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LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA DISUSUN OLEH : NAMA :PRATIWI DIMIANTI NPM :2008730101 FAKULTAS KEDOKTERAN DAN KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH JAKARTA TAHUN 2009 HEMOGLOBIN

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L A P O R A N

P R A K T I K U M B I O K I M I A

D I S U S U N O L E H :

N A M A : P R AT I W I D I M I A N T I

N P M : 2 0 0 8 7 3 0 1 0 1

FA K U LTA S K E D O K T E R A N D A N K E S E H ATA N

U N I V E R S I TA S M U H A M M A D I YA H J A K A R TA

TA H U N 2 0 0 9

H E M O G L O B I N

I . T U J U A N

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1 . M e m b u k t i k a n H b d a p a t m e n g i k a t o k s i g e n m e m b e n t u k o k s h e m o g l o b i n ( H b O 2 ) d a n t e r u r a i

k e m b a l i m e n j a d i O 2 d a n d e o k s i h e m o g l o b i n

2 . M e m b u k t i k a n b a h w a H b d a p a t m e n g i k a t C O y a n g i k a t a n n y a l e b i h k u a t d a r i p a d a H b

d e n g a n O 2

3 . M e m p e r l i h a t k a n b i l a b e s i d a l a m m o l e k u l H b d i o k s i d a s i m e n j a d i F e3 +

, m a k a t e r b e n t u k

M e t H b y a n g t i d a k l a g i d a p a t m e n g i k a t O 2 .

I I . L A N D A S A N T E O R I

1 . U j i O k s i h e m o g l o b i n d a n D e o k s i h e m o g l o b i n

D a l a m k e a d a a n t e r e d u k s i F e d a l a m m o l e k u l H b d a p a t m e n g i k a t d a n m e l e p a s k a n o k s i g e n

t e r g a n t u n g p a d a t e k a n a n O 2 d a n C O 2 .

H b ( F e2 +

) + O 2 H b ( F e2 +

) O 2

D e o k s i H b o k s i H b

U n t u k m e r e d u k s i o k s i H b m e n j a d i d e o k s i H b d i g u n a k a n l a r u t a n s t o k e s

2 . U j i K a r b o n m o n o k s i d a H e m o g l o b i n ( H b C O )

G a s C O y a n g b e r a s a l d a r i p r o s e s - p r o s e s p e m b a k a r a n y a n g t i d a k s e m p u r n a d a p a t

m e n g i k a t H b m e m b e n t u k H b C O . I k a t a n i n i s a n g a t k u a t ( ± 2 0 0 k a l i l e b i h k u a t d i s b a n d i n g

i k a t a n H b d e n g a n O 2 ) . H b b e r w a r n a m e r a h t e r a n g .

H b O 2 + C O H b C O + O 2

H b C O + s t o k e s t i d a k b e r e a k s i

( t e t a p b e r w a r n a m e r a h t e r a n g )

3 . U j i M e t h e m o g l o b i n

H b ( F e2 +

) + K 3 F e ( C N ) 6 H b ( F e3 +

) + K 4 F e ( C N ) 6

H b o k s i d a t o r M e t H b

M e t H b t i d a k d a p a t l a g i m e n g i k a t O 2

I I I . A L A T D A N B A H A N

1 . U j i O k s i h e m o g l o b i n d a n D e o k s i h e m o g l o b i n

1 ) T a b u n g r e a k s i

2 ) G e l a s u k u r

3 ) P i p e t

4 ) D a r a h s e g a r

5 ) P e r e a k s i s t o k e s

6 ) L a r u t a n N H 4 O H

7 ) A i r s u l i n g

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2 . U j i K a r b o n m o n o k s i d a H e m o g l o b i n ( H b C O )

1 ) T a b u n g r e a k s i

2 ) G e l a s u k u r

3 ) P i p e t

4 ) D a r a h s e g a r

5 ) S u m b e r g a s C O

6 ) P e r e a k s i s t o k e s

7 ) N H 4 O H

3 . U j i M e t h e m o g l o b i n

1 ) T a b u n g r e a k s i

2 ) G e l a s u k u r

3 ) P i p e t

4 ) D a r a h s e g a r

5 ) P e r e a k s i K 3 F e ( C N ) 6

6 ) P e r e a k s i s t o k e s

I V . P R O S E D U R K E R J A

1 . U j i O k s i h e m o g l o b i n d a n D e o k s i h e m o g l o b i n

a . U j i O k s i h e m o g l o b i n

a ) K e d a l a m s e b u a h t a b u n g r e a k s i e n c e r k a n 2 m L d a r a h d e n g a n 6 m L a i r s u l i n g .

