MIKROBIOLOGI

PENDAHULUAN

Latar BelakangTidak ada satupun yang menggambarkan biologik sebaik mikrooraganisme, Mahluk hidup yang tidak bisa dilihat olah mata telanjang. Keanakaragaman biokimia atau mekanisme genetik, baik dalam bentuk maupun fungsi yang diperlihatkan dalam analisa mikrooraganisme, telah mengantar kita pada batas pemahaman biologi. Oleh karenanya, kebutuhan akan penemuan baru – suatu tes keabsahan hipotesa ilmiah – dapat dijumpai secara utuh pada mikrobiologi. Hipotesa yang berguna akan memberikan dasar bagi ilmu alam lain, dan keragaman mikrobia memberi peluang, dimana tantangan tersebut selalu ada.Prediksi, suatu bentuk praktis dari ilmu pengetahuan, adalah suatu produk yang dihasilkan oleh perpaduan antara teori dan praktik. Biokimia, biologi molekuler dan genetika merupakan perangkat atau wahana yang dibutuhkan untuk analisis mikroba. Dalam berbagai pengembangan, mikrobiologi dapat memperluas wawasan ilmu-ilmu tersebut. Seorang ahli mikrobiologi, mungkin menjelaskan berbagai proses pertukaran berbagai bentuk saling membutuhkan (Mutualisme), misalnya suatu kejadian kecil yang merupakan bagiannya. Dalam biologi, mutualisme disebut simbiosis, yaitu hubungan yang terus menerus antara organisme yang berbeda. Pemberian kegunaan utama pada satu pihak saja disebut parasitisme, yaitu suatu hubungan dimana inang memberikan kegunaan utamanya kepada parasit. Isolasi dan karakterisasi sebuah parasit, contohnya bakteri patogen atau Virus, seringkali membutuhkan rencana laboratorium, sehingga mirip dengan apa yang diperoleh organisme tersebut saat berada dalam sel inang. Kebutuhan ini kadang-kadang memjadi tentangan utama bagi peneliti.Pengertian Mutualisme, simbiosis dan pasitisme berkaitan erat dengan ilmu ekologi dan prinsip-prinsip biologi lingkungan, kesemuanya sudah masuk dalam mikrobiologi. Mikroorganisme merupakan hasil evolusi, suatu konsekuensi biologis dari proses seleksi alam, yang terjadi pada bentangan garaduil yang sangat luas pada organisme dengan berbagai keragaman genetik. Sejarah alam yang kompleks ini harus selalu ada dalam pikiran kita sebelum menyimpulkan mikroorganisme, bagian yang paling heterogen dari seluruh Mahluk Hidup.Sebelum penemuan jasad-jasad renik, semua benda hidup yang dikenal dianggap sebagai tumbuhan atau binatang; tidak terpikirkan adanya Jenis-jenis peralihan. Namun dalam abad ke-19, menjadi jelas bahwa jasad renik memiliki semua kemungkinan kombinasi sifat-safat tumbuhan dan binatang. Sekarang telah diakui secara umum bahwa jasad renik berkembang, dengan perubahan relatif sedikit, dari seluruh tumbuhan dan binatang.Kecenderungan para ahli biologi untuk menggolongkan semua jasad dalam salah satu dari 2 ”dunia”, tumbuhan atau binatang, menimbulkan sejumlah keganjilan. Misalnya jamur, digolongkan sebagai tumbuhan sebab sebagian jamur-jamur tidak bergerak, walaupun jamur hampir tidak memiliki sifat-safat lain dari tumbuhan dan menunjukan afinitas filogenik kuat dengan protozoa.Agar dapat menghindarkan penempatan sewenang-wenang kelompok-kelompok peralihan dalam “dunia” yang satu atau yang lainnya, Heckel mengusulkan pada tahun 1899, agar jasad renik ditempatkan dalam “dunia” yang terpisah, Protista. Menurut

definisi Heckel, dalam protista tergolong alga, Protozoa, jamur, dan kuman. Namun pada pertengahan abad ini, renik mikroskopik elektron yang baru mengungkapkan bahwa kuman secara fundamental berbeda dari tiga kelompok yang lain damal struktur sel. Ke-3 kelompok yang terakhir memiliki tipe struktur sel yang lebih maju, sama dengan sel-sel tumbuhan dan binatang, yang dinamakan eukariotik; kuman-kuman memiliki struktur sel yang lebih primitif, yang dinamakan prokariotik. Istilah protista digunakan sekarang untuk menunjukkan jasad-jasad eukariotik, sedangkan semua kelompok kuman dinamakan secara kolektif sebagai prokariota.Biologi umum membedakan antara eukariota (organisme yang memiliki membran inti) terhadap Prokariota (Organisme dimana DNA nya tidak dapat dipisahkan secara fisik dari sitoplama). Perbedaan lebih lanjut tentang eukariota dan prokariota misalnya akan dibedakan oleh ukurannya yang relatif besar dan adanya organela-organela yang terikat pada membran sel, misalnya Mitokondria.Eukariota dan Prokariota merupakan organisme, karena memiliki seluruh enzim yang diperlukan untuk fungsi replikasi (perbanyakan) dan memiliki perangkat biologi yang penting untuk memproduksi energi metabolik. Oleh karenanya eukariota dan Prokariora berbeda dengan virus yang bergantung pada inang untuk menjalankan fungsi seperti di atas.

