IRFANUDIN-FKIK

112
UJI EFEK HIPOGLIKEMIA FRAKSI ETIL ASETAT BIJI JINTEN HITAM (Nigella sativa Linn) PADA TIKUS PUTIH JANTAN DENGAN METODE INDUKSI ALOKSAN DAN TOLERANSI GLUKOSA Skripsi Diajukan sebagai salah satu syarat untuk Memperoleh gelar Sarjana Farmasi Oleh Irfanudin Padilah NIM: 105102003331 PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA 1430 H/ 2009 M i

description

deskripsi

Transcript of IRFANUDIN-FKIK

UJIEFEKHIPOGLIKEMIAFRAKSIETILASETATBIJIJINTENHITAM(NigellasativaLinn)PADATIKUSPUTIHJANTANDENGANMETODEINDUKSIALOKSANDANTOLERANSIGLUKOSA

Skripsi

Diajukansebagaisalahsatusyaratuntuk

MemperolehgelarSarjanaFarmasi

Oleh

IrfanudinPadilah

NIM:105102003331

PROGRAMSTUDIFARMASI

FAKULTASKEDOKTERANDANILMUKESEHATAN

UNIVERSITASISLAMNEGERI(UIN)SYARIFHIDAYATULLAHJAKARTA1430H/2009M

i

ii

iii

LEMBARPERNYATAAN

Denganinipenulismenyatakanbahwaskripsiinibenar-benar

hasilkaryasendiriyangbelumpernahdiajukansebagai

skripsiataukaryailmiahpadaperguruantinggiataulembaga

pendidikanmanapun.

Penulis

iv

ABSTRAK

Judul:UjiEfekHipoglikemiaFraksiEtilAsetatBijiJintenHitam(NigellasativaLinn)PadaTikusPutihJantanDenganMetodeInduksiAloksanDanToleransiGlukosa

Bijijintenhitam(NigellasativaLinn)merupakansalahsatutanamantradisionalyangtelahdiketahuisebagaiobatantidiabetalternatif.Telahdilakukanpengujianefekhipoglikemiafraksietilasetatbijijintenhitamdenganmenggunakanmetodeinduksialoksandenganmasing-masingdosis41mg/200gbb,82mg/200gbbdan164mg/200gbbyangdiberikansecaraoralpadatikusputihjantan,pengukurankadarglukosadarahdilakukanpadaharike-7,21dan28denganmenggunakanglukometer.Pemberianvariasidosismenunjukanbahwadosis41mg/200gbbmemberikanpenurunankadarglukosadarahyangterkuat(51,41%),diikutidosis82mg/200gbb(41,86%)dan164mg/200gbb(39,33%),dibandingkandengankontrolpositiftidakberbedasecarabermaknadalamtarafnyata0,05%.Dosis41mg/100gbbfraksietilasetatbijijintenhitamdiberikansecaraoralpadatikusputihjantandenganmenggunakanmetodetoleransiglukosa.Pengukurankadarglukosadarahdilakukansetiap30menitselama180menitdenganmenggunakanglukometer,dibandingkandengankontrolpositiftidakberbedasecarabermaknapadamenitke-0,30,90,120,150dan180sedangkandibandingkandengankontrolnegatifberbedasecarabermaknapadamenitke-60dalamtarafnyata0,05.Hasilpenelitianinimenunjukanbahwafraksietilasetatbijijintenhitamberpotensimenurunkanglukosadarah.

Katakunci:Induksialoksan,Bijijintenhitam,Etilasetat,Toleransiglukosa

v

ABSTRACK

Title:HypoglykemiaEffectOfEthylAcetatFractionOfBlackSeed(NigellaSativaLinn)OnAlloxanInducedAndGlucoseToleranceMethodInRats

Traditionalherbamedicine,blackseed(NigellasativaLinn)hasalreadyknowncanbeusedfororalanti-diabeticdrug.Aninvestigationofthehypoglycemiaeffectofblackseedfractioninethylacetatusingalloxaninducedandglucosetolerancemethod.Measurementthebloodglucoselevelwasdoneonday-17,21and28usingglucose-test.Dosesvariationoftheethylacetatfractionshowedthatthedoseof41mg/200gbwgavethebesthypoglycemiceffect(51,41%),followedbydoses82mg/200gbw(41,86%)and162mg/200gbw(39,33%),comparedwithpositivecontrolwasnotdifferentincisivelywhereascomparedwithnegativecontrolwasdifferentincisivelyofsignificant0,05.Dose41mg/200gbwofethylacetatfractiongivenorallytowhitemaleratsusingglucosetolerancemethod.Measurementofthebloodglucoselevelwasdoneevery30minutesduring180minutesusingglucose-test,comparedwithpositivecontrolatminute-0,30,60,90,120,150and180wasnotdifferentincisivelywhereascomparedwithnegativecontrolwasdifferentincisivelyatminute60ofsignificant0,05.Thisexperimentshowedthatblackseedfractioninethylacetatpotentiallydecreasingbloodglucoselevel.

Keyswords:Alloxaninduced,Blackseed,Ethylacetat,Glucosetolerance

vi

KATAPENGANTAR

PujisyukurkehadiratAllahSWTRabbYangMahaKuasadengankasihdansayang-Nya,berkatrahmatdankuasa-Nyamemberikanjalankepadahamba-NyasehinggapenulisdapatmenyelesaikanpenelitiandanskripsidenganjudulUjiEfekHipoglikemiaFraksiEtilAsetatBijiJintenHitam(NigellasativaLinn)PadaTikusPutihJantanDenganMetodeInduksiAloksanDanToleransiGlukosa.SkripsiinidisusunsebagaisalahsatusyaratuntukmenyelesaikanprogrampendidikantingkatsarjanaStrata1(S1)padaProgramStudiFarmasi,FakultasKedokterandanIlmuKesehatan,UniversitasNegeri(UIN)SyarifhidayatullahJakarta.

Penyusunanskripsiinitidakterlepasdariberbagaipihak.Karenaitupadakesempatankaliinidengansegalakerendahanhatipenulismengucapkanterimakasihyangsedalam-dalamnyakepadayangterhormat:

1.KeluargabesarkuterutamaAyahandatercintaNurdin(alm)danIbundatersayangIhatMuflihatdankakakuTehPaniRopianidansuaminyaAYusufsertaadik-adikkuAiRisnadanMiftahulHudayangselalumemberikanspiritbaikmorilmaupunspiritualselamapenelitiandanpenyusunanskripsiini.2.BapabDrs.MYanisMusdja,M.Sc,Apt.danIbuAzrifitria,M.Si,Apt.SelakupembimbingAkademikyangmemberikanpengarahan,nasehat,dukungandanbimbingannya,sehinggapenulisbisamenyelesaikandanmenyusunskripsiini.3.GuruspiritualUstAdeTaqiyudindanKakSyahrilyangtelahmemberikandorongandanmotivasidengantausiyahnyayangdapatmenyejukanhatidanmendorongpenulisuntukbisamenyelesaikanskripsiini.4.Bapak,IbuDosenProgramStudiFarmasiyangmemberikandukungan,sehinggapenulisbisamenyelesaikanskripsiini.5.Teman-temanProgramStudiFarmasiyangmemberikandukungan,sehinggapenulisbiasmenyelesaikanskripsiini.

vii

6.Semuapihakyangtelahmembantudariawalhinggaakhirpenyusunanskripsiiniyangtidakdapatdisebutkansatupersatu.Penulismenyadaribahwaskripsiinimasihbanyakkekurangan,penulissangatmengharapkankritikdansaranagarskripsipeneltianinibenar-benarbermanfaatuntukkiyasemuaAmin.

Jakarta,4November2009M16Dzulqodah1430H

viii

DAFTARISI

Halaman

HALAMANJUDUL.................................................................................................iLEMBARPERSETUJUANSKRIPSI......................................................................iiLEMBARPERNYATAAN.......................................................................................viABSTRAK.................................................................................................................vABSTRACT..............................................................................................................viKATAPENGANTAR...............................................................................................viiDAFTARISI.............................................................................................................ixDAFTARGAMBAR.................................................................................................xiDAFTARTABEL.....................................................................................................xiiDAFTARLAMPIRAN..............................................................................................xiiiBABIPENDAHULUAN1.1.LatarBelakang..............................................................................................11.2.PerumusanMasalah......................................................................................31.3.PembatasanMasalah.....................................................................................31.4.TujuanPenelitian..........................................................................................41.5.Hipotesis.......................................................................................................41.6.ManfaatPenelitian........................................................................................4BABIITINJAUANPUSTAKA2.1.JintenHitam(NigellaSativaLinn)...............................................................52.1.1.Klasifikasi...........................................................................................52.1.2.Namalain...........................................................................................52.1.3.Morfologi...........................................................................................62.1.4PengembangandanPertumbuhan.......................................................62.1.5.PenanamandanPerkembangbiakan...................................................72.1.6.EkologidanPerkembangbiakan.........................................................72.1.7.Kandungankimiabijijintenhitam.....................................................72.1.8.Khasiatjintenhitam...........................................................................82.2.TinjauanHewanCoba..................................................................................82.3.EkstrakdanEkstraksi....................................................................................92.3.1.Pembuatanserbuk..............................................................................102.3.2.Pembasahan........................................................................................112.3.3.Penyari/Pelarut...................................................................................112.4.DiabetesMellitus..........................................................................................142.4.1.DiabetesmellitusTipe-1IDDM.........................................................142.4.2.DiabetesmellitusTipe-2NIDDM......................................................152.4.3.DiabetesGestional..............................................................................162.4.4.KelainanFisiologispadaDiabetes.....................................................162.4.5.DiagnosisDiabetes.............................................................................182.5.Alloksan.......................................................................................................192.6.Glibenclamid.................................................................................................202.7.Acarbosa.......................................................................................................222.8.Etilasetat.......................................................................................................232.9.MetodePengujian.........................................................................................242.9.1.Metodeinduksialoksan......................................................................24

ix

2.9.2.Metodeujitoleransiglukosaoral.......................................................27BABIIIKERANGKAKONSEP..............................................................................28BABIVMETODEPENELITIAN............................................................................294.1.TempatDanWaktuPenelitian......................................................................294.2.AlatdanBahan..............................................................................................294.2.1.Alat.....................................................................................................294.2.2.Bahan..................................................................................................294.3.ProsedurKerja..............................................................................................304.3.1.PembuatanSimplisia..........................................................................304.3.2.Ekstraksi.............................................................................................304.3.3.UjiPenapisanFitokimia.....................................................................314.3.4.RancanganPercobaan........................................................................334.3.5.PembuatanSediaanUjidanDosis.....................................................354.3.6.CaraPengambilanDarahdanPengkuranKadarGlukosaDarah.......374.3.7.Percobaan...........................................................................................374.3.8.UjiStatistikTerhadapKadarGlukosaDarah.....................................39BABVHASILPENELITIANDANPEMBAHASAN............................................405.1.HasilPenelitian405.1.1.DeterminasiTanaman........................................................................405.1.2.Ekstraksi.............................................................................................405.1.3.HasilPengujianEkstrak.....................................................................405.1.4.PenapisanFitokimia...........................................................................415.1.5.HasilPengukuranKadarGlukosaDarah...........................................415.2.Pembahasan..................................................................................................42BABVIKESIMPULANDANSARAN...................................................................516.1.Kesimpulan...................................................................................................516.2.Saran.............................................................................................................51DAFTARPUSTAKA................................................................................................52

x

DAFTARGAMBAR

Halaman

Gambar1.Alloksan...................................................................................................19Gambar2.Glibenclamid............................................................................................20Gambar3.Etilasetat..................................................................................................23Gambar4.Bijijintenhitam.......................................................................................56Gambar5.Kandangtikus..........................................................................................56Gambar6.Glukose-test.............................................................................................57Gambar7.Pemberiansecaraoral..............................................................................57Gambar8.Kurvakadarglukosadarahrata-ratahewanujisebelumdansesudahdiberibahanujipadaharipengambilansampelselama28hari72Gambar9.Kurvakadarglukosadarahrata-ratahewanujimenitke0,30,60,90,120,180...72

xi

DAFTARTABEL

Halaman

Tabel1.PembagianKelompokHewanUjiInduksiAloksan...................................34Tabel2.PembagianKelompokHewanUjiToleransiGlukosa................................35Tabel3.Hasilpemeriksaanpenapisanfitokimiabijijintenhitam...........................41Tabel4.Hasilpadametodeinduksialoksan.............................................................41Tabel5.Hasilpadametodetoleransiglukosaaloksan.............................................42Tabel6.Konversidosis............................................................................................64Tabel7.Kadarglukosadarahmetodeinduksialoksan............................................68Tabel8.Kadarglukosadarahmetodetoleransiglukosa..........................................70Tabel9.Persentasepenurunanpadainduksimetodealoksan...71Tabel10.Persentasepenurunanpadametodetoleransiglukosa.71Tabel11.SampleKolmogorovUjinormalitas-Smirnov....73Tabel12.UjiHomogenitas........................................................................................73Tabel13.UjiANAVA...............................................................................................74Tabel14.KruskalWallis...........................................................................................74Tabel15.UjiBNTharike-14....................................................................................74Tabel16.UjiBNTharike-17....................................................................................76Tabel17.UjiBNTharike-21....................................................................................77Tabel18.UjiBNTharike-28....................................................................................78Tabel19.UjinormalitasSampleKolmogorov-Smirnov...........................................80Tabel20.UjiHomogenitas........................................................................................80Tabel21.ANAVA.....................................................................................................81Tabel22.KruskalWallis...........................................................................................81Tabel23.UjiBNTmenitke-30.................................................................................82Tabel24.UjiBNTmenitke-60.................................................................................82

