IDENTIFIKASI SEDIAAN OBAT YANG MENGANDUNG ASPIRIN, KAFEIN DAN PARACETAMOL DENGAN METODE KROMATOGRAFI...

7/21/2019 IDENTIFIKASI SEDIAAN OBAT YANG MENGANDUNG ASPIRIN, KAFEIN DAN PARACETAMOL DENGAN METODE KROMATO

1/16

LAPORAN PRAKTIKUM ANALISIS FARMASI

PERCOBAAN V

IDENTIFIKASI SEDIAAN OBAT YANG MENGANDUNG ASPIRIN,

KAFEIN DAN PARACETAMOL DENGAN METODE KROMATOGRAFI

LAPIS TIPIS (KLT)

NAMA : MUH. ZULFIKAR TAHIR

NIM : F1F1 11 014

KELAS : A

KELOMPOK : III (TIGA)

ASISTEN : AGUNG WIBAWA YODHA, S.Si

JURUSAN FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS HALUOLEO

KENDARI

2013


2/16

IDENTIFIKASI SEDIAAN OBAT YANG MENGANDUNG

ASPIRIN, KAFEIN DAN PARACETAMOL DENGAN METODE

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (KLT)

A. Tujuan

Tujuan dari percobaan ini adalah untuk mengidentifikasi kandungan

aspirin, kafein dan paracetamol dalam sediaan obat.

B.

Landasan Teori

Kimia analitik adalah cabang dari ilmu kimia yang mempelajari tentang

karakteristik suatu zat, meliputi analisis kuantitatif dan kualitataif. Analisis

kualitatif adalah analisis yang bertujuan untuk mengetahui senyawa-senyawa

yang terkandung dalam sampel, sedangkan analisis kuantitatif adalah analisis

yang bertujuan untuk mengetahui kadar suatu senyawa dalam sampel. Dalam

kimia analitik terdapat beberapa tahap pada proses analisis yaitu penentuan

masalah, penetapan metode, perolehan sampel, persiapan sampel untukanalisis, pemisahan, pengukuran, perhitungan hasil, dan pelaporan. Tahapan

penetapan metode merupakan tahapan untuk menentukan banyaknya sampel,

preparasi sampel, dan metode analisis yang digunakan. Metode analisis dibagi

menjadi dua macam yaitu metode analisis konvensional dan modern. Metode

analisis modern lebih mengarah pada penggunaan instrumen. Prinsip dari

metode analisis modern dikelompokkan menjadi tiga yaitu metode

elektrokimia, metode spektrofotometri, dan metode kromatografi (Sabrina et

al, 2011).

Kromatografi merupakan teknik pemisahan tertentu, pada dasarnya

kromatografi menggunakan dua fase yaitu fase tetap (stationary) dan fase

bergerak (mobile), pemisahan tergantung pada gerakan relatif dari dua fase

ini. Dari beberapa jenis kromatografi, satu di antaranya adalah Kromatografi

Lapis Tipis (KLT), kromatografi jenis ini membutuhkan waktu yang lebih

cepat dan diperoleh pemisahan yang lebih baik (Susilo, 2005). Kromatografi


3/16

lapis tipis (KLT) dikembangkan oleh Izmailoff dan Schraiber pada tahun

1938. Pada kromatografi lapis tipis, fase diamnya berupa lapisan yang

seragam (uniform) pada permukaan bidang datar yang didukung oleh lempeng

kaca, pelat aluminium, atau pelat plastik. Meskipun demikian, kromatografi

ini dapat dikatakan sebagai bentuk terbuka dari kromatografi kolom (Mulya

dan Suherman, 1995).

KLT merupakan metode yang efisien karena senyawa bias langsung

dipisahkan bahkan dapat diketahui golongannya. Kelebihan KLT

dibandingkan metode lain adalah pemakaian pelarut dan cuplikan yang

relatif sedikit. Bila dibandingkan dengan kromatografi gas dan KCKT, KLT

menggunakan alat yang lebih sederhana dan murah(Kusumaningtyas, 2008).

KLT merupakan cara cepat dan mudah untuk melihat kemumian suatu

sampel maupun karakterisasi sampel dengan menggunakan standar. Cara

ini praktis untuk analisis skala kecil karena hanya memerlukan bahan yang

sangat sedikit dan waktu yang dibutuhkan singkat. Kemumian suatu

senyawa bisa dilihat dari jumlah bercak yang terjadi pada plat KLT atau

jumlah puncak pada kromatogram KLT. Uji kualitatif dengan KLT dapat

dilakukan dengan membandingkan waktu retensi kromatogram sampel

dengan kromatogram senyawa standar (Sri Handayani et al, 2005).

