BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Obat Tradisional

Obat Tradisional adalah bahan atau ramuan bahan yang berupa bahan

tumbuhan, bahan hewan, bahan mineral, sediaan sarian (galenik) atau campuran

dari bahan tersebut yang secara turun temurun telah digunakan untuk pengobatan

berdasarkan pengalaman (Depkes RI, 1994).

Bahan-bahan ramuan obat tradisional seperti bahan tumbuh-tumbuhan,

bahan hewan, sediaan sarian atau galenik yang memiliki fungsi, pengaruh serta

khasiat sebagai obat. Dalam pengertian umum kefarmasian bahan yang di

gunakan sebagai obat di sebut simplisia. Simplisia adalah bahan alamiah yang di

pergunakan sebagai obat yang belum mengalami pengolahan apapun juga dan

kecuali di nyatakan lain berupa bahan yang telah di keringkan (Depkes RI, 1995).

2.2. Serbuk

Serbuk, berasal dari bahasa latin pulvis adalah sediaan farmasi merupakan

campuran obat dan/atau bahan kimia yang halus, terbagi-bagi dalam bentuk

kering. Beberapa serbuk di siapkan untuk pemakaiaan dalam (internal), lainnya

untuk pemakaian luar (eksternal). Beberapa serbuk di berikan oleh ahli farmasi

dalam jumlah besar dan ada juga yang di bagi dalam bagian-bagian terbungkus,

pada dasarnya tergantung dosis atau potensi dari sebuk tersebut.

Penggunaan serbuk internal adalah penggunaan serbuk melalui mulut

namum untuk di minum dengan cara mencampurkannya dengan air. Memang

kurang begitu umum di bandingkan dengan penggunaan kapsul dan tablet, namun

Universitas Sumatera Utara

di senangi oleh sebagian pasien yang tidak sanggup menelan obat dengan bentuk

sediaan padat lainnya. Akan tetapi kebanyakan obat dengan bentuk serbuk di

gunakan sebagai pemakaiaan eksternal (luar) biasanya pada kulit.

Kebanyakan bahan-bahan obat yang di pakai sekarang terdapat dalam

bentuk serbuk atau kristal dan di campur dengan unsure-unsur serbuk lainnya

sebagai pengisi dan penghancur sebelum di buat menjadi sediaan padat. Obat

serbuk kering juga di tambahkan ke dalam salep, pasta, supositoria, dan bentuk

sediaan lain, pada waktu pengolahannya. Demikian pula granul yang merupakan

gumpalan-gumpalan baha dari bentuk serbuk di olah menjadi partikel yang dapat

mengalir dengan bebas pada dasarnya di gunakan dalam pembuatan tablet dan

dalam sediaan yang kering yang di siapkan dalam bentuk cair sebelum di pakai,

dengan penambahan bahan pembantu yang tepat sebagai bahan pengisi.

2.2.1 Pengolahan Serbuk

2.2.1.1 Ukuran Partikel

Partikel dari serbuk obat mungkin berbentuk sangat kasar dengan ukuran

10.000 mikron atau 10 milimikron atau mungkin juga sangat halus mencapai

ukuran koloidal, 1 mikron atau lebih kecil. Agar ukuran partikel serbuk ini

mempunyai standar maka USP menggunakan suatu batasan dengan istilah Very

Coarse, Coarse, Moderately Coarse, Fine, dan Very Fine (sangat kasar, kasar,

cukup kasar, halus, dan sangat halus, yang di hubungkan denga bagian serbuk

yang mampu melalui lubang-lubang ayakan yang telah di standarisasi yang

berbeda-beda ukurannya, pada suatu periode waktu tertentu ketika di adakan

pengadukan dan biasanya alat pengaduk yang di gunakan pengaduk ayakan secara

Universitas Sumatera Utara

mekanis. Nomor Standar Ayakan dan masing-masing lubang ayakan di nyatakan

dalam milimeter dan mikrometer. Contohnya: Ayakan nomor 2, lubang

ayakannya berukuran 9,5 mm (Ansel, 1989).

2.2.2 Serbuk Obat Tradisional

Menurut SK Menkes, 1994 pengertian dari serbuk obat tradisonal adalah

sediaan obat tradisonal berupa butiran homogen dengan derajat halus yang cocok;

bahan baku nya berupa simplisia sediaan galenik, atau campurannya.