xii

DAFTARLAMPIRAN

Halaman

Lampiran1.GambarBahanDanAlatPenelitian.....................................................56Lampiran2.DeterminasiSimplisia..........................................................................58Lampiran3.SertifikatGlibenklamid........................................................................59Lampiran4.SkemaEkstraksidanPartisi..........................................................................60Lampiran5.SkemaPercobaanMetodeInduksiAloksan....................................................61Lampiran6.SkemaPercobaanMetodeToleransiGlukosa.................................................62Lampiran7.PerhitunganDosisLarutanUji...............................................................63Lampiran8.PenetapanKadarAirDanSusutPengeringanEtilAsetat.............................67Lampiran9.DaftarKadarGlukosaDarahMasing-MasingKelompok.....................68Lampiran10.PersentasePenurunanKadarGlukosaDarah.......................................71Lampiran11.KurvaKadarGlukosaDarah................................................................72Lampiran12.AnalisaDataMetodeInduksiAloksan................................................73Lampiran13.AnalisaDataMetodeInduksiAloksan................................................80

xiii

xiv

BABI

PENDAHULUAN

1.1.LatarBelakang

JumlahpenderitapenyakitDiabetesMellitus(DM)diIndonesia,

menurutdataBadanKesehatanDunia(WHO),mencapai17jutaorangatau

8,6%dari220jutapopulasinegeriinidanmeningkatteruspadaakhir-akhir

inikarenaangkatersebutberdasarkanpenelitianpadatahun2001.Menurut

dataBadanKesehatanDunia(WHO)padatahun2003tercatathampir200

jutaorangdiduniamenderitadiabetesdandiperkirakanpadatahun2025

jumlahpenderitabisamencapaisekitar330jutajiwa.Sementaradi

Indonesiasendiri,berdasarkandataWHOpadatahun2003tercatatlebih

dari13jutapenderitadiabetes,darijumlahtersebutdiperkirakanakan

meningkatmenjadilebihdari20jutapenderitapadatahun2030.

BerdasarkanpenelitianDepartemenKesehatanpada2001,untukjenis

penyakitiniIndonesiamenempatiurutankeempatdiduniasetelahIndia,

ChinadanAmerikaSerikat(AS).Padatahun2001silam,tercatat7,5%

pendudukdiPulauJawadanBali,baikpriamaupunwanita,menderitaDM.

Kemungkinanjugaangkattersebutbisabertambahlebihbesarlagi.penyakit

initercantumdalamurutannomor4dariprioritaspenelitiannasionaluntuk

penyakitdegeneratifsetelahkardiovaskular,serebrovaskulardan

geriatri.(Perkeni,2006)

1

Indonesiamerupakannegarayangmemilikikeanekaragamanhayati

terbesardiduniadenganlebihdari30ribuspesiestanamanberkhasiat

mengobatimelaluipenelitianilmiah.Hanyasekitar180spesiestersebut

telahdimanfaatkandalamtanamanobattradisionalolehindustriobat

tradisionalIndonesia.Halinidisebabkanpemanfaatantumbuhanobat

Indonesiauntukmengobatisuatupenyakitbiasanyahanyaberdasarkan

pengalamanempirisyangdiwariskansecaraturuntemuruntanpadisertai

datapenunjangyangmemenuhipersyaratan.Penelitianfarmakologis

dengantahappengujiansecarasistematik,menggunakanmetodeuji

antidiabetesyangtepatharusdigunakanagarhasilnyadapatdipertanggung

jawabkansecarailmiah,bermanfaatbagimasyarakatdandapatmenjadi

acuanuntukpenelitianselanjutnya.

Salahsatutanamanobatyangsecaratradisionaldigunakanuntuk

mengobatidiabetesmellitusadalahjintenhitam(Nigellasativa

Linn).Masyarakatmesirmenggunakanjintenhitamuntukmengobati

kencingmanis,Penggunaanjintanhitamsebagaiobat-obatantelah

dilakukanjutaanorangdiAsia,TimurTengah,danAfrikauntukmenjaga

kesehatan.Jintanhitamadalahtanamanyangberkhasiatobatdantelah

dimanfaatkanribuantahunlampau.Dalammasyarakatislampenggunaan

jintanhitamadalahtermasukkedalampengobatanalanabi(tibbunnabawi).

HaliniterdokumentasidenganbaikmelaluiriwayatimamBukharidan

Muslimyangterjemahannyasebagaiberikut:

2

"DariAbuHurairahra:Rasulullahsaw.bersabda:Sesungguhnya

padajintanhitamituterdapatobatuntuksegalamacampenyakitkecuali

kematian".

Salahsatukhasiatjintenhitamadalahuntukantidiabeteskarena

jintenhitammempunyaibanyakkandungan.(Mahmud2007)

Haltersebutmelatarbelakangidilakukannyapengujiankhasiat

antidiabetesekstrakjintenhitam(NigellasativaLinn)untukmenurunkan

kadarglukosadarahhewanuji.Dalamhalinihewanpercobaanyang

digunakanadalahtikusputihjantangalurwistardanSD(SpragueDawley)

denganmetodeujidabetesaloksandantoleransiglukosasebagaimetodeuji

antidiabetespraklinisyangmendekatikeadaanpenderitadiabetesyang

sebenarnyadanpemeriksaankadarglukosadarahnyamenggunakan

glukometer.

1.2.PerumusanMasalah

Apakahfraksietilasetatbijijintenhitam(nigellasativaLinn)

memilikikemampuanmenurunkankadarglukosadarahpadatikusputih

jantangalurwistardenganmetodeinduksialoksandanujitoleransiglukosa.

1.3.PembatasanMasalah

Penelitianinidibatasihanyauntukmengetahuikemampuanfraksi

etilasetatbijijintenhitam(NigellasativaLinn)dalammenurunkankadar

glukosadarahtikusjantanmenggunakanmetodeinduksialoksandan

toleransiglukosa.

3

1.4.TujuanPenelitian

Untukmengetahuiefekhipoglikemiadalamfraksietilasetatbiji

jintenhitam(NigellasativaLinn)padatikusputihjantangalurwistar

denganmetodeinduksialoksandanujitoleransiglukosa.

1.5.Hipotesis

Fraksietilasetatjintenhitam(Nigellasativa.Linn)dapat

menurunkankadarglukosadarahtikusputihjantanyangdiinduksidengan

metodeinduksialoksandanujitoleransiglukosa.

1.6.ManfaatPenelitian

Hasilpenelitianinidiharapkandapatmemberikaninformasidalam

meningkatkanupayakesehatandenganmengembangkanobattradisional

sehinggadapatdimanfaatkandenganberdasarkanlandasanilmiah.

4

BABII

TINJAUANPUSTAKA

2.1.JINTENHITAM(NigellasativaLinn).

2.1.1.Klasifikasi(ITIS,2009)

Berdasarkanilmutaksonomi,klasifikasitanamanjintenhitam

adalahsebagaiberikut:

Dunia:Plantae

Subdunia:Tracebionta

Divisi:Spermatophyta

Subdivisi:Magnoliophyta

Kelas:Magnopliopsida

Subkelas:Magnoliidae

Bangsa:Ranuculases

Suku:Ranuculaceae

Marga:Nigella

Jenis:NigellasativaLinn

Sinonim:Nigellacreticamiller,NigellaindicaRoxb

2.1.2.Namalain

DiDunia,jintenhitamdikenaldenganberbagainama,antaralain:

Kalonji(bahasaHindi),Kezah(Hebrew),Chamushka(Rusia),Habbatus

Sauda(Arab),Siyahdaneh(Persian),FennelFlower/BlackCumin/

NutmegFlower/RomanCoriander/BlackOnianSeed(English)

5

2.1.3.Morfologi(Tjitrosoepomo,2000)

NigellasativaatauJintenHitamPahitinimerupakanjenistanaman

bunga,tumbuhsetinggi20-50cm,berbatangtegak,berkayudanberbentuk

bulatmenusuk.

Daunruncing,bercabang,bergaris(namungarisdaunnyatidak

sepertibenang;tidakseperticiridauntumbuhangenusNigellapada

umumnya),daunnyakadang-kadangtunggalataubisajugamajemuk

denganposisitersebaratauberhadapan.Bentukdaunnyabulattelur

berujunglancip.Dibagianpermukaandaunnyaterdapatbuluhalus.

Tumbuhanjintanhitammemilikibungayangbentuknyaberaturan.

Bungainikemudianmenjadibuahberbentukbumbungataubuahkurung

berbentukbulatpanjang.Bunganyamenarikdenganwarnabirupucatatau

putih,dengan5-10mahkotabunga.

Buahnyakerassepertibuahbuni.Berbentukbesar,menggembung,

berisi3-7unitfolikel,masing-masingberisibanyakbijiataubenihyang

seringdigunakanmanusiasebagairempah-rempah.Memilikirasapahit

yangtajamdanbausepertibuahstrawberry.Bijinyaberwarnahitampekat.

2.1.4.PengembangandanPertumbuhan(DeGuzman,1999)

Perkecambahansecaraepigeal.didalamiklimhangatjintenhitam

mulaiberbungasekitar100harisetelahpenaburandanbenihmulai

tumbuh50harikemudian.didalamiklimlebihhangat,jintenhitam

berbungamulai8-10minggusetelahperkecambahan.Penyerbukan

sebagianbesardilakukanolehserangga.Penyerbukanterjadipadabunga

yanglebihtuayangmulaimembungkuk.

6

2.1.5.PenanamandanPerkembangbiakan(DeGuzman,1999)

Jintenhitamdapatdikembangbiakandenganmudah,dengancara

bijidisebarkan.Perkecambahandilakukanditempatgelapdan

temperaturtinggi.benihditaburkandidalambloktepukan,setelahmenjadi

kecambahbenihditanamberbaris,umumnyajarakantarabarissatu

denganyanglainadalah25-40cm.Diethiophia,Jintenhitamsering

dipanenbersamaandengandengangandumdanjewawut.

2.1.6.EkologidanPenyebaran(KHyne,1987)

JintenhitamdipercayaberasaldariMediterania(seputarLaut

Tengah),eropaselatan,sampaikeindia.Bentuknyakecilberserabut,

ukurannyatidaklebihdari3mm,dapattumbuhsampaipadaketinggian

1100mdaripermukaanlaut.Biasanyaditanamdidaerahpegunungan

ataupunsengajaditanamdihalamanatauladangsebagaitumbuhan

rempah-rempah.DaerahsentraproduksiJintandiIndonesiaadalah

SumateradanJawasertadiberbagaidaerahlainnya.

2.1.7.Kandungankimiabijijintenhitam(DeGuzman,1999)

Bijijintenhitamantaralainmengandung:

a.Minyakatsiri:thymoquinone25-50,p-cymenedan-pinene,

carvacrol,anetoldan-terpineol.

b.Minyaklemak:asameososianat0,5%,asamlinoleatsekitar60%,asam

linolenat0,3%,asammyristat0,3%,asamoleatsekitar25%,asam

palmiat0,3%danasamstearat3%.

c.Kandunganlainnya:Tanin,alkaloid,nigelon,nigelimin,nigeliminn-

oksidadannigelisin,campestrol,stigmasterol,-sitosterol,-

7

spinasterol.Jugamengandung1,5%glucosidamelantinyangbiladi

hidrolisismenghasilkanracunmelantogenin.

Dalam100gbijijintenhitammengandung:air4g,protein22g,

lemak41g,karbohidrat17g,serat8g,mineral4,5g(Na0,5g,K0,5g,Ca

0,2g,P0,5g,Fe10mg),thiamin1,5mg,piridoksin0,7mg,tokoperol34mg

danniasin6mg.

2.1.8.Khasiatjintenhitam

Diuretik,karminatif,kencingbatu,sakitgigi,bengkakkarena

peradangan,kelelahan,cacingan,masalahkulitsepertijerawat,haid,

menambahASIpadawanitamenyusui,meningkatkansistemkekebalan

tubuh,Khasiatlainnyaadalahmengurangiberatbadandanlingkarperut,

menurunkantekanandarah,guladarahpuasa,trigiliseridadankolesterol

HDL,asamurat,hipoglikemik(Al-Haderetal.,1993).

2.2.TinjauanHewancoba(Sharpetal,1998)

Klasifikasihewancobayangdigunakanpadapenelitianiniadalah:

Regnum:Animalia

Filum:Chordata

Kelas:Mamalia

Bangsa:Rhodenta

Keluarga:Muridae

AnakKeluarga:Murinae

Marga:Rattus

Jenis:R.Norvegicus

8

Ratusnorvegicusmerupakansalahsatuspeciestikusyangpaling

umumdijumpaidirpekotaan.Hasilseleksipadahewaniniseringdigunakan

sebagaihewanpercobaanyangdikenaldengantikusputihdansebagai

hewanpeliharaaandenganwarnayangbervariasi.

