i

SKRIPSI

RIZA BAGUS SETIAJI

UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL

KULIT BATANG JARAK PAGAR (Jatropha curcas L.)

TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA MCF-7 DAN

SEL VERO DENGAN METODE MTT ASSAY

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2015

ii

Lembar Pengesahan

UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL

KULIT BATANG JARAK PAGAR (Jatropha curcas L.)

TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA MCF-7 DAN

SEL VERO DENGAN METODE MTT ASSAY

SKRIPSI

Dibuat Untuk Memenuhi Syarat Mencapai Gelar Sarjana Farmasi pada

Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang

2015

Oleh:

RIZA BAGUS SETIAJI

201110410311261

Disetujui Oleh:

Pembimbing I Pembimbing II

Siti Rofida, S.Si., M. Farm., Apt Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., M.P NIP 114.0804.0453 NIP 113.0907.0469

iii

Lembar Pengujian

UJI SITOTOKSISITAS EKSTRAK ETANOL

KULIT BATANG JARAK PAGAR (Jatropha curcas L.)

TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA MCF-7 DAN

SEL VERO DENGAN METODE MTT ASSAY

SKRIPSI

Telah diuji dan dipertahankan didepan tim penguji

pada tanggal 19 Agustus 2015

Oleh:

Riza Bagus Setiaji

201110410311261

Tim Penguji

Penguji I Penguji II

Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., M.P

NIP 114. 0804. 0453 NIP 113. 0907. 0469

Penguji III Penguji IV

Drs. H. Achmad Inoni, Apt Dian Ermawati, M.Farm., Apt

NIDN 0020124205 NIP 112.0907.0481

iv

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum warahmatullahi wabarakatuh

Alhamdulillahirrobbil’alamin, segala puji dan syukur penulis panjatkan

kepada Allah SWT atas segala rahmat, nikmat dan pertolonganNya sehingga

penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul UJI SITOTOKSISITAS

EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG JARAK PAGAR (Jatropha curcas

L.) TERHADAP SEL KANKER PAYUDARA MCF-7 DAN SEL VERO

DENGAN METODE MTT ASSAY. Skripsi ini diajukan untuk memenuhi syarat

untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu

Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang. Dalam penyusunan skripsi ini

penulis tidak terlepas dari peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak.

Oleh karena itu, dengan segala kerendahan hati, penulis ingin mengucapkan

banyak terima kasih kepada:

1. ALLAH SWT yang senantiasa memberikan kasih sayang dan rahmatNya

yang berlimpah.

2. Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt. selaku dosen pembimbing I dan Ahmad

Shobrun Jamil, S.Si., M.P. selaku dosen pembimbing II atas saran,

bimbingan, dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan waktu

untuk membimbing dan mengarahkan serta banyak memberikan saran dan

motivasi penulis sampai terselesaikannya skripsi ini.

3. Drs. H. Achmad Inoni, Apt dan Dian Ermawati, M.Farm., Apt selaku Dosen

Penguji yang telah banyak memberikan saran dan masukan demi

kesempurnaan skripsi ini.

4. Yoyok Bekti P, S.Kep. Ns, M.Kep, Sp.Kom., selaku Dekan Fakultas Ilmu

Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan

kesempatan penulis belajar di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang.

5. Nailis Syifa, S.Farm., M.Sc., Apt., selaku Ketua Program Studi Farmasi

Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan kesempatan

v

dan kemudahan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang.

6. Arina Swastika M., S.Farm., Apt selaku dosen wali yang telah memberikan

nasihat, motivasi, dan kemudahan penulis dari mahasiswa baru sampai

mahasiswa tingkat akhir.

7. Sovia Apriani Basuki, S.Farm., M.Si selaku kepala Laboratorium Farmasi

Universitas Muhammadiyah Malang.

8. Laboratorium Parasitologi FK UGM khususnya Prof. Supargiyono dan

Mbak Suprihatin yang telah membantu dan mengarahkan selama proses

penelitian.

9. Dosen-dosen Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang dengan segala

dedikasinya dalam dunia pendidikan, atas ilmu dan bimbingannya selama

menempuh kuliah.

10. Bapak, Ibu, dan adik tersayang. Romadon, Siti Khodijah, Fachrizal Rozak,

M. Syabani Irfan dan Aisyahrani Afifah. yang telah memberi banyak

dukungan baik semangat, moril, maupun materiil.

11. Candra Yuliana, yang selalu memberikan motivasi, masukan, semangat,

dukungan serta doanya selama ini.

12. Sahabat seperjuangan, Soli, Jauzi, Handy, Ega, Triana, Ulik dan Jeki.

Terimakasih atas bantuan dalam penyusunan naskah skripsi selama ini.

13. Sahabat-sahabatsakoplek “Geng Perut Besar”, Nana, Moo, Apres, Sakinah,

Amel, Mbak Dee, Vita, Handy, Soli, Hendro, dan Jauzi. Terimakasih atas

kebersamaannya selama hampir 4 tahun ini.

14. Didid dan Vita yang telah berjasa dalam membantu penulis menghadapi

ujian-ujian semasa kuliah.

15. Teman-teman seperjuangan Bahan Alam yang membantu dalam proses

penelitian mulai awal sampai akhir.

16. Teman-teman Farmasi 2011 khususnya kelas C dan D yang telah menjadi

teman berbagi ilmu, senang, sedih serta canda dan tawa selama perkuliahan.

Kalian hebat.

vi

17. Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya, penulis mohon maaf

dan terima kasih yang sebesar-besarnya. Semua keberhasilan ini tidak luput

dari bantuan, doa yang telah kalian semua berikan.

