SEDIAAN STERIL TETES MATA KLORAMPENIKOL

PRAFORMULASI

I.1        TINJAUAN FARMAKOLOGI BAHAN OBAT

Kloramfenikol merupakan antibiotika yang mempunyai daya antimikroba yang kuat. Kloramfenikol bekerja dengan jalan

menghambat sintesis protein kuman. Yang dihambat adalah enzim peptidil transferase yang berperan sebagai katalisator untuk

membentuk ikatan-ikatan peptide pada proses sintesis protein kuman. Kloramfenikol umumnya bersifat bakteriostatik. Pada

konsentrasi tinggi, kadang-kadang bersifat bakterisid terhadap kuman-kuman tertentu. Spektrum antibaktei kloramfenikol cukup

luas dan kebanyakan kuman anaerob.

Indikasi: Konjungtivitis akut dan kronis disebabkan mikroorganisme E. coli, H. influenzae, Staph. aureus, Strep. hemolitikus;

keratokonjungtivitis, iritis, uveitis, trakoma, dakriosistitis.

Kontraindikasi: Hipersensitivitas, myelosuppresion, histori diskaria, anemia aplastik.

Efek samping: Dapat terjadi pembengkakan sekitar mata atau eritema yang hebat, erupsi papilomakuler sekitar mata, alergi.

(Farmakologi UI)

 

I.2        TINJAUAN SIFAT FISIKA KIMIA BAHAN OBAT

1. Struktur dan berat molekul

C11H12Cl2N2O5

OH    CH2OH      O                 BM : 323,13

O2N                            C       C      N       C     CCl2

H      H      H                H

 

1. Kelarutan

Dalam air            :  sukar larut dalam air (1 : 400)

Dalam etanol      :  mudah larut (1 : 2,5)

Dalam CHCL3 :  sukar larut

Kelarutan dalam propilen glikol 1:7, sukar larut dalam eter, mudah larut dalam aseton, dalam etil asetat, sedikit larut dalam

asam dan alkali, tidak larut dalam benzena.

Penambahan benzalkonium klorida (BKC) dapat meningkatkan kelautan dalam air (Codex)

1. Stabilitas

Terhadap cahaya   :     tidak stabil

Exposure kloramfenikol (eye drops, 10 mg/L, dapar fosfat pH 7,0) terhadap cahaya matahari menyebabkan degradasi 80% dalam

waktu 45 menit. (Codex)

Terhadap suhu    :  tidak stabil

Pada larutan air akan terhidrolisis 4% (pemanasan 100°C, 3 menit) dan 10% (pemanasan 115°C, 30 menit). Pada pH 7,2 lebih cepat

terdegradasi daripada di pH 4,8 (pemanasan 100°C/120°C).

Terhadap pH      :  pH larutan jenuh 4,5-7,5

pH stabilitas optimum 6,0      (Farmakope Indonesia IV)

Stabil terhadap larutan netral dan asam, cepat rusak oleh larutan alkali (Remington)

Stabil pada pH yang luas untuk larutan air (pH 2-7)

Terhadap oksigen  :     tidak stabil

1. Titik lebur              :  149°C – 153°C

1. Inkompatibilitas    :

Dengan parasetamol : menurunkan waktu paruh kloramfenikol dan  meningkatkan klirens

Dengan kontrasepsi oral : menurunkan efikasi  kontrasepsi oral

Dengan diuretik : meningkatkan ekskresi kloramfenikol (furosemid)

menurunkan ekskresi kloramfenikol (HCT)

 

I.3        BENTUK SEDIAAN, DOSIS DAN CARA PEMBUATAN

Bentuk sediaan : Larutan tetes mata kloramfenikol

Dosis : Tetes mata mengandung kloramfenikol 0,5%

Cara pemberian : Beberapa kali sehari (Farmakologi UI)

Sesekali selama 4-12 jam sehari

 

BAB II

FORMULASI

 

Bentuk dan volume sediaan yang dibuat :

Larutan tetes mata kloramfenikol volume 5 ml

 