2.3.EkstrakdanEkstraksi

Ekstrakadalahsediaanpekatyangdiperolehdenganmengekstraksi

zataktifdarisimplisianabatiatauhewanimenggunakanpelarutyang

sesuai,kemudiansemuaatausebagianpelarutdiuapkandanmassaatau

serbukyangtesisaperlakukansedemikianhinggamemenuhibakuyang

telahditetapkan.(DepkesRI,1994)

Ekstraksiadalahsuatuprosespenarikankandungankimiayanglarut

sehinggadapatterpisahdaribahanbahanyangtidaklarutdengan

menggunakanpelarutcair.Ekstrakmerupakansediaankentalyang

diperolehdenganmengekstraksisenyawaakifdarisimplisianabatiatau

hewanimenggunakanpelarutdandiuapkandanmassaatauserbukyang

tersisadiperlakukansedemikianrupahinggamemenuhibakuyangtelah

ditetapkan.(Harbone,1996)

Ekstraktumbuhanobatyangdibuatdarisimplisianabatidapat

dipandangsebagaibahanawaldianalogkandengankomoditibahanbaku

obatyangdenganteknologifitofarmasidiprosesmenjadibahanantaraatau

produkjadi.Ekstraksebagaibahananataraberartimasihmenjadibahan

yangdapatdiproseslagimenjadifraksifraksi,isolatsenyawatunggal

ataupuntetapsebagaicampuandenganekstraklain,ekstraksebagaiproduk

9

jadiberartiekstrakyangberadadidalamsediaanobatjadisiapdigunakan

olehpenderita.

Prinsipyangsangatpentingdalamekstrakadalahbahwasuatuzat

akanterekstraksiefektifjikaekstraksidilakukanberulang-ulangdengan

menggunakanpelarutdalamjumlahyanglebihkecildaripadahanyasatu

atauduakaliekstraksidenganjumlahyangbesar.

Ekstrakdikelompokanatasdasarsifatnya,yaitu(Voight,2005):

a.Ekstakenceradalahsediaanyangmemilikikonsistensisemacammadu

dandapatdituang.

b.Ekstrakkentaladalahsediaanyangliatdalamkeadaandingindantidak

dapatdituang.Kandunganairberjumlahsampai30%.

c.Ekstrakkeringadalahsediaanyangmemilikikonsistensikeringdan

mudahdituang,sebaiknyamemilikikandunganlembabtidaklebih

dari5%.

d.Ekstrakcairadalahekstrakyangdibuatsedemikianrupasehingga1

bagiansimplisiasesuaidengan2bagianekstrakcair.

Prosesekstraksidapatmelaluitahapmejadi:pembuatanserbuk,

pembasahan,penyariandanpemekatan(DepkesRI,1978,1986)

2.3.1.Pembuatanserbuk

Padaumumnyapenyarianakanbertambahbaikbilapermukaan

serbuksimplisiayangbersentuhandengancairanpenyarisemakinluas.

Kehalusanserbukakanmempermudahprosespenyarian.Tetapiserbuk

yangterlaluhalusakanmerusakseldindingselsehinggaakanmerusakzat

10

aktifpadasimplisiatersebutdanzatyangtidakdiinginkanpundapatikut

masukkedalamhasilpenyarian.

2.3.2.Pembasahan

Pembasahanserbukdilakukanpadapenyarian.Dimaksudkan

memberikesempatansebesar-besarnyakepadacairanpenyarimemasuki

pori-poridalamsimplisiasehinggamempermudahpenyarian

selanjutnya(Depkes,1978)

2.3.3.Penyari/Pelarut

Cairanpenyariyangdigunakandalamprosespembuatanekstrak

adalahpenyariyangbaikuntuksenyawakandunganyangberkhasiatatau

aktif.Penyaritersebutharusdipisahkandaribahandadarikandungan

lainnya,sertaekstrakhanyamengandungsebagianbesarsenyawayang

diinginkan.Faktorutamayangmenjadipertimbangandalampemilihan

penyariadalahselektifitas,ekonomis,dankemudahanbekerja(DepkesRI

1978)

Macam-macammetodepenyariandalamekstraksiyangdapatdi

lakukanialah:

a.Ekstraksidenganmenggunakanpenyari(DepkesRI1978)

1.Maserasi(Depkes2001)

Maserasiadalahprosespengekstrakkansimplisiadengan

menggunakanpelarutdenganbeberapakalipengocokanatau

pengadukanpadatemperaturruangan(kamar)secarateknologi

11

termasukekstraksidenganmetodepencapaiankonsentrasipada

keseimbangan.

2.Perkolasi

Perkolasiadalahekstraksidenganpelarutyangselalubaru

sampaisempurna(exhaustiveextraction)yangumumnyadilakukan

padatemperaturruangan.Prinsipperkolasiadalahdengan

menempatkanserbuksimplisiapadasuatubejanasilinder,yang

bagianbawahnyadiberisekatberpori.Cairanpenyariakanmenarik

zataktifdalamsel-selyangterdapatdalamsimplisia.

3.Refluks

Refluksadalahekstraksidenganpelarutsampaipada

temperaturtitikdidihnyaselamawaktutertentudanjumlahpelarut

terbatasyangrelatifkonstandenganadanyapendinginbalik.

Umumnyadilakukanpengulanganprosespadaresidupertama

sampai3-5kalisehinggadapattermasukprosesekstraksi

sempurna.

4.Sokhletasi

Sokhletadalahekstraksimenggunakanpenyariyang

berbeda.Umumnyadilakukandenganalatkhusussehinggaterjadi

ekstraksiberlanjutsampaijumlahpenyarirelatifkonstandengan

adanyapendinginbalik.

12

5.Digesti

Digestiadalahmaserasikinetik(denganpengadukan

kontinyu)padatemperaturyanglebihtinggidaritemperature

ruangan,secaraumumdilakukanpadatemperature40oC-50oC.

6.Infus

Infusadalahekstraksidenganpelarutairpadatemperatur

penangasairmendidih,temperatureterukur96oC-98oCselama

waktutertentu(15-20menit).Infuspadaumumnyadigunakan

untukmenarikataumengekstraksizataktifyanglarutdalamair

daribahan-bahannabati.Hasildariekstrakiniakanmenghasilkan

zataktifyangtidakstabildanmudahtercemarolehkumandan

kapang,sehinggaekstrakyangdiperolehdenganinfustidakboleh

disimpanlebihdari24jam.

7.Dekok

Dekokadalahinfusyangwaktunyalebihlama(lebihdari

30menit)dantemperatursampaititikdidihair.

Caraekstraksiyangdigunakandalampenelitianiniadalah

maserasi.MaserasiadalahcaraekstraksiyangpalingsederhanaBahan

yangdihaluskansesuaidengansyaratfarmakope(umumnyaterpotong

potongataudiserbukkasarkan)disatukandenganbahanekstraksi.

Waktumaserasiberbedabeda,masingmasingfarmakope

mencantumkan4-10hari.(Voight,1995)

13

b.Destilasiuap

Destilasiuapadalahekstraksikandungansenyawamudah

menguap(minyakatsiri)daribahan(segaratausimplisisa)dengan

uapair.Carainididasarkanpristiwatekananparsialsenyawa

kandunganmenguapdenganfaseuapairdariketelsecaraberlanjut

sampaisempurnadandiakhiridengankondensasifaseuapcampuran

menjadidestilatairbersamasenyawakandunganyangmemisah

sempurnasebagian.

2.4.DiabetesMellitus

Diabetesmellitus,penyakitgulaataukencingmanisadalahsuatu

gangguankronisyangkhususnyamenyangkutmabolismehidratarang

(glukosa)didalamtubuh.Penyebabnyaadalahkekuranganhormoninsulin,

yangberfungsimemanfaatkanglukosasebagaisumberenergidan

mensintesislemak.Akibatnyaialahglukosabertumpukdidalamdarah

(hiperglikemia)danakhirnyadiekskresikanlewatkemihtanpadigunakan

(glycosuria).Olehkarenaituproduksikemihsangatmeningkatdanpasien

selalubuangairkecil,merasaselaluhaus,beratbadanmenurundanberasa

lelah.Penyebablainialahmenurunnyakepekaanreseptorselbagiinsulin

(resistensiinsulin)yangdikibatkanmakanterlalubanyakdankegemukan

(overweigh).

2.4.1.DiabetesmelitusTipe-1(IDDM)

Padatipeiniterdapatdestruksidariselselbetapankreas,

sehinggatidakmemproduksiinsulinlagidenganakibatselseltidak

menyerapglukosadaridarah.Karenaitukadarglukosadarahmeningkatdi

14

atas10mmol/l,yakninilaiambangginjal,sehinggaglukosaglukosa

berlebihandikeluarkanlewaturinbersamabanyakair(glycosuria)Di

bawahkadartersebutglukosaditahanolehtubuliginjal.Tipe-1

mengghinggapiorang-orangdibawahusia30tahun.

Penyebabdiabetestipe-1inibelumbegitujelas,tetapiterdapat

indikasikuatbahwajenisinidisebabkanolehsuatuinfeksivirusyang

menimbulkanreaksiautoimunberlebihanuntukmenanggulangivirus.

Akibatnyasel-selpertahanantubuhtidaktidakhanyamembasmiviru,

melainkanjugaturutmerusakataumemusnahkansel-sellangerhans.

Dalamwaktusatutahunsesudahdiagnosa,80-90%penderitatipe-1

memperlihatkanantibodisel-selbetadidalamdarahnya.Padatipeini

faktorketurunanjugamemegangperanan.Virusyangdicurigaiadalah

virusCoxsackie-BEpstein-Barr,morbilldanvirusparotitis.Pengobatan

tipeinisatu-satunyaadalahpemberianinsulinseumurhidup.(Tjaydan

Rahardja,2002)

2.4.2.DiabetesmelitusTipe-2(NIDDM)

Padatipeinilazimnyamulaidiatas40tahundenganinssidenlebih

besarpadaoranggemukdanpadausialebihlanjut.Orangorangyang

hidupnyamakmur,culasdankuranggerakbadanlebihbesarresiko

terkenagejalaini.Penyebabgejalainiadalahakibatmenua,banyakpasien

jenisinimengalamipenyusutanselselbetayangprogresifsertaserta

penumpukanamiloidsekitarselselbeta.Selbetayangtersisapada

umumnyamasihaktiftetapisekresiinsulinnyasemakinberkurang.Selain

itukepekaanreseptornyamenurun.Hipofunsiselbetainibersama

15

resistensiinsulinyangmeningkatmengakibatkanguladarahmeningkat

(hiperglikemia).Padatipeinitidaktergantungpadainsulindandapat

diobatidenganantidiabetikoral.

Diagnosatipe-2umumnyabarudidiagnosapadastadium

terlambat,padahaldiagnosadiniadalahpentingsekaliuntuk

menghindarkankomplikasilambat.Makabilaterdapatgejalasepertihaus

yanghebat,seringbuangairkecildanturunnyaberatbadansertarasaleti,

makasebaiknyasegerakonsultasikedokteruntukdiperiksapenyakit

gula.(TjaydanRahardja,2002)

2.4.3.DiabetesGestional

DiabetesMellitusgestional(GDM)adalahkeadaandiabetesatau

intoleransiglukosayangtimbulselamamasakehamilan,danbiasanya

berlangsunghanyasementaraatautemporer.

Diabetespadamasakehamilan,walaupunumumnyadapatpulih

sendiribeberapasaatsetelahmelahirkan,namundapatberakibatburuk

yangdapatterjadiantaralainmalformasikongenital,peningkatanberat

badanbayiketikalahirdanmeningkatnyarisikomortalitasperinatal.

WanitayangpernahmenderitaGDMakanlebihbesarrisikonyauntuk

menderitalagidiabetesdimasadepan.(Depkes,2006).

2.4.4.KelainanFisiologispadaDiabetes

Manifestasiutamadiabetesmellitusadalahhiperglikemiayang

terjadiakibatberkurangnyajumlahglukosayangmasukkedalamsel,

berkurangnyapenggunaanglukosaolehberbagaijaringandanpeningkatan

produksiglukosakarenaprosesglukoneogenesisolehhati.Poliuri,

16

polidipsi,polifagidanpenurunanberatbadanmerupakangejalautama

penyakitini.Dalamkeadaanhiperglikemiayangberlangsunglamadan

melewatiambangginjal,akanterjadiglukosuriadimanabatasmaksimal

reabsorbsipadatubulusrenalisdilampauidanglukosaakandiekskresikan

kedalamurin(Murraydkk,1992).