Semoga Allah SWT berkenan melimpahkan karunia-Nya sebagai balasan

atas bantuan selama ini dan semoga skripsi ini bermanfaat bagi masyarakat dan

Ilmu Pengetahuan Alam. Amiinn.

Wassalamu’alaikum warahmatullahi wabarakatuh

Malang, 19 Agustus 2015

Penyusun,

Riza Bagus Setiaji

vii

RINGKASAN

Kanker adalah suatu penyakit yang diakibatkan adanya pertumbuhan tidak

normal dari sel-sel jaringan tubuh karena sel-sel kanker ini dapat menyebar

kebagian jaringan tubuh lain sehingga dapat menyebabkan kematian (WHO,

2014). Di Indonesia, prevalensi penyakit kanker juga cukup tinggi. Kanker

tertinggi di Indonesia pada perempuan adalah kanker payudara dan kanker leher

rahim.di Indonesia sebesar 40 per 100.000 perempuan dan berdasarkan data

Sistem Informasi Rumah Sakit, pada tahun 2007 sebanyak 8.227 kasus atau

sebesar 16,85% dan angka mortalitas mencapai 50% dan meningkat pada tahun

2010, kasus rawat inap kanker payudara di Indonesia sebanyak 12.014 kasus

28,7% (Depkes RI, 2014).

Pengobatan terhadap kanker payudara dapat dilakukan melalui operasi,

radiasi atau dengan memberikan kemoterapi dan terapi hormonal namun

memberikan efek samping yang merugikan (Muhartono et al., 2014). Banyak

penelitian yang dilakukan untuk mengetahui aktivitas antikanker salah satunya

adalah jarak pagar (Jatropha curcas L.). Penelitian sebelumnya senyawa polifenol

dari ekstrak metanol kulit batang Jatropha curcas L. memiliki aktivitas sebagai

penangkal radikal bebas atau sebagai antioksidan dengan menggunakan metode

2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) dan didapat nilai IC50 1,0 µg ml-1

yang

berati kandungan antioksidan dari kulit batang Jatropha curcas sangat aktif dan

berpotensi sebagai antikanker (Igbinosa et al., 2011). Jatropha curcas L. memiliki

potensi sebagai anti mikroba, antioksidan, dan anti kanker. Pengujian aktivitas

anti kanker ekstrak etanol akar Jatropha curcas L. menggunakan metode Tunel

assay pada sel kanker payudara MCF-7 didapatkan nilai IC50 36,55 µg ml-1

(Engel et al., 2014). Dari penelitian yang telah dilakukan sebelumnya, diharapkan

kulit batang jarak pagar memiliki aktivitas sebagai antikanker.

Pada penelitian ini, serbuk kering kulit batang memiliki nilai MC (Moisture

Content) 6,13%. Ekstrak etanol kulit batang jarak pagar di ekstraksi menggunakan

metode remaserasi kinetik dengan pelarut etanol 96% dan direplikasi sebanyak 3x.

Pemilihan metode remaserasi kinetik dipilih karena semakin besar kecepatan

putaran pengaduk dan semakin lama waktu operasi, maka semakin besar pula

jumlah kadar senyawa yang terambil (Mardina et al., 2011). Ekstrak dibuat dari

100 gram simplisia serbuk kulit batang jarak pagar (Jatropha curcas L.) yang

diremaserasi dengan pelarut etanol 96% sebanyak 1 liter, lalu diaduk dengan

kecepatan 350 rpm selama 4 jam, didapatkan ekstrak cair dengan berat 7,50 gram

setelah dipekatkan menggunakan rotary evaporator. Kemudian ekstrak

dikeringkan di dalam oven pada suhu 40°C hingga mengental selama kurang lebih

63 jam dan didapatkan berat ekstrak kental sebesar 4,58 gram. Ekstrak yang

diperoleh kemudian diidentifikasi menggunakan kromatografi lapis tipis untuk

mengetahui seyawa yang terkandung pada kulit batang jarak pagar. Fase diam

yang digunakan adalah silika gel GF254 dan fase gerak n-heksana : kloroform :

etil asetat : asam formiat dengan perbandingan 8 : 3 : 2,5 : 1 tetes. Dari hasil

identifikasi yang telah dilakukan bahwa ekstrak etanol kulit batang jarak pagar

positif mengandung alkaloid, terpenoid, flavonoid, polifenol, dan antrakuinon.

Untuk mengetahui sitotoksisitas ektrak etanol kulit batang jarak pagar

(Jatropha curcas L.) terhadap sel kanker payudara MCf-7 dan sel vero digunakan

metode MTT assay. Uji MTT adalah uji kolorimetri berdasarkan pelarut kuning

viii

yang larut dalam air garam tetrazolium, dan mengubah kristal gelap formazan

menjadi berwarna biru/ungu. MTT hanya terjadi di sel-sel yang hidup dengan

enzim suksinat mitokrondria dehidrogenase (Nursid et al., 2013). Selain untuk

mengukur besarnya efek penghambatan pertumbuhan sel MCF-7, uji MTT juga

digunakan untuk menentukan parameter nilai IC50 (Inhibitory Concentration 50).

Nilai IC50 menunjukkan nilai konsentrasi yang menghasilkan hambatan proliferasi

sel 50% dan menunjukkan potensi ketoksikan suatu senyawa terhadap sel (Putri et

al., 2010).