Sediaan serbuk ini penggunaan nya dengan cara diseduh dalam air

mendidih. Air seduhan diminum sesuai kebutuhan. Karena serbuk berbahankan

dari bahan obat tumbuh-tumbuhan yang di keringkan secara alamiah ataupun

merupakan campuran dua atau lebih unsur kimia murni yang di buat menjadi

serbuk dalam perbandingan tertentu, maka serbuk harus memiliki persyaratan agar

layak edar. Adapun persyaratan serbuk yang akan diedarkan meliputi :

Kadar air : tidak lebih dari 10 %

Angka lempeng total : tidak lebih dari 106.

Angka kapang dan khamir : tidak lebih dari 104.

Mikroba patogen : negatif

Aflatoksin : tidak lebih dari 30 bpj.

Bahan tambahan : Pengawet, serbuk dengan bahan baku simplisia dilarang

ditambahkan bahan pengawet. Serbuk dengan bahan baku sediaan galenik dengan

penyari air atau campuran etanol air bila diperlukan dapat ditambahkan bahan

pengawet.

Universitas Sumatera Utara

Pemanis : Gula tebu (gula pasir), gula aren, gula kelapa, gula bit dan pemanis

alam lainnya yang belum menjadi zat kimia murni.

Pengisi : Sesuai dengan pengisi yang diperlukan pada sediaan galenik.

Wadah dan Penyimpanan : Da|am wadah tertutup baik; disimpan pada suhu

kamar, ditempat kering dan terlindung dari sinar matahari (Depkes RI, 1994)

Serbuk obat-obatan dari bahan tumbuh-tumbuhan atau hewan ditetapkan

dengan nomor sebagai berikut :

Very Coarse powder (serbuk sangat kasar atau nomor 8) semua partikel serbuk

dapat melewati lubang ayakan nomor 8 dan tidak lebih dari 20 % melewati lubang

ayakan nomor 60.

Coarse powder (serbuk kasar atau nomor 20) semua partikel serbuk dapat

melewati lubang ayakan nomor 20 dan tidak lebih dari 40 % yang melewati

lubang ayakan nomor 60.

Moderately Coarse powder (serbuk cukup kasar atau nomor 40) semua partikel

serbuk dapat melewati lubang ayakan nomor 40 dan tidak lebih dari 40 % yang

melewati lubang ayakan nomor 80.

Fine powder (serbuk halus atau nomor 60) semua partikel serbuk dapat

melewati lubang ayakan nomor 60 dan tidak lebih dari 40 % yang melewati

lubang ayakan nomor 100.

Very Fine powder (serbuk sangat halus atau nomor 80) semua partikel serbuk

dapat melewati lubang ayakan nomor 80 dan tidak ada limitasi bagi yang lebih

halus (Ansel, 1989).

Universitas Sumatera Utara

2.3 Penyakit Reumatik

2.3.1 Fisiologi Reumatik

Reumatik di definisikan sebagai setiap kondisi yang di sertai rasa nyeri

dan kaku pada sistem tulang otot (muskuloskeletal) dan penyakit yang terjadi pada

jaringan ikat (connective tissue). Atau lebih sederhananya penyakit ini dapat di

artikan sebagai suatu penyakit yang menyerang sendi, otot, dan jaringan tubuh. Ini

merupakan istilah dalam ilmu kedokteran, serta dalam ilmu kedokteran penyakit

ini di masukkan dalam kelompok penyakit sendi atau reumatologi karena

peristiwa mengalirnya mukus ke sendi terjadi pada persendian . Namun jika di kaji

dari penyebab terjadinya reumatik, penyakit ini berupa suatu penyakit yang di

sebabkan oleh kerusakan rawan sendi. Rawan sendi berfungsi sebagai bantalan

untuk meredam benturan maupun beban berat akibat gerakan sendi dan

meneruskan beban tadi ke tulang bawah sendi. Rawan sendi terbentuk dari sel

rawan sendi yang di sebut kondrosit dan matriks rawan yang sebagian besar

terdiri dari air, proteoglikan, dan kolagen. Rawan sendi yang normal selalu

mengalami proses kerusakan dan perbaikan secara terus-menerus. Tapi, terkadang

kedua proses yang terjadi ini tidak berjalan lancar seperti biasanya, karena di

akibatkan oleh rawan sendi yang rusak atau terjadi peradangan. Akibat kerusakan

yang terjadi timbul rasa nyeri dan sakit yang bukan kepalang rasanya. Keadaan ini