Volumeurinmeningkat(poliuri)akibatterjadinyadiuresisosmotik

yangselanjutnyaakanmenimbulkandehidrasidanadanyarangsangan

untukbanyakminum(polidipsi).Glikosuriamenyebabkankehilangan

kaloriyangcukupbesar(4,1kalbagisetiapkarbohidratyang

diekskresikan).Keadaaninijikaditambahdengandeplesijaringanotot

danadiposaakanmengakibatkanpenurunanberatbadanyanghebat

kendatiterdapatpeningkatanseleramakan(polifagia)danasupankalori

yangnormal.Namunglukosayangdimakantidakakandapatmasukke

dalamseluntukmembentukglikogenmaupundipergunakanuntuk

menghasilkanenergisehinggamengeluhlelah,mengantuk(Murraydkk,

1992;Sylviadkk,1995).

Dalamkeadaandefisiensiinsulin,sintesisproteinakanmenurun.

Pengangkutanasamaminosebagaisubstratglukoneogenikkedalamotot

berkurangsehinggaterjadikeseimbangannitrogenyangnegatif.Defisiensi

insulinjugaterjadikeseimbangannitrogenyangnegatif.Defisiensiinsulin

jugamenyebabkantidakadanyakerjaantipolisismaupunlipogenik

sehinggakadarasamlemakplasmaakanmeninggi.Jikakemampuanhati

untukmengoksidasiasamlemakterlampaui,makasenyawaasam-

hidroksibutiratdanasamasetoasetatakanbertumpuksehinggaterjadi

17

ketosis.Mula-mulapenderitadapatmengimbangipenumpukanasam

organikinidenganmeningkatkanpengeluaranCO2lewatsistemrespirasi,

namunbilakeadaaninitidakdikendalikanmakaakanterjadiasidosis

metabolik,pernafasanmenjadicepatdandalam(pernafasankushmaul)

danpasiendapatmeninggaldalamkeadaankomadiabetik.

Selainketoasidosis,komplikasiyangseringtimbulialah

komplikasivaskularjangkapanjangberupamikroangiopatimencakup

retinopatidiabetik,nefropatidiabetikmaupunneuropatidiabetik.

Mikroangiopatimempunyaigambaranhistopatologisberupa

aterosklerosis,penimbunansorbitoldalamintimavaskular.

Hiperlipoproteinemiamaupunkelainanpembekuandarah.Sehingga

diabetesmellitusdapatmenjadisalahsatupenyebabpenyakitangina

pektoris,onfarkmiokard,gagalginjal,katarak.Kegagalanpernafasan

bahkankematian(Murraydkk,1992;Sylviadkk,1995).

2.4.5.DiagnosisDiabetes

Penyakitdiabetesmelitusditandaigejala3P,yaitupoliuria(banyak

berkemih),polidipsia(banyakminum)danpolifagia(banyakmakan),

yangdapatdijelaskansebagaiberikut:

Disampingnaiknyakadarguladarah,diabetesbercirikanadanya

guladalamkemih(glycosuria)danbanyakberkemihkarenaglukosayang

diekskresikanmengikatbanyakair.Akibatnyatimbulrasasangathaus,

kehilanganenergi,turunnyaberatbadansertarasaletih.Tubuhmulai

membakarlemakuntukmemenuhikebutuhanenerginya,yangdisertai

perubahanzat-zatperombakan,antaralainaseton,asamdiksobutiratdan

18

diacetat,yangmembuatdarahmenjadiasam.Keadaanini,yangdisebut

ketoacidosisdanterutamatimbulpadatipe-1,amatberbahayakarena

dapatmenyebabkanpingsan(comadiabeticum).Napaspenderitasering

kaliberbauaseton(TjaydanRahardja,2002).DiagnosisDMyang

dianjurkanadalahyangsesuaidengananjuranWHO1985dengan

mengambilsampleglukosadarahvenapuasadanduajampostpradial

(Ganiswara,1995).

2.5.Alloksan

Gambar1.AlloksanSinonim:Alloxan;2,4,5,6-tetraoxohexahydropyrimidine;

mesoxalylurea;mesoxalylcarbamide

Rumusmolekul:C4H2N2O4

Beratmolekul:142,07

Persentasekandungan:C33.82%,H1.42%,N19.72%,O45.05%

Kelarutan:mudahlarutdalamair;aseton;alcoholdan

petroleumeter.Larutandalamairpanas

berwarnakuningdansetelahdingin

Penggunaan:Untukmenghasilkandalameksperimen

terhadapbinatangdiabetes;dalameksperimen

nutrisi;dalamsintesissenyawaorganic.

Mekanismekerja:Aloksandengancepatterikatatauterakumulasi

didalamsel-Bpankreasberbedadenganbukan

sel-Bpankreas.agensitotoksiknyasecaracepat

19

danselektifmerusakkemampuansel-Bdalam

memproduksiinsulinyangdikenalsebagaiefek

diabetogenik.

Stabilitas:Aloksanstabilpadasuhu210derajatcelcius.

Penyimpananpadasuhurendahdalamwadah

tidaktembuscahayadantertutuprapat.(Windolz

M,1983).

2.6.Glibenclamid

Gambar2.Glibenclamid

Sinonim:Glibenclamida;Glibenclamidum;Glibenklamid;

Glibenklamidas;Glibenklamidi;Glybenclamide;

Glybenzcyclamide;HB-419;U-26452

(marthindale);Glyburide(merk)

Namakimia:1-{4-[2-(5-Chloro-2

methoxybenzamido)ethyl]benzenesulphonyl}-3-

Rumusmolekul:C23H28ClN3O5S

Beratmolekul:494.01

PersentasiKandungan:C55.92%,H5.71%,Cl7.18%,N8.51%,O

16.19%,S6.49%

20

Deskripsi:Berwarnaputihatauhampirputih,berbentuk

serbukKristal,(Marthindal)

Kelarutan:Praktistidaklarutdalamairdaneter;sedikit

larutdalam,etanol(95%),metanoldanmetil

alcohol;denganmudahlarutdalamdiklormetan

ataumetilenklorida.pKa5,3.Dapatdilarutkan

dalamlarutanhidroksidaalkali.LD50padatikus

(g/kg):>20secaraoral;>12,5i.p;>20s.c.

Penggunaanterapi:Antidiabetikoral(diabetestipe2),hipoglikemik

Dosis:dewasa:oral2,5-5mg/haribersamaanmakan;

untukpasienlebihsensitiveterhadapobat

hipoglikemik(disfungsiginjalatauhati)dewasa:

padaawalnya1,25mg/hari,perawatan:1,2520

mg/haridalamdosistunggalataubagi,tidak

direkomendasikanuntukdosis>20mg/hari.

(AtoZ)

Mekanismekerja:Derivat-klormetoksiiniadalahobatpertama

dariantidiabetikaoralgenerasike-2dengan

khasiathipoglikemisnyayangkira-kira100kali

lebihkuatdaripadatolbutamida.Polakerjanya

berlainandengansulfonylurealain,yaitudengan

single-dosepagiharimampumenstimulasi

sekresiinsulinpadasetiappemasukanglukosa

(selamamakan).Dengandemikianselama24

21

jamtercapairegulasiguladarahoptimalyang

mirippolanormal.resorpsinyadariususpraktis

lengkap,PP-nyadiatas99%,plasma-t1/2-nyaca

10jam,kerjanyadapatbertahansampai24jam.

Dalamhatizatinidirombakmenjadimetabolit

kurangaktif,yangdiekskresikansamaratalewat

kemihdantinja.(TjaydanRahardja,2002)

mekanismenyamengurangiguladarahdengan

menstimulasipelepasaninsulindaripankreas.

Memungkinkanjugamengurangiproduksi

glukosahatidanataumeningkatkanrespon

insulin.

2.7.Acarbosa(Martindale,2007)

Sinonim:Acarbose;Acarbosum;Akarbos

NomorregestasiCAS:56180-94-0

Beratmolekul:645.60

Rumusmolekul:C46.51%,H6.71%,N2.17%,O44.61%

Deskripsi:Berbentukamorp,higroskopis,berwarnaputih/

kekuning-kuningan,sangatmudhlarutdalamair,

larutdalammetalalcoholdanpraktistidaklarut

dalamdiklorometan.

Mekanismekerja:Berkhasiatmenghambatenzimglukosidase

(matase,sukrasedanglukomilase)yangperluuntuk

22

perombakandi/polisakaridadarimakananmenjadi

monosakarida,dengandemikianpenyerapan

glukosadiperlambat,sehinggafluktuasiglukosa

darahmenjadilebihkecildannilairata-ratanya

menurun.

Dosis

Efeksamping

:3dd50mglangsungsebelummakan,bilaperlu

dinaikan1-22minggusampaimaksimal3dd100

mg/minggu.

:Terbentuknyabanyakgasdiususdankejangusus

diakibatkanpenumpukanhidratangyangtidak

dicernadidalamusus.

2.8.Etilasetat(Merk)

Gambar3.Etilasetat

Sinonim

Sifatkimiadanfisika

:Etilester,esterasetat,esteretanol

:Etilasetatadalahpelarutpolarmenengahyang

volatil(mudahmenguap),tidakberacun,dan

tidakhigroskopis.Etilasetatmerupakan

penerimaikatanhidrogenyanglemah,danbukan

suatudonorikatanhidrogenkarenatitidakadanya

protonyangbersifatasam(yaituhidrogenyang

terikatpadaatomelektronegatifsepertiflor,

23

oksigendannitrogen.Etilasetatdapat

melarutkanairhingga3%,danlarutdalamair

hinggakelarutan8%padasuhukamar.

Kelarutannyameningkatpadasuhuyanglebih

tinggi.Namundemikian,senyawainitidakstabil

dalamairyangmengandungbasaatauasam.

NamaCAS:10238-21-8(merek)

Rumusmolekul:C4H8O2

Beratmolekul:88.12g/mol

Deskripsi:Cairantakberwarna

Penggunaan:Secaraluasdigunakansebagaibahanpelarut

untukindusridanbahanpelarutuntukekstraksi.

2.9.MetodePengujian

2.9.1.Metodeinduksialoksan

Keadaandiabetespadahewanujiinidapatdilakukandengan

carapankreotomidanjugasecarakimia.Zat-zatkimiasebagaiinduktor

diabetogenantaralainaloksandanstreptozosinyangpadaumumnya

dapatdiberikansecaraparenteral.Zatdiatasmampumenginduksi

hiperglikemiyangpermanendalamwaktuduasamapitigahari.

Prinsipmetodenyaadalahkepadahewanujidilakukandegan

memberikanaloksanmonohidratsecaraintrevenadengandosis140

mg/kgbb.Hewanujiyangberbedadengankondisiyangberbedaakan

menghasilkandosisyangberbedasehinggaujipendahuluantetap

24

dilakukandelapanharisetelahpemberianaloksan.Pemberianobat

antidiabetiksecaraoraldapatmenurunkankadarglukosadarah

dibandingkanterhadaphewanujinormal.

Keadaandiabetespadahewanujidilakukandengan

memberikanaloksanmonohidratsecaraintravenadengandosis140

mg/kgbb.Hewanujiyangberbedasehinggaujipendahuluantetap

dilakukanuntukmenetapkandosisaloksan.Selanjutnyaperkembangan

hiperglikemiadiperiksasetiaphari.Pemberiantanamanobatyangakan

diujidilakukandelapanharisetelahpemberianaloksan.Pemberianobat

antidiabetiksecaraoraldapatmenurunkankadarglukosadarah

dibandingkanterhadaphewanujinormal.

Keadaandiabetespermanenpadahewancobadapatdicapai

denganpemberiandosisaloksanyangoptimum.Sebelummencapai

keadaantersebut,hewanakanmengalamibeberapatahapanyang

fluktuatifdimanaterjadifasehiperglikemia,fasehipoglikemiadan

kadang-kadangsecaraspontanakankembalinormalbahkandapat

terjadikematian.Adapunfase-faseyangterjadiadalah(Jamalia,2005):

Pertama:setelah5sampai19menitpemberianaloksansecara

intravenaakanterjadifasehipoglikemiaawaldimanasarafotonom

akanmempengaruhiselbetapankreasagarmelepaskaninsulinyang

tersimpansehinggainsulinmasukkeperedarandarahdan

menyebabkanhipoglikemia.Faseiniberlangsungsingkatnamundapat

berakibatfatalpadahewan.

25

Kedua:dalamfaseinimula-mulaterjadistimulasi

orthosimpatikdimanaterjadikekuranganinsulinyangdisebabkan

adanyainhibisisekresiinsulinyangdisebabkanadanyainhibisisekresi

insulindalamsel-selbetapankreas.Faseiniberlangsung30sampai120

menitsetelahpemberianaloksan.Dalamfaseinikadang-kadangkadar

glukosamencapai6g/l.

Ketiga:padafaseiniterjadihipoglikemiasekunderdankadang

terjadikonvulsipadahewan.Padafaseinikadarglukosadarah

menurundanmencapaikeadaanyanglebihgawatdarisemula.Tahap

yangterjadiantarajamketigaataujamkesepuluhsetelahpemberian

aloksansecaraintravenasangatberbahayadandapatmenyebabkan

kematian.Untukkedaanfataldianjurkanpemberianglukosa.

