Orrline JSV 33 (2), Desember 2015

r-I

L- {,\

Terakreditasi oleh Dir.ien Penguatan Riset dan Pengembangan Kemenristek DiktiSK No : UEIKPT/2o15, tanggal 21 September 2015

FAKUITAS KEDOKTERAN HEWAN, UNIVERSITAS GADJAH MADA

BFKER]A SAI\,1A DENGAN PERHIMPUNAN DOKTER HEWAN INDONESIA

JURNAL SAIN VETERINER

Ketua Dewan PenyuntingAris Haryanto

wakil Ketua Dewan PenyuntingAsustina Dwi Wijayanti

Penyunting PelaksanaAmelia HanaD c!ira ,{nggracni

Konsultan PenyuntingSentot Sanlosa (Juslus-Licbig Univcrsity, Giessen, Jerman)Tutut Herawan (Univcrsity of Malaya, Malaysia)

Pelaksana TeknikEndah ChoiriyahSurohlniatun

Mitra Bebestari-lbd. LaticlToleng (Universitas Hasanudin)Asung Janika Sitasiwi (Universitas Diponegoro)Asustin Indrawati (lnstitut Pertanian Bogor)Alim lsnansetyo (Universitas Gadjah Mada.)

Anak Agung Ayu Mirah Adi (Universitas Udayana)An\rar Rosyidi (Universitas Mataram)

Budi Setiadi Daryono (Universitas Gadjah Mada)

Darmawi (Universitas Syiah Kuala)Deni Noviana (lnstitut Peftanian Bogor)Dloko winarso (Universitas Brawijaya)Galuh Tresnani (Universitas Mataram)Gusti Ayu Yuniati Kencana (Universitas Udayana)Hario Punto Dewo Siswanto (Universitas

-{irlangga)Heru Nurcahyo (Universitas Negeri Yogyakarta)

I Gusti Ngurah Kade Mahardika (UniversitasI-dayana)I Wayan Batan (Universilas Udayana)

I wayan Suardana (Universitas Udayana)Ida Ayu Pasti Apsari (Universitas Udayana)Ietje Wientarsih (lnsitut Pertanian Bogor)Ismartoyo (UniveIsitas Hasanudin)M- Hanafiah (Universitas Syiah Kuala)Maxs U.E. Sanam (Universilas UNDANA)Min Rahminiwati (Institut Pcrtanian Bogor)Mufasirin (Universitas Airlangga)Nastiti Wijayanti (Univcrsitas Gadjah Mada)Ni wayan Kumiani Kada (Institut PertanianBogor.)Retno Murwanti (Universitas Gadjah Mada)

Sapto Yuliani (Universitas Ahmad Dahlan)Sri Murwani (Universitas Brawijaya)Susilo Hadi (Universitas Cadjah Mada)

Suwamo (Universitas Airlangga)Tongku N. Siregar (Universitas Syiah Kuala)wiwik Misaco Yuniarti (Universitas Airlangga)

Dicctak olch :

KALIWANG] OFFSETil. Monjali 93 Yogyaka(a Telp. (0271) 566307

JSv ll (2). Desember 2015 JIJIII\TAI-SAIN VETERINER

ISSN:0126-0421

142

DAFTAR ISI

Moniroring of Physiological ald PaEsites Sutus ofBasean Deer (,4rn (,n1ri) in Its Habitat as a Baseline for Wildlife 126 133

ConserationEndeavorWisnt Nurcahlo, Deita AngArdeni, M. A. t" on

Pola ?cwarisan CreJ/ Ayan ( Ga 6Eallusda 5lirats. Linnaeus 1758),8a.f.rcsr Hasil Pe6ilangan Ayam Mahkota Dengan

Budi Setiudi Ddryana, Utrl Ekld Ptspita

Suplementasi Calcitriol Mcnurunkan Risiko Osteoporo!isTikus Ovariektomillartit i'1 gs i h, Deri ta A n ggta i n i

