lxvii

Lampiran 1. Prosedur uji zona hidrolisis kasein

Media kultur agar yang mengandung kasein 2% disiapkan di dalam cawan petri.

Wilayah agar dibagi menjadi 4 bagian (kuadran) yang sama, dan empat buah kertas cakram ditempatkan di bagian tengah setiap kuadran.

Sebanyak 0.1 ml kultur cair isolat yang akan diuji dipipet dan diteteskan di satu kertas cakram, sehingga satu cawan petri dapat digunakan untuk 4 isolat yang berbeda.

Biakan diinkubasi pada suhu 29oC selama 24 sampai 48 jam. Jika terjadi proses hidrolisis protein, maka daerah bening akan terlihat

di sekeliling koloni mikrob, sebaliknya bila tidak terjadi hidrolisis daerah sekitar koloni tetap berwarna keruh.

Diameter wilayah yang dihidrolisis (daerah bening) diukur.

lxviii

Lampiran 2. Prosedur analisis aktivitas enzim protease (Bergmeyer dan Graβ1, 1986).

Pereaksi

Blanko (µl)

Standar (µl)

Sampel (µl)

1. Buffer phosphat 0.05 M pH 7 250 250 250 2. Substrat kasein 2% (b/v) pH 7 250 250 250 3. Enzim protease - - 50 4. Tirosin standar 5 mmol/l - 50 - 5. Aquadest 50 - -

Di-vortex , kemudian diinkubasi pada suhu 37oC selama 10 menit.

6. TCA 0,1 M 500 500 500 7. Aquadest - - 50 8. Enzim protease 50 50 -

Di-vortex , kemudian diinkubasi pada suhu 37oC selama 10 menit

lalu disentrifus 6000 g selama 10 menit dengan suhu 4oC.

Absorbansi diukur dengan spektrofotometer UV pada panjang gelombang 280 nm.

Aktivitas enzim dihitung dengan rumus : U = (Abs Sample – Abs blanko) x konsentrasi tirosin (mM) x 181 (Abs standar – Abs blanko) x waktu inkubasi (menit) x vol. enzim (ml) Di mana : U = aktivitas enzim dalam µg/ (menit.ml) atau unit Abs = absorbansi T = waktu inkubasi (menit)

lxix

Lampiran 3. Prosedur analisis proksimat (kadar air, kadar abu, kadar protein, kadar lemak, dan kadar serat kasar) mengikuti metode Takeuchi (1988).

a. Prosedur analisis kadar air - Cawan dipanaskan pada suhu 110oC selama 1 jam, kemudian didinginkan

dalam desikator selama 30 menit dan ditimbang (A). - Sampel ditimbang sebanyak 1 gram dan dimasukkan ke dalam cawan,

kemudian ditimbang (B). - Cawan dan sampel dipanaskan tanpa penutup pada suhu 110oC selama 2 jam,

kemudian didinginkan dalam desikator sampai suhu ruang dan timbang. Proses tersebut diulang sampai beratnya konstan (C).

- Kadar air (%) = (B-C) x 100 (B-A) b. Prosedur analisis kadar abu - Cawan porselin dipanaskan pada suhu 600oC selama 1 jam di dalam muffle

furnase, kemudian dibiarkan suhu muffle furnase turun sampai 110oC , selanjutnya cawan porselin dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator selama 30 menit dan ditimbang (A).

- Sampel ditimbang sebanyak 1 sampai 2 gram dan dimasukkan ke dalam cawan, kemudian ditimbang (B).

- Cawan porselin dan sample dipanaskan di dalam muffle furnase pada suhu 600oC selama 1 jam, kemudian dibiarkan sampai samalam.

- Cawan porselin + sample dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator selama 30 menit, kemudian ditimbang (C).

- Kadar abu (%) = C x 100 (B-A) c. Prosedur analisis protein c.1. Tahap Oksidasi - Sampel ditimbang sebanyak 0,5 gram dan dimasukkan ke dalam labu

Kjehldahl, salah satu dari labu digunakan sebagai blanko dan tidak diisi dengan sample.

- Tiga gram katalis (K2SO4 + Cu SO4.H2O dengan rasio 9:1) dan 10 ml H2SO4 pekat ditambahkan.

- Labu Kjeldahl dipanaskan pada suhu 400oC selama 0,5 sampai satu jam, kemudian pemanasan dilanjutkan lagi selama 3 sampai 4 jam sehingga terjadi perubahan warna menjadi hijau bening.