Obat yang bersifat analgesik (penahan rasa sakit/nyeri) dan antipiretik

(penurun panas/demam) adalah obat yang paling banyak dikonsumsi

masyarakat, karena obat ini dapat berkhasiat menyembuhkan demam, sakit

kepala dan rasa nyeri. Umumnya obat yang bersifat analgesik dan antipiretik

ini mengandung zat aktif yang disebut asetaminofen atau yang lebih dikenal

dengan parasetamol (Rachdiati, 2008).

Acetaminophen atau Parasetamol adalah obat analgetik dan antipiretik

yang digunakan untuk melegakan sakit kepala, sengal-sengal atau sakit ringan

dan demam. Parasetamol merupakan derivate dari asetanilida yang efek

enalgetiknnya dapat diperkuat dengan koffein dengan kira-kira 50% dan

codein. Penggunaan parasetamol dalam dosis besar dan dalam jangka waktu

yang lama dapat menyebabkan kerusakan pada hati, untuk itu parasetamol


4/16

dikontraindikasikan untuk pasien dengan gangguan fungsi hati berat

(Rusmayanti, 2011). Parasetamol merupakan obat yang aman tetapi bukan

berarti tidak berbahaya. Sejumlah besar asetaminofen akan melebihi kapasitas

kerja hati, sehingga hati tidak dapat lagi menguraikannya menjadi bahan yang

tidak berbahaya (Nasution, 2009).

Aspirin merupakan obat anti-inflamasi non-steroid yang memiliki

kemampuan menghambat biosintesis prostaglandin yang merupakan salah satu

mediator inflamasi (Vane dan Botting, 1996). Mediator inflamasi tersebut

disintesis dari asam arakidonat dalam berbagai tahap dan dikatalisis oleh

berbagai enzim dalam setiap tahapnya, antara lain glutation S-transferase

(GST) yang terlibat dalam pembentukan prostaglandin D2, E2, F2 dari

prostaglandin H (Istyastono, 2002).

Kafein (1,3,7-trimetil xantin) merupakan salah satu derivat xantin yang

mempunyai daya kerja sebagai stimulan sistem saraf pusat, stimulan otot

jantung, relaksasi otot polos dan meningkatkan diuresis, dengan tingkatan

berbeda. Efek kafein dapat meningkat apabila berinteraksi dengan beberapa

jenis obat, antara lain : obat asma (epinefrin/teofilin), pil KB, antidepresan,

antipsikotika, simetidin. Akibatnya mungkin terjadi kofeinisme disertai gejala

gelisah dan mudah terangsang, sakit kepala, tremor, pernapasan cepat dan

insomnia (Hartono, 2011).

Sediaan farmasi yang beredar di pasaran kebanyakan berupa campuran

berbagai zat berkhasiat. Campuran ini bertujuan untuk meningkatkan efek

terapi dan kemudahan dalam pemakaian. Salah satu campuran zat aktif yang

sering digunakan adalah parasetamol dan kafein yang berkhasiat sebagai

analgetik dan antipiretik. Campuran parasetamol dan kafein banyak ditemukan

dalam produk antiinfluenza dengan berbagai merek dagang. Parasetamol

merupakan metabolit fenasetin dengan efek analgetik ringan sampai sedang,

dan antipiretik yang ditimbulkan oleh gugus aminobenzen, sedangkan kafein

adalah basa lemah yang merupakanturunan xantin, memiliki gugus metil dan

berefek stimulasi susunan saraf pusat serta dapat memperkuat efek analgetik

parasetamol (Naid et al, 2011).