Berdasarkan penelitian yang dilakukakan, ekstrak etanol kulit batang jarak

pagar (Jatropha curcas L.) terhadap sel kanker payudara MCF-7 memiliki nilai

IC50 sebesar 1.383,883 µg/ml dan niai IC50 sebesar 442,515 µg/ml terhadap sel

vero. Berdasarkan nilai IC50 tersebut, bahwa ekstrak etanol kulit batang jarak

pagar (Jatropha curcas L.) tidak aktif toksisitasnya terhadap sel kanker payudara

MCF-7 dan juga tidak dapat dikembangkan sebagai antikanker dalam

menghambat pertumbuhan sel kanker karena menurut NCI (National Cancer

Institute) syarat suatu ekstrak memiliki ekativitas antikanker apabila memiliki

nilai IC50 < 30 μg/ml, walaupun ekstrak etanol kulit batang jarak pagar (Jatropha

curcas L.) tidak toksik terhadap sel vero.

ix

ABSTRAK

Pendahuluan : Kanker payudara adalah penyakit yang bersifat ganas akibat

tumbuhnya sel kanker yang tidak terkendali dan berasal dari sel jaringan

payudara. Studi tentang aktivitas antikanker ekstrak etanol kulit batang jarak

pagar (Jatropha curcas L.) bertujuan untuk mengetahui sitotoksisitas ekstrak

etanol kulit batang jarak pagar (Jatropha curcas L.) terhadap sel kanker payudara

MCF-7 dan sel vero serta untuk mengetahui kandungan senyawa yang terdapat

pada ekstrak etanol kulit batang jarak pagar.

Metode Penelitian : Untuk mengetahui aktivitas antikanker digunakan metode

MTT assay. Sedangkan untuk mengetahui golongan senyawa menggunakan

skrining fitokimia dengan metode kromatografi lapis tipis.

Hasil Penelitian : Konsentrasi ekstrak uji yang digunakan pada sel kanker

payudara MCF-7 adalah 800 µg/ml, 600 µg/ml, dan 400 µg/ml dan sel vero

menggunakan konsentrasi 800 µg/ml, 400 µg/ml, dan 200 µg/ml. Didapatkan nilai

IC50 terhadap sel kanker payudara MCF-7 dan sel vero sebesar 1.383,883 µg/ml

dan 442,515 µg/ml. Ekstrak etanol kulit batang jarak pagar mengandung senyawa

alkaloid, terpenoid, flavonoid, polifenol, dan antrakuinon.

Kata kunci : Ekstrak etanol kulit batang jarak pagar (Jatropha curcas L.), sel

kanker payudara MCF-7, sel vero, sitotoksisitas MTT Assay.

x

ABSTRACT

Background : Breast cancer is a malignant disease as a result ofthe growth of

cancer cells which is uncontrolled and derived from breast tissue. The aim of this

study isto determine the cytotoxicity of stem bark ethanolic extract from Jatropha

curcas Linn on breast cancer cells MCF-7 and vero cells as well as to analyze the

compounds of Jatropha curcas Linn stem bark.

Method : The cytotoxicity activity of stem bark ethanolic extract from Jatropha

curcas Linn was evaluated using MTT assay, while its compounds was identified

by using TLC method.

Result : Concentration extract used in breast cancer cells MCF-7 was 800 µg/ml,

600 µg/ml, and 400 µg/ml and vero cells using a concentration of 800 µg/ml, 400

µg/ml, and 200 µg/ml. The result after calculated by probit analysis, it was

concluded of stem bark ethanolic extract from Jatropha curcas Linn has a IC50

value against breast cancer cells MCF-7 and vero cells at 1.383,883 µg/ml and

442,515 µg/ml. The compounds identification using TLC showed that stem bark

ethanolic extract from Jatropha curcas Linn contains alkaloids, terpenoids,

flavonoids, polyphenols, and antraquinone.

Keywords : Breast cancer cells MCF-7, MTT Assay cytotoxicity, stem bark

ethanolic extract from Jatropha curcas Linn, vero cells.

xi

DAFTAR ISI

Halaman

LEMBAR PENGESAHAN .................................................................................... ii

LEMBAR PENGUJIAN ........................................................................................ iii

KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv

RINGKASAN ....................................................................................................... vii

ABSTRAK ............................................................................................................. ix

ABSTRACT ............................................................................................................. x

DAFTAR ISI .......................................................................................................... xi

DAFTAR SINGKATAN ..................................................................................... xiv

DAFTAR TABEL ................................................................................................ xvi

DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xvii

DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xviii

BAB I PENDAHULUAN ........................................................................................ 1

1.1 Latar Belakang ......................................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah Penelitian ................................................................... 5

1.3 Tujuan Penelitian ..................................................................................... 5

1.4 Manfaat Penelitian ................................................................................... 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA .............................................................................. 7

2..1 Tinjauan Tentang Jarak Pagar (Jatropha curcasLinn.) .......................... 7