- Larutan ditambah dengan 20 ml air destilata dan didinginkan. - Setelah dingin diencerkan dengan air destilata sampai 100 ml.

lxx

c.2.Tahap Destilasi - Beberapa tetes H2SO4 ditambahkan ke dalam botol A yang sebelumnya telah

diisi setengah bagian dengan air destilata untuk menghindari amoniak lingkungan, kemudian dididihkan selama 10 menit.

- Botol erlenmeyer (F) yang berisi 10 ml H2SO4 0,05 N ditetesi 2 sampai 3 tetes indikator (methyl red / methyl blue), disiapkan untuk menampung NH3 yang dibebaskan.

- 5 ml larutan sampel dimasukkan ke botol D melalui corong C, kemudian corong C dicuci dengan air destilata.

- 10 ml larutan NaOH 30% ditambahkan melalui corong C dan corong C dicuci kembali dengan air destilata, kemudian antara corong C dan botol D ditutup dengan cara dijepit.

- Campuran alkalin dalam botol destilasi dipanaskan dengan uap selama minimum 10 menit estela kondensasi terlihat pada kondensor.

- Larutan dalam erlenmeyer dititrasi dengan larutan NaOH 0,05 N dan catat hasilnya.

- Prosedur titrasi yang sama juga dilakukan pada blanko. - Kadar protein (%) = 0,0007*1 x (Vb – Vs) x F x 6,25*2 x 20 x 100 S Di mana : Vs = volume NaOH 0,05 N untuk sampel F = faktor koreksi untuk larutan standar NaOH 0,05 N S = berat sampel (g)

*1 = setiap ml NaOH 0,05 N equivalent dengan 0,0007 g nitrogen

*2 = faktor nitrogen, protein diasumsikan pada 16% nitrogen, faktor 6,25 (100/16) digunakan untuk mengkonversi total nitrogen ke total protein.

d. Prosedur Analisis Lemak - Labu ekstraksi dipanaskan pada suhu 110oC selama 1 jam, setelah itu

didinginkan selama 30 menit dalam desikator. Labu dipanaskan kembali selama 30 menit dan dinginkan, kemudian ditimbang. Proses tersebut diulang sampai tidak ada perbedaan bobot labu (lebih kecil dari dari 0,3 mg). Bobot labu ekstraksi (A).

- Sampel ditimbang sebanyak 1 sampai 2 gram dan dimasukkan ke dalam tabung filter kemudian ditutup dengan lapisan tipis dari katon absorbent dan dikeringkan dalam oven pada suhu 90 sampai 100oC selama 2 sampai 3 jam.

- Tabung filter ditempatkan di dalam ruang ekstraksi dari alat soxhlet dan dihubungkan dengan kondensor labu ekstraksi yang telah diisi dengan 100 ml petrolium ether, sebelumnya ether dipanaskan terlebih dahulu pada labu ekstraksi dalam water bath pada suhu 60 sampai 70oC selama 16 jam.

- Labu ekstraksi dipanaskan pada suhu 100oC, kemudian ditimbang (B) - Kadar lemak (%) = (B-A) x 100 Berat sampel

lxxi

e. Prosedur analisis serat kasar - Kertas filter dipanaskan dalam oven pada suhu 110oC, kemudian didinginkan

dalam desikator selama 15 menit. Dipanaskan kembali selama 30 menit dan dinginkan, kemudian ditimbang. Proses tersebut diulang sampai tidak ada perbedaan bobot (lebih kecil dari 0,3 mg).

- Cawan porselin dipanaskan pada suhu 550oC selama 1 jam di dalam muffle furnase, kemudian dibiarkan suhu muffle furnase turun sampai 110oC, selanjutnya cawan porselin dikeluarkan dan didinginkan dalam desikator selama 30 menit.

- Sampel sebanyak 1 sampai 2 gram ditimbang dan dimasukkan ke dalam labu erlenmeyer, (kalau kandungan lemak sampel > 1% dilakukan ekstraksi dengan larutan ether untuk memindahkan lemak), tambahkan 200 ml H2SO4 1,25% panas dan 1 ml iso-amyl alkohol sebagai agen antifoam.

- Labu dihubungkan dengan kondensor dan dididihkan selama 30 menit, labu diputar secara periodik agar bahan tidak mengendap.

