IRFANUDIN-FKIK
-
Upload
nurhalifah-ibrahim -
Category
Documents
-
view
248 -
download
11
description
Transcript of IRFANUDIN-FKIK
UJIEFEKHIPOGLIKEMIAFRAKSIETILASETATBIJIJINTENHITAM(NigellasativaLinn)PADATIKUSPUTIHJANTANDENGANMETODEINDUKSIALOKSANDANTOLERANSIGLUKOSA
Skripsi
Diajukansebagaisalahsatusyaratuntuk
MemperolehgelarSarjanaFarmasi
Oleh
IrfanudinPadilah
NIM:105102003331
PROGRAMSTUDIFARMASI
FAKULTASKEDOKTERANDANILMUKESEHATAN
UNIVERSITASISLAMNEGERI(UIN)SYARIFHIDAYATULLAHJAKARTA1430H/2009M
i
ii
iii
LEMBARPERNYATAAN
Denganinipenulismenyatakanbahwaskripsiinibenar-benar
hasilkaryasendiriyangbelumpernahdiajukansebagai
skripsiataukaryailmiahpadaperguruantinggiataulembaga
pendidikanmanapun.
Penulis
iv
ABSTRAK
Judul:UjiEfekHipoglikemiaFraksiEtilAsetatBijiJintenHitam(NigellasativaLinn)PadaTikusPutihJantanDenganMetodeInduksiAloksanDanToleransiGlukosa
Bijijintenhitam(NigellasativaLinn)merupakansalahsatutanamantradisionalyangtelahdiketahuisebagaiobatantidiabetalternatif.Telahdilakukanpengujianefekhipoglikemiafraksietilasetatbijijintenhitamdenganmenggunakanmetodeinduksialoksandenganmasing-masingdosis41mg/200gbb,82mg/200gbbdan164mg/200gbbyangdiberikansecaraoralpadatikusputihjantan,pengukurankadarglukosadarahdilakukanpadaharike-7,21dan28denganmenggunakanglukometer.Pemberianvariasidosismenunjukanbahwadosis41mg/200gbbmemberikanpenurunankadarglukosadarahyangterkuat(51,41%),diikutidosis82mg/200gbb(41,86%)dan164mg/200gbb(39,33%),dibandingkandengankontrolpositiftidakberbedasecarabermaknadalamtarafnyata0,05%.Dosis41mg/100gbbfraksietilasetatbijijintenhitamdiberikansecaraoralpadatikusputihjantandenganmenggunakanmetodetoleransiglukosa.Pengukurankadarglukosadarahdilakukansetiap30menitselama180menitdenganmenggunakanglukometer,dibandingkandengankontrolpositiftidakberbedasecarabermaknapadamenitke-0,30,90,120,150dan180sedangkandibandingkandengankontrolnegatifberbedasecarabermaknapadamenitke-60dalamtarafnyata0,05.Hasilpenelitianinimenunjukanbahwafraksietilasetatbijijintenhitamberpotensimenurunkanglukosadarah.
Katakunci:Induksialoksan,Bijijintenhitam,Etilasetat,Toleransiglukosa
v
ABSTRACK
Title:HypoglykemiaEffectOfEthylAcetatFractionOfBlackSeed(NigellaSativaLinn)OnAlloxanInducedAndGlucoseToleranceMethodInRats
Traditionalherbamedicine,blackseed(NigellasativaLinn)hasalreadyknowncanbeusedfororalanti-diabeticdrug.Aninvestigationofthehypoglycemiaeffectofblackseedfractioninethylacetatusingalloxaninducedandglucosetolerancemethod.Measurementthebloodglucoselevelwasdoneonday-17,21and28usingglucose-test.Dosesvariationoftheethylacetatfractionshowedthatthedoseof41mg/200gbwgavethebesthypoglycemiceffect(51,41%),followedbydoses82mg/200gbw(41,86%)and162mg/200gbw(39,33%),comparedwithpositivecontrolwasnotdifferentincisivelywhereascomparedwithnegativecontrolwasdifferentincisivelyofsignificant0,05.Dose41mg/200gbwofethylacetatfractiongivenorallytowhitemaleratsusingglucosetolerancemethod.Measurementofthebloodglucoselevelwasdoneevery30minutesduring180minutesusingglucose-test,comparedwithpositivecontrolatminute-0,30,60,90,120,150and180wasnotdifferentincisivelywhereascomparedwithnegativecontrolwasdifferentincisivelyatminute60ofsignificant0,05.Thisexperimentshowedthatblackseedfractioninethylacetatpotentiallydecreasingbloodglucoselevel.
Keyswords:Alloxaninduced,Blackseed,Ethylacetat,Glucosetolerance
vi
KATAPENGANTAR
PujisyukurkehadiratAllahSWTRabbYangMahaKuasadengankasihdansayang-Nya,berkatrahmatdankuasa-Nyamemberikanjalankepadahamba-NyasehinggapenulisdapatmenyelesaikanpenelitiandanskripsidenganjudulUjiEfekHipoglikemiaFraksiEtilAsetatBijiJintenHitam(NigellasativaLinn)PadaTikusPutihJantanDenganMetodeInduksiAloksanDanToleransiGlukosa.SkripsiinidisusunsebagaisalahsatusyaratuntukmenyelesaikanprogrampendidikantingkatsarjanaStrata1(S1)padaProgramStudiFarmasi,FakultasKedokterandanIlmuKesehatan,UniversitasNegeri(UIN)SyarifhidayatullahJakarta.
Penyusunanskripsiinitidakterlepasdariberbagaipihak.Karenaitupadakesempatankaliinidengansegalakerendahanhatipenulismengucapkanterimakasihyangsedalam-dalamnyakepadayangterhormat:
1.KeluargabesarkuterutamaAyahandatercintaNurdin(alm)danIbundatersayangIhatMuflihatdankakakuTehPaniRopianidansuaminyaAYusufsertaadik-adikkuAiRisnadanMiftahulHudayangselalumemberikanspiritbaikmorilmaupunspiritualselamapenelitiandanpenyusunanskripsiini.2.BapabDrs.MYanisMusdja,M.Sc,Apt.danIbuAzrifitria,M.Si,Apt.SelakupembimbingAkademikyangmemberikanpengarahan,nasehat,dukungandanbimbingannya,sehinggapenulisbisamenyelesaikandanmenyusunskripsiini.3.GuruspiritualUstAdeTaqiyudindanKakSyahrilyangtelahmemberikandorongandanmotivasidengantausiyahnyayangdapatmenyejukanhatidanmendorongpenulisuntukbisamenyelesaikanskripsiini.4.Bapak,IbuDosenProgramStudiFarmasiyangmemberikandukungan,sehinggapenulisbisamenyelesaikanskripsiini.5.Teman-temanProgramStudiFarmasiyangmemberikandukungan,sehinggapenulisbiasmenyelesaikanskripsiini.
vii
6.Semuapihakyangtelahmembantudariawalhinggaakhirpenyusunanskripsiiniyangtidakdapatdisebutkansatupersatu.Penulismenyadaribahwaskripsiinimasihbanyakkekurangan,penulissangatmengharapkankritikdansaranagarskripsipeneltianinibenar-benarbermanfaatuntukkiyasemuaAmin.
Jakarta,4November2009M16Dzulqodah1430H
viii
DAFTARISI
Halaman
HALAMANJUDUL.................................................................................................iLEMBARPERSETUJUANSKRIPSI......................................................................iiLEMBARPERNYATAAN.......................................................................................viABSTRAK.................................................................................................................vABSTRACT..............................................................................................................viKATAPENGANTAR...............................................................................................viiDAFTARISI.............................................................................................................ixDAFTARGAMBAR.................................................................................................xiDAFTARTABEL.....................................................................................................xiiDAFTARLAMPIRAN..............................................................................................xiiiBABIPENDAHULUAN1.1.LatarBelakang..............................................................................................11.2.PerumusanMasalah......................................................................................31.3.PembatasanMasalah.....................................................................................31.4.TujuanPenelitian..........................................................................................41.5.Hipotesis.......................................................................................................41.6.ManfaatPenelitian........................................................................................4BABIITINJAUANPUSTAKA2.1.JintenHitam(NigellaSativaLinn)...............................................................52.1.1.Klasifikasi...........................................................................................52.1.2.Namalain...........................................................................................52.1.3.Morfologi...........................................................................................62.1.4PengembangandanPertumbuhan.......................................................62.1.5.PenanamandanPerkembangbiakan...................................................72.1.6.EkologidanPerkembangbiakan.........................................................72.1.7.Kandungankimiabijijintenhitam.....................................................72.1.8.Khasiatjintenhitam...........................................................................82.2.TinjauanHewanCoba..................................................................................82.3.EkstrakdanEkstraksi....................................................................................92.3.1.Pembuatanserbuk..............................................................................102.3.2.Pembasahan........................................................................................112.3.3.Penyari/Pelarut...................................................................................112.4.DiabetesMellitus..........................................................................................142.4.1.DiabetesmellitusTipe-1IDDM.........................................................142.4.2.DiabetesmellitusTipe-2NIDDM......................................................152.4.3.DiabetesGestional..............................................................................162.4.4.KelainanFisiologispadaDiabetes.....................................................162.4.5.DiagnosisDiabetes.............................................................................182.5.Alloksan.......................................................................................................192.6.Glibenclamid.................................................................................................202.7.Acarbosa.......................................................................................................222.8.Etilasetat.......................................................................................................232.9.MetodePengujian.........................................................................................242.9.1.Metodeinduksialoksan......................................................................24
ix
2.9.2.Metodeujitoleransiglukosaoral.......................................................27BABIIIKERANGKAKONSEP..............................................................................28BABIVMETODEPENELITIAN............................................................................294.1.TempatDanWaktuPenelitian......................................................................294.2.AlatdanBahan..............................................................................................294.2.1.Alat.....................................................................................................294.2.2.Bahan..................................................................................................294.3.ProsedurKerja..............................................................................................304.3.1.PembuatanSimplisia..........................................................................304.3.2.Ekstraksi.............................................................................................304.3.3.UjiPenapisanFitokimia.....................................................................314.3.4.RancanganPercobaan........................................................................334.3.5.PembuatanSediaanUjidanDosis.....................................................354.3.6.CaraPengambilanDarahdanPengkuranKadarGlukosaDarah.......374.3.7.Percobaan...........................................................................................374.3.8.UjiStatistikTerhadapKadarGlukosaDarah.....................................39BABVHASILPENELITIANDANPEMBAHASAN............................................405.1.HasilPenelitian405.1.1.DeterminasiTanaman........................................................................405.1.2.Ekstraksi.............................................................................................405.1.3.HasilPengujianEkstrak.....................................................................405.1.4.PenapisanFitokimia...........................................................................415.1.5.HasilPengukuranKadarGlukosaDarah...........................................415.2.Pembahasan..................................................................................................42BABVIKESIMPULANDANSARAN...................................................................516.1.Kesimpulan...................................................................................................516.2.Saran.............................................................................................................51DAFTARPUSTAKA................................................................................................52
x
DAFTARGAMBAR
Halaman
Gambar1.Alloksan...................................................................................................19Gambar2.Glibenclamid............................................................................................20Gambar3.Etilasetat..................................................................................................23Gambar4.Bijijintenhitam.......................................................................................56Gambar5.Kandangtikus..........................................................................................56Gambar6.Glukose-test.............................................................................................57Gambar7.Pemberiansecaraoral..............................................................................57Gambar8.Kurvakadarglukosadarahrata-ratahewanujisebelumdansesudahdiberibahanujipadaharipengambilansampelselama28hari72Gambar9.Kurvakadarglukosadarahrata-ratahewanujimenitke0,30,60,90,120,180...72
xi
DAFTARTABEL
Halaman
Tabel1.PembagianKelompokHewanUjiInduksiAloksan...................................34Tabel2.PembagianKelompokHewanUjiToleransiGlukosa................................35Tabel3.Hasilpemeriksaanpenapisanfitokimiabijijintenhitam...........................41Tabel4.Hasilpadametodeinduksialoksan.............................................................41Tabel5.Hasilpadametodetoleransiglukosaaloksan.............................................42Tabel6.Konversidosis............................................................................................64Tabel7.Kadarglukosadarahmetodeinduksialoksan............................................68Tabel8.Kadarglukosadarahmetodetoleransiglukosa..........................................70Tabel9.Persentasepenurunanpadainduksimetodealoksan...71Tabel10.Persentasepenurunanpadametodetoleransiglukosa.71Tabel11.SampleKolmogorovUjinormalitas-Smirnov....73Tabel12.UjiHomogenitas........................................................................................73Tabel13.UjiANAVA...............................................................................................74Tabel14.KruskalWallis...........................................................................................74Tabel15.UjiBNTharike-14....................................................................................74Tabel16.UjiBNTharike-17....................................................................................76Tabel17.UjiBNTharike-21....................................................................................77Tabel18.UjiBNTharike-28....................................................................................78Tabel19.UjinormalitasSampleKolmogorov-Smirnov...........................................80Tabel20.UjiHomogenitas........................................................................................80Tabel21.ANAVA.....................................................................................................81Tabel22.KruskalWallis...........................................................................................81Tabel23.UjiBNTmenitke-30.................................................................................82Tabel24.UjiBNTmenitke-60.................................................................................82
xii
DAFTARLAMPIRAN
Halaman
Lampiran1.GambarBahanDanAlatPenelitian.....................................................56Lampiran2.DeterminasiSimplisia..........................................................................58Lampiran3.SertifikatGlibenklamid........................................................................59Lampiran4.SkemaEkstraksidanPartisi..........................................................................60Lampiran5.SkemaPercobaanMetodeInduksiAloksan....................................................61Lampiran6.SkemaPercobaanMetodeToleransiGlukosa.................................................62Lampiran7.PerhitunganDosisLarutanUji...............................................................63Lampiran8.PenetapanKadarAirDanSusutPengeringanEtilAsetat.............................67Lampiran9.DaftarKadarGlukosaDarahMasing-MasingKelompok.....................68Lampiran10.PersentasePenurunanKadarGlukosaDarah.......................................71Lampiran11.KurvaKadarGlukosaDarah................................................................72Lampiran12.AnalisaDataMetodeInduksiAloksan................................................73Lampiran13.AnalisaDataMetodeInduksiAloksan................................................80
xiii
xiv
BABI
PENDAHULUAN
1.1.LatarBelakang
JumlahpenderitapenyakitDiabetesMellitus(DM)diIndonesia,
menurutdataBadanKesehatanDunia(WHO),mencapai17jutaorangatau
8,6%dari220jutapopulasinegeriinidanmeningkatteruspadaakhir-akhir
inikarenaangkatersebutberdasarkanpenelitianpadatahun2001.Menurut
dataBadanKesehatanDunia(WHO)padatahun2003tercatathampir200
jutaorangdiduniamenderitadiabetesdandiperkirakanpadatahun2025
jumlahpenderitabisamencapaisekitar330jutajiwa.Sementaradi
Indonesiasendiri,berdasarkandataWHOpadatahun2003tercatatlebih
dari13jutapenderitadiabetes,darijumlahtersebutdiperkirakanakan
meningkatmenjadilebihdari20jutapenderitapadatahun2030.