terjadi akibat adanya cairan jahat yang di sebut mukus. Cairan ini mengalir dari

otak ke sendi dan struktur lain dalam tubuh. Kondisi ini dalam bahasa Yunani di

sebut rheumatismos. Pada umumnya, masyarakat umum menyebutnya

Rheumatism, reumatik, atau rematik (Utami, 2003).

Universitas Sumatera Utara

2.3.2 Gejala Umum Reumatik

Gejala umum dari reumatik adalah nyeri sendi, kaku pada sendi, bengkak

pada sendi, gangguan fungsi sendi, sendi tidak stabil, sendi berbunyi, pengecilan

otot (Atrofi), timbul tofi, perubahan fisik di bagian jari dan kuku, kelainan di

bagian selaput lendir, gangguan penglihatan, gejala lain, seperti: berat badan

menurun, rasa lelah dan lesu, susah tidur, aktivitas seksual suami istri terganggu,

dan selain itu muncul depresi.

a. Nyeri Sendi

Nyeri sendi merupakan keluhan utama setiap penderita rematik. Jika

rematik sampai menyerang bagian syaraf, nyeri sendi dapat menjalar jauh hingga

keseliruh tubuh. Nyeri sendi ada dua macam, yaitu nyeri mekanis dan nyeri

inflamasi (nyeri radang). Nyeri mekanis biasanya muncul setelah manusia

melakukan aktivitasnya yang umum dan nyeri ini akan hilang setelah beristirahat.

Sedangkan nyeri inflamasdi biasanya akan timbul di pagi hari ketika seseorang

bangun tidur. Nyeri inflamasi ini akan di sertai rasa kaku pada sendi dan rasa

nyeri yang hebat bagi penderita ketika awal gerak dari masa istirahatnya (tidur).

Biasanya rasa nyeri baru akan hilang setelah beberapa saat melakukan aktivitas

dengan bertahap.

b. Kaku pada Sendi

Kaku sendi adalah kaku yang di akibatkan karena terjadinya desakan suatu

cairan di sekitar jaringan tubuh yang sedang mengalami peradangan, seperti

kapsul sendi, sinovia, atau bursa. Gejala ini di tandai dengan sukarnya persendsian

Universitas Sumatera Utara

untuk di gerakkan. Kaku sendi terjadi pada pagi hari dan akan berkurang setelah

beristirahat dari aktivitasnya.

c. Bengkak pada Sendi

Bengkak sendi terjadi karena adanya cairan yang menumpuk di sekitar

kapsul sendi, sehingga sendi terasa kaku. Cairan yang menumpuk membuat

peradangan pada sendi tengah dalam jaringan lunak dan tulang. Biasanya di tandai

dengan memerahnya warna kulit dan terasa panas jika di raba.

d. Gangguan Fungsi Sendi

Gangguan fungsi sendi di sebabkan oleh terjadinya tekukan pada posisi

persendian. Tekukan ini sebenarnya adalah kesengajaan oleh si penderita karena

ingin menghilangkan rasa nyeri yang di derita.

e. Sendi Tidak Stabil

Ketidak stabila suatu sendi di akibatkan seseorang mengalami trauma atau

radang di bagian ligamen dan kasul sendinya. Dan juga bisa di akibatkan oleh

kerusakan rawan sendi atau robeknya ligamen. Sendi tidak stabil umum terjadi

pada penderita osteoartritis di bagian lutut.

f. Sendi Berbunyi

Sendi akan berbunyi atau terjadi krepitasi ketika sendi sedang di gerakkan.