- Labu dipindah dan cairan disaring melalui filter fiber nilon dalam sebuah corong, kemudian dicuci sebanyak 3 kali berturut-turut dengan 40 sampai 50 ml air panas.

- Residu yang terdapat dalam filter dipindahkan ke dalam labu original yang berisi sedikit air panas dan ditambahkan dengan 50 ml NaOH 5% panas dan 1 ml iso-amyl alkohol, kemudian diencerkan dengan 200 ml air panas.

- Selanjutnya labu dididihkan dan cairan disaring kembali dengan filter fiber nilon, kemudian dicuci sebanyak 5 kali berturut-turut dengan 40 sampai 50 ml air panas.

- Residu yang terdapat pada filter dipindahkan dalam kertas filter dan dicuci dengan air, tambahkan 15 ml alkohol dan 10 ml ether. Selanjutnya dikeringkan pada suhu 110 oC sampai tercapai bobot konstan.

- Kertas saring dimasukkan ke dalam cawan porselin dipanaskan dalam muffle furnace pada suhu 550 oC selama 1 jam atau sampai beratnya konstan, kemudian didinginkan.

- Kadar serat kasar (%) = Berat yang hilang selama pembakaran x 100 Berat sampel

lxxii

Lampiran 4. Komposisi pakan buatan untuk ikan nila

Komposisi Bahan

Prosentase (% bobot kering)

Komposisi Proksimat Pakan Formulasi (%)

Nutrien Basah KeringTepung ikan 10.00 Kadar Protein 28.00 31.12TBK 20.77 Kadar Lemak 7.29 8.10Tp darah 6.13 Kadar Serat Kasar 6.03 6.71Dedak 19.78 Kadar Abu 9.15 10.17Polard 34.62 Kadar BETN 39.50 43.90Minyak ikan 2.12 Kadar Air 10.02 0.00Minyak jagung 2.12 C/P (kkal/g protein) 9.14Premix 2.97 DE (kkal/kg) 2842.99CMC 1.48Total 100.00

Keterangan : total energi tercerna (DE) dihitung berdasarkan : protein 3.5 kkal; lemak 8.1 kkal, BETN 2.5 kkal (NRC 1977).

Lampiran 5. Hasil analisis proksimat pakan percobaan

(% bobot basah)

Perlakuan Protein Lemak Abu Serat Kasar BETN Air A 28.00 7.29 9.15 6.03 39.50 10.02 B 28.00 7.48 9.11 6.14 37.82 11.45 C 28.10 7.71 8.97 6.14 37.79 11.29 D 31.00 6.16 9.53 5.05 39.00 9.25 E 31.10 8.11 9.42 5.28 35.15 10.93 F 31.10 7.67 9.50 5.32 36.16 10.25 G 28.30 7.37 9.27 5.41 39.31 10.35

(% bobot kering)

Perlakuan Protein Lemak Abu Serat Kasar BETN Air A 31.12 8.10 10.17 6.71 43.90 0.00 B 31.62 8.45 10.29 6.93 42.71 0.00 C 31.68 8.69 10.11 6.93 42.60 0.00 D 34.16 6.79 10.51 5.57 42.97 0.00 E 34.92 9.11 10.58 5.93 39.47 0.00 F 34.65 8.55 10.59 5.93 40.29 0.00 G 31.57 8.22 10.34 6.03 43.84 0.00

lxxiii

Lampiran 6. Prosedur pengukuran derajat hidrolisis pakan Pakan sebanyak 15-20 gram dihidrolisis dengan enzim A1 atau L1 dengan dosis sesuai perlakuan. Pakan sebanyak 0.5 gram yang telah terhidrolisis oleh enzim protease ditambah 3 ml Tris HCl pH 6.5 dan disentrifus dengan kecepatan 10.000 rpm selama 20 menit. Supernatan diambil, dan endapan yang dihasilkan digunakan untuk analisis kadar protein total dengan metode Kjehldahl mengikuti metode Takeuchi (1988). Pengukuran kadar protein total juga dilakukan pada sampel yang tidak dihidrolisis.