Tujuan Dan Kegunaan PraktikumTujuan PraktikumACARA 1 :SterilisasiPraktikum Sterilisasi bertujuan untuk memperkenalkan dan melakukan salah satu cara memcegah pencemaran mikroba terhadap media, sampel dan peralatan yang digunakan untuk pemeriksaan.

ACARA 2 engenalan MediaPraktikum pengenalan Media bertujuan untuk memperkenalkan macam-macam media.

ACARA 3 enghitungan bakteriPraktikum penghitungan Bakteri bertujuan untuk mengetahui dan melakukan proses penghitungan koloni bakteri.

ACARA 4 engenalan Dunia MikrobaPraktikum Pengamatan bakteri bertujuan untuk mengenal berbagai kelompok mikroba berdasarkan bentuk, ukuran, komponen sel, gerak dan alat geraknya.

ACARA 5 :Kultur BakteriPraktikum Kultur bakteri bertujuan untuk memperkenalkan beberapa macam goresan yang dipergunakan pada kultur bakteri.

ACARA 6 engecatan GramPraktikum Pengecatan Gram Bertujuan untuk memperjalas ukuran morfologi bakteri.

Kegunaan PraktikumKegunaan Praktikum ini yaitu agar praktikan dapat mempelajari dasar-dasar Pratikum

mikrobiologi yang merupakan pengetahuan dasar dalam penerapan Mikrobiologi. Serta mempelajari Sterilisasi alat-alat praktikum beserta alat sterilisasinya, mempelajari alat-alat dan media yang digunakan dalam praktikum mikrobiologi, dapat membuat preparat hidup, dapat menghitung bakteri, mempelajari kultur bakteri, mengamati bakteri, dan Praktikan dapat melakukan pengecatan gram pada bakteri.

TINJAUAN PUSTAKA

SterilisasiSterilisasi merupakan Metode praktis yang dirancang untuk membersihkan dari mikroorganisme, atau sengaja untuk menghambat pertumbuhannya, yang nyata dari kepentingan dasar di banyak keadaan. Jenis dari mikroorganisme sangat berbeda dalam kelemahannya terdapat berbagai macam agen antimikroba, dan lebih banyak lagi, afek yang praktis dari agen ini pada adanya keadaan nyatayang sangat besar dipengaruhi oleh keadaan sekitar. Banyak yang akan bertahan, contohnya, pada cuaca tertentu organisme memiliki kulit, pada beberapa tubuh zat cair atau pada udara, Air, makanan, kotoran, atau ruangan berdebu. Caranya harus dirubah, oleh karena itu, dengan masalah nyata. Hal ini tidak mungkin, bagaimanapun pada garis besarnya tentunya prinsip dasar digaris bawahi pada umumnya digunakan cara untuk memusnahkan dan mengontrol kehidupan mikroba (Burdon, 1969).Cara kerja sterilisasi adalah cara kerja agar terhindar dari kontaminasi, cara kerja steril ini digunakan pada pembuatan media, pemeriksaan kultur dan pembuatan preparat. Sterilisasi dapat dilakukan secara; (1) Fisik di bagi menjadi beberapa bagian antara lain (a) dengan ”Hot air Sterilization” oven. Bahan dari gelas dibungkus dengan alumunium foil, suhu 170-250°C selama 2 jam. (b) panas basah dengan tekanan, suhu 121°C selama 15 menit. Alat yang digunakan adalah autoclave, caranya: alat-alat gelas dibungkus lagi dengan alumunium foil. (c) Pressure Cooker, caranya: panaskan air mendidih, biarkan klep uap terbuka agar keluar uap kemudian klep uap ditutup, lihat suhu dan tekanan, bila suhu telah 121°C dengan tekanan 1,5 atm, dijaga konstan selama 15 menit. Kemudian buka klep uap hingga tercapai tekanan nol, dan setelah suhu mencapai suhu kamar, alat dan bahan dikeluarkan. (2) Kimia yaitu dengan menggunakan zat-zat kimia seperti desinfektan, antiseptik. (3) Radiasi yaitu dengan menggunakan sinar Ultraviolet, biasanya digunakan pada ruangan dan alat-alat plastik. (4) Filter yaitu dengan menggunakan membran filter dan Vacum Pump (Anonim, 2007).

