PENGARUH DUA MACAM MEDIA DAN KOMPOSISI SUKROSA,

PROLINE, KASEIN HIDROLISAT (CH) TERHADAP PERTUMBUHAN

EMBRIOGENESIS APEL (Malus sylvestris Mill) SECARA IN VITRO

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan

Mencapai Derajat Sarjana S1

Jurusan Agronomi

Diajukan Oleh:

POVAREZZA ARYANADA

Nim. 201410200311156

JURUSAN AGRONOMI

PROGAM STUDI AGROTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN PETERNAKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

MALANG

2018

ii

HALAMAN PENGESAHAN

NAMA : POVAREZZA ARYANADA

NIM : 201410200311156

PROGRAM STUDI : AGROTEKNOLOGI

JURUSAN : AGRONOMI

FAKULTAS :PERTANIAN PETERNAKAN UNIVERSITAS

MUHAMMADIYAH MALANG

JUDUL SKRIPSI :PENGARUH DUA MACAM MEDIA DAN KOMPOSISI

SUKROSA, PROLINE, KASEIN HIDROLISAT (CH)

TERHADAP PERTUMBUHAN EMBRIOGENESIS APEL

(Malus sylvestris Mill) SECARA IN VITRO

Skripsi ini telah diterima sebagai persyaratan untuk memperoleh gelar Sarjana

Pertanian pada Program Studi Agroteknologi Jurusan Agronomi Fakultas

Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang.

Mengesahkan,

Dekan, Ketua Jurusan,

Dr. Ir. David Hermawan, MP.

NIP. 196405261990031003

Dr. Ir. Ali Ikhwan, MP.

NIP. 196410201991011001

iii

SKRIPSI

PENGARUH DUA MACAM MEDIA DAN KOMPOSISI SUKROSA,

PROLINE, KASEIN HIDROLISAT (CH) TERHADAP PERTUMBUHAN

EMBRIOGENESIS APEL (Malus sylvestris Mill) SECARA IN VITRO

Dipersiapkan dan disusun oleh:

Povarezza Aryanada

(NIM. 201410200311156)

Telah dipertahankan di depan Dewan Penguji

Pada tanggal 24 Oktober 2018

Susunan Dewan Penguji Ketua Dewan Penguji/

Pembimbing Utama,

Dr. Ir. Fatimah Nursandi, M.Si

NIP. 196601291991032004

Anggota Dewan Penguji II,

Dr. Ir. Ali Ikhwan, MP.

NIP. 196410201991011001

Anggota Dewan Penguji I/

Pembimbing Pendamping,

Dr. Ir. Maftuchah, MP.

NIP. 19680312 199212 1002

Anggota Dewan Penguji III,

Ir. Sufianto, MM

NIP.196208171989021001

Skripsi ini telah diterima sebagai salah satu persyaratan

Untuk memperoleh gelar Sarjana Pertanian

Jurusan Agronomi Fakultas Pertanian Peternakan

Universitas Muhammadiyah Malang

Malang, 24 Oktober 2018

Dekan,

Dr. Ir. David Hermawan, MP. NIP. 196405261990031003

Ketua Jurusan,

Dr. Ir. Ali Ikhwan, MP.

NIP. 196410201991011001

iv

SURAT PERNYATAAN

Saya yang bertanda tangan dibawah ini :

NAMA : POVAREZZA ARYANADA

NIM : 201410200311156

JURUSAN/PRODI : AGRONOMI/AGROTEKNOLOGI

FAKULTAS : PERTANIAN PETERNAKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

Menyatakan bahwa Karya Ilmiah yang berjudul “Pengaruh Dua Macam

Media Dan Komposisi Sukrosa, Proline, Kasein Hidrolisat (CH) Terhadap

Pertumbuhan Embriogenesis Apel (Malus sylvestris Mill) Secara In Vitro ”

merupakan bagian dari program penelitian berjudul “Induksi Embrio Somatic

Beberapa Varietas Apel Pada Media Dengan Komposisi Asam Amino Yang

Berbeda” tahun 2017 dibawah tanggung jawab Dr. Ir. Fatimah Nursandi, M.Si. oleh

sebab itu bentuk kekayaan intelektual dan publikasi ilmiah baik seluruh atau sebagian

dari hasil penelitian tersebut menjadi hak dan harus sepengetahuan, persetujuan serta

keterlibatan Ibu Dr. Ir. Fatimah Nursandi, M.Si.

Demikian pernyataan ini saya buat dengan sebenar-benarnya dan apabila

pernyataan ini tidak benar maka saya bersedia mendapatkan sanksi akademik.

Malang, 24 Oktober 2018

Mengetahui,

Ketua Peneliti / Pembimbing Utama Yang menyatakan,

Dr. Ir. Fatimah Nursandi, M.Si Povarezza Aryanada

NIP. 196601291991032004 NIM. 201410200311156

Mengetahui :

Ketua Jurusan / Prodi

Agroteknologi FPP UMM

Dr. Ir. Ali Ikhwan, MP.

NIP. 196410201991011001

v

MOTTO

“….Sukses merupakan salah satu tujuan hidup seseorang tidak

ada yang menginginkan bahwa seseorang tidak sukses, karena sukses

adalah salah satu bagian dan hak masing-masing kehidupan seseorang.

