PA Hitung Ertrosit & Trombosit

8/10/2019 PA Hitung Ertrosit & Trombosit

1/9

BAB I

PENDAHULUAN

A.

LATAR BELAKANG

Darah merupakan gabungan dari cairan, sel-sel dan partikel yang menyerupai sel, yang

mengalir dalam arteri, kapiler, dan vena yang mengirimkan oksigen dan zat gizi ke jaringan dan

membawa karbondioksida dan hasil limbah lainnya .Darah adalah suatu jaringan tubuh yang

terdapat di dalam pembuluh darah yang terdiri dari sel darah dan plasma.Sel darah terdiri daributir (sel) darah merah (eritrosit),sel darah putih (leukosit),keping megakariosit (trombosit) dan

plasma terdiri dari air,garam (elektrolit) serta protein.

Hemopoeisis adalah proses produksi, pertumbuhan dan perkembangan sel sel darah.Sangatbesar sekali peran darah dalam tubuh kita dan terdiri dari berbagai jenis dan mempunyaifungsinya masing-masing.Akan tetapi jenis-jenis tersebut pada awalnya berasal dari sel yang

sama yaitu sel punca. Sel punca merupakan asal eritroid, granulositik & monosit, sertamegakariosit & limfosit.

B.

TUJUAN

1. Mahasiswa mengetahui penetapan kadar hemoglobin

2.

Mahasiswa mampu mengetahui pemeriksaan hitung eritrosit

3. Mahasiswa mampu mengetahui pemeriksaan hitung trombosit

4.

Mahasiswa mampu mengetahui pemeriksaan hematokrit


2/9

BAB II

DASAR TEORI

Darah adalah suatu suspense partikel dalam suatu larutan koloid cair yang mengandung

elektrolit, dan merupakan suatu medium pertukaran antara sel yang terfiksasi dalam tubuh dan

lingkungan luar, serta memiliki sifat protektif terhadap organism dan khususnya terhadap diri

sendiri. Komponen cair darah yang disebut plasma terdiri dari 91 sampai 92% air yang berperan

sebagai medium transport, dan 8 sampai 9% zat padat. Zat padat tersebut antara lain protein-

protein seperti albumin, globulin, faktor-faktor pembekuan, dan enzim serta unsure organic

seperti zat nitrogen nonprotein. (Sylvia, 2005)

Tes Hematologi Rutin

Hitung darah lengkap -HDL- atau darah perifer lengkap DPL- (complete blood count/full

blood count/blood panel) adalah jenis pemeriksan yang memberikan informasi tentang sel-sel

darah pasien. HDL merupakan tes laboratorium yang paling umum dilakukan. HDL digunakan

sebagai tes skrining yang luas untuk memeriksa gangguan seperti seperti anemia, infeksi, dan

banyak penyakit lainnya.HDL memeriksa jenis sel dalam darah, termasuk sel darah merah, sel

darah putih dan trombosit (platelet). Pemeriksaan darah lengkap yang sering dilakukan meliputi:

Jumlah sel darah putih

Jumlah sel darah merah

Hemoglobin

Hematokrit

Indeks eritrosit

jumlah dan volume trombosit (Koepke, J.A., 1991)

Tabel 1. Nilai pemeriksaan darah lengkap pada populasi normal

Parameter Laki-Laki Perempuan

Hitung sel darah putih (x 10 /L) 7.8 (4.411.3)

Hitung sel darah merah (x 10 /L) 5.21 (4.525.90) 4.60 (4.105.10)

Hemoglobin (g/dl) 15.7 (14.017.5) 13.8 (12.315.3)

Hematokrit (%) 46 (4250) 40 (3645)


3/9

MCV (fL/ m ) 81-96

MCH (pg) 27-31

MCHC (g/dl eritrosit) 30-36

RDW (%) 13.1 (11.514.5)

Hitung trombosit (x 10 /L) 311 (172450)

(Biokimia Harper, 2003)

Spesimen

Sebaiknya darah diambil pada waktu dan kondisi yang relatif sama untuk meminimalisasi

perubahan pada sirkulasi darah, misalnya lokasi pengambilan, waktu pengambilan, serta kondisi

pasien (puasa, makan). Cara pengambilan specimen juga perlu diperhatikan, misalnya tidak

menekan lokasi pengambilan darah kapiler, tidak mengambil darah kapiler tetesan pertama, serta

penggunaan antikoagulan (EDTA, sitrat) untuk mencegah terbentuknya

clot. (Koepke, J.A., 1991)