2.1.1 Klasifikasi ...................................................................................... 7

2.1.2 Sinonim .......................................................................................... 7

2.1.3 Nama Daerah ................................................................................. 7

2.1.4 Deskripsi Morfologi ...................................................................... 8

2.1.5 Etiologi dan Penyebaran ................................................................ 9

2.1.6 Kegunaan ....................................................................................... 9

2.1.7 Kandungan ..................................................................................... 9

2.2 Tinjauan tentang Ekstraksi .................................................................... 13

2.3 Tinjauan tentang Kromatografi Lapis Tipis .......................................... 17

2.4 Tinjauan tentang Siklus Sel ................................................................... 19

2.5 Tinjauan tentang Kanker........................................................................ 22

2.5.1 Definisi Kanker ........................................................................... 22

xii

2.5.2 Penyebab dan Faktor Risiko Kanker ........................................... 23

2.5.3 Sifat dan Karakteristik Sel Kanker .............................................. 24

2.5.4 Gejala Kanker .............................................................................. 25

2.5.5 Immunosurveillence Kanker ....................................................... 26

2.5.6 Proses Karsinogen ....................................................................... 27

2.6 Tinjauan tentang Kanker Payudara ........................................................ 30

2.6.1 Definisi ........................................................................................ 30

2.6.2 Stadium Kanker Payudara ........................................................... 32

2.6.3 Faktor Resiko Kanker Payudara .................................................. 34

2.6.4 Tanda dan Gejala Kanker Payudara ............................................ 35

2.6.5 Pengobatan Kanker ...................................................................... 36

2.7 Tinjauan tentang Sel MCF-7 ................................................................. 38

2.8 Tinjauan tentang Sel Vero ..................................................................... 38

2.9 Tinjauan tentang Kultur Sel ................................................................... 39

2.10 Tinjauan tentang Microculture Tetrazolium Salt (MTT) Assay ........... 39

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ................................................................ 41

BAB IV METODE PENELITIAN ........................................................................ 44

4.1 Tempat Penelitian .................................................................................. 44

4.1.1 Tempat Pembuatan Ekstrak dan Skrining Fitokimia ................... 44

4.1.2 Tempat Pengujian Sitotoksisitas .................................................. 44

4.2 Bahan Penelitian .................................................................................... 44

4.2.1 Bahan Tanaman ........................................................................... 44

4.2.2 Bahan Penelitian .......................................................................... 44

4.2.3 Alat-Alat Penelitian ..................................................................... 45

4.3 Variabel Penelitian................................................................................. 47

4.3.1 Variabel Bebas ............................................................................. 47

4.3.2 Variabel Tergantung .................................................................... 47

4.4 Metode Penelitian .................................................................................. 47

4.4.1 Rancangan Penelitian .................................................................. 47

4.4.2 Kerangka Operasional ................................................................. 48

4.4.3 Prosedur Kerja ............................................................................. 49

4.5 Uji Sitotoksisitas dengan Metode MTT ................................................. 55

xiii

4.6 Analisis Data .......................................................................................... 57

BAB V HASIL PENELITIAN ............................................................................. 58

5.1 Persiapan Pembuatan Ekstrak Etanol 96% Kulit Batang Jatropha curcas

Linn. ...................................................................................................... 58

5.1.1 Pembuatan Serbuk Simplisia ....................................................... 58

5.1.2 Pembuatan Ekstrak ...................................................................... 59

5.2 Identifikasi Profil Senyawa Kimia dengan Metode KLT ...................... 60

5.2.1 Identifikasi Senyawa Alkaloid..................................................... 60

5.2.2 Identifikasi Senyawa Terpenoid .................................................. 61

5.2.3 Identifikasi Senyawa Flavonoid .................................................. 62

5.2.4 Identifikasi Senyawa Polifenol .................................................... 63

5.2.5 Identifikasi Senyawa Antrakuinon .............................................. 64

5.3 Perhitungan Sel MCF-7 dan Volume Panenan Sel yang di Transfer .... 65

5.4 Perhitungan Sel vero dan Volume Panenan Sel yang di Transfer ......... 66

5.5 Uji Sitotoksisitas Ekstrak Etanol Kulit Batang Jarak Pagar (Jatropha

curcas L.) Terhadap Sel Kanker Payudara MCF-7 dan Sel Vero dengan

Metode MTT Assay .............................................................................. 66

5.6 Analisis Data .......................................................................................... 69

BAB VI PEMBAHASAN ..................................................................................... 71

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 77

7.1 Kesimpulan ............................................................................................ 77

7.2 Saran ...................................................................................................... 77

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 78

LAMPIRAN ........................................................................................................... 84

xiv

DAFTAR SINGKATAN

CCRC = Cancer Chemoprevention Research Center

Depkes = Departemen Kesehatan

MTT = Microculture Tetrazolium Salt

RisKesDas = Riset Kesehatan Dasar

WHO = World Health Organization

NCI = National Cancer Institute

ER = Estrogen

PR = Progesteron

SERM = Selective Estrogen Receptor Modulator

BHA = Butylated Hydroxyanisole

cm = Centimeter

mm = Milimeter

nm = Nanometer

µg = Mikrogram

mg = Miligram

g = Gram

ml = Mililiter

HAP = Hidrokarbon Aromatik Polisiklik

DNA = Deoxiribosa Nucleid Acid

RNA = Ribosa Nucleid Acid

C = Celcius

KLT = Kromatografi Lapis Tipis

Rf = Reterdation Factor

G1 = Gap 1

S = Sintesis

G2 = Gap 2

M = Mitosis

Cdk = Cyclin Dependent Kinase

CKI = Cyclin–Dependent Kinase Inhibitor

NK = Natural Killer

CTL = Cytotoxic T Limfosit

xv

TNF = Tumor Nekrosis Factor

DCIS = Ductal Carsinoma in Situ

LCIS = Lobular Carsinoma in Situ

SNP = Single Nucleotide Polymorphism

FBS = Foetal Bovine Serum

Pgp = P-glikoprotein

MTT = Microculture Tetrazolium Salt

IC = Inhibitory Concentration

MCF-7 = Michigan Cancer Foundation-7

xvi

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel II.1 Nilai Konstanta Dielektrik Berbagai Zat Pelarut .................................. 15

