Mesa redonda:Mesa redonda: Comparativo interinstitucional de Comparativo interinstitucional de

sistemas de vigilancia sistemas de vigilancia epidemiológica, Benchmarking para epidemiológica, Benchmarking para

infecciones infecciones nosocomialesnosocomiales

Coordina: Dra. Daniela de la Rosa Zamboni. Jefe del Departamento de Epidemiología Hospitalaria

Dra. Hilda Guadalupe Hernández OrozcoDra. Hilda Guadalupe Hernández Orozco Presidenta del CODECINPresidenta del CODECIN

Dra. Irma Dra. Irma ZamudioZamudio LugoLugo

Jefa de División de Epidemiología Hospitalaria, Hospital de Jefa de División de Epidemiología Hospitalaria, Hospital de Pediatría Pediatría

Dra. Norma Velázquez Guadarrama Dra. Norma Velázquez Guadarrama

Departamento de InfectologíaDepartamento de Infectología Laboratorio de Bacteriología IntestinalLaboratorio de Bacteriología Intestinal

EL PAPEL DEL LABORATORIO EN LA VIGILANCIA Y CONTROL DE LAS INFECCIONES

NOSOCOMIALES.

“Puede parecer un principio extraño el “Puede parecer un principio extraño el definir como primer requerimiento de un definir como primer requerimiento de un

hospital no producir daño a los enfermos”hospital no producir daño a los enfermos”

Florence Nightingale (1820-1910)

INFECCIÓN ASOCIADA A LA INFECCIÓN ASOCIADA A LA ASISTENCIA SANITARIA ASISTENCIA SANITARIA (definición)(definición)

Cuadro clínico localizado o sistémico, resultante de una reacción adversa debida a la presencia de un microorganismo infeccioso o su toxina.

http://www.cdc.gov/nhsn/pdfs/pscmanual/17pscnosinfdefcurrent.pdf

Indicador de la calidad de los servicios que ofrecen las instituciones de asistencia sanitaria.

Las IAAS resultan ser una de las principales causas de alta morbilidad, mortalidad y mayor gravamen a los costos de salud.

FUNCIONES EN LA VIGILANCIA FUNCIONES EN LA VIGILANCIA

EPIDEMIOLOGICA EN EL HOSPITALEPIDEMIOLOGICA EN EL HOSPITAL

EPIDEMIOLOGOEPIDEMIOLOGO INFECTOLOGOINFECTOLOGO ENFERMERAENFERMERA

MICROBIOLOGOMICROBIOLOGO

LABORATORIOLABORATORIO MICROBIOLOGIAMICROBIOLOGIA

COMITESCOMITES HOSPITALARIOS HOSPITALARIOS

FUNCIONALESFUNCIONALES

UNIDADES DE UNIDADES DE INFORMATICAINFORMATICA

COORDINACIONCOORDINACION

NORMATIVIDADNORMATIVIDAD

FUNCIONES VIGILANCIA ACTIVA Y CONTROL DE BROTES

FUNCIONES APOYO A LA PREVENCION

ANALISISANALISIS REGISTROREGISTRO

DETECCIONDETECCION DETECCIONDETECCION

Pilar fundamental para el programa de prevención y control de las IAAS.

1. Proporciona de manera oportuna la información de los casos.

2. Integrar y analizar la información de los microorganismos responsables de las mismas.

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA CLÍNICA

1.Participante en el comité de control de Infecciones 2. Responsable de la enseñanza continua y permanente de las IAAS. 3. Generar el manual de procedimientos en microbiología clínica 4. Emitir los reportes a tiempo 5. Generar el manual de procedimientos especiales y de investigación

PARTICIPACIÓN DE LOS LABORATORIOS CLÍNICOS EN LA

PREVENCIÓN, CONTROL Y VIGILANCIA DE LAS IAAS

Para lograr dichos objetivos el laboratorio debe realizar algunas funciones específicas entre las que se encuentran:

• Aislamiento e identificación de microorganismos dentro de la rutina del laboratorio clínico: bacterias, virus, parásitos y hongos.

• Establecer y uniformar prácticas reproducibles de aislamiento, identificación y determinación de resistencia bacteriana.

• Buscar el aislamiento de las cepas causantes de un probable “brote”

Apoyo microbiológico para programas de vigilancia y control de las infecciones: • Evaluación de la resistencia a los antibióticos. • Cultivos de vigilancia. • Caracterización microbiológica detallada de microorganismos específicos especialmente para definir brotes, fuente de diseminación, reservorios y rutas de transmisión: fenotipificación y genotipificación. • Realizar control de calidad interno y externo. • Participación activa en el Comité de Detección de Infecciones Nosocomiales (CODECIN). •Coordinación con los servicio de Epidemiología e Infectología.

