �� ������ 2� 1��� �1

2� !�$� �� ��� � � �:�!� $ �� !�� ��� � 6� 2 2� �� ��

��%�� � �1 �2�� >��? ��� ��� >�<?�

82� ����� %��%�� ��� �1 �� ������ ���� ����� �� ��7

����� �� 2��� � ��$ 2� 6��� �:�! 4//=5 !�� ��� � 6� 2

2� ����� � ��%�� �� �$ � 2���� �2�� >��? �2�6�� 2� /-=

�1 2� 0D �� ������ ���� ����� �� 1���� 6��� �� �:�!

������ ��"��� "�� �� ������ � � � � �����. ����C�

� ��� >�-? 1���� 2� ;D= �1 �- ����� �� 6��� �� �:�!

������ �� ���� �� ���� � � �� � ��� �� ���� ��� ����!

�� ���. 1�� 2������ ����2��� � ��� >�? �2�6�� 2� <0�0=

�1 2� 3--- �� ������ ���� ����� �� �� ����� 1��� ���%���

!����! �� 6����6��� 6��� �� �:�! � � 6��� ����� �1 ��7

��! �� & �� %������� 2� 2��� ���!��%��!��� ��� ��� � 2�

��11���� ����! �%�!��� ���� �� 2� �������$� �� � � ��17

1����!� �� 2� ��� ���� ��� �1 �� ������ ���� ���� $%��

��� �� 2�� �� �� !��� 2� 6���� �� �:%������ �$ 2�

2��2�� �������!�� ��'���� $ �1 2� ��%�!��

���� #� ���� $%�! 1��(���!��� �1 �������� ������ ���� ����� ��

1��� ��'���� ��� �%�!���

*������1 ����� �� ���� $%� ���!�� ���

<- ������ ������ ������ ������ ���� 3<�;;� ���� �0�3� ��� 4�%�!�9! �� ��!�������5� ���� 3�3 ������ ������ ������ ������

����� ���'��-

3 ��� 4�%�!�9! �� ��!�������5� ��-� ������ ���� ��� ������ ���� ���� -�0� ��� 4�%�!�9! �� ��!�������5� ���

����-�0

� ���� ���� -�0� ������ ������ ���� -�0� ������ ���� -�0� ������ ���� -�0 ������ ����� -�< ������ ������ ������ ����� -�< ������ ������ ���� ���� -�<� *� ��%��9!� ��� �1 ��$ ���� -�0

� ���%��� 2� 6��� %��� �'� 1�� ����7!�$ %������ ��� ���� �'� 1�� �,7;�,07� ��� �,<7/ %�������

3- �� ������� � ���

&� 2� %����� � ��$ �� �%%��:��� ��� � 2� ������!��

%�%��� ��� �1 �� ������ ���� 4'��� � �'� !���� ���@�� '�����

�%����5 %�� !�� �1 ���1 6�� � ��% ��� 82�� %�%��� ��� %��

��� ���� 2�� ���� �� ��� �� 1��� 2� ���� ��� 2� 2�� ����

��!�����$ � �� ��� 2��� ����� �� ��� ��'�� � ��!2 �� ��

%�%��� ��� �� ��� � 2�� 2� ���� ������ �1 ��! ����

1���� �� ���%���� G����� �� 6��� � ��� 3 � -� '����� ��

������ ���� !���� %�� !�� �1 ���'�� 6��� �� ������ 82���

'����� !�� ��� 6� 2 '����� �� 6��� � ��� � -� %�� !��

1���� �$ ��� 2 ��� ���!2� ><-? ��� 6� 2 2��� �1 ,���

>��! 2����? 62� 1���� �� 6��� ��� �- �%���� %�� !���

& �� '��$ %������� 2� 2��� ��11����!�� �1 ��� ����� �1

����� ��� !���� �� ��� � 2� ��� �1 2�� �2�!C �� 2���

����� ��� %��!������ � ������� � ���7�%���71������ ��7

!������������ 82�� !��%������ !���� ���� � 2� !��!��7

���� 2� 2� �� �� %�� �1 2� '����� !���� �1 �� ������ ����

�� ���'�� ��� �� '��� � �'� 1���� J�6�'�� � �� ��!�����$ �

��$ 2� 2� !��!������ 2�� ���� �� ����� �$ !��%�����

6� ��11���� � ����� 6� 2 ��11���� '��� �� �%�!���. 2���7

1��� 1�� 2�� � ����� ��� ������ � �2�� ���2 �� 2�� ��� �! �

�� ������ ���� 6�� 1���� �� ��� 2� �� � ������ ��'���

��� �� ��� �� ��� �1 2� �%�!��� �'���� ��� &� 2� � � �� �!��

� ��$ � 6�� �����'�� 2� 2� ������ �1 �� ������ ����

��� �� ��11�� �� �� �� � ������ ����� �� 6��� 0-- ���

�/-- ���� ��� ���� �1 2� %��� �%�!��� ���%��� ���� �

���� �� ������ �1 ����� �� 2�� 2� � 2���� ��������� 2�

!2���! ���� �!� �1 2� �� ������ ���� ����� �� 1���� ��

� � �� �!���$ �����9!�� ��11����!�� 6��� �����'�� �����

2� ��11���� '��� �� �%�!��� ���%��� �� ��11����!��

����� 2� �� � ������ ��'��� 6��� 1����� 82� ����� �� 6� 2

����� !�$� ��� ��� 2� ����� �� �:�! � �� ������ ���������

6��� ���� ������� �� 2� ������ ��'�� 2�� �� 2� � 2��

6�� & 6���� �� ��!�����$ � !���$ �� � �� ����� � ��$ �1

2� %�%��� ��� �1 ��% ����� �� 2� �� � ������ ����� � ���

�1 2��� �� ���� ���� ����2�% �� 6��� 2� ����! � �1 2��

����� ��� 2� %��� �%�!��� � 2�� �� � ��� �� �� ��C��6�

1�! �� 2� !���� ����! ��!2 � $%� �1 � ������ &� � %��7

���2�� ����$��� >/? � ���� �� ������ �1 ����� �� �1

�� ������ ���� 6��� 1���� �� 2� ������ ��'������� �1

6���2����� �� 2� ���� ������ ����� 2�� �� ��6�� ������

)��� 2� ������ � �� � �2�6� �� 2� � ��$ � �� ��19!��

� !��!���� 62� 2�� �� � ��� 2�� ���� �11�! �� �� ��!

���� ���� ��� ���� ��� ��!���� 2� �! ��� ������� �1

��! ���� �� 2� ���%��� � ����� !���� �� �� �� ��� ���

�� ������ ���� 2�� � ��� ���� ��� 2� ��!����� '������

2��� � �� & �� %������� 2� 2� �� ������ ���� �%���� %���

� 2� %��� ���'�� �$ ����� �1 2� 6��� �� �$ ����!

!�� �! 6� 2 2� ���� ������ %��� ������� ���� �� 2�

���'�� �� ������ ���� !�� ��'� �� � �%��� ���@�� '��� �7

�'� !��� 62��� 2� %�%��� ���� �1 ��11���� � ����� ���6

��� �!!������ � 2�����'�� �� � ��11���� 6�$ 2�� ��

2� ���� >A������� �J �2A 2����?� & �� � 2�� ��� 2�

2�$ !�� �� ����� �� �$ ���� %2$ �%2����� ����! � B� ��

2� ���1 ���@�� 2� ����! 1���� � 2� ���� �� 6� �� 62��� �

�����'��� �1 � ����� !�� �� ���� ����� ��� 2� !$!�� !��

�� ����� �� �� �� 2� ����� 82��� �2���� �� ���� 1�! ��� 2�

1�'�� 2� ��'���%��� �1 �%�!�9! �� ������ ���� ����'���

�� 2� ���'�� �� 2���2 �% � 2�� ��� �� ��11����!�� 2�'�

���� 1���� �� 2� ������ �1 �� ������ ���� ����� ��

����� 2� ��11���� '��� �� �%�!��� >�- <-?�

�!!������ � A������� >�2A 2����? ���'�� !���� �!