Untuk menuju kesuksesan pasti memerlukan perjalanan yang penuh

dengan rintangan, maka dari itu rintangan demi rintangan tetap harus

dilewati karena hal ini yang akan menghantarkan menuju kesuksesan

begitu pula disertai rasa ikhlash dan penuh kesabaran. Sesungguhnya

kesabaran akan membuatmu mengerti bagaimana cara mensyukuri arti

sebuah keberhasilan….”

“….Dan hendaklah ada di antara kamu segolongan umat yang

menyeru kepada kebajikan, menyuruh kepada yang ma’ruf dan

mencegah dari yang munkar; merekalah orang-orang yang

beruntung….”( QS-Ali Imron-104)

“….Maka berikanlah kepada Kerabat yang terdekat akan haknya,

demikian (pula) kepada fakir miskin dan orang-orang yang dalam

perjalanan[1171]. Itulah yang lebih baik bagi orang-orang yang

mencari keridhaan Allah; dan mereka Itulah orang-orang

beruntung….”(QS-Arrum-38)

Setiap Insan pasti mendambakan kesuksesan dalam hidupnya,

sukses dalam pekerjaan, sukses dibidang akademis, sukses dalam

percintaan. Kita juga sebagai orang yang menganut agama tentunya ingin

sukses baik dikehidupan dunia maupun akhirat sebagaimana

digambarkan dalam doa kita robbana atina fiddunya hasanah wa fil

akhirah hasana waqina azabannar.

vi

PERSEMBAHAN

Skripsi ini saya persembahkan :

Yang utama dari segala sembah sujud serta syukur kepada Allah SWT.

Taburan cinta dan kasih sayangmu memberikan kekuatan, membekaliku

dengan ilmu dan atas karuniaserta kemudahan yang engkau berikan akhirnya

skripsi ini dapat terselesaikan. Sholawat dan salam selalu terlimpahkan

kekhariban Rosullulah Muhammad SAW.

Kepada Ayahanda Slamet Kusbiantoro dan Ibunda Tina Wati telah

memberikan doa, dukungan dan kasih sayang. Orang tua terbaik didunia dan

yang paling saya banggakan, yang sudah mensupport dari segala hal yang

positif, memotivasi, menasehati, mendidikku hingga sampai saat ini.

Kepada “Kakek dan Nenek” yang aku sayangi terimakasih atas kasih saying

yang telah diberikan kepadaku selama ini dan mendoakan setiap waktunya

untuk perjalanan hidupku.

Sebagai rasa hormat dan ucapan terima kasih kepada Bu Fatimah Nursandi,

Pak Untung Santoso, Bu Maftuchah, Pak Ali Ikhwan, Pak Sufianto dan

segenap dosen-dosen Agronomi yang telah membimbing serta memberikan

ilmu pengetahuan yang bermanfaat dengan keikhlasan dan kesabaran.

Kepada mas Arif dan teman-teman Praktek Kerja Lapang dari Bondowoso

yang sudah meluangkan waktunya membantu dalam penelitian di

Laboratorium Mitra Anggrek Indonesia.

vii

Sebagai rasa terimakasih dan rasa hormat kepada ibu Prapti yang sudah

membantu dalam penelitian yaitu uji Histologi dari Laboratorium Fakultas

Biologi Universitas Gajah Mada Yogyakarta

Teruntuk kepada team Apel yang sudah bekerjasama sampai titik akhir

penelitian dan mengorbankan waktu demi skripsi jenjang S1.

Teruntuk sahabat-sahabat yang telah setia menemani, memotivasi, menghibur

dan belajar bersama yaitu teman-teman Agroteknologi angkatan 2014. Rekan

dan kawan yang setia membantu penelitian hingga selesai. Terimakasih,

hanya Allah yang bisa mengganti kebaikan kalian dengan kebaikan yang

berlipat-lipat dan semoga barokah Amin.

Teruntuk kepada teman teman musik di kampus dan komunitas musik malang

yang selalu menjadi ruang untuk meluapkan segala rasa dan hal yang

membuatku gembira.

“....Nothing in the world is impossible, during we are able to and try,

trust all will walk well and you will find success in your life....”

“….Do not be afraid to fail!!

“…Do not fear loss!!

“....And Start From Now For Your Life...”

viii

RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan pada tanggal 26 Desember 1995, sebagai

putra pertama. Ayahanda bernama Slamet Kusbiantoro dan

Ibunda bernama Tina Wati. Penulis menyelesaikan

pendidikan Sekolah Dasar di SDN Ngunut VI Kota

Tulungagung pada tahun 2008, kemudian melanjutkan ke

jenjang Sekolah Menengah Pertama di SMP Negeri 1

Sumbergempol Kota Tulungagung lulus pada tahun 2011, dan melanjutkan ke

jenjang Sekolah Menengah Atas di SMA Negeri 1 Ngunut Kota Tulungagung lulus

pada tahun 2014.