Karakterisasi Sr/pl.r/a.o.rrJ arl€ls Isolat Susu Sapi PcEh Berdasai Keberadaan Protein A pada Media .t",7,, S,l ,4aalterhad ap Altivitas Fago silo sis S eca.a /, ,4rrcFajat Bu.li Lestari, Siti lsrnw Oktario Salasia

Deteksi Molekuler Virus lnlectiaus BtnalTerdiagnosa lenyakit IBD.Mi.hael Harya.li Wbo||o, Radhilat Fa.liaa

143 - t48

149 155

156 - 166D,rerre (lBD) pada Sample BuBa Fabrisius yan8 Diporoleh da.i Ayam

Dito Anggotu, Sidnd Afianto, Surya Ananu, Agnesia Endang Tti Haltuti

Daya Ovicidal Ekstak Kulit B ohMnl^(Cdlohph ptuceta) Tcfiadap Hoenonthts to?Iorrd secara h uir?t Gusti Kanang Okt tlna$di1. Wstu Nutcahw.Joka Prostava Kurnnlsih

?erbandiryan Aktivitas Linimentun Ekslrak Koral Kelimutu dan Linimentumleucochepalo)'tethrdap Penyembuhan Scabies Pada Kelin.i (Oryctoldgus cun i. lus)A s i h R o haru. M na nt i Cnndtu riela

Eksfak Daun Lamroro (ree.aera

Katian Fenotip Kuskus (Famil; Pholaageritlae) di Penangkaran Desa Lumoli, Kccanratan Pitu. Maluku Cuscus (FamilyPhdlaryeti.lde)PhenotypeStudy in Lumoli Rural District Breeding Fam. Piru, MalukuI'tarthirts Us anr, Hasan Tuaputy Pielt K.tkhiha

Analish Cemaran S/aprtla.o..rr aarerr Pada Gelas. Damh Segar. dan Jamtr denSan Ramuan Darah Ular Kobm Jawa lNaja 190 - 194

195 - 20:t

Banda 205 - 215

Raza Azizah Prinotika, Wdasdo Sri Nugtuho, Rdis Dii Abddi

Kamkterisasi Gm Non Struktural I (NSI) Virus Avian InflueDza pada Isolat lrik Tahun 2013NttKhrskiHida),a ta, ltldya Asnara, M HaryadiWiba o

Dercksi dan Identifikasi Cemaran Vims Avian Influenza pada Pasar Tradisional di Kabupaten Aceh Besar dan Kota

Te"tu Zahial Helni, Rika vulisha, Bu.lionto Padaitat, Charles Ranssa Tabbu, ,4 tis Harylnto

Su1,a /lnanu, Tri Utuari, M. Ha4a.li Wboio, SidkaAltanto

Deteksi Edwtrdsi€lla lctalui pada Ikan dengan Metode Co-Agglutination TeslMiliahul Fikat, Surla /1nana, Suhado R.T Sinanjuntak, M.tioAti vr.lista

Idend l'lkasi Bakleri Asam Laktat Hasil lsolai dari Kolon Sapi Bali sebagai Probioiik melaluiAnalhis Cen I 65 IRNADewa Gede Agtue Wdydhldka, I Dewd Mo.le Sulaaha, t ttroron Suahiana

Pengcmbangan Deteksj ..4 erc ronas hldraphila patl^1k^nN1l^ (Orca.htortis riloticus) dengan Metoda Agar Gel Presipitasi

222 - 221

228 - 233

Pergujian Toksisitd Akul Obat Herbal ?ada Mencit Berdasarkan Oryanization for Econo ic Co-aperalio and 234 239DeEtopnekt I0ECD)UrLktAdiS6nito. ABusti"aDwi Wiald i,Ida Fit iaka, Puspa Inkat Sa/i

Efek Eksbak Etanol Daun Pepaya terhadap Jumlah rryp4roro,r4 evo,ri pada Paru-?am dan Limpa Mencit

Dewi Ratka Sari, Anki Nu iani, Heri Bu.li Saftaso

214 - 241

CambarDepsn: Kajian fenotif Kuskus (fa]J,ily Phalangerideae) di penangkaran desa Limoli, kecamatan Piru,Malr].tu. Mafiinus Lisnary,, Hasd Tuaputty dan Pieter Kakis ina. hal: 180 189-