Tabel II.2 Stadium Kanker Payudara ..................................................................... 33

Tabel IV.1Kelompok Perlakuan Kultur Sel Kanker Payudara MCF-7 dalam Tiap

Percobaan............................................................................................... 47

Tabel V.1 Hasil Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Batang Jatropha curcas L. ...... 60

Tabel V.2 Hasil Identifikasi Profil Senyawa Kimia dengan Metode KLT ........... 65

Tabel V.3 Data Hasil Uji MTT Ekstrak Etanol Kulit Batang Jarak Pagar (Jatropha

curcas L.) Terhadap Sel Kanker Payudara MCF-7 dengan Metode MTT

Assay ..................................................................................................... 67

Tabel V.4 Data Hasil Uji MTT Ekstrak Etanol Kulit Batang Jarak Pagar (Jatropha

curcas L.) Terhadap Sel Verodengan Metode MTT Assay .................. 68

xvii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Jarak Pagar (Jatropha curcasL.) (a) Simplisia Kulit Batang Jatropha

curcas L. (b) ........................................................................................ 7

Gambar 2.2 Struktur Kimia Flavonoid .................................................................. 10

Gambar 2.3 Fase-fase Kritis Pembelahan Sel Normal ........................................... 20

Gambar 2.4 Peran Kompleks Cyclin Dependent Kinase di Tiap Fase Siklus Sel . 21

Gambar 2.5 Proses Karsinogenesis ........................................................................ 27

Gambar 2.6 Jaringan Normal Payudara ................................................................. 30

Gambar 3.1 Skema Kerangka Konseptual ............................................................. 41

Gambar 4.2 Skema Kerangka Operasional ............................................................ 48

Gambar 4.3 Skema Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Batang Jatropha curcas L.50

Gambar 5.1 Proses Pembuatan Simplisia Kering .................................................. 58

Gambar 5.2 Ekstrak Kental Kulit Batang Jatropha curcas L. ............................... 59

Gambar 5.3 Hasil Identifikasi KLT Golongan Alkaloid ........................................ 60

Gambar 5.4 Hasil Identifikasi KLT Golongan Terpenoid ..................................... 61

Gambar 5.5 Hasil Identifikasi KLT Golongan Flavonoid ..................................... 62

Gambar 5.6 Hasil Identifikasi KLT Golongan Polifenol ....................................... 63

Gambar 5.7 Hasil Identifikasi KLT Golongan Antrakuinon ................................. 64

Gambar 5.8 Kondisi Sel Kanker Payudara MCF-7 Sebelum dan Sesudah

Pemberian MTT Pada Konsentrasi 800 µg/ml dilihat di Bawah

Mikroskop inverted dengan Perbesaran 40 Kali .............................. 67

Gambar 5.9 Kondisi Sel Vero Sebelum dan Sesudah Pemberian MTT Pada

Konsentrasi 800 µg/ml dilihat di Bawah Mikroskop inverted dengan

Perbesaran 40 Kali ........................................................................... 68

Gambar 5.10 Hubungan Antara Konsentrasi Ekstrak Etanol Kulit Batang Jarak

Pagar (Jatropha curcas L.) terhadap Presentase Sel Kehidupan

Kanker Payudara MCF-7 ................................................................. 69

Gambar 5.11 Hubungan Antara Konsentrasi Ekstrak Etanol Kulit Batang Jarak

Pagar (Jatropha curcas L.) terhadap Presentase Sel Kehidupan Sel

Vero ................................................................................................. 70

xviii

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

1. Daftar Riwayat Hidup ....................................................................................... 84

2. Rincian Anggaran.............................................................................................. 85

3. Perencanaan Penelitian...................................................................................... 86

4. Surat Pernyataan................................................................................................ 87

5. Surat Determinasi Tanaman .............................................................................. 88

6. Perhitungan Presentase Sel Hidup Sel Kanker Payudara MCF-7 ..................... 89

7. Perhitungan Presentase Sel Hidup Sel Vero ..................................................... 90

8. Analisis Probit Log Ekstrak Etanol Kulit Batang Jarak Pagar (Jatropha curcas

L.) Terhadap Sel Payudara MCF-7 .............................................................. 91

9. Analisis Probit Log Ekstrak Etanol Kulit Batang Jarak Pagar (Jatropha curcas

L.) Terhadap Sel Vero ................................................................................. 95

10. Daftar Alat dan Bahan ..................................................................................... 99

xix

DAFTAR PUSTAKA

Abdelgadir, H.A., and Staden, V., 2013. Ethnobotany, Ethnopharmacology and

Toxicity of Jatropha curcas L. (Euphorbiaceae): A Review. South African

Journal of Botany, Vol. 88, pp. 204–218.

Aksara, R., Weny, J.A., Musa, L.A., 2013. Identifikasi Senyawa Alkaloid Dari

Ekstrak Metanol Kulit Batang Mangga (Mangifera indica L). Jurnal

Entropi, Vol. 8 No. 1, pp. 514-519.

Alatas, Z., 2007. Faktor Genetik dalam Karsinogenesis yang diinduksi oleh

Radiasi Pengion. PTKMR-BATAN.

Ammerman, N.C., Sexton, M.B., and Azad, A.F., 2008. Growth and Maintenance

of Vero Cell Lines. Curr Protoc Microbiol, pp. 1-10.

American Cancer Society, 2014. Breast Cancer. Atlanta : American Cancer

Sociaty, Inc.