*Bacterianos: E. coli, P. aeruginosa, S. aureus, K. pneumoniae,

Enterobacter, Enterococcus y SCN. (80%) *Virales: virus sincitial respiratorio, citomegalovirus, herpes simple y rotavirus. (15%) *Fúngicos: Candida albicans y Aspergillus sp. *Parasitarios: VIH: Pneumocystis jirovecii, Toxoplasma gondii y Cryptosporidium spp. (ambos 5%)

IAAS

Agente etiológico

•Infectividad

•Virulencia

•Resistencia a antimicrobianos

Pérez ML., Zurita VI., Pérez RN., Patiño CN. y Calvimonte O. 2010. Infecciones Intrahospitalarias: Agentes, Manejo Actual y Prevención. Rev. Cient Cienc Méd. 13(2).

Distribución y rango de microorganismos responsables de infección nosocomial en hospitales de Estados Unidos durante el periodo 2009-2010

Pujol M, Limón E. Epidemiología general de las infecciones nosocomiales. Sistemas y programas de vigilancia. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2013.

BIOPELICULABIOPELICULA Estructura compleja e involucra tres componentes: 1.Masa de bacterias la cual puede estar formada por una sola especie o por múltiples especies, 2. Espacios intercelulares o canales, y 3. Matriz extracelular que lo rodea compuesta por una mezcla de exopolisacáridos, proteínas, ácidos nucleicos y otras sustancias

Aparna, Madhu Sharma and Sarita Yadav. Biofilms: microbes and disease BJID 2008

Formación de biopelícula en cepas de S. epidermidis.

MÉTODOS COMUNES PARA LA MÉTODOS COMUNES PARA LA CARACTERIZACIÓN CARACTERIZACIÓN FENOTÍPICAFENOTÍPICA DE DE

BACTERIAS:BACTERIAS:

BIOTIPIFICACIÓNBIOTIPIFICACIÓN SEROTIPIFICACIÓNSEROTIPIFICACIÓN

SUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANOSSUSCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANOS

RESISTENCIA RESISTENCIA

BACTERIANABACTERIANA

Cambios en el material genético Cambios en el material genético Modificaciones de los genes Modificaciones de los genes ““in situin situ””

Adquisición horizontal de material genéticoAdquisición horizontal de material genético

Evento Genético

Evento ecológico

Presión de selección por el mismo uso de Presión de selección por el mismo uso de

antibióticosantibióticos

Evento epidemiológico

Diseminación de cepas Diseminación de cepas

resistentesresistentes

Identificación y Identificación y SusceptibilidadSusceptibilidad

(CLSI) Clinical and Laboratory Standards Institute CLSI/2007

Antibióticos activos in vitro sin Antibióticos activos in vitro sin eficacia clínicaeficacia clínica

(CLSI) Clinical and Laboratory Standards Institute CLSI/2007

Detección de BLEEs por Detección de BLEEs por prueba de doble discoprueba de doble disco

Disco de la izquierda con 30 g de CTX y disco central con 20

mas 10 g de amoxicilina con ac clavulanico y a la derecha

disco con 30 g de CAZ, muestran un fenotipo de resistencia

a ambas cefalosporinas

CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS, Oct. 1995, p. 557–584

Determinación del perfil de susceptibilidad Determinación del perfil de susceptibilidad antimicrobiana por la prueba de difusión con antimicrobiana por la prueba de difusión con

discodisco

(CLSI) Clinical and Laboratory Standards Institute CLSI/2007

Walsh. CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS, Apr. 2005, p. 306–325

E-test por un extremo imipenem (IP) y en el otro extremo imipenem más EDTA

(IPI), reducción de 3 diluciones en la CIM en presencia de EDTA prueba positiva

para metalo- -lactamasa (MBL), recomienda como S. malthophilia ATCC13636

como control +

EE--test para determinación de MBLtest para determinación de MBL

MÉTODOS COMUNES PARA LA MÉTODOS COMUNES PARA LA CARACTERIZACIÓN CARACTERIZACIÓN GENOTÍPICASGENOTÍPICAS DE DE

BACTERIASBACTERIAS::

