Teknik Isolasi Biakan Murni

Wisnu Satrio Herlambang (116275)Yeni Dwija Cahyanti (116276)

Pendahuluan

• Isolasi mikroba adalah memisahkan mikroba satu dengan mikroba lain yang berasal dari campuran berbagai mikroba.

• Inokulasi adalah penanaman mikroba.• Isolasi mikroba dapat dilakukan dengan cara

menumbuhkan (menanam) mikroba dalam medium padat atau medium cair.

Langkah Inokulasi dan Isolasi Mikroba

• Menyiapkan Ruangan • Pemindahan dengan kawat inokulasi• Pemindahan dengan pipet

Teknik Biakan Murni

1. Cara Pengenceran 2. Cara Penuangan 3. Cara Penggesekan / Penggoresan4. Cara Penyebaran (Agarsebar)5. Cara Pengucilan Satu Sel (single cell isolation)6. Cara Inokulasi pada Hewan

Teknik Biakan Murni

1. Cara Pengenceran

Suspensi berupa

campuran spesies diencerkan dlm

satu tabung

Diambil 1 mL untuk

diencerkan

Dari enceran yg kedua diambil 1mL untuk

diencerkan lbh lnjut

0,1 mL disebar pada medium

padat

Koloni tumbuh dalam mediumBiakan murni

2. Cara Penuangan

NB: penuangan pada cawan petri menggunakan agar-agar sebagai pengganti gelatin

Teknik Biakan Murni

Ambil sedikit sampel campuran bakteri yg sudah

diencerkan

Disebar ke medium dari kaldu dan gelatin encer

Medium mengental

Nampak koloni

3. Cara Penggesekan / Penggoresan(+) penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang

terpisah(-) bakteri-bakteri anaerob tidak dapat tumbuhYang perlu diperhatikan:• Gunakan ose yang dingin untuk menggores permukaan• Waktu menggores, ose dibiarkan meluncur di atas permukaan

lempengan• Ose harus dipijarkan setelah menggores suatu daerah• Menggunakan tutup cawan petri untuk melindungi permukaan• Membalikkan lempeng untuk mencegah air kondensasi jatuh di

atas permukaan

Teknik Biakan Murni

Teknik Penggesekan

a. Goresan T

b. Goresan Kuadran

c. Goresan Radian

d. Goresan Sinambung

4. Cara Penyebaran (Agarsebar)

Teknik Biakan Murni

Pengenceran sama seperti

cara penuangan

Pipet 0,1 mL cairan dari botol

pengencer

Biarkan cairan mengalir ke atas permukaan agar

Cairan sampel di sebarkan dg penyebar

yg terbuat dr gelkas

Sterilisasi penyebaran dilakukan dg mencelupkan ke alkohol, kemudian

dipanaskan sehingga alkohol terbakar habis.Penyebar didinginkan dahulu, penyebaran

cairan sampel dilakukan dg memutar

5. Cara Pengucilan Satu Sel (Single Cell Isolation)

Teknik Biakan Murni

Menggunakan alat mikropipet yg

ditempatkan pada mikromanipulator

Buat beberapa tetesan

bergantung pada kaca penutup dg

mikropipet

Tampak suatu tetesan yg

mengandung satu bakteri

Tetesan dipindahkan ke suatu medium

encer

Diperoleh biakan murni

6. Cara Inokulasi pada Hewan

Teknik Biakan Murni