Pengenalan MediaPembiakan adalah proses perbanyakan organisme melalui penyediaan kondisi lingkungan yang sesuai. Mikroorganisme yang sedang tumbuh membuat replika dirinya, membutuhkan adanya elemen-elemen dalam komposisi kimia mereka. Nutrisi harus menyediakan elemen ini dalam bentuk yang mudah di metabolisme (Jawetz, etc. 2001). Demikian pula dengan media sebagai tempat berkembang biakan bekteri, karena media merupakan salah satu bahan yang terdiri dari campuran nutrisi zat makanan yang dipakai untuk menumbuhkan mikroba (Anonim, 2007)Kebanyakan berat kering dari mikroorganisme adalah bahan-bahan organik yang mengandung elemen-elemen karbon, hidrogen, nitrogen, oksigen, phospor dan belerang.Di samping itu, ion-ion anorganik seperti potasium, sodium, besi, magnesium, kalsium

dan klorida dibutuhkan untuk memfasilitasi katalis enzim dan mempertahankan Gradien kimia yang melelui membran sel (Jawetz, etc. 2001). Oleh karena itu adapun syarat-syarat untuk media yang baik adalah media harus mengandung semua nutrisi yang mudah digunakan bakteri, Media tidak mengandung zat-zat penghambat serta media harus steril (anonim, 2007)Klasifikasi media berasarkan fungsinya yaitu; (1) Enriched media, adalah sejumlah media umum yang kemudian ditambahkan dengan darah, serum, ekstrak tumbuh-tumbuhan atau kaldu yang mampu memacu pertumbuhan bakteri patogen. (2) media selektif, yaitu media yang menggunakan bahan-bahan kimia yang bersifat memacu pertumbuhan bakteri yang diinginkan. (3) media diferensial yaitu media yang ditamnahkan zat-zat kimia tertentu yang menyebabkan suatu mikroorganisme membentuk perubahan tertentu, sehingga dapat membedakan tipe mikrooraganisme. (4) Media Penguji, yaitu media dengan susunan tertentu yang digunakan untuk pengujian antibiotika, asam amino dan vitamin. (5) media Khusus yaitu media untuk menentukan tipe pertumbuhan mikroorganisme dan kemampuannya untuk mengadakam perubahan-perubahan tertentu. (6) media untuk bakteri Anaerob yaitu beberapa bahan kimia dapat ditambahkan untuk menguji kandungan O2 dengan pengikatan kimiawi (Anonim, 2007).

Perhitungan BakteriPada pemeriksaan suatu produk, jumlah bakteri akan menggambarkan mutu bahan baku, proses pembuatan dan tingkat kerusakan suatu bahan mekanan. Metode perhitungan sangat banyak, hanya biasanya metode yang dipilih adalah disesuaikan dengan kepentingan pemeriksaan, kecepatan dan ketepatan hasil pemeriksaan. Metode perhitungan itu adalah: (1) metode hitung bakteri, metode ini dapat dikerjakan tergantung dari jumlah bakteri yang hidup dengan aktifitas metabolisme (a) angka lempengan total, (b) pengenceran, Most Probable Number (MPN), (c) aktifitas metabolik. (2) Metode total bakteri hidup dan bakteri mati meliputi (a) berat kering bakteri, (b) kekeruhan, berdasarkan jumlah sinar yang diserap pada panjang gelombang tertentu, (c) hitung partikel elektronik, (d) hitung dengan mikroskop langsung, (e) Volume sel (Anonim, 2007).Dari sejumlah metode di atas beberapa saja yang sering digunakan untuk pemeriksaan rutin yaitu; (1) angka lempeng total ”Pour Plate” digunakan untuk menghitung bakteri dengan ketentuan yaitu (a) satu koloni bakteri dihitung satu sel bakteri hidup, (b) satu sel hidup dari sampel akan mampu membentuk koloni bakteri dalam lempeng petri dish, (c) dihitung jumlah koloni antar 30-300 koloni. Apabila kurang maka dihitung jumlah koloni yang ada, sedang apabila lebih dari 300 maka perlu dilakukan pengenceran. (2) penghitungan bakteri dengan bakteri ”Spread Plate”, prinsip hitung bakteri dengan metode ini adalah meratakan bakteri yang terdapat di dalam sampel dengan volume tertentu di atas permukaan media yang sesuai. (3) Most Probable Number (MPN), adalah perhitungan bakteri dengan cara menggunakan variasi jumlah tabung yang sudah ada di dalam standard (Anonim, 2007).Slide spesial-counting Chambers sebagaimana penghitung bakteri Petroff-Hausser juga digunakan untuk membuat perhitungan langsung. Perhitungan bakteri ditempatkan pada sebuah jalur ruangan, dimensi dari yang kita tahu, dan dibungkus dengan yang kecil. Pengujian dapat di buat dengan lebih banyak kepuasan dengan lapangan-gelap atau fase mikroskopis, jika sel tidak ditandai dan karena itu tidak terlalu mencolok oleh pengujian

