KORELASI PEMBERIAN BAWANG HITAM DENGAN KADAR …repository.ub.ac.id/167231/1/Salsabila Absari...

90
KORELASI PEMBERIAN BAWANG HITAM DENGAN KADAR TRIGLISERIDA PADA TIKUS PUTIH (Rattus Norvegicus strain wistar) JANTAN YANG DIBERI DIET TINGGI LEMAK DAN FRUKTOSA TUGAS AKHIR Untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Gizi Oleh : Salsabila Absari 145070300111008 PROGRAM STUDI SARJANA ILMU GIZI FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS BRAWIJAYA MALANG 2018

Transcript of KORELASI PEMBERIAN BAWANG HITAM DENGAN KADAR …repository.ub.ac.id/167231/1/Salsabila Absari...

KORELASI PEMBERIAN BAWANG HITAM DENGAN KADAR TRIGLISERIDA

PADA TIKUS PUTIH (Rattus Norvegicus strain wistar) JANTAN YANG

DIBERI DIET TINGGI LEMAK DAN FRUKTOSA

TUGAS AKHIR

Untuk Memenuhi Persyaratan

Memperoleh Gelar Sarjana Gizi

Oleh :

Salsabila Absari

145070300111008

PROGRAM STUDI SARJANA ILMU GIZI

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS BRAWIJAYA

MALANG

2018

DAFTAR ISI

Halaman

Judul .......................................................................................................................... i

Halaman Pengesahan ............................................... Error! Bookmark not defined.

Pernyataan Keaslian Tulisan ..................................... Error! Bookmark not defined.

Kata Pengantar .......................................................... Error! Bookmark not defined.

Abstrak .................................................................................................................... vii

Abstract ................................................................................................................... vii

Daftar Isi ................................................................................................................. viii

Daftar Gambar ......................................................................................................... xii

Daftar Tabel ............................................................................................................ xiii

Daftar Lampiran ..................................................................................................... xiiv

Daftar Singkatan ...................................................................................................... xv

Bab 1 PENDAHULUAN ............................................................................................ 1

1.1 Latar Belakang .................................................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah .............................................................................................. 4

1.3 Tujuan Penelitian ................................................................................................ 5

1.3.1 Tujuan Umum .................................................................................................. 5

1.3.2 Tujuan Khusus ................................................................................................. 5

1.4 Manfaat ................................................................ Error! Bookmark not defined.

1.4.1 Manfaat Bagi Akademik .................................... Error! Bookmark not defined.

1.4.2 Manfaat Praktis Untuk Masyarakat ................... Error! Bookmark not defined.

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA..................................... Error! Bookmark not defined.

2.1 Sindrom Metabolik ............................................... Error! Bookmark not defined.

2.1.1 Definisi ............................................................................................................. 7

2.1.2 Patogenesis ..................................................................................................... 9

2.1.2.1 Resistensi Insulin .......................................................................................... 9

2.1.2.2 Obesitas ..................................................................................................... 11

2.1.2.3 Hipertensi.................................................................................................... 12

2.2 Dislipidemia ......................................................... Error! Bookmark not defined.

2.2.1 Klasifikasi Dislipidemia ...................................... Error! Bookmark not defined.

2.3 Trigliserida ........................................................... Error! Bookmark not defined.

2.3.1 Definisi .............................................................. Error! Bookmark not defined.

2.3.2 Metabolisme Trigliserida ................................... Error! Bookmark not defined.

2.3.2.1 Jalur eksogen ................................................ Error! Bookmark not defined.

2.3.2.2 Jalur endogen ................................................ Error! Bookmark not defined.

2.3.3 Faktor – faktor yang mempengaruhi kadar TrigliseridaError! Bookmark not defined.

2.3.4 Diet tinggi lemak dan fruktosa ........................... Error! Bookmark not defined.

2.4 Bawang Hitam ..................................................... Error! Bookmark not defined.

2.4.1 Kandungan Bawang Hitam ............................... Error! Bookmark not defined.

2.4.2 Pengaruh Pemberian Bawang Hitam terhadap Kadar TrigliseridaError! Bookmark not defined.

BAB 3 KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESA PENELITIANError! Bookmark not defined.

3.1 Kerangka Konsep ................................................ Error! Bookmark not defined.

3.2 Penjelasan Kerangka Konsep Penelitian .......................................................... 26

3.3 Hipotesis .............................................................. Error! Bookmark not defined.

BAB 4 METODOLOGI PENELITIAN .......................... Error! Bookmark not defined.

4.1 Rancangan Penelitian .......................................... Error! Bookmark not defined.

4.2 Populasi dan Sampel ........................................... Error! Bookmark not defined.

4.2.1 Jumlah Sampel ................................................. Error! Bookmark not defined.

4.2.2 Prosedur Pengambilan Sampel ......................... Error! Bookmark not defined.

4.2.3 Kriteria Subjek .................................................. Error! Bookmark not defined.

4.3 Variabel Penelitian ............................................... Error! Bookmark not defined.

4.4 Lokasi dan waktu penelitian ................................. Error! Bookmark not defined.

4.4.1 Lokasi penelitian ............................................... Error! Bookmark not defined.

4.4.2 Waktu penelitian ............................................... Error! Bookmark not defined.

4.5 Bahan dan Alat/ Instrument Penelitian ................. Error! Bookmark not defined.

4.5.1 Bahan Penelitian ............................................... Error! Bookmark not defined.

4.5.2 Alat Penelitian ................................................... Error! Bookmark not defined.

4.6 Definisi Operasional ............................................. Error! Bookmark not defined.

4.7 Prosedur Penelitian dan Pengumpulan Data........ Error! Bookmark not defined.

4.7.1 Persiapan ......................................................... Error! Bookmark not defined.

4.7.1.1 Pengajuan Etik ............................................... Error! Bookmark not defined.

4.7.1.2 Persiapan Bahan ........................................... Error! Bookmark not defined.

4.7.2 Pelaksanaan ..................................................... Error! Bookmark not defined.

4.7.2.1 Pembelian Hewan Coba ................................ Error! Bookmark not defined.

4.7.2.2 Pembelian Bawang Hitam .............................. Error! Bookmark not defined.

4.7.2.3 Pembuatan Pakan dan Diet Tikus .................. Error! Bookmark not defined.

4.7.3 Induksi Diet dan Bawang Hitam ....................... Error! Bookmark not defined.

4.7.4 Pembedahan Tikus ........................................... Error! Bookmark not defined.

4.7.5 Langkah-langkah Pelaksanaan Penelitian ........ Error! Bookmark not defined.

4.7.6 Prosedur Pemberian Diet Tinggi Lemak dan FruktosaError! Bookmark not defined.

4.7.7 Prosedur Pemberian Bawang Hitam ................. Error! Bookmark not defined.

4.7.8 Prosedur Pengambilan Serum .......................... Error! Bookmark not defined.

4.7.9 Perlakuan terakhir pada Tikus........................... Error! Bookmark not defined.

4.7.10 Prosedur Pengukuran Kadar Trigliserida serumError! Bookmark not defined.

4.7.11 Pengumpulan Data ......................................... Error! Bookmark not defined.

4.8 Analisa Data ........................................................ Error! Bookmark not defined.

BAB 5 HASIL PENELITIAN DAN ANALISA DATA ..... Error! Bookmark not defined.

5.1 Karakteristik Sampel ............................................ Error! Bookmark not defined.

5.2 Asupan Pakan dan Zat Gizi Hewan Coba ............ Error! Bookmark not defined.

5.3 Kadar Trigliserida serum ...................................... Error! Bookmark not defined.

BAB 6 PEMBAHASAN ............................................... Error! Bookmark not defined.

6.1 Karakteristik Sampel ............................................ Error! Bookmark not defined.

6.2 Pengaruh Pemberian DTLF dan bawang hitam terhadap berat badan tikusError! Bookmark not defined.

6.3 Pengaruh Pemberian DTLF dan Bawang Hitam terhadap Kadar TrigliseridaError! Bookmark not defined.

6.4 Implikasi di Bidang Gizi ........................................ Error! Bookmark not defined.

6.5 Keterbatasan Penulis ........................................... Error! Bookmark not defined.

BAB 7 Kesimpulan dan Saran.................................... Error! Bookmark not defined.

7.1 Kesimpulan .......................................................... Error! Bookmark not defined.

7.2 Saran ................................................................... Error! Bookmark not defined.

DAFTAR PUSTAKA ................................................... Error! Bookmark not defined.

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 3.1 Kerangka Konsep................................................................................ 31

Gambar 5.1 Penambahan Berat Badan Hewan Coba ............................................. 43

Gambar 5.2 Rata – rata Asupan Energi Hewan Coba ............................................. 46

Gambar 5.3 Rata – rata Asupan Lemak Hewan Coba ............................................ 47

Gambar 5.4 Rata – rata Asupan Karbohidrat Hewan Coba ..................................... 47

Gambar 5.4 Rerata Kadar Trigliserida .................................................................... 49

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 2.1 Kriteria Sindrom Metabolik ........................................................................ 8

Tabel 2.2 Komposisi Pakan Tikus ......................................................................... 16

Tabel 2.3 Komposisi Pakan Tikus ........................................................................... 17

Tabel 2.4 Perbedaan kandungan dalam bawang hitam dan bawang putih ............. 18

Tabel 2.5 Kandungan SAC (µg/g) bawang hitam dipengaruhi oleh suhu dan lama

pemanasan ............................................................................................................. 19

Tabel 2.6 Kandungan poliphenol dan flavonoid pada bawang hitam selama

proses pemanasan dengan suhu 70o ...................................................................... 19

Tabel 4.1 Komposisi Diet Normal Persaji ............................................................... 27

Tabel 4.2 Kandungan Gizi Diet Normal Persaji (40 gram) ....................................... 27

Tabel 5.1 Karakteristik Sampel ............................................................................... 42

Tabel 5.2 Rata – rata Berat Badan Tikus Selama Penelitian ................................... 43

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Teknik Randomisasi Sampel ........................................................ 77

Lampiran 2. Diagram Alur Pembuatan Diet Normal PARS ............................... 79

Lampiran 3. Diagram Alur Pembuatan Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa .......... 80

Lampiran 4. Diagram Alur Persiapan Bawang Hitam ....................................... 81

Lampiran 5. Bahan Pembuatan Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa .................... 82

Lampiran 6. Bahan-Bahan Pembuatan Bawang Hitam .................................... 83

Lampiran 7. Dokumentasi Kegiatan Selama Penelitian .................................... 84

Lampiran 8. Hasil Penimbangan Berat Badan Tikus Selama Penelitian ........... 87

Lampiran 9. Asupan Pakan Tikus Selama Penelitian ....................................... 88

Lampiran 10. Prosedur Pembedahan Tikus ..................................................... 94

Lampiran 11. Hasil Analisis Statistik Berat Badan ............................................ 95

Lampiran 12. Hasil Analisis Statistik Asupan Pakan PARS .............................. 96

Lampiran 13. Hasil Analisis Statistik Asupan Pakan DTLF ............................. 100

Lampiran 14. Hasil Analisis Statistik Kadar MDA ........................................... 104

Lampiran 15. Pernyataan Kelaikan Etik Penelitian ......................................... 107

Scanned by CamScanner

ABSTRAK

Absari, Salsabila. 2018. Korelasi Pemberian Bawang Hitam Dengan Kadar Trigliserida

Pada Tikus Putih (Rattus Norvegicus strain wistar) Jantan Yang Diberi Diet Tinggi Lemak Dan Fruktosa. Tugas Akhir, Program Studi Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. Pembimbing: (1) Kanthi Permaningtyas T, S.Gz.MPH (2) Olivia Anggraeny, S.Gz,. M.Biomed

Sindrom Metabolik termasuk kumpulan sindroma - sindroma yang prevalensinya tinggi saat ini. Salah satu faktor risiko terjadinya Sindrom Metabolik yaitu dislipidemia yang ditandai oleh peningkatan kadar kolesterol total, kadar LDL dan kadar trgliserida serta penurunan kadar HDL. Peningkatan kadar trigliserida dapat ditangani dengan pemberian bawang hitam. Bawang hitam mengandung antioksidan seperti S-allylcysteine, polifenol, dan flavonoid yang mampu menurunkan kadar trigliserida. Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui hubungan pemberian bawang hitam dengan kadar trigliserida tikus putih (Rattus Novergicus Strain Wistar) jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa. Penelitian ini menggunakan metode true experimental yang menggunakan rancangan post test only control group design. Pemilihan sampel hewan coba menggunakan simple random sampling. Jumlah sampel yang digunakan sebanyak 30 ekor tikus yang dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kelompok kontrol negatif diberi pakan diet normal berupa PARS dan sonde aquades, kontrol positif diberi pakan diet tinggi lemak dan fruktosa dan sonde aquades, kelompok P1 diberi diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa (DTLF) dan sonde bawang hitam dosis 240 mg, kelompok P2 diberi diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa (DTLF) dan sonde bawang hitam dosis 480 mg serta kelompok P3 diberi diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa (DTLF) dan sonde bawang hitam dosis 960 mg selama 14 hari. Kadar trigliserida diukur menggunakan metode spektrofotometer dan analisis statistik menggunakan uji One Way Anova. Hasil analisis statistik menunjukkan bahwa rata – rata kadar trigliserida pada kelompok (K1) = 95,6 mg/dl, (K2) = 77 mg/dl. (P1) = 85,54 mg/dl, (P2) = 91,8 mg/dl, (P3) = 87,8 mg/dl. Kemudian, dengan menggunakan One Way Anova didapatkan nilai p=0,984 (p<0.005) dan dilanjutkan dengan Uji Spearman dan uji korelasi linear sederhana dengan nilai p = 0.947 dan p = 0.971 (p>0,05). Kesimpulan dari penelitian ini adalah tidak terdapat hubungan pemberian bawang hitam dengan kadar trigliserida pada tikus putih jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa.

Kata Kunci : bawang hitam, kadar trigliserida, diet tinggi lemak dan fruktosa*

ABSTRACT

Absari, Salsabila. 2018. The Correlation Of Black Garlic with Triglyceride Levels of White Male Rats (Rattus Norvegicus Strain Wistar) Fed with High-Fat And Fructose Diet. Final Assignment, Nutrition Program, Faculty of Medicine, Brawijaya University. Supervisors: (1) Kanthi Permaningtyas T, S.Gz.MPH (2) Olivia Anggraeny, S.Gz,. M.Biomed

Metabolic syndrome includes a highly prevalent disease nowadays. One of the factors that influence the Metabolic Syndrome is dyslipidemia characterized by elevated cholesterol, LDL and triglyceride levels and decreased HDL levels. Elevated triglyceride levels may be given by black garlic. Black garlic contain antioxidants such as S-allylcysteine, polyphenols, and flavonoids that overcome triglyceride levels. The purpose of this study was to determine the effect of black garlic on triglyceride levels of white rat (Rattus Novergicus Strain Wistar) males who were fed with high fat and fructose diet. This research used true experimental method used post test only control group design design. Selection of animal samples used simple random sampling. The samples used were 30 rats divided into 5 groups: negative control group fed with normal diet (PARS) and aquades, positive control fed with high fat and fructose diet, P1 group fed with normal diet, high fat and fructose diet (HFFD) and black garlic dose 240 mg, P2 group fed with normal diet, high fat and fructose diet (HFFD) and black garlic dose 480 mg and group P3 fed with normal diet, high fat and fructose diet (HFFD) and black garlic dose 960 mg for 14 days. Levels of triglycerides measured using spectrophotometer method and statistical analysis using One Way Anova test. The result of statistical analysis showed that the mean of triglyceride level in group (K1) = 95,6 mg / dl, (K2) = 77 mg / dl. (P1) = 85.54 mg / dl, (P2) = 91.8 mg / dl, (P3) = 87.8 mg / dl. Then, using One Way Anova obtained p value = 0,984 (p <0.005) and continued with Spearman test and simple linear correlation test with p = 0.947 and p = 0.971 (p> 0,05). The conclusion of this research is that there is no correlation of black garlic with triglyceride levels in male white rats fed with high fat and fructose diet. Keywords : black garlic, Triglycerides levels, High Fat and Fructose Diet*

1

BAB 1

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Sindrom metabolik bukan merupakan penyakit yang spesifik. Sindrom

metabolik adalah keadaan gangguan metabolik seperti resistensi insulin,

hiperinsulinemia, obesitas sentral, gangguan toleransi glukosa, dislipidemia,

hipertensi, dan keadaan proinflamasi dan protrombotik. Sindrom metabolik

adalah sekelompok kelainan metabolik yang membuat seseorang mengalami

peningkatan risiko penyakit kardiovaskular secara substansial - kira-kira dua kali

lebih tinggi dari orang yang tidak mengalami sindrom ini (Srikanthan et al., 2016;

Thaman et al., 2013).