III

JSv 33 (2). Desember 2015 JIJFTNAI-SAIN VETERIITER

Identifikasi Bakteri Asam Laktat Isolat 9A. dari Kolon Sapi Bali sebagaiProhiotik melalui Analisis Gen l65 rRNA

(studies on Lactic Acid Bacteria Isolate gAfrom Bali Cattle' Colan as a Probiotic Through 165rRNA Gene Anab)sis)

Dewa Gede Agung Widyadnyana', I Dewa Maale Sukrama', I Wayan Suardana''

'Mahasiswa, Fakultas Kedokteran Hewan; ' Laborato um Mikrobiologi Klinik Fakultas Kedokteran;rlaboratorium Kesmavet, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Udayana

')Corresponding author: wayan suardana@unud.ac.id

ABSTRACT

Lactic acid bacteria (LAB) is a bacterium that ferment lactose to produce lactic acid as the main product.

Morcover, LAB also known potentially prcducing bacteriosins which has antimicrobial activity. On the order

hands, Bali cattle has many advantages, one ofrhem is their adaptation to survive in less nutritious food Their

characteristics were believeal as a soul.ce ofpotentialLAB. Tle aims ofstudy was to discoverthe aotimicrobial

activity ofLAB isolate 9A isolated fiom colon ofbali cattle, so that it can be used as a probiotic, and to analyze

the nucleotides sequences of 165 rRNA gene as well as thei/s phylogenetic tlee. The LAB isolates were

cultivated on MRS broth, followed by catalase test and stained with Gram staining. The antimicrobial activitywas conflrmatedby testing them against pathogen bacteri^(Escherichia coli fid Staphylococcus aureus). The

molecular analysei in orde; to confim the strain ofisolate was done by amplification ofthe 165 rRNA gene by

using B27F and U 1492R primers... The result ofstudy showed antimicrobial activity ofLAB isolate 9Aagainst

the growth ofs.d ers is3'7.56 61.47y" wirh an average 50.3502 compared antibiotic conffol. Onth€ other

hands. the isolate showed no antimicrobial activity to Escheichia coli. The isolate was i4entified as

Streptococcus bovis (99% similarity with bootstrap value 1 00).

Ke),\ ords: Lactic acidbacteria, bali cattle's colon, antimicrobial activiry,l65 rRNAgene.

ABSTRAK

Bakteri asam laktat (BAl) merupakan bakteri yang mampu memfementasi laktosa dan mengliasilkan asam

laktat sebagai produk utamanya. BAlberpotensi dalam memproduksi bakteriosin dan be$ifat probiotik. Disisilain, sapi b;li aiketahui memiliki banyak keunggulan salah saturya mampu memanfaatkan hij auan yang kurang

bergizi, dan mempunyai daya cema yang baik lerhadap pakan, sehingga diharapkan dapat ditemukan BAL yang

memilikikeunggulan spesifik. Penelitianini bertujuan untuk dapat mengetahui aktivitas anlimikobaBALisolat9A asal kolon sapi bali sehingga bisa di manfaatkan sebagai kandidat probiotik, serta untuk menganalisis

susunan nukleotida dan gambaran pohon filogenetiknya. Penelitian diawali dengan kultivasi isolatpada media

MRS ,rolr, dilanjutkan dengan uji katalase dan pewamaan Gram. Isolat BAL yang sudah terkonfirmasi diujiaktivitas aotimikobanya dengan bakteri patogen (Escherichi(l coli dar. Staphylococcus arrers). Analisis

molekuler dilakukan dengan amplifikasi gen 165 rRNA menggunakan primer B27F dan U1492R. Hasilpenclitian menunjukkan aktivitas antimikoba bakteri asam laktat isolat 9A mampu menghambat perhrmbuhan

S aureus antara3T,56 - 61,477o, dengan rata-rata 50.35% jika dibandingkan dengan kontrol antibiotika. Dalampenelitian ini BAL tidak menunjukkan tedadinya penghambatan pada pertumbuhan ,, ao1i. BAL isolat 9Aiericlentifikasi sebagai Streptococcus Dovis dengan tingkat similaritas 99% dan berada satu cluster dengan

spesies Streptococcus bovtr dengannilai bootstrap sebesar 100.