terang-lapang. Sejak counting cahmber diputuskan mati di dalam area yang pasti dan sejak kedalaman dari perhitungan pada ruangan diperhitungkan di ketahui, berarti bahwa di atas volume lain daerah yang diatus dapat dijumlahkan. Semuanya adalah dibutuhkan, oleh karena itu, apakah dijumlahkan nomor dari organisme di beberapa area, rata-rata mendapatkan bilangan untuk menghitung per area, dan juga mengalikan rata-rata ini oleh sebuah faktor yang tepat memasukkan penjumlahan ke nomor bakteri per milimeter (Pelczar, etc. 1958).

Pengenalan Dunia MikrobaKetika manusia tekun mempelajari lensa optik dan menggunakannya untuk mengamati benda yang sangat kecil yang tidak dapat dilihat oleh mata telanjang, mereka membawa sebuah sejumlah dunia baru kedalam pandangan-sebuah dunia dari tumbuhan dan binatang yang sangat kecil yang terdiri dari miliaran dari mereka yang dapat ditemukan pada setetes air atau susu dan ribuan dari mereka dapat menunjukan pada kepala dari sebuah titik. Ini adalah dunia dari menit tapi mahluk yang sangat kuat. Organisme ini, tidak dapat dilihat tanpa bantuan dari kekuatan mikroskop, dapat membuat manusia menjadi sakit dan bahan yang kuat menjadi lemah; mereka dapat membuat makanan tidak terjaga dan tidak enak: mereka dapat menghancurkan bangunan, tenda membusuk, dan kecelakaan pesawat. Beberapa dari mereka di memproduksi obat dan konsentrat yang efeknya sangat berbahaya dari ancaman mikroba; beberapa yang dimasukkan dalam jus dari anggur ke dalam wine dan apel manis sari buah apek ke dalam cuka; yang lain, menukar kanji dan gula ke dalam buah dan butir padi ke alkohol. Beberapa mikroba dibuat dari kulit yang kuat, lunak dan sangat lunak; lainnya ”obat” tembakau dan asinan/acar, kraut, dan makanan lainnya karakteristik mereka rasa dan tekstur. Meskipun daftar prodek penting penyebab dari aktivitas mereka yang panjang dan mengejutkan, tak seorangpun memperkirakan sampai seratus tahun yang lalu berapa banyak dan berapa banyak jalan efek mikroorganisme pada kehidupan kita (Pelgzar, etc. 1958). Phycomycetes yang penting dari segi medis sesungguhnya merupakan cendawn umum yang biasa terdapat dalam udara dan tanah,termasuk kapang roti yang umum yaitu Mucor dan Rhizopus.Sebagian besar cendawan ini termasuk kedalam genus yang lebih tinggi tingkat perkembangannya di dalam kelas Phycomycetes dan bereproduksi baik secara aseksual maupun seksual. Mereka merupakan pathogen oportunis, artinya tidak menyebabkan penyakit pada inang sehat tetapi menyebabkan mikosis (Pelczar, 2005).Pada Saccharomycetaceae atau ragi yang sejati tidak ada miselium.Ragi untuk membuat roti atau bir adalah galur-galur fisiologi dari Saccharomyces cereviseae.Sel-sel kuntum haploid dapat meleburkan diri.Kariogmi langsung dapat dilanjutkan dengan meiosis atau pembentukan empat buah askospora.Tetapi dapat juga sel-sel diploid memperbanyak diri dengan berkuntum (Hans,1994).

Kultur MikrobaSaat bakteri di inokulasi kedalam sebuah medium dan di inkubasi secukupnya, kumpulan sel menjadi tak terlihat. Bakteri ataupun mikroorganisme lainnya tumbuh di sebuah medium laboratorium yang berhubungan dengan mengkultur. Spesies yang berbeda dari pertumbuhan bakteri pada media beberapa macam media yang sama lebih terlihat berbeda; jadi diketahui dari penampilan, atau ciri khas kultur, dari sebuah species sangat berguna untuk pengenalan tipe yang pasti dari bakeri dan dapat uga disediakan sebagai

