7/31/2019 Penentuan Kadar Protein Kuantitatif

1/9

Penentuan Kadar Protein

Kuantitatif

Metode Kjeldahl nama orang

ahli kimia Denmark

7/31/2019 Penentuan Kadar Protein Kuantitatif

2/9

Prinsip

Bahwa N hanya dimiliki oleh protein, shgkalo diket kadar N maka bisa dihit kadarprotein

Rata2 kadar N dalam protein 16%, jadisetiap 100 g protein mengandung 16 g N.ato 1 g N ekivalen dg (100/16) x 1 = 6,25

Shg berapapun nilai g N, jika dikalikan6,25 = .. g protein

7/31/2019 Penentuan Kadar Protein Kuantitatif

3/9

7/31/2019 Penentuan Kadar Protein Kuantitatif

4/9

Tahap I (Destruksi) Protein dalam sampel akan didestruksi mggnk

H2SO4 (pekat) dalam keadaan panasmenghasilkan (NH4)2 SO4

(CHON)n + H2SO4 (p) (NH4)2 SO4 + CO2 +O2 + H2O

Timbang sampel + 0,05 g (catat hasilpenimbangan sebenarnya). Gunakan alastimbangnya pake kertas payung

Masukkan sampel beserta kertasnya dalam labu

kjeldahl Tambahkan H2SO4 pekat 2 ml (jika perlu

tambah katalisator HgO 40 mg, K2SO4 1 g)

Destruksi sampe jernih (1 jam)

7/31/2019 Penentuan Kadar Protein Kuantitatif

5/9

Tahap II (Destilasi)

Destroat didestilasi menggunakan NaOH

dalam keadaan panas menghasilkan NH4OH yg selanjutnya dialirkan ke pipakondensor (pendingin balik) shg terurai

mjd NH3 dan H2O. NH3 akan ditangkapoleh larutan penangkap:

1. H3BO3 (asam borat)

NH3 + H3BO3

(NH4)3 BO3indikator: BCG (hijau biru) atau pake

mix indikator (MR+MB) krem biru

7/31/2019 Penentuan Kadar Protein Kuantitatif

6/9

Tahap II (Destilasi)

2. H Cl atao H2SO4NH3 + HCl NH4Cl

NH3 + H2SO4 (NH4)2 SO4

Indikator: PP (jernih merah)

7/31/2019 Penentuan Kadar Protein Kuantitatif

7/9

in

out

A

liranG

as

7/31/2019 Penentuan Kadar Protein Kuantitatif

8/9

Tahap III (Titrasi)

Jika lar penangkapnya ad H3BO3, tujuan titrasi adu/ menget jumlah H3BO3 yangmengikat/menangkap NH3. titrasi menggunakanlarutan standar asam (HCl ato H2SO4)

(NH4)3BO3 + 3 HCl 3 NH4Cl + H3BO3

2(NH4)3BO3 + 3 H2SO4 3 (NH4)2 SO4 + 2H3BO3

TAT: warna biru tepat hilang

Tidak perlu pake blanko

Rumus perhit: volume titrasi (Sampel Blanko)

7/31/2019 Penentuan Kadar Protein Kuantitatif

9/9

Tahap III (Titrasi)

Jika lar penangkapnya ad standar asam, tujuantitrasi ad u/ menget jumlah sisa asam yang tidakmengikat/menangkap NH3. titrasi menggunakanlarutan standar basa (Na OH)

Sisa HCl + NaOH Na Cl + H2O

Sisa H2SO4 + NaOH Na2 SO4 + H2O

TAT: warna merah tepat hilang

Harus pake blanko

Rumus perhit: volume titrasi (Blanko Sampel)