Kata kunci: Bakteri asam laktat, kolon sapibali, akdvitas antimikoba, gen 165 rRNA

22E

Dewa Gede Agung widyadnyana e/ al

PENDAHULUAN

Bakteri asam laltat (BAL) merupakan bakteri Gram

positif, tidak berspora, berbentuk basil atau kokus,

fakultatif anaerob dan mampu memfementasi

laktosa dengan asam laktat sebagai hasil utamanya.

Peranan penring BAL .dalah memecah prolein

menjadi monopeptida asam amino tersedia bagi

tubuh serta menghasilkan bakteriosin (Widodo,

2003). Bakteriosin memiliki peranan dalam

menanggulangi kejadian infeksi, aman dan tidak

menimbulkan resistensi (Marshall dan Arenas,

2003)

Sapi bali yang merupakan sapi asli Indonesia,

merupakan hasil domestikasi banteng (Bos fBlbos/

banteng) (Batan, 2006) dengan keunggxlannya

mudah beradaptasi dengan lingkungannya, serta

dapat hidup dj lahan kritis karena dapat

memanfaatkan hijuan yang kurang bergizi, dan

mempunyai daya cema yang baik terhadap pakan

(Hardjosubroto, 1994). Diketahui bahwa pakan

memberjkan pengaruh lerhadap ekologi dari bakteri

asam laktatdalam saluran pencernaan (Suardana dan

Suarsana, 2007). Disisi lain, saluran pencernaan

hewan (sapi) diketahui memiliki sejumlah besar

mikoorganisme, pada usus besar atau kolon dengan

400-500 jenis bakteri, dan jumtahnya dapat

rnencapai I l0r:- l0r'rsel. Padalolon. bakleriasam

laktat (BAL) umumnya ditemukan sekitar 10'-10'

bakteri per gram isi kolon (Lambeft and Hull, 1996),

sehingga menjadikan upaya ideniifikasi BAL pada

saluran cerna sapi bal i menarik untuk dilakukan.

Upaya identifikasi spesies bakteri asam laktat dapat

dilakukan melalui pemeriksaan karakteristik

morfologi, metabolit, fenotipik dan genotipik.

Metode fenotipik dianggap kurang efisien dan

kurang akurat karena mengandalkan ekspresi

fenotip di bawah kondisi laboratorium dan dapat

229

menyebabkan kesalahan identifikasi(nisidentilication) (Chenooll ei dl, 2003). Metode

genotipik yang banyak diaplikasikan dalam studi

identifikasi mikrobia adalah menggunakan analisis

skuen gen 163 dan 23S rRNA(Anindita,20l3).

Isolat bakteri asam laktat (BAL) 9A merupakan

bakteri asam laktathasil isolasi 20 sarnpel fesesyang

berasal dari koion sapi bali yang sudah terkonfirmasi

sebagai BAL didasarkan atas uji penumbuhan pada

MRS, uji katalase, pewamaan Gram dan diketah i

memiliki potens i antimikroba terhadap

pertumbuhan bakteri patogen (Lindawati dan

Suardana,2014), namun sejauh ini konfinnasi

akurat tentang potensi serta analisis secara genetik

dengan analisis gen 165 rRNA belum pemah

dilakukan. Berdasarkan uraian tersebut, m;ka kajian

ini menarik untuk disa.jikan sehiogga nantinya dapat

memperkuat kiteria penilaian sebagai kandidat

probiotikunggnl.