Anggorowati, L., 2013. Faktor Risiko Kanker Payudara Wanita. Jurnal

Kesehatan Masyarakat, Vol. 8 No. 2, P. 2.

Arifin, H., Anggraini, N., Handyani, D., Rasyid, R., 2006. Standarisasi Ekstrak

Etanol Daun Eugenia cumini Merr. Fakultas MIPA Universitas Andalas.

Azamris., 2013. Kanker Payudara dalam Kehamilan. Cermin Dunia Kesehatan,

Vol. 40 no. 5 : hal. 358-360.

Balaji, R., Rekha, N., Deecaraman, M., and Manikandan, L., 2009.Antimetastatic

and Antiproliferative Activity of Methanolic Fraction of Jatropha curcas

Against B16F10 Melanoma Induced Lung Metastasis in C57BL/6 Mice.

African Journal of Pharmacy and Pharmacology, Vol. 3 No. 11, pp. 547-

555.

Budiman, A., Khambri, D., dan Bachtiar, H., 2013. Faktor Yang Mempengaruhi

Kepatuhan Berobat Pasien Yang Diterapi Dengan Tamoxifen Setelah

Operasi Kanker Payudara. Jurnal Kesehatan Andalas, Vol. 2 No. 1, pp.

20-24.

Chrestella, J., 2009. Neoplasma, Departemen Patologi Anatomi Fakultas

Kedokteran Universitas Sumatra Utara, http://repository.usu.ac.id/

bitstream/123456789/2053/1/10E00541.pdf, diakses tanggal 16 November

2014.

xx

Davidson, M. W., 2004. Normal African Green Monkey Kidney Epithelial

Cells (Vero Line). http://micro.magnet.fsu.edu/primer/techniques/

fluorescence/gallery/cells/vero/verocells.html, diakses tanggal 2 Februari

2015.

Demissie, A.G., and Lele, S.S., 2013. Bioactivity-Directed Isolation and

Identification of Novel Alkaloid from Jatropha curcas (Linn.). Research

Journal of Chemical and Environmental Sciences, Vol. 1 No. 2, pp. 22-

28.

Depkes RI., 2014. Hilangkan Mitos Tentang Kanker. Jakarta : Departemen

Kesehatan Republik Indonesia.

Dipiro, Joseph T., 2008. Pharmacotheraphy : A Phatophsyologic Approach.

Seventh Edition.The McGraw-Hill Companies, Inc.

DitJenBun (Direroktorat Jenderal Perkebunan) 2014. Buku Jarak Pagar.

http://ditjenbun.pertanian.go.id/perlindungan/downlot.php?file=buku_jarak_

16okt.pdf, diakses tanggal 15 November 2014.

Engel, N., Falodun, A., Kühn, J., Kragl, U., Langer, P., and Nebe, B., 2014. Pro-

apoptotic and Anti-adhesive Effects of Four African Plant Extracts on the

Breast Cancer Cell Line MCF-7. BMC Complementary and Alternative

Medicine, Vol. 14, pp. 1-13.

Frizzell, J.P., 2001. Handbook of Pathophisiology. Philadelphia : Sprighouse

Corporation.

Hanahan, D., dan R. A. Weinberg., 2000. The Hallmarks of Cancer. Cell Press

Vol. 100 : 57-70.

Hapsari, Y., 2010. Studi Kimia dan Farmakologi: Tumbuhan Obat Indonesia

Kayu Lawang (Cinnamomum culilaban (L.) Presl.). Tesis Magister Ilmu

Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas

Indonesia.

Haryanti, S., dan Katno., 2011. Aktivitas Sitotoksik Ocimum sanctum L pada

Sel Kanker Kolo WiDr. Jakarta : Balai Besar Penelitian dan

Pengembangan Tanaman Obat dan Obat Tradisional Badan Litbang

Kesehatan, Kementerian Kesehatan RI.

Hermawan, A., Meiyanto, E., dan Susidarti, R.A., 2010. Hesperidin

Meningkatkan Efek sitotoksik Doxorubicin pada Sel MCF-7. Majalah

Farmasi Indonesia, Vol. 21 No.1, pp. 8 – 17.

Hernani., Marwati, Tri., dan Winarti, Christina., 2007. Pemilihan Pelarut pada

Pemurnian Ekstrak Lengkuas (Alpinia galanga) secara Ekstraksi. Jurnal

Pascapanen, Vol. 4 No. 1, pp. 1-8.

xxi

Hidayati, D.N., Arifin, I., dan Susilowati, S., 2013. Uji Sitoksisitas Fraksi Etil

Asetat Ekstrak Etanol Herba Alfalfa (Medicago sativa L.) terhadap Sel

kanker Payudara T47D dan Sel Kanker Leher Rahim (Sel HeLa) serta

Kandungan Senyawa Kimianya. Semarang : Fakultas Farmasi Universitas

Wahid Hasyim.

Hirota, M., et al., 2014.A New Tumor Promoter from the Seed Oil of Jatropha

curcas L., an Intramolecular Diester of 12-Deoxy-l 6-hydroxyphorbol.

Cancer Research, Vol. 48, pp. 5800-5804.

Igbinosa, O.O., et al., 2011. Polyphenolic Contents and Antioxidant Potential of

Stem Bark Extracts from Jatropha curcas (Linn). International Journal of

Molecular Sciences, Vol. 12, pp. 2958-2971.

Igbinosa, O.O., Igbinosa, E.O., Aiyegoro, O.A., 2009. Antimicrobial Activity and

Phytochemical Screening of Stem Bark Extracts from Jatropha curcas

(Linn). African Journal of Pharmacy and Pharmacology, Vol. 3, pp.