Prevalensi sindrom metabolik pada orang dewasa di Amerika Serikat,

menurut kriteria diagnostik National Centers for Environmental Predictions

(NCEP), adalah 6,7% pada kelompok usia 20-29 tahun, 43,5% 60 - 69 tahun,

dan 42% paling tinggi di antara 70 tahun. Diperkirakan saat ini sekitar 100 juta

orang di dunia menderita sindrom metabolik. Prevalensi sindrom metabolik

berkisar antara 20% - 25% di antara individu dengan status gizi yang baik, 50%

pada pasien dengan glukosa darah abnormal, 80% pada pasien diabetes tipe 2.

Dan juga berkisar 12,4% sampai 28,5% pada pria dan dari 10,7% sampai 40,5%

pada wanita, sindrom ini lebih banyak terjadi pada wanita dibanding pria

(Tavares et al., 2015).

2

Komponen utama sindrom metabolik diantaranya adalah dislipidemia

(Arthur, 2009). Dislipidemia disebabkan ketidaknormalan metabolisme

lipoprotein, mencakup kolesterol total meningkat, trigliserida meningkat,

kolesterol Low Density Lipoproterin (LDL) meningkat, dan kolesterol High

Density Lipoprotein (HDL) menurun (Price, 1994). Kadar kolesterol serum dan

trigliserida yang tinggi dapat menyebabkan pembentukan arterosklerosis.

Kolesterol dan trigliserida di dalam darah terbungkus di dalam protein

pengangkut lemak yang disebut lipoprotein. Kadar trigliserida di atas 200 mg/dl

perlu diwaspadai dan perlu dikendalikan (Adiputro, 2008). Peningkatan

trigliserida darah atau hipertrigliserida dipengaruhi oleh faktor gen dan konsumsi

makanan seperti Karbohidrat, lemak, dan alkohol. Karena itu untuk menurunkan

kadar trigliserida darah selain lemak makanan, karbohidrat juga diperhitungkan.

Selain itu, kadar trigliserida darah juga dipengaruhi oleh aktivitas enzim LPL

(Lipoprotein Lipase) yang berfungsi untuk menghidralisis trigliserida menjadi

asam lemak dan gliserol. Rendahnya aktifitas LPL ini akan dapat meningkatkan

kadar trigliserida darah (Tsalissavrina et al., 2006).

Masyarakat saat ini mulai banyak mengalami perubahan gaya hidup

sejalan dengan kemajuan teknologi. Gaya hidup seperti kurangnya aktivitas fisik

dan perubahan pola konsumsi makanan ke arah makanan yang kaya lemak dan

energi, dan rendah serat mulai banyak ditemukan. Kurangnya aktivitas fisik dan

mengkonsumsi makanan tinggi lemak termasuk beberapa faktor risiko dari

dislipidemia (Rukmini, 2007; Castillo’n et al., 2007). Akhir – akhir ini terjadi

peningkatan pengonsumsian makanan tinggi lemak dan menggunakan fruktosa

sebagai pemanis yang dapat menginduksi terjadinya sindrom metabolik.

3

Indonesia memiliki ragam kekayaan alam yang sekarang ini dapat

digunakan sebagai obat tradisional seperti jeruk nipis, kulit manggis, jahe, kunyit,

dan bawang putih. Bawang putih merupakan salah satu bumbu yang pasti ada di

rumah masyarakat dan mudah untuk didapatkan. Bawang putih berisi berbagai

bio-fungsional yang dapat mempengaruhi kesehatan, tetapi tidak dinikmati oleh

banyak orang karena baunya yang menyengat. Berbagai metode pengolahan

makanan telah digunakan untuk menyingkirkan bau bawang putih. Salah satunya

adalah dengan melakukan reaksi maillard yaitu bawang putih yang dilakukan

proses pemanasan yang mengakibatkan perubahan warna pada bawang putih

(Sasaki et al., 2007). Bawang hitam dibuat dengan menggunakan rice cooker

dalam suhu 34-38ºC selama 21 hari tanpa diberi obat tambahan dan zat aditif

lainnya. Bentuknya berwarna hitam, tidak berbau menyengat seperti bawang

putih, dan dapat dimakan secara langsung tanpa harus diolah (Wang et al.,

2010). Selama proses pematangan, glyco-komponen dan asam amino dari

bawang putih mengalami reaksi pencoklatan non-enzimatik, memproduksi

melanoidins dan komponen yang larut dalam air seperti S-allylcysteine (SAC)

dan S-allyl melcaptocystein (SAMC), dan hampir menghilangkan semua zat yang

mudah menguap. Dalam ekstrak bawang hitam, isi komponen larut dalam air,

seperti SAC dan SAMC, diketahui meningkat secara signifikan selama proses

penuaan, seperti bawang putih mentah, yang mungkin berperan penting dalam

antilipidemic serta pemberian aktivitas antioksidan yang kuat (Ha et al., 2015).

Beberapa studi melaporkan bahwa 3-5% ekstrak bawang hitam secara

signifikan menghambat peningkatan kadar kolesterol darah dan trigliserida (TG)

pada tikus diabetes atau hiperkolesterol. Dalam penelitian Ha et al (2015),

suplementasi ekstrak bawang hitam secara signifikan meningkatkan ekskresi

4

fekal lipid, baik TG dan kolesterol, yang menunjukkan bahwa mekanisme ekstrak

bawang hitam tidak hanya terkait dengan mekanisme sintesis lemak, tetapi juga

bisa terkait dengan mekanisme lain yang menyebabkan peningkatan ekskresi

feses atau tingkat penyerapan lemak makanan, menghasilkan penurunan yang

signifikan dalam konsentrasi plasma profil lipid pada tikus yang diberi ekstrak

bawang hitam. Sehingga asupan yang tepat dari bawang hitam akan bermanfaat

dalam pencegahan hiperlipidemia dan hiperglikemia yang disebabkan oleh diet

tinggi lemak.

Kelebihan dari penelitian ini adalah sudah ada penelitian yang meneliti

pemberian bawang hitam terhadap kadar trigliserida pada tikus yang diberi

pakan tinggi lemak, tetapi belum ada penelitian yang mengkaitkan hubungan

pemberian bawang hitam dengan kadar trigliserida yang diberi pakan tinggi

lemak dan fruktosa. Pada penelitian Sasaki (2007), bawang hitam digunakan

dalam bentuk ekstrak sedangkan peneliti menggunakan bawang hitam yang

dihaluskan sehingga lebih mudah pengaplikasiannya untuk masyarakat.

Dari latar belakang di atas, peneliti akan meneliti hubungan pemberian

bawang hitam dengan kadar Trigliserida (TG) pada tikus putih (Rattus norvegicus

strain wistar) jantan yang diberi tinggi lemak dan fruktosa.

1.2 Rumusan Masalah

Apakah ada hubungan pemberian bawang hitam dengan kadar

Trigliserida (TG) pada tikus putih j(Rattus norvegicus strain wistar) jantan

yang diberi tinggi lemak dan fruktosa

1.3 Tujuan Penelitian

1.3.1 Tujuan umum

5

Tujuan umum penelitian ini dilakukan adalah untuk mengetahui hubungan

pemberian bawang hitam dengan kadar Trigliserida (TG) pada tikus putih

(Rattus norvegicus strain wistar) yang diberi tinggi lemak dan fruktosa

1.3.2 Tujuan khusus

Tujuan khusus penelitian ini dilakukan adalah untuk mengetahui:

1) Mengetahui kadar TG pada tikus wistar jantan strain Rattus

Novergicus yang diberi diet normal.

2) Mengetahui kadar TG pada tikus wistar jantan strain Rattus

norvegicus yang diberi tinggi lemak dan fruktosa.

3) Mengetahui kadar TG pada tikus wistar jantan strain Rattus

norvegicus yang diberi tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam

dosis 1.

4) Mengetahui kadar TG pada tikus wistar jantan strain Rattus

norvegicus yang diberi tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam

dosis 2.

5) Mengetahui kadar Trigliserida (TG) pada tikus putih (Rattus

norvegicus strain wistar) jantan yang diberi tinggi lemak dan fruktosa

dan bawang hitam dosis 3.

6) Mengetahui berat badan awal, berat badan akhir, dan penambahan

berat badan pada tikus putih Rattus norvegicus strain wistar) jantan

yang diberi diet normal

7) Mengetahui berat badan awal, berat badan akhir, dan penambahan

berat badan pada tikus putih Rattus norvegicus strain wistar) jantan

yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa.

6

8) Mengetahui berat badan awal, berat badan akhir, dan penambahan

berat badan pada tikus putih Rattus norvegicus strain wistar) jantan

yang diberi diet diet tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam dosis

1.

9) Mengetahui berat badan awal, berat badan akhir, dan penambahan

berat badan pada tikus putih Rattus norvegicus strain wistar) jantan

yang diberi diet diet tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam dosis

2.

10) Mengetahui berat badan awal, berat badan akhir, dan penambahan

berat badan pada tikus putih Rattus norvegicus strain wistar) jantan

yang diberi diet diet tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam dosis

3.

11) Mengetahui asupan pakan tikus putih Rattus norvegicus strain wistar)

jantan

1.4 Manfaat

1.4.1 Manfaat Bagi Akademik

Hasil penelitian ini dapat menjadi bahan pustaka informasi hubungan

pemberian bawang hitam dengan kadar Trigliserida (TG) pada tikus putih

(Rattus norvegicus strain wistar) jantan yang diberi tinggi lemak dan

fruktosa dengan berbagai dosis sehingga dapat dijadikan dasar untuk

studi lanjutan yaitu uji klinis pada manusia.

1.4.2 Manfaat Praktis Untuk Masyarakat

Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi

kepada masyarakat bahwa bawang hitam dapat digunakan untuk

menurunkan kadar Trigliserida.

7

BAB 2

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Sindrom Metabolik

2.1.1 Definisi

Sindrom metabolik adalah gabungan dari gangguan metabolik seperti

resistensi insulin, hiperinsulinemia, obesitas perut, toleransi glukosa terganggu,

dislipidemia, hipertensi, dan keadaan proinflamasi dan protrombotik. Sindrom

metabolik adalah sekelompok kelainan metabolik yang membuat seseorang

mengalami peningkatan risiko penyakit kardiovaskular secara substansial - kira-

kira dua kali lebih tinggi dari orang yang tidak mengalami sindrom ini (Srikanthan

et al., 2016; Thaman R et al., 2013).

Pada tahun 1998, WHO merupakan organisasi pertama yang

menyampaikan kriteria sindrom metabolik. Menurut WHO istilah sindrom

metabolik dapat digunakan pada populasi Diabetes Mellitus karena dapat

memenuhi kriteria tersebut dan dapat menunjukkan besarnya risiko pada

kejadian kardiovascular. Pada tahun 1999, the European Group for Study of

Insulin Resistance (EGIR) melakukan modifikasi pada kriteria WHO, EGIR lebih

menggunakan obesitas sentral dibandingkan Indeks Massa Tubuh (IMT) dan

istilah sindrom resistensi insulin tidak dapat dipakai pada penyandang DM karena

resistensi insulin merupakan faktor risiko DM. Pada tahun 2001, National

Cholesterol Education Program (NCEP) Adult Treatment Panel III (ATP III)

8

menampilkan kriteria baru yang tidak memasukkan adanya komponen resistensi

insulin, kriteria ini menganggap bahwa obesitas sentral adalah faktor utama yang

dapat mendasari kejadian sindrom metabolik. Nilai cut-off lingkar perut diambil

dari National Institute of Health Obesity Clinical Guidelines; ≥102 cm untuk pria

dan ≥88 cm untuk wanita. Etnik tertentu seperti Asia memiliki cut-off lebih rendah

dari ATP III, mudah berisiko terkena kejadian sindrom metabolik.

Tabel 2.1 Kriteria Sindrom Metabolik

Kriteria Klinis WHO 1998 ATPIII 2004 EGIR 1999 AACE 2003

Pada IGT/HOMA –IR ,DM/IFG dibutuhkan 2 dari 4

Minimal 3 dari 5 Hiperinsulinemi a puasa (kuartil tertinggi) dan 2 dari 4

2 dari 4

Ekskresi Albumin urin

>20 µg/menit - -

Ratio lingkar pinggang panggul pria

Wanita

>0.90

>0.85

Lingkar pinggang pria wanita

≥102 cm

≥88 cm

>94 cm

≥80 cm

Trigliserida ≥150 mg/dL ≥150 mg/dL ≥150 mg/dL ≥150 mg/dL

Kolesterol HDL Pria

Wanita

<35 mg/dL

<39 mg/dL

<40 mg/dL

<50 mg/dL

<39 mg/dL

<39 mg/dL

<40 mg/dL

<50 mg/dL

Tekanan Darah ≥140/90 mmHg ≥130/85 mmHg ≥140/90 mmHg ≥130/85 mmHg

Glukosa darah GDP ≥110 mg/dL (DM tidak di eksklusi)

GDP ≥6.1 mmol/l (menyingkirkan

DM)

GDP 110-125 GD 2 j PP 140- 200 mg/dL

9

** Penyakit serebrovascular, hipertensi, PCOS, NAFLD, riwayat keluarga dengan

T2DM/hipertensi/ penyakit serebrovascular, riwayat diabetes gestasional, non Kaukasian,

gaya hidup kurang aktif, IMT >25, umur >40 tahun Diambil dari Bloomgarden 2004, 1 st

congress on insulin resistance syndrome

2.1.2 Patogenesis

2.1.2.1 Resistensi Insulin

Insulin adalah hormon anti-hormonal dan efek metabolik ini melibatkan

aktivasi phosphatidylinosital (PI) 3-kinase. Dalam kasus resistensi insulin, jalur PI

3- kinase terganggu dan Insulin tidak lagi antiautogenik (Wang et al., 2004).

Obesitas adipositas pada perut tertentu merupakan salah satu alasan utama

resistensi insulin. Asam lemak nonesterifikasi (NEFA) dilepaskan dari jaringan

adiposa berlebih, yang meningkatkan resistensi insulin. Dalam kasus resistensi

insulin ada peningkatan lipolisis dari jaringan adiposa yang meningkatkan asam

lemak bebas, selanjutnya menghambat efek anti-lipolitik dari Insulin (Eckel et al.,

2005). Lemak viseral atau omental nampaknya paling merugikan dan paling

berkontribusi terhadap pengembangan lipotoksisitas pada jaringan perifer oleh

sekresi adipositokin (Gill et al., 2005). Sindrom Metabolik dikaitkan dengan

jumlah lemak intra-abdomen dalam jumlah tinggi, kadar adiponektin rendah, dan

kadar sitokin yang meningkat (interleukin 1RA dan interleukin 1beta)

(Salmenniemi et al., 2004). Hiperinsulinemia dapat meningkatkan produksi

trigliserida lipoprotein densitas rendah dan dengan demikian meningkatkan

trigliserida.

Insulin mempromosikan pengambilan glukosa pada sel otot, lemak, dan

hati dan dapat mempengaruhi lipolisis dan produksi glukosa oleh hepatosit.

Kontributor utama untuk pengembangan resistensi insulin adalah asam lemak

yang beredar melebihi batas normal, yang dilepaskan dari massa jaringan

10

adiposa. Asam lemak bebas mengurangi sensitivitas insulin pada otot dengan

menghambat serapan glukosa yang dimediasi oleh insulin. Peningkatan kadar

glukosa yang beredar meningkatkan sekresi insulin pankreas yang

mengakibatkan hiperinsulinemia. Di hati, asam lemak bebas meningkatkan

produksi glukosa, trigliserida dan sekresi lipoprotein densitas sangat rendah

(VLDL). Konsekuensinya adalah pengurangan transformasi glukosa menjadi

glikogen dan peningkatan akumulasi lipid pada trigliserida (TG). Insulin adalah

hormon antilipolitik yang penting. Dalam kasus resistensi insulin, peningkatan

jumlah lipolisis dari molekul triasilgliserol yang tersimpan dalam jaringan adiposa

menghasilkan lebih banyak asam lemak, yang selanjutnya dapat menghambat

efek antilipolitik insulin, menciptakan lipolisis tambahan (Aganović et al., 2005).

