7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

1/12

7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

2/12

PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA

MEMBRAN PLASMA

Penelitian ini menemukan hubungan biosentesa VLCFAs

dengan efek fitotoksik herbisida chloroacetamide

Sampel : bibit mentimun

Chloroacetamidementimun VLCFAs

dalam membran plasma

Menggunakan 2 fase pemisahan &masingmasing di analisa kandungan asam lemaknya

VLCFAs yang menjadi sumber pokok pemotongan rantaiacyl fungsi membran plasma kematian tanaman.

7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

3/12

Bahan Tanaman & Bahan Kimia :

-Biji mentimun (varietas delikatess) - [2-14C] Malonate-Lipid - Standar Asam Lemak

-Monensin - Reagen derivatesasi-Bahan kimia lainnya -Pelarut untuk analisa lipid

INKUBASI : Setelah di tumbuhkan & inkubasi 3 hari + metazachlor

tumbuhkan lagi 3 hari berikutnya, setiap 16 jam & 8 jam sehari semalam aturpada suhu 28 derajat C

PELABELAN BIBIT : Bibit di tumbuhkan di atas vermiculate & kran air +cahaya

, suhu sama selama 7 hari. Lalu sampel kotiledon di iris & 24 jam, 20 derajat C

di inkubasi dalam cawan petri berisi nutrisi dengan cahaya tanpa henti.

ISOLASI MEMBRAN PLASMA:

-Semaian bibit diblender homogen + (N-morpholino)asam

propanesulfonic saring & pisahkan dari plastid dengan sentrifugasi

selama 20 menit sentrifugasi kembali 1 jam suspensi ulang dalam

sukrosa + 2DTT + EDTA pecahan mikrosomal diperoleh sebagai pellet.

7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

4/12

Ada 3 analisa yang dilakukan :

1. Analisa asam lemak

- Asam lemak yang dihasilkan dari membran fosolipid dan cerebrosideberdasarkan sifat kimianya.

2. Analisa Lipid- Pecahan membran lipid di ekstraksi dengan modifikasi dari Bigh & Dayer

3.Analisa immunoblotAnalisa immunoblot menggunakan uji sodium dodecylsulfate (SDS-PAGE)

Uji Blot di kembangkan dengan alat deteksi

-ECL western blot chemiluminescence-Hyperfilm ECL film

7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

5/12

Hasil dan diskusi :

Membran plasma murni dan analisa lipid (lihattabel 1)

Membran tempat diperolehnya VLCFAsditemukan paling tinggi di membran plasma.(lihat tabel 2)

7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

6/12

7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

7/12

Komposis asam lemak pada intraseluler

membran dan plasma membran dengan dua

fase pemisahan :

7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

8/12

EFEK METAZACHLOR PADA MEMBRAN PLASMA

ASAM LEMAK :

-Analisis dari isi membran plasma menunjukkanbahwa metazachlor mengubah komposisi asam

lemak (gambar 3)

7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

9/12

EFEK METAZACHLOR PADA VLCFAs SINTESIS DE NOVO :

Efek inhibitor pada level membran VLCFAs dilakukan :

Mengukur penggabungan de novo melonate pertama ke

dalam lipid membran intra selular yang menghambat

biosintesa VLCFAs dalam RE & GOLGI

Melonate kedua ke dalam lipid membran plasma yang

disediakan dengan sintesis VLCFAs segar

Radio HPLC temukan plasma membran asam lemak yang

sudah di namai.

Dengan 1 M metazachlor penggabungan VLCFAs berhenti.

Monensin di gunakan sebagai pembanding chloroacetamide

(gambar 6)

7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

10/12

7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

11/12

KESIMPULAN DAN EFEK FITOTOKSIK

Efek metazachlor pada mentimun yang berkecambah :

Berefek pada susunan de novo membran

plastid, mitokondria & RE

Mengganggu pembelahan sel

Pergeseran asam lemak dapat mengakibatkan kematian sel

Bukti kuat VLCFAs berperan dalam sifat fisik dan

fungsi metabolisme pada membran plasma.

7/27/2019 PENGARUH CHLOROACETAMIDE PADA MEMBRAN PLASMA

12/12

SEKIAN

DAN

TERIMA KASIH