i

PROFIL FINGERPRINT DAUN SALAM (Syzygium

polyanthum Wight) DENGAN METODE KLT-

SPEKTROFOTODENSITOMETRI

Skripsi

I WAYAN SUPARWATA

1108505053

JURUSAN FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS UDAYANA

2015

ii

iii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa, karena atas

berkat rahmat-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Profil

Fingerprint Daun Salam (Syzygium polyanthum Wight) Dengan Metode KLT-

Spektrofotodensitometri” tepat pada waktunya, sebagai salah satu syarat untuk

memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm) di Jurusan Farmasi Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.Pada kesempatan

ini penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada semua pihak yang telah

memberikan bantuan baik secara langsung maupun tidak langsung, yaitu kepada:

1. Luh Putu Mirah Kusuma Dewi, S.F., M.Sc., Apt., selaku dosen

pembimbing I yang dengan penuh perhatian telah memberikan motivasi,

semangat, bimbingan dan saran dengan sabar selama penulis mengikuti

pendidikan di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam Universitas Udayana, khususnya dalam penyusunan

skripsi ini.

2. Ni Made Pitri Susanti, S.Farm., M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing II

yang dengan penuh perhatian telah memberikan motivasi, semangat,

bimbingan dan saran selama penulis mengikuti pendidikan di Jurusan

Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas

Udayana, khususnya dalam penyusunan skripsi ini.

3. Ir. Anak Agung Gde Raka Dalem, M.Sc. (Hons), selaku Dekan Fakultas

Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.

iv

4. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt., selaku Ketua

Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Udayana yang dengan penuh perhatian telah memberikan

motivasi, semangat, bimbingan dan saran selama penulis mengikuti

pendidikan di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam Universitas Udayana.

5. Seluruh dosen dan staf pegawai di Jurusan Farmasi Fakultas MIPA

Universitas Udayana yang telah memberikan bantuan kepada penulis

selama penyusunan skripsi ini.

6. Orang tua yang sangat saya cintai dan hormati, I Gede Tista, S.Pd.H. dan

Ni Wayan Tusan yang telah mengasuh dan membesarkan penulis,

membimbing dan memberi motivasi dalam penyusunan skripsi ini.

7. Adik kandung saya yaitu Ni Made Purwaningsih, I Nyoman Tri Adi

Parwata, I Ketut Supiartha dan keluarga besar yang selalu memberi

motivasi dan dukungan.

8. Seluruh rekan mahasiswa Jurusan Farmasi angkatan 2011 dan Analisis

2011 yang saya banggakan Yuni M., West, Butet, Ratu, Evi, Risma, Eka,

Dayu Chandra, Yogi serta para laboran Kak Anggi, Kak Pasek, Kak

Nova dan Mbok Dwi yang banyak membantu dan memberikan semangat

dalam penyusunan skripsi ini. Ucapan terima kasih yang sebesar-

besarnya kepada anggota dalam praktikum selama saya kuliah yaitu

Tiara, Jeffry, Maria, Cipta yang selalu memberi motivasi.

v

9. Seluruh tim Mosquito yaitu Dwi, Prima, Dewa, Krisna, Sastra, Jeffry,

Andre, Indra, Agung, Yan, Samy, Ari, Roni, Redika, Gung Deddy yang

selalu menemani disaat suka maupun duka.

10. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam

penyusunan tugas akhir I ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per

satu.

Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih belum sempurna.

Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat

membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Penulis

berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang

memerlukan.

Bukit Jimbaran, Juli 2015

Penulis

vi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ................................................................................ i

LEMBAR PENGESAHAN ...................................................................... ii

KATA PENGANTAR .............................................................................. iii

DAFTAR ISI ............................................................................................ vi

DAFTAR TABEL .................................................................................... x

DAFTAR GAMBAR ............................................................................... xi

DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ xiii

DAFTAR SINGKATAN........................................................................... xiv

DAFTAR ISTILAH……........................................................................... xvi

ABSTRAK ……....................................................................................... xvii

ABSTRACT ……..................................................................................... xviii

BAB I PENDAHULUAN ........................................................................ 1

1.1 Latar Belakang …………………………………………………. 1

1.2 Rumusan Masalah ........................................................................ 3

1.3 Tujuan Penelitian .......................................................................... 4

1.4 Manfaat Penelitian ........................................................................ 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................. 5