bantuan dalam mengidentifikasi spesies. Bagaimanapun bakteri harus didapatkan sebuah dari kultur murni sebelum ciri khas kultur atau pada tempat lain dari sebuah spesies yang dapat ditentukan (Pelgzar, 1958).Untuk mempelajari sifat-sifat dari masing-masing mikroba termasuk sifat pertumbuhan, morfologi dan sifat fisiologinya, masing-masing mikroba tersebut harus dipisahkan satu dengan yang lainnya, sehingga terbentuk kultur murni yaitu suatu biakan yang terdiri dari sel-sek dari satu spesies atau satu galur mikroba, dengan cara menggoreskan kultur ke medium padat. Ada beberapa cara untuk menggoreskan kultur pada agar cawan yaitu; (1) Goresan Langsung, (2) Goresan kuadran, (3) Goresan radian. Koloni yang tumbuh pada agar cawan dapat dibedakan dalam besarnya, warna, penampakan apakah keruh atau bening, bentuk penyebarannya, bentuk kemunculannya di atas agar dan bentuk permukaan (Anonim, 2007)Agar tumbuh suatu organisme membutuhkan seluruh elemen dalam bahan-bahan organiknya dan komlpemen ion-ion yang dibutuhkan untuk energi dan katalisis. Disamping itu harus ada sumber energi untuk memantapkan proton motive force dan untuk memungkinkan sintesis makromolekul. Mikroorganisme sangat beragam kebutuhan nutrisi dan sember energi metabolismenya (Jawetz, etc. 2001).

Pengecatan GramKebanyakan sel bakteri tidak berwarna, sehingga jika dilarutkan dalam air dan diperlihatkan di bawah mikroskop tidak memperlihatkan warna kontras dengan medium disekelilingnya. Beberapa zat yang digunakan untuk mengamati struktur bagian dalam sel. Dalam pewarnaan mikroba, dapat digunakan satu jenis warna, cara ini disebut pewarnaan sederhana. Zat-zat warna yang biasa digunakan untuk pewarnaan bekteri dapat dibedakan atas beberapa golongan yaitu: pewarnaan sederhana, pewarnaan diferensial, pewarnaan strukturan dan pewarnaan untuk menguji adanya komponentertentu di dalam sel (Anonim, 2007)Karakteristik taksonomi penting bakteri adalah reaksi mereka terhadap pewarnaan gram. Pewarnaan gram menjadi penting karena reaksi gram berhubungan dengan sifat morfologi lain dalam bentuk hubungan filogenik. Organisme yang berpotensi gram positif mungkin hanya dapat dilihat dengan pewarnaan gram pada kondisi lingkungan yang sesuai dan pada biakan muda. Prosedur pewarnaan gram dimulai dengan pemberian pewarna basa, kristal violet. Larutann iodine kemudian ditambahkan; semua bakteri akan diwarnai biru pada fase ini. Sel kemudian diberi alkohol. Sel gram positif akantetap mengikat senyawa kristal violet-iodine, tetap berwarna biru; sel gram negatif warnanya hilang oleh alkohol. Sebagai langkah terakhir, counterstain (misalnya Safranin pewarna merah) ditambahkan, sehingga sel gram negatif yang tidak berwarna, akan mengambil warna kontras; sedangkan sel gram positif terlihat dalam warna biru (Jawetz, etc. 2001).

MATERI DAN METODE PRAKTIKUM

Materi PraktikumAlat-alat Praktikum1.Lampu Bunsen dengan bahan bakar Gas2.Petri dish3.Lampu UV

4.Lampu Bunsen dengan bahan spirtus5.Erlenmeyer6.Gelas Kimia7.Tabung Reaksi8.Alumunium foil9.Ose10.Golf Stick11.Glass objek12.Cover Glass13.Pipet tetes14.Pipet Ukur15.Mortal16.Stomacher Sirculator17.Volt tage18.Inkcubator19.Autoclave20.Mikroskop

Bahan-bahan Praktikum1.Aquades2.SSA (Salmonella Sigela Agar)3.MSA4.Agar Darah5.EMBA6.BSA7.kapas8.Cat Gram9.Biakan bakteri dalam media padat

Metode PraktikumACARA 1 : SterilisasiAdapun cara kerja dari Praktikum Sterilisasi yaitu;1.Sterilisasi dengan pemijaran. Caranya; dengan meletakkan alat-alat di atas api2.Sterilisasi dengan AutoClave. Caranya; alat-alat gelas dibungkus kertas, sedangkan media ditutup dengan kapas kemuadian dilapisi dengan alumunium foil, masukan ke dalam AutoClave, kemudian Stel AutoClave pada tekanan 121°C dan waktu 15 menit.

ACARA 2 : Pengenalan MediaAdapun cara Kerja dari Praktikum pengenalan Media dan Alat yaitu;1.media yang telah tersedia dikenalkan satu persatu kapada Praktikan2.kemudian media di gambar.