Bunyi yang di timbulkan di bagi menjadi dua, yaitu: bunyi yang kasar dan bunyi

yang halus. Bunyi yang kasar, berarti menandakan adanya kerusakan di bagian

rawan sendi atau tulang, bunyi bisa di dengar dan di raba sepanjang tulang. Bunyi

yang halus menandakan adanya kerusakan atau peradangan di bagian sarung

Universitas Sumatera Utara

tendon, bursa, atau sinovia. Bunyi yang halus ini dapat di dengar dengan bantuan

stetoskop.

g. Pengecilan Otot (Atrofi)

Pengecilan otot sekitar sendi yang rusak terjadi jika rematik telah

berlangsung dalam jangka waktu yang relatif lama (lebih dari 10 tahun). Akibat

adanya atrofi, fungsi sendi akan terganggu.

h. Timbul Tofi

Tofi atau nodul atau benjolan kecil biasanya terjadi dalam jaringan di

bawah kulit. Biasanya gejala ini nterjadi pada penderita rematik gout atau

reumatoid artritis. Tofi biasanya muncul di permukaan ekstensor, yaitu di

punggung tangan, siku, tumit belakang, dan sacrum.

i. Perubahan Fisik di Bagian Jari dan Kuku

Kelaina hanya terjadi pada beberapa jenis reumatik yang bersifat sistemik.

Biasanya, kuku menjadi berlubang atau jari tangan membesar. Keadaan ini terjadi

karena adanya tofi yang semakin membesar, menimbulkan koreng, dan akhirnya

mengeluarkan suatu cairan kental seperti kapur.

j. Kelainan di Bagian Selaput Lendir

Kelainan ini terjadi karena adanya ulkus di bagian rongga mulut, kelamin,

dan selaput lendir hidung. Akibat yang di timbulkan oleh adanya kelainan ini

adalah berupa gannguan saat menelan makanan, gannguan aktivitas seksual, dan

bernafas.

Universitas Sumatera Utara

k. Gangguan Penglihatan

Gejala hanya terjadi pada penderita atritis reumatoid. Gejalanya berupa

peradangan di permukaan bola mata yang berwarna putih atau episkleritis (Utami,

2003).

2.3.3 Pengobatan Reumatik

Pengobatan reumatik biasanya lebih dipercaya dengan ramuan tradisional

di bandingkan berobat dengan bantuan dokter. Contohnya adalah ramuan dari

beberapa simplisia seperti; belimbing wuluh yang di tumbuk halus, di campur

dengan daun cempaka, cengkeh (biji), lada hitam serta tambahan perasan air jeruk

dan sedikit minyak kayu putih. Setelah semua bahan di campur gosokkan pada

bagian yang terasa nyeri sambil di urut-urut dengan perlahan, selama 2-3 kali

sehari.

Ada juga alternatif lain yang juga sangat efektif, yaitu ramuan dari

tumbuhan pegagan (Centella asiatica). Dengan cara merebus semua bagian

tanaman, kemudian air rebusannya di minum 2-3 kali sehari. Pegagan ini bersifat

antiinflamasi sehingga dapat menyembuhkan peradangan (Lasmadiwati, 2003).

2.4 Parasetamol

Parasetamol (Acetamenopen) adalah turunan dari senyawa sintetis dari p-

aminofenol yang merupakan metabolit aktif dari fenasetin, namun tidak memiliki

sifat karsinogenik (menyebabkan kanker) seperti halnya fenasetin. Khasiatnya

analgetis dan antipiretis, tetapi tidak anti radang. Dewasa ini pada umumnya di

anggap sebagai zat anti nyeri yang paling aman, juga untuk swamedikasi

(pengobatan mandiri).Tetapi jika senyawa ini bila dikombinasikan dengan obat

Universitas Sumatera Utara

anti inflamasi non steroid (NSAID) atau obat pereda nyeri opioid, dapat

digunakan untuk mengobati nyeri yang lebih parah. (Tan dan Kirana, 2002;

Hardman, 2001)

Namun senyawa obat parasetamol ini tidak seperti obat pereda nyeri

lainnya (aspirin dan ibuprofen), tidak digolongkan ke dalam obat anti inflamasi

non steroid (NSAID) karena memiliki khasiat anti inflamasi yang relatif kecil

karena itu dianggap aman. Tapi pada dosis tinggi dapat menyebabkan kerusakan

hati. Risiko kerusakan hati ini diperparah apabila pasien juga meminum alkohol.