Kontributor tambahan untuk resistensi insulin meliputi kelainan pada

sekresi insulin dan sinyal reseptor insulin, penurunan kadar glukosa, dan sitokin

proinflamasi. Hubungan toleransi glukosa terganggu dan resistensi insulin

terdokumentasi dengan baik. Untuk mengimbangi kekurangan aktivitas insulin,

sekresi insulin atau pembersihan perlu dimodifikasi untuk mempertahankan

kadar glukosa normal. Hiperglikemia adalah hasil akhir jika mekanisme ini gagal

(Eckel et al., 2005). Karena resistensi insulin meningkatkan risiko seseorang

terkena penyakit kardiovaskular dan diabetes tipe 2, beberapa peneliti telah

mengusulkan tindakan resistensi insulin pada individu obesitas dengan dan

tanpa Sindrom Metabolik. Reilly (2004) percaya bahwa tes insulin atau biomarker

alternatif resistensi insulin dapat memfasilitasi prediksi risiko kardiovaskular pada

individu dengan Metabolic Syndrome (Thaman R et al., 2013)

11

2.1.2.2 Obesitas

Epidemiologi obesitas dianggap sebagai salah satu pendorong utama

meningkatnya prevalensi sindrom metabolik. Obesitas berkontribusi terhadap

hiperglikemia dan hipertensi dan dikaitkan dengan risiko penyakit kardiovaskular

(CVD) yang lebih tinggi. Dalam studi klinis dan epidemiologi, obesitas sangat

terkait dengan semua faktor kardiovaskular. Namun, mekanisme yang mendasari

hubungan antara obesitas perut (terutama obesitas viseral) dan sindrom

metabolik tidak sepenuhnya dipahami dan cenderung rumit.

Beberapa perubahan yang merusak metabolisme lipid sering terlihat pada

orang yang menderita obesitas. Perubahan ini paling erat berkorelasi dengan

jumlah lemak viseral daripada lemak tubuh total. Secara umum, obesitas

cenderung meningkatkan kadar kolesterol dan trigliserida plasma puasa dan

menurunkan kadar HDL-C plasma. Meskipun tingkat kolesterol LDL-C (LDL-C)

tetap sedikit meningkat atau normal, partikel LDL aterogenik meningkat, terutama

pada pasien dengan resistensi insulin yang terkait dengan adipositas viseral.

Perubahan ini meningkatkan risiko aterosklerosis (Standl, 2005).

Lemak viseral mengeluarkan produk metabolisme langsung ke sirkulasi

portal, yang membawa darah langsung ke hati. Karena itu asam lemak bebas

dicampurkan ke dalam hati. Asam lemak bebas juga menumpuk di pankreas,

jantung dan organ lainnya. Hal ini menyebabkan disfungsi organ, yang nantinya

akan menyebabkan gangguan regulasi insulin, gula darah dan kolesterol serta

fungsi jantung yang tidak normal. Ini dikenal sebagai lipotoxicity (Harvard

College, 2006).

12

2.1.2.3 Hipertensi

Salah satu gejala utama sindrom metabolik adalah hipertensi. Ini adalah

gejala yang mungkin tidak terdeteksi dalam waktu yang lama. Ini adalah faktor

risiko penting yang dapat menimbulkan penyakit kardiovaskular. Semua

gangguan hemodinamik dan metabolik hipertensi esensial dan resistensi insulin

berhubungan erat. Hipertensi esensial sering dikaitkan dengan beberapa

kelainan metabolik, dimana obesitas, intoleransi glukosa, dan dislipidemia adalah

yang paling umum (Ferranini et al., 1991). Obesitas mungkin merupakan faktor

risiko terkuat untuk hipertensi yang tidak terkontrol. Penelitian telah menunjukkan

bahwa obesitas terdapat hubungan antara hipertensi, resistensi insulin dan

dislipidemia (Wingard et al., 1996). Di studi lain, tiga faktor ditemukan pada

pengelompokkan variabel metabolik. Ketiga faktor ini adalah resistensi insulin,

hipertensi dan dislipidemia. Baik obesitas umum maupun central dikaitkan

dengan resistensi insulin dan hipertensi dan hanya terkait erat dengan

dislipidemia (Anderson et al., 2001). Hasil studi Farmingham Heart

memperkirakan risiko kelebihan berat badan adalah penyebab hipertensi pada

78% pria dan 65% wanita (Morse et al., 2005).

Studi juga menunjukkan bahwa baik hiperglikemia dan insulin

mengaktifkan Renin-Angiotensin System (RAS) dengan meningkatkan ekspresi

angiotensinogen, AII, dan reseptor AT1, yang dapat berkontribusi pada

perkembangan hipertensi pada pasien dengan resistensi insulin (Malhotra et al.,

2001). Aktivasi RAS dapat menghambat aksi Insulin melalui jalur PI3 (Prasad et

al., 2001). Ada juga bukti yang mendukung hubungan kuat antara hipertensi dan

obesitas, yang mungkin melibatkan insulin dan leptin serta sistem saraf simpatik.

Leptin dan insulin dianggap sebagai mekanisme kompensasi yang diperlukan

13

untuk mengembalikan keseimbangan energi dengan sistem saraf simpatik

sebagai salah satu lengan efektor (Landsberg, 2001).

2.2 Dislipidemia

Dislipidemia adalah kelainan metabolisme lipid yang ditandai dengan

peningkatan atau penurunan fraksi lipid dalam plasma. Kelainan fraksi lipid yang

utama adalah kenaikan kadar kolesterol total, Low Density Lipoprotein (LDL), dan

trigliserida serta penurunan kadar High Density Lipoprotein (HDL) (Price, 2012).

2.2.1 Klasifikasi Dislipidemia

Berdasarkan proses terjadinya penyakit, dislipidemia dapat

diklasifikasikan menjadi 2, yaitu dislipidemia primer dan dislipidemia sekunder.

Dislipidemia primer disebabkan karena kelainan genetik dan bawaan.

Dislipidemia yang menyertai beberapa penyakit seperti diabetes melitus,

hipotiroidisme, sindrom nefrotik, dan gagal ginjal kronik disebut sebagai

dislipidemia sekunder (Irwan, 2008). Dislipidemia primer dapat berupa

hiperkolesterolemia poligenik, hiperkolesterolemia familial, dislipidemia remnant,

sindrom kilomikron. Hiperkolesterolemia poligenik merupakan

hiperkolesterolemia yang paling sering ditemukan yang merupakan interaksi

antara kelainan genetik, intake nutrisi dan faktor-faktor lingkungan lainnya.

Hiperkolesterolemia familial adalah kelainan yang bersifat autosomal dominan

dan terdapat dalam bentuk homozigot maupun heterozigot. Sedangkan pada

dislipidemia remnant terjadi peningkatan kolesterol dan trigliserida dengan berat

bervariasi. Dan hiperlipidemia kombinasi familial yang merupakan kelainan

genetik metabolisme lipoprotein yang sering berhubungan dengan penyakit

kardiovaskuler. Serta sindrom kilomikron, dimana terjadi kelainan enzim

lipoprotein lipase atau apolipoprotein C-II, ini merupakan penyebab

14

hipertrigliseridemia berat yang jarang ditemukan (Irwan, 2008). Sedangkan

klasifikasi dislipidemia secara klinis (menurut Eropean Atherosclerosis Society,

EAS) dibagi menjadi 3, yaitu: hiperkolesterolemia, hipertrigliseridemia, dan

campuran hiperkolesterolemia dan hipertrigliseridemia (dislipidemia campuran)

(Decroli, 2008).

2.3 Trigliserida

2.3.1 Definisi

Trigliserida adalah salah satu jenis lemak yang terdapat dalam darah dan

berbagai organ di dalam tubuh. Menurut ilmu kimia, trigliserida adalah substansi

yang terdiri dari gliserol yang mengikat gugus asam lemak (Bangun, 2003).

Sedangkan menurut Kamus Gizi (2010), trigliserida adalah istilah ilmiah untuk

bentuk umum lemak yang dapat ditemukan baik di dalam tubuh ataupun di dalam

makanan yang berbentuk ester gliserol dan asam lemak. Disebut trigliserida

karena didalamnya terkandung tiga asam lemak yang berkaitan dengan gliserol,

yang bagaimana satu asam lemak dan gliserol disebut monogliserida dan dua

asam lemak yang bergabung dengan gliserol disebut digliserida. Jika asam

lemak – asam lemak yang bergabung tersebut sama maka lemak tersebut

termasuk trigliserida sederhana dan apabila ternyata berbeda maka menjadi

trigliserida campuran (Almatsier, 2009)

Trigliserida yang biasanya terdapat di dalam tubuh manusia yaitu seperti

stearic acid yang mempunyai 18 rantai karbon yang semuanya berikatan dengan

atom hidrogen, oleic acid yang mempunyai 18 rantai karbon dan 1 ikatan ganda

di tengah rantai, serta palmitic acid yang mempunyai 16 karbon yang semuanya

berikatan (Guyton, 2006). Trigliserida ini termasuk sebagian besar bentuk dari

15

simpanan lemak di dalam tubuh yang diubah dari asam lemak bebas di dalam

jaringan tubuh menjadi cadangan energi (Wulandari, 2014).

Trigliserida yang juga dikenal sebagai triacylglycerol merupakan

kombinasi gliserol dengan tiga dari lima macam asam-asam lemak yang tersedia.

Dalam darah, trigliserida dikombinasi dengan protein untuk menghasilkan

lipoprotein. Malole (1989) menyatakan bahwa kadar trigliserida normal tikus

dewasa adalah 26 - 145 mg/dL (Baroroh, 2013), sedangkan menurut Rahayu

(2011) kadar trigliserida normal pada tikus adalah 62 – 92 mg/dl (Maris, 2015).

Kadar trigliserida normal dalam darah manusia adalah 150 mg/dL (Ramadhani,

2014).

2.3.2 Metabolisme Trigliserida

Metabolisme trigliserida dalam tubuh terutama terjadi pada hepar. Jalur

metabolisme trigliserida dibagi menjadi 2, yaitu :

2.3.2.1 Jalur eksogen

Pada jalur eksogen, trigliserida yang berasal dari makanan dalam usus

dikemas sebagai kilomikron. Kilomikron ini nantinya diangkut dalam darah

melalui ductus torasikus. Di jaringan lemak, trigliserida dan kilomikron mengalami

hidrolisis oleh lipoprotein lipase yang terdapat pada permukaan sel endotel.

Akibat hidrolisis, akan terbentuk asam lemak dan kilomikron remnan. Asam

lemak bebas akan menembus endotel dan masuk ke dalam jaringan lemak atau

sel otot untuk diubah menjadi trigliserida kembali atau dioksidasi (Wibowo, 2009).

2.3.2.2 Jalur endogen

Pada jalur endogen, trigliserida yang disintesis oleh hati akan diangkut

secara endogen dalam bentuk Very Low Density Lipoprotein (VLDL) kaya

trigliserida dan mengalami hidrolisis dalam sirkulasi oleh lipoprotein lipase yang

16

juga menghidrolisis kilomikron menjadi partikel lipoprotein yang lebih kecil yaitu

Intermediate Density Lipoprotein (IDL) dan Low Density Lipoprotein (LDL). LDL

merupakan lipoprotein yang mengandung kolesterol paling banyak (60-70%)

(Wibowo, 2009).

2.3.3 Faktor – faktor yang mempengaruhi kadar Trigliserida

Kadar trigliserida di dalam darah dapat dipengaruhi oleh berbagai faktor,

yaitu seperti Diet tinggi karbohidat (60% dari intake energi) dapat

meningkatkatkan kadar trigliserida (U.S. Departement of Health and Human

Services, 2001), Faktor genetik, misalnya pada hipertrigliseridemia familial dan

disbetalipoproteinemia familial(Widiharto, 2008), Usia, semakin tua seseorang

maka terjadi penurunan berbagai fungsi organ tubuh sehingga keseimbangan

kadar trigliserida darah sulit tercapai akibatnya kadar trigliserida cenderung lebih

mudah meningkat (anonim, 2008), Stres mengaktifkan sistem saraf simpatis

yang menyebabkan pelepasan epinefrin dan norepinefrin yang akan

meningkatkan konsentrasi asam lemak bebas dalam darah, serta meningkatkan

tekanan darah (Guyton dan Hall, 1997), Penyakit hati, menimbulkan kelainan

pada trigliserida darah karena hati merupakan tempat sintesis trigliserida

sehingga penyakit hati dapat menurunkan kadar trigliserida, Vitamin niasin dosis

tinggi, menurunkan kolesterol LDL dan meningkatkan kolesterol HDL (Ganong,

1992).

2.3.4 Diet tinggi lemak dan fruktosa

Masyarakat saat ini mulai banyak mengalami perubahan pola konsumsi

makanan ke arah makanan yang kaya lemak dan energi, dan rendah serat.

Mengkonsumsi makanan tinggi lemak termasuk beberapa faktor risiko dari

17

dislipidemia (Rukmini, 2007; Castillo’n et al., 2007). Akhir – akhir ini terjadi

peningkatan pengonsumsian makanan tinggi lemak dan menggunakan fruktosa

sebagai pemanis yang dapat menginduksi terjadinya sindrom metabolik.

Diet tinggi lemak dan fruktosa pada hewan coba juga mempengaruhi

kadar trigliserida hewan coba. Hasil penelitian yang di lakukan oleh Tsalissavrina

et al., (2006) menunjukkan bahwa kadar Trigliserida darah hewan coba untuk

kelompok Diet Normal menunjukan rata-rata kadar trigliserida 81.28 ± 17,98

mg/dl. Selanjutnya pada kelompok diet tinggi karbohidrat menunjukan rata-rata

kadar trigliserida 130.28 ± 42,03 mg/dl dan nilai tertinggi adalah 169 ± 43,49

mg/dl untuk kelompok diet tinggi lemak. Sesuai dengan hasil penelitian yang

dilakukan oleh Rondonuwu et al., (2013), kadar trigliserida Rattus novergicus

strain Wistar jantan yang diberi diet standar yang terdiri dari comfeed PARS

66,67%, tepung terigu dan air 33,33% didapat rata-rata kadar trigliseridanya

adalah 84,8 mg/dL, lebih rendah dibandingkan dengan yang diberi diet tinggi

lemak yang terdiri dari PARS 50%, tepung terigu 25%, kolesterol 2%, asam kolat

0,2%, minyak babi 5%, dan air 17,8% rata-rata kadar trigliserida yang diperoleh

adalah 114,6 mg/dL.4 Penelitian yang dilakukan Wibowo (2009) mendapatkan

hasil kadar trigliserida 83,93 mg/dL pada Rattus novergicus yang diberi pakan

hiperkowiboowolesterolemik terdiri dari kolesterol 1%, kuning telur 5%, lipida

hewan 10%, minyak goreng 1 %, ditambah makanan standar sampai 100%.

Sedangkan kadar Rattus novergicus yang diberi makan standar kadar

trigliseridanya 45,22 mg/dL. Rachmandiar (2012), kadar trigliserida Rattus

novergicus strain Wistar jantan yang diberi makanan standar lebih rendah

dengan rata-rata kadar trigliserida 50 mg/dL dibandingkan dengan yang diberi

diet tinggi lemak yang rata-rata kadar trigliseridanya adalah 68,7 mg/dL.

18

Berdasarkan teori salah satu faktor yang dapat meningkatkan kadar trigliserida di

dalam darah adalah makanan yang tinggi lemak. Semakin banyak kadar lemak

yang dikonsumsi maka sintesis trigliserida di dalam tubuh juga akan meningkat

(Murray et al., 2009 ; Simanjuntak, 2009). Pemberian diet tinggi lemak yang

semakin lama akan menyebabkan peningkatan kadar trigliserida. Kadar

trigliserida yang banyak ini menyebabkan akumulasi trigliserida di apparatus

golgi meningkat sehingga menyebabkan pembengkakan pada apparatus golgi.

Apabila hal tersebut terus berlanjut maka akumulasi trigliserida ini dapat mengisi

seluruh sel. Kadar trigliserida yang tinggi juga dapat membentuk plak pada

pembuluh darah sehingga menghambat aliran darah yang menyebabkan

terjadinya aterosklerosis (Niza, 2015).