058-062.

Jenie, R.I., dan Meiyanto, E., 2009. Aplikasi Ko-Kemoterapi Fraksi Etil Asetat

Ekstrak Etanolik Daun Sambung Nyawa (Gynura procumbens (Lour.)

Merr).pada Sel Kanker PayudaraMCF-7. Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol.

4 No. 3, pp. 132 – 141.

Kamal, S., Manmohan, S., and Birendra, S., 2011. A Review on Chemical and

Medicobiological Applications of Jatropha curcas. International Research

Journal of Pharmacy, Vol. 2 ,No.4, pp.61-66.

Kartawiguna, E., 2001. Faktor-faktor yang berperan pada karsinogenesis. Jurnal

Kedokteran Trisakti, Vol. 20 No.1, pp. 16-26.

Khairinal., 2012. Efek Kurkumin terhadap Proliferasi Sel Limfosit dari Limpa

Mencit C3H Bertumor Payudara Secara In Vitro. Depok : Tesis Progam

Pascasarjana.

Khasanah., 2013. Karsinoma Mammae Stadium IV dengan Tanda-Tanda Dyspnoe

dan Paraplegiekstremitas Inferior. Jurnal Fakultas Kedokteran

Universitas Lampung, Vol. 1 No. 2, pp. 43-52.

Kumala, S., Septisetyani, E.P., dan Meiyanto, E., 2009. Fraksi n-Butanolik

Kapang Endofit Buah Makasar Meningkatkan Efek Apoptosis Doxorubusin

pada Sel MCF-7. Majalah Farmasi Indonesia, Vol. 20 No.1, pp. 42 – 47.

Kusuma, I.G.A.I.A., dan Wahyuniari, I.A.I., 2013. Peranan Retinoid, Kalsium,

dan Vitamin D untuk Pencegahan Kanker Payudara, Fakultas

Kedokteran Universitas Udayana, http://download.portalgaruda.org/

article.php?article=82578&val=970, diakses tanggal 17 November 2014.

xxii

Larasati, S., 2012. Regulasi Siklus Sel. Cancer Chemoprevention Research

Center.

Lenny, Sovia., 2006. Senyawa Terpenoida dan Steroida.Medan : Karya Ilmiah

Departemen Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan

Alam Universitas Sumatera Utara.

Lin, J., Yan, F., Tang, L., and Chen, F., 2003. Antitumor Effects of Curcin from

Seeds of Jatropha curcas. Acta Pharmacol Sin, Vol. 3, pp. 241 -246.

Mahleda, M., dan Hartini, N., 2012. Post-traumatic Growth pada Pasien Kanker

Payudara Pasca Mastektomi Usia Dewasa Madya. Jurnal Psikologi Klinis

dan Kesehatan Mental, Vol. 1 No. 02, pp. 2.

Ma’at, S., 2003.Tanaman Obat untuk Pengobatan Kanker. Jurnal Bahan Alam

Indonesia, Vol. 2 No. 4, pp. 145-148.

Meiyanto, E., Tasminatun, S., Susilowati, S., Murwanti, R., dan Sugiyanto., 2007.

Penghambatan Karsinogenesis Kanker Payudara Tikus Terinduksi DMBA

pada Fase Post Inisiasi oleh Ekstrak Etanolik Daun Gynuraprocumbens

(Lour), Merr. Majalah Farmasi Indonesia, Vol. 18 No. 4, pp. 169 – 175.

Misyetti., 2006. Kajian Instabilitas Kit Kering Radiofarmaka Bertanda99m

Tc

Ditinjau dari Aspek Kimia dan Fisika. Jurnal Sains dan Teknologi Nuklir

Indonesia ISSN 1411 – 3481, Vol. 7 No. 1, pp. 65-81.

Muhartono., Windarti, I., Busman, H., Tarigan, H., dan Putra, B., 2014. Ekstrak

Ethanol Daun Sirsak (Annona Muricata) Berpotensi Memiliki Efek

Kemoterapi pada Kanker Payudara Tikus Putih. Jurnal Kedokteran

Brawijaya, Vol. 28 No. 2 : pp. 97-99.

Murty, H., Boediono, A., Setiawan, B., dan Sandra, F., 2007. Regulasi Siklus Sel:

Kunci Sukses Somatic Cell Nuclear Transfer. Cdk, Vol. 34 No. 6, pp. 312-

316.

NCI (National Cancer Institute), 2014. What Is Cancer? http://www. cancer.

gov/ about-cancer/what-is-cancer. Diakses 13 November 2014.

Novianti, F.A., dan Purnami, S.W., 2012. Analisis Diagnosis Pasien Kanker

Payudara Menggunakan Regresi Logistik dan Support

VectorMachine(SVM) Berdasarkan Hasil Mamografi. Jurnal Sains dan

Seni ITS, Vol. 1 No. 1.

Novita, L., 2010. Imunologi dan Biologi Kanker Kepala Leher, Fakultas

Kedokteran Universitas Riau, http://www.scribd.com/doc/13887398/

Imunologi-Tumor-KL#scribd, diakses tanggal 25 November 2014.

xxiii

Nurhayati, S., dan Lusiyanti, Y., 2006. Apoptosis dan Respon Biologik Sel

Sebagian Faktor Prognosa Radioterapi Kanker. PTKMR-BATAN, Vol. 7,

No. 3, hal.57-66.