Keempat:faseterjadinyahiperglikemiaawalpermanen.Pada

faseinihewanmenjadihiperglikemiapermanen.Terjadisetelah2

sampai8jamsetelahpemberianaloksansecaraintravena.Tetapipada

faseinihewandapatpulamenjadinormalkembalisecaraspontan

setelahselangwaktutersebut.Olehkarenaitusebaiknyapemeriksaan

kadarguladarahdilakukansetelahtahapkeempattersebutatauharike-

3,diperkirakansindromdiabetespermanenterjadiakibatrusaknya

sebagiansel-selbetapulaulangerhans,tetapiadapulayang

menyatakanbahwahayafungsiselLangerhanssajayangambang

rangsangnyamenurun(Jamalia,2005).

26

2.9.2.Metodeujitoleransiglukosaoral.(Depkes,1993)

Kemampuantubuhuntukmenggunakankarbohidratdisebut

toleransikarbohidrat(toleransiglukosa).Denganmemberikanglukosa

1g/kgbbsecaraoral,kadarglukosadarahakannaik,tetapitetapdalam

keadaannormaltidakpernahmelebihi10sampai170mg/100ml.

Puncakkadarglukosadalamatau1jamdankembalinormalsetelah

2-3jam.

Prinsipmetodenyaadalahkepadahewanujiyangtelah

dipuasakanselama20-24jam,diambildarahvenanyalaludiberikan

bahanujiobatantidiabetesdandiberilarutanglukosaperoral.

Kemudiancuplikandarahdiambillagisetelahintervalwaktutertentu.

27

BABIII

KERANGKAKONSEP

3.1.AlurPenelitian

Menurutempirisbijijintenhitamdapatmenurunkanglukosadarah

Serbukbijijintenhitam

Ekstraksidanpartisi

Pengujianfraksietilasetat

Aklimatisasitikus(2minggu)

MetodeinduksialoksanMetodetoleransiglukosa

Pemeriksaankadarglukosadarahtikus(harike-17,21dan28)

Analisadata

28

Pemeriksaankadarglukosadarahtikus(menitke-30,60,90,120,150dan180)

BABIV

METODEPENELITIAN

4.1.TempatDanWaktuPenelitian

PenelitianinidilakukandilaboratoriumFakultasKedokterandan

IlmuKesehatanUniversitasIslamNegeriSyarifHidayatullahJakarta.

BerlangsungmulaidaribulanApril2009sampaiAgustus2009.

4.2.AlatdanBahan

4.2.1.Alat

Alat-alatyangdigunakandalampenelitianiniadalahsebagaiberikut:

Timbanganhewan,kandangtikusbesertatempatmakanandanminum,

sondeoral,jarumsuntik,hotplate,blender,magneticstirer,destiller,oven,

timbangananalitik,holder,glukometerdantesstrip,vacumrotavapor,

kertassaring,kapas,danalat-alatgelas.

4.2.2.Bahan

Bahanyangdigunakanadalahbijijintenhitam(Nigellasativa

linn),denganspesifikasiwarnahitam,bauaromatik,danrasaagakpedas

yangdiperolehdaritokoIsykarimayangdiimpordariMesir,gibenklamid

sebagaiobatpebandinginduksialoksandanakarbosesebagaiobat

pebandingujitoleransiglukosa.

29

4.3.ProsedurKerja

4.3.1.PembuatanSimplisia

Pembuatansimplisiayangbaikdanmemenuhisyaratterdiridari

tahap-tahapsebagaiberikut:sortasi,pencucian,perajangan,pengeringan,

penggilingandanpengayakan.

4.3.2.Ekstraksi(Harbone,1996)

Simplisiabijijintenhitam(NigellasativaL)diekstraksidengan

metodemaserasisecarabertingkatdenganmenggunakanpelarutetanol

70%sehinggadidapatekstrak,laluekstraktersebutdievaporasidengan

vacuumevaporatorsehinggadidapatekstrakkentalkemudiandi

tambahkanpelarutetilasetatkemudianpartisihinggaterbentuk2lapisan,

lapisanekstraketilasetattersebutdiujiaktivitaspenurunankadarglukosa

darah.

a.Ditimbangserbuksimplisia2000gram,kemudiandimasukkanke

dalamErlenmeyer,ditambahkanpelarutetanol70%sampaiserbuk

simplisiaterendamdanterdapatlapisanpelarutsetebal3cmdiatas

serbuksimplisia.

b.Erlenmeyerditutupmaserasiselamasatuharisambilsesekalidiaduk.

c.Disaringhasilmaserasidenganmenggunakankapasdiatascorong

sehinggadidapatkanfiltrate,selanjutnyafiltrateyangdihasilkan

disaringlagidenganmenggunakankertassaring.Kemudian

dimaserasikembalisampainampakwarnapucat.

30

d.Filtratyangdidapatkankemudiandiuapkanpelarutnyadengan

menggunakanrotaryevaporatorvakumsampaididapatkanektrak

kental.

e.Ekstrakkentalditambahkanairaquadestsebanyak100150lalu

pindahkanpadacorongpisahkemudianmasukanetilasetatsebanyak

100mlkemudiandikocok,lakukanpartisisampaiwarnapelarut

menjadijernihkembalikemudianambillapisanfraksietilasetat.

f.Fraksietilasetatyangdidapatkemudiandimurnikandengan

penambahantragakan,kocokkuatlaludisaringmenggunakankertas

saring.

g.Fraksietilasetatmurnikemudiandiuapkandenganrotaryevaporator

hinggadidapatkanfraksikentaletilasetat.Kemudiandibuatlarutan

ujidandiberikankepadahewanuji.

4.3.3.UjiPenapisanFitokimia

a.Identifikasigolonganalkaloid

Sebanyak+5gramserbukdilembabkandengan5ml

ammoniak25%digerusdalammortir,kemudianditambahkan20ml

kloroformdandigeruskembalidengankuat,campurantersebut

disaringdengankertassaring,filtratberupalarutanorganikdiambil

(sebagailarutanA),sebagailarutanA(10ml)diekstraksidengan10

mllarutanHCl1:10denganpengocokandalamtabungreaksi,diambil

larutanbagianatasnya(larutanB).LarutamAditeteskanbeberapa

tetespadakertassaringdandisemprotatauditetesidenganpereaksi

Dragendroff,terbentukwarnamerahataujinggapadakertassaring

31

menunjukkanadanyasenyawaalkaloid.LarutanBdibagidalam2

tabungreaksi,ditambahkanmasing-masingpereaksiDragendroff

danpereaksiMayer,terbentukendapanmerahbatadenganpereaksi

DragendroffatauendapanputihdenganpereaksiMayermenunjukkan

adanyasenyawaalkaloid.

b.Identifikasigolonganflavonoid

Sebanyak+10gramserbukditambah100mlairpanas,

didihkanselama5menit,saring.Ambil5mlfiltratnya(dalamtabung

reaksi),ditambahkanserbukMgsecukupnyadan1mlasamklorida

pekatdan2mlamilalkohol,kocokkuatdanbiarkanmemisah.

Terbentuknyawarnamerah,kunig,ataujinggapadalapisanamil

alkoholmenunjukkanadanyaflavonoid.

c.Identifikasigolongansaponin

Serbukdimasukkankedalamtabungreaksi,ditambah10

mlairpanas.Setelahdinginkocokkuatsecaravertikalselama10

detik.Terbentuknyabusayangstabil,menunjukkanadanyasaponin,

biladitambahkan1tetesHCl1%busatetapstabil.

d.Identifikasigolongansteroiddantriterpenoid

Sebanyak+5gramserbukdimaserasidalam20mleter

selama2jamkemudiandisaring.Diuapkandalamcawanpenguap

sampaikering.Ditambahkan2tetesasetatanhidratdan1tetesasam

sulfatpekatkedalamresidu.Terbetuknyawarnahijauataumerah

menunjukkanadanyasteroid/triterpenoid.

32

e.Identifikasigolongantanin

Sebanyak+10gramserbukditambah10mlair,didihkan

selama15menit,setelahdinginkemudiandisaringdengankertas

saring.Filtratditambah1-2tetesFeCl31%,terbentuknyawarnabiru,

hijauatauhitammenunjukkanadanyaseyawagolongantanin.

f.Identifikasigolongankuinon

Sebanyak+1gramserbukdipanaskandalamairselama5

menit,disaring.Sebanyakmlfiltatditambah5mlNaOH1N,

terbentukwarnamerahmenunjukkanadanyakuinon.

g.Identifikasigolonganminyakatsiri

Sebanyak+2gramserbukdimasukkankedalamtabung

reaksi(volume20ml),tambahkan10mlpelarutpetroleumeter.Pada

muluttabungdipasangcorongyangdiberilapisankapasyangtelah

dibasahidenganair,kemudiandisaringdengankertassaring.Filtrat

yangdiperolehdiuapkanpadacawanpenguap,selanjutnyaresidu

dilarutkandenganpelarutetanol95%sebanyak5mllalusaring

dengankertassaring.Filtratnyadiuapkandengancawanpenguap,

residuyangberbauaromatikmenunjukkanadanyasenyawagolongan

minyakatsiri.

4.3.4.Rancanganpercobaan

Hewancobayangdigunakanadalahtikusputihjantangalur

Wistar,berumur4-5bulandenganberatbadan180-250gram

diaklimatisasiselamaduamingguagardapatmenyesuaikandengan

33

KelJmlTikusPerlakuan16Kontrolnormal,diberiaqudest1ml/200gbb26Kontrolnegatif,dibuatdiabetes,diberiaqudest1ml/200gbblingkungannya.Selamaprosesadaptasi,dilakukanpengamatankondisi

umumdanpenimbanganberatbadan.

a.Induksialoksan

Hewanujidipilihsebanyak36ekortikusputihjantansecara

acakuntukdibagimenjadi6kelompok,masing-masingterdiridari6

ekor.Penentuanjumlahtikustiapkelompok,dihitungberdasarkan

rumusFederer:(n-1)(t-1)15,dimanatmenunjukkanjumlah

perlakuandannmenunjukkanjumlahulanganminimaldaritiap

perlakuan(Sudjana,1992).

b.Metodetoleransiglukosa

Hewanujidipilihsebanyak32ekortikusputihjantansecara

acakuntukdibagimenjadi4kelompok,masing-masingterdiridari8

ekor.Penentuanjumlahtikustiapkelompok,dihitungberdasarkan

rumusFederer:(n-1)(t-1)15,dimanatmenunjukkanjumlah

perlakuandannmenunjukkanjumlahulanganminimaldaritiap

perlakuan(Sudjana,1992).

Tabel1.PembagianKelompokHewanUjiinduksialoksan

34

KelJmlTikusPerlakuan18Kontrolnormal,diberiaqudest1ml/200gbb28Kontrolnegatif,diberiglukosa,diberiairsuling1ml/200gbb38Kontrolpositif,diberiglukosa,diberisuspensiakarbosa1,0mg/200gbb48Diberiglukosa,diberisediaanujifraksietilasetatbijijintenhitamdosispotensialpadametodeinduksialoksan.36Kontrolpositif,dibuatdiabetes,diberisuspensiglibenklamid0,1mg/200gbb46Dibuatdiabetes,diberisediaanujiekstrakkentalbijijintenhitam41mg/200gbb56Dibuatdiabetes,diberisediaanujiekstrakkentalbijijintenhitam82mg/200gbb66Dibuatdiabetes,diberisediaanujiekstrakkentalbijijintenhitam164mg/200gbbTabel2.PembagianKelompokHewanUjiToleransiGlukosa

4.3.5.PembuatanSediaanUjidanDosis

a)Dosisekstrakbijijintenhitam

DosisdipakaiberdasarkanpenelitianAl-awdidanGumatahun

1987bahwadengandosis41mg/haribijijintenhitamtidak

35

memberikanefekyangsignifikanterhadappenurunankadarglukosa

darahtikusdenganmetodeinduksistreptotozin.Dalampenelitianini

dilakukanpercobaandengandosisfraksietilasetatbijijintenhitam

yangdigunakanadalah:

Dosisrendah41mg/200gbb

Dosissedang82mg/200gbb

Dosistinggi164mg/200gbb

Volumelarutanujiyangdiberikankepadasetiapkelompokuji

dankontrolpembandingsamadenganvolumeairsulingyangdiberikan

kepadakontrolnormaldankontrolperlakuanyaitusebanyak1ml/200

g.

b)Dosisglibenklamid

GlibenklamiddiberikandalambentuksuspensidenganCMC

sesuaidosisoralefektifpadamanusia5mg/60kgbbyang

dikonversikanberdasarkanrumusHED,yaitudosisuntuksetiap200g

bbtikusadalah0,1mg/200gbbtikus.

c)Dosisakarbosa

AkarbosadiberikandalambentuksuspensidenganCMCsesuai

dosisoralefektifpadamanusia50mg/60kgbbyangdikonversikan

berdasarkanrmusHED,yaitudosisuntuksetiap200gbbtikusadalah

1,0mg/200gbbtikus.

d)Dosisaloksan

Dosisaloksanditetapkanberdasarkanhasilujipendahuluandan

penelitiansebelumnya.Diambildosisyangpadaharike-7

36

menyebabkanhiperglikemiatetapibelummenyebabkankematianpada

tikus.Dosisaloksanyangdigunakandalampercobaaniniadalah13

mg/200gbb(maria,2001).

e)Dosisglukosa

Dosisglukosaditetapkanberdasarkanhasilujipendahuluandan

penelitiansebelumnya.Diambildosisyangsetelahpemberian

menyebabkanhiperglikemiatetapibelummenyebabkankematianpada

tikus.Dosisglukosayangdigunakanpadapercobaaniniadalahadalah

200mg/200gbbpemberianyasecaraoral.