Pembuatan diet tinggi lemak dibagi menjadi 2 komposisi yang dibagi

menjadi 2 kelompok. Penelitian Hendra et al., (2011) tentang optimasi pemberian

komposisi diet tinggi lemak menggunakan komposisi diet tinggi lemak yang terdiri

dari pakan standar yang ditambah dengan kuning telur 100 g dan lemak babi 50

g. berdasarkan penelitian tersebut komposisi diet tinggi lemak yang digunakan

ditunjukkan pada tabel 2.3

19

Tabel 2.3 Komposisi Pakan Tikus

Komposisi Diet Tinggi Lemak

Komposisi 1 Komposisi 2

Modifikasi Pakan Pakan standar 300 gram

Kuning telur ayam 20 gram

Mentega 100 gram

Lemak sapi 10 gram

PTU (0,05%)

Pakan standar 50 gram

Kuning telur bebek 50 gram

Lemak sapi 50 gram

PTU (0,01%)

Emulsi Kuning telur ayam 10 gram

Lemak sapi 5 gram

Gom arab 7,5 gram

Kuning telur bebek 2,5 ml/g BB

Pada penelitian yang dilakukan oleh Tsalissavrina et al., (2006) komposisi diet

tinggi lemak dan fruktosa yang dapat meningkatkan kadar trigliserida yang

ditunjukkan oleh tabel 2.4

Tabel 2.4 Komposisi Pakan Tikus

Bahan Diet Normal Diet Tinggi Karbohidrat

Diet Tinggi Lemak

Confeed Pars (gr) 200 200 200

Terigu (gr) 100 100 100

Glukosa (gr) - 80 -

Kolesterol (gr) - - 8

Cholic Acid (gr) - - 0,8

Minyak Babi (gr) - - 20

Air (ml) 71,2 menyesuaikan 71,2

20

Konsumsi fruktosa dalam jumlah berlebihan dapat meningkatkan kadar

trigliserida dan penimbunan lemak di hati yang menyebabkan terjadinya

resistensi insulin. Konsumsi fruktosa dalam jangka panjang juga dapat

menstimulasi resistensi leptin yang berfungsi untuk menurunkan asupan makan.

Sehingga diet tinggi fruktosa dapat menyebabkan peningkatan rasa lapar dan

memicu tejadinya obesitas (Prahastuti, 2011). Pengonsumsian glukosa yang

berlebih yaitu fruktosa dalam makanan memberikan pengaruh terhadap kejadian

sindrom metabolik. Konsumsi pemanis fruktosa dalam jumlah yang tinggi dalam

makanan dan minuman dapat meningkatkan resiko dislipidemia, obesitas,

resistensi insulin, dan penyakit jantung (Lozano et al., 2016).

2.4 Bawang Hitam

Gambar 2.1 Proses Perubahan Bawang Hitam (Choi et al.,2014)

Bawang hitam adalah bawang putih yang diolah dengan cara fermentasi yang

nantinya akan menghasilkan bawang hitam atau black garlic. Bawang hitam

dibuat dengan menggunakan rice cooker dalam suhu 34-38ºC selama 21 hari

(Wang et al., 2010). Black garlic memiliki warna hitam, ringan karena kadar

airnya berkurang dan mempunyai aroma serta rasa yang tidak terlalu menyengat

seperti bawang putih. Dalam bawang putih hitam, S-allylcysteine membantu

penyerapan allicin sehingga metabolisme perlindungan terhadap infeksi bakteri

menjadi lebih mudah (Abusufyan, 2012).

21

2.4.1 Kandungan Bawang Hitam

Hasil penelitian Lee (2009) menyebutkan nilai Trolox Equivalent

Antioxidant Capacity (TEAC) antioksidan bawang putih dan black garlic adalah

13,3± 0,5 dan 59,2 ± 0,8 µmol / g basah. Black garlic mempunyai aktivitas

antioksidan lebih kuat dari bawang putih sehingga bisa digunakan untuk

mencegah komplikasi diabetes

Tabel 2.5 Perbedaan Kandungan dalam Bawang Hitam dan Bawang Putih

Bawang hitam Bawang putih

Energi (kkal/100 gram) 227,1 138

Air (%) 45,1 60,3

Protein (%) 9,1 8,4

Lipid (%) 0,3 0,1

Karbohidrat (%) 47,0 28,7

Abu (%) 2,1 ND

Na (mg) 4 ND

Ca (mg) 24 ND

ND not determined Sumber: Sasaki et al., 2007

Bawang hitam tidak mengeluarkan rasa menyengat yang kuat, seperti bawang

putih segar pada umumnya. Hal ini karena perubahan pada senyawa allicin,

yang bertanggung jawab untuk bau yang menyengat, menjadi senyawa

antioksidan larut air seperti S-allylcysteine, tetrahydro-β-carbolines, alkaloid aktif

secara biologis, dan senyawa mirip flavonoid. S-Allylcysteine dibentuk oleh

katabolisme γ-glutamylcysteine dan menghambat kerusakan oksidatif yang

terkait dengan penuaan dan berbagai penyakit. Derivat tetrahydro-β-carboline,

yang telah diidentifikasi dalam ekstrak Bawang hitam, juga menunjukkan efek

antioksidan. Derivat tetrahydro-β-carboline dibentuk oleh kondensasi antara

triptofan dan aldehid, serupa dengan produksi asam piruvat oleh jalur allin-allicin

22

atau proses reaksi Maillard. Selanjutnya, beberapa penelitian telah melaporkan

bahwa ekstrak Bawang hitam memiliki antioksidan, anti-alergi, anti-diabetes, anti-

inflamasi, hipokolesterolemik, hipolipidemia, dan efek anti karsinogenik (Choi, et

al., 2014).

Tabel 2.6 Kandungan SAC (µg/g) Bawang Hitam Dipengaruhi oleh Suhu dan

Lama Pemanasan

Lama

pemanasan

(hari)

Suhu (oC)

40 55 70 85

0 19.61 19.61 19.61 19.61

1 43.09 36.29 34.22 28.78

3 62.73 52.61 46.40 40.72

5 78.56 62.30 57.01 49.39

10 96.97 78.58 70.72 63.31

15 108.03 92.83 80.91 71.36

30 120.58 103.27 93.37 81.04

45 124.67 113.25 113.25 85.46

Sumber: Bae et al., 2014

Bawang hitam juga mengandung polifenol dan flavonoid yang berfungsi

sebagai antioksidan. Peningkatan asam polifenol berhubungan dengan

peningkatan total asam dari bawang hitam. Pemanasan pada komponen fenolik

meningkatkan fraksi dari asam polifenol, dimana hal tersebut dapat menurunkan

ester, glikosida, dan fraksi ikatan, yang menyebabkan peningkatan fenol dalam

bentuk bebas. Bawang putih yang mengalami pengolahan dapat menyebabkan

perubahan komponen bioaktif seperti polifenol, flavonoid yang berhubungan

dengan tipe dan durasi pemanasan (Gorinstein et al., 2008 dalam Choi et al.,

2014).

23

Tabel 2.7 Kandungan Poliphenol dan Flavonoid pada Bawang Hitam selama

proses pemanasan dengan suhu 70oC.

Lama pemanasan (hari)

0 7 14 21 28 35

Total polyphenol

(mg GAE/g) 13.91 25.81 35.28 58.33 55.25 48.35

Total flavonoid

(mg RE/g) 3.22 5.38 8.34 15.37 16.26 15.70

Sumber: Choi et al., 2014

2.4.2 Pengaruh Pemberian Bawang Hitam terhadap Kadar Trigliserida

Bawang hitam mengandung berbagai bahan antioksidan, salah satunya

flavonoid. Mekanisme flavonoid menurunkan kadar kolesterol adalah dengan

menurunkan aktivitas HMG-KoA reduktase, menurunkan aktivitas enzim acyl-

CoA cholesterol acyltransferase (ACAT), dan menurunkan absorbsi kolesterol di

saluran pencernaan. Flavonoid merupakan salah satu kelompok fitokimia

yang memiliki struktur polifenol. Banyak penelitian yang menyatakan bahwa

flavonoid ini dapat menurunkan kadar kolesterol dalam darah karena

flavonoid berperan dalam metabolisme lipid (Rumanti 2011).

Flavonoid dapat menurukan kadar kolesterol dalam darah karena

flavonoid merupakan kofaktor dari enzim kolesterol esterase selain itu flavonoid

juga dapat mengaktifkan enzim P-450 sehingga membuat peningkatan ekskresi

getah empedu. Jika terjadi peningkatan maka secara otomatis akan

24

membuat kadar kolesterol dalam darah akan menurun (Merindasari 2013).

Flavonoid memiliki berbagai potensi bagi kesehatan, flavonoid dapat

menurunkan angka kejadian penyakit kardiovaskular. Flavonoid meningkatkan

aktivitas lipoprotein lipase sehingga berpengaruh terhadap kadar trigliserida

serum (Lamson, 2000). Flavonoid adalah senyawa antioksidan polifenol alami,

terdapat pada tumbuhan, buahbuahan, dan minuman (teh dan wine) yang dapat

menurunkan kadar kolesterol dan kadar trigliserida dalam darah, melindungi

pembuluh arteri dari kerusakan, mengurangi jumlah penimbunan kolesterol di

permukaan endotel pembuluh darah arteri (Ekananda et al., 2015).

25

BAB 3

KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESA PENELITIAN

3.1 Kerangka Konsep

Gambar 3.1 Kerangka Konsep Penelitian

Keterangan :

: Variabel yang diteliti : Mempengaruhi

: Variabel yang tidak diteliti : Menghambat

Diet tinggi lemak dan

fruktosa

Antioksidan

Bawang Hitam

Resistensi

Insulin

Menurunkan aktivitas

HMG-KoA reduktase

TG

meningkat

Sindrom

metabolik

Obesitas Dislipidemia

SAC Polifenol

Kolesterol total

meningkat LDL

meningkat HDL

meningkat

Flavonoid

26

3.2 Penjelasan Kerangka Konsep Penelitian

Konsumsi tinggi lemak dan fruktosa dapat menyebabkan peningkatan

resistensi insulin, obesitas, dan dislipidemia. Dislipidemia disebabkan karena

adanya kelainan metabolisme yang ditandai dengan adanya peningkatan

trigliserida, kadar LDL, kolesterol total, serta menurunnya kadar HDL. Apabila

dislipidemia berlangsung lama dan tidak ditangani dapat menyebabkan sindrom

metabolik. Bawang hitam memiliki kandungan antioksidan yang tinggi

dibandingkan dengan bawang putih.

Bawang hitam diketahui memiliki antioksidan seperti flavonoid, SAC, dan

polifenol yang memiliki aktivitas antihiperlipidemia dengan menghambat absorbsi

lemak yang berpengaruh pula terhadap peningkatan Trigliserida. Flavonoid

nantinya yang akan menurunkan aktivitas HMG-KoA reduktase, yang akan

menghambat sistesis kolesterol pada Apo-B dan menghambat peningkatan

kadar trigliserida di hati.

3.3 Hipotesis

Terdapat hubungan pemberian bawang hitam dalam menghambat

peningkatan kadar Trigliserida pada tikus putih (Rattus norvegicus Strain Wistar)

jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa.

27

BAB 4

METODOLOGI PENELITIAN

4.1 Rancangan Penelitian

Penelitian ini menggunakan desain true experimental laboratory karena

terdapat suatu perlakuan pada hewan coba tikus. Metode yang digunakan yaitu

Randomized Post test Only Controlled Group Design karena pengukuran

parameter dilakukan di akhir perlakuan. Rancangan penelitian yang dipakai

adalah rancangan acak lengkap (RAL). Dengan metode ini peneliti dapat

membandingkan kelompok eksperimental dengan kelompok kontrol. Hal ini

dilakukan untuk mengambil hasil data pengukuran setelah diberikan perlakuan

seperti berikut :

a) Kontrol negatif (K1) : mendapatkan diet normal dan sonde plasebo berupa

akuades.

b) Kontrol positif (K2) : mendapatkan diet normal, diet tinggi lemak dan

fruktosa (DTLF) dan sonde plasebo berupa akuades.

c) Perlakuan 1 (P1) : mendapatkan diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa

(DTLF) dan bawang hitam dosis 240 mg.

d) Perlakuan 2 (P2) : mendapatkan diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa

(DTLF) dan bawang hitam dosis 480 mg.

e) Perlakuan 3 (P3) : mendapatkan diet normal, diet tinggi lemak dan fruktosa

(DTLF) dan bawang hitam dosis 960 mg.

28

4.2 Populasi dan Sampel

4.2.1 Jumlah Sampel

Perhitungan jumlah sampel berdasarkan rumus Federer adalah

sebagai berikut :

[(t – 1) (n – 1)] ≥ 15

Dimana :

n =jumlah pengulangan/besar sampel dalam kelompok

t = jumlah perlakuan/banyaknya kelompok

Maka jumlah sampel yang dibutuhkan dalam kelompok adalah :

[(t – 1) (n – 1)] ≥ 15

[( 5 – 1) (n – 1)] ≥ 15

4n – 4 ≥ 15

4n ≥ 19

n ≥ 4,75 dibulatkan menjadi 5

Keterangan :

n : jumlah sampel

t : jumlah perlakuan dalam sampel

(Arkeman dan David, 2006)

Jumlah sampel untuk 5 kelompok adalah 5 x 5 = 25 ekor tikus.

29

Jumlah total sampel adalah 25 ekor tikus. Namun untuk mengurangi

terjadinya lose of sample di tengah-tengah penelian karena tikus mati,

maka jumlah sampel ditambah 1 tiap perlakuan menjadi 30 tikus.

4.2.2 Prosedur Pengambilan Sampel

Seluruh sampel tikus yang tersedia dikelompokkan menjadi 5 kelompok

perlakuan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) berdasarkan

simple random sampling karena hewan coba, tempat percobaan, dan bahan

penelitian lainnya dapat dikatakan homogen. Teknik randomisasi ini juga

memungkinkan tiap tikus memiliki peluang yang sama untuk semua

kelompok. Berikut langkah – langkahnya :

1) Memberi nomor urut pada masing – masing kandang mulai dari nomor

yang telah di tentukan :

206 432 611 741 837

249 481 647 759 848

252 527 651 798 857

315 530 654 809 868

342 591 678 817 923

391 604 704 828 973

2) Membuka aplikasi Microsoft Excel, masukkan formula = randbetween

(111;999) pada sel A1, kemudian klik enter dan drag hingga sel A30.

3) Mengelompokkan hasil randomisasi dalam 5 kelompok. Sel A1 – A6

masuk ke dalam kelompok K1, sel A7 – A12 masuk ke dalam

kelompok K2, sel A13 – A18 masuk ke dalam kelompok P1, sel A19 –

A24 masuk ke dalam kelompok P2, sel A25 – A30 masuk ke dalam

30

kelompok A30.

4.2.3 Kriteria Subjek

1) Kriteria Inklusi

a. Jenis kelamin jantan

b. Umur tikus 2-3 bulan

c. Berat badan tikus 150-200 gram

d. Warna bulu putih bersih

e. Gerakkan aktif

2) Kriteria Eksklusi

a. Tikus tidak mengalami cacat

3) Kriteria Dropout

a. Tikus yang mati selama proses penelitian

b. Tikus yang hilang atau lepas dari kandang

4.3 Variabel Penelitian

1) Variabel Bebas

Variabel bebas penelitian ini adalah dosis bawang hitam.

2) Variabel Terikat

Variabel terikat penelitian ini adalah kadar Trigliserida

4.4 Lokasi dan waktu penelitian

4.4.1 Lokasi penelitian

1) Perawatan tikus dilakukan di Laboratoriun Parasitologi Fakultas

Kedokteran Universitas Brawijaya.

2) Analisis kadar trigliserida pada darah hewan coba dilakukan di

Laboratorium Patologi Klinik FKUB Malang.

3) Pembuatan pakan tikus dilakukan di Laboratorium Farmakologi

31

Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya

4) Pembuatan bawang hitam dilakukan di Laboratorium Parasitologi

Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya.

4.4.2 Waktu penelitian

Waktu pelaksanaan dilakukan pada bulan November - Desember 2017.

4.5 Bahan dan Alat/ Instrument Penelitian

4.5.1 Bahan Penelitian

1. Diet Normal Tikus

Tabel 4.1 Komposisi Diet Normal Persaji (40 gram)

Tabel 4.1 Komposisi Diet Normal Persaji (40 gram)

Komposisi Persentase (%) Jumlah

Comfeed PARS 53 21,1 gram

Tepung terigu 23,5 9,4 gram

Air 23,5 9,4 ml Sumber: Laboratorium Farmakologi FKUB, 2013.

Kandungan gizi diet normal ditunjukkan pada Tabel 4.2.

