Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

download Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

of 19

Transcript of Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    1/19

    BAB I

    TINJAUAN PUSTAKA

    I.1 Tinjauan Botani

    I.1.1 KlasifikasiMenurut Syukur dan Hernani (2002) dalam Hasaanah

    (2009) tumbuhan Centella asiatica(L) Urban dapat diklasifikasikan

    sebagai berikut:

    Divisio : Spermatophyta

    Kelas : Dicotyledonae

    Ordo : Umbellalesamily : Umbelliferae

    !enus : "entela

    Spesies : Centella asiatica(L) Urban

    I.1.2 Deskripsi

    Heni (2005) dalam Hasaanah (2009) menjelaskan

    bahwa pegagan (Centella asiatica) merupakan tanaman

    herba tahunan yang tumbuh menjalar dan berbunga

    sepanjang tahun. Tanaman akan tumbuh subur bila tanahdan lingkungannya sesuai hingga dijadikan penutup

    tanah. Termasuk tanaman terna menahun tidak

    berbatang mempunyai rimpang pendek dan st!l!n"st!l!n

    yang merayap panjang #0"$0 %m. &kar keluar dari setiap

    buku banyak per%abangan membentuk tumbuhan baru

    daun tunggal bertangkai panjang tersusun dalam r!set

    dan akar yang terdiri dari 2"#0 helai daun. Helaian daun

    berbentuk ginjal tepi bergerigi atau beringgit sedikit

    berambut diameter #"' %m. unga tersusun berbentuk

    payung tunggal atau "5 bunga keluar dari ketiak daun

    dan berwarna merah muda atau putih. uahnya ke%il

    bergantung berbentuk l!nj!ng pipih panjang 2"25 mm

    baunya wangi dan rasanya pahit. *aunnya dapat

    dimakan sebagai lalap untuk penguat lambung. +egagan

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    2/19

    dapat diperbanyak dengan pemisahan st!l!n dan biji

    (,asmadiwati dan Hetty, 200 citHasaaanah 2009).-inart! dan Surbakti (200) dalam Hasaanah

    (2009) menjelaskan bahwa buah pegagan berukuran

    ke%il panjang 2 " 25 mm lebar ' mm berbentuk l!nj!ng

    atau pipih dan menggantung. Selain itu rasanya pahit

    berdinding agak tebal kulitnya keras berlekuk dua

    berusuk jelas dan berwarna kuning. &karnya berbentuk

    rimpang dengan banyak st!l!n berkel!mp!k dan lama

    kelamaan meluas hingga menutupi tanah merayap dan

    berbuku"buku. &kar berwarna agak kemerah"merahan.

    !ambar # $umbuhan pegagan centella asiatica (Linn%) Urban

    (&asaanah' *)

    I.1.3 Sinonim

    Centella coroacea +annfd%' Hydrocotyle asiatica L%' H. lunata

    Lamk' H. Lurida&ance%' Trisanthus cochichinensisLour (,adan -O.

    /0' #)%

    I.1. Nama Daera!

    .enurut ,adan -O. /0 (#) nama daerah dari Centella asiatica

    adalah

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    3/19

    Sumatera : -egaga (1ceh)' daun kaki kuda' daun penggaga'

    rumput kaki kuda' pegagan' kaki kuda (.elayu)'

    pegago' pugago (.inangkabau)

    2a3a : "o3et gompeng' antanan' antanan bener' antanan

    gede (Sunda)' gagan4gagan' gangganan' kerok

    batok' pantego3ang' panigo3ang' rending' calingan

    rambut' pacul go3ang (2a3a)' gan4gagan (.adura)

    +usa $enggara : ,ebele (Sadak)' paiduh' panggaga (,ali)' kelai lere

    (Sa3o)

    .aluku : Saro3ati (&almahera)' koloditi manora ($ernate)

    Sula3esi : pagaga' 3isu43isu (.aksar)' cipubala3o (,ugis)'

    hisu4hisu (Salayar)-apua : Dogauke' gogauke' sandanan%

    I.1." Nama #uar Ne$ri

    +ama4nama luar negeri dari tumbuhan pegagan (&asaanah'

    *) adalah sebagai berikut :