DHP = P0 – Pt x 100% P0 Di mana : DHP = derajat hidrolisis protein P0 = kadar protein pakan pada waktu awal Pt = kadar protein pakan yang tidak dihidrolisis

lxxiv

Lampiran 7. Prosedur analisis kadar kromium pakan dan feses (Takeuchi 1988)

Analisis kadar cromium oksida (Cr2O3)

Feses ditimbang sebanyak 0.1-0.2 gram (sampel kering) dimasukkan ke

dalam labu Kjehldahl. 5 ml asam nitrat 65 % ditambahkan pada sampel. Larutan campuran

kemudian dipanaskan pada suhu sekitar 300oC sampai volume larutan menjadi ± 1 ml, kemudian larutan campuran didinginkan.

3 ml asam perklorat 72% ditambahkan, kemudian larutan dipanaskan kembali hingga terjadi perubahan warna dari hijau menjadi kuning atau jingga.

Larutan dipanaskan kembali selama 10 menit dan didinginkan.

Larutan dipindahkan dalam wadah 100 ml , akuades ditambahkan hingga 100 ml dan dibaca serapannya pada panjang gelombang 350 nm.

Berat Cr2O3 dalam sampel dihitung berdasarkan persamaan: Y = 0.2089X + 0.0032 Dimana : Y = absorbansi X = mg Cr2O3 dalam 100 ml larutan (= dalam sampel yang

ditimbang)

lxxv

Lampiran 8. Luas zona hidrolisis kasein sepuluh isolat bakteri

No Isolat Diameter hidrolisis (mm)

1 A1 30 2 L1 28 3 L4 28 4 L3 25 5 L7 11 6 L2 10 7 L6 8 8 A2 8 9 A3 6 10 L5 5

Lampiran 9. Hasil uji patogenisitas isolat bakteri proteolitik

Isolat uji

JNA (ekor)

JNM (ekor)

SR (%)

Keterangan

A1 5 0 100 Sehat hingga akhir masa pemantauan

L1 5 0 100 Sehat dan gesit hingga akhir masa pemantauan

L4 5 4 20 Ikan yang masih hidup kurang gesit di akhir masa pengamatan.

L3 5 3 40 Ikan yang masih hidup kurang gesit di akhir masa pengamatan

Kontrol 5 0 100 Sehat JNA : jumlah nila awal, JNM : jumlah nila mati, SR: survival rate

lxxvi

Lampiran 10. Kerapatan optis isolat bakteri proteolitik A1 dan L1 dalam 4 hari pengamatan

No Jam

Kultur ke- Kerapatan Optis

Urut A1 L1 1 0 0.045 0.044 2 4 0.105 0.119 3 8 0.179 0.186 4 12 0.257 0.266 5 16 0.278 0.312 6 20 0.414 0.383 7 24 0.505 0.512 8 28 0.615 0.547 9 32 0.683 0.634 10 36 0.820 0.696 11 40 0.850 0.776 12 44 1.050 1.065 13 48 1.055 0.953 14 52 1.050 1.022 15 56 0.927 0.990 16 60 0.835 0.997 17 64 0.721 0.968 18 68 0.790 0.990 19 72 0.771 0.975 20 76 0.759 0.959 21 80 0.721 0.899 22 84 0.724 0.851 23 88 0.735 0.773 24 92 0.715 0.819 25 96 0.721 0.645

lxxvii

Lampiran 11. Aktivitas enzim protease (µg/menit.ml) isolat A1 dan L1 dalam 4 hari pengamatan.

No Pengamatan Absorbansi

(λ = 280 nm) Aktivitas enzim (µg/menit ml)

Urut

jam ke- Enzim A1 Enzim A1 Enzim A1 Enzim L1

1 0 0.000 0.000 0.00 0.002 4 0.030 0.020 37.19 24.793 8 0.020 0.086 24.79 106.034 12 0.010 0.025 12.40 30.995 16 0.030 0.028 37.19 34.576 20 0.040 0.056 49.59 69.427 24 0.050 0.041 61.99 50.968 28 0.055 0.044 68.18 54.559 32 0.045 0.079 55.79 97.9410 36 0.056 0.080 69.42 99.1811 40 0.150 0.070 185.96 86.7812 44 0.250 0.090 309.93 111.5813 48 0.390 0.090 483.49 111.5814 52 0.430 0.120 533.08 148.7715 56 0.440 0.330 545.48 409.1116 60 0.450 0.450 557.88 557.8817 64 0.510 0.500 632.26 619.8618 68 0.580 0.660 719.04 818.2219 72 0.570 0.646 706.64 800.8720 76 0.590 0.630 731.44 781.0321 80 0.570 0.643 706.64 797.1422 84 0.588 0.680 728.96 843.0123 88 0.533 0.612 660.77 758.4124 92 0.561 0.650 695.49 805.8225 96 0.420 0.520 520.68 644.66