II.1      PERMASALAHAN

1. Kloramfenikol tidak stabil terhadap cahaya

2. Kloramfenikol tidak stabil terhadap pemanasan

3. Kelarutan kloramfenikol dalam air keci (1:400), sedangkan dosis sediaan 0,5% (1:200)

4. Sediaan multiple dose sehingga dapat terjadi kontak langsung dengan udara dan mikroba

5. pH optimum kloramfenikol = 6

6. Kloramfenikol tidak stabil terhadap oksigen

 

II.2      PENYELESAIAN MASALAH

1. Dipilih wadah sediaan yang tidak tembus cahaya

2. Sterilisasi dengan cara filtrasi à butuh ruangan khusus (teknik aseptik)

Atau dengan suhu rendah (98°C-100°C) à autoklaf dengan tekanan tidak terlalu tinggi

1. Dibuat sediaan menggunakan dapar sitrat pH 6

2. Ditambahkan pengawet tertentu

3. pH sediaan dibuat 6

4. Pada pembuatannya dialiri gas inert, misalnya N2. Atau ditambah antioksidan

 

 

 

 

 

II.3      MACAM-MACAM FORMULASI

Kloramfenikol Eye Drops (Martindale 28th ed. page 1141)

1.  Kloramfenikol                500 mg

Borax                              300 mg

Asam borat                      1,5 g

Phenyl mercuric nitrate   2 mg

WFI                          ad   100 ml

 

II.4      FORMULA YANG DIBUAT

Kloramfenikol                0,5%

Asam sitrat                     0,16%

Natrium sitrat                 1,9%

Benzalkonium klorida    0,01%

WFI steril               ad    25 mL

Akan dibuat 3 botol @ 5 ml, maka volume yang dibuat adalah

= ( 3 × 5 ml ) + 20% = 18 ml ? 25 ml

Berat : Kloramfenikol                = 0,5% × 25 ml     = 125 mg

Asam sitrat                     = 0,16% × 25 ml   = 40 mg

Natrium sitrat = 1,9% × 25 ml = 475 mg

0,1%

 

Benzalkonium klorida    = 0,01%  × 25 ml  = 2,5 ml

 

Water For Injection (WFI) ad 25 ml

Nama Bahan Fungsi Kelarutan pH stabilitas CaraSterilisasi

KloramfenikolAsam

sitrat

Na sitrat

BKC

WFI

Bahan aktifDapar

Dapar

Pengawet

Pembawa

1 : 400 ( air )-

-

mudah larut air

-

6-

-

5-8

-

AutoklafAutoklaf

Autoklaf

Autoklaf

Autoklaf

Cara sterilisasi sediaan : Filtrasi teknik aseptis

BAB III

PELAKSANAAN

 

III.1     CARA KERJA

1. Ditimbang 125 mg kloramfenikol dengan gelas arloji steril

2. Ditimbang 40 mg asam sitrat dengan gelas arloji steril

3. Ditimbang 475 mg Na sitrat dengan gelas arloji steril

QC : Kecocokkan bahan dan jumlah penimbangan

1. Ukur larutan benzalkonium klorida 0,1% 2,5 ml dalam gelas ukur 10 ml

2. (2) + WFI ± 20 ml à diaduk ad larut dengan batang pengaduk steril dalam beaker glass 50 ml

3. (5) + (3) à diaduk ad larut dengan batang pengaduk steril

4. (6) + (4) à diaduk ad homogen dengan batang pengaduk steril

QC : Kejernihan dan cek pH

1. (7) dicek pH dengan cara meneteskan sedikit larutan pada kertas indikator yang diletakkan pada gelas arloji steril ? cek pH

= 6

2. (8) + (1) à diaduk ad larut dengan batang pengaduk steril (untuk mempercepat kelarutan dapat menggunakan pemanasan)

à cek pH= 6

10.  (9) dituang dalam gelas ukur 25 ml dan ditambahkan WFI ad 25 ml

11.  (10) disaring menggunakan corong gelas dengan kertas saring Æ 0,45 mm à ditampung dalam erlenmeyer 50 ml à cek kejernihan

12.  (11) diambil dengan spuit injeksi 5,0 ml à ganti jarum dengan filter holder   Æ 0,2 mm

13.  (12) ditekan masuk ke dalam botol tetes kemudian ditutup

14.   (13) diberi etiket, dimasukkan kemasan sekunder dan diberi brosur.

