ISOLASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN …repository.ump.ac.id/1842/1/Fitri Aryanti Cover.pdfi...

i

ISOLASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN

EKSTRAK BIJI PINANG

Skripsi

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

Mencapai Derajat Sarjana S-1

Oleh

FITRI ARYANTI

1108010091

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

2015

Isolasi dan Uji..., Fitri Aryanti, Fakultas Farmasi UMP, 2015

ii


iii


iv

PERNYATAAN

Yang bertandatangan dibawah ini, saya :

Nama : FITRI ARYANTI

NIM : 1108010091

Program Studi : Farmasi

Fakultas / Universitas : Farmasi/Universitas Muhammadiyah Purwokerto

Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari

proses penelitian saya yang telah dilakukan sesuai dengan prosedur penelitian

yang benar dengan arahan dari dosen pembimbing dan bukan hasil penjiplakan

dari karya orang lain atau terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh

gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis

juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan orang

lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam

daftar pustaka.

Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak di kemudian hari terbukti ada

unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggungjawabkan sesuai dengan

ketentuan yang berlaku.

Purwokerto, Agustus 2015

Yang menyatakan,

FITRI ARYANTI


v

INTISARI

FITRI ARYANTI. Isolasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Biji Pinang.

Dibawah bimbingan ASMIYENTI DJALIASRIN DJALIL dan RETNO

WAHYUNINGRUM.

Latar Belakang : Ekstrak Etanol Biji Pinang memperlihatkan aktivitas

antioksidan yaitu IC50 sebesar 0,409 mg/mL yang lebih besar dibandingkan

vitamin C sebagai kontrol positif dengan nilai IC50 sebesar 0,964 mg/mL.

Berdasarkan landasan tersebut membuktikan bahwa ekstrak biji pinang berpotensi

sebagai antioksidan tetapi belum ada penelitian yang mengisolasi kandungan

kimia dari berbagai macam fraksi pada ekstrak biji pinang. Oleh karena itu perlu

dilakukan isolasi kandungan kimia dari beberapa fraksi dan uji aktifitas

antioksidan pada ekstrak dan berbagai fraksi biji pinang.

Tujuan Penelitian : Tujuan dari penelitian ini adalah mengisolasi kandungan

kimia dari fraksi dan menguji aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi biji pinang.

Metode Penelitian : Penelitian ini dilakukan dengan radikal DPPH untuk ekstrak

metanol, fraksi metanol-air, fraksi n-heksan, fraksi etilasetat, fraksi metanol biji

pinang dan untuk mengisolasi kandungan kimia dari fraksi metanol menggunakan

Kromatografi Lapis Tipis, Kromatografi Lapis Tipis Preparatif dan

Spektrofotometri UV-Vis.

Hasil : IC50 pada fraksi metanol adalah yang paling kecil dibandingkan dengan

fraksi metanol-air, fraksi etilasetat dan fraksi n-heksan yaitu 20,738 ppm karena

senyawa aktif biji pinang tertarik pada fraksi metanol sehingga aktivitas

antioksidannya paling besar. Hasil isolasi menggunakan metode KLT dan KLT

Preparatif adalah 84,6 mg yang kemudian diuji aktivitas antioksidan dengan IC50

sebesar 22396,3 ppm.

Kesimpulan : aktivitas antioksidan fraksi metanol lebih baik dibandingkan fraksi

metanol-air, fraksi etilasetat dan fraksi n-heksan. Fraksi metanol telah diisolasi

yang membuktikan senyawa aktif sebagai antioksidan.

Kata kunci : antioksidan, ekstrak metanol biji pinang, fraksi metanol


vi

ABSTRACK

FITRI Aryanti. Isolation and Antioxidant Activity Test of areca seed extract.

Under the supervisor of ASMIYENTI DJALIASRIN DJALIL and RETNO

WAHYUNINGRUM.

Background: The Extract of areca seed ethanol showed that the antioxidant

activity IC50 of 0.409 mg / mL was greater than vitamin c as a positive control

with IC50 value of 0.964 mg / mL. Based on these premises proves that areca seed

extract has potential as an antioxidant yet there was no further research that isolate

the chemical constituents of the various factions in the areca seed extracts.

Therefore it was necessary to isolate chemical constituents of some fractions and

antioxidant activity test of the extracts and various fractions of areca seed.

Objective: The objective of this study was to isolate the chemical constituents of

the fractions and tested the extracts of antioxidant activity and fractions of areca

seed.

Methods of the research: The study was carried out by radical DPPH for the

methanol extract, fraction of methanol-water, the fraction of n-hexane, fraction of

ethyl acetate, methanol fraction areca seed and to isolate the chemical constituents

of the methanol fraction using Thin Layer Chromatography, preparative thin layer

chromatography and spectrophotometry UV -Vis.