Penelitian pada tahun 2008 membuktikan bahwa pemberian parasetamol pada usia

bayi dapat meningkatkan risiko terjadinya asma pada usia kanak-kanak. Tapi pada

dasarnya parasetamol memang senyawa obat yang aman di gunakan untuk

antipiretis maupun antiinflamasi (anti nyeri/radang). Bahkan ibu yang sedang

hamil pun bisa dengan aman mengkonsumsi parasetamol dengan aturan pakai

yang telah di tentukan (Hardman, 2001; Foye, 1995)

Parasetamol memiliki sebuah cincin benzena, tersubstitusi oleh satu gugus

hidroksil dan atom nitrogen dari gugus amida pada posisi para. Senyawa ini dapat

disintesis dari senyawa asal fenol yang dinitrasikan menggunakan asam sulfat dan

natrium nitrat. Parasetamol dapat pula terbentuk apabila senyawa 4-aminofenol

direaksikan dengan senyawa asetat anhidrat (Hardman, 2001).

Universitas Sumatera Utara

2.4.1 Struktur Parasetamol

Nama Kimia : N-acetyl-p-aminophenol atau p-asetamedofenol atau 4-

hidroksiasetanilida

Rumus Empiris : C8H9NO2

Berat Molekul : 151,16

Pemerian : Kristal putih tidak berbau atau serbuk kristalin dengan

rasa pahit, jarak lebur atau titik lebur pada 169o-172o

Kelarutan : 1 g dapat larut dalam kira-kira 70 ml air pada suhu 25oc,

1 g larut dalam 20 ml air mendidih, dalam 7 ml alkohol,

dalam 13 ml aseton, dalam 50 ml kloroform, dalam 40 ml

gliserin, dalam 9 ml propilenglikol, dan larut dalam

arutan alkali hidroksida. Tidak larut dalam benzen dan

eter. Larutan jenuh mempunyai pH kira-kira 6. pKa= 9,51

(Connors, 1992; Ditjen POM, 1995).

2.4.2 Mekanisme Kerja Parasetamol

Mekanisme kerja yang sebenarnya dari parasetamol masih menjadi bahan

perdebatan. Parasetamol menghambat produksi prostaglandin (senyawa penyebab

inflamasi), namun parasetamol hanya sedikit memiliki khasiat anti inflamasi.

Telah dibuktikan bahwa parasetamol mampu mengurangi bentuk teroksidasi

Universitas Sumatera Utara

enzim siklooksigenase (COX), sehingga menghambatnya untuk membentuk

senyawa penyebab inflamasi. Sebagaimana diketahui bahwa enzim

siklooksigenase ini berperan pada metabolisme asam arakidonat menjadi

prostaglandin H2, suatu molekul yang tidak stabil, yang dapat berubah menjadi

berbagai senyawa pro-inflamasi. Kemungkinan lain mekanisme kerja parasetamol

ialah bahwa parasetamol menghambat enzim siklooksigenase seperti halnya

aspirin, namun hal tersebut terjadi pada kondisi inflamasi, dimana terdapat

konsentrasi peroksida yang tinggi. Pada kondisi ini oksidasi parasetamol juga

tinggi, sehingga menghambat aksi anti inflamasi. Hal ini menyebabkan

parasetamol tidak memiliki khasiat langsung pada tempat inflamasi, namun malah

bekerja di sistem syaraf pusat untuk menurunkan temperatur tubuh, dimana

kondisinya tidak oksidatif (Hardman, 2001; Munaf, 1994; Departemen

Farmakologi dan Terapeutik, 2007)

2.4.3 Metabolisme

Metabolisme parasetamol terjadi di hati. Metabolit utamanya meliputi

senyawa sulfat yang tidak aktif dan konjugat glukoronida yang dikeluarkan lewat

ginjal. Hanya sedikit jumlah parasetamol yang bertanggungjawab terhadap efek

toksik (racun) yang diakibatkan oleh metabolit NAPQI (N-asetil-p-benzo-kuinon

imina). Bila pasien mengkonsumsi parasetamol pada dosis normal, metabolit

toksik NAPQI ini segera didetoksifikasi menjadi konjugat yang tidak toksik dan

segera dikeluarkan melalui ginjal. Namun apabila pasien mengkonsumsi

parasetamol pada dosis tinggi, konsentrasi metabolit beracun ini menjadi jenuh

sehingga menyebabkan kerusakan hati (Hardman, 2001)

Universitas Sumatera Utara

2.4.4 Efek Samping

Efek samping adalah hal yang bukan tidak jarang terjadi pada

penggunaan/konsumsi senyawa obat, begitu pula dengan parasetamol.