Penulis melanjutkan pendidikan di Program Studi Agroteknologi, Jurusan

Agronomi, Fakultas Pertanian Peternakan, Universitas Muhammadiyah Malang pada

tahun 2014. Semasa perkuliahan penulis aktif dalam Organisasi Musik yaitu

IKABAMA Universitas Muhammadiyah Malang pada tahun 2014/2015 dan aktif

sebagai Asisten Laboratorium Agroteknologi Universitas Muhammadiyah Malang

dimulai tahun 2015 sampai 2017 selama 5 semester atau 5 periode. Penulis juga aktif

sebagai organisasi progam jurusan Agroteknologi yaitu kelompok study Hortikultura

menjabat sebagai ketua umum pada tahun 2016/2017.

ix

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Warahmatullohi Wabarakatuh

Syukur Alhamdulillah penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas limpahan

rahmat dan hidayahNya, sehingga penulis mampu menyelesaikan laporan penelitian

dengan judul “Pengaruh Dua Macam Media Dan Komposisi Sukrosa, Proline,

Kasein Hidrolisat (CH) Terhadap Pertumbuhan Embriogenesis Apel (Malus

sylvestris Mill) Secara In Vitro”. Laporan penelitian ini merupakan salah satu

persyaratan untuk menyelesaikan pendidikan tingkat Sarjana pada Jurusan Agronomi,

Fakultas Pertanian Peternakan Universitas Muhammadiyah Malang.

Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih atas segala

bantuan baik berupa tenaga dan pikiran, kepada yang terhormat :

1. Dr. Ir. Fatimah Nursandi,MSi. Sebagai pembimbing utama yang telah bersedia

membimbing dengan sabar dan mengarahkan selama penyusunan skripsi ini

hingga selesai.

2. Dr. Ir. Maftuchah, MP sebagai pembimbing pendamping yang telah banyak

membantu penulis dan dengan sabar membimbing dan mendampingi pada proses

penyusunan skripsi ini hingga selesai.

3. Dr. Ir. Untung Santoso, MSi, Dr. Ir. Ali Ikhwan, MP, dan Ir. Sufianto, MM yang

telah memberikan bimbingan selama pelaksanaan penelitian hingga selesai.

4. Kedua orang tua yang selalu memberi kasih sayang dan doa setiap waktu.

5. Teman-teman Agronomi angkatan 2014 yang selama ini membantu dalam

pelaksanaan penelitian ini hingga selesai.

Akhir kata, penulis menyadari bahwa laporan penelitian ini masih jauh dari

kesempurnaan. Penulis mengharapkan adanya kritik dan saran yang bersifat

membangun demi sempurnanya penulisan skripsi ini. Semoga bermanfaat.

Wasalamu’alaikum Warahmatullohi Wabarakatuh

Malang, 24 Oktober 2018

Penulis

x

DAFTAR ISI

Teks Hal

KATA PENGANTAR ......................................................................................... ix

DAFTAR ISI ........................................................................................................ x

DAFTAR TABEL ............................................................................................... xii

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xiii

DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xiv

ABSTRAK ........................................................................................................... xv

I. PENDAHULUAN ............................................................................................ 1

1.1 Latar Belakang ............................................................................................ 1

1.2 Rumusan Masalah ....................................................................................... 3

1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................................ 3

1.4 Hipotesis ...................................................................................................... 3

II. TINJAUAN PUSTAKA ................................................................................. 4

2.1 Tanaman Apel ............................................................................................. 4

2.2 Embriogenesis Somatik ............................................................................... 5

2.3 Kultur Jaringan ............................................................................................ 8

2.4 Media .......................................................................................................... 9

2.5 Asam Amino ............................................................................................... 12

2.5.1 Kasein Hidrolisat .................................................................................. 12

2.5.2 Asam Amino Prolin ............................................................................. 14

2.6 Sukrosa ........................................................................................................ 15

III. BAHAN DAN METODE ............................................................................. 18

3.1 Tempat dan Waktu Pelaksanaan ................................................................. 18

3.2 Alat dan Bahan ............................................................................................ 18

3.2.1 Alat ....................................................................................................... 18

3.2.2 Bahan ................................................................................................... 18

3.3 Rancangan Penelitian .................................................................................. 18

xi

3.4 Pelaksanaan Penelitian ................................................................................ 21

3.4.1 Pembuatan Larutan Stok Media MS .................................................... 21

3.4.2 Pembuatan Media Murashige dan Skoog (MS) ................................... 22

3.4.3 Persiapan dan Sterilisasi Bahan Tanam ............................................... 23

3.4.4 Penanaman Biji Apel............................................................................ 24

3.4.5 Sub Kultur Kalus .................................................................................. 24

3.4.6 Pemberian Perlakuan ............................................................................ 24

3.4.7 Regenerasi Kalus Embriogenik ............................................................ 25

3.4.8 Pengamatan Analisis Histologi dan SEM ............................................ 25

3.5 Variabel Pengamatan .................................................................................. 26

3.6 Analisis dan Penyajian Data ....................................................................... 28

BAB IV ................................................................................................................. 29

HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................................... 29

4.1 Hasil ............................................................................................................ 29