Materi dan Metode

Kultivasi Bakteri Asam Laktat Isolat 9A

Isolat bakteri asam laktat (BAL) 9Amerupakan BAL

hasil penelitian sebelumnya (Lindawati dan

Suardana,20l4), tersimpan daiam bentuk stok

,?ezer -20'C. Penumbuhan isolat BAL gAdi mulai

dcngan mclakukan ,rr,)yirg pada suhu 4"C selama

15 menit. Selanjutnya di biakan dalam de Manl

Rogosa Sharp (MRS) broth dan dinkubasikan

selama 24 jam 37C pada kondisi unaeroh (0,5%

CaCO,) dengan menambahkan gas geilerattug kit

sebanyak2 sachet p dn anaerobic jor. Bakteri dittji

katalase dengan diambil satu tetes kultur isolat

selanjutnya di tetesi dengan H,O.dengan konsentrasi

10% dan diamati adanya gclembung gas yang

terbentuk. Bakteri pada uji katalase negatif

sclanjutnya dibuat sediaan apus pada objek gelas

dengan pewamaan Gram dan diamati di bawah

mikoskop.

Uji Aktivitas Antimikroba Bakteri Asam Laktat

Isolat9A

Uji aktivitas antimikroba dilakukan dengan

menginol!:ulasi biakan dai stock culture ke dalam 5

mL MRS 6roti dan diinkubasi selama 48jam dalam

suasana anaerob. Selanjutnya diinokulasikan satu

ose biakan mumi bakteri patogen E. coli dan S.

arrers ke dalam 5 mI mediufi nutrient broth da\

dirnluba.i pada suhu 37'( selama 24jam. Suspcnsi

biakan ditanam dengam metode sebar sebanyak 100

pL di atas medium M eller Hintan (MH). Setclah

kedng, pada medium dibuat sumur-sumur dengan

diameter 5-6 mm. kemudian bakteri asam laktat

yang telah dirumbuhkan scbelumnya masing-

masing didepositkan sebanyak 20 pL pada sumur-

sumur tersebut diinkubasi selama 24jam pada suhu

37"C. Zona hambar yang terbentuk diukur sebanyak

tiga kali kcmudian hasilnya dirata-ratakan dan

dikurangi dengan diameter sumur (welfi darr

antibiotika kontrol (Sujaya st a1., 2008). Persentase

pcnglambatan BAL dalam menghambat patogen

dihitung dengan pcmbanding antibiotik.hloronpheni,ol menggunakan rumus Tangapo

(2006).

Analisis Molekuler

Isolasi DNA genom dilakukan sesuai dengan

prosedur Kit Qiagen,2007. Metode PCR dilakukan

dengan mengguDakan primer universaloligonukleotida B27F 5'-AGAGTTTGAICCTGGCTACG-'3 dan U1492R

5'-CCfiACCTTGTTACCACTT-'J )epeni yang

digmakan oleh Lim el al. (2009). Setiap sampel

DNA diencerkan dengan aquabides dengan

Idcntifikasi Bakteri .^sam Laktat Hasil holasi dari Kolon Sapi Bali

perbandingan 1 : 4 yaitu 1 pl DNA genom

diencerkan dengan 4 pl aquabides. Satu mikoliter

(1 pl) DNA genom dimasukan ke dalam tabung PCR

kemudian ditambahkan 25ul drea taqgrcen,lp,l

Iotwrd princr B27l (l0 pmol). 1 tl rcyprte primer

Ul492R (10 pmol) dan l0 pI aquabides sehingga

volume total38 pl. ReaksiPCR menggunakan suhu

denaturasi tunggal94"C selama 7 menit yang diikuti

35 siklus yang terdiri dari denaturasi dengan suhu

94"C selama I i\enit, annedling dengan suhu 56"C

selama 1 menit, dan e\lensiotl dengan suhu 72"C

selama 1,5 menit. Satu tahap perpanjangan tahapan

pada aklir siklus dilakukan pada suhu 72"C selama 5

menit. Produk PCR kemudian dielektroforesis

dergan agarose gel 1 ,5Yo.

AnalisisData

Prodak PCR yanB positiI kemudian di sckuensing.