Parasetamol menimbulkan efek sampin seperti; reaksi hipersensitivitas dan

kelainan pada darah (anemia hemolitik). Pada penggunaan kronis dari 3-4 g sehari

dapat terjadi kerusakan hati, reaksi alergi: jarang terjadi, berupa eritem, urtikaria,

atau bila lebih berat dapat timbul demam dan lesi mukosa (Tan dan Kirana, 2002).

2.5 Identifikasi Parasetamol dalam sediaan Obat Tradisonal bentuk Kapsul secara Kromatografi Lapis Tipis dan Spektrofotometri UV-Visible

2.5.1 Kromatografi Lapis Tipis

Kromatografi merupakan teknik yang paling sering di gunakan dalam

bidang kimia analisis karena teknik ini dapat di lakukan untuk keperluan analisis,

baik kualitatif maupun kuantitatif, atau preparatif bagi bidang farmasi, ataupun

industri. Kromatografi merupakan suatu teknik pemisahan yang menggunakan

dua fase, yaitu: fase diam (stationary phase) dan fase gerak (mobile phase).

Kromatografi Lapis Tipis (KLT)

Kromatografi lapis tipis di kembangkan oleh Izmailoff dan Schraiber pada

tahun 1938. Kromatografi ini merupakan bentuk kromatografi planar. Berbeda

dengan kromatografi kolom yang mana fase diamnya diisikan atau di kemas di

dalamnya, pada kromatografi lapis tipis fase diamnya berupa lapisan yang

seragam (uniform) pada permukaan bidang datar yang di dukung oleh lempeng

kaca, pelat aluminium, atau pelat pelastik. Meskipun demikian kromatografi

planar ini dapat dikatakan sebagai bentuk terbuka dari kromatografi kolom.

Universitas Sumatera Utara

Penggunaan fase gerak atau sebagai pelarut dimana pelarut ini akan

bergerak sepanjang fase diam di karenakan oleh dua pengaruh, yaitu 1). Pengaruh

kapiler ini terjadi pada metode pengembangan secara menaik (ascending), 2).

Pengaruh gravitasi ini terjadi pada pengelusian secara menurun (descending).

Fase diam pada Kromatografi Lapis Tipis adalah merupakan suatu

penyerap berukuran kecil dengan diameter partikel antara 10-30 m. Semakin

kecil ukuran rata-rata partikel fase diam dan semakin sempit kisaran ukuran fase

diam maka semakin baik kinerja KLT dalam hal efesiensinya dan resolusinya.

Biasanya yang paling sering di gunakan adalah silika dan serbuk selulosa.

Penyerap biasanya di gunakan untuk melapisi pada permukaan kaca, gelas, atau

aluminium dengan ketebalan 250 m, atau biasa di sebut plat/lempeng KLT.

Fase gerak pada KLT biasanya dapat di pilih dari pustaka, tetapi lebih

sering di pilih dengan cara mencoba-coba karena waktu yang di perlukan hanya

sebentar. Sistem yang paling sederhana adalah sistem 2 pelarut organik karena

daya elusi camuran dari dua pelarut ini dapat mudah di atur sedemikian rupa

sehingga pemisahan dapat terjadi secara optimal. Berikut adalah kriteria yang

harus di penuhi oleh fase gerak ialah: Fase gerak harus memiliki kemurnian yang

sanagat tinggi, karena KLT sangat sensitif, Daya elusi fase gerak harus di atur

agar harga Rf terletak antara 0,2-0,8 untuk pemisahan yang maksimal, untuk

pemisahan senyawa yang polar yang biasanya fase diamnya berupa silika gel,

maka polaritas dari fase gerak sangat menentukan kecepatan elusi/pengembangan

yang berarti juga akan menentukan nilai Rf (Rohman, 2009)