4.1.1 Panjang Kalus ...................................................................................... 29

4.1.2 Lebar Kalus .......................................................................................... 30

4.1.3 Bobot Segar Kalus Apel (Malus sylvestris Mill) ................................. 33

4.1.4 Bobot Segar Kalus 1 MST ................................................................... 34

4.1.5 Berat Kering Kalus ............................................................................... 35

4.1.6 Tekstur Kalus Kompak (Non Friable) Dan Remah (Friable)............... 36

4.1.7 Kalus Embriogenik............................................................................... 37

4.1.9 Pengamatan Mikroskopis ..................................................................... 39

4.2 Pembahasan ................................................................................................. 46

V. KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................................... 55

5.1 Kesimpulan ................................................................................................. 55

5.2 Saran ............................................................................................................ 55

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 56

LAMPIRAN ......................................................................................................... 63

xii

DAFTAR TABEL

No Teks Hal

1. Rerata Panjang Kalus (cm) Apel (Malus sylvestris Mill) Umur 1 MST

Sampai Dengan 8 MST Pada Media dan Komposisi Sukrosa dan Asam

Amino ............................................................................................................... 31

2. Rerata Lebar Kalus (cm) Apel (Malus sylvestris Mill) Umur 1 MST

Sampai Dengan 8 MST Pada Media dan Komposisi Sukrosa dan Asam

Amino ............................................................................................................... 32

3. Uji Rata-rata Bobot Segar Kalus, Pertambahan Bobot Segar Kalus dan

Persentase Pertambahan Bobot Segar Kalus Apel (Malus sylvestris Mill)

Pada Media dan Komposisi Perlakuan Sukrosa dan Asam Amino .................. 34

4. Uji Rata-rata Bobot Segar Kalus Apel (Malus sylvestris Mill) Pada Media

dan Komposisi Sukrosa dan Asam Amino Umur 1 MST ................................ 35

5. Uji Rata-rata Berat Kering Kalus Apel (Malus sylvestris Mill) Pada Media

dan Komposisi Sukrosa dan Asam Amino Umur 8 MST ................................ 36

6. Uji Rata-rata Tekstur Kalus Kompak dan Remah Apel (Malus sylvestris

Mill) Pada Media Dan Komposisi Sukrosa dan Asam Amino Pada Umur

8 MST ............................................................................................................... 37

7. Uji Rata-rata Persentase Kalus Apel (Malus sylvestris Mill) Embriogenik

Pada Semua Komposisi Perlakuan Umur 8 MST ............................................ 38

xiii

DAFTAR GAMBAR

No Teks Hal

1 . Detail Dari Sektor Embriogenik Pada Kotiledon Dari Embrio Somatik ......... 6

2. Struktur Biji Apel (Greensleeves) ..................................................................... 7

3. In Vitro Pembentukan Tunas Adventif Kultivar Apel Co-Op 32 ..................... 8

4. Struktur Kimia Asam Amino ............................................................................ 12

5. Struktur Kimia Prolin ........................................................................................ 14

6. Struktur Kimia Sukrosa ..................................................................................... 15

7. Denah Percobaan Penelitian .............................................................................. 20

8. Diagram Alir Pembuatan Larutan Stok Media MS ........................................... 21

9. Diagram Alir Pembuatan Media Murashige & Skoog (MS). ........................... 22

10. Diagram Alir Persiapan Dan Sterilisasi Bahan Tanam. .................................. 23

11. Tekstur Kalus Apel. ........................................................................................ 37

12. Kalus Kompak Dan Remah Pengamatan Menggunakan Kamera DSLR. ...... 39

13. Kalus Kompak Dan Remah Pengamatan Menggunakan Kamera DSLR. ...... 40

14. Penampang Irisan Horizontal Kalus Umur 8 MST. ........................................ 42

15. Penampang Irisan Vertical Kalus Umur 8 MST. ............................................ 44

16. Penampang Irisan Horizontal Kalus Umur 8 MST ......................................... 48

17. Penampang Kalus Embriogenik. ..................................................................... 50

18. Pengamatan Menggunakan Mikroskop SEM.................................................. 52

19. Literatur Uji SEM Dan Histologi. ................................................................... 53

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

No Teks Hal

1. Analisis Ragam Panjang Kalus Apel (Malus sylvestris Mill) Umur 1-8

MST .................................................................................................................. 63

2. Analisis Ragam Lebar Kalus Apel (Malus sylvestris Mill) Umur 1-8 MST..... 63

3. Analisis Ragam Pertambahan Bobot Segar Kalus Apel (Malus sylvestris

Mill) Dari Umur 0 MST Sampai Dengan 8 MST ............................................ 64

4. Analisis Ragam Persentase Pertambahan Bobot Segar Kalus Apel (Malus

sylvestris Mill) dari umur 0 MST sampai dengan 8 MST ................................ 64

5. Analisis Ragam Berat Kering Kalus Apel (Malus sylvestris Mill) Umur 8

MST .................................................................................................................. 64

6. Analisis Ragam Bobot Basah Kalus Apel (Malus sylvestris Mill) Umur 1

MST .................................................................................................................. 65

7. Analisis Ragam Bobot Segar Kalus Apel (Malus sylvestris Mill) Umur 8

MST .................................................................................................................. 65

