Spektrofotometri UV-Vis

Spektrofotometri UV-Vis TIM DOSEN KIMIA DASAR FTP UBPrinsip Spektrometri Larutan sampel dikenai radiasi elektromagnetik, sehingga menyerap energi / radiasi terjadi interaksi antara radiasi elektromagnetik dengan materi (atom/molekul)Jumlah intensitas radiasi yang diserap oleh larutan sampel dikonversi dengan konsentrasi analit data kuantitatifSpektrometri Berdasarkan jenis materi yang berinteraksi dengan radiasi elektromagnetik, dibagi :Spektrometri molekul radiasi elektromagnetik berinteraksi dengan molekul Contoh : NMR, IR, UV-Vis, XRDSpektrometri atom radiasi elektromagnetik berinteraksi dengan atomContoh : AAS, AFSSpektrofotometer spektrometer + fotometerSpektrometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentuFotometer alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau diabsorpsikanSpektrofotometer untuk mengukur energi secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan atau diemisikan.Spektrofotometri Analisis spektrofotometri : analisis kimia yang didasarkan pada pengukuran intensitas warna larutan yang akan ditentukan konsentrasinya dibandingkan dengan larutan standar, yaitu larutan yang telah diketahui konsentrasinya. Penentuan konsentrasi didasarkan pada absorpsimetri, yaitu metode analisis kimia yang didasarkan pada pengukuran absorpsi (serapan) radiasi gelombang elektromagnetik.

Spektrofotometri Spektrofotometri adalah pengukuran konsentrasi larutan dengan menggunakan instrumen

Spektrofotometer : instrumen yang digunakan untuk mengukur jumlah cahaya yang diserap atau intensitas warna yang sesuai dengan panjang gelombang

Pengukuran kuantitatif dari cahaya yang diserap terukur dalam bentuk Transmitansi dan absorbansi tersebut.6V = Wave Number (cm-1)l = panjang gelombang (nm-1)C = kecepatan cahaya = 3 x 1010 cm/sec. u = frekuensi (Hz)Energi foton :

h (Tetapan Planck) = 6.62 x 10-27 (Ergsec)

C = u Radiasi Elektromagnetik7VisibleUltra violetRadioGamma ray Hz cmcm-1Kcal/moleVType Quantum TransitionTypespectroscopyTypeRadiationFrequencyWavelengthWaveNumber VEnergy9.4 x 1074.9 x 106

3.3 x 10103 x 10-1110219.4 x 1034.9 x 102

3.3 x 1063 x 10-71017

9.4 x 1014.9 x 100

3.3 x 104

3 x 10-51015

9.4 x 10-14.9 x 10-2

3.3 x 102

3 x 10-31013

9.4 x 10-34.9 x 10-4

3.3 x 100

3 x 10-11011

9.4 x 10-74.9 x 10-83.3 x 10-4

3 x 103107

X-rayInfraredMicro-waveGamma ray emissionX-ray absorption, emissionUV absorptionIR absorptionMicrowave absorptionNuclear magnetic resonanceNuclearElectronic (inner shell)Molecular vibrationElectronic (outer shell)Molecular rotationMagnetically induced spin statesSifat spektra, aplikasi dan interaksi radiasi elektromagnetik8Tipe RadiasiFrekuensi (Hz)Panjang Gelombanggamma-rays1020-1024 C = O280Azo-N = N-262Nitro-N=O270Thioketon-C =S330Nitrit-NO2230Diena terkonjugasi-C=C-C=C-233Triena terkonjugasi-C=C-C=C-C=C-268Tetraena terkonjugasi-C=C-C=C-C=C-C=C-315Benzena26123Aplikasi spektrofotometer UVProteinAmino Acids (aromatic)Glucose DeterminationEnzyme Activity (Hexokinase) 24Larutan yang dapat dianalisis dengan spektrofotometer visible senyawa yang berwarnaContoh : KMnO4Apabila senyawa tersebut tidak berwarna, maka perlu ditambahkan pengompleks yang dapat membentuk warnaContoh : analisis logam Pb

Struktur kimia dan absorpsi Visible25Aplikasi spektrofotometer visibleNiacinPyridoxineVitamin B12Metal Determination (Fe)Fat-quality Determination (TBA)Enzyme Activity (glucose oxidase)

26Penentuan konsentrasi sampel :Ukur panjang gelombang maksBuat kurva standarUkur sampelKonversi A sampel dengan kurva standar Dont think a lot, just do the best