 

Keterangan

Poin 1 – 4   : Tahap penimbangan bahan

Poin 5 – 10 : Tahap pelarutan dan pencampuran

III.2     ALAT – ALAT YANG DIGUNAKAN DAN CARA STERILISASINYA

 

No. Nama Alat Ukuran Jumlah CaraSterilisasi Suhu Waktu

12

3

4

Gelas arlojiBatang

pengaduk

Penara logam

Beaker gelas

kecil

-

41

q.s

1

OvenOven

Oven

Oven

180oC180oC

250oC

180oC

30`30`

60`

30`

5

6

7

 

8

9

10

 

11

12

 

13

Pinset logam

Spatel logam

Gelas ukur

 

Pipet tetes

Erlenmeyer

Corong gelas + kertas

saring

Spuit injeksi

Filter holder +

membran 0,2 mm

Wadah + tutup

-

-

50 ml

-

-

10 ml

25 ml

panjang

50 ml

kecil

 

5 ml

-

5 ml

 

2

1

1

1

3

1

1

 

 

1

 

1

 

 

 

3

 

Oven

Oven

Autoklaf

Autoklaf

Autoklaf

Oven

Autoklaf

 

Autoklaf

Autoklaf

 

Autoklaf

180oC

180oC

115oC

115oC

115oC

180oC

115oC

 

115oC

115oC

 

115oC

30`

30`

30`

30`

30`

30`

30`

 

30’

30’

 

30’

 

BAB IV

EVALUASI

 

IV. 1    UJI TEKANAN TITIK GELEMBUNG (Bubble Point Test)

Uji tekanan titik gelembung dilakukan untuk mengetahui integritas dari pasangan penyaring. Uji ini dilakukan sebelum dan atau

sesudah proses penyaringan.

Cara kerja :

Untuk membran penyaring berdiameter 13 mm dan 25 mm

1. Isi semprit injeksi dengan 2 ml aquadest steril

2. Pasang filter holder pada ujung semprit, kemudian tekan penyemprit hingga membran penyaring dalam filter holder

terbasahi.

3. Lepas filter holder dari semprit injeksi

4. Isi semprit injeksi dengan udara sampai tanda 5 ml.

5. Pasang filter holder pada ujung semprit.

6. Siapkan gelas piala 100 ml, isi dengan aquadest steril.

7. Letakkan filter holder sampai tercelup di bawah air.

8. Tekan penyemprit dan catat kedudukannya pada saat gelembung udara pertama keluar dari ujung filter holder. Volume

udara yang tersisa dalam semprit (V) harus lebih kecil dari bilangan tercantum dalam tabel.

 

Tabel Hubungan diameter membran – ukuran pori dan volume udara sisa pada tekanan titik gelembung dengan menggunakan

semprit injeksi 5 ml

Hasil Bubble

Point Test

Replikasi I :

Volume 0,7 ml

Replikasi II :

Volume 0,8

ml              

Rata-rata =

0,767 ml

Replikasi III : Volume 0,8 ml

Volume udara yang tersisa dalam semprit lebih kecil dari 0,8 ml (memenuhi syarat).

 

IV. 2    BEBAS PARTIKEL

Penyaring membran dibebaskan dari partikel, kemudian sediaan disaring dengan penyaring membran. Seluruh penyaring membran

diamati dibawah mikroskop yang sesuai dengan perbesaran 100 kali, dengan penyinaran pada sudut 10?-20? terhadap garis

horizontal. Dihitung jumlah partikel dimensi partikel dimensi 10 µm/7,25 µm.

Syarat: mengandung tidak lebih dari 50 partikel/ml yang berukuran lebih  dari sama dengan 10 µm dan tidak lebih 5 partikel lebih dari

sama dengan 25 µm dalam dimensi linier.