ACARA 3 : Menghitung BakteriAdapun Cara kerja dari praktikum menghitung bakteri yaitu;1.Dengan menggunkan pipet Steril dilakukan pengenceran bahan pemeriksaan seri 10-², 10-³ dst …

2.diambil 1 ml dari masing-masing seri pengenceran3.tambahkan 10-15 ml nutrien agar cair suhu 45°C pada setiap petri dish.4.campurlah dengan cepat antara sampel yang telah diencerkan dengan media, kemudian digoyang dengan gerak memutar di atas bidang datar.5.tunggu sampai media beku sempurna, inkubasi 37°C selama 24-48 jam.6.hitung jumlah koloni.

ACARA 4 : Pengenalan Dunia MikrobaPembuatan Preparat hidup:•Tetes TegakDengan cara aseptis/steril menggunakan pipet tetes ditaruh satu tetes bahan pemeriksaan di atas objek glass lalu ditutup dengan Cover glass (untuk menghindari gelembung udara pada preparat maka saat menutup Cover glass bersudut 45° lalu tutup)

ACARA 5 : Kultur MikrobaMenggoreskan kultur Bakteri dengan menggunakan jarum ose kemudian di inkubasi 37°C selama 24 jam.

ACARA 6 : Pengecatan Gram1.Preparat yang telah siap di cat di taruh di atas jembatan pengecat2.di tambah karbol gentian Violet dibiarkan 1-3 menit, dicuci air mengalir3.ditambah Lugol dibiarkan 1 menit, dicuci dengan air mengalir4.ditambah etanol 96 % dibiarkan ¼ – ½ menit, dicuci dengan air mengalir5.Keringkan di udara6.Dilihat di bawah Mikroskop.

Tempat Dan Tanggal PraktikumTempat PraktikumPraktikum Mikrobiologi ini dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi UNRAM.

Tanggal PraktikumPraktikum ini dilaksanakan pada tanggal 10, 12, 14 dan 15 mei 2007.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil PraktikumHasil Pengamatan

ACARA 1 : SterilisasiTabel 1.

1.Lampu UV adalah alat untuk mensterilkan ruangan2.Lampu Bunsen dengan bahan bakar spirtus berfungsi Untuk membakar dan mensterilkan dengan bahan bakar Spirtus3.Lampu Bunsen dengan bahan bakar gas adalah Alat untuk membakar dan mensterikan alat dengan bahan bakar gas

4.Erlenmeyer adalah Alat untuk mencampur Larutan dan sampel yang akan direaksikan5.Gelas Kimia adalah Alat untuk mengukur larutan yang akan dicampurkan bersama media6.Tabung Reaksi adalah Alat untuk menyimpan dan mereaksikan sampel7.Alumunium Foil adalah Alat untuk menutup sampel agar tidak terkontaminasi oleh mikroorganisme8.Ose adalah Alat untuk mengangkat bakteri dan menyimpannya ke media9.Golf Stick adalah Alat untuk meratakan media/sampel10.Petri Dish adalah Alat untuk menanam Bakteri11.Objek Glass adalah Alat untuk menyimpan objek/sampel yang akan diamati di Mikroskop12.Cover Glass adlalah Alat untuk menutup sampel/objek yang akan diamati di mikroskop13.Pipet tetes adalah Alat yang berfungsi untuk mengambil larutan berdasarkan ukuran per tetes14.Pipet Ukur adalah Alat yang digunakan untuk mangambil larutan berdasarkan ukuran.15.Mortal adalah Alat untuk menghancurkam sampel16.Stomacher Sirculator adalah alat yang lebih modern namum berfungsi sama dengan Mortal yaitu Alat untuk menghancurkan sampel17.Volt tage adalah Alat untuk menghomogenkan sampel18.Inkubator adalah tempat untuk menumbuhkan bakteri19.AutoClave adalah Alat untuk mensterilkan alat-alat dan bahan.Sumber: Data Primer di olah tahun 2007

ACARA 2 : Pengenalan MediaMedia Selektif1.SSA (salmonela Sigela Agar)-> Untuk menumbuhkan sigela dan salmonela2.MSA (Manitold salt Agar)-> Tidak digunakan dalam Praktikum ini3.BSA (Bismuth Sulfit Agar)-> Tidak digunakan dalam praktikum ini.

Media Diferensial1.Agar Darah adalah Berguna sebagai media penumbuh bakteri, yang berasal dari darah yang dibentuk sedemikian rupa2.EMBA (Eosin Metilen Bleu Agar)adalah Semua bakteri dapat ditumbuhkan di EMBA. Contohnya bakteri E. Coli warnanya akan gelap.3.MACKE (Much Counkey Agar)terdiri dari 1.Nutrien Agar.