4.3.6.CaraPengambilanDarahdanPengkuranKadarGlukosaDarah

Sebelumpengambilandarah,tikusdimasukkankedalamkandang

kecilsedemikianrupahinggatidakdapatbergerak.Kemudianekortikus

dibersihkandenganalkohol70%.Selanjutyaujungekortikusdigunting

0,2cmdariujungekor,dilakukanpemijatanperlahanterhadapekoragar

darahkeluar.Kemudiandiukurkadarguladarahdenganalatglukometer.

4.3.7.Percobaan

a.Metodeinduksialoksan

Padaujipendahuluandilakukanupayapeningkatankadar

glukosadarahdenganmenginduksitikusdenganaloksan13mg/200g

bb.Setelahpenginduksiantersebut,kadarglukosadarahtikusdikontrol

padaharike-3,ke-7danke-14untukmeyakinkanbahwaaloksan

dengandosistersebutmenyebabankerusakanpankreas.

37

Padaharike-3percobaandimulai,dilakukanpenentuankadar

glukosapuasaseluruhhewanujisecarakuantitatif.Setiapkali

pengambilandarah,semuahewanujidipuasakanselama16jam.Kadar

glukosayangdidapatmerupakankadarglukosadarahawal.Kemudian

larutanaloksandisuntikkandibagianvenaekortikuspadakelompok

tikus2,3,4,5dan6.

Padaharike-14dilakukanpengambilandarah.Hasilpengukuran

kadarglukosadarahditetapkansebagaikadarglukosadarah14hari

(hiperglikemiaawal).Kemudiantikusdiberikanbahanujisesuai

rancanganpercobaanyangdiperlihatkanpadatabel1.Selesai

perlakukan,semuatikusdiistirahatkandidalamkandangmasing-

masingdandiberimakandanminum.

Pemberianlarutanbahanuji,pembandingdanairsuling

dilakukansetiaphariselama2minggu.Pengukurankadarglukosa

darahselanjutnyadilakukanpadaharike-3,ke-7danke-14setelah

pemberianbahanujiyangpertama(Antiadkk,2005).

b.Metodetoleransiglukosa

Sebelumujitoleransiglukosa,tikusdiaklimitasiselamadua

mingguagarbisamenyesuaikandirikemudiantikusditimbangberat

badannya.Kadarglukosaawaldiukuruntukmenitke0,sebelumnya

tikusdipuasakanselama16-18jamtujuanyauntukmenghilangkan

faktoryangmempengaruhiperhitunganglukosadarah.Kemudiantikus

38

diberikanbahanujisesuairancanganpercobaanyangdiperlihatkan

padatabel2.

Ekstrakjintenhitamyangdiberikanialahekstrakyangpotensial

darihasilinduksialoksan,setelahjampemberianekstrak,diberikan

glukosa200mg/200gberatbadan,kemudiandiperiksakadargula

darahnyapadamenitke30,60,90,120,150dan180.

4.4.8.UjiStatistikTerhadapKadarGlukosaDarah

Hasilpercobaandihitungsecarastatistik,dimanakadarglukosadarah

awaluntukkelompokhewanujiyangdiinduksialoksandantoleransi

glukosadiujikenormalannyadenganmetodeKolmogorov-Smirnovdan

homogenitasnyadenganmetodeLevene.Bilakeduaujiinidipenuhimaka

dilanjutkandenganujiAnalisisVariansatuarah(ANAVA)untukmelihat

perbedaanantarkelompok(Sudjana,1992).Jikaadaperbedaansecara

bermaknaantarkelompokperlakuanmakadilanjutkandenganujiKruskal

Wallisuntukmelihatperbedaanantarkelompok.Jikamasihadaperbedaan

secarabermaknaantarkelompokperlakuanmakadilanjutkandenganuji

BedaNyataTerkecil(BNT).

39

BABV

HASILPENELITIANDANPEMBAHASAN

5.1.HasilPenelitian

5.1.1.DeterminasiTanaman

DeterminasitanamandilakukandiHerbariumBogoriense,Pusat

PenelitianBiologiLIPI,Bogor,JawaBarat.Hasildeterminasi

menunjukkanbahwatanamaniniadalahjenistanamanjintenhitam

(Nigelalasativa.Llinn)sukuRanuculaceae.

5.1.2.Ekstraksi

Ditimbang2000gramserbukbijijintenhitam(Nigelalasativa.

Linn)dimaserasidenganetanol70%,kemudiandikentalkandenganvacum

rotaryevaporator,dandidapatkanekstrakkental173,5g.ekstrakkental

kemudiandifraksinasidenganetilasetatdandikentalkandenganvacum

rotavapordandidapatkan25,2gfraksikentalbijijintenhitam.

5.1.3.HasilPengujianEkstrak

Darihasilpengujianekstrakbijijintenhitamyangdifraksinasi

denganetilasetatdidapatsusutpengeringanekstrakbijijintenhitam

sebesar0.155%sedangkanhasilpengujiankadarairekstrakbijijinten

hitamsebesar4,87%.

40

Waktu(hari)Kadarrata-rataglukosadarahdanstandardevasiKLNRKLPFKLNFDOS1DOS2DOS3084,75-3,5985,503,4183,75-1,2587,753,30862,2786,752,751488,50-16,84199,5049,47168,5035,30164,2523,93150.514,47150,002,171790,00-14,1472,5027,38165,505,19109,75-8,99122.7510,21118,256,702189,75-14,1577,0024,45170,00-4,0885,004,3299.257,8896,004,892890,00-23,1078,5012,66177,506,4580,256,6087.55,6891,006,95GolongansenyawaHasilpenapisana.Alkaloidb.Flavonoidc.Saponind.Steroid/triterpenoide.Tanninf.Kuinong.MinyakAtsiri++++++-5.1.4.PenapisanFitokimia

Berdasarkanhasilpemeriksaanpenapisanfitokimiabijijintenhitam

(Nigelalasativa.Llinn)terdapatbeberapagolongansenyawa.Hasilnya

dapatdilihatpadatabel3.

Tabel3.Hasilpemeriksaanpenapisanfitokimiabijijintenhitam

Keterangan:(+)Memberikanreaksipositif,(-)Memberikanreaksinegatif

5.1.5.HasilPengukuranKadarGlukosaDarah

Tabel4.Hasilpadametodeinduksialoksan

Keterangan:

KLNR:Kontrolnormal

KLPF:Kontrolpositif

KLNF:Kontolnegatif

DOS1:Dosis41mg

DOS2:Dosis82mg

DOS3:Dosis162mg

41

Waktu(hari)Kadarrata-rataglukosadarahdanstandardevasiKLNRKLPFKLNFDOSP0105.8322,0487.1612,849155,51100.519,783094.169,64141.8319,13166.664,45153.514,706094.338,84102.6616,58150.666,68107.513,4290874,42101.510,5410318,2892.8315,5112086.3320,528711,6497.3314,5896.510,29150878,769613,95100.6618,0093.1610,2218010612.64944,2895.832,7187.338,28Tabel5.Hasilpadametodetoleransiglukosaaloksan

Keterangan:

KLNR:Kontrolnormal

KLPF:Kontrolpositif

KLNF:Kontolnegatif

DOSP:Dosispotensial

5.2.Pembahasan

Jintenhitamyangdigunakanuntukpenelitiansebelumnya

dilakukandeterminasiterlebihdahuluuntukmemastikanbahwatanaman

yangditelitiadalahjintenhitam.Pelarutetanolyangdigunakanuntuk

prosesekstraksisebelumnyadidestilasiterlebihdahulusupayaetanolbenar-

benarjernihdanterhindardaripengotor.Pelarutetanolyangdigunakan

adalahetanol96%yangkemudiandiencerkanmenjadietanol70%supaya

lebihmudahmenariksenyawa-senyawayangterkandungdalamsimplisia

yangmeliputisenyawapolar,semipolardannonpolar.

Caraekstraksiyangdigunakanadalahmaserasi,karenacarainilebih

mudahdilakukan,alatyangdigunakansedehanadanmaseratyang

42

digunakancukupbanyak.Hasilmaserasikemudianditambahkantragakan

untukmenarikpengotoryangadadalamekstak,ekstraklaludisaringdan

dikentalkandenganvacumrotaryevaporatoruntukmenjadiekstrakkental.

Untukmendapatkanfraksietilasetatmakadilakukanpartisiekstaketanol

kentalyangdidapatdalampelarutetilasetat.Partisidilakukanhingga

lapisanfraksietilasetatmenjadijernihkembaliuntukmembuktikanbahwa

senyawasemipolaryangterdapatdalamekstraketanoltidakdapatditarik

kembaliolehetilasetat.

Penelitianinimenggunakantikussebagaihewanujikarenamudah

didapat,murahdantelahadapenelitiansebelumnyayangberhasil.Tikus

purtihjantanpadausia4-5bulanadalahtikusdewasamudayang

mempunyaikeadaanfisiologikyangoptimum.Sebelumdigunakan,tikus

diaklimatisasiselama2minggu,agardapatmenyesuaikandiridengan

lingkungannnyaselamapenelitianberlangsung.

Tikusyangdipilihuntukpenelitianadalahtikusyangsehatdengan

ciri-ciri:bulubersih,matamerahjernihbersinar,tingkahlakunormaldan

beratbadanbertambahsetelahdiaklimatisasimenjadi180-300g.selama

pemeliharaansemuatikusditimbang,diberimakandanminumdengan

takaranyangsamauntuksetiapekor.Sebelumdilakukanpercobaan,tikus

diaklimatisasiselama2mingguagardapatmenyesuaikandiridengan

lingkungannyaselamapenelitianberlangsung.

Sebelumdiberiperlakuan,tikusdipuasakanterlebihdahuluuntuk

meniadakanpengaruhzat-zatlainpadapengukurankadarglukosadarah

puasasebagiankadarglukosadarahawal.Penelitianinimenggunakan

43

metodeinduksialoksandantoleransiglukosayangmerupakanujipraklinik

yanglebihmendekatikeadaanpenderitadiabetesyangsebenarnya.

Terlebihdahuludilakukanpercobaandenganmenggunakanmetode

induksialoksan,padapercobaaninipankreashewanujicobadirusak

denganpemberianaloksansecaraintravenasehinggapankreashanyadapat

menghasilkansedikitinsulindanterjadihiperglikemiapadahewanuji.

Fraksietilasetatbijijintenhitamdiujikemampuannyauntukmerangsang

sekresiinsulindaripankreasyangtelahrusaksehinggadapatmenurunkan

kadarglukosadarah.

Padapenelitianinidigunakan3kelompokkontrolyaitukontrol

normal,kontrolnegatifdankontrolpositif.KelompokKontrolnormal

diperlukanuntukmengetahuikadarnormalglukosadarahselama

percobaan.Kontrolnegatifyangdiinduksidenganaloksansehinggamenjadi

diabetesdiperlukanuntukmengetahuipeningkatankadarglukosadarahdari

keadaannormalselamapercobaan.Sedangkankontrolpositifdalam

penelitianiniadalahglibenklamid,diperlukanuntukmelihatpengaruhobat

antidiabetikoralyangtelahterbuktikhasiatnyauntukmenurunkankadar

glukosadarah.Glibenklamidmerupakanobatgolongansulfonylurea

generasikedua,yangseringdigunakanolehpasiendiabetesmellitus.

Karenaglibenklamidtidaklarutdalamair,makadisuspensikandenganzat

pensuspensiCMC(CarboxyMethyCellulosa)1%.

Berdasarkanpenelitiansebelumnya,dosisaloksanadalah13mg/200

gbb/hariyangdiberikansecaraintravena..Bahanujiyangdigunakandalam

penelitianiniberupafraksietilasetatbijibijijintenhitamdengandosis41

44

mg/200gbb,82mg/200gbb,dan164mg/200gbb.Sedangkandosis

kontrolpositifyangdigunakanadalah0,1mg/200gbb.Dosisini

didapatkanberdasarkandosisefektiforalpadamanusiayangdikonversikan

kedosistikus.Pemberianbahanujidilakukansatukalisehariperoral

denganmenggunakansondelambungselama2mingguberturut-turut.

Padaharipertamapercobaan,sebelumdiinduksidenganaloksan,

kadarglukosadarahtikusseluruhkelompokmenunjukkanhasilyang

normal.Padaharike-3,7dan14setelahdiinduksi,hewanujiyangtelah

diinduksialoksandiperiksakadarglukosadarahnya.Hasilnyamenunjukkan

hewanujitersebutmengalamihiperglikemiamulaiterlihatpadaharike-3,7

danharike-14mengalamihiperglikemiayangsangattinggisetelah

diinduksi,kelompokhewanyangdiinduksialoksanmengalamikeadaan

hiperglikemia.daripenampakanfisik,tikusyangmengalamihiperglikemia

tersebutmengalamipenurunanberatbadan,polidipsi,polifagidanpoliuri

yangjelasterlihat.Keadaankandangdarikelompoktikusyangmengalami

hiperglikemiatersebutmenjadilebihlembabdanberbautidaksedapdari

padakandangkelompoktikusnormal.