�� � �����'��� �1 �� ������ ���� � ����� �:�! ������

�%�!��� �1 ��1���� ��� ����! � 4���� �� ������ ���� ����'���

%����%�5� 82� 1�! � 2� 2� %����%� ����'�� �� ��� �1 2�

��� 1��(��� �$ 1���� �� ���'�� >3 �- ��? 2� 2�

%� ��� �1 2� !�$� �� %�� ��� 1���� 2� ��� �����

�� ������ ���� ���1 ����� �� �� ������� � 2� �1 �� ��!

���� ���� ����'��� %����%� ><-? ��� 2� �� 2� %�����

� ��$ 2� ��� 1��(��� �� ����� ��� ��� 4%����� ��

����'��� �:�! � ��%���% ����� �� 2���2 �� �:!����'��$5

��� 6���2 � 2� 2���$� ��� �1 2� ���� ������ �1 ��7

1���� ��� �� 6� 2�� � ���� 2� B�%���% ��� ��� � ��

%��!����$ 2�� ����� 2� �� ��� ���!�% ���� � 2� ��$

�:���� M2� �� � ��� 1�� 1��� ����� %��'�� �� 62� 2��

%��� � ���� ��� � �� ��� ���� ����2�% 6� 2 �� ������ ����

� 9�2 ������ 2� ����! �%�!��� 2� 1��� �� 2�� ��

��� 2 ��� ���!2� ><-? %��%����� )�� 2�� ������ � �� �1

�������� �� ���� � !�� ���� � ��$��� 2� �!����$ �1 2��

��!���������� �� ����� � ���!��� � � � ��2�'��� 2��� � �

��� �� ���! ���� 6� 2 � 2�� ����������

&� ������$ ����� ��� ������� ��� ��� ���� $%�! ���

�:�!�����!�� !2���! ����� ��� �1 �� ������ ���� 1��� �

�%�!��� 6� 2�� 2� ����� ��� !����! �� � 2��� ��11����

�� � ���� �� 2� ��������� ������ 1���� 6��� %��1������

�� ������ ���� 6�� !��9���� � �� �����$ �!!�� �� %���

%2$����%2����� *� �� � ������ �� �%�!���7�%�!�9! ��� ����7

��� 6�� 1����� �����'�� !2���! ����� ��� �1 2� ����� ��

��'����� ���$ ��11���� ���� $%�� ��!������ ���� ����

��� ���� �� %��'�����$ ��%�� ���

��������������

82� �� 2��� 2��C A�� A����� ������ 1�� !�� �!�� ��'��6 �1

2� �����!��% � 82�� � ��$ 2�� ���� !������ �� 6� 2 2�

9���!��� ��%%�� �1 ��B�&E*�&�� !�� ��! <3-7-;73��7

/; 2� ���%���!��#� %��� &�'�� ���!����� �����#��!�� 4�&�5

�� ������ ���� �� ��%���!��� �� 82��� �� � ������ B�'��� 3

��� � %�� ������ � �!2�����2�% �6����� �$ ����!�� E�7

%��O��� �� ���%���!��#� &� ����!����� 4�E�&5 4����5�

���������

� �C2��� �, B$���� EM P2��� QH ���%�� A, �����!C AE

4//;5 � D� ��*� ���� �������!��� ��� %���� 1�� ���� �97

!� ��� �1 �������� ������ ���� ����� �� 1��� �2��% K��!��

, &�'�� ��� �� 2�� D/+�<F�

�� ����2��� � ,���� � ������6� � �� , E���� A, ����� �

�� ����� � ������� � ������ JA 4//;5 *� ���� ����� �� �1

�������� ������ ���� 6����6��� ��� ���� ��� !2���! �����7

��� ��� �! �'� $ ������ ����! %�� �� , &�'�� ��� �� 2��

;-+3/FD0

�� ���'� � ������� � B�#%�� B �� �'���� J ����!� � �� �� �

�� �� � B��� B *��O��7G����� � ������#� � Q��� ��� �

4//05 �2���! ����� ��� �1 �� ����� �� � ��:�!�� ��������

������ ���� � ���� !����! ���� �%%� E�'���� ��!������

D<+</D3F</;�

<� ����� �� � �� ��!�� , 4//;5 *��'�� ��%�!��� �� ��%���!���

�� ��� ����� �� ��������� *�'�� D+�-F�/

3� ����� �� � 4//;5 ��%���!���� &�+ ,� �� �� 4��5 )���� �� ��

E:%���!��#� �� �#��!� G�� � ���� �� �� ��� ��� �� E�%�����

������

D� �������� � 4/��5 ��%���!����� !��'�� ����$ �!�� ���������

+DDF<3

;� ������� *� ������ G� M����� �M E'��� � ������ ��

4//5 �����! ��� �1 ����! �!���� �! �'� $ �1 �������� ����!

�� ���� � ����� �$ %��$������ !2��� ���! ��� %����! %��9����

�%%� E�'���� ��!������ 3;+�-3;F�-D

0� ����� , ��'�������� B Q��� ��� � �� �� � �� �� �

������ E B��� B ���'� � 4//<5 ��� ����$��� �1 2� ���

����! �!���� !�$� �� 1����$ ����� 1��� �������� ������ �����

�%%� E�'���� ��!������ D-+�3�F�3D

/� ����� , �� �� � Q��� ��� � ��R���!� B ���'� � 4//35

�%�!�9! ��� %������ ����! �� � ���� �1$ ��/ ��� ��///

����� 6� 2�� � �������� ������ ���� � ���� !����! ���� �%%�

E�'���� ��!������ D+�0�DF�0�

-� �2����� �B ���1���� � 4//�5 ���� �!� $ �1 ���1 ��� ��$ ��

���� ��� � %2� ��$� 2���� ���2 �!!���� ���� )��! E!��

;+�03F�/<

� �2�������� *� )���� �� �����$ J� 4/0;5 �����$ 6�� ���

�� � ��%�!�� %������ ���� )��! E!�� +�F

�� �2��!� �* M����$ �, 4//�5 &���� ��� ��� �:�!� $ �1 ��!

������ ������ ���� 1��� ����� ��� 2��� � � �� *�6 P�������

, &�'�� ��� �� 2�� D+�<<F�<;

�� ����(��� � 4/05 �� &� ���� �� �$� �� �1 ������9!� ��� �1

)��6������ ���� �� �������� ���'���� $ ����� *�6 H��C

<� A������� �J 4//D5 E� ��� �:���7%����!��� � ����� �1 ��!

������ ������ ���� ����� �� 1��� 1���� B� �%%� ��!������

��+<3F3-

3� A������� �J J����� �� �������� ,� E�������� , 4//;5

*� ���� �!!�����!� �1 �������� ������ ���� �� !������ 1�7

����� ��� �� ����! � ����!�� �� 6� 2 !������ !��%�� , �%%�

��!������ 0�+�3�F�30

D� A������� �J �����7J����� � E�������� , ��� � �J

4//05 *� ���� �!!�����!� �1 �������� ������ ���� �� �����

1������� M , ��!������ ��� �!2��� <+��/F�<�

;� J�� �6� � B�$ �M �2�� � 4//�5 *� �����$ �!!������

�������� ������ ���� �� &��������� , �%%� ��! ����� ;�+-0F

0� J������� E ������ A� ����� & B�!��� �7� �2�� H

��2����� , B�R'���� � J���� & ��'��S$ � ���� S �7�

4//05 ���� �! ��'���� $ �1 �������� � ����� ������ ����

����� �� 1��� �� ���� ����!��� ���� ��!������ �;+0-F0;

/� J���$� P P���� H M���:� A 4�---5 ���%��� ��� ���

�!�����!�� ��� ���� ��� �1 ��$ %�� ���� ��� 2��� ���� $%�� �1

�������� ������ ���� ����� �� 1��� 6���2����� �� �2����

, &�'�� ��� �� 2�� ;D+/F/;