Universitas Sumatera Utara

a. Penotolan Sampel

Kromatografi yang di lakukan dengan hasil yang optimal juga di

pengaruhi oleh faktor penotolan. Penotolan yang baik adalah menotolkan sampel

dengan ukuran bercak sekecil dan sesempit mungkin sehingga akan di dapati hasil

yang optimal. Sebagaimana dalam prosedur jika sampel yang di gunakan terlalu

banyak maka akan menurunkan resolusi. Umumnya volume penotolan adalah 15

l. Penotolan sampel yang tidak tepat akan menyebabkan bercak menyebar dan

puncak ganda. Penotolan secara otomatis lebih sering di pilih, terutama jika

volume sampel lebih dari 15 l.

b. Pengembangan/Elusi

Pengembangan adalah tahap di mana di lakukan setelah melakukan

penotolan sampel dan baku, jika menggunakan baku. Pengembangan/elusi

biasanya di lakukan dalam sebuah bejana kromatografi yang sebelumnya telah di

jenuhi oleh uap pelarut/fase gerak. Biasanya plat sebelum di totol di beri jarak

untuk titik penotolan ialah berjarak 1-2 cm. Jadi ketika plat di masukkan ke dalam

bejana, tinggi fase gerak berada di bawah titik penotolan. Bejana kromatografi

harus di tutup rapat.

c. Deteksi Bercak

Bercak pemisahan pada KLT umunya merupakan bercak yang tidak

berwarna. Sehingga untuk penentuannya dapat di lakukan dengan cara kimia,

fisika, maupun biologi. Cara kimia adalah cara yang lebih sering di gunakan yaitu

dengan cara mereaksikan bercak dengan suatu pereaksi tertentu melalui

Universitas Sumatera Utara

penyemprotan sehingga bercak tampak dengan jelas. Cara fisika adalah

mendeteksi bercak dengan menggunakan flurosensi sinar ultraviolet.

d. Identifikasi dan Harga-harga Rf

Identifikasi dari senyawa-senyawa yang telah di pisahkan pada lapisan

tipis lebih baik di kerjakan dengan pereaksi kimia dan reaksi-reaksi warna.

Namun Lazimnya untuk identifikasi menggunakan harga Rf, Walaupun harga Rf

dari KLT kurang tepat di bandingkan dengan harga RF yang di peroleh dari

kromatografi kertas.

Definisi harga RF adalah jarak yang di gerakkan oleh senyawa dari titik

asal di bagi dengan jarak yang di gerakkan oleh pelarut dari titik asal. Harga Rf

untuk senyawa murni dapat di bandingkan dengan harga senyawa standard.

Senyawa standard biasanya memiliki sifat-sifat kimia yang mirip dengan senyawa

yang di pisahkan pada kromatogram.

Harga Rf sangat di tentukan oleh kelancaran pergerakan noda dalam KLT,

adapun faktor yang mempengaruhi pergerakan noda ialah: 1). Struktur kimia dari

senyawa yang di pisahkan, 2). Sifat dari penyerap dan derajat aktifitasnya, 3).

Tebal dan kerataan dari lapisan penyerap, 4). Pelarut dan derajat kemurniannya,

5). Derajat kejenuhan dari uap pelarut dalam bejana elusi, 6). Teknik percobaan,

7). Jumlah sampel yang di gunakan, 8). Suhu, 9). Kesetimbangan (Sastromidjojo,

1985)

2.5.2 Spektrofotometri UV-Visible

Spektrofotometer UV-Vis adalah pengukuran panjang gelombang dan

intensitas sinar ultraviolet dan cahaya tampak yang di absorbsi oleh sampel.

Universitas Sumatera Utara

Spektrofotometer UV-Vis biasanya di gunakan untuk molekul dan ion anorganik

atau kompleks didalam larutan. Sinar ultraviolet berada pada panjang gelombang

200-400 nm, sedangkan sinar tampak berada pada panjang gelombang 400-800

nm.Sebagai sumber cahaya biasanya di gunakan lampu hydrogen atau deuterium

untuk pengukuran UV dan lampu tungsten untuk pengukuran pada cahaya

tampak.

Panjang gelombang adalah jarak antara satu lembah dan satu puncak.

Panjang gelombang dari sumber cahaya akan di bagi oleh pemisah panjang

gelombang, seperti monokromator. Pada spektrofotometer ada juga istilah

frekwensi yang memang akrab dengan panjang gelombang, frekwensi adalah

kecepatan cahaya di bagi dengan panjang gelombang (Dachriyanus, 2004)

Universitas Sumatera Utara