Results: the result revealed that methanol fraction with IC50 is the smallest

fraction (20.738 ppm) compared by the methanol-water fractions, fractions ethyl

acetate and n-hexane fraction. It was because of the active compounds of areca

nut adsorbed into methanol fraction. Therefore, those fractions have the greatest

antioxidant activity. The method of isolation was using 84.6 mg TLC and TLC

Preparative then it tested by the antioxidant activity with IC50 of 22396.3 ppm.

Conclusion: The antioxidant activity of the methanol fraction was better than the

methanol-water fractions, fractions ethyl acetate and n-hexane fraction. The

Methanol fraction that had been isolated proved the active compounds as

antioxidants.

Keywords: antioxidants, methanol extract of areca seed, methanol fraction.


vii

PERSEMBAHAN

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah memberikan

petunjuk dan kemudahan, sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik

dan lancar.

Skripsi ini penulis persembahkan untuk:

Orangtuaku yang selalu memberikan dukungan serta doa yang selalu

mengiringi hidupku dalam menempuh segala hal.

Kakak-kakakku, adikku dan keponakanku yang selalu memberikan

semangat dan motivasi untukku.

Emon, Lele, Aminah, Icon, Devi, Mas Enggi, Anya, Ghelsa, kelompok

praktikum RA, Bu woro, Pak mamat dan teman-teman seangkatan yang

telah membantu dan selalu memberikan dukungan untukku.

Kedua pembimbing yang selalu membimbing dan memberi nasehat

dengan sabar selama ini

Mba viji, Pindut, Ira, Helmi, Mba Santi, Mba devi,dan teman-teman kos

yang menemani dan menghibur


viii

MOTTO

Dibalik kesulitan ada Kemudahan sesudahnya

Teruslah berfikir positif, karena dengan itu dapat menutupi segala hal-hal negatif

dan segala ketakutan yang menghampiri diri

Dimana ada kemauan, disitu pasti ada jalan menuju kebaikan

Lakukan semuanya dengan penuh kesabaran agar hasilnya tidak sia-sia.


ix

PRAKATA

Dengan mengucap Alhamdulillahi Robil’allamin, dan segala puji syukur

senantiasa peneliti panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan

rahmat, hidayah dan inayahnya, sehingga peneliti dapat menyusun dan

menyelesaikan skripsi ini. Sholawat dan salam senantiasa tercurahkan kepada

Nabi Besar Muhammad SAW berserta keluarga dan sahabatnya.

Penyelesaian skripsi ini tidak terlepas dari bantuan dan dukungan dari

berbagai pihak yang telah memberikan bantuan yang sangat berarti bagi peneliti,

baik secara moral maupun materi. Untuk itu, peneliti mengucapkan terima kasih

kepada :

1. Dr. H. Syamsuhadi Irsyad, SH, M.H Rektor Universitas Muhammadiyah

Purwokerto.

2. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si., Apt. Dekan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto.

3. Dr. Asmiyenti Djaliasrin Djalil, M.Si. Ketua Bidang Kemahasiswaan

Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto dan Dosen Pembimbing

I yang telah membimbing, memotivasi dan mendukung terlaksananya

ujian skripsi dan memberikan kesempatan hingga peneliti selesai studi.

4. Retno Wahyuningrum,S.Farm., M.Si., Apt. Dosen Pembimbing II yang

selalu sabar membimbing dan mengarahkan dalam penyusunan skripsi.

5. Semua pihak yang telah membantu hingga terselesaikannya skripsi ini.

Semoga semua bimbingan, dorongan dan bantuan yang telah diberikan

kepada peneliti mendapatkan pahala dari Allah SWT. Teriring harapan

semoga skripsi ini dapat bermanfaat khususnya bagi peneliti dan pembaca.

Purwokerto, Agustus 2014

Peneliti


x

RIWAYAT HIDUP

Nama : Fitri Aryanti

NIM / Angkatan : 1108010091 / 2011

Tempat / Tanggal Lahir : Cilacap, 12 April 1992

Jenis Kelamin : Perempuan

Agama : Islam

Alamat : Jln.Jaga desa no.68 Pahonjean, Majenang, Cilacap

Riwayat Pendidikan:

1. Perguruan Tinggi :Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah

Purwokerto (Angkatan 2011)

2. SMA / Tahun Lulus : SMK Farmasi Majenang / Tahun 2010

3. SMP / Tahun Lulus : SMP Negeri 2 Majenang / Tahun 2007

4. SD / Tahun Lulus : SD Negeri 1 Pahonjean / Tahun 2004


xi

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ...................................................................................... .i