8. Analisis Ragam Tekstur Kalus Kompak Apel (Malus sylvestris Mill)

Umur 8 MST .................................................................................................... 66

9. Analisis Ragam Tekstur Kalus Remah Apel (Malus sylvestris Mill) Umur

8 MST ............................................................................................................... 66

10. Analisis Ragam Persentase Embriogenik Kalus Apel (Malus sylvestris

Mill) Umur 8 MST ........................................................................................... 66

11. Komposisi Media MS (Murasige Skoog) ....................................................... 67

12. Dokumentasi Kegiatan Penelitian ................................................................... 68

56

DAFTAR PUSTAKA

Aisyah D. N. 2017. Induksi Embrio Somatik Beberapa Varietas Apel Pada Media

Dengan Komposisi Asam Amino Yang Berbeda. Skripsi. Jurusan

Agroteknologi. Malang: Universitas Muhammadiyah Malang.

Alfian, F.N., Didik P.R., Sigit, S. 2015. Induksi Kalus Embriogenik Tanaman Tebu

(Saccharum Officinarum L.)Varietas NXI 1-3.Jurnal Pertanian. Jurusan

Agroteknologi , Fakultas Pertanian, Universitas Negeri Jember, Indonesia.

Almatseir, S. P. 2004. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Jakarta: PT Gramedia Pustaka

Umum.

Ardiansyah, A. 2016. Pengaruh Komposisi Zat Pengatur Tumbuh Thidiazuron dan

Napthalene Acetic Acid Terhadap Pertumbuhan Embrio Beberapa Kultivar

Apel (Mallus Sylvestris Mill). Skripsi. Jurusan Agroteknologi. Malang:

Universitas Muhammadiyah Malang.

Azizah A.K., Didik P.R., Bambang P.S. 2017. Peningkatan Efisiensi Regenerasi

Melalui Optimasi Media Induksi Kalus dengan 2,4-Dicholorophenoxyacetic

acid pada Padi Indica (Oryza sativa L. var. Ciherang). Jurnal Ilmu Dasar.

Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Univesitas

Jember. Fakultas Pertanian, Univesitas Jember. Vol.18 No. 2.

Bapat, V. A. And P. S. Rao. 1984. Regulatory factors for in vitro multiplication of

sandalwood tree (Santalum album L.). I. Shoot bud regeneration and somatic

embryogenesis in hypocotyl cultures. Proc. Indian Acad. Sci. (Plant Sci.) 93,

19-27 .

Baskara.,M. 2010. Pohon Apel Masih Berbuah Lebat. Malang: Fakultas Pertanian

Universitas Brawijaya.

Badan Pusat Statistik. 2006. Statistik Perdagangan Luar Negeri Ekspor-Impor.

Sumatera Utara: Badan Pusat Statistik .

Beyl B. 2000. Getting Started with Tissue Culture – Media Preparation, Sterile

Technique and laboratory Equipment. London: CRC Press.

Bieysse, D., A. 1993. Effect of experimental conditions and genotypic variability on

somatic embryogenesis in Coffea arabica. Can. J. Bot. 71, 1496-1502.

Bustaman. 2004. Pengaruh Konsentrasi NAA dan BAP Terhadap Kultur Embrio

Pinang Sirih (Areca catechu L.) Secara In Vitro. 7.

57

Cempaka A.,S. S. 2015. Pengaruh Metode Pengolahan (Juicing dan Blending)

Terhadap Kandungan Quercetin Berbagai Varietas Apel Lokal dan Impor. In

Indonesian Journal of Human Nutrition. Malang: Universiitas Brawijaya.

Devy, N.F.,Yulianti, F., H. 2012. Perbanyakan Massal Embrio Kalamondin Melalui

Teknologi Somatik Embriogenesis Menggunakan Bioreaktor. Balai Penelitian

Tanaman Jeruk dan Buah Subtropika. J.Hort 22(1):1-7

Dinas Pertanian. 2008. Laporan Pembibitan Buah-buahan. Lampung Timur: Dinas

Pertanian Tanaman Pangan dan Hortikultura.

DPTH. 2004. Pola Produksi Hortikultura. In Direktorat Jendral Bina Produksi

Hortikultura. Jakarta: Departemen Pertanian RI.

Druart, P. 1990. Improvement of somatic embryogenesis of the cherry dwarf rootstock

Inmil/GM9 by the use of different carbon sources. Acta Hort. 280, 125-129.

Ehsanpour, A. A. 2002. Induction of Somatic Embryogenesis from Endosperm of Oak

(Quercus castanifolia). In A. Taji and R. Williams (ed.) The Importance of

Plant Tissue Culture and Biotechnology in Plant Siences. Univ. of New

England Unit, Australia. pp 273-277.

Fasolo, F., R. H. Zimmerman, And I. Fordham. 1989. Adventitious shoot formation

on excised leaves of in vitro grown shoots of apple cultivars. Plant Cell, Tissue

and Org. Cult. 16, 75-87.

Fitriani, H. 2008. Kajian Konsentrasi BAP dan NAA terhadap Multiplikasi Tanaman

Artemisia annua L. secara In Vitro. Skripsi. Surakarta : Fakultas Pertanian

UNS.