Tabel 4.2 Kandungan Gizi Diet Normal Persaji (40 gram)

Zat Gizi Persentase (%) Kandungan

Energi 104,9 kkal

Karbohidrat 72,7 19,06 gram

Lemak 8,0 0,93 gram

Protein 19,3 5,06 gram Sumber: Laboratorium Farmakologi FKUB, 2013.

2. Diet tinggi lemak dan fruktosa

Diet tinggi lemak dan fruktosa (DTLF) yang digunakan pada penelitian ini

mengacu pada Octavia, dkk (2017) yang memiliki komposisi bahan terdiri dari

minyak babi 2 ml/200g BB tikus, kuning telur puyuh 1 ml/200g BB tikus dan

fruktosa murni sebanyak 1 ml/200g BB tikus (Octavia dkk, 2017).

32

Tabel 4.3 Kandungan Zat Gizi DTLF

Bahan Volume

(ml)

Berat (g) Energi

(kkal)

Protein (g) Lemak (g) Karbohidrat (g)

Minyak babi 2 1,9 17,14 0 1,9 0

Kuning telur

puyuh

1 1,2 0,68 0,06 0,05 0

Fruktosa 1 1,4 5,13 0 0 1,39

Total kandungan/4 ml 22,95 0,06 1,95 1,39

(Persagi, 2009)

Energi telur utuh/100 g = 116

Protein kuning/100 g = = 4,6 g

Lemak kuning/100 g = = 4,2 g

KH kuning/100 g = = 0,2 g

Energi kuning/100 g = (4,6 x 4) + (4,2 x 9) + (0,2 x 4)

= 57 kkal

3. Bawang hitam

Bawang hitam dibeli pada produsen yang beralamat di Jalan Aris Munandar,

Kota Malang, Jawa Timur (PIRT) . Bawang hitam dibuat dengan proses

pemanasan dari bawang putih China yang dipanaskan dengan menggunakan

rice cooker dengan suhu 34-380C selama 21 hari. Penentuan dosis bawang

hitam berdasarkan penelitian Miao (2014) mencampurkan 32,2 gram bawang

hitam diblender dengan air sehingga menghasilkan 100 ml larutan bawang

hitam. Pemberian bawang hitam sebanyak 1,5 ml larutan tersebut signifikan

dapat menurunkan tekanan darah. Tekanan darah yang tinggi atau disebut

hipertensi merupakan salah satu komponen dari sindrom metabolik (Miao et al.,

33

2014) Jumlah dosis yang digunakan adalah ×32,2 = 0,48 gram sama dengan

480 mg. Perhitungan dosis bawang hitam dapat menggunakan deret hitung

yang diberikan pada tikus yaitu:

Dosis I: 240 mg/200 grBB

Dosis II: 480 mg/200 grBB

Dosis III: 960 mg/200 grBB

4. Bahan untuk pemebedahan dan pemeriksaan

a. Bahan untuk pembedahan: larutan kloroform sebanyak 80ml.

b. Bahan untuk pemeriksaan hewan coba menggunakan prosedur kadar

Trigliserida

5. Bahan untuk Pemeriksaan kadar Trigliserida

a. Reagen : sampel serum, reagen kolesterol dengan komposisi yang

terdiri dari sodium kolat 0,5 mmol/L, fenol 28 mmol/L, kolesterol

esterase >0,2 U/mL, kolesterol oksidase >0,1 U/mL, peroksidase >0,8

U/mL, dan 4-aminoantipirin 0,5 mmol/L.

b. Trigliserida Standard : Glycerol equivalent ≤200 mg/dL sebanyak 2,26

mmol/L.

4.5.2 Alat Penelitian

1) Pemeliharaan hewan coba

- Bak plastik ukuran 31 cm x 23 cm x 10 cm

- Tutup kandang tikus terbuat dari anyaman kawat dengan ukuran 33

cm x 25 cm dan luas lubang kawat 1 cm2

34

- Botol air minum untuk tikus

- Sekam yang bersih dan kering

2) Pembuatan diet normal (PARS) tikus

- Baskom plastik

- Timbangan digital dengan ketelitian 0,1 gram

- Nampan

- Sarung tangan

3) Pembuatan diet tinggi lemak dan fruktosa (DTLF)

- Spuit 10 ml

- Gelas ukur 10 ml

- Pengaduk

- Mangkuk plastik

4) Pembuatan larutan bawang hitam

- Timbangan digital merk Portable Scale SFC dengan ketelitian 0,01

gram

- Baskom plastik

- Gelas plastik

- Gelas ukur 10 ml

- Mortar dan stamper

5) Alat pemberian dosis bawang hitam

- Sonde lambung

- Gelas ukur 10 ml

6) Pembiusan, pembedahan dan pengambilan sampel darah tikus

- Seperangkat alat bedah (gunting bedah dan papan bedah)

- Ruang kaca

35

- Spuit 5 ml

- Kapas

- Seperangkat tabung reaksi

- Tabung vial

7) Pemeriksaan kadar Trigliserida

- Centrifuge

- Pipet ukur

- Spektrofotometer

- Waterbath

- Cuvet

- Spuit

8) Alat untuk hygiene dan sanitasi

- Tempat cuci tangan

- Sarung tangan

- Jas laboratorium

- Masker

- Sabun antiseptik

9) Penguburan tikus

- Sekop

- Kain putih bersih dengan ukuran 1 m x 1 m

36

4.6 Definisi Operasional

Variabel Definisi Operasional Skala

Dosis Bawang

Hitam

Dosis bawang hitam yang akan diberikan pada hewan coba yaitu 240 mg, 480 mg, dan 960 mg. Bawang hitam yang dihaluskan dengan mortar dan pestle dan dilarutkan oleh air, diberikan kepada hewan coba dengan kelompok perlakuan dengan tanda P1, P2, P3 selama masa perlakuan 14 hari. Proses pemberian melalui sonde yang dilakukan setiap hari pada pukul 16.00

Rasio

Kadar

Trigliserida

Banyaknya trigliserida dalam tubuh tikus jantan jenis Rattus norvegicus Strain Wistar yang diukur dengan pengambilan serum darah tikus dan uji laboratorium menggunakan metode spektrofotometri pada panjang gelombang 500 nm dan dinyatakan dalam satuan mg/dl, dengan kadar normal trigliserida pada tikus adalah 62 – 92 mg/dl (Maris, 2015).

Rasio

Diet Normal Diet normal tikus yang menggunakan bahan berupa comfeed PARS yang dicampur dengan tepung terigu dan air yang diberikan kepada tikus secara ad libitum sebanyak 40 gram/tikus/hari pada semua kelompok selama masa adaptasi ( 7 hari) dan masa perlakuan (14 hari).

Rasio

Diet Tinggi

Lemak dan

Fruktosa

Diet yang mengacu pada Octavia, dkk (2017) yang dibuat dengan cara mencampurkan bahan yang terdiri dari minyak babi 2 ml/200g BB tikus, kuning telur puyuh 1 ml/200g BB tikus dan fruktosa murni sebanyak 1 ml/200g BB tikus menggunakan alat magnetic stirrer. Diet ini diberikan kepada tikus pada kelompok kontrol positif (K2) dan kelompok perlakuan P1, P2, P3 selama masa perlakuan yaitu 14 hari dengan menggunakan sonde lambung. Pemberian diet ini dilakukan pada pukul 09.00 WIB.

-

37

4.7 Prosedur Penelitian dan Pengumpulan Data

4.7.1 Persiapan

4.7.1.1 Pengajuan Etik

Peneliti kemudian mengajukan permohonan kelaikan etik (ethical

clearance) kepada Komite Etik Penelitian Kesehatan FKUB dengan

melengkapi persyaratan dokumen-dokumen yang telah ditetapkan.

Pengajuan kelaikan etik ini dilakukan sebagai persyaratan untuk dapat

melakukan penelitian menggunakan hewan coba sebagai subyek penelitian

yaitu tikus putih jantan jenis Rattus norvegicus Strain Wistar sebanyak 30

ekor. Kemudian proposal penelitian yang telah diajukan diuji kelaikannya

oleh Komite Etik Penelitian Kesehatan FKUB dan setelah proposal diterima,

komite etik menerbitkan surat kelaikan etik penelitian kepada peneliti untuk

selanjutnya dapat digunakan dalam melaksanakan penelitian. Penelitan ini

telah mendapatkan nomor etik 3577/EC/KEPK/10/2017. Surat keterangan

kelaiakan etik terlampir.

4.7.1.2 Persiapan Bahan

1. Tikus

2. Pakan Tikus

4.7.2 Pelaksanaan

4.7.2.1 Pembelian Hewan Coba

Tikus putih jantan diperoleh dari produsen tikus yang beralamat di Jalan

Sudimoro Gang 6 No. 25 RT 05/07 Malang. Pemilihan tikus dilakukan

sesuai dengan kriteria inklusi yang telah ditetapkan.

38

4.7.2.2 Pembelian Bawang Hitam

Bawang hitam dibeli pada produsen yang beralamat di Jalan Aris

Munandar, Kota Malang, Jawa Timur. Pembelian bawang hitam ini dikarenakan

dalam proses pengolahan bawang hitam yang dilakukan produsen sudah sesuai

dengan penelitian sebelumnya. Berdasarkan penelitian Choi et al (2014) proses

pengolahan yang baik untuk memaksimalkan kandungan antioksidan dilakukan

selama waktu 21 hari.

4.7.2.3 Pembuatan Pakan dan Diet Tikus

Diet normal serta diet tinggi lemak dan fruktosa dibuat di Laboratorium

Penyelenggaraan Makanan FKUB. Diet normal tikus dibuat dengan cara:

1) Menimbang bahan yang dibutuhkan yaitu comfeed PARS, tepung terigu,

dan air.

2) Mencampurkan comfeed PARS dan tepung terigu dalam baskom plastik.

3) Menambahkan air.

4) Mengaduk adonan hingga tercampur rata.

5) Membentuk adonan menjadi bulatan.

6) Menimbang adonan/ diet untuk tiap ekor tikus 40 gram

4.7.3 Induksi Diet dan Bawang Hitam

- Menyiapkan bahan yang dibutuhkan yaitu minyak babi, kuning telur

puyuh, dan fruktosa murni.

- Mengambil minyak babi sebanyak 2 ml/200g BB tikus, kuning telur

puyuh 1 ml/200g BB tikus, dan fruktosa murni 1 ml/200g BB tikus

menggunakan spuit 10 ml, kemudian dimasukkan ke dalam gelas

ukur.

39

- Mencampurkan bahan menggunakan magnetic stirrer hingga

homogen.

(Octavia dkk, 2017).

Sedangkan untuk persiapan bawang hitam :

1) Mengupas kulit dan membersihkan bawang hitam yang telah dibeli

2) Menghaluskan bawang menggunakan mortar dan pestle hingga halus

3) Menimbang bawang hitam sesuai dosis yang dibutuhkan

4) Menambahkan air pada setiap dosis bawang hitam hingga volume

mencapai 3 ml, sehingga didapatkan:

a. Dosis I = 3 ml mengandung 240 mg bawang hitam

b. Dosis II = 3 ml mengandung 480 mg bawang hitam

c. Dosis III = 3 ml mengandung 960 mg bawang hitam (Fadlia, 2011).

4.7.4 Pembedahan Tikus

Proses pembedahan tikus dilakukan di Laboratoriun Parasitologi

Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya sesuai dengan prosedur.

40

4.7.5 Langkah-langkah Pelaksanaan Penelitian

Melakukan persiapan alat dan bahan untuk penelitian

Melakukan penimbangan berat badan awal semua tikus sebelum

dan setelah dilakukan masa adaptasi

Masa adaptasi dilakukan selama 7 hari dengan diberikan diet normal

(PARS) dan minum secara ad libitum

Randomisasi dengan metode

simple random sampling

K2

Selama 14 hari, sisa pakan ditimbang setiap hari untuk mengetahui

asupan makan tikus, berat badan tikus ditimbang seminggu sekali

untuk mengetahui berat badan tikus, sedangkan sekam diganti dua

kali dalam seminggu

Tikus yang sudah diberikan perlakuan

dipuasakan selama 12 jam

Melakukan pembedahan dan pengambilan

sampel darah

Analisa Data

K1 P1 P2 P3

41

4.7.6 Prosedur Pemberian Diet Tinggi Lemak dan Fruktosa

a. Pemberian sonde diet tinggi lemak dan fruktosa serta sonde

bawang hitam dilakukan setelah masa adaptasi yaitu pada hari ke-

8 dan diberikan selama 14 hari sesuai dengan perlakuan pada

setiap kelompok. Selama masa perlakuan tersebut, tikus tetap

diberikan diet normal dan minuman setiap hari secara ad libitum.

Diet normal diberikan sebanyak 40 gram/tikus/hari kepada tikus

pada semua kelompok.

b. Diet tinggi lemak dan fruktosa diberikan kepada tikus kelompok

kontrol positif (K2), dan kelompok perlakuan P1, P2, P3 melalui

sonde lambung dengan bahan yang terdiri dari minyak babi 2

ml/200g BB tikus, kuning telur puyuh 1 ml/200g BB tikus, dan

fruktosa murni 1 ml/200g BB tikus. Pemberian diet tinggi lemak

dan fruktosa dilakukan pada pukul 09.00 WIB (Pritaningtyas,

2016). Diberikan selama 14 hari karena berdasarkan hasil

penelitian Octavia, dkk (2017) menunjukkan bahwa pemberian

diet tinggi lemak dan tinggi fruktosa pada tikus selama 14 hari

dapat menginduksi tikus menjadi sindrom metabolik yang ditandai

dengan kondisi hiperglikemia, hipertrigliserida, dan memiliki HDL

yang rendah (Octavia dkk, 2017). Total volume pemberian diet

tinggi lemak dan fruktosa pada tikus dalam satu kali pemberian

adalah 4 ml sehingga tidak melebihi kapasitas maksimal lambung

tikus yaitu 5 ml (Lingga dkk, 2014).

42

4.7.7 Prosedur Pemberian Bawang Hitam

Bawang hitam diberikan kepada tikus pada kelompok perlakuan

P1, P2, dan P3 dengan dosis pada masing-masing kelompok yaitu 240

mg, 480 mg, dan 960 mg. Masing-masing dosis bawang hitam dilarutkan

dengan air hingga volume mencapai 3 ml karena jumlah sediaan normal

yang dapat diberikan pada tikus jika pelarutnya air tidak melampaui 4

ml/200 g BB dan volume tersebut tidak melebihi kapasitas maksimal

lambung tikus (BPOM RI, 2014; Lingga dkk, 2014). Pemberian bawang

hitam dilakukan pada pukul 16.00 WIB dengan cara disondekan

menggunakan sonde lambung. Bawang hitam diberikan 5 jam setelah

pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa yang disesuaikan dengan waktu

pengosongan lambung tikus yaitu 4 jam (Tarigan, 2001).

43

4.7.8 Prosedur Pengambilan Serum

Tikus dianastesi menggunakan kloroform dengan dosis 80 ml secara

inhalasi

Tikus dibiarkan lemas

Pemberian label pada tabung reaksi sesuai urutan

Pembedahan tikus

Pengambilan darah dari jantung sebanyak 3 ml dan dimasukkan ke dalam

tabung eppendorf

Tabung didiamkan selama kurang lebih tiga jam dalam posisi miring

Darah di sentrifus dengan kecepatan 3000 rpm dengan waktu 15 menit

Serum diambil dan disimpan dalam pendingin

(Laboratorium Parasitologi FKUB).

Proses pembedahan dan pengambilan serum darah tikus dilakukan oleh

tenaga ahli/ laboran.

44

4.7.9 Perlakuan terakhir pada Tikus

1. Setelah dilakukan pembedahan dan pengambilan darah pada tikus.

2. Tubuh tikus yang telah dilakukan pembedahan akan dibersihkan dan

dilakukan aseptik dengan alkohol 70%.

3. Kemudian mengubur tikus dengan kedalaman 60 cm

45

4.7.10 Prosedur Pengukuran Kadar Trigliserida serum

a. Pengukuran kadar trigliserida tikus dilakukan dengan metode

spektrofotometri menggunakan reagen Biosystems pada panjang gelombang

500 nm dengan langlah – langkah sebagai berikut :

1. Bawa Reagen ke suhu kamar.

2. Pipet ke dalam tabung uji berlabel:

Blank Standard Sample

Triglycerides Standard

(S)

- 10 µL -

Sample - - 10 µL

Reagen (A) 1.0 mL 1.0 mL 1.0 mL

3. Campur secara menyeluruh dan inkubasi tabung selama 15 menit pada

suhu kamar (16-25ºC) atau selama 5 menit pada suhu 37ºC.