BerdasarkanpenelitianDepartemenKesehatanpada2001,untukjenis
penyakitiniIndonesiamenempatiurutankeempatdiduniasetelahIndia,
ChinadanAmerikaSerikat(AS).Padatahun2001silam,tercatat7,5%
pendudukdiPulauJawadanBali,baikpriamaupunwanita,menderitaDM.
Kemungkinanjugaangkattersebutbisabertambahlebihbesarlagi.penyakit
initercantumdalamurutannomor4dariprioritaspenelitiannasionaluntuk
penyakitdegeneratifsetelahkardiovaskular,serebrovaskulardan
geriatri.(Perkeni,2006)
1
Indonesiamerupakannegarayangmemilikikeanekaragamanhayati
terbesardiduniadenganlebihdari30ribuspesiestanamanberkhasiat
mengobatimelaluipenelitianilmiah.Hanyasekitar180spesiestersebut
telahdimanfaatkandalamtanamanobattradisionalolehindustriobat
tradisionalIndonesia.Halinidisebabkanpemanfaatantumbuhanobat
Indonesiauntukmengobatisuatupenyakitbiasanyahanyaberdasarkan
pengalamanempirisyangdiwariskansecaraturuntemuruntanpadisertai
datapenunjangyangmemenuhipersyaratan.Penelitianfarmakologis
dengantahappengujiansecarasistematik,menggunakanmetodeuji
antidiabetesyangtepatharusdigunakanagarhasilnyadapatdipertanggung
jawabkansecarailmiah,bermanfaatbagimasyarakatdandapatmenjadi
acuanuntukpenelitianselanjutnya.
Salahsatutanamanobatyangsecaratradisionaldigunakanuntuk
mengobatidiabetesmellitusadalahjintenhitam(Nigellasativa
Linn).Masyarakatmesirmenggunakanjintenhitamuntukmengobati
kencingmanis,Penggunaanjintanhitamsebagaiobat-obatantelah
dilakukanjutaanorangdiAsia,TimurTengah,danAfrikauntukmenjaga
kesehatan.Jintanhitamadalahtanamanyangberkhasiatobatdantelah
dimanfaatkanribuantahunlampau.Dalammasyarakatislampenggunaan
jintanhitamadalahtermasukkedalampengobatanalanabi(tibbunnabawi).
HaliniterdokumentasidenganbaikmelaluiriwayatimamBukharidan
Muslimyangterjemahannyasebagaiberikut:
2
"DariAbuHurairahra:Rasulullahsaw.bersabda:Sesungguhnya
padajintanhitamituterdapatobatuntuksegalamacampenyakitkecuali
kematian".
Salahsatukhasiatjintenhitamadalahuntukantidiabeteskarena
jintenhitammempunyaibanyakkandungan.(Mahmud2007)
Haltersebutmelatarbelakangidilakukannyapengujiankhasiat
antidiabetesekstrakjintenhitam(NigellasativaLinn)untukmenurunkan
kadarglukosadarahhewanuji.Dalamhalinihewanpercobaanyang
digunakanadalahtikusputihjantangalurwistardanSD(SpragueDawley)
denganmetodeujidabetesaloksandantoleransiglukosasebagaimetodeuji
antidiabetespraklinisyangmendekatikeadaanpenderitadiabetesyang
sebenarnyadanpemeriksaankadarglukosadarahnyamenggunakan
glukometer.
1.2.PerumusanMasalah
Apakahfraksietilasetatbijijintenhitam(nigellasativaLinn)
memilikikemampuanmenurunkankadarglukosadarahpadatikusputih
jantangalurwistardenganmetodeinduksialoksandanujitoleransiglukosa.
1.3.PembatasanMasalah
Penelitianinidibatasihanyauntukmengetahuikemampuanfraksi
etilasetatbijijintenhitam(NigellasativaLinn)dalammenurunkankadar
glukosadarahtikusjantanmenggunakanmetodeinduksialoksandan
toleransiglukosa.
3
1.4.TujuanPenelitian
Untukmengetahuiefekhipoglikemiadalamfraksietilasetatbiji
jintenhitam(NigellasativaLinn)padatikusputihjantangalurwistar
denganmetodeinduksialoksandanujitoleransiglukosa.
1.5.Hipotesis
Fraksietilasetatjintenhitam(Nigellasativa.Linn)dapat
menurunkankadarglukosadarahtikusputihjantanyangdiinduksidengan
metodeinduksialoksandanujitoleransiglukosa.
1.6.ManfaatPenelitian
Hasilpenelitianinidiharapkandapatmemberikaninformasidalam
meningkatkanupayakesehatandenganmengembangkanobattradisional
sehinggadapatdimanfaatkandenganberdasarkanlandasanilmiah.
4
BABII
TINJAUANPUSTAKA
2.1.JINTENHITAM(NigellasativaLinn).
2.1.1.Klasifikasi(ITIS,2009)
Berdasarkanilmutaksonomi,klasifikasitanamanjintenhitam
adalahsebagaiberikut:
Dunia:Plantae
Subdunia:Tracebionta
Divisi:Spermatophyta
Subdivisi:Magnoliophyta
Kelas:Magnopliopsida
Subkelas:Magnoliidae
Bangsa:Ranuculases
Suku:Ranuculaceae
Marga:Nigella
Jenis:NigellasativaLinn
Sinonim:Nigellacreticamiller,NigellaindicaRoxb
2.1.2.Namalain
DiDunia,jintenhitamdikenaldenganberbagainama,antaralain:
Kalonji(bahasaHindi),Kezah(Hebrew),Chamushka(Rusia),Habbatus
Sauda(Arab),Siyahdaneh(Persian),FennelFlower/BlackCumin/
NutmegFlower/RomanCoriander/BlackOnianSeed(English)
5
2.1.3.Morfologi(Tjitrosoepomo,2000)
NigellasativaatauJintenHitamPahitinimerupakanjenistanaman
bunga,tumbuhsetinggi20-50cm,berbatangtegak,berkayudanberbentuk
bulatmenusuk.
Daunruncing,bercabang,bergaris(namungarisdaunnyatidak
sepertibenang;tidakseperticiridauntumbuhangenusNigellapada
umumnya),daunnyakadang-kadangtunggalataubisajugamajemuk
denganposisitersebaratauberhadapan.Bentukdaunnyabulattelur
berujunglancip.Dibagianpermukaandaunnyaterdapatbuluhalus.
Tumbuhanjintanhitammemilikibungayangbentuknyaberaturan.
Bungainikemudianmenjadibuahberbentukbumbungataubuahkurung
berbentukbulatpanjang.Bunganyamenarikdenganwarnabirupucatatau
putih,dengan5-10mahkotabunga.
Buahnyakerassepertibuahbuni.Berbentukbesar,menggembung,
berisi3-7unitfolikel,masing-masingberisibanyakbijiataubenihyang
seringdigunakanmanusiasebagairempah-rempah.Memilikirasapahit
yangtajamdanbausepertibuahstrawberry.Bijinyaberwarnahitampekat.
2.1.4.PengembangandanPertumbuhan(DeGuzman,1999)
Perkecambahansecaraepigeal.didalamiklimhangatjintenhitam
mulaiberbungasekitar100harisetelahpenaburandanbenihmulai
tumbuh50harikemudian.didalamiklimlebihhangat,jintenhitam
berbungamulai8-10minggusetelahperkecambahan.Penyerbukan
sebagianbesardilakukanolehserangga.Penyerbukanterjadipadabunga
yanglebihtuayangmulaimembungkuk.
6
2.1.5.PenanamandanPerkembangbiakan(DeGuzman,1999)
Jintenhitamdapatdikembangbiakandenganmudah,dengancara
bijidisebarkan.Perkecambahandilakukanditempatgelapdan
temperaturtinggi.benihditaburkandidalambloktepukan,setelahmenjadi
kecambahbenihditanamberbaris,umumnyajarakantarabarissatu
denganyanglainadalah25-40cm.Diethiophia,Jintenhitamsering
dipanenbersamaandengandengangandumdanjewawut.
2.1.6.EkologidanPenyebaran(KHyne,1987)
JintenhitamdipercayaberasaldariMediterania(seputarLaut
Tengah),eropaselatan,sampaikeindia.Bentuknyakecilberserabut,
ukurannyatidaklebihdari3mm,dapattumbuhsampaipadaketinggian
1100mdaripermukaanlaut.Biasanyaditanamdidaerahpegunungan
ataupunsengajaditanamdihalamanatauladangsebagaitumbuhan
rempah-rempah.DaerahsentraproduksiJintandiIndonesiaadalah
SumateradanJawasertadiberbagaidaerahlainnya.
2.1.7.Kandungankimiabijijintenhitam(DeGuzman,1999)
Bijijintenhitamantaralainmengandung:
a.Minyakatsiri:thymoquinone25-50,p-cymenedan-pinene,
carvacrol,anetoldan-terpineol.
b.Minyaklemak:asameososianat0,5%,asamlinoleatsekitar60%,asam
linolenat0,3%,asammyristat0,3%,asamoleatsekitar25%,asam
palmiat0,3%danasamstearat3%.
c.Kandunganlainnya:Tanin,alkaloid,nigelon,nigelimin,nigeliminn-
oksidadannigelisin,campestrol,stigmasterol,-sitosterol,-
7
spinasterol.Jugamengandung1,5%glucosidamelantinyangbiladi
hidrolisismenghasilkanracunmelantogenin.
Dalam100gbijijintenhitammengandung:air4g,protein22g,
lemak41g,karbohidrat17g,serat8g,mineral4,5g(Na0,5g,K0,5g,Ca
0,2g,P0,5g,Fe10mg),thiamin1,5mg,piridoksin0,7mg,tokoperol34mg
danniasin6mg.
2.1.8.Khasiatjintenhitam
Diuretik,karminatif,kencingbatu,sakitgigi,bengkakkarena
peradangan,kelelahan,cacingan,masalahkulitsepertijerawat,haid,
menambahASIpadawanitamenyusui,meningkatkansistemkekebalan
tubuh,Khasiatlainnyaadalahmengurangiberatbadandanlingkarperut,
menurunkantekanandarah,guladarahpuasa,trigiliseridadankolesterol
HDL,asamurat,hipoglikemik(Al-Haderetal.,1993).
2.2.TinjauanHewancoba(Sharpetal,1998)
Klasifikasihewancobayangdigunakanpadapenelitianiniadalah:
Regnum:Animalia
Filum:Chordata
Kelas:Mamalia
Bangsa:Rhodenta
Keluarga:Muridae
AnakKeluarga:Murinae
Marga:Rattus
Jenis:R.Norvegicus
8
Ratusnorvegicusmerupakansalahsatuspeciestikusyangpaling
umumdijumpaidirpekotaan.Hasilseleksipadahewaniniseringdigunakan
sebagaihewanpercobaanyangdikenaldengantikusputihdansebagai
hewanpeliharaaandenganwarnayangbervariasi.