 

IV. 3 PENETAPAN pH

Sediaan tetes mata sebaiknya dibuat mendekati pH fisiologis mata. Dalam praktikum ini, pH sediaan dibuat 6. Untuk evaluasi, pH

larutan dicek dengan menggunakan pH meter.

 

IV. 4    VOLUME

Pada wadah diberi tanda, dan tanda tersebut dapat diamati bila volume kurang dari yang seharusnya. Bila berkurang karena

penguapan saat pemanasan, misalnya dapat ditambahkan.

Syarat: volume tidak kurang dari volume yang tertera pada wadah

 

 

IV. 5    UJI STERILISASI MENGGUNAKAN PENYARINGAN MEMBRAN

Alat         : membrane filter ukuran 0,45 µm, diameter ± 47 mm.

Filter holder dan spuit injeksi.

Prosedur :  1. Buatlah media uji yang terdiri dari media uji untuk inokulasi 15 ml  dan media uji untuk membran 100 ml

2. Pindahkan volume yang didinginkan untuk kedua media   sebanyak 20 wadah

Diameter Ukuran pori Volume

13 mm 

25 mm

0,2 mm 

0,2 mm

0,45 mm

1,2 mm

0,8 ml 

0,7 ml

1.0 ml

2,3 ml

3. Lewatkan segera tiap spesimen melalui penyaring dengan      bantuan pompa vakum atau tekanan

 

IV. 6 PENETAPAN KADAR

Alat            : Kromatografi Cair Kinerja tinggi

Prosedur     : 1. Buat larutan baku : timbang seksama sejumlah  kloramfenikol, larutkan dalam fase gerak dan encerkan secara

kuantitatif

2. Buat larutan uji : ukur seksama sejumlah volume sediaan   uji setara dengan lebih kurang 50 mg kloramfenikol, masukkan kedalam

labu ukur 100 ml, tambahkan fase gerak sampai tanda. Pipet 5 ml larutan ke dalam labu ukur 25 ml ad.kan sampai tanda. Saring

melalui penyaring dengan porositas 0,5 µm atau lebih kecil dan gunakan filtrat yang jernih sebagai larutan uji

3. Fase gerak = air : metanol : asam asetat glasial (55:45:0,1)

4. Suntikkan secara terpisah masing-masing sejumlah   volume sama (10µL) larutam baku dan larutan uji ke dalam kromatografi, rekam

dan ukur respon puncak utama, hitung jumlah dalam mg, dengan rumus :

2,5C (ru/rs)

Ket :  C             = kadar kloramfenikol dalam µg/ml

ru dan rs = respon puncak larutan baku dan uji.

 

 

 

 

 

BAB V

PEMBAHASAN

 

Sediaan tetes mata adalah sediaan steril yang bebas dari partikel asing dan mikroorganisme, dibuat dengan cara yang sesuai serta

dikemas untuk digunakan pada mata. Struktur penyusun organ mata  bersifat sensitif sehingga mudah terluka dan terinfeksi bila

terkena partikel asing dan bakteri.  Mata juga dilindungi oleh cairan-cairan (mengandung enzim yang bersifat bakteriostatik) yang

dihasilkan kelenjar air mata. Cairan mata juga merupakan cairan steril yang secara terus menerus membilas mata dari bakteri, debu

dan lain-lain. Karena     hal-hal tersebut, maka sediaan mata harus steril.

Bahan tambahan dan cara pembuatan obat tetes mata sangat tergantung dari sifat fisika kimia bahan aktifnya. Pada sediaan

parenteral, termasuk sediaan mata, bahan tambahan yang digunakan tidak terlalu banyak karena mempertimbangkan stabilitas dan

tonisitas sediaan. Penggunaan bahan tambahan bertujuan untuk menjaga stabilitas kimia, memperbaiki efek klinis serta mengurangi

ketidaknyamanan.