Data susunannukleotida gen 16S iRNAdi d/ig,rrerl

dan di baca h omol og i nya di NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) dengan

menggunakan "cl slal 14, program package" \tntnk

men€ntukan pohon filogenclik untuk melihat

hubungan kekabatan isolat, di buat berdasarkan

pendekatan eighbor-joini g method dalam

program MEGA 4.0 (Tamta et al.,2007")

IIasil dan Pembahasrn

Kultivasi BakteriAsam Laktrt Isolat 9A

Bakteri asam laktat (BAL) 9A tumbuh pada media

MRS r,,olr, bersjfat katalase negatif, dan Gram

positif(+) dengan morfologi .occ r.Widodo (2003)

menyebutkan hampir semua strain BAL tidak

menghasilkan enzim katalase, sehingga pada

pengujian hasilnya negatif sebagai akibat tidak

tedadinya degradasi H,O, oleh ensim katalase.

230

Dcwa Gede Agu.g Widyadnyana e, al.

Peptidoglikan pada dinding sel bakteri ini membuat

bakted Gram positifresisten terhadap lisis osmotik.

Pada pewarnaan Gram, bakte inj memiliki

rarnpilan berwama ungu tJawelz e/dI.. )001 ).

UjiAktivitas Antimikroba

Pengujian aktivitas antimikroba spesies BAL

isolat 9A hanya menunjukkan diamcto zona

hambatannya terhadap baktei indikator S. ,lrlerr.

dengan zona hambat yang berkisar 0,77-1,26 cm

atau memiljki kemampuan menghambat sebesar

6,15 - 7,56 % dibandingkan kontrol antibiotika

control dengan zona hambat 2,I2 cm, namun tidak

mempcrlihatkan daya hambat terhadap E. coli

Tabel 1. Uji daya hambat BAL isolat 9Aterhadap baktcd patogen

Diameter Zona Hambat (cm)

Ulangan E. coliEfektifitaspenghambatan o%

Elektifiiaspenghambatan %

1

2

3

4

1.26

0.9'7

1.13

0.'/'l

6t.47

47.3

55.1

3'.7.56

0

0

0

0

0

0

0

0

Rata-rata 1.03+0,21 50.35

+) Nilai-nilai pada Tabel 1. standar deviasi rata_rata dari empat kali ulangan

Dalam mcnghambat peftumbuhan baktei uji,

bakteri asam laktat tidak hanya menghasilkan asam

IaLrar dan asam aselal (asam organik). lelapi juga

scnyawa-senyrwa Iain sepen, bakteriosin yang

memiliki aktivitas antibakted (Daeschel, 1989).

Bakteriosin merupakan zat antimikoba berupa

pohpeplida. prolein. alau senyawa )ang mirip

protein. Bakteriosin mencegah sintesis

peptidoglikan yang utuh, sehingga dinding sel

melemah dan akibatnya sel bakteri mengalami lisis.

Selarn itu. largel ulama dari bakleri05,n yaitu

membmn sitoplasma dengan cara mengubah

permeabilitasnya, sehingga transport membran

teryanggu dan akibatnya Foduksi energi dan

biosintesis protein terhambat (Nissen-Meyer €l al.,

t992).

Analisis Molekuler

Hasil amplifikasi gen 163 iRNA dapat

dilihat dengan munculnya fragmen produk PCR

dengan uL-uran 1.502 base pairs (bp) yang

mempakan uL-uran yang diharapkan dengan

menggunakan kombinasi primer B27F dan

Ul492R (Gambar 1).

Gambar 2. Amplifikasi gcn 165 rRNA BAL isolat9A hasil isolasi kolon sapi bali denganp merB2TF danul492Rpada agarose1%. M: Marker lkb. DNA ladder, l:Isolat9A.

23t

Hasil sekuensing amplifikasi gen 165 rRNA

dengan primer B27F dan Ul492R didapat data

nukleotida yang layak untuk dianalisis yaitu

sepanjang 630 nukleotida- Hasil Basic Local

Alignment Search %o1 (BLAST) menunjuklGn

isolat 9A memiliki homologi (kemiripan) dengan Sa

6ovis (DQ148957), Sr. bov,s (AY500370) dan Sr

suzkl, (4.8366385.1) sebesar 990/0. Serta memiliki

kemiripan cukup jauh jika dibandingkan dengan

Bifdobacterium animalr sp./aclri (AB050136), r.sdguini (A8559504) dan B. reuteri (A8613259)