Absorbansi tirosin standar 5 mM = 0,365

Lampiran 12. Derajat hidrolisis protein pakan oleh enzim A1 dan L1

Dosis (ml/kg pakan)

Derajat Hidrolisis Protein (%) Enzim A1 Enzim L1

Ulangan Rataan SD

Ulangan Rataan SD1 2 1 2

0 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00200 30.67 35.75 33.21 3.59 40.26 37.82 39.04 1.73400 50.56 55.98 53.27 3.83 53.79 58.92 56.36 3.63600 62.88 66.96 64.92 2.88 58.95 55.70 57.33 2.30800 72.98 77.64 75.31 3.30 68.42 73.36 70.89 3.491000 90.23 91.65 90.94 1.00 91.53 92.45 91.99 0.65

lxxviii

Lampiran 13. Perhitungan kecernaan total dan protein

Parameter U

Perlakuan A B C D E F G

Kadar kromium 1 0.71 0.52 0.72 0.68 1.01 0.50 0.58

pakan 2 0.71 0.52 0.72 0.68 1.01 0.50 0.58

(% bobot kering) 3 0.71 0.52 0.72 0.68 1.01 0.50 0.58

Rata-rata 0.71 0.52 0.72 0.68 1.01 0.50 0.58

Standar Deviasi 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00

Kadar kromium 1 1.42 1.74 2.89 2.28 3.25 3.72 1.51

feses 2 1.33 1.86 3.08 2.24 3.21 3.80 1.44

(% bobot kering) 3 1.37 1.99 2.99 2.21 3.28 3.64 1.47

Rata-rata 1.37 1.86 2.98 2.24 3.25 3.72 1.47

Standar Deviasi 0.04 0.12 0.09 0.04 0.03 0.08 0.03

Kecernaan total 1 50.14 70.12 75.18 70.11 68.80 86.65 61.65

(%) 2 46.92 72.00 76.69 69.55 68.47 86.92 59.92

3 48.16 73.79 75.97 69.13 69.10 86.36 60.73

Rata-rata 48.41 71.97 75.95 69.59 68.79 86.64 60.77

Standar Deviasi 1.62 1.83 0.76 0.49 0.31 0.28 0.86

Kadar protein 1 31.12 31.62 31.68 34.16 34.92 34.65 31.57

pakan 2 31.12 31.62 31.68 34.16 34.92 34.65 31.57

(% bobot kering) 3 31.12 31.62 31.68 34.16 34.92 34.65 31.57

Rata-rata 31.12 31.62 31.68 34.16 34.92 34.65 31.57

Standar Deviasi 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00

Kadar protein 1 16.24 17.22 12.12 21.93 21.85 17.88 20.95

feses 2 14.10 18.31 13.76 20.02 20.56 18.96 19.22

(% bobot kering) 3 15.26 19.45 12.90 18.09 22.88 16.76 19.87

Rata-rata 15.20 18.33 12.93 20.01 21.76 17.87 20.01

Standar Deviasi 1.07 1.12 0.82 1.92 1.16 1.10 0.87

Kecernaan protein 1 73.98 83.73 90.50 80.81 80.48 93.11 74.55

(%) 2 75.95 83.79 89.88 82.15 81.44 92.84 75.59

3 74.58 83.88 90.21 83.65 79.75 93.40 75.28

Rata-rata 74.84 83.80 90.20 82.20 80.56 93.12 75.14

Standar Deviasi 1.01 0.08 0.31 1.42 0.85 0.28 0.54

lxxix

Lampiran 14. Perhitungan jumlah konsumsi pakan, efisiensi pakan, laju pertumbuhan spesifik (LPS) dan kelangsungan hidup ikan nila