Nursid, M., Fajarningsih, N. D., dan Chasanah, Ekowati., 2013. Aktivitas

Sitotoksik dan Induksi Apoptosis pada Sel T47D oleh Ekstrak Turbinaria

decurrens. Squalen, Vol. 8 No. 1, pp. 23-28.

Nzikou, M., et al., 2009. Characteristics and Composition of Jatropha curcas

Oils, Variety Congo-Brazzaville. Research Journal of Applied Sciences,

Engineering and Technology, Vol. 1 No. 3, pp. 154-159.

Oloyede, O. B., Salau, A. K., Akeusola, R. T., Ganiyu, O. T., Azeez, L., and

Ogunbode, S. M., 2012. Phytochemical Content, Radical Scavenging and

Antibacterial Properties of Aqueous Extract of Jatropha curcas Linn Leaves.

Fountain Journal of Natural and Applied Sciences, Vol. 1 No. 1, pp. 41 –

48.

Puspitasari, R., Sardjono, C., Setiawan, B., dan Sandra, F., 2008. Kultur

Embryonic Stem Cell menjadi Sel Neuron dengan Medium Bebas Serum.

Cermin Dunia Kesehatan, Vol.35 No.6, pp. 342-344.

Redha, A., 2010. Flavonoid : Struktur, Sifat Antioksidatif dan Peranannya dalam

Sistem Biologis. Jurnal Belian, Vol. 9 No. 2, pp. 196 – 202.

Riastiti, Y., Fatmawati, N. K., Yani, S., dan Hasanah, N., 2009.Ekspresi p53 pada

Gambaran Histologi Kanker Payudara. Bioprospek, Vol. 6 No. 2, pp. 42-

48.

Riskesdas (Riset Kesehatan Dasar). 2013. Penyajian Pokok-Pokok Hasil Riset

Kesehatan Dasar 2013, Jakarta.

Roezin, A., 2005. Perkembangan Mutakhir Terapi Tumor Ganas Payudara.

Universa Medicina, Vol.24 No.4, pp. 190-198.

Rohmatussolihat., 2009. Antioksidan, Penyelamat Sel-Sel Tubuh Manusia.

BioTrends, Vol.4 No.1, pp. 5-9.

Romadhon, Y.A., 2013. Gangguan Siklus Sel dan Mutasi Gen pada Kanker

Payudara. Cermin Dunia Kesehatan, Vol. 40 No. 10, pp. 786-789.

Sak, K., 2014. Characteristic Features of Cytotoxic Activity of Flavonoids on

Human Cervical Cancer Cells. Asian Pacific Journal of Cancer

Prevention, Vol. 15, pp. 8007-8019.

Sari, R., Armilasari, D., Nawawi, D., Darmawan, W., dan Mariya, S., 2014.

Aktivitas Antiproliferasi Ekstrak Jabon Putih (Anthocephaluscadamba Miq.)

terhadap Sel Kanker Payudara dan Serviks (Antiproliferative Activities of

xxiv

Anthocephalus cadamba Extracts on Human Breast Cancer and Cervical

Adenocarcinoma Cell Lines). Jurnal Ilmu dan Teknologi Kayu Tropis,

Vol. 12, pp. 91-100.

Sastroamidjojo, Harjono, 2005, Kromatografi, Liberty, Yogyakarta.

Senja, R.Y., Issusilaningtyas, E., Nugroho, A.K., dan Setyowati, E.P., 2014.

Perbandingan Metode Ekstraksi dan Variasi Pelarut terhadap Rendamen dan

Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kubis Ungu (Brassica oleracea L. var.

capitata f. rubra). Traditional Medicine Journal, Vol. 19 No. 1, pp.43-48.

Setiawati, A., Septisetyani, E.P., Wijayanti, T.R., dan Rokhman, M.R., 2010.

Sambung Nyawa (Gynura procumbens (Lour.) Merr.) sebagai Agen

Kemopreventif. Yogyakarta : Cancer Chemoprevention Research Center

Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada.

Simanjuntak, K., 2012. Peran Antioksidan dan Flavonoid dalam Meningkatkan

Kesehatan. Bina Widya, Vol. 23 No. 3, pp. 135-140.

Stahl E. 1969. Analisis Obat Secara Kromatografi Dan Mikroskopi. Institut

Teknologi Bandung, Bandung.

Syaifudin, M., 2007. Gen Penekan p53, Kanker dan Radiasi Pengion. Pusat

Teknologi Keselamatan dan Metrologi Radiasi–BATAN, Volume 8 No.

3, pp. 119 – 128.

Turalely, R., Hadanu, R., dan Mahulete, F., 2012.Uji Aktivitas Sitotoksik dan

Analisis Fitokimia Ekstrak Daun Kapur (Harmsiopanax aculeatus Harms).

Prosiding Insinas, pp. 98-103.

Uche, F. I., and Aprioku, J. S., 2008.The Phytochemical Constituents, Analgesic

and Anti-inflammatory Effects of Methanol Extract of Jatropha curcas

Leaves in Mice and Wister Albino rats. Jounal of Applied Science and

Environmental Management, Vol. 12 No. 4, pp. 99 – 102.

Voigt R. 1994. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Edisi ke-5. Diterjemahkan

oleh : Dr. Soendani Noerono. Gadjah Mada University Press.Yogyakarta.

WHO (World Helath Organization) 2014. Cancer, http:// www.who.int/

mediacentre/factsheets/fs297/en/, diakses tanggal 9 Oktober 2014.

Xia, Y., et al., 2013. Differential Regulation of c-Jun Plays an Instrumental Role

in Chemoresistance of Cancer Cells. The Journal of Biological Chemistry:

1-11.