MOST PROBABLE NUMBER (MPN)

RITA ENDRIANI

Pendahuluan- Test u/ mengetahui tingkat kontaminasi air minum oleh

Coliform dan E. coli- Tujuan: untuk mendeteksi bakteri-bakteri patogen

enterik yang mencemari sumber air minum

- Dasar: seberapa besar Coliform dan E. coli mampu meragi laktosa

Tahap-tahap

- Tahap ada 3:* Presumtif test Laktosa broth* Comfirmatif test BGLB/ EMB* Completed test Endo atau LB

yang dilanjutkan pewarnaan Gram

Metode

- Multi tube test* seri 3 3 3* seri 5 1 1* seri 5 5 5

Alat dan Bahan

Air minum dari sumber airTabung reaksi yang berisi Lactosa broth dan

tabung durhamPipet sterilInkubator

Cara Kerja Uji Presumtifmetode 5 5 5

Siapkan satu seri tabung reaksi sesuai metode yang digunakan

Ke dalam masing-masing tabung dimasukan tabung durham

Ke dalam masing-masing tabung dimasukan 10 ml laktosa broth

Samb....

Masukan sampel sebanyak 0,1 ml ke dalam 5 tabung yang berisi laktosa broth dengan menggunakan pipet steril.

Masukan sampel sebanyak 1 ml ke dalam 5 tabung yang berisi laktosa broth dengan menggunakan pipet steril.

Masukan sampel sebanyak 10 ml ke dalam 5 tabung yang berisi laktosa broth dengan menggunakan pipet steril.

Samb...

Inkubasikan semua tabung pada suhu 370C selama 24 jam

Setelah 24 jam lihat hasilnya dan bandingkan dengan tabel indeks MPN

Hasil

Positif: bila terbentuk gas yang tertangkap dalam tabung Durham

Negatif: bila tidak terbentuk gas

Samb....

Tabel MPN metode 5 5 5

Cara Kerja Uji Comfirmatif dg BGLB

Sediakan tabung reaksi yang berisi 10 ml BGLB dan tabung durham

Diambil 1 osse air tabung yang positif pd uji presumtif

Masukan ke dalam BGLB Inkubasikan secara duplo pada suhu

35,50C dan 44,50C selama 24 jam

Hasil

Positif : adanya gas yang tertangkap dalam tabung durham

Negatif: tidak adanya gas

Interprestasi hasil

Positif suhu 35,50C menguatkan uji presumtif Coliform total Coliform

Positif suhu 44,50C fecal Coliform

Cara Kerja Uji Comfirmatif dg EMB

Diambil 1 osse air pada tabung yang positif pada uji presumtif

Kultur pada media EMB Inkubasi pada 370C selama 24 jam

Hasil EMB

Tampak koloni dengan gambaran kilat logam kehijauan (green metallic sheen) E.coli.

Cara Kerja Uji Completed

Media Endo kultur koloni kmdian identifikasi Pewarnaan Gram dan Reaksi biokimia E.coli

LB kultur dan adanya gas yang tertangkap tabung durham pewarnaan Gram dan Reaksi biokimia E.coli