George, E. F., M. A. Hall, dan G. J. de Klerk. 2008. Plant Propagation by Tissue

Culture. Dordrecht: The Netherland

Gunawan.,L. W. 1988. Teknik Kultur Jaringan. Bogor: Institut Pertanian Bogor.

Gunawan.,L. W. 1992. Teknik Kultur Jaringan Tanaman. Bogor: Pusat Antar

Universitas Bioteknologi Institut Pertanian Bogor.

H. Paul, M. B., B.S. Sangwan N. 1993. Somatic Embryogenesis in Apple.Plant.

Universite de Picardie-Jules Verne, Faculte des Sciences, Laboratoire

Androgenese et Biotechnologies, 33 rue Saint Leu, llot des Poulies, 80039

Amiens Cedex, France. PhysioL VoL 143. pp. 78-86.

Haensch, K.T. 2007. Influence of 2,4-D and BAP on callus growth and the

subsequent regeneration of somatic embryos in longterm cultures of

Pelargonium domesticum cv. Madame Layal. Elec. Jour. of Bio ech. : 69-77

58

Hendaryono, D.P.S dan A. Wijayani. 1994. Teknik Kultur Jaringan Pengenalan dan

Petunjuk Perbanyakan Tanaman Secara Vegetatif Moderen.Kanisius.

Yogyakarta.

Herwinaldo D.C. 2010. Pengaruh Variasi Konsentrasi Sukrosa Terhadap

Pertumbuhan Dan Induksi Embriogenesis Somatic Kultur Kalus Tapak Dara

(Catharanthus Roseus L) G. Don. In Skripsi. Surakarta: Universitas Sebelas

Maret.

Husin N.,M. J. 2014. Enhancement Of Regeneration Efficiency In Banana ( Musa

acuminata cv. Berangan) By Using Proline And Glutamine.168, 33-37.

Inayah T. 2015. Pengaruh Konsentrasi Sukrosa Pada Induksi Embrio Somatik Dua

Kultivar Kacang Tanah (Arachis hypogaea L.) Secara In Vitro. Jurnal

Agribisnis, Vol. 9, No. 1, Juni 2015, [ 61 - 70 ]

Irawan. 2007. Glukosa dan Metabolisme Energi. Sport Science Brief.

Irawati. 2000. Diferensiasi Berbagai Macam Eksplan pada Perbanyakan

Philodendron goeldii (Araceae) secara in-vitro. 5, 69-75.

Istiningdyah A., Y.T., M.U.B. 2013. Pengaruh Bap Dan Kasein Hidrolisat Terhadap

Pertumbuhan Tunas Melon (Cucumis melo L.) Secara In Vitro. Program Studi

Agribisnis Fakultas Pertanian Universitas Tadulako. e-J. Agrotekbis 1 (4) : 314-

322, Oktober 2013

Iraqi., T. 2001. Analysis of Carbohydrate Metabolism Enzymes and Cellular Contents

of Sugar and Protein during Spruce Somatic Embryogenesis Suggest a

Regulatory Role of Exogenous Sucrose in Embryo Development. In Journal of

Experimental Biology (pp. 52 (365) 2301-2311).

James, D. J., A. Passey, And D. C. Deeming. 1984. Adventitious embryogenesis and

the in vitro culture of apple seed parts. J. Plant Physiol. 115, 217- 229.

Jayasankar. 2001. Variation in tissue culture. In G. D. Di dalam: Trigiano RN, Plant

Development and Biotechnology (pp. 301-309). New York: CRC Press.

Karjadi dan Buchory. 2008. Pengaruh Komposisi Media Dasar, Penambahan BAP,

Dan Pikloram Terhadap Induksi Tunas Bawang Merah. J. Hort, 18, 1-9.

Kasim dan Sumaryono. 2008. Perkembangan Kalus Embriogenik Sagu (Metroxylon

sagu Rottb.) Pada Tiga Sistem Kultur In Vitro. Menara Perkebunan.

Kishor P.B.K, S. Sangam, & Naidu K.P. 1999. Sodium, Potassium, Sugar, alcohol

and proline mediated somatic embryogenesis and plant regeneration in

recalcitrant rice callus. Plant Tissue Cult. Biotech.

59

Khumaida, N., dan T. Handayani. 2010. Induksi dan Proliferasi Kalus Embriogenik

Pada Beberapa Genotipe Kedelai. Journal Agro Indonesia 38 (1) : 19-24

Lestari E.G. 2011. Peranan Zat Pengatur Tumbuh dalam Perbanyakan Tanaman

melalui Kultur Jaringan. Jurnal AgroBiogen. Balai Besar Penelitian dan

Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian. 7(1):63-68.

Leyser. 2002. Molecular Genetics Of Auxin Signaling. Annu rev Plant Biol.

Lru, J. R., K. C. SINK, And F. G. Dennis. 1983. Plant regeneration from apple

seedling explants and callus cultures. Plant Cell Tissue and Organ Culture. 2,

293-304.

