Penentuan Kombinasi Pengawet P-hidroksi Benzoat Acid Dalam Liquid

8/6/2019 Penentuan Kombinasi Pengawet P-hidroksi Benzoat Acid Dalam Liquid

http://slidepdf.com/reader/full/penentuan-kombinasi-pengawet-p-hidroksi-benzoat-acid-dalam-liquid 1/20

Anggita Mirzautika (051031023)

Evrasia Lely Agustin (051031037)

Vivi Erina (051031059)

Kireina OAA (051031081)

Cindy Oktaviana (051031161)



` menjelaskan metode uji untuk penentuan kombinasi pengawet asam p-hidroksi benzoat (ethylparaben (EP), metil (MP) dan propil (PP)) dalam

liquid phar maceutical for mulation dengan menggunakan kromatograficair kinerja tinggi fase ter balik (RP-HPLC). Pemisahan kromatografidicapai dengan menggunakan fase gerak buffer kalium fosfat (pH =7,05)-metanol (47.5 : 52.5, v/v) dengan kolom C18 Spherisor b (250mm

x 4,6 mm) dan deteksi UV pada 254 nm. Waktu analisis <8 min.Metode ini divalidasi berkaitan dengan linearitas, presisi, akurasi,selektivitas, spesifisitas dan ketegaran (ruggedness). Kurva kalibrasimenunjukkan linieritas yang baik dengan rentang konsentrasi 2-140 µg/ ml. Koefisien korelasi > 0,9999 dalam setiap kasus. Standar deviasirelatif (RSD) nilai untuk studi presisi intra dan inter-day adalah <1%.Prosedur yang dijelaskan di sini adalah sederhana, selektif dan cocokuntuk pengendalian mutu analisis rutin dan tes stabilitas.



Bahan

` Methyl 4-hydroxybenzoate (kemurnian> 99%), Etil4-hydroxybenzoate (kemurnian> 99%) dan propel 4-hydroxybenzoate (kemurnian> 99%) yang

digunakan dibeli dari Sigma (St Louis, MO).` Kalium dihidrogen fosfat dan natrium hidroksida

(analyiycal reagent grade) dan methanol (HPLCgrade) diperoleh dari Merck (Dar mstadt, Jer man).

`

Air suling De-ionized digunakan di seluruhpercobaan.



Per alatan

` Sebuah Perkin-Elmer HPLC, dilengkapi model detektor UV-Vis seri 200,

pompa LC seri 200, autosampler seri 200 dan LC kolom oven Peltier seri200, digunakan untuk kromatografi larutan. Pemisahan dicapaimenggunakan kolom Waters-Bondapak C18 (300mm x 3.9 mm). Datadiperoleh melalui akuisisi data software Perkin-Elmer Tur boChrom

Workstation, Version 6.1.0 menggunakan PE Nelson 600 interface seriLINK. Sebuah neraca analitik Oxford A2205D digunakan untuk menimbangstandar dan sampel. Selain itu, seperangkat filter Millipore, dan pengaduk(stirer) Corning PC-351 digunakan dalam penelitian ini. Fase gerak adalah

larutan air 52,5% (v / v) metanol mengandung 0.2M kalium dihidrogenfosfat dengan pH 7.05 ± 0,05 dan di adjust dengan sodium hidroksida 1M.Fase gerak disaring melalui membran filter 0,45 µm dan penghilanganudara sebelum digunakan. Flow rate 2,0 ml / menit. Deteksi UV dilakukanpada 254 nm. Volume yang diiinjeksikan adalah 20 µl. Semua sampel danstandar diencerkan dengan fase gerak.



` Dua puluh miligram dari masing-masing standar

ditimbang secara akurat, dilarutkan dalam metanol

pada labu ukur 100 ml. Lima mililiter aliquot MP, 1

ml dan 1ml EP PP dari baku standart ditambahkanke labu ukur 100 ml dan diencerkan dengan fase

gerak, menghasilkan konsentrasi akhir 10, 2 dan 2

µg / ml.



` Kira-kira 1 g sampel sediaan cair ditimbang

secara akurat, ditambahkan ke labu ukur 100 ml

labu dan kemudian diencerkan dalam fase gerak.

Sam

pel disaring dengan filter m

emb

ran 0,45 µm

dan disuntikkan ke kromatograf tersebut.



` Uji linieritas dilakukan dengan tujuh konsentrasi

ber beda MP, EP dan PP dalam kisaran 20-140%

di sekitar nilai teoritis (MP 10 µg/ml, EP dan PP 2

µg/m

l). Larutan yang sesuai untuk setiap tingkatkonsentrasi disuntik dan analisis regresi linier dari

daerah puncak MP, EP, PP (y) vs konsentrasi MP,

EP dan PP (X) dihitung (Tabel 3), MP (r 2 =

0,9999), EP (r2 = 1,0000) dan PP (r2 = 0,9999).