C a m p u r k a n d e n g a n b a i k d a n p e r h a t i k a n p e r u b a h a n w a r n a m e r a h k e e m a s a n d a r i

o k s i h e m o g l o b i n y a n g t e r b e n t u k

b ) B a g i 2 i s i t a b u n g s e h i n g g a m a s i n g - m a s i n g t a b u n g b e r i s i 4 m L . g u n a k a n t a b u n g 1

s e b a g a i c o n t r o l

R e a k s i :

H C O O H + H 2 S O 4 C O + H 2 S O 4 + H 2 O

( a . F o r m a t )

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b . P e m b e n t u k a n D e o k s i h e m o g l o b i n

a ) I s i t a b u n g k e t i g a d e n g a n 2 m L p e r e a k s i s t o k e s d a n t a m b a h k a n N H 4 O H

s e c u k u p n y a u n t u k m e l a r u t k a n e n d a p a n y a n g s e g e r a t e r b e n t u k . C a m p u r a n i n i

m e r u p a k a n p e r e d u k s i y a n g a m a t k u a t .

b ) M a s u k k a n b e b e r a p a t e t e s ( 5 t e t e s ) l a r u t a n s t o k e s k e d a l a m t a b u n g 2 . T e r l i h a t

p e r u b a h a n w a r n a k a r e n a t e r b e n t u k n y a d e o k s i h e m o g l o b i n . B a n d i n g k a n d e n g a n

t a b u n g 1

c ) P i n d a h k a n 2 m L l a r u t a n d e o k s i h e m o g l o b i n k e t a b u n g l a i n s e b a g a i c o n t r o l .

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c . P e m b e n t u k a n k e m b a l i o k s i h e m o g l o b i n

a ) K o c o k k u a t - k u a t t a b u n g y a n g b e r i s i d e o k s i h e m o g l o b i n , m a k a a k a n k e m b a l i

t e r j a d i o k s i g e n a s i d a r i u d a r a . P e r h a t i k a n d a n c a t a t w a r n a H b O 2 y a n g k e m b a l i

t e r b e n t u k

b ) O k s i g e n a s i d a n d e o k s i g e n a s i i n i d a p a t d i l a k u k a n b e r u l a n g - u l a n g

2 . U j i K a r b o n m o n o k s i d a H e m o g l o b i n ( H b C O )

a . E n c e r k a n 2 m L d a r a h d e n g a n 8 m L a i r s u l i n g . B a g i 2 d a r a h e n c e r i t u ( m a s i n g - m a s i n g

5 m L ) d a l a m 2 t a b u n g r e a k s i .

b . P a d a t a b u n g 1 a l i r k a n g a s C O ( d a l a m l e m a r i a s a m ) . O k s i h e m o g l o b i n a k a n b e r u b a h

m e n j a d i k a r b o n m o n o k s i d a h e m o g l o b i n . B a n d i n g k a n k e d u a w a r n a t a b u n g t a d i .

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c . P i n d a h k a n m a s i n g - m a s i n g 1 m L d a r i t a b u n g 1 ( y a n g b e r i s i H b C O ) k e d a l a m t a b u n g 3

d a n t a b u n g 4 , d a n m a s i n g - m a s i n g 1 m L d a r i t a b u n g 2 ( y a n g b e r i s i H b O 2 ) k e d a l a m

t a b u n g 5 d a n 6

d . T a m b a h k a n p e r e a k s i s t o k e s p a d a t a b u n g 3 d a n 5 . P e r h a t i k a n h a s i l y a n g d i p e r o l e h

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e . E n c e r k a n i s i t a b u n g k e - 4 d a n t a b u n g k e - 6 d e n g a n 4 m L a i r s u l i n g . B a n d i n g k a n

w a r n a k e d u a c a i r a n i t u . o k s i H b b e r w a r n a k e k u n i n g - k u n i n g a n , s e d a n g k a n H b C O

b e r w a r n a m e r a h t e r a n g ( c a r m i n e t i n t )

3 . U j i M e t h e m o g l o b i n

a . E n c e r k a n 1 m L d a r a h d e n g a n 4 m L a i r s u l i n g k e d a l a m t a b u n g r e a k s i .

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b . K e d a l a m t a b u n g i t u d i t a m b a h k a n b e b e r a p a t e t e s K 3 F e ( C N ) 6 3 3 % . P e r h a t i k a n d a n

c a t a t p e r u b a h a n w a r n a y a n g t e r j a d i . K e m u d i a n t a m b a h k a n p e r e a k s i s t o k e s k e d a l a m

t a b u n g i t u d a n k o c o k k u a t - k u a t . P e r u b a h a n a p a k a h y a n g t e r l i h a t ?

c . E n c e r k a n 3 m L d a r a h d e n g a n 3 m L a i r s u l i n g d a n p a n a s k a n s e b e n t a r . L a l u t a m b a h k a n

6 m L K 3 F e ( C N ) 6 . C a m p u r d e n g a n m e m b a l i k - b a l i k a n n y a . P e r h a t i k a n g e l e m b u n g -

g e l e m b u n g o k s i g e n y a n g t e r b e n t u k .