4. Ukur absorbansi (A) dari Standar dan Sampel pada 500 nm terhadap

Blank. Warnanya akan stabil dengan waktu minimal 2 jam.

(Sumber: Laboratorium Patologi Klinik FKUB)

46

4.7.11 Pengumpulan Data

Pengumpulan data didapatkan dari hasil pengamatan berat badan

tikus yang diperoleh dari penimbangan yang dilakukan satu kali

seminggu, data sisa pakan tikus selama perlakuan yang diperoleh

dari hasil penimbangan berat pakan awal yang diberikan dikurangi

dengan berat pakan yang tersisa, dari hasil pengukuran trigliserida.

4.8 Analisa Data

Setelah semua data telah diperoleh, dilakukan analisa secara statistik dengan

menggunakan beberapa uji menggunakan SPSS (Statistical Package for the

Social Sciences) versi 16.0, yaitu uji kadar Trigliserida menggunakan uji statistik

Shapiro Wilk dikarenakan data terdistribusi normal. Setelah itu dilakukan uji

homogenitas dan uji beda kadar Trigliserida pada antar kelompok perlakuan

dengan menggunakan One-Way ANOVA. Kemudian, melakukan uj korelasi

untuk mengukur hubungan antara kadar trigliserida dan dosis bawang hitam 240

mg, 480 mg, dan 960 mg dengan menggunakan Uji Spearman dikarenakan data

tidak terdistribusi normal, dilanjutkan dengan uji korelasi linear sederhana. Uji

statistik dilakukan dengan tingkat kepercayaan 95% ( = 0,05), dikatakan

bermakna jika p<0,05.

47

BAB 5

HASIL PENELITIAN DAN ANALISA DATA

5.1 Karakteristik Sampel

Sampel yang digunakan dalam penelitian adalah hewan coba (tikus),

tikus yang digunakan sebagai sampel penelitian ini terdiri dari 25 ekor tikus yang

terbagi dalam lima kelompok perlakuan. Masing – masing pelakuan terdiri dari K

(-) = 5 ekor, K (+) = 5 ekor, P1 = 5 ekor, P2 = 5 ekor, dan P3 = 5 ekor, dan

semua tikus memiliki kriteria inklusi dengan karakteristik seperti terlihat pada

tabel 5.1 berikut ini :

Tabel 5.1 Karakteristik Sampel

Karakteristik K1 K2 P1 P2 P3

Jumlah 5 5 5 5 5

Jenis Rattus norvegicus Strain Wistar

Jenis kelamin Jantan

Umur 2-3 bulan

Warna bulu Putih

Keadaan umum

Aktif

Keterangan:

Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades

Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo

Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 240 mg

Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 480 mg

Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 960 mg

Berat badan hewan coba, diukur sebelum adaptasi untuk melihat berat

badan tikus yang sesuai dengan kriteria inklusi, saat perlakuan setiap seminggu

48

sekali dan asupan pakan dihitung setiap hari untuk melihat pengaruh perlakuan

pada tikus.

Tabel 5.2 Rata-rata Berat Badan Tikus Selama Penelitian

Berat badan K1 K2 P1 P2 P3

Rata-rata berat badan awal penelitian (gram) (Mean±SD)

160.4 ± 12.05

153.2 ± 3.63

173.2 ± 15.02

166.4 ± 12.99

175.2 ± 10.76

Rata-rata berat badan akhir penelitian (gram) (Mean±SD)

210.6 ± 20.13

202.8 ± 13.50

194.4 ± 25.32

200.6 ± 6.69

221.2 ± 27.99

50.2 49.6

21.2

34.2

46

0

10

20

30

40

50

60

K1 K2 P1 P2 P3

Penambahan Berat Badan

Keterangan:

Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades

Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo

Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 240 mg

Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 480 mg

Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 960 mg

Gambar 5.1 Penambahan Berat Badan Hewan Coba

Berdasarkan Tabel 5.2, untuk berat badan awal tikus didapatkan hasil uji

statistik Test of Normality dengan menggunakan Saphiro wilk test menunjukkan

49

bahwa data terdistribusi normal p = 0.066 (p>0.05) dan hasil uji statistik Test of

Homogenity of Variance menunjukkan berat badan awal tikus homogen untuk

semua kelompok perlakukan p = 0.452 (p>0.05).

Pada rata – rata berat badan akhir tikus didapatkan hasil uji statistik Test

of Normality dengan menggunakan Saphiro wilk test menunjukkan bahwa data

terdistribusi normal p = 0.143 (p>0.05) dan hasil uji statistik Test of Homogenity

of Variance menunjukkan berat badan awal tikus homogen untuk semua

kelompok perlakukan p = 0.265 (p>0.05). Hasil uji One Way Anova menunjukkan

nilai p = 0.306 (p>0.05) yang dapat diartikan bahwa tidak terdapat perbedaan

rata – rata berat badan akhir tikus.

5.2 Asupan Pakan dan Zat Gizi Hewan Coba

Tabel 5.3 Asupan diet tikus Asupan Rata – rata

Asupan Diet

Normal

(gram) ± SD

P

K1 34.5120 ± 1.81

0.001

K2 29.1540 ± 1.76

P1 26.1900 ± 1.49

P2 25.4300 ± 1.52

P3 32.4500 ± 0.93

Keterangan:

Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades

Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo

Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 240 mg

Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 480 mg

Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 960 mg

50

Berdasarkan tabel 5.2 untuk rata – rata asupan pakan tikus didapatkan hasil uji

statistik Test of Normality dengan menggunakan Saphiro wilk test menunjukkan

bahwa data terdistribusi normal p = 0.250 (p>0.05) dan hasil uji statistik Test of

Homogenity of Variance menunjukkan berat badan awal tikus homogen untuk

semua kelompok perlakukan p = 0.829 (p>0.05). Hasil uji One Way Anova untuk

rata – rata asupan diet normal menunjukkan nilai p = 0.001 (p<0.05) yang dapat

diartikan bahwa terdapat perbedaan rata – rata asupan pakan tikus, dan untuk

rata – rata asupan DTLF menunjukkan nilai p = 0.775 (p>0.05) yang dapat

diartikan bahwa tidak terdapat perbedaan rata – rata asupan diet tinggi lemak

fruktosa tikus. Perbedaan antar dua kelompok tersebut yaitu pada kelompok K1

dengan kelompok P1, kelompok K1 dengan kelompok P2, kelompok P1 dengan

kelompok P3, dan kelompok P1 dengan kelompok P3. Pada tabel dapat

disimpulkan dimana asupan makan pada kelompok K1 dan kelompok P3 lebih

banyak dibandingkan dengan kelompok lain.

Sehingga dapat ditampilkan dalam bentuk gambar dengan sebagai berikut

90.51

99.4191.06 89.54

109.2

0

20

40

60

80

100

120

K1 K2 P1 P2 P3

Tota

l Asu

pan

En

erg

i He

wan

Co

ba

(kka

l)

Kelompok Perlakuan

Rata - Rata Asupan Energi Hewan Coba (g)

51

Keterangan:

Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades

Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo

Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 240 mg

Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 480 mg

Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 960 mg

Gambar 5.2 Rata – rata Asupan Energi Hewan Coba

Rata – rata asupan energi PARS + DTLF pada hewan coba paling tinggi

adalah kelompok P3 dan yang paling rendah adalah kelompok P2, dan untuk

kelompok hewan coba yang mendapatkan perlakuan bawang hitam untuk

asupan energy PARS + DTLF dapat diurutkan dari yang paling tinggi hingga

paling rendah yaitu P3, P1, dan P2.

Pada total asupan energi diet normal dan diet tinggi lemak dan fruktosa

dilakukan uji statistik menggunakan uji One Way Anova karena data terdistribusi

normal dan homogen yang dapat diartikan terdapat perbedaan yang signifikan

antar kedua kelompok dengan nilai p=0,013. Selanjutnya dilakukan uji Pos Hoc

Tukey didapatkan hasil terdapat perbedaan pada kelompok K1 dengan P3, P1

dengan P3, namun tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok K2 dan

P3.

52

0,8

2.63 2.56 2.54 2.7

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

K1 K2 P1 P2 P3

Tota

l Asu

pan

Le

mak

He

wan

Co

ba

(g)

Kelompok Perlakuan

Rata - rata Asupan Lemak Hewan Coba (g)

Keterangan:

Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades

Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo

Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 240 mg

Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 480 mg

Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 960 mg

Gambar 5.3 Rata – rata Asupan Lemak Hewan Coba

Rata – rata asupan lemak PARS + DTLF pada hewan coba paling tinggi

adalah kelompok P3 dan yang paling rendah adalah kelompok K1, dan untuk

kelompok hewan coba yang mendapatkan perlakuan bawang hitam untuk

asupan lemak PARS + DTLF dapat diurutkan dari yang paling tinggi hingga

paling rendah yaitu P3, P2, dan P1.

Pada total asupan lemak diet normal dan diet tinggi lemak dan fruktosa

dilakukan uji statistik menggunakan uji Kruskal Wallis karena data tidak

terdistribusi normal dan homogen yang dapat diartikan terdapat perbedaan yang

signifikan antar kedua kelompok dengan nilai p=0,000. Selanjutnya dilakukan uji

53

Mann Whitney U didapatkan hasil terdapat perbedaan pada kelompok K1

dengan K2, K1 dengan P1, K1 dengan P2, K1 dengan P3, dab P2 dengan P3

Asupan Karbohidrat Hewan Coba (gram)

16,45 15,2813,87

16,85 13,51

0

5

10

15

20

25

K1 K2 P1 P2 P3

Perlakuan Hewan Coba

Tota

l Asu

pan

Kar

bo

hid

rat

Hew

an C

ob

a (g

ram

)

Keterangan:

Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades

Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo

Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 240 mg

Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 480 mg

Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 960 mg

Gambar 5.4 Rata – rata Asupan Karbohidrat PARS + DTLF Hewan Coba

Rata – rata asupan karbohidrat PARS + DTLF pada hewan coba paling

tinggi adalah kelompok P3 dan yang paling rendah adalah kelompok P2, dan

untuk kelompok hewan coba yang mendapatkan perlakuan bawang hitam untuk

asupan karbohidrat PARS + DTLF dapat diurutkan dari yang paling tinggi hingga

paling rendah yaitu P3, P1, dan P2.

Pada total asupan karbohidrat diet normal dan diet tinggi lemak dan

fruktosa dilakukan uji statistik menggunakan uji One Way Anova karena data

54

terdistribusi normal dan homogen yang dapat diartikan terdapat perbedaan yang

signifikan antar kedua kelompok dengan nilai p=0,009. Selanjutnya dilakukan uji

Pos Hoc Tukey didapatkan hasil terdapat perbedaan pada kelompok P1 dengan

P3 dan P2 dengan P3.

5.3 Kadar Trigliserida serum

Kadar serum trigliserida didapatkan hasil uji statistik Test of Normality

dengan menggunakan Saphiro wilk test menunjukkan bahwa data terdistribusi

tiak normal p = 0.035 (p<0.05) dan hasil uji statistik Test of Homogenity of

Variance menunjukkan kadar trigliserida homogen p = 0.769 (p>0.05), karena

data tidak terdistribusi normal maka dilakukan uji transformasi data terlebih

dahulu. Dari hasil transformasi data, kemudian diuji normalitas datanya, dan di

dapatkan hasil p = 0.403 (p>0.05) yang menunjukkan data terdistribusi normal,

dengan demikian maka analisa data dapat dilakukan dengan menggunakan uji

One Way Anova.

87,8 ± 31.7691,8 ± 42.1785,54 ± 36.3 77 ± 21.05

95,6 ± 52,16

0

20

40

60

80

100

120

K1 K2 P1 P2 P3

Kelompok Perlakuan

Rat

a -

Rat

a K

adar

Trig

lise

rid

a

Rerata Kadar Trigliserida

Keterangan:

Kontrol negatif (K1) : memberikan diet normal + sonde plasebo berupa aquades

Kontrol positif (K2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + sonde plasebo

Perlakuan 1 (P1) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 240 mg

55

Perlakuan 2 (P2) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 480 mg

Perlakuan 3 (P3) : memberikan diet normal + diet tinggi lemak dan fruktosa + bawang hitam

dosis 960 mg

Gambar 5.5 Rerata Kadar Trigliserida

Uji One Way Anova digunakan untuk mengetahui apakah terdapat

perbedaan kadar serum trigliserida tikus yang signifikan antar kelompok dengan

sebaran data yang tidak normal. Berdasarkan tabel uji One Way Anova

didapatkan nilai p = 0.984, sehingga p > 0.05 yang dapat diartikan bahwa tidak

terdapat perbedaan kadar trigliserida tikus.

Uji statistik selanjutnya yaitu uji korelasi antara dosis bawang hitam dan

kadar trigliserida pada kelompok perlakuan P1, P2, dan P3. Uji korelasi

menggunakan Uji Spearman dikarenakan ada salah satu data yang terdistribusi

tidak normal. Berdasarkan hasil uji analisis Spearman didapatkan hasil nilai p =

0,947 ( p > 0,05) yang menunjukkan tidak terdapat korelasi yang bermakna

antara dua variabel yang diuji yaitu dosis bawang hitam dan kadar trigliserida.

Kekuatan korelasi sangat lemah dengan nilai 0,019 dan arah korelasi

menunjukkan negatif yaitu semakin besar nilai dosis bawang hitam maka

semakin kecil nilai kadar trigliserida.

Selanjutnya dilakukan uji statistik regresi linier sederhana, didapatkan

nilai hasil p = 0,971 (p>0.05) sehingga dapat disimpulkan bahwa tidak ada

hubungan dosis bawang hitam dengan kadar trigliserida.

56

BAB 6

PEMBAHASAN

6.1 Karakteristik Sampel

Penelitian ini menggunakan true experimental dengan metode Post Test

Only Controlled Group Design. Subyek penelitian yang digunakan dalam

penelitian ini adalah tikus jantan (Rattus Norvegicus Strain Wistar) sebanyak 25

ekor yang dibagi menjadi 5 kelompok pelakuan. Pemilihan tikus untuk kelompok

perlakuan dipilih dengan teknik randomisasi yang memungkinkan setiap hewan

coba memiliki peluang yang sama. Tikus yang dipilih pun disesuaikan dengan

kriteria inklusi dengan tujuan mengurangi bias pada penelitian yaitu tikus berjenis

kelamin jantan, bulu putih bersih, berusia 2 – 3 bulan, berat badan tikus 150 –

200 gram, dan bergerak aktif. Menggunakan tikus berkelamin jantan yaitu agar

tidak terdapat pengaruh hormonal dan kehamilan, yaitu seperti hormone

esterogen pada tikus betina yang dapat mempengaruhi kerja lemak dan

kolesterol (Yusuf, 2005 dalam Sabrina, 2014)

Sebelum dilakukan perlakuan, hewan coba diadaptasi terlebih dahulu

selama 7 hari dan diberikan diet normal (diet PARS). Setelah 7 hari adaptasi,

hewan coba diberi perlakuan selama 14 hari yaitu dengan diet tinggi lemak dan

fruktosa melalui sonde yang bertujuan untuk meningkatkan kadar Trigliserida

darah dalam tikus, serta untuk variabel yang diuji adalah bawang hitam dengan

berbagai dosis pemberian yang berbeda. Diberikan diet tinggi lemak dan fruktosa

pada hewan coba diberikan berdasarkan DTLF pada penelitian Octavia karena

57

sudah terbukti dapat menginduksi hewan coba menjadi sindrom metabolik

(Octavia, 2017).

Setiap satu minggu satu kali tikus dilakukan penimbangan berat badan

untuk mengetahui perubahan berat badan tikus. Setelah dilakukan uji, data

terdistribusi normal dan data homogen sehingga dapat mengurangi bias. Pada

berat badan akhir, hasil uji menunjukkan tidak adanya perbedaan rata – rata

berat badan akhir pada tikus. Dibandingkan dengan rerata berat badan akhir

tikus pada kelompok kontrol positif (K2) yaitu 202,8 gram, tikus dengan

pemberian bawang hitam berat badan akhirnya lebih rendah yaitu P1 194,4 gram

dan P2 200,6 gram, namun pada P3 lebih tinggi yaitu 221,2 gram.