2.1 Tanaman Salam ............................................................................. 5

2.1.1 Klasifikasi Tanaman ........................................................... 5

2.1.2 Deskripsi Tanaman ............................................................. 5

2.1.3 Kandungan Kimia .............................................................. 6

vii

2.1.4 Khasiat dan Kegunaan . ...................................................... 7

2.2 Kuersitrin ....................................................................................... 7

2.3 Metode Ekstraksi ........................................................................... 9

2.3.1 Maserasi ................................................................................ 9

2.3.2 Metode Ekstraksi dengan Sonikasi ....................................... 9

2.4 Kromatografi Fingerprint ............................................................... 10

2.4.1 Fingerprint Kromatografi Lapis Tipis

Spektrofotodensitometri ...................................................... 11

2.4.2 Kromatogram dan Spektrum pada KLT Fingerprint .......... 11

2.4.3 Parameter Kromatogram ...................................................... 13

2.5 Analisis Data .................................................................................. 15

2.5.1 Fungsi Cosinus ..................................................................... 15

2.5.2 Analisis Data dengan Cross Correlation Function ............. 16

BAB III METODE PENELITIAN .......................................................... 17

3.1 Rancangan Penelitian .................................................................... 17

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian ....................................................... 18

3.3 Alat dan Bahan ............................................................................. 18

3.3.1 Alat Penelitian ...................................................................... 18

3.3.2 Bahan Penelitian ................................................................... 18

3.4 Prosedur Penelitian ....................................................................... 19

3.4.1 Determinasi........................................................................... 19

3.4.2 Preparasi Sampel ................................................................. 19

3.4.3 Penetapan Susut Pengeringan .............................................. 19

3.4.4 Metode Ekstraksi ................................................................. 19

viii

3.4.5 Pemilihan Fase Diam ........................................................... 20

3.4.6 Optimasi Fase Gerak ........................................................... 20

3.4.7 Optimasi Volume Penotolan Larutan Sampel Daun Salam . 20

3.4.8 Analisis Kromatografi Fingerprint dengan Metode KLT-

Spektrofotodensitometri ...................................................... 21

3.4.9 Analisis dengan Fungsi Cosinus .......................................... 21

3.4.10 Analisis Data dengan Cross Correlation Function ........... 22

3.5 Skema Kerja Penelitian ................................................................. 23

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................. 24

4.1 Determinasi Sampel ....................................................................... 24

4.2 Tempat Pengambilan Sampel ........................................................ 24

4.3 Susut Pengeringan ........................................................................ 24

4.4 Identifikasi Senyawa Penanda Kuersitrin ...................................... 25

4.5 Optimasi Fase Gerak ..................................................................... 29

4.6 Optimasi Volume Penotolan Larutan Sampel .............................. 31

4.7 Analisis Kromatografi Fingerprint Daun Salam Dengan Metode

KLT-Spektrofotodensitometri ...................................................... 34

4.8 Analisis Data dengan Fungsi Cosinus dan Cross Correlation

Function ...................................................................................... 37

4.8.1 Analisis data dengan fungsi cosinus ..................................... 37

4.8.2 Analisis data dengan cross correlation function ................. 38

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .................................................. 40

5.1 Kesimpulan ..................................................................................... 40

5.2 Saran ............................................................................................. 40

ix

DAFTAR PUSTAKA .............................................................................. 41

LAMPIRAN ............................................................................................. 45

x

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 4.1 Susut pengeringan serbuk daun salam ................................... 24

Tabel 4.2 Nilai resolusi senyawa penanda kuersitrin pada

kromatogram .......................................................................... 31

Tabel 4.3 Nilai resolusi dan tailling factor senyawa penanda kuersitrin

pada kromatogram ................................................................. 33

Tabel 4.4 Nilai AUC ekstrak etanol daun salam dari 3 daerah pada tiap

nilai Rf .................................................................................... 37

Tabel 4.5 Nilai cosinus (C) sampel daun salam ..................................... 37

Tabel 4.6 Nilai cross correlation function (r) spektrum kuersitrin ........ 39

xi

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Tanaman salam, simplisia kering daun salam, daun salam,

bunga tanaman salam, biji tanaman salam dan buah

tanaman salam .................................................................. 6

Gambar 2.2 Struktur kimia kuersitrin .................................................... 8

Gambar 2.3 Pola kromatografi lapis tipis larutan uji daun salam ........... 8

Gambar 2.4 Kromatogram simplisia bunga, biji, daun, dan batang

Cannabis Sp. pada variasi metode ekstraksi dan cairan

penyari ............................................................................... 12

Gambar 2.5 Perhitungan tailling factor .................................................. 14