HALAMAN PERSETUJUAN ...................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................ iii

HALAMAN PERNYATAAN ........................................................................ iv

INTISARI ....................................................................................................... v

ABSTRACT ..................................................................................................... vi

HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................... vii

MOTTO .......................................................................................................... viii

PRAKATA ...................................................................................................... ix

RIWAYAT HIDUP......................................................................................... x

DAFTAR ISI ................................................................................................... xi

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xiii

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xiv

BAB I PENDAHULUAN ........................................................................ .. 1

A. Latar Belakang Masalah ......................................................... .. 1

B. Perumusan Masalah ............................................................... .. 2

C. Tujuan Penelitian ................................................................... .. 2

D. Manfaat Penelitian ................................................................. .. 2

BAB II TINJAUAN PUSTAKA .............................................................. .. 3

A. Tinjauan buah pinang ............................................................. .. 3

B. Antioksidan dan Radikal Bebas ............................................. .. 4

C. Ekstraksi ................................................................................. .. 6

D. Fraksinasi dan Isolasi Ekstrak ................................................ .. 7

E. Kromatografi Lapis Tipis ....................................................... .. 8

F. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ...................................... .. 9

G. Uji Antioksidan 1,1 DPPH... .................................................. .. 10

H. Spektrofotometri Ultraviolet-Visible........................................... 11

BAB III METODOLOGI PENELITIAN ................................................ 12

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ............................................. 12


xii

B. Variabel Penelitian ................................................................. 12

1. Variabel Bebas ................................................................ 12

2. Variabel Tergantung ....................................................... 12

3. Variabel Terkendali ......................................................... 12

C. Definisi Variabel Operasional ................................................ 12

D. Waktu dan tempat Penelitian.................................................. 13

E. Alat dan Bahan ....................................................................... 13

F. Prosedur Penelitian................................................................. 14

1. Pengumpulan dan Penyiapan Sampel ............................. 14

2. Determinasi Bahan .......................................................... 14

3. Maserasi Biji Pinang ....................................................... 14

4. Fraksinasi ........................................................................ 14

5. Uji Aktivitas Antioksidan ............................................... 15

6. Identifikasi senyawa dengan KLT .................................. 18

7. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ............................... 18

8. Uji Aktivitas Antioksidan isolat dengan Spektrofotometri Uv-

vis .................................................................................... 19

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................... 20

A. Determinasi Tanaman ............................................................ 20

B. Penyiapan Bahan .................................................................... 20

C. Pembuatan Ekstrak Biji Pinang .............................................. 21

D. Fraksinasi Ekstrak Biji Pinang ............................................... 22

E. Uji aktivitas Antioksidan ....................................................... 23

F. Identifikasi senyawa menggunakan KLT............................... 28

G. Kromatografi Lapis Tipis Preparatif....................................... 30

H. Uji Aktivitas antioksidan Isolat.............................................. 30

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................... 32

DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 33

LAMPIRAN .................................................................................................... 35


xiii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Buah Pinang ...................................................................................... 3

Gambar 2. Ektrak Kering biji pinang .................................................................. 22

Gambar 3. Scanning (λ maks) larutan DPPH ...................................................... 23

Gambar 4. Prinsip penangkapan H oleh DPPH .................................................. 24

Gambar 5. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan ekstrak

metanol.... .............................................................................................. 25

Gambar 6. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan fraksi

metanol.... .............................................................................................. 25


metanol-air.... ........................................................................................ 26

Gambar 8. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan fraksi n-

heksan.... ............................................................................................... 26


etilasetat.... ............................................................................................ 27

Gambar 10. Kurva hubungan antara konsentrasi dengan %penghambatan vitamin

C.... ........................................................................................................ 27

Gambar 11. Lempeng KLT setelah disemprot H2SO4, NaNO2, FeCl3... .............. 29

Gambar 12. Hasil pengukuran λ maks isolat ...................................................... 23


xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Surat determinasi ............................................................................ 35

Lampiran 2. Perhitungan rendemen ekstrak biji pinang ..................................... 36

Lampiran 3. Tahapan Fraksinasi ......................................................................... 37

Lampiran 4. Perhitungan Uji daya tangkap radikal bebas (%penghambatan), IC50

dan IC20 dengan radikal DPPH ...................................................... 38

Lampiran 5. Perhitungan Standar Deviasi (SD) untuk IC50 dan IC20 ................. 57


ISOLASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN …repository.ump.ac.id/1842/1/Fitri Aryanti Cover.pdfi...

Documents

Transcript of ISOLASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN …repository.ump.ac.id/1842/1/Fitri Aryanti Cover.pdfi...