2.3.EkstrakdanEkstraksi
Ekstrakadalahsediaanpekatyangdiperolehdenganmengekstraksi
zataktifdarisimplisianabatiatauhewanimenggunakanpelarutyang
sesuai,kemudiansemuaatausebagianpelarutdiuapkandanmassaatau
serbukyangtesisaperlakukansedemikianhinggamemenuhibakuyang
telahditetapkan.(DepkesRI,1994)
Ekstraksiadalahsuatuprosespenarikankandungankimiayanglarut
sehinggadapatterpisahdaribahanbahanyangtidaklarutdengan
menggunakanpelarutcair.Ekstrakmerupakansediaankentalyang
diperolehdenganmengekstraksisenyawaakifdarisimplisianabatiatau
hewanimenggunakanpelarutdandiuapkandanmassaatauserbukyang
tersisadiperlakukansedemikianrupahinggamemenuhibakuyangtelah
ditetapkan.(Harbone,1996)
Ekstraktumbuhanobatyangdibuatdarisimplisianabatidapat
dipandangsebagaibahanawaldianalogkandengankomoditibahanbaku
obatyangdenganteknologifitofarmasidiprosesmenjadibahanantaraatau
produkjadi.Ekstraksebagaibahananataraberartimasihmenjadibahan
yangdapatdiproseslagimenjadifraksifraksi,isolatsenyawatunggal
ataupuntetapsebagaicampuandenganekstraklain,ekstraksebagaiproduk
9
jadiberartiekstrakyangberadadidalamsediaanobatjadisiapdigunakan
olehpenderita.
Prinsipyangsangatpentingdalamekstrakadalahbahwasuatuzat
akanterekstraksiefektifjikaekstraksidilakukanberulang-ulangdengan
menggunakanpelarutdalamjumlahyanglebihkecildaripadahanyasatu
atauduakaliekstraksidenganjumlahyangbesar.
Ekstrakdikelompokanatasdasarsifatnya,yaitu(Voight,2005):
a.Ekstakenceradalahsediaanyangmemilikikonsistensisemacammadu
dandapatdituang.
b.Ekstrakkentaladalahsediaanyangliatdalamkeadaandingindantidak
dapatdituang.Kandunganairberjumlahsampai30%.
c.Ekstrakkeringadalahsediaanyangmemilikikonsistensikeringdan
mudahdituang,sebaiknyamemilikikandunganlembabtidaklebih
dari5%.
d.Ekstrakcairadalahekstrakyangdibuatsedemikianrupasehingga1
bagiansimplisiasesuaidengan2bagianekstrakcair.
Prosesekstraksidapatmelaluitahapmejadi:pembuatanserbuk,
pembasahan,penyariandanpemekatan(DepkesRI,1978,1986)
2.3.1.Pembuatanserbuk
Padaumumnyapenyarianakanbertambahbaikbilapermukaan
serbuksimplisiayangbersentuhandengancairanpenyarisemakinluas.
Kehalusanserbukakanmempermudahprosespenyarian.Tetapiserbuk
yangterlaluhalusakanmerusakseldindingselsehinggaakanmerusakzat
10
aktifpadasimplisiatersebutdanzatyangtidakdiinginkanpundapatikut
masukkedalamhasilpenyarian.
2.3.2.Pembasahan
Pembasahanserbukdilakukanpadapenyarian.Dimaksudkan
memberikesempatansebesar-besarnyakepadacairanpenyarimemasuki
pori-poridalamsimplisiasehinggamempermudahpenyarian
selanjutnya(Depkes,1978)
2.3.3.Penyari/Pelarut
Cairanpenyariyangdigunakandalamprosespembuatanekstrak
adalahpenyariyangbaikuntuksenyawakandunganyangberkhasiatatau
aktif.Penyaritersebutharusdipisahkandaribahandadarikandungan
lainnya,sertaekstrakhanyamengandungsebagianbesarsenyawayang
diinginkan.Faktorutamayangmenjadipertimbangandalampemilihan
penyariadalahselektifitas,ekonomis,dankemudahanbekerja(DepkesRI
1978)
Macam-macammetodepenyariandalamekstraksiyangdapatdi
lakukanialah:
a.Ekstraksidenganmenggunakanpenyari(DepkesRI1978)
1.Maserasi(Depkes2001)
Maserasiadalahprosespengekstrakkansimplisiadengan
menggunakanpelarutdenganbeberapakalipengocokanatau
pengadukanpadatemperaturruangan(kamar)secarateknologi
11
termasukekstraksidenganmetodepencapaiankonsentrasipada
keseimbangan.
2.Perkolasi
Perkolasiadalahekstraksidenganpelarutyangselalubaru
sampaisempurna(exhaustiveextraction)yangumumnyadilakukan
padatemperaturruangan.Prinsipperkolasiadalahdengan
menempatkanserbuksimplisiapadasuatubejanasilinder,yang
bagianbawahnyadiberisekatberpori.Cairanpenyariakanmenarik
zataktifdalamsel-selyangterdapatdalamsimplisia.
3.Refluks
Refluksadalahekstraksidenganpelarutsampaipada
temperaturtitikdidihnyaselamawaktutertentudanjumlahpelarut
terbatasyangrelatifkonstandenganadanyapendinginbalik.
Umumnyadilakukanpengulanganprosespadaresidupertama
sampai3-5kalisehinggadapattermasukprosesekstraksi
sempurna.
4.Sokhletasi
Sokhletadalahekstraksimenggunakanpenyariyang
berbeda.Umumnyadilakukandenganalatkhusussehinggaterjadi
ekstraksiberlanjutsampaijumlahpenyarirelatifkonstandengan
adanyapendinginbalik.
12
5.Digesti
Digestiadalahmaserasikinetik(denganpengadukan
kontinyu)padatemperaturyanglebihtinggidaritemperature
ruangan,secaraumumdilakukanpadatemperature40oC-50oC.
6.Infus
Infusadalahekstraksidenganpelarutairpadatemperatur
penangasairmendidih,temperatureterukur96oC-98oCselama
waktutertentu(15-20menit).Infuspadaumumnyadigunakan
untukmenarikataumengekstraksizataktifyanglarutdalamair
daribahan-bahannabati.Hasildariekstrakiniakanmenghasilkan
zataktifyangtidakstabildanmudahtercemarolehkumandan
kapang,sehinggaekstrakyangdiperolehdenganinfustidakboleh
disimpanlebihdari24jam.
7.Dekok
Dekokadalahinfusyangwaktunyalebihlama(lebihdari
30menit)dantemperatursampaititikdidihair.
Caraekstraksiyangdigunakandalampenelitianiniadalah
maserasi.MaserasiadalahcaraekstraksiyangpalingsederhanaBahan
yangdihaluskansesuaidengansyaratfarmakope(umumnyaterpotong
potongataudiserbukkasarkan)disatukandenganbahanekstraksi.
Waktumaserasiberbedabeda,masingmasingfarmakope
mencantumkan4-10hari.(Voight,1995)
13
b.Destilasiuap
Destilasiuapadalahekstraksikandungansenyawamudah
menguap(minyakatsiri)daribahan(segaratausimplisisa)dengan
uapair.Carainididasarkanpristiwatekananparsialsenyawa
kandunganmenguapdenganfaseuapairdariketelsecaraberlanjut
sampaisempurnadandiakhiridengankondensasifaseuapcampuran
menjadidestilatairbersamasenyawakandunganyangmemisah
sempurnasebagian.
2.4.DiabetesMellitus
Diabetesmellitus,penyakitgulaataukencingmanisadalahsuatu
gangguankronisyangkhususnyamenyangkutmabolismehidratarang
(glukosa)didalamtubuh.Penyebabnyaadalahkekuranganhormoninsulin,
yangberfungsimemanfaatkanglukosasebagaisumberenergidan
mensintesislemak.Akibatnyaialahglukosabertumpukdidalamdarah
(hiperglikemia)danakhirnyadiekskresikanlewatkemihtanpadigunakan
(glycosuria).Olehkarenaituproduksikemihsangatmeningkatdanpasien
selalubuangairkecil,merasaselaluhaus,beratbadanmenurundanberasa
lelah.Penyebablainialahmenurunnyakepekaanreseptorselbagiinsulin
(resistensiinsulin)yangdikibatkanmakanterlalubanyakdankegemukan
(overweigh).
2.4.1.DiabetesmelitusTipe-1(IDDM)
Padatipeiniterdapatdestruksidariselselbetapankreas,
sehinggatidakmemproduksiinsulinlagidenganakibatselseltidak
menyerapglukosadaridarah.Karenaitukadarglukosadarahmeningkatdi
14
atas10mmol/l,yakninilaiambangginjal,sehinggaglukosaglukosa
berlebihandikeluarkanlewaturinbersamabanyakair(glycosuria)Di
bawahkadartersebutglukosaditahanolehtubuliginjal.Tipe-1
mengghinggapiorang-orangdibawahusia30tahun.
Penyebabdiabetestipe-1inibelumbegitujelas,tetapiterdapat
indikasikuatbahwajenisinidisebabkanolehsuatuinfeksivirusyang
menimbulkanreaksiautoimunberlebihanuntukmenanggulangivirus.
Akibatnyasel-selpertahanantubuhtidaktidakhanyamembasmiviru,
melainkanjugaturutmerusakataumemusnahkansel-sellangerhans.
Dalamwaktusatutahunsesudahdiagnosa,80-90%penderitatipe-1
memperlihatkanantibodisel-selbetadidalamdarahnya.Padatipeini
faktorketurunanjugamemegangperanan.Virusyangdicurigaiadalah
virusCoxsackie-BEpstein-Barr,morbilldanvirusparotitis.Pengobatan
tipeinisatu-satunyaadalahpemberianinsulinseumurhidup.(Tjaydan
Rahardja,2002)
2.4.2.DiabetesmelitusTipe-2(NIDDM)
Padatipeinilazimnyamulaidiatas40tahundenganinssidenlebih
besarpadaoranggemukdanpadausialebihlanjut.Orangorangyang
hidupnyamakmur,culasdankuranggerakbadanlebihbesarresiko
terkenagejalaini.Penyebabgejalainiadalahakibatmenua,banyakpasien
jenisinimengalamipenyusutanselselbetayangprogresifsertaserta
penumpukanamiloidsekitarselselbeta.Selbetayangtersisapada
umumnyamasihaktiftetapisekresiinsulinnyasemakinberkurang.Selain
itukepekaanreseptornyamenurun.Hipofunsiselbetainibersama
15
resistensiinsulinyangmeningkatmengakibatkanguladarahmeningkat
(hiperglikemia).Padatipeinitidaktergantungpadainsulindandapat
diobatidenganantidiabetikoral.
Diagnosatipe-2umumnyabarudidiagnosapadastadium
terlambat,padahaldiagnosadiniadalahpentingsekaliuntuk
menghindarkankomplikasilambat.Makabilaterdapatgejalasepertihaus
yanghebat,seringbuangairkecildanturunnyaberatbadansertarasaleti,
makasebaiknyasegerakonsultasikedokteruntukdiperiksapenyakit
gula.(TjaydanRahardja,2002)
2.4.3.DiabetesGestional
DiabetesMellitusgestional(GDM)adalahkeadaandiabetesatau
intoleransiglukosayangtimbulselamamasakehamilan,danbiasanya
berlangsunghanyasementaraatautemporer.
Diabetespadamasakehamilan,walaupunumumnyadapatpulih
sendiribeberapasaatsetelahmelahirkan,namundapatberakibatburuk
yangdapatterjadiantaralainmalformasikongenital,peningkatanberat
badanbayiketikalahirdanmeningkatnyarisikomortalitasperinatal.
WanitayangpernahmenderitaGDMakanlebihbesarrisikonyauntuk
menderitalagidiabetesdimasadepan.(Depkes,2006).
2.4.4.KelainanFisiologispadaDiabetes
Manifestasiutamadiabetesmellitusadalahhiperglikemiayang
terjadiakibatberkurangnyajumlahglukosayangmasukkedalamsel,
berkurangnyapenggunaanglukosaolehberbagaijaringandanpeningkatan
produksiglukosakarenaprosesglukoneogenesisolehhati.Poliuri,
16
polidipsi,polifagidanpenurunanberatbadanmerupakangejalautama
penyakitini.Dalamkeadaanhiperglikemiayangberlangsunglamadan
melewatiambangginjal,akanterjadiglukosuriadimanabatasmaksimal
reabsorbsipadatubulusrenalisdilampauidanglukosaakandiekskresikan
kedalamurin(Murraydkk,1992).
Volumeurinmeningkat(poliuri)akibatterjadinyadiuresisosmotik
yangselanjutnyaakanmenimbulkandehidrasidanadanyarangsangan
untukbanyakminum(polidipsi).Glikosuriamenyebabkankehilangan
kaloriyangcukupbesar(4,1kalbagisetiapkarbohidratyang
diekskresikan).Keadaaninijikaditambahdengandeplesijaringanotot
danadiposaakanmengakibatkanpenurunanberatbadanyanghebat
kendatiterdapatpeningkatanseleramakan(polifagia)danasupankalori
yangnormal.Namunglukosayangdimakantidakakandapatmasukke
dalamseluntukmembentukglikogenmaupundipergunakanuntuk
menghasilkanenergisehinggamengeluhlelah,mengantuk(Murraydkk,
1992;Sylviadkk,1995).