6.2 Pengaruh Pemberian DTLF dan bawang hitam terhadap berat badan

tikus

Pada kelompok kontrol negatif yang diberikan diet normal (K1) rata rata

penambahan berat badan 50,2 gram sedangkan pada kelompok kontrol positif

yang diberikan diet normal dan diet tinggi lemak dan fruktosa (K2) rata – rata

penambahan berat badannya adalah 49, 6 gram. Berdasarkan hasil statistik

pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa tidak terdapat perbedaan peningkatan

berat badan dibandingkan dengan yang diberi diet normal. Pada penelitian

Castillo dkk (2012), menunjukkan bahwa pemberian diet tinggi lemak dan tinggi

karbohidrat tidak signifikan meningkatkan berat badan dibandingkan yang diberi

diet normal. Dan juga pada penelitian Shabbir dkk (2016), pemberian diet tinggi

lemak tidak secara signifikan meningkatkan berat badan. Berbeda dengan

pernyataan Octavia dkk., (2017) yang menyatakan diet tinggi lemak dan fruktosa

dapat mempengaruhi metabolisme lemak dalam tubuh yang menyebabkan

timbunan lemak sehingga dapat meningkatkan berat badan. Menurut James

58

(2005), diet tinggi lemak akan menurunkan kadar hormone leptin. Semakin

rendah kadar leptin akan semakin meningkatkan nafsu makan. Dan juga

pemberian fruktosa dapat menurunkan kadar leptin (Tsalissavrina, 2006).

Pemberian fruktosa akan mempengaruhi otak yang nantinya akan memberikan

efek adiksi dan resistensi leptin sehingga konsumsi fruktosa dalam jangka yang

panjang akan mengakibatkan hilangnya sinyal kenyang di otak dan akan

berakibat meningkatkan asupan energi yang dapat menambah berat badan

(Prahastuti, 2011). Antara kelompok kontrol negatif yang hanya diberi diet normal

(K1) dan kelompok kontrol positif yang diberi diet normal dan diet tinggi lemak

dan fruktosa (K2) tidak terdapat perbedaan penambahan berat badan. Walaupun

K2 diberikan diet tinggi lemak dan fruktosa, penambahan berat badan pada K1

tidak jauh berbeda dapat disebabkan karena K1 tingkat asupan pakannya tinggi,

sehingga besarnya asupan makan yang masuk ke dalam tubuh akan

mempengaruhi kepada besarnya asupan energi yang kemudian disimpan

sebagai lemak dalam tubuh dan akhirnya akan berefek terhadap penambahan

berat badan dari hewan coba (Tsalissavrina, 2006).

Rata – rata penambahan berat badan pada kelompok perlakuan yang

diberikan bawang hitam (P1, P2, dan P3) jika dibandingkan dengan kelompok

control positif (K2) terdapat perbedaan yaitu penambahan berat badan pada P1,

P2, dan P3 lebih rendah dibandingkan K2 disebabkan karena pada kelompok

perlakuan yang diberikan diet tinggi lemak dan fruktosa diberikan bersamaan

dengan pemberian sonde bawang hitam. Hal tersebut bisa disebabkan pada

bawang hitam terdapat polifenol. Polifenol memiliki potensial untuk mencegah

obesitas dengan menghambat enzim yang berkaitan dengan metabolisme lemak

seperti pancreatic lipase, lipoprotein lipase atau dengan meregulasi hemeostasis

59

lipid (Chen, 2014). Pada penelitian yang dilakukan Chen (2014), pemberian

bawang hitam secara signifikan dapat menurunkan berat badan, sehingga dapat

disimpulkan bahwa bawang hitam memiliki efek anti-obesitas. Mekanisme

polifenol dalam menurunkan berat badan yaitu dengan meningkatkan gelombang

otak neurotransmitter dan metabolisme tubuh yang dapat meningkatkan energi

dan menurunkan nafsu atau selera maka, dan juga dapat meningkatkan

konsumsi oksigen dan oksidasi lemak yang pada akhirnya dapat membantu

menurunkan berat badan (Murase dkk, 2009).

Pada penelitian ini, kelompok perlakuan setelah diberikan bawang hitam

yang memiliki rata – rata penambahan berat badan dari yang paling rendah

adalah P1 dan paling tinggi adalah P3. Berdasarkan teorinya bawang hitam

dapat menurunkan berat badan, yang seharusnya penambahan berat badan

pada kelompok P2 dan P3 lebih sedikit jika dibandingkan dengan P1. Hal ini

dapat berkaitan dengan pada kelompok P3 mengonsumsi pakan diet normal

lebih tinggi dibandingkan dengan P1 dan P2. Sehingga P3 mengalami

penambahan berat badan yang paling tinggi dibandingkan kelompok perlakuan

yang lain.

6.3 Pengaruh Pemberian DTLF dan Bawang Hitam terhadap Kadar

Trigliserida

Pada kelompok kontrol negatif yang hanya diberikan diet normal (K1)

memiliki kadar trigliserida 95,6 mg/dl dan pada kelompok kontrol positif yang

diberikan diet normal dan diet tinggi lemak dan fruktosa (K2) kadar trigliseridanya

adalah 77 mg/dl. Sehingga kelompok K1 kadar trigliseridanya lebih tinggi

dibandingkan dengan kelompok K2, yang dapat disimpulkan tidak ada

perbedaan antara kelompok yang diberi diet normal dan kelompok yang

60

diberikan diet tinggi lemak dan fruktosa. Namun, kadar trigliserida pada kelompok

K1 masih pada kadar normal trigliserida tikus yaitu 26 – 145 mg/dl (Bresnahan,

2004). Pada penelitian Octavia dkk., (2017), kadar trigliserida pada tikus setelah

pakan tinggi lemak tinggi fruktosa menunjukkan tidak terdapat perbedaan

perubahan kadar trigliserida tikus yang bermakna. Pada penelitian yang

dilakukan Al-Numair (2009), kadar trigliserida pada tikus setelah pakan tinggi

lemak menunjukkan tidak terdapat perbedaan perubahan kadar trigliserida pada

tikus.

Menurut Faisal Baraas (2003), konsumsi diet tinggi lemak dan karbohidrat

akan meningkatkan jumlah lemak yang terdeposit pada jaringan adipose.

Nantinya setiap jumlah lemak dan karbohidrat yang berlebih dan tidak digunakan

oleh tubuh akan disimpan di jaringan adipose dalam bentuk trigliserida. Yang

nantinya jika tubuh memerlukan trigliserida, trigliserida tersebut akan dihidrolisis

menjadi asam lemak bebas dan gliserol. Lalu asam lemak bebas akan

mengalami oksidasi untuk menghasilkan energi dan melepasnya ke dalam

pembuluh darah. Asupan energi yang berlebih maupun asupan lemak dari

makanan pada kelompok diet tinggi lemak akan mengakibatkan aktivitas

lipogenesis meningkat, serta asam lemak bebas yang terbentuk akan semakin

banyak. Selanjutnya akan terjadi mobilisasi asam lemak bebas dari jaringan

lemak ke hepar lalu berikatan dengan gliserol membentuk trigliserol (TG). Maka,

semakin tinggi pengonsumsian lemak maka akan semakin tinggi pula sintesis

triasilgliserol di hepar yang menyebabkan semakin tinggi juga kadar trigliserida

dalam darah (Myers, 2003). Kadar trigliserida akan meningkat pada kelompok

yang diberi diet tinggi karbohidrat dikarenakan akan meningkatkan kadar fruktosa

2,6 bifosfat lalu fosfofruktokinase-1 akan lebih aktif dan akan merangsang reaksi

61

glikolisis. Peningkatan reaksi glikolisis akan mengakibatkan peningkatan glukosa

yang diubah menjadi asam lemak bebas. Asam lemak bebas nantinya akan

membentuk Triasilgliserol (TG) bersama – sama dengan gliserol. Sehingga

pengonsumsian tinggi fruktosa akan meningkatkan kadar TG di dalam darah

(Tsalissavria dkk., 2006).

Pada penelitian ini walaupun kadar trigliserida pada kelompok K2 lebih

rendah dibandingkan K1, tetapi kadar trigliserida pada K2 masih dalam taraf

normal yaitu pada range 26 – 145 mg/dl. Dapat terjadi karena pemberian diet

tinggi lemak dan fruktosa pada kelompok kontrol positif dan kelompok perlakuan

yaitu hanya dilakukan selama 14 hari. Menurut penelitian yang dilakukan

Suliburska (2013) dan Chang et al., (2017), untuk meningkatkan trigliserida

dibutuhkan waktu 6 minggu masa perlakuan pemberian diet tinggi lemak dan

fruktosa. Pada penelitian yang dilakukan Matos (2005) dan penelitian yan di

lakukan Ble-Castillo et al., (2012) , untuk meningkatkan kadar trigliserida

dilakukan selama 8 minggu. Sedangkan untuk dapat meningkatkan trigliserida

secara signifikan diperlukan waktu yang lebih lama yaitu 6 – 8 minggu (Coelho et

al., 2011; Altunkaynak, 2005). Sedangkan dalam penelitian yang dilakukan

Tsalissavria dkk., (2006), kadar trigliserida yang diberikan diet tinggi lemak dan

tinggi karbohidrat secara signifikan meningkat dengan pemberian 12 minggu.

Pada kelompok K2 yang hanya diberi diet tinggi lemak dan fruktosa kadar

trigliserida nya lebih rendah dibandingkan kelompok perlakuan P1, P2, dan P3

yang diberikan diet tinggi lemak dan fruktosa dan bawang hitam. Pada kelompok

perlakuan yang diberikan bawang hitam (P1, P2, dan P3) didapatkan hasil

bahwa tidak terdapat perbedaan pada kadar trigliserida tikus. Hal ini berbanding

terbalik dengan penelitian yang dilakukan oleh Seo Yeong-Ju dkk., (2009) yang

62

menyatakan bahwa bawang hitam secara signifikan dapat menurunkan kadar

trigliserida. Hal ini di karenakan zat gizi allicin yang menjadi komponen aktif

dalam penanganan efek hipolipidemia. Pada penelitian Chang Wei-Tang dkk.,

(2017), mengatakan bahwa tikus yang diberikan diet tinggi lemak dan bawang

hitam secara signifikan dapat menurunkan kadar serum trigliserida. Pada

penelitian yang dilakukan Kim dkk., (2011), ekstrak bawang hitam secara

signifikan dapat meningkatkan profil lipid dengan menurunkan kadar serum

trigliserida. Dan juga pada penelitian Chang et al., (2017), bawang hitam secara

signifikan dapat menurunkan kadar serum trigliserida. Namun, kadar trigliserida

pada kelompok perlakuan P1, P2, dan P3 masih pada dalam kadar normal

trigliserida tikus yaitu 26 – 145 mg/dl.

Bawang hitam sendiri berasal dari bawang putih. Bawang putih memiliki

senyawa yang mengandung sulfur allin, yang diubah menjadi bahan aktif yaitu

allicin. Senyawa ini memiliki efek menghambat enzim kunci yang terlibat dalam

biosintesis kolesterol, seperti HMG CoA reduktase. Efek hipokolesterolemik

bawang putih diberikan dengan menurunkan biosintesis kolestrol hati, sedangkan

efek menurunkan trigliserida tampaknya disebabkan oleh penghambatan sintesis

asam lemak oleh enzim malic, sintase asam lemak dan glukosa-6-fosfat

dehidrogenase. Di antara senyawa larut air sallylcysteine, s-ethylcysteine dan s-

propylcysteine mengurangi sintesis kolesterol hingga 40-60%. Senyawa sulfur

larut seperti diallylsulphide, dipropylsulphide dan di-propyldisulphide

menghambat sintesis kolesterol sebesar 10–15% (Choudhary, Prema Ram et al.,

2013). Bawang hitam juga mengandung polifenol dan flavonoid yang berfungsi

sebagai antioksidan. Peningkatan asam polifenol berhubungan dengan

peningkatan total asam dari bawang hitam. Pemanasan pada komponen fenolik

63

meningkatkan fraksi dari asam polifenol, dimana hal tersebut dapat menurunkan

ester, glikosida, dan fraksi ikatan, yang menyebabkan peningkatan fenol dalam

bentuk bebas. Bawang putih yang mengalami pengolahan dapat menyebabkan

perubahan komponen bioaktif seperti polifenol, flavonoid yang berhubungan

dengan tipe dan durasi pemanasan (Gorinstein et al., 2008).

Pada penelitian ini hewan coba diberi perlakuan bawang hitam selama 14

hari (2 minggu). Sedangkan menurut Chang et al., (2017), bawang hitam secara

signifikan dapat menurunkan kadar trigliserida dalam masa perlakuan 6 minggu.

Pada penelitian Kim (2011), bawang hitam juga dapat menurunkan kadar

trigliserida serum dengan lama pemberian bawang hitam yaitu 5 minggu.

Hasil penelitian pemberian sonde bawang hitam terhadap tikus jantan

Rattus norvegicus strain wistar belum dapat mencegah peningkatan kadar

trigliserida secara signifikan. Hal ini disebabkan karena kurangnya lama waktu

pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa ataupun lama waktu pemberian bawang

hitam. Oleh karena itu, masih perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai

pemberian bawang hitam yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa dengan

jangka waktu pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa yang lebih lama, dan

dosis yang efektif agar dapat menurunkan kadar serum trigliserida tikus.

6.4 Implikasi di Bidang Gizi

Perlunya dilakukan langkah penelitian lebih lanjut dengan menggunakan

bahan penelitian yang sama berupa bawang hitam. Pembuatan bawang hitam

lebih baik dilakukan sendiri yaitu pemanasan selama 21 hari, agar dapat

mengontrol suhu, kualitas, dan agar tidak ada terjadinya bias pada penelitian.

Penelitian selanjutnya dapat dilakukan dengan menggunakan dosis yang

64

berbeda dan lama pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa lebih lama

dibandingkan penelitian ini.

6.5 Keterbatasan Penulis

Keterbatasan dalam penelitian yang telah berlangsung, yaitu berupa :

1) Dosis bawang hitam yang sudah ditentukan belum memberikan efek

secara nyata yaitu untuk menurunkan kadar trigliserida.

2) Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah Post Test Only

Control Group Design sehingga tidak bisa melihat kadar trigliserida awal

sebelum dilakukan perlakuan

3) Pada penelitian ini pemberian diet tinggi lemak dan fruktosa diberikan

selama 14 hari, sehingga belum menghasilkan hasil yang signifikan untuk

meningkatkan kadar trigliserida pada tikus.

65

BAB 7

Kesimpulan dan Saran

7.1 Kesimpulan

1. Tidak terdapat hubungan pemberian bawang hitam dengan kadar

trigliserida tikus putih (Rattus Norvegicus strain wistar) jantan yang diberi

diet tinggi lemak dan fruktosa

2. Rata – rata asupan pakan tikus semua kelompok berbeda secara

signifikan. Rata – rata asupan pakan tertinggi adalah kelompok K1 yang

hanya mendapatkan diet normal, sementara asupan paka terendah

adalah pada kelompok P2 yang mendapatkan diet normal, diet tinggi

lemak dan fruktosa, serta bawang hitam dosis 480mg.

3. Rerata kadar trigliserida tikus putih (Rattus Norvegicus strain wistar)

jantan yang diberi diet normal adalah 95,6 mg/dl dan tikus yang diberikan

diet tinggi lemak dan fruktosa memiliki rerata kadar trigliserida 77 mg/dl.

4. Rerata kadar trigliserida tikus putih (Rattus Norvegicus strain wistar)

jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa serta pemberian

perlakukan sonde bawang hitam dengan dosis 240 mg adalah 85,54

mg/dl

5. Rerata kadar trigliserida tikus putih (Rattus Norvegicus strain wistar)

jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa serta pemberian

perlakukan sonde bawang hitam dengan dosis 480 mg adalah 91,8 mg/dl

66

6. Rerata kadar trigliserida tikus putih (Rattus Norvegicus strain wistar)

jantan yang diberi diet tinggi lemak dan fruktosa serta pemberian

perlakukan sonde bawang hitam dengan dosis 960 mg adalah 87,8 mg/dl

7. Pemberian bawang hitam tidak signifikan dapat menurunkan kadar

trigliserida pada tikus (Rattus Norvegicus strain wistar) jantan yang diberi

diet tinggi lemak dan fruktosa.

7.2 Saran

1. Diperlukan menggunakan metode penelitian pre-post test group

control untuk menguji kadar trigliserida pada tikus sebelum diberikan

perlakuan dan untuk melihat homogenitas data sebelumnya.