    0nggris : !otu kola' asiatica penny3ort' 0ndian penny3ort

    ,runei : -egaga

    ilipina : $akip4kohol' tapingan4daga' hahang4halo

    Singapura : -egaga

    .yanmar : .in4kuabin

    Kambo5a : $ranchiek4kranh

    Laos : -hak nok

    $hailand : ,ua bok' pa4na4ekhaa4doh' phak 3aen

    6ietnam : /au m7as8% $7is8ch tuy 7ees8t' th7ar8o%

    I.1.% Kan&un$an Kimia

    Kandungan kimia pegagan (Centella asiatica (L%) Urban)

    terbagi men5adi beberapa golongan' yakni asam amino' flavonoid'

    terpenoid' dan minyak atsiri% $erpenoid' khususnya triterpenoid'

    merupakan kandungan utama dalam pegagan' yang terdiri dari

    asiatikosida' madekosida' brahmosida' dan brahminosida (glikosida

    saponin) asam madekasat (,arnes et al% cit&ermanto et al' ##)%

    ,ermacam4macam kandungan kimia dari daun pegagan antara

    lain senya3a glikosida triterpenoid disebut asiatikosida yakni suatu

    senya3a heteroside% 1siatikosida merupakan senya3a metabolit

    sekunder yang termasuk dalam kelompok terpen tersebut adalah lemak

    yang disintesa dari metabolit primer 1cetyl "o1 melalui lintasan 1sam

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    4/19

    .evalonat (.1-) atau intermediet dasar glikolisis le3at lintasan

    .ethylerythritol -hosphate (.9-) (&ermanto et al' ##)%

    OH

    OH

    COOH

    HOH3C

    1sam 1siatikat

    OH

    OH

    CH3OH

    COOH

    HO

    1sam .adekasat

    HOH3C

    &O

    &O

    C

    O

    O

    H

    O

    OH

    H

    H

    CH3

    HOH

    H OH

    OO H

    H

    HOH

    H OH

    CH2OH

    O

    H

    O

    H

    OH

    H

    HOH

    H OH

    CH3

    1siatikosida

    !ambar % Struktur senya3a 1sam 1siatikat' 1sam .adekasat'

    1siatikosida (&asaanah' *)%

    I.1.' Pen$$unaan Tra&isional

    -egagan secara tradisional banyak digunakan untuk penyakit

    kulit% Di samping untuk penggunaan topikal pegagan 5uga digunakan

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    5/19

    untuk mengobati sakit perut' batuk' batuk berdarah dan disentri'

    penyembuhan luka' radang' pegal linu' asma' 3asir' tuberkulosis' lepra'

    demam dan penambah selera makan (,adan -O. /0' #)%

    I.1.( )fek *armakolo$is

    "ampuran triterpenoid dalam pegagan mempunyai khasiat

    merangsang biosintesis kolagen dan digunakan dalam pengobatan lepra'