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V. H A S I L

1 . U j i o k s i h e m o g l o b i n d a n d e o k s i h e m o g l o b i n

H a s i l T a b u n g 1

O k s i H b

T a b u n g 2

D e o k s i H b

T a b u n g 3

R e o k s i g e n a s i

D e o k s i H b

W a r n a y a n g t e r b e n t u k M e r a h k e e m a s a n M e r a h g e l a p M e r a h k e e m a s a n

2 . U j i k a r b o n m o n o k s i d a H e m o g l o b i n

T a b u n g O k s i H b K a r b o n m o n o k s i d a

W a r n a s e b e l u m p e n a m b a h a n

p e r e a k s i s t o k e s

M e r a h k e e m a s a n M e r a h t e r a n g

W a r n a s e t e l a h p e n a m b a h a n

p e r e a k s i s t o k e s

M e r a h g e l a p M e r a h k e c o k l a t a n

3 . U j i M e t h e m o g l o b i n

T a b u n g W a r n a t a b u n g 1 W a r n a T a b u n g 2

+ K 3 F e ( C N ) 6 M e r a h t e r a n g + K 3 F e ( C N ) 6 M e r a h k e c o k l a t a n

P e n g o c o k a n k u a t M e r a h t e r a n g G e l e m b u n g u d a r a A d a g e l e m b u n g u d a r a

+ S t o k e s M e r a h t e r a n g

P e n g o c o k a n k u a t M e r a h k e c o k l a t a n

V I . K E S I M P U L A N

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1 . U j i o k s i h e m o g l o b i n d a n d e o k s i h e m o g l o b i n

H b d a p a t m e n g i k a t O 2 m e m b e n t u k o k s i h e m o g l o b i n ( b e r w a r n a m e r a h k e e m a s a n )

s e d a n g k a n H b y a n g t i d a k m e n g i k a t O 2 a t a u b e l u m m e n g i k a t O 2 d i s e b u t

D e o k s i h e m o g l o b i n ( b e r w a r n a m e r a h g e l a p ) d a n p e m b e n t u k a n k e m b a l i o k s i h e m o g l o b i n

d a r i d e o k s i h e m o g l o b i n d i s e b u t R e o k s i g e n a s i D e o k s i h e m o g l o b i n y a n g s e m u l a b e r w a r n a

m e r a h g e l a p k e m u d i a n s e t e l a h d i k o c o k - k o c o k t e t a p i t i d a k d i t u t u p u j u n g t a b u n g t e r j a d i

o k s i g e n a s i d a r i u d a r a y a n g m e n y e b a b k a n w a r n a m e r a h k e e m a s a n .

2 . U j i k a r b o n m o n o k s i d a H e m o g l o b i n

O k s i h e m o g l o b i n d i t a m b a h k a n p e r a k s i s t o k e s b e r u b a h m e n j a d i D e o k s i h e m o g l o b i n ( m e r a h

g e l a p ) . S e d a n g k a n k a r b o n m o n o k s i d a H e m o g l o b i n d i t a m b a h k a n s t o k e s t i d a k b e r u b a h

( m e r a h t e r a n g ) k a r e n a i k a t a n k a r b o n m o n o k s i d a H e m o g l o b i n s a n g a t k u a t ± 2 0 0 k a l i l e b i h

k u a t d i b a n d i n g O k s i h e m o g l o b i n

3 . U j i M e t h e m o g l o b i n

VII. P E R T A N Y A A N

1. P e r i s t i w a f a a l a p a k a h y a n g d a p a t d i t i r u d a r i p e r c o b a a n U j i O k s i h e m o g l o b i n d a n

D e o k s i h e m o g l o b i n

P e r i s t i w a p e r f u s i p a d a p r o s e s r e s p i r a s i y a i t u d i m a n a O 2 d i s e b a r k a n d a r i p a r u - p a r u k e

j a r i n g a n o l e h H b s e h i n g g a m e m b e n t u k H b O 2 s e d a n g k a n C O 2 d i a n g k a t d a r i j a r i n g a n k e

p a r u - p a r u o l e h H b s e h i n g g a m e m b e n t u k D e o k s i H b . H b m e n g i k a t C O ± 2 0 0 k a l i l e b i h

k u a t d a r i p a d a H b m e n g i k a t O 2 s e h i n g g a l a r u t a n D e o k s i H b l e b i h p a k a t d a r i p a d a H B O 2

( p e n g a n g k u t a n O 2 k e j a r i n g a n p e r i f e r ) .

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2. G e j a l a - g e j a l a a p a k a h y a n g t e r l i h a t p a d a s e s e o r a n g y a n g k e r a c u n a n C O

a. R a s a l e l a h

b. S a k i t k e p a l a

c. M u a l

d. M u n t a h

e. P i n g s a n

f. D e n y u t n a d i d a n p e r n a p a s a n m e n j a d i c e p a t

g. T e k a n a n d a r a h t u r u n

h. k e g a g a l a n p e r n a p a s a n

i. k e m a t i a n