(Data tidak ditunjuu(an). Kemiripan yang tinggi

dengan strain Streplococcus Dorts (DQ148957)

ldenlifikasi Baktc,iAsam Laklat Ilasil Isolasi dari Kolon SapiBali

dibuktikan dengan terletaknya isolat BAL 9A dalam

I cluster dengan strain tersebut dengan nilai

boolstrap sebesar 100%. Nilai roolsrldp

menunjukan kekerabatan yang dekat apabila

rnemiliki nilaiyang tinggi, yaitu lebihdari 70% atau

di atas 70 (Mount, 2001). Petti (2007) menyatakan

bahwa hasil identifikasi bakteri berdasarkan sekuen

gen I 63 rRNA dapat diterima sebagai satu genus bila

memiliki homologi lebih dari 97% dan sebagai satu

spesies jika homologinya lebih dari 99%. Hasil ini

selanjuhya dikonstruksi untuk men,'usun pohon

fiIogenetik dengan hasil seperti Gambar2.

S bovis AY500370

S bovs 0Q148957

s1

L. lacl s subsp. cr€mo sA8008214

L. aclis bv diacetylactis A8100805

L. laclis subsp laciisAB008215

E. cecorumA8681217

E. duamA8596943

L. fiamnosus D 1 6552.1

L. sunkiiA8366385.1

L. messnletuides subsp, mesenlercdes...

L mesenle rcides su bs p. mesenleo des(2 )

B. animalis subsp. laclis A80501 36

B euledA8613259

B. saguiniA8559504

Gambar 3. Pohon filogenetik isolat 9A

Bakteri Sl. 6our adalah adalah bakteri Gftm

positif, fakultatif anaerobik, katalase dan oksidase

negatif berbentuk coccus menrpakan genus dari

Strcptococclts (Lozano al dl., 2014). Menurut

Mantovani dan Russel! (2002) Streptococcus bo'tis

menghasilkan baktedosin HC5 (Bovicin HC5)

mampu menghambat baklett Clostridium

aminophilum. Bakteriosin St bovis HC5 dapat

berdasarkan seluen gen 165 rRNA

menghambat pembentukan metana pada ruminansia

sebanyak 50% dan bahkan konsentrasi rendah

Bovicin HC5 menyebabkan penurunan produksi

metaD yang signifikan (Lee at a1.,2002). Bo\tcln

HC5 Sa bour stabil pada kondisi asam dan hanya

mengikat bakteri yang sensitifpada pH kurang dari 6

(Haulihan and RusseJl, 2006)-

232

Dcwa Gcdc Agung Widyadnyana er al.

Kesimpulan

Berdasarkan data yang dipercleh dalam

penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa bakteri

asam laktat isolat 9,A berpotensi digunakan sebagai

sumber probiotik didukung dengan kemampuannya

untuk menghambat pertumbuhan.9. drlerc sebasar

50,35% (36,56 - 61,47% ) dibandingkan antibiotika

kontrol kloramphenikol. Bakteri asam laktat isolat

9A teridentifikasi sebagai St ,orrr dengan nilai

simiiaritas 99% dan berada satu kelompok dengan

^St. Dov,rnilai bootstrap sebesar 100.

Daftar Pustaka

Anindita, N. S. (2013) Idenrifikasi dan Karakterisasilsolat Bakteri Asam Laktat Potensi PrcbiotikPensintesis Conjugated Linoleic Acid (CLA).Tesis. Universitas Gad jah Mada, Yogyakarta.

Batan, I. W. (2006) Sapi Bali dan Penyakitnya.IaLultas Kedokleran Heuar L nl\ersitasUdayana- Denpasar

Chenooll, E., Macian, M. C. and Aznar R. (2003)Tdcntilicar ron ol Canobutt, rt un,Lactobacillus. Leucotlostoc and Pediooccusby rDNA based techniques. Sj,st. Appl.Micro b io l. 26 (4): 5 46- 5 6.