    luka bekas operasi' luka bakar' keloid' fibrosis' dan radioterapi%

    +egagan (Centella asiatica) merupakan salah satu bahan

    alam yang mempunyai khasiat sebagai anti

    spermat!genik (antiertilitas). ahan utama yang

    dikandungnya adalah triterpen!id glik!sida yang

    termasuk g!l!ngan ster!id yang juga berungsi sebagai

    anti kanker. Ster!id merupakan bahan baku untuk

    mensintesis test!ster!n (Sastr!midj!y!#99'). Tingginya

    k!nsentrasi test!ster!n akan menyebabkan umpan balik

    negati ke hip!/sis pelepasan SH dan ,H terhambat

    sehingga akan menghambat pr!ses spermat!genesis

    (+art!dihardj!#9$0) .1siatikosida yang terdapat di dalam tanaman pegagan mampu

    meningkatkan daya ingat' konsentrasi dan ke3aspadaan% &al ini

    dimungkinkan karena asiatikosida yang terkandung di dalamnya mampu

    membantu kelancaran sirkulasi oksigen dan nutrisi serta melindungi sel4

    sel otak dari kerusakan oksidatif oleh radikal bebas karena kandungan

    asam lemak yang sangat tinggi dan mudah teroksidasi (,erma3i et al%

    cit&ermantoet al' ##)%

    "heng et al% (;) dalam &ermanto et al (##) melaporkan

    bah3a ekstrak air pegagan dan senya3a asiatikosida' yang merupakan

    senya3a aktif dalam ekstrak tersebut potensial sebagai ramuan aktif atau

    obat untuk mencegah radang usus% Ditemukan pula bah3a glikosida total

    yang terkandung dalam ekstrak pegagan dapat mencegah secara

    signifikan efek fibrosis pada 5aringan hati tikus percobaan (.ing et al%

    ;)%

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    6/19

    .elalui penelitian kultur sel' terbukti bah3a ekstrak pegagan

    mampu mereduksi oksidan nitrit oksida' yang terbentuk sebagai akibat

    dari menumpuknya plak beta4amyloid di otak yang dikaitkan dengan

    penyakit 1l4 hari pada

    tempat yang terlindungi cahaya dan diaduk berulang4ulang' serta

    diperas' cuci ampas dengan cairan penyari secukupnya' hingga

    didapatkan hasil maserasi sebanyak # bahagian% -indahkan ke

    dalam be5ana tertutup biarkan di tempat yang se5uk' terlindungi dari

    cahaya selama hari% 9nap tuangkan' sambil mencegah penguapan

    pelarutnya (D5amal' #)%

    .aserasi merupakan proses perendaman sampel dengan

    pelarut organik pada temperatur ruangan% -roses ini sangat

    menguntungkan dalam isolasi senya3a metabolit sekunder karena

    dengan perendaman sampel tumbuhan akan ter5adi pemecahan

    dinding dan membran sel karena adanya perbedaan tekanan antara di

    dalam dan di luar sel sehingga senya3a metabolit sekunder yang

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    7/19

    terdapat pada sitoplasma akan terlarut dalam pelarut organik%

    9kstraksi senya3a dapat diatur dengan lama perendaman yang

    dilakukan% -emilihan pelarut dalam metode maserasi akan

    memberikan efektivitas yang tinggi dengan memperhatikan kelarutan

    senya3a metabolit sekunder dengan pelarut yang digunakan (Syafni'

    ?)%

    ,% Destilasi Uap

    Destilasi uap adalah penyulingan dengan mengalirkan uap

    pada evapor atau dikenal dengan metoda destilasi uap% Sampel

    dengan air penyulingan berada pada tempat terpisah (D5amal' #)

    -roses destilasi uap banyak digunakan mengekstraksi

    senya3a bahan alam yang tahan pada suhu yang cukup tinggi' yang

    lebih tinggi dari titik didih pelarut yang digunakan% Umumnya'

    banyak digunakan untuk ekstraksi minyak atsiri (Syafni' ?)%

    "% raksinasi

    raksinasi adalah proses untuk memisahkan kandungan

    senya3a bahan alam atas perbedaan sifat kelarutannya dalam kondisi

    yang ditentukan% -roses fraksinasi dilakukan apabila penyarian tahap

    a3al bertu5uan untuk mendapatkan ekstrak total% -roses fraksinasi

    dapat dilakukan dengan menggunakan berbagai pelarut yang

    memliki perbedaan kepolaran atau dengan membuat senya3a

    berubah sifat kelarutannya akibat perubahan p& (D5amal' #)%

    D% Kromatografi

    Kromatografi merupakan sebuah metode yang digunakan

    untuk memisahkan suatu komponen dari suatu campuran yang

    didasarkan pada interaksi komponen dengan fasa diam dan fasagerak yang tidak saling bercampur (Syafni' ?)%

    -ada praktikum menggunakan Kromatografi Lapis $ipis

    (KL$)% Kromatografi Lapis $ipis (KL$) adalah salah satu teknik

    kromatografi yang banyak digunakan untuk analisis kualitatif

    senya3a organik' isolasi senya3a tunggal dari campuran

    multikomponen' analisis kuantitatif dan isolasi skala preparativ%

    $enik KL$ sangat bermanfaat untuk analisis obat dan bahan lain

    dalam laboratorium karena hanya memerlukan peralatan sederhana'

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    8/19

    3aktu yang cukup singkat dan 5umlah )%

    b% ase gerak

    Sifat dan komposis kimia fase gerak ditentukan oleh 5enis

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    9/19

    BAB II

    P0S)DU0 K)0JA

    2.1 Alat &an Ba!an

    2.1.1 Alat

    Aadah untuk maserasi' kolom kromatografi' corong' botol

    # ml' vila' pipet tetes' seperangkat alat rotary evaporator' chamber'

    penotol%

    2.1.2 Ba!an

    Daun pegagan kering (# g)' methanol' etil asetat' plat

    KL$' kapas' norit' penampak noda untuk triterpenoid%

    2.2 ara Kerja

    a% !rinder sebanyak # g daun pegagan kering

    b% .aserasi dengan ml methanol selama #B> hari' saring

    c% Uapkan maserat hingga volume ml

    d% .asukkan # g norit ke dalam kolom kemudian le3atkanmeserat ke dalam kololm' tapung

    e% Uapkan eluet denga rotary evaporator hingga kering

    f% KL$ senya3a hasil isolasi menggunakan fase diam silika gel

    = ;' fase gerak etil asetat : metsanol : aCuadest (; : # : ')%

    Semprotkan reagen vanillin asam sulfat pada plat KL$ yang

    sudah dielusi kemudian panaskan untuk melihat noda pada fase

    diam%

    BAB III

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    10/19

    ASI# &an P),BAASAN

    3.1 asil

    1. Organoleptis

    ,entuk : endapan

    Aarna : kream kehi5auan

    ,au : berbau khas (agak bau)