�-� &���� � , ��� H )�������� �A �����6 � ������� , )����� ,

��������� � 4//05 E�'������� �� ��� ���� ��� ��� ��'���� $

�1 �������� ������ ���� �� �%���� �$� �� �%%� ��!������

�+/;F-D

�� ,��� M� ���%���� �2� ������ E� � �'��� �) 4///5 ����

�$� ��� �!�+ � �2$������ �! �%%���!2� ������� ����! ���7

������� ��

��� ������ � ����� � ������ ) 4//<5 &���� ��� �1 ��������

������ ���� 1��� � ���� ���!!� ��� 2����� "� � ����

4)5� �%%� E�'���� ��!������ D-+/F�3

��� ���� � ����2 � 4�---5 *� ���� �!!�����!� �1 ��������

������ ���� �� ���������� %2$���%���� �� 2� *�6 A��2�

������ �1 &����� M , ��!������ ��� �!2��� D+D;/FD0�

�<� ��� J� 4�---5 ���%��� �'� � ��$ �1 2� 1��(���!$ K�������

���� $%� !�$� �� �2�%� �:�!� $ ��� �� ���� !�� �� � �1

�������� ������ ���� 1��� 2��� ��'������� �� ���� ��7

!������ <+�3-F�3D

�3� B���!��� A A���#!���� � B�!��� �7� 4//�5 A�'���� $ �1

�������� ������ ���� �:��� ��� ������ &�+ � E� 6�� �� ,�

���$ �, �����$ � J���� 4���5 �������� ������ ���� ��

E�'������� �� ���%�� �!���+ 82���$ ��� ���! �!�� ,�2� M�7

��$ ��� ���� B����� %% �;FD/

�D� ����� � ����C� E *�C����� H J� ��� 8 �2�� � 4�---5

��!�'��$ �1 �������� ������ ���� 1��� ������ ������� � �1

,�%��� ���� ��!������ <-+<0F<��

�;� ���(��� �� A��� ,��� ������� �� 4�---5 �!������� ���

!2���! ����� ��� �1 �������� ������ ���� ����� �� 1��� ������

1�� 2� %�����!� �1 !����% ���7�%�!�9! �� ������ ��!������

��� 3<+�33F�D�

�0� ��� �� ��M 8��'��� �� 4/0/5 M����6��� �������!� ���

��� ���� ��� �1 �������� ������ ���� ����� ��� �%%� E�'����

��!������ 33+�<�;F�<<�

�/� �����6� �� E���� A, �� , ,���� � ������ JA 4//�5

A�� ���� ��� 1��(���!$ ��� ��'���� $ �1 �������� ������ ����

�� �� ������ 1��� ����� �%%� E�'���� ��!������ 30+�<<F�3-

�-� ����C� E &!2��� �� 8 J6��� �7J ���C H� ��� �2 J

J���!2� � �2�� � 4///5 ���(�� $ �1 �������� ������ ����

�� %2$���%����� �1 ��������� ��� 2����!���� %��� � �� ,�7

%��� , �%%� ��!������ 0D+/;/F/0<

3� �� ������� � ���

�� *�������� � �2��� ����� �� ����� � ����� * 4//05 E17

1�! �1 ��! ����� ��� ���� ��� ��� �! �'� $ �� !�� ���� ����

����1�� �� 2� %2$���%���� �1 2� ���2 ���� 4��� ����

#������5� �%%� E�'���� ��!������ D<+/-�F/-/

��� �2�� � 4//D5 �������� ������ ���� %�%��� ��� �� �����$

�!!������ �� �������$ ���'��+ � %������� ����!� �1 2� %�%7

��� ���� ����!�� �� 6� 2 ���C6���7������� ����! ������ , �%%�

��! ����� 0-+3DFD<

��� ����� � �� �� M ������ �� ��� �$� �E A� ��� �! J

4//�5 � ��6 ���� $%� �1 �������� ������ ���� 1��� ��7

������ �:�! � ���(�� � ���'��� , &�'�� ��� �� 2�� 3/+//F-�

�<� ����� � A��� 8 ��� ��%� * �� ���� �� 8���$� �� 4//D5

���!2���!�� ����������!�� ��� �:�!�����!�� !2���! ���� �!�

�1 2� !�$� �� %�� ���� �1 �������� ������ ���� ����%

" � ����� ��� &�� ��6���� ���� /+��F��;