Parameter

U Perlakuan

A B C D E F G Bobot Ikan Awal (g) 1 40.05 40.25 40.56 40.37 40.97 40.76 40.53

2 41.27 41.20 41.57 41.35 41.65 41.87 41.78

3 40.85 40.72 40.55 40.01 40.61 40.34 40.66

Rata-rata 40.72 40.72 40.89 40.58 41.08 40.99 40.99

Standar Deviasi 0.62 0.48 0.59 0.69 0.53 0.79 0.69

Bobot ikan akhir (g) 1 143.50 212.67 198.90 249.70 209.01 276.40 169.90

2 164.93 194.30 216.20 296.60 271.10 225.18 182.65

3 170.30 208.00 192.20 204.00 219.33 220.90 189.71

Rata-rata 159.58 204.99 202.43 250.10 233.15 240.83 180.75

Standar Deviasi 14.18 9.55 12.38 46.30 33.27 30.88 10.04

Jumlah Ikan Akhir 1 10 9 10 10 10 10 10

(jumlah awal 10 ekor 2 9 10 10 10 10 9 10

Per akuarium) 3 10 10 10 10 9 10 10

Bobot ikan mati (g) 1 0.00 23.63 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00

2 18.33 0.00 0.00 0.00 0.00 25.02 0.00

3 0.00 0.00 0.00 0.00 24.37 0.00 0.00

Konsumsi Pakan (g) 1 136.96 245.10 204.86 253.11 201.36 276.47 171.71

2 186.59 185.06 212.46 298.55 272.12 259.23 176.63

3 162.92 196.06 190.34 184.01 252.16 235.89 202.98

Rata-rata 162.16 208.74 202.55 245.22 241.88 257.20 183.77

Standar Deviasi 24.82 31.97 11.24 57.68 36.48 20.37 16.81

Efisiensi Pakan (%) 1 75.53 79.99 77.29 82.70 83.45 85.23 75.34

2 72.77 82.73 82.19 85.50 84.32 80.36 79.75

3 79.46 85.32 79.67 89.12 80.54 76.54 73.43

Rata-rata 75.92 82.68 79.72 85.77 82.77 80.71 76.18

Standar Deviasi 3.36 2.67 2.45 3.22 1.98 4.35 3.24

LPS (%) 1 2.13 2.95 2.65 3.04 2.72 3.19 2.39

2 2.48 2.58 2.75 3.28 3.12 2.98 2.46

3 2.38 2.72 2.59 2.71 2.99 2.83 2.57

Rata-rata 2.33 2.75 2.66 3.01 2.94 3.00 2.47

Standar Deviasi 0.18 0.18 0.08 0.29 0.21 0.18 0.09

Kelangsungan 1 100.0 90.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0

Hidup (%) 2 90.0 100.0 100.0 100.0 100.0 90.0 100.0

3 100.0 100.0 100.0 100.0 90.0 100.0 100.0

Rata-rata 96.7 96.7 100.0 100.0 96.7 96.7 100.0

Standar Deviasi 5.8 5.8 0.0 0.0 5.8 5.8 0.0

lxxx

Lampiran 15. Perhitungan retensi protein Parameter

U Perlakuan

A B C D E F GBobot Ikan Awal (g) 1 40.05 40.25 40.56 40.37 40.97 40.76 40.53

2 41.27 41.20 41.57 41.35 41.65 41.87 41.78

3 40.85 40.72 40.55 40.01 40.61 40.34 40.66

Kadar protein ikan 1 10.94 10.94 10.94 10.94 10.94 10.94 10.94

awal (% bobot basah) 2 10.94 10.94 10.94 10.94 10.94 10.94 10.94

3 10.94 10.94 10.94 10.94 10.94 10.94 10.94

Protein tubuh 1 82.19 79.99 82.73 79.67 85.32 77.29 84.32

ikan awal (g) 2 75.53 80.54 85.23 72.77 80.36 76.54 82.70

3 78.77 85.50 89.12 75.34 74.65 76.20 73.43

Bobot ikan akhir (g) 1 143.50 212.67 198.90 249.70 209.01 276.40 169.90

2 164.93 194.30 216.20 296.60 271.10 225.18 182.65

3 170.30 208.00 192.20 204.00 219.33 220.90 189.71

Kadar protein ikan akhir (% bobot basah)

1 15.01 15.69 15.85 15.24 15.45 15.52 15.52

2 15.01 15.69 15.85 15.24 15.45 15.52 15.52

3 15.01 15.69 15.85 15.24 15.45 15.52 15.52

Protein tubuh ikan 1 21.54 33.37 31.53 38.05 32.29 42.90 26.37

hidup akhir (g) 2 23.82 30.49 34.27 45.20 41.88 34.95 28.35

3 25.56 32.64 30.46 31.09 33.89 34.28 29.44

Bobot ikan mati (g) 1 0.00 23.63 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00