Daeschel, M. A. (1989) Antimicrobial substancefrom lactic acid bacteria for use as loodpreservation. -/FoodTectuol. 43 148- | 55.

Haroosubroto, W. (1994) Aplikasi PemuliabiakaTernak di Lapangan. Gramcdia WidiasaranaIndonesia. Jakarta.

Haulihan, A. J. and Russell, J. B. (2006) Factorsaffecting the activity of bovicin HC5, abacteriocin from Streptococcus bovis HC5:release, stability and binding to targetbacteria.Journal ofApplielllliqqbiqlogy. 100 ( 1): 168-14.

Jawetz, E., Melnick, J. L. andAdelberg, E. A. (2001)Mikrobiologi kedokteran 2'i ed. BagianMikobiologi. FKU Unair Jakal1a.

Lambert, J. and Hull, R. (1996) Uppergastrointestinal tract disease and probiotics.AsiaPasific J Clin. Nutr.5(1):31 35

Lee, S. S.,Hsu,J.T., Mantovani, H. C. andRussell,J.B. (2002) he eiect oa bovicin HC5, abacteriocin from Streptococcus bovis HC5, onruminal methane production in vitro. FEMSMicro b io lo gy Let ters. 2l'7 : 5 I - 5 5

233

Lindawati, S. A. and Suardana, I. W (2014). ..r.,/aridan Uji Potensi Bakteri Asam Laktat Hasilholasi dari Kolon Sapi Bali sebagai KandidatUnggul Biopresenatil: Fakultas PeiemakanUniversitasUdayana.

Lozano, T. G., Ballestero, P P, Oroval, E. A. andJonatan, A. G. (2014) Analysis ofStreptococcus rovir infections a! amonographic oncologic al centre. J Cdncer Res

Ther.2(2):34-3sMantovani, H.C. and Russell, J. B. (2002) The

ability of a bacteriocin of streptococcus bovisHc5 (bovicin Hc5) to inhibit Clostridiumaminophilum, anobligate amino acidfermenting bacterium from the rumen,Anaerobe. S:247 -252

Marshall, S. H. andArenas, G. (2003) Antimicrobialpeptides : A natural atlernative to chemicalantibiotics and a potential for appliedbiotechnology Electrcn- J. Bioiechnologt). 6

l2)t 2'7 1 -284Mount, D. W (2001) Phrlogenetic prediction. In:

Riainlormatic Sequen, e anJ' Genone,!a.lrsr.r. Cold Sprin8 Harbor laboratory NewYork Press

Nissen-Meyer, J., Holo, H., HevaNtein, L. S.,Sletten, K. and Nes, I. F.(1992) A novellactococcal bacteriocin whose activity dependson the complementary action of two peptides. -/Bdctetiol. l74. 5686 5692

Petti, P A. (2007) Detecrion and identification ofmicroorganisms by gene Amplification andSeqrercirg. Clitl Inlect Dlsc.44 (8): I I08-I I14

Suardana,L W. andSuarsana,l. N. (2007) Isolasi danldentifikasi Bakteri Asam Laktat dari CairanRumen Sapi Bali sebagai KandidatBiopreservalif. i./r"nr1 Vete r ine r, 8 (4\. 1 5 5159.

Sujaya L N., Ramona Y, Utami D. N. M; SuarianiN.L. P, Widarini N. P, Nocianitri K. A., NuniniN. W. (2008) Isolation and characterization ofLactic acid bacte a from Sumbawa mare milk..lur n a l Vete r i ner. 9 : 52- 59.

Tamura K., Dudley,J., Nei, M. and Kumar S. (200?)MECA4: Molecular Evolutioary GeneticAnalysis (MEGA) Softwer Version 4.0. MoaBiol. Evol.24 (8): 1596-1599

Tangapo, A. M. (2006) Efektivitas AntibakteriEkstrak Tumbuhan Daun Sendok (Plantagomajor) Terhadap Staphylococcus aureus danPseudomonas aeruginosa. Skripsi. FMIPAUNSRAT.Manado.

Widodo. (2003) -Biote,tr o logi Industri Susu. PercrbttDuawarna. Yogyakarta.