Hitung Eritrosit

Hitung eritrosit adalah jumlah eritrosit per milimeterkubik atau mikroliter darah. Seperti

hitung leukosit, untuk menghitung jumlah sel-sel eritrosit ada dua metode, yaitu manual dan

elektronik (automatik). Metode manual hampir sama dengan hitung leukosit, yaitu menggunakan

bilik hitung. Namun, hitung eritrosit lebih sukar daripada hitung leukosit.Prinsip hitung eritrosit

manual adalah darah diencerkan dalam larutan isotonis untuk memudahkan menghitung eritrosit

dan mencegah hemolisis. (Gandasoebrata R. 2009)

Larutan Pengencer yang biasa digunakan adalah :

Larutan Hayem : Natrium sulfat 2.5 g, Natrium klorid 0.5 g, Merkuri klorid 0.25 g,

aquadest 100 ml. Pada keadaan hiperglobulinemia, larutan ini tidak dapat dipergunakan

karena dapat menyebabkan precipitasi protein, rouleaux, aglutinasi.

Larutan Gower : Natrium sulfat 12.5 g, Asam asetat glasial 33.3 ml, aquadest 200 ml.

Larutan ini mencegah aglutinasi dan rouleaux.

Natrium klorid 0.85 %

Bahan pemeriksaan yang dipergunakan adalah darah kapiler, darah EDTA, darah heparin,

atau darah amonium-kalium oksalat. (Gandasoebrata R. 2009)


4/9

Nilai Rujukan

Dewasa laki-laki : 4.50 6.50 (x106/L)

Dewasa perempuan : 3.80 4.80 (x106/L)

Bayi baru lahir : 4.30 6.30 (x106/L)

Anak usia 1-3 tahun : 3.60 5.20 (x106/L)

Anak usia 4-5 tahun : 3.70 5.70 (x106/L)

Anak usia 6-10 tahun : 3.80 5.80 (x106/L) (Gandasoebrata R. 2009)

Nilai Rujukan

MCV (fL/ m ) 81-96

MCH (pg) 27-31

MCHC (g/dl eritrosit) 30-36

(Biokimia Harper, 2003)

Hemoglobin

Adalah molekul yang terdiri dari kandungan heme (zat besi) dan rantai polipeptida globin

(alfa,beta,gama, dan delta), berada di dalam eritrosit dan bertugas untuk mengangkut oksigen.

Kualitas darah ditentukan oleh kadar haemoglobin. Stuktur Hb dinyatakan dengan menyebut

jumlah dan jenis rantai globin yang ada. Terdapat 141 molekul asama amino pada rantai alfa, dan

146 mol asam amino pada rantai beta, gama dan delta. (Guyton, 2007)

Kadar hemoglobin dapat ditetapkan dengan berbagai cara, antara lain metode Sahli,oksihemoglobin atau sianmethhemoglobin.Metode Sahli tidak dianjurkan karena memiliki

kesalahan yang besar, alatnya tidak dapat distandardisasi, dan tidak semua jenis hemoglobin

dapat diukur, seperti sulfhemoglobin, methemoglobin dan karboksihemoglobin. Dua metode

yang lain (oksihemoglobin dan sianmethemoglobin) dapat diterima dalam hemoglobinometri

klinik. Namun, dari dua metode tersebut, metode sianmethemoglobin adalah metode yang

dianjurkan olehInternational Commitee for Standardization in Hematology(ICSH) sebab selain

mudah dilakukan juga mempunyai standar yang stabil dan hampir semua hemoglobin dapat

terukur, kecuali sulfhemoglobin. (Koepke, J.A., 1991)

Cara sianmethemoglobin adalah cara yang dianjurkan untuk penetapan kadar hemoglobin

di laboratorium karena larutan standar sianmethemoglobin sifatnya stabil, mudah


5/9

diperoleh dan pada cara ini hampir semua hemoglobin terukur kecuali sulfhemoglobin.

Pada cara ini ketelitian yang dapat dicapai 2%.