Gambar 4.1 Visualisasi plat dibawah sinar putih (A), UV 254 nm (B),

UV 366 nm setelah dicelupkan kedalam reagen sitroborat

(C) dan kromatogram ekstrak etanol daun salam dengan

fase gerak etil asetat-asam format-asam asetat-air

(10:0,5:0,5:1 v/v) ................................................................ 26

Gambar 4.2 Spektrum masing-masing puncak kromatogram ekstrak

etanol daun salam dengan fase gerak etil asetat-asam

format-asam asetat-air (10:0,5:0,5:1 v/v) ........................... 27

Gambar 4.3 Visualisasi plat dibawah sinar putih (A), UV 254 nm (B),

UV 366 nm setelah dicelupkan kedalam reagen sitroborat

(C) dan kromatogram etanol daun salam dengan fase gerak

etil asetat-asam format-asam asetat (100:11:11 v/v) .......... 28

xii

Gambar 4.4 Spektrum masing-masing puncak kromatogram ekstrak

etanol daun salam dengan fase gerak etil asetat-asam

format-asam asetat (100:11:11 v/v) .................................... 29

Gambar 4.5 Kromatogram ekstrak etanol daun salam dengan fase

gerak etil asetat-asam format-asam asetat-air

(100:0,5:0,5:1 v/v) (A) dan etil asetat-asam format-asam

asetat (100:11:11 v/v) (B) ................................................... 30

Gambar 4.6 Perbandingan kromatogram ekstrak etanol daun salam

dengan volume penotolan 2 μL (A), 3 μL (B), 5 μL (C), 7

μL (D), 9 μL (E), dan 10 μL (F) ......................................... 32

Gambar 4.7 Visualisasi plat ekstrak etanol daun salam dari 3 daerah

yang telah dielusi dengan fase gerak etil asetat-asam

format-asam asetat (100:11:11 v/v) pada sinar putih (A),

UV 254 nm (B) dan UV 366 nm (C) ................................... 35

Gambar 4.8 Profil kromatogram sampel daun salam Bali (A), Jawa

Timur (B) dan D.I. Yogyakarta (C) .................................... 36

Gambar 4.9 Perbandingan spektrum kuersitrin ekstrak etanol daun

salam dari 3 daerah berbeda ............................................... 39

xiii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Hasil Determinasi Tanaman Salam ................................... 44

xiv

DAFTAR SINGKATAN

AUC : Area Under Curve

BHP : British Herbal Pharmacopoeia

C : Cosinus

DAD : Diode Array Detector

FID : Flame Ionisation Detection

GC : Gas Chromatography

HPLC : High Performance Liquid Chromatography

HPTLC : High Performance Thin Layer Chromatography

KCKT : Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

KLT : Kromatografi Lapis Tipis

KV : Koefisien Variasi

MS : Mass Spectrofotometry

Rf : Redentation of Factor

SD : Standar Deviasi

TLC : Thin Layer Chromatography

USA : United States of America

USP : United States Pharmacopoeia

UV : Ultraviolet

WHO : World Health Organization

xv

DAFTAR ISTILAH

Antioksidan : Merupakan zat yang mampu memperlambat atau

mencegah proses oksidasi.

Antibakteri : Aktivitas yang dapat mengganggu pertumbuhan atau

bahkan mematikan bakteri dengan cara mengganggu

metabolismenya.

Antihipertensi : Aktivitas yang dapat menurunkan tekanan darah.

Antiinflamasi : Aktivitas yang dapat mengurangi gejala peradangan.

Determinasi Tumbuhan : Suatu cara untuk membandingkan suatu tumbuhan

dengan tumbuhan lain yang sudah dikenal

sebelumnya (mencocokkan atau menyamakan).

Fingerprint : Seluruh informasi yang merupakan karakteristik dari

tanaman meliputi warna bercak pada UV-visibel,

kromatogram dan spektrum.

Hipertensi : Gangguan pada sistem peredaran darah yang dapat

menyebabkan kenaikan tekanan darah di atas nilai

normal, yaitu melebihi 140 / 90 mmHg.

Hiperglikemia : Keadaan kadar gula dalam darah lebih tinggi dari nilai

normal. Dalam keadaan normal, gula darah berkisar

antara 70 – 100 mg/dL.

Radiasi Elektromagnetik : Kombinasi medan magnet dan medan listrik yang

berosilasi dan merambat lewat ruang dan membawa

energi dari satu tempat ke tempat yang lain.

xvi

Daun : Salah satu organ tumbuhan yang tumbuh dari ranting,

umumnya berwarna hijau (mengandung klorofil) dan

terutama berfungsi sebagai penangkap energi dari

cahaya matahari untuk fotosintesis.