Pada praktikum ini, bahan aktif yang digunakan adalah kloramfenikol. Kloramfenikol tidak stabil terhadap cahaya dan suhu. Oleh

karena itu diperlukan perlakuan tertentu untuk menjaga stabilitas, yaitu menggunakan wadah sediaan yang tidak tembus cahaya serta

menggunakan metode filtrasi untuk sterilisasi sediaan. Selain itu perlu ditambahkan dapar untuk menjaga pH sediaan agar sesuai

dengan pH stabilitas kloramfenikol (4,5 – 7,5) dan diusahakan  tidak terlalu jauh dari pH fisiologis mata (3,5 – 10,5) agar tidak

menimbulkan rasa sakit dan iritasi saat penggunaan. Berdasarkan hal tersebut, maka dipilih dapar sitrat dengan pH 6.

Sediaan obat tetes mata yang dibuat adalah multiple dose sehingga memungkinkan terjadinya kontaminasi bakteri selama pemakaian

dan penyimpanan sediaan. Untuk mengantisipasi  kontaminasi tersebut maka perlu ditambahkan bahan pengawet, yang terpilih adalah

benzalkonium klorida.

Volume sediaan yang dibuat adalah 5 ml. Pada umumnya, volume sediaan tetes mata tidak terlalu besar. Hal ini dikarenakan jaminan

sterilitas sediaan tetes mata multiple dose hanya sekitar satu bulan. Jika lebih lama dari itu, dikhawatirkan telah banyak

mikroorganisme yang mengkontaminasi sediaan sehingga akan menimbulkan efek yang tidak diinginkan.

Sterilisasi dilakukan dengan filtrasi teknik aseptis, sehingga proses pembuatan sediaan ini dilakukan di dalam laminar air flow (LAF).

Setelah menimbang seluruh bahan, dapar dilarutkan dalam WFI steril dan ditambahkan bahan aktif. Kemudian dimasukkan pengawet

sambil dicek pHnya. Selanjutnya sediaan disaring sebanyak dua kali, yang pertama disebut klarifikasi dengan tujuan untuk menurunkan

jumlah partikel dan mengurangi bioburden. Klarifikasi dilakukan dengan menggunkan kertas saring Whatman 54 dengan diameter pori 

0, 45 µm. Penyaringan yang kedua (filtrasi) bertujuan untuk membebaskan larutan dari bakteri, dilakukan dengan menggunakan filter

membran dengan diameter pori 0,2 µm. Proses filtrasi ini sekaligus pengisian ke dalam wadah dan merupakan tahapan yang paling

kritis, karena sebelum melewati membran, larutan masih belum steril, namun larutan yang telah melewati membran dan menetes

masuk ke wadah sediaan adalah larutan yang sudah steril, sehingga sterilitas sediaan tetes mata sangat ditentukan pada tahap ini.

Untuk menguji sterilitas sediaan tetes mata yang telah dibuat maka dapat dilakukan beberapa uji evaluasi, diantaranya bubble point

test, uji sterilitas, uji bebas partikel, cek pH dan volume sediaan akhir, serta penetapan kadar.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

BAB VI

KESIMPULAN

 

pH akhir sediaan tetes mata = 6.

Hal ini berarti pH yang dicapai telah sesuai dengan yang diinginkan.

Hasil Bubble Point Test :

Volume udara yang tersisa dalam semprit adalah 0,767 ml (lebih kecil dari 0,8 ml) à memenuhi syarat

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

DAFTAR PUSTAKA

 

Ganiswara, S. G. 1995 Farmakologi dan Terapi. Edisi 4. Jakarta : Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.

hal. 657-659.

 

Lund, W. 1994. The Pharmaceutical Codex. Principles and Practice of Pharmacutics. Twelfth Edition. London : The

Pharmaceutical Press. p.786-790.

 

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1979, Farmakope Indonesia, Edisi III. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik

Indonesia.

 

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik

Indonesia.

 

Connors, K.A., 2000. Complex Formation, In: Alfonso R. Gennaro (Ed.), Remington: The Science and Practice of  Pharmacy,

20th ed., Philadelphia: Lippincott Williams and Walkins. p. 1210.

 

Reynolds, 1992. Martindale, The Extra Pharmacopeia, 28th ed., London: The Pharmaceutical Press. p. 1141.