Berhubung ketelitian masing-masing cara berbeda, untuk penilaian basil sebaiknya

diketahui cara mana yang dipakai. Nilai rujukan kadar hemoglobin tergantung dari umur

dan jenis kelamin. Pada bayi baru lahir, kadar hemoglobin lebih tinggi dari pada orang

dewasa yaitu berkisar antara 13,6 19, 6 g/dl. Kemudian kadar hemoglobin menurun dan

pada umur 3 tahun dicapai kadar paling rendah yaitu 9,5 12,5 g/dl. Setelah itu secara

bertahap kadar hemoglobin naik dan pada pubertas kadarnya mendekati kadar pada

dewasa yaitu berkisar antara 11,5 14,8 g/dl. Pada laki-laki dewasa kadar hemoglobin

berkisar antara 1316 g/dl sedangkan pada perempuan dewasa antara 12 14 g/dl.

Pada perempuan hamil terjadi hemodilusi sehingga batas terendah nilai rujukan

ditentukan 10 g/dl. (Koepke, J.A., 1991)

Nilai Rujukan

Dewasa pria : 13.2 - 17.3 g/dl

Perempuan : 11.7 - 15.5 g/dl

Bayi baru lahir : 15.2 - 23.6 g/dl

Anak usia 1-3 tahun : 10.8 - 12.8 g/dl

Anak usia 4-5 tahun : 10.7 - 14.7 g/dl

Anak usia 6-10 tahun : 10.8 - 15.6 g/dl (Koepke, J.A., 1991)

Hematokrit

Hematokrit atau volume eritrosit yang dimampatkan (packed cell volume, PCV) adalah

persentase volume eritrosit dalam darah yang dimampatkan dengan cara diputar pada kecepatan

tertentu dan dalam waktu tertentu. Tujuan dilakukannya uji ini adalah untuk mengetahui

konsentrasi eritrosit dalam darah.Berdasarkan reprodusibilitas dan sederhananya, pemeriksaan ini

paling dapat dipercaya di antara pemeriksaan yang lainnya, yaitu kadar hemoglobin dan hitung

eritrosit. Dapat dipergunakan sebagai tes penyaring sederhana terhadap anemia.Nilai hematokrit

atau PCV dapat ditetapkan secara automatik menggunakan hematology analyzer atau secaramanual. (Gandasoebrata R. 2009)

Metode pengukuran hematokrit secara manual dikenal ada 2, yaitu :

1. Metode makrohematokrit


6/9

Pada metode makro, sebanyak 1 ml sampel darah (darah EDTA atau heparin)

dimasukkan dalam tabung Wintrobe yang berukuran panjang 110 mm dengan diameter

2.5-3.0 mm dan berskala 0-10 mm. Tabung kemudian disentrifus selama 30 menit dengan

kecepatan 3.000 rpm. Tinggi kolom eritrosit adalah nilai hematokrit yang dinyatakan

dalam %.

2.

Metode mikrohematokrit

Pada metode mikro, sampel darah (darah kapiler, darah EDTA, darah heparin atau

darah amonium-kalium-oksalat) dimasukkan dalam tabung kapiler yang mempunyai

ukuran panjang 75 mm dengan diameter 1 mm. Tabung kapiler yang digunakan ada 2

macam, yaitu yang berisi heparin (bertanda merah) untuk sampel darah kapiler

(langsung), dan yang tanpa antikoagulan (bertanda biru) untuk darah

EDTA/heparin/amonium-kalium-oksalat. (Gandasoebrata R. 2009)

Prosedur pemeriksaannya adalah : sampel darah dimasukkan ke dalam tabung kapiler sampai

2/3 volume tabung. Salah satu ujung tabung ditutup dengan dempul (clay) lalu disentrifus selama

5 menit dengan kecepatan 15.000 rpm. Tinggi kolom eritrosit diukur dengan alat pembaca

hematokrit, nilainya dinyatakan dalam %.Metode mikrohematokrit lebih banyak digunakan

karena selain waktunya cukup singkat, sampel darah yang dibutuhkan juga sedikit dan dapat

dipergunakan untuk sampel tanpa antikoagulan yang dapat diperoleh

secara langsung. (Gandasoebrata R. 2009)

Nilai Rujukan

Dewasa pria : 40 - 52 %

Dewasa wanita : 35 - 47 %

Bayi baru lahir : 44 - 72 %

Anak usia 1 - 3 tahun : 35 - 43 %

Anak usia 4 - 5 tahun : 31 - 43 %

Anak usia 6-10 tahun : 33 - 45 % (Gandasoebrata R. 2009)

Trombosit

Trombosit adalah fragmen atau kepingan-kepingan tidak berinti dari sitoplasma

megakariosit yang berukuran 1-4 mikron dan beredar dalam sirkulasi darah selama 10 hari.