    /asa : 4

    Konsistensi : belum kering

    2. Kelarutan

    Dapat larut dalam etil asetat

    >% ,erat senya3a isolat

    ,erat vial kosong *'@ gram,erat vial E endapan *'**; gram

    ,erat endapan '#?; gram

    #?; mg

    ;% ,erat rendemen

    berat isolat

    berat sampel B # F 0,174gram

    100gram B # F '#?; F

    % -rofil KL$G /f

    /f # jarak yang ditempuhkomponen

    jarak yang ditempuheluen

    0

    4.3

    /f jarak yang ditempuhkomponen

    jarak yang ditempuheluen

    0,5

    4,3

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    11/19

    '##=

    /f > jarak yang ditempuhkomponen

    jarak yang ditempuheluen

    2,2

    4,3

    ' ##

    ' cm cm ;'> cm ' cm

    !ambar >% &asil KL$ asiatikosida' asam madekasat' asam asiatat

    3.2 Pem/a!asan

    -ada pemeriksaan triterpenoid dari pegagan (Centella asiatica (L)

    Urban) yang digunakan adalah bagian daunnya yang telah disortir terlebih

    dahulu% Daun pegagan (Centella asiatica (L) Urban) yang digunakan

    merupakan daun yang telah kering% $u5uan digunakan daun yang telah keringagar simplisia bertahan lama dan tidak ber5amur%

    Untuk pemeriksaan triterpenoid ini kami menggunakan metode

    maserasi% Dipilihnya metode ini karena metode ini lebih sederhana' hanya

    dengan perendaman beberapa hari% Selain itu sampel yang digunakan dalam

    5umlah yang banyak% -elarut yang digunakan adalah metanol' karena metanol

    ini merupakan pelarut yang universal yang bisa melarutkan semua senya3a

    yang terkandung dalam simplisia% Selain itu harganya 5uga relatif lebih murah

    dibandingkan dengan pelarut4pelarut lainnya%

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    12/19

    Setelah dimaserasi dan uapakan dengan rotary evaporator' maserat

    yang didapatkan dile3atkan ke norit yang bertu5uan untuk menghilangkan

    klorofil yang terdapat pada daun pegagan dan agar didapatkan senya3a yang

    murni% Sehingga didapatkan larutan yang 5ernih yang kemudian diuapkan

    kembali sehingga didapatkan arutn yang kental yang kemudian didiamkan

    agar didapatkan endapan%

    Setelah didapatkan endapan' kemudian dihitung berat rendemen dari

    senya3a yang didpatkan sebanyak '#?; F% Kemudian dilakukan cek KL$

    dari endapan yang didapatkan% Didapatkan tiga nilai /f yaitu /f# ' /f

    '##=% /f > ' ##% .enurut penelitian &erlina et al (#) nilai /f dari

    senya3a asiatikosida adalah /f ';?= dengan fase gerak yang digunakankloroform : metanol (;:#) sedangkan menurut penelitian -admadisastra et al

    (?) nilai /f dari

    dan 1sitikosida /f '* dengan fase gerak yang digunakan adalah kloroform :

    methanol : air (=::;)% ase gerak yang digunakan berbeda maka nilai /f

    yang dihasilan 5uga berbeda%

    BAB I4

    K)SI,PU#AN &an SA0AN

    .1 Kesimpulan

    Dari praktikum yang telah dilaksanakan didapatkan kesimpulan sebagai

    berikut :

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    13/19

    #% -ada tumbuhan -egagan (Centella asiaticaL) mengandung senya3a

    triterpenoid% Senya3a triterpenoid yang terdapat pada pegagan adalah

    asiatikosida' asam madekasat' asam asiatat%

    % Senya3a triterpenoid pada pegagan ("entella asiatica) dapat sebagai

    pengobatan lepra' luka bekas operasi' luka bakar' keloid' fibrosis'

    radioterapi' ani spermatogenik' dan anti radang usus%

    >% /andemen dan /f yang didapatkan pada saat praktikum adalah '#?;F

    dan /f# H /f '##=H /f> '##%

    .2 Saran

    #% $eliti' hati4hati dan serius dalam melaksanakan percobaan' dan sesuai

    dengan prosedur ker5a%

    % -ahami terlebih dahulu prosedur ker5a sebelum melaksanakan percobaan%>% -ergunakan alat4alat praktikum yang benar4benar bersih dan kering%