Padaharike-17,Ke-20danke28kadarglukosadarahkontrolnormal

masihtetapdalamrentangnormalsedangkankontrolnegatifmengalami

hiperglikemiayangsemakinparah.Tikusyangdayatahantubuhnyatidak

kuatsangatberisikomengalamikematian.Sehinggaharusselaludijagaagar

waktuuntuktikuskontrolnegatiftersebutdipuasakantepatdantidak

menimbulkankematian.Untukkontrolpositifdanujiterlihatpenurunan

kadarglukosadarahsecarabertahappadaharike-3,ke-6danke-14setelah

45

perlakuan.Keadaanfisiktikusjugamengalamiperbaikanberupa

peningkatanberatbadan,danmenurunnyagejalapolidipsidanpolifagi.

Namunpenurunankadarglukosadarahyangpalingcepatterjadipada

kelompokujidosis41mg/200gbb,dimanapadaharike-14setelah

diberikansediaanujimenunjukkankadarglukosadalamrentangnormal.

BerdasarkanujinormalitasKolmogorov-Smirnovmenunjukkan

bahwakadarglukosadarahseluruhkelompokhewanujipadaharike-0,14,

17dan21terdistribusinormalsedangkanpadaharike-28tidakterdistribusi

normal.Padaujihomogenitasmenunjukanhanyakadarglukosaharike-0

yanghomogensedangkanpadaharike-14,17,21dan28tidakhomogen.

Untukharike-0dilanjutkandenganujistatistikANAVAsedangkanuntuk

harike-14,17,21dan28dilanjutkandenganstatistikmetodeKruskal

Wallis.

PadaujistatistikdenganmetodeKruskalWallismenunjukankadar

glukosaharike-14,17,21dan28menunjukanadanyakelompokyang

berbedasecarabermaknaolehsebabitudilanjutkandenganmetodeujibeda

nyataterkecil(BNT).

Padaharike-14BNTmenunjukanantarakelompokujidosis41

mg/200gbb,82mg/200gbbdan164mg/200gbbmemperlihatkantidak

adanyaperbedaansecarabermaknaterhadapkontrolnegatif,tetapiada

perbedaansecarabeermaknadengankontrolnormal.Halinimenunjukan

bahwaadakenaikankadarglukosadarahyangefeknyasignifikandengan

dosisnegatif.BNTmenunjukanuntukharike-17antarakelompokujidosis

41mg/200gbbmemperlihatkantidakadaperbedaansecarabermakna

46

dengankontrolnormaltetapiadaperbedaansecarabermaknadengan

kontrolpositifdannegatif.Halinimenunjukanterjadipenurunanglukosa

darahyangsinifikanpadarentangnormaltetapiefeknyatidaksignifikan

denganobatpembanding.Untukdosis82mg/200gbbdan164mg/200gbb

memperlihatkanadaperbedaansecarasignifikanantarakontrolnormal,

kontrolpositifdankontrolnegative.Halinimenunjukanbahwakeduadosis

ujitersebutbelummenunjukanpenurunanyangsignifikan.Padaharike-21

BNTmenunjukandosis41mg/200gbbdandosis164mg/200mgbb

memperlihatkantidakadaperbedaansecarabermaknadengankontrol

nomaldankontrolpositiftetapiberbedasecarabermaknadengankontrol

negatif.Halinimenunjukanbahwaterjadipenurunanyangsignifikan

glukosadarahdalamrentangnormaldanefeknyasignifikandenganobat

pembanding(kontrolpositif).Untukdosis84mg/200gbbmemperlihatkan

tidakadaperbedaansecarabermaknadengankontrolnormal,tetapiberbeda

secarabermaknadengankontrolnormaldankontrolpositif,menunjukan

terjadipenurunanyangsignifikanglukosadarahdalamrentangnormal

tetapitidaksignifikandenganobatpembanding.BNTmenunjukanuntuk

harike-28dosis41mg/200gbb,82mg/200gbbdan164mg/200gbb

memperlihatkantidakadaperbedaansecarabermaknadengankontrol

normaldankontrolpositiftetapiberbedasecarabermaknadengankontrol

negative.Halinimenunjukanpenurunanyangsignifikandalamrentang

normaldanefeknyasignifikandenganobatpembanding.

Jadiujistatistikdalammetodeinduksialoksanpadaumumnyadosis

42mg/200gbbsangatberpotensimenurunkanglukosadarahdisebabkan

47

padaharike-21dan28tidakberbedasecarabermaknadengankontrol

positifdanberbedasecarabermaknadengankontrolnegatifdalamtaraf

nyata.

Selanjutnyadilakukanpercobaandenganmetodetoleransiglukosa

menggunakandosispotensial41mg/200gbbyangdiketahuipadapercobaan

metodeinduksialoksan.Lainhalnyadenganmetodeinduksialoksan,sedian

ujidiberikanterlebihdahulusebelumtejadiefekhiperglikemiadiakibatkan

pemberianglukosasecaraoral,inibertujuanuntukmengetahui

penghambatansediaanujiterhadapabsorpsiglukosadalamtubuhsupaya

mencegahkadarglukosadarahyangmelambungtinggi.

Penelitiantahapiniberlangsungselama180menit.Sebelum

dilakukanpengambilanglukosadarahdanpemberianlarutanuji,tikus

dipuasakanselama16jamuntukmenurunkankadarglukosadarah,dengan

harapanketikadiberiperlakuanakanmudahterlihatpeningkatankadar

glukosadarahnya,danjugauntukmeningkatkanrasalaparpadatikus

sehinggapadasaattikusdiberiperlakuanmaumenelansediaanujidengan

mudah.

Padamenitke-30kadarglukosadarahmeningkatsecaranyatadi

setiapkelompokkontroldanujidisebabkanolehpemberianglukosaoral.

Padapemberiansediaanujifraksietilasetatbijijintenhitammenunjukan

kemampuandalammenghambatpeningkatankadarglukosadarahmulai

terlihatpadamenitke-60dalamrentangnormal,padamenitke-90sedikit

turundancenderungstabilhinggamenitke-180.Begitupulakontrolpositif

(akarbose)menunjukanhalyangsamasepertisediaanuji.Halini

48

menunjukanbahwaefektifitassediaanujisamabaiknyadengankontrol

normal(akarbose)dalammenghambatpeningkatankadarglukosadarah.

Sedangkancontrolnegativeterlihatsecaranyatapeningkatankadarglukosa

darahpadamenitke-30dansedikitturunpadamenitke-60tetapimasih

dalamrentanghiperglikemialalukemblinormalpadamenitke-90danterus

stabilhinggamenitke-180.

Antihiperglikemia/antidiabetesdalammetodeinilebihcenderung

padaprosespenghambatanmeningkatnyakadarglukosadarah,seperti

penghambatanpadaalfaglucosidaseyangdapatmenghambatproses

pemecahankarbohidrat,danpenghambatantransporterssodium-glukosa

yangdapatmenghanbatpenyerapanglukosa.(Kobayashietal.2000).

BerdasarkanujinormalitasKolmogorov-Smirnovmenunjukan

bahwakadarglukosadarahseluruhkelompokhewanujipadamenitke-0

hinggamenitke-150terdistribusinormal.Sedangkanujihomogenitas

menunjukankadarglukosadarahmenitke-0,30,60,120dan150homogen

sedangkanpadamenitke-90dan180tidakhomegen.Makapadamenitke-

90dan180harusdilakukanstatistikdenganmetodeKruskalWallis.

BerdasarkanujistatistikpadametodeKruskalWallis,padamenit

ke-90menunjukanseluruhhewanujitidakberbedasecarabermakna,

sedangkanpadamenitke-180menunjukanadanyakelompokyangberbeda

secarabermaknaolehsebabitudilanjutkandenganujiBedaNyataKecil

(BNT).BNTmenunjukanbahwakelompokujidosis42mg/200gbb

memperlihatkantidakadaperbedaansecarabermaknatehadapdosis

kontrolpositifdannegatifdanmenunjukanperbedaansecarabermakna

49

dengankontrolnormal.Halinimenunjukanbahwaefektifitassediaanuji

samabaiknyadenganobatpembanding(acarbose)danadanyasedikit

peningkatankadarglukosadarahpadakontrolnormalsedangkanefek

pemberianglukosaoralpadakontrolnegatiftelahhilang.

Untukmenitke-0,30,60,120dan150dapatdilakukanstatistik

denganANAVAuntukmelihatperbedaanpadasetiapkelompokhewanuji.

Padamenitke-0,120dan150menunjukanseluruhkelompokhewanuji

tidakberbedasecarabermaknasedangkanpadamenitke-30dan60

menunjukanadanyakelompokyangberbedasecarabermaknaolehsebabitu

dilanjutkandenganujiBedaNyataTerkecil(BNT).BNTmenunjukanuntuk

menituntukmenitke-30dosis42mg/200gbbmemperlihatkantidakada

perbedaansecarabermaknaterhadapkontrolpositifdannegatif.Halini

disebabkanolehpemberianglukosaoralmeningkatkankadarglukosadarah

setelah30menit.Untukmenitke-60dosis42mg/200gbbmemperlihatkan

tidakadaperbedaansecarabermaknaterhadapkontrolpositifdannormal,

berbedasecarabermaknadengankontrolnegatif.Halinimenunjukan

bahwaterjadipenghambatanpeningkatankadarglukosadarahsecara

signifikanolehsediaanujihinggabatasrentangnormal.

50

BABVI

KESIMPULANDANSARAN

6.1.Kesimpulan

1.Dosis41mg/200mgbbmenunjukanefekpalingbagusdibandingkan

dengandosis82mg/200gbbdandosis164mg/200gbbdenganpenurunan

glukosadarahmencapai51,14%,padaharike-28.

2.Dosis41mg/200gbbdibandingkandengankontrolpositiftidakberbeda

secarabermaknapadamenitke-0,30,60,90,120,150dan180

sedangkandengankontrolnegatifberbedasecarabermaknauntukmenit

ke-60.

6.2.Saran

1.Untuklebihmelengkapidatailmiah,perludilakukanlebihlanjut

mengenaiefekhipoglikemiatanamaninimenggunakanmetodeyang

lebihbaiksertamencarikandungansenyawaaktifyangberkhasiat

sebagaisenyawahipoglikemianya.

2.Perludilakukanpenelitiantentangtoksisitasbijijintenhitam(Nigella

sativaLinn)pdahewanujiuntukmengevaluasibataskeamanannyajika

digunakandalamjangkapanjang.

51

DAFTARPUSTAKA

[ACUC]AnimlCareandUseCommittes.2005.GuidelinesforSurvivalBleedingofMiceandRates.

Al-awadiFM,GumaaKA.Studiesontheactivityofindividualplantsofanantidiabeticplantmixture,ActaDiabetol,1987;24:7-41.

Anonim.TekhnologiEkstrak.DirektoratJendralPengawasanObatdanmakanan.Jakarta.1-17.

Antia,BS,JEOkon2005.HypoglycemicActivityofAquosLeafExtractofPerseaAmericanaMill.DepartementofChemistry,UniversityofUyo,UyoNigeria.Barre,KJ.1949.LeDiabetiqueAllocanique.1stEdition.ActualPharmacology.NewYork;113-124

Burkill,M.A.GovernmentOfTheStraitsSettlementsAndFederatedMalayStatesByTheCrownAgentsForTheColonies.Millbank.London.1935;1555-1557

Dalimartha,Setiawan.RamuanTradisionalUntukPengobatanDiabetesMellitus.PenebarSwadaya.Depok.2004.59-60

DepartemenKesehatanRI.1979.MateriaMedikaIndonesia.JilidIII.DirjenPOM.DepartemenKesehatanRI.Jakarta;112

DepartemenKesehatanRI.DirektoratBudidayaTanamanRempahDanPenyegar.Jakarta.2006;

DepartemenKesehatanRI.1989VedemekumBahanObatAlam.DirjenPOM.Jakarta;

DepartemenKesehatanRI2001.Bukupanduanteknologiekstrak.DirektoratJendralPengawasanObatdanMakanan.Jakarta;13-14

DepartemenKesehatanRI.2006.PharmaceuticalCareUntukPenyakitDiabetesMellitus.DitjenBinakefarmasiandanAlkes.Jakarta;11

DepartemenKesehatanRI.1979.FarmakopeIndonesia.Edisi3Jakarta;9DepartemenKesehatanRI.1993.Martindale.TheExtraPharmacopoela.30th.

DeGuzman,C.CandSiemonsma,J.S.PlantResourcesOfSouth-EastAsia13.BackhuysPublishers.Leiden.1999;148-151

52

El-NaggarAm,El-DeibAM.AstudyofsomebilogicalactivitiesofNigellasativa(blackseed)HabatElBaraka.JEgyptPharmacolExpTher1992;11:789-99.