2. Meningkatkan dosis bawang hitam untuk memperbesar kemungkinan

untuk menurunkan kadar trigliserida.

3. Memperpanjang jangka waktu pemberian diet tinggi lemak dan

fruktosa untuk meningkatkan kadar trigliserida, disarankan dilakukan

pemberian selama 5 – 8 minggu.

67

67

DAFTAR PUSTAKA

Adam, John M.F. 2006. Dislipidemia dalam : Aru W. Sudoyo, editor : Buku Ajar

Ilmu Penyakit Dalam. edisi 4. Jakarta : Pusat Penerbitan FK UI. Hal 1926-

31.

Adiputro, D. L., Widodo, M. A., Romdoni, R., & Sargowo, D. 2013. Extract of

mangosteen increases high density lipoprotein levels in rats fed high lipid.

Jurnal Universa Medicina, 32(1), 37–43.

Aganović, I., Dušek, T. 2005. Pathophysiology of Metabolic Syndrome. In: Topić,

E., Brguljan, P.M., Blaton, V. New Trends In Classification, Monitoring

and Management of Metabolic Syndrome. Forum of the European

Societies of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. Croatia; 1:1-5.

Arthur SL. 2009. Dislipidemia and Risk of Coronary Heart Disease : Role of

Lifestyle Approaches for its Management. American Journal of Lifestyle

Medicine; 3(4) : 257-273

Baroroh, Y. M. 2013. Pengaruh Pemberian Diet Tinggi Lemak terhadap Profil

Lipid dan Serum MDA (malonaldehida) pada Tikus Percobaan. Bogor :

Fakultas Ekologi Manusia Institut Pertanian Bogor.

Brooks. G, Butel. J, dan Morse. S. 2005. Mikrobiologi Kedokteran. Salemba

Medika. Jakarta

68

Castillo’n, PG, et al. 2007. Intake of fried foods is associated with obesity in the

cohort of Spanish adults from the European Prospective Investigation into

Cancer and Nutrition. Am J Clin Nutr Vol.86:198–205. 9

http://www.ajcn.org/content/86/1/198.f ull.pdf.

Castillo, J. L., Aparicio-Trapala, M. A., Juárez-Rojop, I. E., Torres-Lopez, J. E.,

Mendez, J. D., Aguilar-Mariscal, H., Diaz-Zagoya, J. C. 2012. Differential

effects of high-carbohydrate and high-fat diet composition on metabolic

control and insulin resistance in normal rats. International Journal of

Environmental Research and Public Health, 9(5), 1663–1676.

https://doi.org/10.3390/ijerph9051663

Chao, J. S., Einosuke, L., Mami, M., & Katsunori, T. 2007. Processed Black

Garlic ( Allium sativum ) Extracts Enhance Anti-Tumor Potency against

Mouse Tumors. Medicinal and Aromatic Journal of Plant Science and

Biotechnology, 1(2), 278–281.

Chang, W., Shiau, D., Cheng, M., Tseng, C., & Chen, C. 2017. Black Garlic

Ameliorates Obesity Induced by a High-fat Diet in Rats, 5(10), 736–741.

https://doi.org/10.12691/jfnr-5-10-3

Chen, Y. C., Kao, T. H., Tseng, C. Y., Chang, W. T., & Hsu, C. L. 2014.

Methanolic extract of black garlic ameliorates diet-induced obesity via

regulating adipogenesis, adipokine biosynthesis, and lipolysis. Journal of

Functional Foods, 9(1), 98–108. https://doi.org/10.1016/j.jff.2014.02.019

69

Choi, I. S., Cha, H. S., & Lee, Y. S. 2014. Physicochemical and Antioxidant

Properties of Black Garlic, 16811–16823.

https://doi.org/10.3390/molecules191016811

Decroli eva., et al., 2008. The Profile of Diabetic Ulcer on Hospitalized Patiens in

Internal Medicine Departement, Dr M Djamil Hospital, Padang. The Journal

of the Indonesian Medical Association Volume 58 Nomor 1 pp 4

Eckel RH, Grundy SM, Zimmet P. The Metabolic Syndrome. Lancet. 2005;

365:1415-28

Ekananda N. 2015. Bay Leaf in Dyslipidemia Therapy. 2015;4:64-69.

Gentilcore, D., Chaikomin, R., Jones, K. L., Russo, A., Feinle-Bisset, C., Wishart,

J. M., … Horowitz, M. 2006. Effects of fat on gastric emptying of and the

glycemic, insulin, and incretin responses to a carbohydrate meal in type 2

diabetes. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 91(6), 2062–

2067. https://doi.org/10.1210/jc.2005-2644

Gill dan J.M. Harrington.2005. Buku Saku Kesehatan Kerja Edisi 3.

Penerbit Buku Kedokteran EGC. Jakarta

Grundy,M.S.,Cleeman I.J.,Merz C.N.B et al.,. 2004. NCEP Report: Implications of

Recent Clinical Trials for the national Cholesterol Education Program Adult

Treament Panel III Guidelines.pp. 227-34. Diakses : 18 Maret 2011 dari

http://www.nhlbi.nih.gov/guidelines/cholesterol/atp3upd04.pdf.

70

Gupta PK, Roy JK, Prasad M. 2001. Single nucleotide polymorphisms: A new

paradigm for molecular marker technology and DNA polymorphism

detection with emphasis on their use in plants. Current Sci 80:524–535.

Guyton A. C., Hall J. E. 1997. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi 9. Jakarta :

EGC. P. 208 – 212, 219 – 223, 277 – 282, 285 – 287.

Guyton, A.C. and Hall, J.E., 2006. Textbook of Medical Physiology. 11th ed.

Philadelphia, PA, USA: Elsevier Saunders.

Ha, A. W., Ying, T., & Kim, W. K. 2015. The effects of black garlic (Allium

satvium) extracts on lipid metabolism in rats fed a high fat diet. Nutrition

Research and Practice, 9(1), 30–36. https://doi.org/10.4162/nrp.9.1.30

Hartwig, MS. 2012. Penyakit Serebrovaskular. Dalam: Price SA, Wilson LM,

penyunting. Patofisiologi Konsep Klinis Proses-Proses Penyakit. Edisi ke-6.

(diterjemahkan oleh: Pendit B.U., Hartanto, H., Wulansari P., Mahanani,

D.A.). Jakarta: EGC. hlm. 1105-32

Hendra, P., Wijoyo, Y., Fenty & Dwiastuti, R. 2011. Optimasi Lama Pemberian

Dan Komposis Formulasi Sediaan Diet Tinggi Lemak Pada Tikus Betina,

Lembaga Penelitian Dan Pengabdian Masyarakat, Universitas Sanata

Dharma, Yogyakarta, online,

(http://www.usd.ac.id/lembaga/lppm/detail_penelitian.php?bidang=a&kod

e=b3&id=5&id_bi=3&noid=156 , diakses 15 Desember 2012)

Hunt, J. 1983. Mechanisms and disorders of gastric emptying. Annu Rev Med,

34(2), 219–229. https://doi.org/10.1146/annurev.me.34.020183.001251

71

James WP, Haslam DW. 2005. Obesity Lancet Neurol 2005;366:1197–1209

Jung, Y. M., Lee, S. H., Lee, D. S., You, M. J., Chung, I. K., Cheon, W. H., … Ku,

S. K. 2011. Fermented garlic protects diabetic, obese mice when fed a high-

fat diet by antioxidant effects. Nutrition Research, 31(5), 387–396.

https://doi.org/10.1016/j.nutres.2011.04.005

Kim, I., Kim, J., Hwang, Y., Hwang, K., Om, A., Kim, J., & Cho, K. 2011. The

beneficial effects of aged black garlic extract on obesity and hyperlipidemia

in rats fed a high-fat diet. Journal of Medicinal Plants Research, 5(14),

3159–3168.

Lee, Y.-M., Gweon, O.-C., Seo, Y.-J., Im, J., Kang, M.-J., Kim, M.-J., and Kim,

J.-I. 2009. Antioxidant effect of garlic and aged black garlic in animal model

of type 2 diabetes mellitus. Nutrition Research and Practice, 3(2), 156.

https://doi.org/10.4162/nrp.2009.3.2.156

Lozano, I., Van der Werf, R., Bietiger, W., Seyfritz, E., Peronet, C., Pinget, M., …

Dal, S. 2016. High-fructose and high-fat diet-induced disorders in rats:

impact on diabetes risk, hepatic and vascular complications. Nutrition &

Metabolism, 13(1), 15. https://doi.org/10.1186/s12986-016-0074-1

Maris, F. N. (2015). Pengaruh Pemberian Ekstrak Tauge (Vigna Radiata)

terhadap Kadar Serum Trigliserida pada Tikus Wistar Jantan yang Diinduksi

Kuning telur. Jember: Fakultas Kedokkteran Universitas Jember.

Matos, S. L., De Paula, H., Pedrosa, M. L., Dos Santos, R. C., De Oliveira, E. L.,

Júnior, D. A. C., & Silva, M. E. 2005. Dietary models for inducing

72

hypercholesterolemia in rats. Brazilian Archives of Biology and Technology,

48(2), 203–209. https://doi.org/10.1590/S1516-89132005000200006

Merindasari, Neny. “Pengaruh Pemberian Jus Biji Pepaya (Carica Papaya L)

terhadap kadar kolesterol total tikus Sprague Dawley Dislipidemia.” 2013.

McCowen K, Malhotra A Bistrian BC. 2001. Stress induced Hyperglicemia.

Critical Care Clinic. Vol 17 (1) p.107-124. Murray RK, Granner DK, Mayes

PA, Rodwell VM. Biokimia harper. Edisi 27. Jakarta: EGC; 2009. p.239-49.

Niza, Renti S., et al. 2015. Hubungan Lama Pemberian Diet Aterogenik terhadap

Kadar Trigliserida Rattus novergicus Jantan Strain Wistar. Jom FK Volume

2 No. 2 Oktober 2015.

Octavia, Z. F., Djamiatun, K., & Suci, N. 2017. Pengaruh pemberian yogurt

sinbiotik tepung pisang tanduk terhadap pro fi l lipid tikus sindrom metabolik,

13(4), 159–169.

Prahastuti, S., 2011, Konsumsi Fruktosa Berlebihan dapat Berdampak Buruk

bagi Kesehatan Manusia, JKM, 10 (2) : 173-189.

Price, Sylvia A., Lorraine, Wilson. 1994. Patofisiologi : Konsep Klinis Proses –

Proses Penyakit. Jakarta : EGC

Rachmandiar R. Perbedaan pengaruh jus kacang merah, yoghurt susu dan

yoghurt kacang merah terhadap kadar kolesterol total dan trigliserida serum

pada tikus dislipidemia. (skripsi). Semarang: Fakultas Kedokteran

Universitas Diponegoro; 2012.

73

Ramadhani, azhoranezar. 2014. Perbedaan Kadar Trigliserida Sebelum dan

Setelah Pemberian Sari Bengkuang (Pachyrrhizus erosus) pada Wanita.

Semarang: Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro.

Rondonuwu RE, Setijowati N, Sarwono I. Efek pemberian ekstrak biji srikaya

(Annona squamosa) terhadap kadar trigliserida tikus (Rattus norvegicus)

galur wistar dengan diet aterogenik. [Skripsi]. Universitas Brawijaya; 2013.

Rukmini, Ambar. 2007. Regenerasi Minyak Goreng Bekas dengan Arang Sekam

Menekan Kerusakan Organ Tubuh. Seminar Nasional Teknologi 2007 ( SNT

2007 ).

Rumanti, Rizna T. “Efek Propolis terhadap Kadar Kolesterol Total pada Tikus

Model Tinggi Lemak.” 2011

Salmenniemi U, Ruotsalainen E, Pihlajamaki J. Multiple abnormalities in glucose

and energy metabolism and coordinated changes in levels of adiponectin,

cytokines, and adhesion molecules in subjects with metabolic syndrome.

Circulation. 2004; 110 (25): 3842-48.

Sasaki, J., Chao, Einosuke, L., Mami, M., & Katsunori, T. 2007. Processed Black

Garlic ( Allium sativum ) Extracts Enhance Anti-Tumor Potency against

Mouse Tumors. Medicinal and Aromatic Journal of Plant Science and

Biotechnology, 1(2), 278–281.

Seo, Y.-J., Gweon, O.-C., Im, J.-E., Lee, Y.-M., Kang, M.-J., Kim, J.-I. 2009.

Effect of Garlic and Aged Black Garlic on Hyperglycemia and

74

Dyslipidemia in Animal Model of Type 2 Diabetes Mellitus. Preventive

Nutrition and Food Science, 2009, 14(1), 1–7.

Shabbir, F., Khan, S., Yousaf, M. J., Khan, M. A., & Rajput, T. A. 2016.

Comparison of Effect of High Fat Diet Induced Obesity and Subsequent

Atorvastatin Administration on Different Anthropometric Measures in

Sprague Dawley Rats. High Fat Diet Induced Obesity And Atorvastatin

Pak Armed Forces Med J, 66(5), 699–704.

Simanjuntak K. Pengaruh diet tinggi lipid terhadap timbulnya penyakit. Bina

Widya. 2011; 4(22): 191-9.

Srikanthan, K., Feyh, A., Visweshwar, H., Shapiro, J. I., & Sodhi, K. 2016.

Systematic Review of Metabolic Syndrome Biomarkers : A Panel for Early

Detection , Management , and Risk Stratification in the West Virginian

Population, 13. https://doi.org/10.7150/ijms.13800

Standl, E. 2005. Artiology and consequences of the metabolic syndrome. Eur

Heart J.pp.7(supplement):10-13

Suliburska, J. 2013. A six-week diet high in fat, fructose and salt and its influence

on lipid and mineral status, in rats. Acta Scientiarum Polonorum,

Technologia Alimentaria, 12(2), 195–202. https://doi.org/10.1007/s13105-

013-0276-1

Tavares, P., Gelaleti, R., Picolo, F., Beatriz, S., Prata, M., Marini, G. Campos, P.

A. De. 2015. Metabolic Syndrome : Consensus and Controversy : State of

75

the Art. Journal of Endocrine and Metabolic Diseases, 5(September), 124–

130. https://doi.org/10.4236/ojemd.2015.59016

Thaman R, & Arora GP. 2013. Metabolic Syndrome: Definition and

Pathophysiology– the discussion goes on! Metabolic Syndrome: Definition

and Pathophysiology– the discussion goes on! Introduction and Definition. J

Phys Pharm Adv Journal of Physiology and Pharmacology Advances

THAMAN AND ARORA J. Phys. Pharm. Adv. J. Phys. Pharm. Adv, 3(33),

48–5648. https://doi.org/10.5455/jppa.20130317071355

Tsalissavrina, Iva., Djoko Wahono, Dian H. 2006. PENGARUH PEMBERIAN

DIET TINGGI KARBOHIDRAT DIBANDINGKAN DIET TINGGI LEMAK

TERHADAP KADAR TRIGLISERIDA DAN HDL DARAH PADA Rattus

novergicus galur wistar. Ilmu Gizi Kesehatan Fakultas Kedokteran

Universitas Brawijaya, Laboratorium Ilmu Penyakit Dalam Fakultas

Kedokteran Universitas Brawijaya/ RSU Dr. Saiful Anwar Malang, XXII.

Retrieved from http://jkb.ub.ac.id/index.php/jkb/article/viewFile/229/220

Wang, D., Feng, Y., Liu, J., Yan, J., Wang, M., Changlong, J. S. 2010. Black

Garlic ( Allium sativum ) Extracts Enhance the Immune System.

Medicinal and Aromatic Plant Science and Biotechnology, 2010, 4(1),

37–40.

Wibowo. 2009. Pengaruh Pemberian Seduhan Kelopak Rosela (Hibiputih Scus

Sbdariffa) Terhadap Kadar Trigliserida Darah Tikus. Pengaruh Pemberian

Seduhan Kelopak Rosela (Hibiputih Scus Sbdariffa) Terhadap Kadar

Trigliserida Darah Tikus.

76

Wulandari, Widya Ayu and Pramono, Adriyan. 2014. PENGARUH PEMBERIAN

YOGHURT KORO PEDANG (Canavalia ensiformis) TERHADAP KADAR

TRIGLISERIDA SERUM TIKUS SPRAGUE DAWLEY

HIPERTRIGLISERIDEMIA. Undergraduate thesis, Diponegoro University.

Yusuf, A Muri. 2014. Metode Penelitian Kuantitatif Kualitatif dan Penelitian

Gabungan. Jakarta: Prenadamedia Gro

77