PEMERIKSAAN SEROLOGI HIV/AIDS

A. Deteksi Antigen stadium dini: seronegatif, paparan +, Ag p24 ELISA Ab

B. Deteksi Antibodi mulai 4-8 minggu setelah infeksi / window periode

untuk diagnosis :

1.PenyaringWHO: 3 strategi berbeda jenis antigen dan tekniknya, sensitivitas tinggi, ELISA, aglutinasi, dot blot immunobinding a. Strategi I : keamanan transfusi/ transplantasi, surveillance b. Strategi II: surveillance, diagnosis c. Strategi III: diagnosis

2. Konfirmasia. Western blot: paling sering b. RIPA (Radio Immuno Precipitation Assay ): dg radioaktif c. LIA (Line Immuno Assay): WB, tetapi pemindahan prot virusdg meneteskan/ mencapkan mahal, sulit, lama, tidak lebih sensitif dp ELISA, hasil

IFA ( Immuno Fluorenscence Assay) sel limfosit dilabel fluoresen,dilihat dg mikroskop fluoresen

false +, false indeterminate

Tab. 1. Reagensia pada pemeriksaan pertama /penyaring No1 2 3

Reagensia

Produsen

Sensitivitas %100.00 100.00 99.34

Spesifisitas %99.43 97.16 98.30

Abbot HIV Abbot Murex HIV-1.2.O Abbot Enziygnost anti HIV Dade Behring plus

Tab.2. Reagensia pada pemeriksaan ke II/III untuk diagnosis No Reagensia Produsen Sensitivi tas %98.68 97.37 94.70 100.00 98.68 98.03 97.39 99.34

Spesifisi tas %100.00 100.00 100.00 99.43 99.43 99.43 98.86 98.30

1 2 3 4 5 6 7 8

Determin HIV 1 / 2 * Hexagon HIV* HIV Spot # Abbott HIV 1 / 2 gO** Immunocomb II HIV 1&2** Entabe HIV Dipstick ## HIV 1&2 Antibody Rapid Test* Enzygnost anti-HIV 1 /2 Plus**

Abbot Human Genelab Diagnostics Abbot PBS Organics Hepatika Laboratories Oncorobe Biotech Dade Behring

Tab. 3. Reagensia yang (pernah) dipakai di RSDK

NamaBioline

Sensitivi tas100%

Spesivisi tas99,8%

Aggp41, p24 (HIV-1) gp36 (HIV-2) gp41, p24 (HIV1) gp36 (HIV-2) HIV-1 subtipe O, POD conjugated (peroksidase) HIV-2

MetodaImunokromatografi

Determine Immunocomb Entebe

100% 100% 100%

99,7% 98,4% 100%

Imunokromatografi EIA Imunokromatografi

Enzygnost

100%

100%

ELISA

Western Blot (WB) Prinsip : prot virus dipisahkan secara elektroforesis, dipindahkan ke nitroselulosa, direaksikan dg serum penderita pita berwarna Penilaian hasil pemeriksaan WB menurut profil pita protein : POSITIF a.1 Envelope : gp41, gp120, gp160. a.2 Salah satu dari pita : p15, p17, p24, p31, gp41, p51,p55,p66. NEGATIF : Tidak ada pita. INDETERMINATE : Ditemukan pita-pita lain yang tidak termasuk kriteria positif. Kriteria penilaian tes WB : a. CDC (Centers for Disease Control)

: infeksi HIV +, 2 pita diantara : p24,gp41 atau gp120/gp160. b. WHO (World Halth Organization) : infeksi HIV +, paling sedikit 2 pita protein envelope. c. USFDA (United States Food and Drug Agency) : infeksi HIV +, bila ada pita p24, p31, dan gp41 atau gp120/gp160.

PEMERIKSAAN LABORATORIUM LAIN UNTUK DIAGNOSIS

Memulai

terapi dan monitoring hasil terapi

Jumlah sel limfosit T CD 4 / L darah viral load : jumlah RNA HIV dalam 1 L plasma/ serum

Tab 4. Pemeriksaan CD4 dan viral load

CD4Indikasi/menggambarkan - menghitung jumlah limfosit T CD4/ L darah - menggambarkan status imun tubuh

Viral Load-Jumlah (RNA) virus dalam 1 L darah - menggambarkan replikasi virus dalam sel-sel darah (tidak dalam jaringan tubuh yang lain/ limfonodi, lien, otak) undetectable (9.999 kopi/ L darah) - memulai terapi - monitor penyakit dan terapi

Nilai normal Tujuan

500-1500/ L darah (28-58% limfosit) - memulai terapi - monitor penyakit dan terapi

a. 1. 1. jumlah limfosit CD4+ 200 sel/ L, terapi direkomendasikan untuk dimulai. a.1. 2. jumlah limfosit CD4+ 200 - 350 sel/ L, terapi dapat ditawarkan untuk dimulai. a.1. 3. jumlah limfosit CD4+ 350 sel/ L dengan viral load 100.000 kopi/ L, terapi dapat dimulai atau ditunda. a.1. 4. jumlah limfosit CD4+ 350 sel/ L dengan viral load 100.000 kopi/ L., terapi ARV tidak dianjurkan. Metoda pemeriksaan Flow cytometry - PCR - bDNA (branched DNA): material bercahaya dihubungkan dengan partikel HIV. Jumlah cahaya yang terukur = jumlah virus. - NASBA (nucleic acid sequence based amplification): menghitung jumlah protein virus