Dalamkeadaandefisiensiinsulin,sintesisproteinakanmenurun.
Pengangkutanasamaminosebagaisubstratglukoneogenikkedalamotot
berkurangsehinggaterjadikeseimbangannitrogenyangnegatif.Defisiensi
insulinjugaterjadikeseimbangannitrogenyangnegatif.Defisiensiinsulin
jugamenyebabkantidakadanyakerjaantipolisismaupunlipogenik
sehinggakadarasamlemakplasmaakanmeninggi.Jikakemampuanhati
untukmengoksidasiasamlemakterlampaui,makasenyawaasam-
hidroksibutiratdanasamasetoasetatakanbertumpuksehinggaterjadi
17
ketosis.Mula-mulapenderitadapatmengimbangipenumpukanasam
organikinidenganmeningkatkanpengeluaranCO2lewatsistemrespirasi,
namunbilakeadaaninitidakdikendalikanmakaakanterjadiasidosis
metabolik,pernafasanmenjadicepatdandalam(pernafasankushmaul)
danpasiendapatmeninggaldalamkeadaankomadiabetik.
Selainketoasidosis,komplikasiyangseringtimbulialah
komplikasivaskularjangkapanjangberupamikroangiopatimencakup
retinopatidiabetik,nefropatidiabetikmaupunneuropatidiabetik.
Mikroangiopatimempunyaigambaranhistopatologisberupa
aterosklerosis,penimbunansorbitoldalamintimavaskular.
Hiperlipoproteinemiamaupunkelainanpembekuandarah.Sehingga
diabetesmellitusdapatmenjadisalahsatupenyebabpenyakitangina
pektoris,onfarkmiokard,gagalginjal,katarak.Kegagalanpernafasan
bahkankematian(Murraydkk,1992;Sylviadkk,1995).
2.4.5.DiagnosisDiabetes
Penyakitdiabetesmelitusditandaigejala3P,yaitupoliuria(banyak
berkemih),polidipsia(banyakminum)danpolifagia(banyakmakan),
yangdapatdijelaskansebagaiberikut:
Disampingnaiknyakadarguladarah,diabetesbercirikanadanya
guladalamkemih(glycosuria)danbanyakberkemihkarenaglukosayang
diekskresikanmengikatbanyakair.Akibatnyatimbulrasasangathaus,
kehilanganenergi,turunnyaberatbadansertarasaletih.Tubuhmulai
membakarlemakuntukmemenuhikebutuhanenerginya,yangdisertai
perubahanzat-zatperombakan,antaralainaseton,asamdiksobutiratdan
18
diacetat,yangmembuatdarahmenjadiasam.Keadaanini,yangdisebut
ketoacidosisdanterutamatimbulpadatipe-1,amatberbahayakarena
dapatmenyebabkanpingsan(comadiabeticum).Napaspenderitasering
kaliberbauaseton(TjaydanRahardja,2002).DiagnosisDMyang
dianjurkanadalahyangsesuaidengananjuranWHO1985dengan
mengambilsampleglukosadarahvenapuasadanduajampostpradial
(Ganiswara,1995).
2.5.Alloksan
Gambar1.AlloksanSinonim:Alloxan;2,4,5,6-tetraoxohexahydropyrimidine;
mesoxalylurea;mesoxalylcarbamide
Rumusmolekul:C4H2N2O4
Beratmolekul:142,07
Persentasekandungan:C33.82%,H1.42%,N19.72%,O45.05%
Kelarutan:mudahlarutdalamair;aseton;alcoholdan
petroleumeter.Larutandalamairpanas
berwarnakuningdansetelahdingin
Penggunaan:Untukmenghasilkandalameksperimen
terhadapbinatangdiabetes;dalameksperimen
nutrisi;dalamsintesissenyawaorganic.
Mekanismekerja:Aloksandengancepatterikatatauterakumulasi
didalamsel-Bpankreasberbedadenganbukan
sel-Bpankreas.agensitotoksiknyasecaracepat
19
danselektifmerusakkemampuansel-Bdalam
memproduksiinsulinyangdikenalsebagaiefek
diabetogenik.
Stabilitas:Aloksanstabilpadasuhu210derajatcelcius.
Penyimpananpadasuhurendahdalamwadah
tidaktembuscahayadantertutuprapat.(Windolz
M,1983).
2.6.Glibenclamid
Gambar2.Glibenclamid
Sinonim:Glibenclamida;Glibenclamidum;Glibenklamid;
Glibenklamidas;Glibenklamidi;Glybenclamide;
Glybenzcyclamide;HB-419;U-26452
(marthindale);Glyburide(merk)
Namakimia:1-{4-[2-(5-Chloro-2
methoxybenzamido)ethyl]benzenesulphonyl}-3-
Rumusmolekul:C23H28ClN3O5S
Beratmolekul:494.01
PersentasiKandungan:C55.92%,H5.71%,Cl7.18%,N8.51%,O
16.19%,S6.49%
20
Deskripsi:Berwarnaputihatauhampirputih,berbentuk
serbukKristal,(Marthindal)
Kelarutan:Praktistidaklarutdalamairdaneter;sedikit
larutdalam,etanol(95%),metanoldanmetil
alcohol;denganmudahlarutdalamdiklormetan
ataumetilenklorida.pKa5,3.Dapatdilarutkan
dalamlarutanhidroksidaalkali.LD50padatikus
(g/kg):>20secaraoral;>12,5i.p;>20s.c.
Penggunaanterapi:Antidiabetikoral(diabetestipe2),hipoglikemik
Dosis:dewasa:oral2,5-5mg/haribersamaanmakan;
untukpasienlebihsensitiveterhadapobat
hipoglikemik(disfungsiginjalatauhati)dewasa:
padaawalnya1,25mg/hari,perawatan:1,2520
mg/haridalamdosistunggalataubagi,tidak
direkomendasikanuntukdosis>20mg/hari.
(AtoZ)
Mekanismekerja:Derivat-klormetoksiiniadalahobatpertama
dariantidiabetikaoralgenerasike-2dengan
khasiathipoglikemisnyayangkira-kira100kali
lebihkuatdaripadatolbutamida.Polakerjanya
berlainandengansulfonylurealain,yaitudengan
single-dosepagiharimampumenstimulasi
sekresiinsulinpadasetiappemasukanglukosa
(selamamakan).Dengandemikianselama24
21
jamtercapairegulasiguladarahoptimalyang
mirippolanormal.resorpsinyadariususpraktis
lengkap,PP-nyadiatas99%,plasma-t1/2-nyaca
10jam,kerjanyadapatbertahansampai24jam.
Dalamhatizatinidirombakmenjadimetabolit
kurangaktif,yangdiekskresikansamaratalewat
kemihdantinja.(TjaydanRahardja,2002)
mekanismenyamengurangiguladarahdengan
menstimulasipelepasaninsulindaripankreas.
Memungkinkanjugamengurangiproduksi
glukosahatidanataumeningkatkanrespon
insulin.
2.7.Acarbosa(Martindale,2007)
Sinonim:Acarbose;Acarbosum;Akarbos
NomorregestasiCAS:56180-94-0
Beratmolekul:645.60
Rumusmolekul:C46.51%,H6.71%,N2.17%,O44.61%
Deskripsi:Berbentukamorp,higroskopis,berwarnaputih/
kekuning-kuningan,sangatmudhlarutdalamair,
larutdalammetalalcoholdanpraktistidaklarut
dalamdiklorometan.
Mekanismekerja:Berkhasiatmenghambatenzimglukosidase
(matase,sukrasedanglukomilase)yangperluuntuk
22
perombakandi/polisakaridadarimakananmenjadi
monosakarida,dengandemikianpenyerapan
glukosadiperlambat,sehinggafluktuasiglukosa
darahmenjadilebihkecildannilairata-ratanya
menurun.
Dosis
Efeksamping
:3dd50mglangsungsebelummakan,bilaperlu
dinaikan1-22minggusampaimaksimal3dd100
mg/minggu.
:Terbentuknyabanyakgasdiususdankejangusus
diakibatkanpenumpukanhidratangyangtidak
dicernadidalamusus.
2.8.Etilasetat(Merk)
Gambar3.Etilasetat
Sinonim
Sifatkimiadanfisika
:Etilester,esterasetat,esteretanol
:Etilasetatadalahpelarutpolarmenengahyang
volatil(mudahmenguap),tidakberacun,dan
tidakhigroskopis.Etilasetatmerupakan
penerimaikatanhidrogenyanglemah,danbukan
suatudonorikatanhidrogenkarenatitidakadanya
protonyangbersifatasam(yaituhidrogenyang
terikatpadaatomelektronegatifsepertiflor,
23
oksigendannitrogen.Etilasetatdapat
melarutkanairhingga3%,danlarutdalamair
hinggakelarutan8%padasuhukamar.
Kelarutannyameningkatpadasuhuyanglebih
tinggi.Namundemikian,senyawainitidakstabil
dalamairyangmengandungbasaatauasam.
NamaCAS:10238-21-8(merek)
Rumusmolekul:C4H8O2
Beratmolekul:88.12g/mol
Deskripsi:Cairantakberwarna
Penggunaan:Secaraluasdigunakansebagaibahanpelarut
untukindusridanbahanpelarutuntukekstraksi.
2.9.MetodePengujian
2.9.1.Metodeinduksialoksan
Keadaandiabetespadahewanujiinidapatdilakukandengan
carapankreotomidanjugasecarakimia.Zat-zatkimiasebagaiinduktor
diabetogenantaralainaloksandanstreptozosinyangpadaumumnya
dapatdiberikansecaraparenteral.Zatdiatasmampumenginduksi
hiperglikemiyangpermanendalamwaktuduasamapitigahari.
Prinsipmetodenyaadalahkepadahewanujidilakukandegan
memberikanaloksanmonohidratsecaraintrevenadengandosis140
mg/kgbb.Hewanujiyangberbedadengankondisiyangberbedaakan
menghasilkandosisyangberbedasehinggaujipendahuluantetap
24
dilakukandelapanharisetelahpemberianaloksan.Pemberianobat
antidiabetiksecaraoraldapatmenurunkankadarglukosadarah
dibandingkanterhadaphewanujinormal.
Keadaandiabetespadahewanujidilakukandengan
memberikanaloksanmonohidratsecaraintravenadengandosis140
mg/kgbb.Hewanujiyangberbedasehinggaujipendahuluantetap
dilakukanuntukmenetapkandosisaloksan.Selanjutnyaperkembangan
hiperglikemiadiperiksasetiaphari.Pemberiantanamanobatyangakan
diujidilakukandelapanharisetelahpemberianaloksan.Pemberianobat
antidiabetiksecaraoraldapatmenurunkankadarglukosadarah
dibandingkanterhadaphewanujinormal.
Keadaandiabetespermanenpadahewancobadapatdicapai
denganpemberiandosisaloksanyangoptimum.Sebelummencapai
keadaantersebut,hewanakanmengalamibeberapatahapanyang
fluktuatifdimanaterjadifasehiperglikemia,fasehipoglikemiadan
kadang-kadangsecaraspontanakankembalinormalbahkandapat
terjadikematian.Adapunfase-faseyangterjadiadalah(Jamalia,2005):
Pertama:setelah5sampai19menitpemberianaloksansecara
intravenaakanterjadifasehipoglikemiaawaldimanasarafotonom
akanmempengaruhiselbetapankreasagarmelepaskaninsulinyang
tersimpansehinggainsulinmasukkeperedarandarahdan
menyebabkanhipoglikemia.Faseiniberlangsungsingkatnamundapat
berakibatfatalpadahewan.
25
Kedua:dalamfaseinimula-mulaterjadistimulasi
orthosimpatikdimanaterjadikekuranganinsulinyangdisebabkan
adanyainhibisisekresiinsulinyangdisebabkanadanyainhibisisekresi
insulindalamsel-selbetapankreas.Faseiniberlangsung30sampai120
menitsetelahpemberianaloksan.Dalamfaseinikadang-kadangkadar
glukosamencapai6g/l.
Ketiga:padafaseiniterjadihipoglikemiasekunderdankadang
terjadikonvulsipadahewan.Padafaseinikadarglukosadarah
menurundanmencapaikeadaanyanglebihgawatdarisemula.Tahap
yangterjadiantarajamketigaataujamkesepuluhsetelahpemberian
aloksansecaraintravenasangatberbahayadandapatmenyebabkan
kematian.Untukkedaanfataldianjurkanpemberianglukosa.
Keempat:faseterjadinyahiperglikemiaawalpermanen.Pada
faseinihewanmenjadihiperglikemiapermanen.Terjadisetelah2
sampai8jamsetelahpemberianaloksansecaraintravena.Tetapipada
faseinihewandapatpulamenjadinormalkembalisecaraspontan
setelahselangwaktutersebut.Olehkarenaitusebaiknyapemeriksaan
kadarguladarahdilakukansetelahtahapkeempattersebutatauharike-
3,diperkirakansindromdiabetespermanenterjadiakibatrusaknya
sebagiansel-selbetapulaulangerhans,tetapiadapulayang
menyatakanbahwahayafungsiselLangerhanssajayangambang
rangsangnyamenurun(Jamalia,2005).