1. EMBA (Eosin Metilen Blue Agar)adalah Termasuk media yang dapat menumbuhkan bakteri E. Coli, Warna E. Coli akan gelap.

2. NA (Nutrien Agar)berguna untuk Mengetahui adanya bakteri E. Coli, Warnanya Bening3. SSA (Salmonela Sigela Agar)adalah Untuk menumbuhkan bakteri Salmonela dan Sigela4. Much Counkey Agar (MCA)adalah Untuk melihat bakteri E. Coli, termasuk media

diferensialSumber: Data Primer diolah tahun 2007

ACARA 3 : Menghitung BakteriTabel 3.Kelompok Bahan Makanan Jumlah Koloni10-1 10-2 10-3 10-4 10-51 Susu 121 129 285 182 1922 Daging Ayam 0 0 235 205 -3 Telur 84 44 12 – -4 Daging Sapi 300 313 278 165 335 Yakult 2 1 – - -Sumber: Data Primer di olah tahun 2007

Tabel 4.No Bahan Makanan Koloni (CFU/Gram)10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 Rata-rata1 Susu 1210 12900 285000 1820000 19200000 42638222 Ayam – - 235 205 – 11425003 Telur 84 44 12 – - 5746,674 Daging Sapi >300 313 287 165 33 10542605 Yakult 20 100 – - – 60Sumber: Data Primer diolah tahun 2007

PEMBAHASAN

Tidak satupun yang menggambarkan keanekaragaman biologik sebaik mikroorganisme, mahluk hidup yang tidak terlihat oleh mata telanjang (Jawetz, etc. 2001). Dunia tersebut dapat kita pelajari secara mendalam pada ilmu Mikrobiologi. Ilmu ini mempelajari Mikroorganisme yang merupakan bagian lain dari mahluk hidup yang ada di muka bumi. Prediksi, suatu bentuk praktis ilmu pengetahuan, adalah suatu produk yang dihasilkan oleh perpaduan antara teori dan Praktik (Jawetz, etc. 2001), dalam hal ini mikrobiologi merupakan ilmu yang mendalami mikroorganisme untuk penerapannya dalam kehidupan agar ditemukan cara-cara terbaik dalam penyelesaian masalah-masalah yang timbul dalam kehidupan dalam hal ini semakin banyaknya penyakit yang disebabkan oleh bakteri, jamur, virus dan kuman yang menyebabkan semakin kompleksnya permasalahan yang menyangkut mikroorganisme. Namun, selain akibat yang tidak menguntungkan tersebut banyak mikroorganisme yang dapat dimanfaatkan dalam kehidupan manusia misalnya Ragi untuk membuat roti, Produk-prodek hasil pemanfaatan mikroorganisme tersebut telah menyebar dan bahkan subah menjadi kebutuhan kita karena pada umumnya dimanfaatkan dalam mengolah bahan pangan.Dalam prakteknya, untuk pembiakan bakteri kita memerlukan alat-alat yang steril. Steril sendiri merupakan keadaan bebas dari pertumbuhan mikroba beserta sporanya. Untuk itu pada prakteknya kita membicarakan sterilisasi sebagai proses pembunuhan seluruh organisme yang ada pada preparat. Dari pertimbangan di atas kita melihat tidak ada sekumpulan kondisi yang menyamai mensterilkan preparat (Jawetz, etc. 2001). Dalam

praktikum mikrobiologi yang praktikan lakukanpun melakukan hal yang demikian adapun yang praktikan dapatkan dari praktikum sterilisasi ini adalah bahwa ada beberapa cara namun yang kami amati untuk melakukan sterilisasi yang dapat dilakukan secara fisik dengan memanaskan menggunakan beberapa alat yang biasanya telah tersedia di setiap laboratorium mikrobiologi. Alat alat tersebut yaitu Hot Air Sterilisation, AutoClave dan Pressure Cooker.

Pembiakan adalah proses perbanyakan organisme melalui penyediaan kondisi lingkungan yang sesuai. Mikroorganisme yang sedang tumbuh membuat replika dirinya, membutuhkan adanya elemen-elemen dalam komposisi kimia mereka. Nutrisi harus menyediakan elemen ini dalam bentuk yang mudah di metabolisme (Jawetz, etc. 2001). Demikian pula dengan media sebagai tempat berkembang biakan bekteri, karena media merupakan salah satu bahan yang terdiri dari campuran nutrisi zat makanan yang dipakai untuk menumbuhkan mikroba (Anonim, 2007).

Media yang diperkenalkan pada para praktikan pada praktikum pengenalan media ini adalah SSA (Salmonela Sigela Agar), NA (Natrium Agar), MCA (Much Counkey Agar), MSA (Manitold Salt Agar) pada media ini yang merupakan tempat pembiakan bakteri yang steril karena dalam media agar ini telah tersedia nutrisi yang cukup bagi tiap bakteri. Setiap jenis media menerangkan perbedaan kandungan bakteri yang akan berada pada media tersebut.