    ;% Lakukan penambahan reagen secara kuantitatif%

    % -ergunakan pipet tetes yang berbeda untuk masing4masing reagen atau

    larutan u5i untuk mendapatkan hasil yang lebih akurat%

    =% Sebelum di KL$ pastikan dahulu kristal yang diperoleh sudah murni dan

    bebas dari pengotor agar hasil KL$ lebih baik dan nilai /fnya sama

    dengan literatur%

    DA*TA0 PUSTAKA

    1dhan' .% #**?% Teknik Kromatografi untuk Analisis Bahan Makanan%

    Iogyakarta : 1ndi' ?4>

    ,adan -O. /0% #%Acuan ediaan Her!al "olume Kelima #disi $ertama%

    ,adan -O. /0% #%$egagan Centella asitica (L.% &r!an% 2akarta : Direktorat

    Obat 1sli 0ndonesia

    ,arnes' 2%' L%1% 1nderson' and 2%D% -hilipson% %Her!al Medicines' Second

    9dition% -harmaceutical -ress' London' > p%

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    14/19

    *jamal 1usjdi. 20#0.Prinsip-prinsip Dasar Isolasi dan Identifkasi.

    ni3ersitas aiturrahmah

    !ritter' /' 2%' 2% .% ,obbits' and 1% 9% Sch3arting% #*@?% 'ntroduction toChromatography ($engantar Kromatorafi%' 9disi ke4' diter5emahkan oleh

    K% -adma3inata% ,andung : -enerbit 0$,

    &asaanah' 0fnaini Airdatul% *%$engaruh #kstrak aun $egagan (Centella

    asiatica% terhadap permatogenesis Mencit (Mus musculus%..alang :

    U0+ .aulana .alik 0brahim

    Herlina dan ,. Hutas!it. 20#0. Pengaruh Senyawa Murni Dari

    Pegagan (Centella asiatica (L. !r"an #erhadap $ungsi

    %ogniti& 'elaar dan Mengingat dan )&ek #oksisitas Pada

    Mencit (Mus *usculus 'etina. Sriwijaya 4 M+& ni3ersitas

    Sriwijaya

    &ermanto' .% !hulamahdi' L% K% Darusman' 1% Sutandi dan +% ,erma3ie% ##%

    $enetapan Bahan iagnosis tatus Hara )$K $ada *aringan Tanaman

    $egagan% ,ul% Littro' 6ol% +o% ' ##' #@= J #*?

    .ing' %' Liu' S%' L% "ao' L% $ang% ;. #ffect of total glucosides of centella

    asiatica on antagoni+ing liver fi!rosis induced !y dimethylnitrosamine in

    rats.hongguo hongBi5i 2iche a

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    15/19

    Syani 7!3a. 200'. pti*asi Isolasi %ae*p&erol dari Paku +esa*

    (leichenia linearis ('ur*. Clarke. +adang 4 7&7*

    $ouchstone' 2% "%' .% Dobbins% #*@>%$ractice of Thin Layer Chromatography%"anada : 2ohn Ailey Sons' 4#

    #AP0AN AKI0 P0AKTIKU,

    KI,IA BAAN A#A,

    IS#ASI T0IT)0P)NID DA0I P)5A5AN

    6Centella asiatica L7

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    16/19

    #) 8

    *IT0IA #A4ITA A50)SA

    1211913991

    S)#ASA PA5I

    K)# II 6DUA7

    #AB0AT0IU, KI,IA BAAN A#A,

    *AKU#TAS *A0,ASI

    UNI4)0SITAS ANDA#AS

    PADAN5

    291

    #AP0AN AKI0 P0AKTIKU,

    KI,IA BAAN A#A,

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    17/19

    #) 8

    *IT0IA #A4ITA A50)SA

    1211913991

    #AB0AT0IU, KI,IA BAAN A#A,

    *AKU#TAS *A0,ASI

    UNI4)0SITAS ANDA#AS

    PADAN5

    291

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    18/19

  • 7/24/2019 Isolasi Triterpenoid Dari Pegagan

    19/19