26
2.9.2.Metodeujitoleransiglukosaoral.(Depkes,1993)
Kemampuantubuhuntukmenggunakankarbohidratdisebut
toleransikarbohidrat(toleransiglukosa).Denganmemberikanglukosa
1g/kgbbsecaraoral,kadarglukosadarahakannaik,tetapitetapdalam
keadaannormaltidakpernahmelebihi10sampai170mg/100ml.
Puncakkadarglukosadalamatau1jamdankembalinormalsetelah
2-3jam.
Prinsipmetodenyaadalahkepadahewanujiyangtelah
dipuasakanselama20-24jam,diambildarahvenanyalaludiberikan
bahanujiobatantidiabetesdandiberilarutanglukosaperoral.
Kemudiancuplikandarahdiambillagisetelahintervalwaktutertentu.
27
BABIII
KERANGKAKONSEP
3.1.AlurPenelitian
Menurutempirisbijijintenhitamdapatmenurunkanglukosadarah
Serbukbijijintenhitam
Ekstraksidanpartisi
Pengujianfraksietilasetat
Aklimatisasitikus(2minggu)
MetodeinduksialoksanMetodetoleransiglukosa
Pemeriksaankadarglukosadarahtikus(harike-17,21dan28)
Analisadata
28
Pemeriksaankadarglukosadarahtikus(menitke-30,60,90,120,150dan180)
BABIV
METODEPENELITIAN
4.1.TempatDanWaktuPenelitian
PenelitianinidilakukandilaboratoriumFakultasKedokterandan
IlmuKesehatanUniversitasIslamNegeriSyarifHidayatullahJakarta.
BerlangsungmulaidaribulanApril2009sampaiAgustus2009.
4.2.AlatdanBahan
4.2.1.Alat
Alat-alatyangdigunakandalampenelitianiniadalahsebagaiberikut:
Timbanganhewan,kandangtikusbesertatempatmakanandanminum,
sondeoral,jarumsuntik,hotplate,blender,magneticstirer,destiller,oven,
timbangananalitik,holder,glukometerdantesstrip,vacumrotavapor,
kertassaring,kapas,danalat-alatgelas.
4.2.2.Bahan
Bahanyangdigunakanadalahbijijintenhitam(Nigellasativa
linn),denganspesifikasiwarnahitam,bauaromatik,danrasaagakpedas
yangdiperolehdaritokoIsykarimayangdiimpordariMesir,gibenklamid
sebagaiobatpebandinginduksialoksandanakarbosesebagaiobat
pebandingujitoleransiglukosa.
29
4.3.ProsedurKerja
4.3.1.PembuatanSimplisia
Pembuatansimplisiayangbaikdanmemenuhisyaratterdiridari
tahap-tahapsebagaiberikut:sortasi,pencucian,perajangan,pengeringan,
penggilingandanpengayakan.
4.3.2.Ekstraksi(Harbone,1996)
Simplisiabijijintenhitam(NigellasativaL)diekstraksidengan
metodemaserasisecarabertingkatdenganmenggunakanpelarutetanol
70%sehinggadidapatekstrak,laluekstraktersebutdievaporasidengan
vacuumevaporatorsehinggadidapatekstrakkentalkemudiandi
tambahkanpelarutetilasetatkemudianpartisihinggaterbentuk2lapisan,
lapisanekstraketilasetattersebutdiujiaktivitaspenurunankadarglukosa
darah.
a.Ditimbangserbuksimplisia2000gram,kemudiandimasukkanke
dalamErlenmeyer,ditambahkanpelarutetanol70%sampaiserbuk
simplisiaterendamdanterdapatlapisanpelarutsetebal3cmdiatas
serbuksimplisia.
b.Erlenmeyerditutupmaserasiselamasatuharisambilsesekalidiaduk.
c.Disaringhasilmaserasidenganmenggunakankapasdiatascorong
sehinggadidapatkanfiltrate,selanjutnyafiltrateyangdihasilkan
disaringlagidenganmenggunakankertassaring.Kemudian
dimaserasikembalisampainampakwarnapucat.
30
d.Filtratyangdidapatkankemudiandiuapkanpelarutnyadengan
menggunakanrotaryevaporatorvakumsampaididapatkanektrak
kental.
e.Ekstrakkentalditambahkanairaquadestsebanyak100150lalu
pindahkanpadacorongpisahkemudianmasukanetilasetatsebanyak
100mlkemudiandikocok,lakukanpartisisampaiwarnapelarut
menjadijernihkembalikemudianambillapisanfraksietilasetat.
f.Fraksietilasetatyangdidapatkemudiandimurnikandengan
penambahantragakan,kocokkuatlaludisaringmenggunakankertas
saring.
g.Fraksietilasetatmurnikemudiandiuapkandenganrotaryevaporator
hinggadidapatkanfraksikentaletilasetat.Kemudiandibuatlarutan
ujidandiberikankepadahewanuji.
4.3.3.UjiPenapisanFitokimia
a.Identifikasigolonganalkaloid
Sebanyak+5gramserbukdilembabkandengan5ml
ammoniak25%digerusdalammortir,kemudianditambahkan20ml
kloroformdandigeruskembalidengankuat,campurantersebut
disaringdengankertassaring,filtratberupalarutanorganikdiambil
(sebagailarutanA),sebagailarutanA(10ml)diekstraksidengan10
mllarutanHCl1:10denganpengocokandalamtabungreaksi,diambil
larutanbagianatasnya(larutanB).LarutamAditeteskanbeberapa
tetespadakertassaringdandisemprotatauditetesidenganpereaksi
Dragendroff,terbentukwarnamerahataujinggapadakertassaring
31
menunjukkanadanyasenyawaalkaloid.LarutanBdibagidalam2
tabungreaksi,ditambahkanmasing-masingpereaksiDragendroff
danpereaksiMayer,terbentukendapanmerahbatadenganpereaksi
DragendroffatauendapanputihdenganpereaksiMayermenunjukkan
adanyasenyawaalkaloid.
b.Identifikasigolonganflavonoid
Sebanyak+10gramserbukditambah100mlairpanas,
didihkanselama5menit,saring.Ambil5mlfiltratnya(dalamtabung
reaksi),ditambahkanserbukMgsecukupnyadan1mlasamklorida
pekatdan2mlamilalkohol,kocokkuatdanbiarkanmemisah.
Terbentuknyawarnamerah,kunig,ataujinggapadalapisanamil
alkoholmenunjukkanadanyaflavonoid.
c.Identifikasigolongansaponin
Serbukdimasukkankedalamtabungreaksi,ditambah10
mlairpanas.Setelahdinginkocokkuatsecaravertikalselama10
detik.Terbentuknyabusayangstabil,menunjukkanadanyasaponin,
biladitambahkan1tetesHCl1%busatetapstabil.
d.Identifikasigolongansteroiddantriterpenoid
Sebanyak+5gramserbukdimaserasidalam20mleter
selama2jamkemudiandisaring.Diuapkandalamcawanpenguap
sampaikering.Ditambahkan2tetesasetatanhidratdan1tetesasam
sulfatpekatkedalamresidu.Terbetuknyawarnahijauataumerah
menunjukkanadanyasteroid/triterpenoid.
32
e.Identifikasigolongantanin
Sebanyak+10gramserbukditambah10mlair,didihkan
selama15menit,setelahdinginkemudiandisaringdengankertas
saring.Filtratditambah1-2tetesFeCl31%,terbentuknyawarnabiru,
hijauatauhitammenunjukkanadanyaseyawagolongantanin.
f.Identifikasigolongankuinon
Sebanyak+1gramserbukdipanaskandalamairselama5
menit,disaring.Sebanyakmlfiltatditambah5mlNaOH1N,
terbentukwarnamerahmenunjukkanadanyakuinon.
g.Identifikasigolonganminyakatsiri
Sebanyak+2gramserbukdimasukkankedalamtabung
reaksi(volume20ml),tambahkan10mlpelarutpetroleumeter.Pada
muluttabungdipasangcorongyangdiberilapisankapasyangtelah
dibasahidenganair,kemudiandisaringdengankertassaring.Filtrat
yangdiperolehdiuapkanpadacawanpenguap,selanjutnyaresidu
dilarutkandenganpelarutetanol95%sebanyak5mllalusaring
dengankertassaring.Filtratnyadiuapkandengancawanpenguap,
residuyangberbauaromatikmenunjukkanadanyasenyawagolongan
minyakatsiri.
4.3.4.Rancanganpercobaan
Hewancobayangdigunakanadalahtikusputihjantangalur
Wistar,berumur4-5bulandenganberatbadan180-250gram
diaklimatisasiselamaduamingguagardapatmenyesuaikandengan
33
KelJmlTikusPerlakuan16Kontrolnormal,diberiaqudest1ml/200gbb26Kontrolnegatif,dibuatdiabetes,diberiaqudest1ml/200gbblingkungannya.Selamaprosesadaptasi,dilakukanpengamatankondisi
umumdanpenimbanganberatbadan.
a.Induksialoksan
Hewanujidipilihsebanyak36ekortikusputihjantansecara
acakuntukdibagimenjadi6kelompok,masing-masingterdiridari6
ekor.Penentuanjumlahtikustiapkelompok,dihitungberdasarkan
rumusFederer:(n-1)(t-1)15,dimanatmenunjukkanjumlah
perlakuandannmenunjukkanjumlahulanganminimaldaritiap
perlakuan(Sudjana,1992).
b.Metodetoleransiglukosa
Hewanujidipilihsebanyak32ekortikusputihjantansecara
acakuntukdibagimenjadi4kelompok,masing-masingterdiridari8
ekor.Penentuanjumlahtikustiapkelompok,dihitungberdasarkan
rumusFederer:(n-1)(t-1)15,dimanatmenunjukkanjumlah
perlakuandannmenunjukkanjumlahulanganminimaldaritiap
perlakuan(Sudjana,1992).
Tabel1.PembagianKelompokHewanUjiinduksialoksan
34
KelJmlTikusPerlakuan18Kontrolnormal,diberiaqudest1ml/200gbb28Kontrolnegatif,diberiglukosa,diberiairsuling1ml/200gbb38Kontrolpositif,diberiglukosa,diberisuspensiakarbosa1,0mg/200gbb48Diberiglukosa,diberisediaanujifraksietilasetatbijijintenhitamdosispotensialpadametodeinduksialoksan.36Kontrolpositif,dibuatdiabetes,diberisuspensiglibenklamid0,1mg/200gbb46Dibuatdiabetes,diberisediaanujiekstrakkentalbijijintenhitam41mg/200gbb56Dibuatdiabetes,diberisediaanujiekstrakkentalbijijintenhitam82mg/200gbb66Dibuatdiabetes,diberisediaanujiekstrakkentalbijijintenhitam164mg/200gbbTabel2.PembagianKelompokHewanUjiToleransiGlukosa
4.3.5.PembuatanSediaanUjidanDosis
a)Dosisekstrakbijijintenhitam
DosisdipakaiberdasarkanpenelitianAl-awdidanGumatahun
1987bahwadengandosis41mg/haribijijintenhitamtidak
35
memberikanefekyangsignifikanterhadappenurunankadarglukosa
darahtikusdenganmetodeinduksistreptotozin.Dalampenelitianini
dilakukanpercobaandengandosisfraksietilasetatbijijintenhitam
yangdigunakanadalah:
Dosisrendah41mg/200gbb
Dosissedang82mg/200gbb
Dosistinggi164mg/200gbb
Volumelarutanujiyangdiberikankepadasetiapkelompokuji
dankontrolpembandingsamadenganvolumeairsulingyangdiberikan
kepadakontrolnormaldankontrolperlakuanyaitusebanyak1ml/200
g.
b)Dosisglibenklamid
GlibenklamiddiberikandalambentuksuspensidenganCMC
sesuaidosisoralefektifpadamanusia5mg/60kgbbyang
dikonversikanberdasarkanrumusHED,yaitudosisuntuksetiap200g
bbtikusadalah0,1mg/200gbbtikus.
c)Dosisakarbosa
AkarbosadiberikandalambentuksuspensidenganCMCsesuai
dosisoralefektifpadamanusia50mg/60kgbbyangdikonversikan
berdasarkanrmusHED,yaitudosisuntuksetiap200gbbtikusadalah
1,0mg/200gbbtikus.
d)Dosisaloksan
Dosisaloksanditetapkanberdasarkanhasilujipendahuluandan
penelitiansebelumnya.Diambildosisyangpadaharike-7
36
menyebabkanhiperglikemiatetapibelummenyebabkankematianpada
tikus.Dosisaloksanyangdigunakandalampercobaaniniadalah13
mg/200gbb(maria,2001).
e)Dosisglukosa
Dosisglukosaditetapkanberdasarkanhasilujipendahuluandan
penelitiansebelumnya.Diambildosisyangsetelahpemberian
menyebabkanhiperglikemiatetapibelummenyebabkankematianpada
tikus.Dosisglukosayangdigunakanpadapercobaaniniadalahadalah
200mg/200gbbpemberianyasecaraoral.