Farnsworth,N.R1969.BiologicalandPhytochemicalScreeningofPlants.JournalPharmaceuticalScience.255-265

Ganiswara,SG.Farmakologidanterapi.Edisi4.bagianfarmakologifkui.Jakarta.1995;22,467-481

GanongWF.1999.FisiologiKedokteran,Edisike-14.JonatanOswari.PenerbitBukuKedokteranEGC.Jakarta.Terjemahandri:PetrusAndriano.

Harborne,J.B.MetodeFitokimiaPenuntunCaramodernMenganalisisTumbuhan.Terjemahan:KosasihP,SoediroIwang,BandungITB.1996;6-17.

JamaliaLia.2005.UjiAntidiabetesEkstrakEtanol96%BuahMahkotaDewa(PhaleriamacrocarpaBoerl)PadaTikusPutihYagDiinduksiAloksan.Skripsi.Jakarta.20-25.

JacquieSR,LindaMF,HeidiAf,DelisaJA,RoseL.2004.CanineandFelineDiabetesMelitus:NatureorNarture?.J.Nutr.134:2072S-2080S.

JungB.2007.GestationalDiabetes.DiabetesPartnersinPrevention:APublicationoftheConnecticutDepartementofPublicHealth.KaplanL.1989.ClinicalChemistryTheory,Analysis,andCorrelation.2scEdition.Philadelphia,Toronto:TheC.V.MosbyCompany;850-855.

Kahn,C.R.1995,DisorderofFuelMetabolism,InBecker,K.L.(ed),PrinciplesandPracticeofEndocrinologyandMetabolism,2ndEd,1148-54.

Kundiarto,Kunto.PengaruhPemberianEkstrakKloroformdann-butanoldaunkembangbulan(Tithoniadiversifolia[Hemsley]A.Gray)TerhadapPenurunanKadarGlukosaDarahMencit(Musmusculus).FakultasFamasiUniversitasPancasila.2007.

KHeyne.TumbuhanbergunaindonesiaII.BadanPenelitianDanPengembanganKehutanan.DepartemenKehutanan.1987;751

Lawrence,J.C.,1994,InsulinandOralHypoglycemicAgents,InBrody,T.M.,Larner,J.,Minneman,K.P.,andNeu,H.C.(Ed.),HumanPharmacology,2ndEd.,523-539,Mostby,London.

LinderMC.2006.BiokimiaNutrisidanMetabolisme.UIPress.Jakarta.Terjemahandari:AminudinParakkasi.

MahmudMuhamadMahirHasan.2007.MukjizatKedokteranNabi.QultumMedia.

53

Martindale.TheCompleteDrugReference,35thedn.(SweetmanS,ed.)London:PharmaceticalPress,2007.

Maria,Fatma.PengaruhsariBuahMengkuduterhadapkadarglukosadarahtikusputihyangdiinduksialoksan.FMIPAJurusanFarmasiUI.2001.

MaryadeleJ.Oneil,TheMerckIndexThirdteenEdition.MerckandCompanyIncorporated,Whitehousestation.NewJerseyUSA.2001.

MediaInformasiPeresepanRasionalBagiYenagaKesehatanIndonesia.2001.Non-InsulinDependentDiabetesMellitus.RasionalVolume1,no.3

Murray,RK.,MaysPA,GarnerDK,RodwellVW.1992.Biokimia(ReviewofBiochemistry).Edisi24.EGC;141-151,190,199-200,185,212.

[NDIC}NationalDiabetesInformationClearinghouse.2005.NationalDiabetesStatisticshttp://diabetes.niddk.nih.gov/dm/pubs/statistics/index.htm.diaksesagustus2009.

NSWHealthDepartement.2004.DiabetesinPregnancygestatnaldiabetes.NSWMulticuturalHealthcommunicationservice.http://mhcs.Health.nsw.gov.au.diaksesagustus2009

[Perkeni]PerkumpulanEndokrinologiIndonesia.2006.KonsensusPengelolaandanPencegahanDiabetesMellitusTipe2diIndonesia.

Rees,D,AandAlcolado,J.C.,2005,Animalmodelsofdiabetesmellitus,DiabeticMedicine,22:359-370.

Sudjana.1992.MetodeStastistika.Tarsito.Bandung.299,219-307.

Skudelsky.T.,2001,TheMechanismOfAlloxanAndStreptozotocinActionInCellsOfTheRatPancreas,PhysiologyResearch,50:536-554.

Tjay,TanHoanRahardja,Kirana.2007.Obat-ObatPenting.PenerbitPTElexMedia

Komputindo.Jakarta;693,696-697

Unger,RHandFoster,DW.1992.DiabetesMellitus,InWilson,J.D.andFoster,D.W.Endocrinology,1255-1317,W.BSundersCompany,ADivisionofHarcourtBranceandCompany,London.

Voight,R.1995.BukuPelajaranTeknologiFarmasi.AlihBahasaSoendaniNoeronoSoewandhi.UniversitasGajahMada.Yogyakarta;556,577-578

Tjitrosoepomo.2000.TaksonomiTumbuhan(Spermatophyta).GadjahMada

UniversityPress.Yogyakarta;

Watts,HDavid.1984.Terapimedic(HandbookofMedicalTreatment.Edisike-17.AlihBahasaPetrusLukmanto.PenerbitEGC,Jakarta;240-241

54

WaspadjiSarwono,Darmono,TjokroprawiroAskandar.1996.BukuAjarIlmuPenyakitDalam.JilidIEdisiketiga.BalaiPenerbitFKUI.Jakarta.590-625.

WindolzM.1983.TheMerckIndexAnencyclopedianOfChemicals,DriegsAndBiologocal.4-43

Yuniarti,Titin.EnsiklopediaTanamanObatTradisional.MedPress.Yogyakarta.2008;23-25.

55

Lampiran1.GambarBahanDanAlatPenelitian

Gambar4.Bijijintenhitam

Gambar5.Kandangtikus

56

Gambar6.Glukose-test

Gambar7.Pemberiansecaraoral

57

Lampiran2.DeterminasiSimplisia

58

Lampiran3.Sertifikatglibenklamid

59

Lampiran4.SkemaEkstraksidanPartisi

Serbukbijijintenhitam

-Dimaserasidenganetanol70%

-Disaring

Ekstraketanol70%Residujintenhitam

-Dievaporasi

Ekstrakkentaletanol

-Dipartisi

Fraksietil

Fraksiair

asetat

-Dievaporasi

Fraksikentaletilasetat

Sediaanuji

Ujiefekhipoglikemia

60

Lampiran5.SkemaPercobaanMetodeInduksiAloksan

Persiapantikus(dipuasakan16)jam

KontrolnegatifKontrolpositifKontrolnormalKelompoksediaandosis(41,82,164)

Pengukurankadarglukosaawal

LarutanNaCMC1%Induksialoksan(selama2minggu)

Pengukurankadarguladarahhiperglikemiaawal

LarutanNaCMC1%LarutanNaCMC1%Ujidenganglibenklamid

Pengukuranglukosadarah(padaharike-17,21dan28)

Analisisdata

61

Ujidosis

Lampiran6.SkemaPercobaaanMetodeToleransiGlukosa

Persiapantikus(dipuasakan16)jam)

KontrolnegatifKontrolpositifKontrolnormalKelompoksediaandosispotensial

Pengukurankadarglukosamenitke-0

LarutanNaCMC1%

Aquadest

LarutanNaCMC1%UjidenganakarbosaUjidosis

Pemberianglukosaoral

Pengukurankadarglukosadarah(menitke-30,60,90,120,150,180)

Analisadata

62

Lampiran7.PerhitunganDosisLarutanUji

A.Fraksietilasetatbijijintenhitam(NigellasativaLinn)1.PerhitunganDosisDosis1=41mg/200gbbtikusDosis2=41mg/200gbbtikusx2=82mg/200gbbtikusDosis3=82mg/200gbbtikusx2=164mg/200gbbtikus2.Dosis(41mg/200gbb/hari)Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanuntukdosis1adalah:

VAO=DosisxBeratBadanKonsentrasi=41mg/200gx200g41mg/ml=1ml

3.Dosis(82mg/200gbb/hari)Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanuntukdosis2adalah:

VAO=DosisxBeratBadanKonsentrasi=82mg/200gx200g82mg/ml=1ml

4.Dosis(164mg/200gbb/hari)

Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanuntukdosis3adalah:

VAO=DosisxBeratBadanKonsentrasi=164mg/200gx200g164mg/ml

=1ml

63

Species2WeightBSA(m)KmfactorManusiaDewasaAnak-anakBaboonAnjingMonyetKelinciGuineapigTikusbesarHamsterTikus601,637200,825120,620100,52030,24121,80,15120,40,0580,150,02560,080,0250,020,0073B.LarutanGlibenklamid

1.PerhitunganDosisTabel6.Konversidosis

HED(mg/kg)=animaldose(mg/kg)x

5mg/60kg=animaldosex6/37

0,083mg/kg=animaldosex0,162

Animaldose=0,083mg/Kg0,162Animaldose=0.10mg/200g

2.DosisI(0,1mg/200gbb)Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanGlibenklamidadalah:

VAO=

=,

/,/

=1ml

64

C.LarutanAcarbosa

1.PerhitunganDosis

HED=animaldosex

50mg/60kg=animaldosex6/37

0,83mg/kg=animaldosex0,162

Animaldose=,

.

/

Animaldose=1,0mg/200g

2.DosisI(1,0mg/200gbb)

Untuksatuekortikusdenganberatbadan200g,makavolumelarutansediaanAkarboseadalah:

VAO=

=,

/,/

=1ml

D.LarutanAloksan

Dosisaloksanadalah65mg/kgbb

DosisAloksanuntuksatuekortikusdenganberatbadan200gadalah13mg/200g

KarenainduksiAloksandibuatIVmakavolumeyangdibuatuntuksatuekortikusdenganberatbadan200gdibuatml.Volumeyangdibuatadalah:

VAO=

=/

/

=ml

65

E.Larutanglukosa

DosisGlukosaadalah1g/kgbb

DosisGlukosauntuksatuekortikusdenganberatbadan200gadalah200mg/200g,makavolumelarutansediaanGlukosaadalah:

VAO=

=/

/

=1ml

66

Lampiran8.PenetapanKadarAirDanSusutPengeringanEtilAsetat

A.DataPengujianFraksietilasetatBijiJintenHitam

Beratcawankosong+tutupsebelumpemanasan:25,3486g

Beratcawankosong+tutupsetelahpemanasan30menitadalah:25,3478g

Beratcawankosong+1gEksrakadalah:26,3663g

Beratcawankosong+1gEkstraksetelahpemanasanke-1selama30menitadalah:26,2789g

Beratcawankosong+1gEkstraksetelahpemanasanke-2selama30menitadalah:26,2487g

Beratcawankosong+1gEkstraksetelahpemanasanke-3selama30menitadalah:26,2378g

B.PerhitunganSusutPengeringanDanKadarAir

1.Susutpengeringan=

X100%

=,

,,X100%

2.Kadarair==,=0,155%

()X100%

,,(,)X100%

=4,87%

67

Kelompok1(Kontrolnormal)Waktu(Hari)TikusXS123409083848284,753,5914101757310588,5016,843100709010090,0014,14780898011089,7514,151476124857590,0023,10Kelompok2(Kontrolpositif)Waktu(Hari)TikusXS1408587898185,503,4114249149185215199,5049,47361844110472,5027,38766108518377,0024,45149364738478,5012,66Kelompok3(Kontrolnegatif)Waktu(Hari)TikusXS123408582848483,751,2514142150220162168,5035,303167170167158165,505,197170175170165170,004,0814185180175170177,506,45Kelompok4(Dosis41mg)Waktu(Hari)TikusXS123408390889087,753,3014161199150147164,2523,933123103107106109,758,9979183818585,004,32148979738080,256,60Kelompok5(Dosis82mg)Waktu(Hari)TikusXS1234090858485862,7014160143134165150,514,473133130115113122,7510,217100110929599,257,88149091907987,505,68Lampiran9.DaftarKadarGlukosaDarahMasing-MasingKelompok

Tabel7.Kadarglukosadarahmetodeinduksialoksan

68

Kelompok6(Dosis164mg)Waktu(Hari)TikusXS1408884908586,752,7514151150147152150,002,163123112113125118,256,707100949010096,004,89149785859791,006,9269

Kelompok1(kontrolnormal)Waktu(menit)TikusXS123456010992921499796105.8322.04301109010286879094.169.64608983107981008994.338.8490809186918589874.24120755611785889786.3320.52150977395838589878.7618091124981111159710612.64Kelompok2(kontrolPositif)Waktu(menit)TikusXS1234560112847882897887.1612.8430110169140149145138141.8319.13609080105128103110102.6616.5890859610810898114101.510.5412070791028797878711.641501008711282831129613.951808895101939295944.28Kelompok3(kontrolnegatif)Waktu(menit)TikusXS12345601008686909589915.5130170168164171168159166.664.4560150158140153146157150.666.869091113809012012410318.281209711474111909897.3314.5815095127951188089100.661818096989893929895.832.71Kelompok4(Dosispotensial)Waktu(menit)TikusXS123456062116100103113109100.519.7830168171134153155140