tipe2 kultur

8/14/2019 tipe2 kultur

1/30

KULTUR JARINGAN TANAMAN

SURYA NINGSI, S.Si.,Apt.


2/30

Teknik Kultur Jaringan

Suatu metode untuk mengisolasi bagian daritanaman seperti protoplasma, sel, sekelompok sel,jaringan, dan organ serta menumbuhkan dalamkondisi aseptik sehingga dapat memperbanyak diridan berdiferensiasi menjadi tanaman utuh


3/30

Prinsip Dasar Kultur Jaringan

didasarkan atas tiga kemampuan dasar daritanaman, yaitu:

1.Totipotensi

2.Rediferensiasi

3.Kompetensi


4/30


5/30

Rediferensiasi

kemampuan sel-sel masak (mature) kembalimenjadi ke kondisi meristematik danberkembang dari satu titik pertumbuhan baruyang diikuti oleh rediferensiasi yang mampumelakukan reorganisasi manjadi organ baru.


6/30

Kompetensi

Menggambarkan potensi endogen dari sel ataujaringan untuk tumbuh dan berkembang dalamsatu jalur tertentu.

Contohnya embrioagenikali kompeten cel adalahkemampuan untuk berkembang menjadi embrio

fungsional penuh.


7/30

Tipe-tipe Kultur

Berdasarkan macam eksplan yang digunakan :

1.Kultur organ

2.Kultur kalus

3.Kultur suspensi sel

4.Kultur protoplasma

5.Kultur haploid


8/30

Kultur Organ

Diinisiasi dari bagian-bagian tanaman sepertiujung akar, pucuk aksilar,tangkai daun, helaiandaun, buku batang, akar, ujung pucuk (meristemdengan beberapa primordia daun), dan embrio(biji)


9/30


10/30


11/30

Jaringam meristem adalah jaringan mudayang terdiri dari sekelompok sel-sel tumbuhanyang aktif membelah.

Sel-sel meristem membelah terus untukmenghasilkan sel-sel baru


12/30

Kultur Kalus

merupakan kultur yang menggunakan jaringan(sekumpulan sel) biasanya berupa jaringanparenkim sebagai bahan eksplannya.

Sekumpulan sel yang tidak terorganisir;

Kalus adalah massa sel yang tidak terdiferensiasi,

terdiri dari sel-sel parenkim yang muncul dari sel-sel jaringan induk yang sedang membelah danbiasanya terjadi di tempat irisan untuk menutupluka dalam media


13/30


14/30

Kultur suspensi sel

Kultur sel bebas atau agregat sel kecil dalammedia cair dengan pengocokan, umumnyadiinisiasi dari kalus

pemeliharaan sel, tunggal maupun gabunganbeberapa sel, dalam medium cair dan lingkungan

buatan yang steril. Kultur suspensi sel terdiri ataspopulasi sel dengan laju pertumbuhan yang cepatkarena seluruh permukaan sel dapat kontaklangsung dengan medium nutrisi


15/30

Metode kultur suspensi sel dapat digunakansebagai sarana untuk produksi metabolitsekunder. Hal ini dapat terjadi karena setiap seltumbuhan yang diisolasi dari tumbuhan

induknya mempunyai potensi genetik danfisiologi yang sama dengan induknya

Sifat ini menyebabkan metabolit sekunder yangdihasilkan oleh tanaman induk dapat pula

dihasilkan pada sel yang dikultur secara in vitro


16/30


17/30

Kultur protoplasma

Sel-sel muda yang diinisiasi dalam media cairkemudian dihilangkan dinding selnya denganmenggunakan enzim. Protoplasma kemudiandibiarkan membelah diri dan membentuk dindingkembali pada media padat


18/30

Isolasi protoplasma dapat dilakukan dengandua cara:

1. Metode mekanikal

isolasi protoplasma dilakukan dengan caramengupas dinding sel menggunakan alatbedah mikro

2. Metode enzimatik

Isolasi protoplasma menggunakan bantuanenzim


19/30

Enzim yang digunakan untuk menghancurkan

dinding sel tumbuhan umumnya ada 3, yaitu:a) Cellulase untuk menghancurkan selluloseb) Hemicellulase untuk menghancurkan

hemisellulosec) Pectinase untuk menghancurkan pektin.


20/30

Jaringan tanaman yang digunakan untuk isolasi

protoplasma ini beragam, umumnya jaringanyang lebih muda dan berasal dari tanaman yangmempunyai umur fisiologis muda, seperti pucuk

muda (kecambah, bibit, plantlet), dan pucukadventif hasil pangkasan. Protoplasma dari seljaringan tersebut lebih mudah diisolasiprotoplasmanya karena dinding selnya masih

sederhana Sumber protoplasma selain diperoleh dari organ

tersebut di atas tetapi juga berasal dari kalus dansel suspensi.


21/30

Kultur protoplasma dapat digunakan untukberbagai macam tujuan seperti perbanyakan danuntuk memperoleh varietas baru

Teknik yang digunakan untuk memperolehhibrida ini antara lain perlakuan protoplasmadengan mutagen dan manipulasi genetikditingkat sel melalui fusi (penggabungan) dua

protoplasma dari varietas atau spesies yangberbeda (hibridisasi somatik)


22/30

Kultur haploid

kultur yang berasal dari bagian reproduktiftanaman, yakni: kepalasari/ anther (kulturanther/kultur mikrospora), tepungsari/ pollen(kutur pollen), ovule (kultur ovule), sehingga dapat

dihasilkan tanaman haploid dan mendapatkantanaman homozigot.


23/30

Kultur antera adalah kultur aseptik antera untukmemproduksi kalus atau tanaman haploid dari mikrospora

Antera mengandung serbuk sari (polen), sehingga kulturantera berarti mengikutsertakan polen didalamnya. Polen

yang masih muda (immature) atau mikrospora yangterkandung dalam antera dapat secara langsung

beregenerasi membentuk embrio, disebut androgenesis,atau membentuk jaringan kalus yang selanjutnya dapatdiinduksi untuk bergenerasi menjadi tanaman dibawahpengaruh zat pengatur tumbuh yang terkandung dalammedia tanam. Polen bersifat haploid, dan tentunya sel-sel

yang diproduksi oleh polen selama dikultur adalah haploidpula. Metoda lain untuk memproduksi tanaman haploidadalah dengan kultur ovul atau ovari (prosesnya disebutgynogenesis)


24/30


25/30


26/30

Tahapan pengerjaan kultur jaringan

Meliputi kegiatan:

1.Persiapan : media, bahan tanaman

2.Isolasi dan penanaman

3.Inkubasi dan penyimpanan kultur (subkultur)

4.Aklimatisasi


27/30


28/30


29/30

Laboratorium Kultur Jaringan Hendaknya memiliki luas yang memadai agar

dapat berfungsi secara maksimal

Pertumbuhan eksplan atau inokulumdiusahakan dalam lingkungan aseptik danterkendali

Pembagian ruangan yang tepat Mempunyai udara yang bersih, tidak banyakdebu dan polutan


30/30

Pembagian Ruangan LaboratoriumKultur Jaringan

Ruang persiapan

Ruang transfer

Ruang kultur

Ruang stok

Ruang mikroskop atau ruang analisa

Ruang timbang Ruang aklimatisasi

tipe2 kultur

Documents

Transcript of tipe2 kultur