Setelah diperkenalkan dengan media, praktikan di ajari menanam bakteri ke dalam media dimana setelah di tanam media di simpan ke dalam inkubator yang merupakan tempat yang cocok untuk tempat bakteri sesuai dengan suhu yang diperlukan. Dalam hal ini, penanaman dilakukan setelah bahan yang di tumbuhkan dalam tabung reaksi dikeluarkan secara perlahan-lahan dan di dekatkan dengan api agar behan yang akan di tanam tetap steril dan tidak terkontaminasi mikroba lainnya. Setelah beberapa hari media di keluarkan dari inkubator dan dihitung banyaknya koloni dalam tiap media, setelah di hitung maka untuk mendapatkan nilai rata-rata dari semua bakteri yang telah ditanam maka di hitung dengan rumus jumlah koloni dikalikan dengan 1/ faktor pengenceran. Untuk faktor pengenceran bahan yang akan di tanam diambil 10-1 kemudian di masukkan ke tabung lain dan begitupun seterusnya tabung satu dengan tabung yang lain dimasukkan dengan perbandingan 10 ml / tabung.

Dari hasil perhitungan ini, media digunakan lagi untuk mengkulturnya ke dalam SSA, NA, MCA dan MSA dengan menggunakan tehnik penggoresan yang berbeda-beda. Hasil yang di dapatkan akan mengikuti kultur yang ada, bakteri akan tumbuh sepanjang goresan yang dilakukan. Setelah bakteri tumbuh maka bakteri di ambil dengan menggunakan jarum ose dan dilakukan pengecatan dengan menggunakan Gram 1, 2, 3 dan 4 yang memiliki kegunaan yang berbeda-bada untuk pewarnaan.

KESIMPULAN DAN SARAN

Kesimpulan

Adapun kesimpulan yang dapat diambil dalam praktikum ini yaitu:1.Sterilisasi merupakan cara membuat suatu alat atau bahan menjadi bebas dari pertumbuhan mikroba beserta sporanya. Dari pertimbangan tersebut tak ada kondisi yang menyamai mensterilkan preparat.2.Media merupakan salah satu bahan yang terdiri dari canpuran nutrisi zat makanan yang dipakai untuk menumbuhkan mikroba.3.Proses penghitungan suatu bakteri dilakukan dengan menggunakan rumus jumlah koloni dikalikan dengan 1/faktor pengenceran4.Setiap mikroba memiliki bentuk, ukuran, komponen sel, gerak dan alat gerak yang berbeda.5.Kultur Mikroba merupakan cara untuk memperbanyak bakteri6.Untuk memperjelas ukuran dan Bentuk morfologi bakteri maka dilakukan pengecatan.

SaranAdapun saran yang dapat diambil dari Praktikum ini adalah:1.Pada saat membuat media ataupun memindahkan mikroba di tempat lain maka diharapkan agar tempat memindahkan media tersebut steril dan selalu dekat dengan alat yang digunakan agar tetap steril.

2.Diperlukan pemahaman yang mendalam untuk mengenal media agar dapat memilih media yang tepat untuk menanam media.

3.Dalam menghitung bakteri diharapkan agar Counting Chamber berada pada posisi nol sebelum melakukan penghitungan

4.Dalam mengenal berbagai kelompok mikroba berdasarkan bentuk, ukuran, komposisi sel, gerak dan alat geraknya di perlukan perhatian yang cukup agar dapat membedakannya dengan baik.

5.Dalam mengkultur mikroba di perlukan ketelitian dalam melakukan penggoresan agar mikroba yang akan di amati dapat tumbuh dengan baik.

6.Diharapkan agar pada saat melakukan pengecatan gram pada glass objek untuk tidak terlalu banyak agar tidak terjadi kelebihan warna juga pada saat pengeringan dengan menggunakan panas pada api untuk tidak terlalu dekat agar glass objek tidak pecah.

DAFTAR PUSTAKA

Anonim, 2007.Petunjuk Praktikum Mikrobiologi.Mataram.Universitas Mataram Press.

Burdon Ph.B., Sc.M., Ph.D., Kenneth L. & Williams, A.B., Sc.M., Ph.D., Robert P. 1969. Mycrobiology. London, Collier-McMillan Publisher.

Jawetz E., Melnick J.L., Adelberg E.A., 1982. Mikrobiologi untuk profesi kesehatan. Jakarta, EGC Press.

Jawetz E., Melnick J.L., Alderberg E.A., 2001. Mikrobiologi kedokteran. Surabaya, Airlangga University Press.

Pelgzar & Reid, 1958. Mycrobiology. Tokyo, McGraw-Hill Company Press.

Pelczar, J Michael, 2005. Dasar-Dasar Mikrobiolog. Jakarta, Universitas Indonesia Press

http://mikroorganisme.blog.com/2009/06/20/mikrobiologi-2/