PFGEPFGE (ELECTROFORESIS POR CAMPOS (ELECTROFORESIS POR CAMPOS PULSADOS)PULSADOS)

RFLPRFLP (POLIMORFISMO DE FRAGMENTOS DE (POLIMORFISMO DE FRAGMENTOS DE DNA POR RESTRICCIÓN ENZIMATICA)DNA POR RESTRICCIÓN ENZIMATICA) MLSTMLST (TIPIFICACIÓN DE SECUENCIAS (TIPIFICACIÓN DE SECUENCIAS

MULTILOCUS)MULTILOCUS)

PFGEPFGE

http://www.google.com.mx/url?sa=i&source=images&cd=&cad=rja&docid=EAvvQcWLaYFSQM&tbnid=zU9ZScUK3WSNaM:&ved=0CAgQjRwwAA&url=http://www.health.state.mn.us/foodsafety/alert/ecoli0610.html&ei=L7d0Ub-CPcaMqgHjiICYAg&psig=AFQjCNGYwbosX5ODklDTHBDjDuLHlzzK0w&ust=1366689968045712

450-500 pb

Variaciones en locus

Identificar microorganismos con

genotipos: identicos (clones),

relacionados (líneas clonales)

Conservados

MLST de Pseudomonas aeruginosa Genes codificantes de enzimas metabólicas: acsA (Acetyl coenzyme A synthetase) aroE (Shikimate dehydrogenase) guaA (GMP synthase) mutL (DNA mismatch repair protein) nuoD (NADH dehydrogenase I chain C, D) ppsA (Phosphoenolpyruvate synthase) trpE (Anthralite synthetase component I)

Curran y col. 2004

Perfil alélico

Número Cepa

ARO E

ACS A

GUA A

PPS A

TRP E

MUT L

NUO D

1 5 91 13 9 17 15 3 1

2 7 91 38 3 2 26, 4 9 1

3 7G4D 52 13 9 17 15 3

4 9 52 13 9 17 15 3

5 12 52 13 9 17 15 3 1

6 15 52 13 9 17 15 3 1

7 15´ 52 13 9 17 15 3 1

8 17 52 13 9 17 3 1

9 23 91 38 3 2 4 9 1

10 26 91 82, 38 3 2, 17 4 9 1

11 27 52 13 9 17 3 1

12 28 52 13 9 17 15 3

13 29 52 13 9 17 15 3 1

14 30 52 13 9 17 15 3 1

15 31 52 13 9 17 15 3 1

16 35 52 13 9 17 15 3 1

17 37 52 13 9 17 15 1

18 38 91 38 3* 2 26, 4 9 1

19 38´ 91 38 3 2 26 1

20 40 75 4 16 18 3 1

21 30´ 52 13 9 17 3*

22 328u-1 52 13 9 17 15 3 1

23 318u-2 52 13 9 17 15 3 1

24 188u 52 13 9 17 15 3 1

25 581u 52 13 9 17 15 3 1

26 873u-1 52 13 9 17 15 3 1

27 305u 52 13 9 17 15 3 1

28 796u 52 13 9 17 15 3 1

29 592D 52 13 9 17 15 3 1

30 964H 52 13 9 17 15 1

31 210u-1 52 13 9 17 15 3 1

32 440u-3 52 13 9 17 15 3

33 281u 52 13 9 17 15 3

Cepas sensibles

Número Cepa

ARO E

ACS A

GUA A

PPS A

TRP E

MUT L

NUO D

1 43s 5 11 1 15 1 25

2 47s 52 38 3 18 77* 9*

3 598H 26* 5 26 33 42 21

4 584H 10 11 6 4 7 8*

5 227H 80 39 12 15 2 8*

6 526u 52 13 9 17 15 3

7 5u 5 6 5 4 26 3

8 884H 80 39 12 15 2* 8*

9 977u 78 17 12 1 18 3

10 51u 78 17 12 1 3

PAO1 5 7 12 1 7 3 4

PAO1P 5 7 12 1 7 3

* Mandar secuencia al curador para asignación de nuevo número alélico

Según su estructura genética se pueden clasificar en:

Distintos modelos de estructuras de poblaciones

Tomado de: Farfán, 2002.

Modelos de poblaciones bacterianas

No recombinación

Recombinación frecuente

RED NACIONAL DE RED NACIONAL DE LABORATORIOS DE SALUD LABORATORIOS DE SALUD PUBLICAPUBLICA

NACIONAL ◦ INDRE

◦ LNSP

ESTATAL

LOCAL