4.3.6.CaraPengambilanDarahdanPengkuranKadarGlukosaDarah
Sebelumpengambilandarah,tikusdimasukkankedalamkandang
kecilsedemikianrupahinggatidakdapatbergerak.Kemudianekortikus
dibersihkandenganalkohol70%.Selanjutyaujungekortikusdigunting
0,2cmdariujungekor,dilakukanpemijatanperlahanterhadapekoragar
darahkeluar.Kemudiandiukurkadarguladarahdenganalatglukometer.
4.3.7.Percobaan
a.Metodeinduksialoksan
Padaujipendahuluandilakukanupayapeningkatankadar
glukosadarahdenganmenginduksitikusdenganaloksan13mg/200g
bb.Setelahpenginduksiantersebut,kadarglukosadarahtikusdikontrol
padaharike-3,ke-7danke-14untukmeyakinkanbahwaaloksan
dengandosistersebutmenyebabankerusakanpankreas.
37
Padaharike-3percobaandimulai,dilakukanpenentuankadar
glukosapuasaseluruhhewanujisecarakuantitatif.Setiapkali
pengambilandarah,semuahewanujidipuasakanselama16jam.Kadar
glukosayangdidapatmerupakankadarglukosadarahawal.Kemudian
larutanaloksandisuntikkandibagianvenaekortikuspadakelompok
tikus2,3,4,5dan6.
Padaharike-14dilakukanpengambilandarah.Hasilpengukuran
kadarglukosadarahditetapkansebagaikadarglukosadarah14hari
(hiperglikemiaawal).Kemudiantikusdiberikanbahanujisesuai
rancanganpercobaanyangdiperlihatkanpadatabel1.Selesai
perlakukan,semuatikusdiistirahatkandidalamkandangmasing-
masingdandiberimakandanminum.
Pemberianlarutanbahanuji,pembandingdanairsuling
dilakukansetiaphariselama2minggu.Pengukurankadarglukosa
darahselanjutnyadilakukanpadaharike-3,ke-7danke-14setelah
pemberianbahanujiyangpertama(Antiadkk,2005).
b.Metodetoleransiglukosa
Sebelumujitoleransiglukosa,tikusdiaklimitasiselamadua
mingguagarbisamenyesuaikandirikemudiantikusditimbangberat
badannya.Kadarglukosaawaldiukuruntukmenitke0,sebelumnya
tikusdipuasakanselama16-18jamtujuanyauntukmenghilangkan
faktoryangmempengaruhiperhitunganglukosadarah.Kemudiantikus
38
diberikanbahanujisesuairancanganpercobaanyangdiperlihatkan
padatabel2.
Ekstrakjintenhitamyangdiberikanialahekstrakyangpotensial
darihasilinduksialoksan,setelahjampemberianekstrak,diberikan
glukosa200mg/200gberatbadan,kemudiandiperiksakadargula
darahnyapadamenitke30,60,90,120,150dan180.
4.4.8.UjiStatistikTerhadapKadarGlukosaDarah
Hasilpercobaandihitungsecarastatistik,dimanakadarglukosadarah
awaluntukkelompokhewanujiyangdiinduksialoksandantoleransi
glukosadiujikenormalannyadenganmetodeKolmogorov-Smirnovdan
homogenitasnyadenganmetodeLevene.Bilakeduaujiinidipenuhimaka
dilanjutkandenganujiAnalisisVariansatuarah(ANAVA)untukmelihat
perbedaanantarkelompok(Sudjana,1992).Jikaadaperbedaansecara
bermaknaantarkelompokperlakuanmakadilanjutkandenganujiKruskal
Wallisuntukmelihatperbedaanantarkelompok.Jikamasihadaperbedaan
secarabermaknaantarkelompokperlakuanmakadilanjutkandenganuji
BedaNyataTerkecil(BNT).
39
BABV
HASILPENELITIANDANPEMBAHASAN
5.1.HasilPenelitian
5.1.1.DeterminasiTanaman
DeterminasitanamandilakukandiHerbariumBogoriense,Pusat
PenelitianBiologiLIPI,Bogor,JawaBarat.Hasildeterminasi
menunjukkanbahwatanamaniniadalahjenistanamanjintenhitam
(Nigelalasativa.Llinn)sukuRanuculaceae.
5.1.2.Ekstraksi
Ditimbang2000gramserbukbijijintenhitam(Nigelalasativa.
Linn)dimaserasidenganetanol70%,kemudiandikentalkandenganvacum
rotaryevaporator,dandidapatkanekstrakkental173,5g.ekstrakkental
kemudiandifraksinasidenganetilasetatdandikentalkandenganvacum
rotavapordandidapatkan25,2gfraksikentalbijijintenhitam.
5.1.3.HasilPengujianEkstrak
Darihasilpengujianekstrakbijijintenhitamyangdifraksinasi
denganetilasetatdidapatsusutpengeringanekstrakbijijintenhitam
sebesar0.155%sedangkanhasilpengujiankadarairekstrakbijijinten
hitamsebesar4,87%.
40
Waktu(hari)Kadarrata-rataglukosadarahdanstandardevasiKLNRKLPFKLNFDOS1DOS2DOS3084,75-3,5985,503,4183,75-1,2587,753,30862,2786,752,751488,50-16,84199,5049,47168,5035,30164,2523,93150.514,47150,002,171790,00-14,1472,5027,38165,505,19109,75-8,99122.7510,21118,256,702189,75-14,1577,0024,45170,00-4,0885,004,3299.257,8896,004,892890,00-23,1078,5012,66177,506,4580,256,6087.55,6891,006,95GolongansenyawaHasilpenapisana.Alkaloidb.Flavonoidc.Saponind.Steroid/triterpenoide.Tanninf.Kuinong.MinyakAtsiri++++++-5.1.4.PenapisanFitokimia
Berdasarkanhasilpemeriksaanpenapisanfitokimiabijijintenhitam
(Nigelalasativa.Llinn)terdapatbeberapagolongansenyawa.Hasilnya
dapatdilihatpadatabel3.
Tabel3.Hasilpemeriksaanpenapisanfitokimiabijijintenhitam
Keterangan:(+)Memberikanreaksipositif,(-)Memberikanreaksinegatif
5.1.5.HasilPengukuranKadarGlukosaDarah
Tabel4.Hasilpadametodeinduksialoksan
Keterangan:
KLNR:Kontrolnormal
KLPF:Kontrolpositif
KLNF:Kontolnegatif
DOS1:Dosis41mg
DOS2:Dosis82mg
DOS3:Dosis162mg
41
Waktu(hari)Kadarrata-rataglukosadarahdanstandardevasiKLNRKLPFKLNFDOSP0105.8322,0487.1612,849155,51100.519,783094.169,64141.8319,13166.664,45153.514,706094.338,84102.6616,58150.666,68107.513,4290874,42101.510,5410318,2892.8315,5112086.3320,528711,6497.3314,5896.510,29150878,769613,95100.6618,0093.1610,2218010612.64944,2895.832,7187.338,28Tabel5.Hasilpadametodetoleransiglukosaaloksan
Keterangan:
KLNR:Kontrolnormal
KLPF:Kontrolpositif
KLNF:Kontolnegatif
DOSP:Dosispotensial
5.2.Pembahasan
Jintenhitamyangdigunakanuntukpenelitiansebelumnya
dilakukandeterminasiterlebihdahuluuntukmemastikanbahwatanaman
yangditelitiadalahjintenhitam.Pelarutetanolyangdigunakanuntuk
prosesekstraksisebelumnyadidestilasiterlebihdahulusupayaetanolbenar-
benarjernihdanterhindardaripengotor.Pelarutetanolyangdigunakan
adalahetanol96%yangkemudiandiencerkanmenjadietanol70%supaya
lebihmudahmenariksenyawa-senyawayangterkandungdalamsimplisia
yangmeliputisenyawapolar,semipolardannonpolar.
Caraekstraksiyangdigunakanadalahmaserasi,karenacarainilebih
mudahdilakukan,alatyangdigunakansedehanadanmaseratyang
42
digunakancukupbanyak.Hasilmaserasikemudianditambahkantragakan
untukmenarikpengotoryangadadalamekstak,ekstraklaludisaringdan
dikentalkandenganvacumrotaryevaporatoruntukmenjadiekstrakkental.
Untukmendapatkanfraksietilasetatmakadilakukanpartisiekstaketanol
kentalyangdidapatdalampelarutetilasetat.Partisidilakukanhingga
lapisanfraksietilasetatmenjadijernihkembaliuntukmembuktikanbahwa
senyawasemipolaryangterdapatdalamekstraketanoltidakdapatditarik
kembaliolehetilasetat.
Penelitianinimenggunakantikussebagaihewanujikarenamudah
didapat,murahdantelahadapenelitiansebelumnyayangberhasil.Tikus
purtihjantanpadausia4-5bulanadalahtikusdewasamudayang
mempunyaikeadaanfisiologikyangoptimum.Sebelumdigunakan,tikus
diaklimatisasiselama2minggu,agardapatmenyesuaikandiridengan
lingkungannnyaselamapenelitianberlangsung.
Tikusyangdipilihuntukpenelitianadalahtikusyangsehatdengan
ciri-ciri:bulubersih,matamerahjernihbersinar,tingkahlakunormaldan
beratbadanbertambahsetelahdiaklimatisasimenjadi180-300g.selama
pemeliharaansemuatikusditimbang,diberimakandanminumdengan
takaranyangsamauntuksetiapekor.Sebelumdilakukanpercobaan,tikus
diaklimatisasiselama2mingguagardapatmenyesuaikandiridengan
lingkungannyaselamapenelitianberlangsung.
Sebelumdiberiperlakuan,tikusdipuasakanterlebihdahuluuntuk
meniadakanpengaruhzat-zatlainpadapengukurankadarglukosadarah
puasasebagiankadarglukosadarahawal.Penelitianinimenggunakan
43
metodeinduksialoksandantoleransiglukosayangmerupakanujipraklinik
yanglebihmendekatikeadaanpenderitadiabetesyangsebenarnya.
Terlebihdahuludilakukanpercobaandenganmenggunakanmetode
induksialoksan,padapercobaaninipankreashewanujicobadirusak
denganpemberianaloksansecaraintravenasehinggapankreashanyadapat
menghasilkansedikitinsulindanterjadihiperglikemiapadahewanuji.
Fraksietilasetatbijijintenhitamdiujikemampuannyauntukmerangsang
sekresiinsulindaripankreasyangtelahrusaksehinggadapatmenurunkan
kadarglukosadarah.
Padapenelitianinidigunakan3kelompokkontrolyaitukontrol
normal,kontrolnegatifdankontrolpositif.KelompokKontrolnormal
diperlukanuntukmengetahuikadarnormalglukosadarahselama
percobaan.Kontrolnegatifyangdiinduksidenganaloksansehinggamenjadi
diabetesdiperlukanuntukmengetahuipeningkatankadarglukosadarahdari
keadaannormalselamapercobaan.Sedangkankontrolpositifdalam
penelitianiniadalahglibenklamid,diperlukanuntukmelihatpengaruhobat
antidiabetikoralyangtelahterbuktikhasiatnyauntukmenurunkankadar
glukosadarah.Glibenklamidmerupakanobatgolongansulfonylurea
generasikedua,yangseringdigunakanolehpasiendiabetesmellitus.
Karenaglibenklamidtidaklarutdalamair,makadisuspensikandenganzat
pensuspensiCMC(CarboxyMethyCellulosa)1%.
Berdasarkanpenelitiansebelumnya,dosisaloksanadalah13mg/200
gbb/hariyangdiberikansecaraintravena..Bahanujiyangdigunakandalam
penelitianiniberupafraksietilasetatbijibijijintenhitamdengandosis41
44
mg/200gbb,82mg/200gbb,dan164mg/200gbb.Sedangkandosis
kontrolpositifyangdigunakanadalah0,1mg/200gbb.Dosisini
didapatkanberdasarkandosisefektiforalpadamanusiayangdikonversikan
kedosistikus.Pemberianbahanujidilakukansatukalisehariperoral
denganmenggunakansondelambungselama2mingguberturut-turut.
Padaharipertamapercobaan,sebelumdiinduksidenganaloksan,
kadarglukosadarahtikusseluruhkelompokmenunjukkanhasilyang
normal.Padaharike-3,7dan14setelahdiinduksi,hewanujiyangtelah
diinduksialoksandiperiksakadarglukosadarahnya.Hasilnyamenunjukkan
hewanujitersebutmengalamihiperglikemiamulaiterlihatpadaharike-3,7
danharike-14mengalamihiperglikemiayangsangattinggisetelah
diinduksi,kelompokhewanyangdiinduksialoksanmengalamikeadaan
hiperglikemia.daripenampakanfisik,tikusyangmengalamihiperglikemia
tersebutmengalamipenurunanberatbadan,polidipsi,polifagidanpoliuri
yangjelasterlihat.Keadaankandangdarikelompoktikusyangmengalami
hiperglikemiatersebutmenjadilebihlembabdanberbautidaksedapdari
padakandangkelompoktikusnormal.