` The system precision di tentukan dengan meng-

analisa 6-sampel dari batch yang sama pada

suatu produk yang 100% telah dilakukan uji

konsentrasi. Sam

pel disim

pan pada 25°C selam

a6 bulan. RSD dari area pada peak paraben kurang

dari 0.9% (table 3), yang menunjukkan bahwa

metodenya sesuai secara presisi.



` Sejumlah bahan murni yang dikombinasi dengan

p-hidroksi benzoic acid ditambahkan pada sampel

untuk memberikan konsentrasi dalam rentang 75-

125% (n=3) pada preparasi untuk uji. Larutan inidi kromatografi. Recovery yang baik dari

kombinasi p-hidroksi benzoic acid telah di uji

seperti ditunjukkan pada table 4.



` Injeksi placebo yang telah diekstraksi

menunjukkan apakah terdapat gangguan atau

interference pada elusi dari kombinasi p-hidroksi

benzoic acid. Hasil uji (g

b.3)

menunjukkan

bahwatidak ada gangguan dari senyawa atau material

dalam liquid phar maceutical for mulation, oleh

karena itu spesifisitas dari metode diterima.



` Larutan sampel dan standard segera

dikromatografi setelah preparasi dan ditentukan

kembali kadarnya setelah disimpan pada suhu

ruang selam

a 24jam

. Hasil uji pada tab

le3menunujukkan bahwa tidak ada perubahan yang

signifikan (<0.14% response factor) dalam

kombinasi konsentrasi p-hidroksi benzoic acid

selam

a ini.`



` Pengembangan metode analisis untuk QC laboratories idealnya sangatbaik. Waktu retensi dari analit tidak akan berubah secara signifikan darihari ke hari atau dari lab ke lab bila metode yang digunakan baik.Untuk menentukan ruggedness dengan pengemabangan metodologikromatografi untuk MP, EP, PP, kondisi eksperimen yang diinginkankarekter kromatografi telah dieveluasi. Khususnya pH dari fase gerak

telah di adjust pada 6.5 dan 7.5. Jadi, nor m

al pH untukm

etode ini 7.05.Efek dari suhu juga telah di uji. Larutan standard dan sampeldipreparasi dan di injekkan pada 20°C dan 27°C. Larutan standard danfase gerak juga disimpan pada lemari es kemudian diinjekkan. Larutanyang sama juga di injekkan pada 27°C. Dari semua studi kasus, wakturetensi dari pengawet2 ini (MP, EP, PP) adalah 2.9 , 4.2 , 6.8 menit.Koefisien variasi untuk waktu retensi kurang dari 1%. Pemisahan yangbaik selalu tercapai, metode HPLC yang digunakan selektif untuksemua komponen dalam kondisi yang telah ditentukan.



` Tujuan dari uji stabilitas untuk menyediakan buktitentang kualitas dari bahan obat atau produk obatdalam ber bagai macam waktu dibawah pengaruhber bagai macam factor lingkungan seperti suhu,kelembaban, dan cahaya dan kondisi penyimpanan

yang dianjurkan dan re-test dan shelf-llifes ditetapkan.Untuk tujuan ini, sampel yang mengandung pengawetMP, EP, PP dikemas dan disimpan pada suhu 25°Cdan 60% RH sesuai dengan stabilitas chamber yangtelah tersertifikasi oleh ICH. Sampel diambil bertahap

(0, 3, 6, 9,12 and 18 bulan) dan dianalisa (table 5).



` Metode penentuan kadar dengan RP-HPLC, detector spektrofotometri-UV pada kolom C18 telah berhasil untukpenentuan dari kombinasi pengawet p-hidroksi benzoicacid. Metode ini telah divalidasi dan hasilnya akurat danpresisi dengan RSD < 1%, dan tidak ada gangguan padapuncak yang dideteksi. Metode ini dapat digunakan untukanalisis QC secara rutin (analisis bets dan uji stabilitas)dari komposisi dalam produk phar masetikal yang terdiridari 0.3% pengawet MP, EP, dan PP dan degradasi bahanaktif dalam produk. Metode ini berhasil diaplikasikan untuk

identifikasi, analisis kuantitatif dan uji stabilitas untuksemua komponen dalam liquid phar maceutical for mulation.

Penentuan Kombinasi Pengawet P-hidroksi Benzoat Acid Dalam Liquid

Documents

Transcript of Penentuan Kombinasi Pengawet P-hidroksi Benzoat Acid Dalam Liquid