Simplisia : Bahan alamiah yang digunakan sebagai obat yang

belum mengalami pengolahan apapun juga dan

kecuali dinyatakan lain simplisia merupakan bahan

yang dikeringkan.

xvii

ABSTRAK

Tanaman salam merupakan tanaman obat yang daunnya langsung dipanen

dari alam atau hutan. Yogyakarta dan Jawa Timur merupakan daerah yang

memiliki sebaran tanaman salam yang luas di Indonesia, sedangkan Bali

merupakan pengkonsumsi daun salam terbanyak di Indonesia. Daun salam

(Syzygium polyanthum Wight) merupakan salah satu tanaman dari Indonesia yang

potensial digunakan sebagai bahan baku obat herbal. Daun salam sebagai obat

herbal memerlukan standardisasi untuk menjamin identitas komponen kimianya.

WHO telah menetapkan fingerprint sebagai standar utama dari bahan baku obat

herbal atau produk herbal. Sehingga dalam penelitian ini dilakukan penentuan

profil fingerprint dan kedekatan profil fingerprint ekstrak etanol daun salam dari

3 daerah, yaitu D.I. Yogyakarta, Jawa Timur dan Bali.

Masing-masing larutan sampel ekstrak etanol daun salam ditotolkan pada

plat KLT silika gel 60 F 254 kemudian dielusi dengan campuran pelarut etil asetat

P-asam format P-asam asetat P (100:11:11 v/v). Plat divisualisasi dengan TLC

Visualizer (CAMAG) dibawah sinar putih, UV 254, 366 nm dan dipindai dengan

TLC Scanner 4 (CAMAG) pada panjang gelombang 210 nm. Tiap noda dibuat

spektrumnya pada panjang gelombang 200-450 nm. Analisis data dilakukan

dengan fungsi cosinus dan cross correlation function.

Daun salam memiliki noda dan puncak pada Rf 0,75; 0,81 dan 0,89.

Senyawa penanda daun salam kuersitrin memiliki spektrum dengan panjang

gelombang maksimum pita II 268 nm dan pita I 364 nm. Analisis fungsi cosinus

dari daun salam 3 daerah menujukkan bahwa daun salam dari Bali memiliki

kedekatan profil fingerprint dengan daun salam Jawa Timur dilihat dari nilai C

yang lebih besar dari 0,95. Daun salam dari daerah D.I. Yogyakarta dengan Bali

dan Jawa Timur tidak memiliki kedekatan profil fingerprint karena memiliki nilai

C yang kurang dari 0,95.

Kata kunci: daun salam (Syzygium polyanthum Wight), profil fingerprint, KLT-

Spektrofotodensitometri, fungsi cosinus, cross correlation function

xviii

ABSTRACT

Indonesian bay-leaf is a medicinal plant whose leaves are harvested directly

from nature or forest. Yogyakarta and East Java is an area that has a wide spread

area Bay-leaf in Indonesia, while Bali is the highest consumer bay-leaves in

Indonesia. Indonesian bay-leaf (Syzygium polyanthum Wight) is one of

Indonesia's plant that potentially used as a raw material of herbal medicines.

Indonesian bay-leaves as a herbal medicine require standardization to ensure the

identity of its chemical components. WHO has defined a fingerprint as the main

standard raw material of herbal medicines or herbal products. So this study

determined the fingerprint profile and the closeness fingerprint profile of

Indonesian bay-leaves ethanol extract from 3 regions, such as Special Region of

Yogyakarta, East Java and Bali.

Each sample solution Indonesian bay-leaves applied on TLC plate and then

eluted with a solvent mixture of ethyl acetat-formic acid-acetic acid (100:11:11

v/v). Plate is visualized by TLC Visualizer (CAMAG) under the white light, UV

254, 366 nm and scanned by TLC Scanne 4 (Camag) at 210 nm wavelength. Each

spot made its spectrum at 200-450 nm wavelength. Data analysis was performed

with cosine function and cross correlation function.

Indonesian bay-leaves had spots and peaks at Rf 0,75; 0,81 and 0,89. Marker

compound of bay-leaves quercitrin had a spectrum with maximum wavelength of

band II at 268 nm and band I at 364 nm. Cosine function analysis of Indonesian

bay-leaves from 3 regions shows that the leaves Bali to East Java has closeness

profile fingerprint with C value higher than 95. Indonesian bay-leaves from

Special Region of Yogyakarta to Bali and East Java doesn‟t have closeness

fingerprint profile with C value under 95.

Keywords: Indonesian bay-leaf (Syzygium polyanthum Wight), fingerprint profile,

TLC-Spectrophotodensitometry, cosine function, cross correlation

function