Padaharike-17,Ke-20danke28kadarglukosadarahkontrolnormal
masihtetapdalamrentangnormalsedangkankontrolnegatifmengalami
hiperglikemiayangsemakinparah.Tikusyangdayatahantubuhnyatidak
kuatsangatberisikomengalamikematian.Sehinggaharusselaludijagaagar
waktuuntuktikuskontrolnegatiftersebutdipuasakantepatdantidak
menimbulkankematian.Untukkontrolpositifdanujiterlihatpenurunan
kadarglukosadarahsecarabertahappadaharike-3,ke-6danke-14setelah
45
perlakuan.Keadaanfisiktikusjugamengalamiperbaikanberupa
peningkatanberatbadan,danmenurunnyagejalapolidipsidanpolifagi.
Namunpenurunankadarglukosadarahyangpalingcepatterjadipada
kelompokujidosis41mg/200gbb,dimanapadaharike-14setelah
diberikansediaanujimenunjukkankadarglukosadalamrentangnormal.
BerdasarkanujinormalitasKolmogorov-Smirnovmenunjukkan
bahwakadarglukosadarahseluruhkelompokhewanujipadaharike-0,14,
17dan21terdistribusinormalsedangkanpadaharike-28tidakterdistribusi
normal.Padaujihomogenitasmenunjukanhanyakadarglukosaharike-0
yanghomogensedangkanpadaharike-14,17,21dan28tidakhomogen.
Untukharike-0dilanjutkandenganujistatistikANAVAsedangkanuntuk
harike-14,17,21dan28dilanjutkandenganstatistikmetodeKruskal
Wallis.
PadaujistatistikdenganmetodeKruskalWallismenunjukankadar
glukosaharike-14,17,21dan28menunjukanadanyakelompokyang
berbedasecarabermaknaolehsebabitudilanjutkandenganmetodeujibeda
nyataterkecil(BNT).
Padaharike-14BNTmenunjukanantarakelompokujidosis41
mg/200gbb,82mg/200gbbdan164mg/200gbbmemperlihatkantidak
adanyaperbedaansecarabermaknaterhadapkontrolnegatif,tetapiada
perbedaansecarabeermaknadengankontrolnormal.Halinimenunjukan
bahwaadakenaikankadarglukosadarahyangefeknyasignifikandengan
dosisnegatif.BNTmenunjukanuntukharike-17antarakelompokujidosis
41mg/200gbbmemperlihatkantidakadaperbedaansecarabermakna
46
dengankontrolnormaltetapiadaperbedaansecarabermaknadengan
kontrolpositifdannegatif.Halinimenunjukanterjadipenurunanglukosa
darahyangsinifikanpadarentangnormaltetapiefeknyatidaksignifikan
denganobatpembanding.Untukdosis82mg/200gbbdan164mg/200gbb
memperlihatkanadaperbedaansecarasignifikanantarakontrolnormal,
kontrolpositifdankontrolnegative.Halinimenunjukanbahwakeduadosis
ujitersebutbelummenunjukanpenurunanyangsignifikan.Padaharike-21
BNTmenunjukandosis41mg/200gbbdandosis164mg/200mgbb
memperlihatkantidakadaperbedaansecarabermaknadengankontrol
nomaldankontrolpositiftetapiberbedasecarabermaknadengankontrol
negatif.Halinimenunjukanbahwaterjadipenurunanyangsignifikan
glukosadarahdalamrentangnormaldanefeknyasignifikandenganobat
pembanding(kontrolpositif).Untukdosis84mg/200gbbmemperlihatkan
tidakadaperbedaansecarabermaknadengankontrolnormal,tetapiberbeda
secarabermaknadengankontrolnormaldankontrolpositif,menunjukan
terjadipenurunanyangsignifikanglukosadarahdalamrentangnormal
tetapitidaksignifikandenganobatpembanding.BNTmenunjukanuntuk
harike-28dosis41mg/200gbb,82mg/200gbbdan164mg/200gbb
memperlihatkantidakadaperbedaansecarabermaknadengankontrol
normaldankontrolpositiftetapiberbedasecarabermaknadengankontrol
negative.Halinimenunjukanpenurunanyangsignifikandalamrentang
normaldanefeknyasignifikandenganobatpembanding.
Jadiujistatistikdalammetodeinduksialoksanpadaumumnyadosis
42mg/200gbbsangatberpotensimenurunkanglukosadarahdisebabkan
47
padaharike-21dan28tidakberbedasecarabermaknadengankontrol
positifdanberbedasecarabermaknadengankontrolnegatifdalamtaraf
nyata.
Selanjutnyadilakukanpercobaandenganmetodetoleransiglukosa
menggunakandosispotensial41mg/200gbbyangdiketahuipadapercobaan
metodeinduksialoksan.Lainhalnyadenganmetodeinduksialoksan,sedian
ujidiberikanterlebihdahulusebelumtejadiefekhiperglikemiadiakibatkan
pemberianglukosasecaraoral,inibertujuanuntukmengetahui
penghambatansediaanujiterhadapabsorpsiglukosadalamtubuhsupaya
mencegahkadarglukosadarahyangmelambungtinggi.
Penelitiantahapiniberlangsungselama180menit.Sebelum
dilakukanpengambilanglukosadarahdanpemberianlarutanuji,tikus
dipuasakanselama16jamuntukmenurunkankadarglukosadarah,dengan
harapanketikadiberiperlakuanakanmudahterlihatpeningkatankadar
glukosadarahnya,danjugauntukmeningkatkanrasalaparpadatikus
sehinggapadasaattikusdiberiperlakuanmaumenelansediaanujidengan
mudah.
Padamenitke-30kadarglukosadarahmeningkatsecaranyatadi
setiapkelompokkontroldanujidisebabkanolehpemberianglukosaoral.
Padapemberiansediaanujifraksietilasetatbijijintenhitammenunjukan
kemampuandalammenghambatpeningkatankadarglukosadarahmulai
terlihatpadamenitke-60dalamrentangnormal,padamenitke-90sedikit
turundancenderungstabilhinggamenitke-180.Begitupulakontrolpositif
(akarbose)menunjukanhalyangsamasepertisediaanuji.Halini
48
menunjukanbahwaefektifitassediaanujisamabaiknyadengankontrol
normal(akarbose)dalammenghambatpeningkatankadarglukosadarah.
Sedangkancontrolnegativeterlihatsecaranyatapeningkatankadarglukosa
darahpadamenitke-30dansedikitturunpadamenitke-60tetapimasih
dalamrentanghiperglikemialalukemblinormalpadamenitke-90danterus
stabilhinggamenitke-180.
Antihiperglikemia/antidiabetesdalammetodeinilebihcenderung
padaprosespenghambatanmeningkatnyakadarglukosadarah,seperti
penghambatanpadaalfaglucosidaseyangdapatmenghambatproses
pemecahankarbohidrat,danpenghambatantransporterssodium-glukosa
yangdapatmenghanbatpenyerapanglukosa.(Kobayashietal.2000).
BerdasarkanujinormalitasKolmogorov-Smirnovmenunjukan
bahwakadarglukosadarahseluruhkelompokhewanujipadamenitke-0
hinggamenitke-150terdistribusinormal.Sedangkanujihomogenitas
menunjukankadarglukosadarahmenitke-0,30,60,120dan150homogen
sedangkanpadamenitke-90dan180tidakhomegen.Makapadamenitke-
90dan180harusdilakukanstatistikdenganmetodeKruskalWallis.
BerdasarkanujistatistikpadametodeKruskalWallis,padamenit
ke-90menunjukanseluruhhewanujitidakberbedasecarabermakna,
sedangkanpadamenitke-180menunjukanadanyakelompokyangberbeda
secarabermaknaolehsebabitudilanjutkandenganujiBedaNyataKecil
(BNT).BNTmenunjukanbahwakelompokujidosis42mg/200gbb
memperlihatkantidakadaperbedaansecarabermaknatehadapdosis
kontrolpositifdannegatifdanmenunjukanperbedaansecarabermakna
49
dengankontrolnormal.Halinimenunjukanbahwaefektifitassediaanuji
samabaiknyadenganobatpembanding(acarbose)danadanyasedikit
peningkatankadarglukosadarahpadakontrolnormalsedangkanefek
pemberianglukosaoralpadakontrolnegatiftelahhilang.
Untukmenitke-0,30,60,120dan150dapatdilakukanstatistik
denganANAVAuntukmelihatperbedaanpadasetiapkelompokhewanuji.
Padamenitke-0,120dan150menunjukanseluruhkelompokhewanuji
tidakberbedasecarabermaknasedangkanpadamenitke-30dan60
menunjukanadanyakelompokyangberbedasecarabermaknaolehsebabitu
dilanjutkandenganujiBedaNyataTerkecil(BNT).BNTmenunjukanuntuk
menituntukmenitke-30dosis42mg/200gbbmemperlihatkantidakada
perbedaansecarabermaknaterhadapkontrolpositifdannegatif.Halini
disebabkanolehpemberianglukosaoralmeningkatkankadarglukosadarah
setelah30menit.Untukmenitke-60dosis42mg/200gbbmemperlihatkan
tidakadaperbedaansecarabermaknaterhadapkontrolpositifdannormal,
berbedasecarabermaknadengankontrolnegatif.Halinimenunjukan
bahwaterjadipenghambatanpeningkatankadarglukosadarahsecara
signifikanolehsediaanujihinggabatasrentangnormal.
50
BABVI
KESIMPULANDANSARAN
6.1.Kesimpulan
1.Dosis41mg/200mgbbmenunjukanefekpalingbagusdibandingkan
dengandosis82mg/200gbbdandosis164mg/200gbbdenganpenurunan
glukosadarahmencapai51,14%,padaharike-28.
2.Dosis41mg/200gbbdibandingkandengankontrolpositiftidakberbeda
secarabermaknapadamenitke-0,30,60,90,120,150dan180
sedangkandengankontrolnegatifberbedasecarabermaknauntukmenit
ke-60.
6.2.Saran
1.Untuklebihmelengkapidatailmiah,perludilakukanlebihlanjut
mengenaiefekhipoglikemiatanamaninimenggunakanmetodeyang
lebihbaiksertamencarikandungansenyawaaktifyangberkhasiat
sebagaisenyawahipoglikemianya.
2.Perludilakukanpenelitiantentangtoksisitasbijijintenhitam(Nigella
sativaLinn)pdahewanujiuntukmengevaluasibataskeamanannyajika
digunakandalamjangkapanjang.
51
DAFTARPUSTAKA
[ACUC]AnimlCareandUseCommittes.2005.GuidelinesforSurvivalBleedingofMiceandRates.
Al-awadiFM,GumaaKA.Studiesontheactivityofindividualplantsofanantidiabeticplantmixture,ActaDiabetol,1987;24:7-41.
Anonim.TekhnologiEkstrak.DirektoratJendralPengawasanObatdanmakanan.Jakarta.1-17.
Antia,BS,JEOkon2005.HypoglycemicActivityofAquosLeafExtractofPerseaAmericanaMill.DepartementofChemistry,UniversityofUyo,UyoNigeria.Barre,KJ.1949.LeDiabetiqueAllocanique.1stEdition.ActualPharmacology.NewYork;113-124
Burkill,M.A.GovernmentOfTheStraitsSettlementsAndFederatedMalayStatesByTheCrownAgentsForTheColonies.Millbank.London.1935;1555-1557
Dalimartha,Setiawan.RamuanTradisionalUntukPengobatanDiabetesMellitus.PenebarSwadaya.Depok.2004.59-60
DepartemenKesehatanRI.1979.MateriaMedikaIndonesia.JilidIII.DirjenPOM.DepartemenKesehatanRI.Jakarta;112
DepartemenKesehatanRI.DirektoratBudidayaTanamanRempahDanPenyegar.Jakarta.2006;
DepartemenKesehatanRI.1989VedemekumBahanObatAlam.DirjenPOM.Jakarta;
DepartemenKesehatanRI2001.Bukupanduanteknologiekstrak.DirektoratJendralPengawasanObatdanMakanan.Jakarta;13-14
DepartemenKesehatanRI.2006.PharmaceuticalCareUntukPenyakitDiabetesMellitus.DitjenBinakefarmasiandanAlkes.Jakarta;11
DepartemenKesehatanRI.1979.FarmakopeIndonesia.Edisi3Jakarta;9DepartemenKesehatanRI.1993.Martindale.TheExtraPharmacopoela.30th.
DeGuzman,C.CandSiemonsma,J.S.PlantResourcesOfSouth-EastAsia13.BackhuysPublishers.Leiden.1999;148-151
52
El-NaggarAm,El-DeibAM.AstudyofsomebilogicalactivitiesofNigellasativa(blackseed)HabatElBaraka.JEgyptPharmacolExpTher1992;11:789-99.