�3� ����� )� 4/0/5 &���� ��� ��� ���� �9!� ��� �1 ������! ����

�%���71������ ��! ���� &�+ �� J��6��� 4��5 ��� �!2�����$

J������C� � ��������� ������ ����� *�6 H��C %% �;F3D

�D� ����� )� 4//�5 �$� ��� �!� ��� �!����$ �1 ��������� &�+ �B

������2��� ,� J�!2 � B���C 4���5 �������� �������� ���

� 2�� ����7���� �'� ��! ����� �����!�� ��!�� $ 1�� ��!��7

������$ M��2��� �� A� %% �FD

�;� ������ � ����� � ��2��� � ����� J B�$ �M J�� �6� �

&���C� 8 4//05 *�'�� �������� ������ ���� ����'��� ��$�&��

� ����� ����� �� 1��� �������$ ���'�� �� &��������� �%%�

E� ���� P��� ��+F<

�0� �2���$ JJ J��� �B 4/D35 ����7������� �1 2� ���'�� �1

���� *�! ��� �%�!��� �� � ���%�� �� �9!��� ������� , E!��

E� ���� 30+3��F3�<

�/� ��� 2 �� ����$ ,M 4//05 E�'������� �� %����� ��!� �1

�������� ������ ���� �%���� 1����6��� ������ �%%��!� ����

, &�'�� ��� �� 2�� ;+�D�F�D;

<-� ��� 2 �� ���!2� �� 4//5 82� %2$���%���� �� � ����!� �1

�������� ������ ���� '����� �� �%%� E�'���� ��!������

3;+�F�3

<� ���� 2 �J� ���� *� �2��%� �E J�� ,� 4���5 4/0D5

�����$T� ������ �1 �$� ��� �! ��! �������$ '�� �� M�������

U M��C��� ��� �����

<�� 82���$ & )��!2��E 4//;5 &��� �9!� ��� ����� ��� !�� ��� ���

%�����'� ���< �1 �� ���%� 2�����! ��! ����� &�+ �B B�!�$ 4��5

������ �1 8�!2��(��� �� &���! �� 2����$� �!�����! �����

B������ %% 33F;;

<�� 82���� A,& ������ �M M2�%%� ,� �������� ,� 4�---5

������� ����1�� �� 6��� 2� �������� ������ ���� ����%�7

!��� %����%� ��� � � ������ �� ������ ��$ !�� ��� ��� ����

��� �� ��%���% ���� ��� !����% ���� ���'��� �%%� E�'����

��!������ DD+0F�<

<<� 82���� A,& ������ �M M2�%%� ,� �������� ,� 4�--5

������� ����1�� �� 6��� 2� �������� ������ ���� ����%�7

!��� ��� � ���� � ����� �� ������ ��$ !�� ��� ��'�� 6� �� ���

��% ���� ���'��� �%%� E�'���� ��!������ D;+��-F��0

<3� 8���!�7� ������� � ����!$ �M 4//�5 � ��� �� �$����!�

��� � � ��%�� ��!� � !����� ���� �� 6� ����1���� ���

�%�!��� & G�A �11�! � �� 2� ������� � ��� �� ���%����� �

���2 K�!C�� ��!������ /<+�00F�/<

<D� G�� )���C��2�$��� � 4//�5 82� !2������� �1 ��������

������ ����� &�+ � E� 6�� �� ,� ���$ �, �����$ � J����

4���5 �������� ������ ����� �� E�'������� �� ���%�� �!���+

82���$ ��� ���! �!�� ,�2� M���$ ��� ���� B����� %% F

�3

<;� M������� � )���� �� �����$ J� 4/0/5 ���� ����2�%�

����� ���1 !��� ��! ��� !�� ���1 �����'� $ ��� ���2 ��'�7

������ �� ����1���� %��� � �� 2� ����� ��� � �� *� �7

����� ��+/0F�

�� ������ ���� �� ��%���!��� �� 82��� �� � ������ B�'��� 3