Lizawati. 2012. Induksi Kalus Embriogenik Dari Eksplan Tunas Aplikasi Tanaman

Jarak Pagar (Jathropa curcas L) Dengan Penggunaan 2,4 D TDZ. Jurnal

Fakultas Pertanian Universitasjambi Vol. 1 No. 2 : 75-87

Lina D.E., Y., S.W. 2015. Pengaruh Konsentrasi Sukrosa Terhadap Biomassa Dan

Kadar Saponin Kalus Gingseng Jawa (Talinum paniculatum Gaertn.) Pada

Berbagai Waktu Kultur. In Skripsi. Departemen Biologi, Fakultas Sains dan

Teknologi, Universitas Airlangga.

Loganathan M, Maruthasalam S. Shiu L. Y, Lien WC, Hsu W. H, Lee P. F, Yu C. W,

Lin C. H,. 2010. Regeneration Of Soybean (Glycine max L. Merril) Trhough

Direct Somatic Embryogenesis From The Immature Embryonic Shoot Tip. in

vitro cell dev biol plant. 46:265-273

Manzila I., S.H., I.M., S.S. 2010. Induksi Kalus serta Regenerasi Tunas dan Akar

Cabai melalui Kultur In Vitro. Jurnal AgroBiogen. Balai Besar Penelitian dan

Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian. 6(2):65-74.

Mattjik dan Nurhayati. 2005. Peran Kultur Jaringan dalam Perbaikan Tanaman.

Malang: Universitas Negeri Malang.

Prakash S.,M. I. 2004. Culture Media and Containers. Proceedings of a Technical

Meeting organized by the Hoint FAO/IAEA Division of Nuclear Techniques in

Food and Agriculture and held in Vienna.

Podwyszynska, M., Iwona S., Aleksandra M., Dorota K., Barbara D. 2017. In vitro

tetraploid induction of Malus × domestica Borkh. using leaf or shoot explants.

Research Institute of Horticulture, Konstytucji 3 Maja, 96-100 Skierniewice,

Poland Scientia Horticulturae 226, 379–388

Puchooa.2004. Comparison of Different Culture Media for the In Vitro Culture of

Dendrobium (Orchidaceae). International Journal Of Agriculture & Biology.

Faculty of Agriculture, University of Mauritius Reduit, Mauritius

60

Purnamaningsih., I. 2005. Seleksi In Vitro Tanaman Padi Untuk Sifat Ketahanan

Terhadap Aluminium.Jurnal Bioteknologi Pertanian , 10, 61-69.

Rahmawati M., Sandra A., Diny D., Dodo R.S. (2004). Pengaruh BAP dan Sukrosa

Terhadap Jahe Empirit (Zingiber officinale Rosc var. amarum) Secara In Vitro.

Jurnal Agron. (32) (3) 37-43

Ruswaningsih, F. 2007. Pengaruh Konsentrasi Ammonium Nitrat dan BAP terhadap

Pertumbuhan Eksplan Pucuk Artemisia annua L. pada Kultur In Vitro. Skripsi.

Surakarta : Fakultas Pertanian UNS.

Rianawati. 2009. Embriogenesis Somatik dan Eksplan Daun Anggrek Phalaenopsis

sp L., Somatic Embryogenesis from Leaf Eksplant of Phalaeonopsis Orchids. 3,

240-248.

Riyadi, I. & Tirtoboma. 2004. Pengaruh 2,4-D terhadap Induksi Embrio Somatik

Kopi Arabika. Bogor : Buletin Plasma Nutfah, 10(2), 82-89.

Rosyidah, M., Evie, R., Dan Yuni, S.R. 2014. Induksi Kalus Daun Melati (Jasminum

sambac) dengan Penambahan Berbagai Konsentrasi Dichlorophenoxyacetic

Acid (2,4-D) dan 6-Benzylamino Purin (BAP) pada Media MS secara In Vitro.

Jurnal Biol gi. Vol 3(3). Hal : 147-153.

Saad, A. I.M. & Ahmed M. E. 2012. Recent Advances in Plant in vitro Culture.

Libya: Intech

Saeed, I., K., Z. 2007. Association of seed yield and some important morphological

traits in mungbean (Vigna radiata L)Wilczek). Pak. J. Bot. 39(7): 2361-2366

Prihatman. 2000. Budidaya Apel. www.warintek.ristek.go.id/pertanian/apel.pdf.

Diakses tanggal 21 Desember 2011.

Sari, N., Enni, S.R., S. 2014. Optimasi Jenis dan Konsentrasi ZPT dalam Induksi

Kalus Embriogenik dan Regenerasi menjadi Planlet pada Carica pubescens

(Lenne & K.Koch. Journal of Biology. Jurusan Biologi, FMIPA, Universitas

Negeri Semarang, Indonesia. 6 (1) (2014)

Sari., R.M. 2012. Pengaruh Berbagai Bagian Benih Sebagai Sumber Eksplan

Dengan Umur Kecambah Enam Hari Terhadap Induksi Embrio Somatik

Kacang Tanah ( Arachis hypogeae L). Skripsi .

Siregar., L.K., B.L. 2010. Pengaruh Kasein Hidrolisat dan Intensitas Cahaya

Terhadap Produksi Biomassa dan Alkaloid Canthinone di Dalam Kultur

Suspensi Sel Pasak Bumi (Eurycomalongifolia Jack). Makara Sains.