2 18.33 0.00 0.00 0.00 0.00 25.02 0.00

3 0.00 0.00 0.00 0.00 24.37 0.00 0.00

Protein tubuh ikan 1 0.00 3.71 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00

mati (g) 2 2.75 0.00 0.00 0.00 0.00 3.88 0.00

3 0.00 0.00 0.00 0.00 3.77 0.00 0.00

Deposit protein 1 17.16 32.67 27.09 33.64 27.81 38.44 21.9345

tubuh (g) 2 22.06 25.98 29.72 40.68 37.33 34.25 23.7765

3 21.09 28.18 26.03 26.71 33.21 29.87 24.9948

Konsumsi pakan (g) 1 136.96 245.10 204.86 253.11 201.36 276.47 171.71

2 186.59 185.06 212.46 298.55 272.12 259.23 176.63

3 162.92 196.06 190.34 184.01 252.16 235.89 202.98

Kadar protein pakan 1 28.00 28.00 28.10 31.00 31.10 31.10 28.30

(% bobot basah) 2 28.00 28.00 28.10 31.00 31.10 31.10 28.30

3 28.00 28.00 28.10 31.00 31.10 31.10 28.30

Protein dikonsumsi 1 38.35 68.63 57.57 78.46 62.62 85.98 48.59

(g) 2 52.25 51.82 59.70 92.55 84.63 80.62 49.99

3 45.62 54.90 53.49 57.04 78.42 73.36 57.44

Retensi Protein (%) 1 44.74 47.61 47.06 42.87 44.41 44.70 45.14

2 42.22 50.14 49.78 43.95 44.11 42.48 47.57

3 46.24 51.33 48.66 46.83 42.35 40.72 43.51

Rata-rata 44.40 49.69 48.50 44.55 43.62 42.64 45.41

Standar Deviasi 2.03 1.90 1.37 2.05 1.11 2.00 2.04

lxxxi

Lampiran 16. Analisis ragam dan uji Duncan laju pertumbuhan spesifik ikan nila selama pemeliharaan.

Analisis Ragam SK dB JK KT F hitung F tabel 5% (6 , 14) Perlakuan 6 1.29 0.21 6.29 2.848 Galat 14 0.48 0.03 Total 20 1.76

Uji Duncan Perlakuan Rata2 Selisih Antara Rata-rata Perlakuan

2p 3p 4p 5p 6p 7p D (c) 3.01 F (c) 3.00 0.01 E (c) 2.94 0.06 0.07 B (bc) 2.75 0.19 0.25 0.26 C (abc) 2.66 0.09 0.28 0.34 0.35 G (ab) 2.47 0.19 0.28 0.47 0.53 0.54 A (a) 2.33 0.14 0.33 0.42 0.61 0.67 0.68r (0,05; p; 14) 3.03 3.18 3.27 3.33 3.37 3.39 Rp = r √ (KTG/r) 0.32 0.34 0.35 0.35 0.36 0.36

Lampiran 17. Analisis ragam dan uji Duncan jumlah konsumsi pakan ikan nila

selama pemeliharaan Analisis Ragam

SK dB JK KT F hitung F tabel 5% (6 , 14)

Perlakuan 6 22129.34 3688.22 3.63 2.848 Galat 14 14238.67 1017.05 Total 20 36368.01

Uji Duncan Perlakuan Rata2 Selisih Antara Rata-rata Perlakuan

2p 3p 4p 5p 6p 7pF (c) 257.20 D (c) 245.22 11.97E (bc) 241.88 3.34 15.32B (abc) 208.74 33.14 36.48 48.46C (abc) 202.55 6.19 39.33 42.67 54.64G (ab) 183.77 18.78 24.97 58.11 61.45 73.42 A (a) 162.16 21.62 40.40 46.58 79.72 83.07 95.04

r (0,05; p; 14) 3.03 3.18 3.27 3.33 3.37 3.39Rp = r √ (KTG/r) 55.79 58.55 60.21 61.31 62.05 62.42

lxxxii

Lampiran 18. Analisis ragam dan uji Duncan kecernaan total pakan ikan nila selama pemeliharaan

Analisis Ragam

SK dB JK KT F hitung F tabel 5% (6 , 14)