Gambaran mikroskopik dengan pewarnaan Wright Giemsa, trombosit tampak sebagai sel kecil,

tak berinti, bulat dengan sitoplasma berwarna biru-keabu-abuan pucat yang berisi granula merah-


7/9

ungu yang tersebar merata.Beberapa uji laboratorium yang digunakan untuk menilai kualitas

trombosit adalah agregasi trombosit, retensi trombosit, retraksi bekuan, dan antibody anti

trombosit. Sedangkan uji laboratorium untuk menilai kuantitas trombosit adalah masa perdarahan

(bleeding time) dan hitung trombosit.Metode untuk menghitung trombombosit telah banyak

dibuat dan jumlahnya jelas tergantung dari kenyataan bahwa sukar untuk menghitung sel-sel

trombosit yang merupakan partikel kecil, mudah aglutinasi dan mudah pecah. Sukar

membedakan trombosit dengan kotoran. (Ratnaningsih, T. dan Setyawati, 2003)

Sebagai petunjuk praktis adalah bahwa hitung trombosit adekuat apabila apusan

mengandung satu trombosit per duapuluh eritrosit, atau dua sampai tiga trombosit per lapang

pandang besar (minyak imersi). Pemeriksaan apusan harus selalu dilakukan apabila hitung

trombosit rendah karena penggumpalan trombosit dapat menyebabkan hitung trombosit rendah

palsu.Bahan pemeriksaan yang dianjurkan untuk pemeriksaan hitung trombosit adalah darah

EDTA. Antikoagulan ini mencegah pembekuan darah dengan cara mengikat kalsium dan juga

dapat menghambat agregasi trombosit.

Jumlah Normal trombosit: 150.000-400.000 /L (Ratnaningsih, T. dan Setyawati, 2003)

Metode langsung (Rees Ecker)

Hitung trombosit secara langsung menggunakan kamar hitung yaitu dengan mikroskop

cahaya. Pada hitung trombosit cara Rees-Ecker, darah diencerkan ke dalam larutan yang

mengandung Brilliant Cresyl Blue sehingga trombosit tercat biru muda. Sel trombosit dihitung

dengan menggunakan kamar hitung standar dan mikroskop.

Metode tidak langsung (sediaan apus)

Penghitungan trombosit secara tidak langsung yang menggunakan sediaan apus dilakukan

dalam 10 lpmi x 2000 atau 20 lpmi x 1000 memiliki sensitifitas dan spesifisitas yang baik untuk

populasi trombosit normal dan tinggi (trombositosis).

Korelasi dengan metode lain cukup erat. (Ratnaningsih, T. dan Setyawati, 2003)


8/9

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

1. Pemeriksaan hitung eritrosit

Alat dan Bahan

1. Larutan pengencer hayem (Natrium sulfat 2.5g, Natrium chloride 0.5g, Merkuri chloride

0.25g dan aquades 100ml)

2. Pipet eritrosit

3. Bilik hitungImproved Neubauerdan kaca penutup

4. Mikroskop

5. Counter

Cara Kerja

Darah dipipetkan sampai tanda 0.5, kemudian ujung pipet dibersihkan dari darah dan larutan

pengencer dipipetkan hingga mencapai tanda 101 (pengenceran 200x)

Pipet dikocok selama 3 menit supaya homogen, kemudian bilik hitung Improved Neubauer

dan kaca penutupnya disiapkan dan dibersihkan dengan etanol 95% hingga kering, penutup

dipasang

Sampel di pipet dibuang 4 tetes, kemudian ujung pipet diletakkan tepat di batas kaca penutup

dengan bilik hitung dan tetes ke 5 dibiarkan mengalir dengan sendirinya. Dan di tunggu 3

menit supaya eritrosit mengendap dalam bilik

Bilik hitung di pasang ke mikroskop. Eritrosit yang ada dalam 5 kotak kecil (1 kotak kecil

yang di tengah ditambah 4 kotak di masing-masing sudut) di hitung dengan perbesaranobjektiv 40x


9/9

2. Penetapan kadar hemoglobin (Metode Sahli)

Alat dan Bahan

1. Hemoglobinometer

2. Larutan HCl 0.1N

3. Aquades

4. Mikropipet ukuran 20L atau mm3

5. Batang pengaduk dari gelas

Cara Kerja

PA Hitung Ertrosit & Trombosit

Documents

Transcript of PA Hitung Ertrosit & Trombosit