Soelarso B. 1997. Budi Daya Apel. Yogyakarta: KANISIUS.

61

Soelaiman, V dan A. Ernawati. 2013. Pertumbuhan dan Perkembangan Cabai

Keriting (Capsicum annuum) secara In Vitro pada Beberapa Konsentrasi BAP

dan IAA. Bul.Agrohorti. 1: 62-66.

Shubashini, K. & G.M. Reddy, 1991. Role of Proline in Callus Growth and Plant

Regeneration Under Salt Stress in Rice. Proc. Indian Naim. Sci. Acad. B57 (1):

81- 84

Santoso, U. & Nursandi, F. 2004. Kultur Jaringan Tanaman. Malang: Universitas

Muhammadiyah Malang Press.

Sujatno A., R.S. 2015. Studi Scanning Electron Microscopy (SEM) Untuk

Karakterisasi Proses Oxidasi Paduan Zirkonium. Jurnal Forum Nuklir (JFN),

9, 44-50.

Sumaryono M., M.,S. 2011. Peningkatan Laju Multiplikasi Tunas dan Keragaan

Planlet Stevia rebaudiana pada Kultur In Vitro. Bogor: Balai Penelitian

Bioteknologi Perkebunan.

Sumaryono, I., R.P.D.,Kasi dan G. Ginting. 2007. Pertumbuhan dan perkembangan

kalus embriogenik dan embrio somatik kelapa sawit (Elaeis guineensis Jacq.)

pada sistem perendaman sesaat. Menara Perkebunan 75 (1):32-42.

Sutjahjo., S. 2006. Daya Regenerasi Galur Jagung pada Beberapa Macam Suplemen

dalam Media Kultur in Vitro. 1-6.

Szabados, L. & Arnould S. 2009. Proline: a Multifunctional Amino Acid. Trends in

Plant Science 15 (2): 89-97

Svetla D. Yancheva., Sara G, Ervin F., Simcha L., Moshe A.F. 2003. Auxin type and

timing of application determine the activation of the developmental program

during in vitro organogenesis in apple. Plant Biotechnology Laboratory,

Agricultural University, 12 Mendeleev Street, 4000 Plovdiv, Bulgaria. Plant

Science 165, 299/309

Terzi,M., L. 1990. Somatic Embrygenesis. In S.S. Bhajwani (ed.) Plant Tissue

Culture: Applications and Limitations. Elsevier, Amsterdam, Oxford, New

York, Tokyo. p. 55-66.

Thadavong S.,P. S. 2004. Callus Induction And Plant Regeneration From Mature

Embryos Of Glutinos Rice (Oryza sativa L) Cultivar TDKI.Kasetart Journal

(Nat, Sci), 36, 334-344.

Trigiano., G. 2010. Development and Biotechnology Plant Tisuue Culture. Florida:

CRC Press.

62

Turhan, H. 2004. Callus Induction and Growth in Transgenic Potato Genotypes.

African Journal of Biotechnology, 3(8), 375-378.

Wardani, D.P.,Solichatun, Achmad D.S. 2004. Pertumbuhan dan Produksi Saponin

Kultur Kalus Talinum paniculatum Gaertn Pada Variasi Penambahan Asam

2,4 Doklorofenoksi Asetat dan Kinetin.Jurnal Biofarmasi, 1, 35-43.

Wardiyati T. 1998. Kultur Jaringan Tanaman Hortikultura. FP UB. Malang

Warintek. 2011. Apel (Malus sylvestris Mill).

http://www.warintek.ristek.go.id/pertanian/apel.pdf. [3 Oktober 2016].

Widiarso, M. 2010. Kajian Penggunaan BAP dan IBA untuk Merangsang

Pembentukan Tunas Lengkeng (Dimocarpus longan Lour) Varietas Pingpong

secara In Vitro. Skripsi. Surakarta : Fakultas Pertanian UNS.

Whetherell, D. F. 1982. Pengantar Propagasi Tanaman Secara In Vitro. United State

Of America. Avery Publishing Group, Inc.

Widyasmoro.,L. E. 2007. Profil Pertumbuhan Dan Kandungan Glikosida Jantung

Kalus Daun Kamboja Jepang (Adenium obseum (Forssk) Roe m & Schult.)

Dalam Woody Plant Medium Dengan Variasi Konsentrasi Asam 2,4 D dan 6-

Furfurylaminopurine. Skripsi .

Yuan F., Q.W. 2010. An Efficient Somatic Embryogenesis Based Plant Regeneration

From The Hypocotyl Of Catharanthus roseus.African Journal Of

Biotechnology, 10, 14786-14795.

Yusnita. 2003. Kultur jaringan: Cara Memperbanyak Tanaman Secara Efisien.

Jakarta: Agro Media Pustaka.

Zhang Y, Chautler S.E., Gupta S., Zhao Y., Hannah, L.C, Meyer C., Weston J., Wu

MX., Preiss J., dan Okita T.W. 1996. Molecular Approaches to Enhance Rice

Production Through Manipulation of Starch Metabolism During Seed

Development. Proc. Third Int’l Rice Gen. Symp:809-813