Perlakuan 6 2581.51 430.25 389.16 2.848 Galat 14 15.48 1.11 Total 20 2596.98

Uji Duncan Perlakuan Rata2 Selisih Antara Rata-rata Perlakuan

2p 3p 4p 5p 6p 7pF (f) 86.64 C (e) 75.95 10.69B (d) 71.97 3.98 14.67D (c) 69.59 2.37 6.35 17.05E (c) 68.79 0.80 3.18 7.15 17.85G (b) 60.77 8.03 8.83 11.20 15.18 25.88 A (a) 48.41 12.36 20.39 21.19 23.56 27.54 38.24r (0,05; p; 14) 3.03 3.18 3.27 3.33 3.37 3.39Rp = r √ (KTG/r) 1.84 1.93 1.99 2.02 2.05 2.06

Lampiran 19. Analisis ragam dan uji Duncan kecernaan protein pakan ikan nila

selama pemeliharaan Analisis Ragam

SK dB JK KT F hitung

F tabel 5% (6 , 14)

Perlakuan 6 868.99 144.83 239.66 2.848 Galat 14 8.46 0.60 Total 20 877.45

Uji Duncan Perlakuan Rata2 Selisih Antara Rata-rata Perlakuan

2p 3p 4p 5p 6p 7pF (f) 93.12 C (e) 90.20 2.92B (d) 83.80 6.40 9.32D (c) 82.20 1.59 7.99 10.91E (b) 80.56 1.65 3.24 9.64 12.56G (a) 75.14 5.41 7.06 8.66 15.06 17.98 A (a) 74.84 0.31 5.72 7.37 8.96 15.36 18.28r (0,05; p; 14) 3.03 3.18 3.27 3.33 3.37 3.39Rp = r √ (KTG/r) 1.36 1.43 1.47 1.49 1.51 1.52

lxxxiii

Lampiran 20. Analisis ragam dan uji Duncan efisiensi pakan ikan nila selama pemeliharaan

Analisis Ragam

SK dB JK KT F hitung F tabel 5% (6 , 14)

Perlakuan 6 234.126 39.02 4.01 2.848 Galat 14 136.325 9.74 Total 20 370.450

Uji Duncan Perlakuan Rata2 Selisih Antara Rata-rata Perlakuan

2p 3p 4p 5p 6p 7p D (c) 85.77 E (bc) 82.77 3.00 B (bc) 82.68 0.09 3.09 F (abc) 80.71 1.97 2.06 5.06 C (ab) 79.72 0.99 2.96 3.05 6.05 G (a) 76.18 3.54 4.54 6.50 6.59 9.60 A (a) 75.92 0.26 3.80 4.79 6.76 6.85 9.85 r (0,05; p; 14) 3.03 3.18 3.27 3.33 3.37 3.39 Rp = r √ (KTG/r) 5.46 5.73 5.89 6.00 6.07 6.11

Lampiran 21. Analisis ragam dan uji Duncan retensi pakan ikan nila selama

pemeliharaan Analisis Ragam

SK dB JK KT F hitung F tabel 5% (6 , 14)

Perlakuan 6 121.25 20.21 6.10 2.848 Galat 14 46.38 3.31 Total 20 167.63

Uji Duncan Perlakuan Rata2 Selisih Antara Rata-rata Perlakuan

2p 3p 4p 5p 6p 7pB (c) 49.69 C (bc) 48.50 1.19G (ab) 45.41 3.09 4.29D (a) 44.55 0.86 3.95 5.14A (a) 44.40 0.15 1.00 4.10 5.29E (a) 43.62 0.78 0.93 1.78 4.88 6.07 F (a) 42.64 0.99 1.77 1.92 2.77 5.87 7.06r (0,05; p; 14) 3.03 3.18 3.27 3.33 3.37 3.39Rp = r √ (KTG/r) 3.18 3.34 3.44 3.50 3.54 3.56

lxxxiv

Lampiran 22. Analisis ragam dan uji Duncan tingkat kelangsungan hidup ikan nila selama pemeliharaan

Analisis Ragam

SK dB JK KT F hitung F tabel 5% (6 , 14)

Perlakuan 6 57.14 9.52 0.50 2.848 Galat 14 266.67 19.05 Total 20 323.81

Lampiran 23. Kualitas air media pemeliharaan ikan nila selama penelitian

No

Parameter Kisaran

1 pH 7 2 DO 5.5-6.5 3 Alkalinitas 80-100 4 Kesadahan 58-71 5 NH3 0.02 6 NO2