Farnsworth,N.R1969.BiologicalandPhytochemicalScreeningofPlants.JournalPharmaceuticalScience.255-265
Ganiswara,SG.Farmakologidanterapi.Edisi4.bagianfarmakologifkui.Jakarta.1995;22,467-481
GanongWF.1999.FisiologiKedokteran,Edisike-14.JonatanOswari.PenerbitBukuKedokteranEGC.Jakarta.Terjemahandri:PetrusAndriano.
Harborne,J.B.MetodeFitokimiaPenuntunCaramodernMenganalisisTumbuhan.Terjemahan:KosasihP,SoediroIwang,BandungITB.1996;6-17.
JamaliaLia.2005.UjiAntidiabetesEkstrakEtanol96%BuahMahkotaDewa(PhaleriamacrocarpaBoerl)PadaTikusPutihYagDiinduksiAloksan.Skripsi.Jakarta.20-25.
JacquieSR,LindaMF,HeidiAf,DelisaJA,RoseL.2004.CanineandFelineDiabetesMelitus:NatureorNarture?.J.Nutr.134:2072S-2080S.
JungB.2007.GestationalDiabetes.DiabetesPartnersinPrevention:APublicationoftheConnecticutDepartementofPublicHealth.KaplanL.1989.ClinicalChemistryTheory,Analysis,andCorrelation.2scEdition.Philadelphia,Toronto:TheC.V.MosbyCompany;850-855.
Kahn,C.R.1995,DisorderofFuelMetabolism,InBecker,K.L.(ed),PrinciplesandPracticeofEndocrinologyandMetabolism,2ndEd,1148-54.
Kundiarto,Kunto.PengaruhPemberianEkstrakKloroformdann-butanoldaunkembangbulan(Tithoniadiversifolia[Hemsley]A.Gray)TerhadapPenurunanKadarGlukosaDarahMencit(Musmusculus).FakultasFamasiUniversitasPancasila.2007.
KHeyne.TumbuhanbergunaindonesiaII.BadanPenelitianDanPengembanganKehutanan.DepartemenKehutanan.1987;751
Lawrence,J.C.,1994,InsulinandOralHypoglycemicAgents,InBrody,T.M.,Larner,J.,Minneman,K.P.,andNeu,H.C.(Ed.),HumanPharmacology,2ndEd.,523-539,Mostby,London.
LinderMC.2006.BiokimiaNutrisidanMetabolisme.UIPress.Jakarta.Terjemahandari:AminudinParakkasi.
MahmudMuhamadMahirHasan.2007.MukjizatKedokteranNabi.QultumMedia.
53
Martindale.TheCompleteDrugReference,35thedn.(SweetmanS,ed.)London:PharmaceticalPress,2007.
Maria,Fatma.PengaruhsariBuahMengkuduterhadapkadarglukosadarahtikusputihyangdiinduksialoksan.FMIPAJurusanFarmasiUI.2001.
MaryadeleJ.Oneil,TheMerckIndexThirdteenEdition.MerckandCompanyIncorporated,Whitehousestation.NewJerseyUSA.2001.
MediaInformasiPeresepanRasionalBagiYenagaKesehatanIndonesia.2001.Non-InsulinDependentDiabetesMellitus.RasionalVolume1,no.3
Murray,RK.,MaysPA,GarnerDK,RodwellVW.1992.Biokimia(ReviewofBiochemistry).Edisi24.EGC;141-151,190,199-200,185,212.
[NDIC}NationalDiabetesInformationClearinghouse.2005.NationalDiabetesStatisticshttp://diabetes.niddk.nih.gov/dm/pubs/statistics/index.htm.diaksesagustus2009.
NSWHealthDepartement.2004.DiabetesinPregnancygestatnaldiabetes.NSWMulticuturalHealthcommunicationservice.http://mhcs.Health.nsw.gov.au.diaksesagustus2009
[Perkeni]PerkumpulanEndokrinologiIndonesia.2006.KonsensusPengelolaandanPencegahanDiabetesMellitusTipe2diIndonesia.
Rees,D,AandAlcolado,J.C.,2005,Animalmodelsofdiabetesmellitus,DiabeticMedicine,22:359-370.
Sudjana.1992.MetodeStastistika.Tarsito.Bandung.299,219-307.
Skudelsky.T.,2001,TheMechanismOfAlloxanAndStreptozotocinActionInCellsOfTheRatPancreas,PhysiologyResearch,50:536-554.
Tjay,TanHoanRahardja,Kirana.2007.Obat-ObatPenting.PenerbitPTElexMedia
Komputindo.Jakarta;693,696-697
Unger,RHandFoster,DW.1992.DiabetesMellitus,InWilson,J.D.andFoster,D.W.Endocrinology,1255-1317,W.BSundersCompany,ADivisionofHarcourtBranceandCompany,London.
Voight,R.1995.BukuPelajaranTeknologiFarmasi.AlihBahasaSoendaniNoeronoSoewandhi.UniversitasGajahMada.Yogyakarta;556,577-578
Tjitrosoepomo.2000.TaksonomiTumbuhan(Spermatophyta).GadjahMada
UniversityPress.Yogyakarta;
Watts,HDavid.1984.Terapimedic(HandbookofMedicalTreatment.Edisike-17.AlihBahasaPetrusLukmanto.PenerbitEGC,Jakarta;240-241
54
WaspadjiSarwono,Darmono,TjokroprawiroAskandar.1996.BukuAjarIlmuPenyakitDalam.JilidIEdisiketiga.BalaiPenerbitFKUI.Jakarta.590-625.
WindolzM.1983.TheMerckIndexAnencyclopedianOfChemicals,DriegsAndBiologocal.4-43
Yuniarti,Titin.EnsiklopediaTanamanObatTradisional.MedPress.Yogyakarta.2008;23-25.
55
Lampiran1.GambarBahanDanAlatPenelitian
Gambar4.Bijijintenhitam
Gambar5.Kandangtikus
56
Gambar6.Glukose-test
Gambar7.Pemberiansecaraoral
57
Lampiran2.DeterminasiSimplisia
58
Lampiran3.Sertifikatglibenklamid
59
Lampiran4.SkemaEkstraksidanPartisi
Serbukbijijintenhitam
-Dimaserasidenganetanol70%
-Disaring
Ekstraketanol70%Residujintenhitam
-Dievaporasi
Ekstrakkentaletanol
-Dipartisi
Fraksietil
Fraksiair
asetat
-Dievaporasi
Fraksikentaletilasetat
Sediaanuji
Ujiefekhipoglikemia
60
Lampiran5.SkemaPercobaanMetodeInduksiAloksan
Persiapantikus(dipuasakan16)jam
KontrolnegatifKontrolpositifKontrolnormalKelompoksediaandosis(41,82,164)
Pengukurankadarglukosaawal
LarutanNaCMC1%Induksialoksan(selama2minggu)
Pengukurankadarguladarahhiperglikemiaawal
LarutanNaCMC1%LarutanNaCMC1%Ujidenganglibenklamid
Pengukuranglukosadarah(padaharike-17,21dan28)
Analisisdata
61
Ujidosis
Lampiran6.SkemaPercobaaanMetodeToleransiGlukosa
Persiapantikus(dipuasakan16)jam)
KontrolnegatifKontrolpositifKontrolnormalKelompoksediaandosispotensial
Pengukurankadarglukosamenitke-0
LarutanNaCMC1%
Aquadest
LarutanNaCMC1%UjidenganakarbosaUjidosis
Pemberianglukosaoral
Pengukurankadarglukosadarah(menitke-30,60,90,120,150,180)
Analisadata
62
Lampiran7.PerhitunganDosisLarutanUji
A.Fraksietilasetatbijijintenhitam(NigellasativaLinn)1.PerhitunganDosisDosis1=41mg/200gbbtikusDosis2=41mg/200gbbtikusx2=82mg/200gbbtikusDosis3=82mg/200gbbtikusx2=164mg/200gbbtikus2.Dosis(41mg/200gbb/hari)Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanuntukdosis1adalah:
VAO=DosisxBeratBadanKonsentrasi=41mg/200gx200g41mg/ml=1ml
3.Dosis(82mg/200gbb/hari)Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanuntukdosis2adalah:
VAO=DosisxBeratBadanKonsentrasi=82mg/200gx200g82mg/ml=1ml
4.Dosis(164mg/200gbb/hari)
Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanuntukdosis3adalah:
VAO=DosisxBeratBadanKonsentrasi=164mg/200gx200g164mg/ml
=1ml
63
Species2WeightBSA(m)KmfactorManusiaDewasaAnak-anakBaboonAnjingMonyetKelinciGuineapigTikusbesarHamsterTikus601,637200,825120,620100,52030,24121,80,15120,40,0580,150,02560,080,0250,020,0073B.LarutanGlibenklamid
1.PerhitunganDosisTabel6.Konversidosis
HED(mg/kg)=animaldose(mg/kg)x
5mg/60kg=animaldosex6/37
0,083mg/kg=animaldosex0,162
Animaldose=0,083mg/Kg0,162Animaldose=0.10mg/200g
2.DosisI(0,1mg/200gbb)Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanGlibenklamidadalah:
VAO=
=,
/,/
=1ml
64
C.LarutanAcarbosa
1.PerhitunganDosis
HED=animaldosex
50mg/60kg=animaldosex6/37
0,83mg/kg=animaldosex0,162
Animaldose=,
.
/
Animaldose=1,0mg/200g
2.DosisI(1,0mg/200gbb)
Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanAkarboseadalah:
VAO=
=,
/,/
=1ml
D.LarutanAloksan
Dosisaloksanadalah65mg/kgbb
DosisAloksanuntuksatuekortikusdenganberatbadan200gadalah13mg/200g
KarenainduksiAloksandibuatIVmakavolumeyangdibuatuntuksatuekortikusdenganberatbadan200gdibuatml.Volumeyangdibuatadalah:
VAO=
=/
/
=ml
65
E.Larutanglukosa
DosisGlukosaadalah1g/kgbb
DosisGlukosauntuksatuekortikusdenganberatbadan200gadalah200mg/200g,makavolumelarutansediaanGlukosaadalah:
VAO=
=/
/
=1ml
66
Lampiran8.PenetapanKadarAirDanSusutPengeringanEtilAsetat
A.DataPengujianFraksietilasetatBijiJintenHitam
Beratcawankosong+tutupsebelumpemanasan:25,3486g
Beratcawankosong+tutupsetelahpemanasan30menitadalah:25,3478g
Beratcawankosong+1gEksrakadalah:26,3663g
Beratcawankosong+1gEkstraksetelahpemanasanke-1selama30menitadalah:26,2789g
Beratcawankosong+1gEkstraksetelahpemanasanke-2selama30menitadalah:26,2487g
Beratcawankosong+1gEkstraksetelahpemanasanke-3selama30menitadalah:26,2378g
B.PerhitunganSusutPengeringanDanKadarAir
1.Susutpengeringan=
X100%
=,
,,X100%
2.Kadarair==,=0,155%
()X100%
,,(,)X100%
=4,87%
67
Kelompok1(Kontrolnormal)Waktu(Hari)TikusXS123409083848284,753,5914101757310588,5016,843100709010090,0014,14780898011089,7514,151476124857590,0023,10Kelompok2(Kontrolpositif)Waktu(Hari)TikusXS1408587898185,503,4114249149185215199,5049,47361844110472,5027,38766108518377,0024,45149364738478,5012,66Kelompok3(Kontrolnegatif)Waktu(Hari)TikusXS123408582848483,751,2514142150220162168,5035,303167170167158165,505,197170175170165170,004,0814185180175170177,506,45Kelompok4(Dosis41mg)Waktu(Hari)TikusXS123408390889087,753,3014161199150147164,2523,933123103107106109,758,9979183818585,004,32148979738080,256,60Kelompok5(Dosis82mg)Waktu(Hari)TikusXS1234090858485862,7014160143134165150,514,473133130115113122,7510,217100110929599,257,88149091907987,505,68Lampiran9.DaftarKadarGlukosaDarahMasing-MasingKelompok
Tabel7.Kadarglukosadarahmetodeinduksialoksan
68
Kelompok6(Dosis164mg)Waktu(Hari)TikusXS1408884908586,752,7514151150147152150,002,163123112113125118,256,707100949010096,004,89149785859791,006,9269
Kelompok1(kontrolnormal)Waktu(menit)TikusXS123456010992921499796105.8322.04301109010286879094.169.64608983107981008994.338.8490809186918589874.24120755611785889786.3320.52150977395838589878.7618091124981111159710612.64Kelompok2(kontrolPositif)Waktu(menit)TikusXS1234560112847882897887.1612.8430110169140149145138141.8319.13609080105128103110102.6616.5890859610810898114101.510.5412070791028797878711.641501008711282831129613.951808895101939295944.28Kelompok3(kontrolnegatif)Waktu(menit)TikusXS12345601008686909589915.5130170168164171168159166.664.4560150158140153146157150.666.869091113809012012410318.281209711474111909897.3314.5815095127951188089100.661818096989893929895.832.71Kelompok4(Dosispotensial)Waktu(menit)TikusXS123456062116100103113109100.519.7830168171134153155140