5/16

C. Alat dan Bahan

1. Alat

Alat yang digunakan pada percobaan ini, yaitu:

- Bejana KLT (Chamber)

- Penyemprot

- Pipa kapiler

- Oven

- Gelas kimia

-

Pipet tetes

- Pipet ukur

- Filler

-

Batang pengaduk

2. Bahan

Bahan yang digunakan pada percobaan ini, yaitu:

-

Silica gel

- Kloroform

-

Methanol

- Asam asetat

- Dietil eter

-

Benzen

- Sampel obat (mengandung parasetamol, aspirin, dan kafein)

-

Zat pembanding (parasetamol, aspirin dan kafein murni)

3. Uraian bahan

a. Kloroform (Dirjen POM, 1979)

Nama resmi : CHLOROFORNUM

Nama lain : Kloroform, Tricholomethan

RM/BM : CHCI3/ 119,38 gr/mol


6/16

Struktur :

Pemerian : Cairan mudah menguap, tidak berwarna, manis, bau

khas, membakar

Kelarutan : Larut dalam kurang lebih 200 bagian air, mudah larut

dalam etanol mutlak

Penyimpanan : Dalam wadah tertutup baik tersumbat kaca, terlindung

cahaya

Kegunaan : Membantu proses kristalisasi

b. Methanol (Dirjen POM, 1979)

Nama Resmi : METIL ALKOHOL

Nama Lain : Metanol, Hidroksimetana, Metil alkohol, Metil

hidrat, Alkohol kayu, Karbinol.

Berat Molekul : 32.04 g/mol

Rumus Molekul : CH3OH

Struktur :

Pemerian : Pada keadaan atmosfer ia berbentuk cairan yang

ringan, mudah menguap, tidak berwarna, mudah

terbakar, dan beracun dengan bau yang khas

(berbau lebih ringan daripada etanol).

Kegunaan : sebagai bahan pendingin anti beku, pelarut, bahan

bakar dan sebagai bahan aditif bagi etanol industri.

c. Asam asetat (Dirjen POM, 1979)

Nama resmi : ACIDUM ACETICUM

Nama lain : Cuka

Berat molekul : 60,05 g/mol


7/16

Rumus molekul : C2H4O2

Struktur :

Pemerian : cairan jernih; tidak berwarna, bau menusuk, rasa

asam, tajam

Kelarutan : dapat campur dengan air, dengan etanol (95%), dan

dengan gliserol.

Penyimpanan : dalam wadah tertutup rapat

Khasiat : zat tambahan.

d. Dietil eter (Dirjen POM, 1979)

Nama resmi : DIETIL ETER

Nama lain : Dieti, eter

Rumus molekul : C2H5O

RJ : 0,714 gram0,78 gram

Struktur :

Jarak didih : Tersuling sempurna pada suhu antara 340C dan

360C.

e. Benzen (Dirjen POM, 1979)

Nama Resmi : BENZENA

Nama lain : Cyclohextriena

Rumus molekul : C6H6

Berat molekul : 78,0 g/mol

Struktur :


8/16

Kelarutan : Mudah larut dalam air

Pemerian : Cairan transparant, tidak berwarna dan mudah

menyala.

Penyimpanan : Dalam wadah tertutup rapat.

Kegunaan : Sebagai inti (induk) senyawa nitrobenzene.

f. Paracetamol (Dirjen POM, 1979)

Nama resmi : ACETAMINOPHENUM

Nama sinonim : Asetaminofen, parasetamol

Rumus molekul : C8H9NO2

Barat molekul : 151,16 gr/mol

Struktur :

Pemerian : Hablur atau serbuk hablur putih, tidak berbau, rasa

pahit.

Kelarutan : Larut dalam 70 bagian air, dalam 7 bagian etanol

(95%) P, dalam 13 bagian aseton p, dalam 40

bagian gliserol p dan dan dalam 9 bagian

propilenglikol p, larut dalam larutan alkali

hidroksida

Penyimpanan : Dalam wadah tertutup baik, terlindung dari cahaya

K/P : Analgetikum (obat yang digunakan untuk

menghilangkan rasa nyeri tanpa menghilangkan

kesadaran), Antipiretikum (obat yang digunakan

untuk menurunkan suhu tubuh / demam).

g. Kafein (Dirjen POM, 1979)

Nama resmi : Kofeina, 1,3,7-trimetilxantin, 1,2,3,6 tetrahidropurine

Nama lain : Coffeinum


9/16

Struktur :

Pemerian : Serbuk atau hablur bentuk jarum mengkilat,

biasanya, biasanya menggumpal, putih tidak berbau,

rasa pahit

Kelarutan : Agak sukar larut dalam air, dan dalam etanol (95%)

P, mudah larut dalam klorofom P, sukar larut dalam

eter P

Penyimpanan : Dalam wadah tertutup baik

Kegunaan : sebagai bahan hasil isolasi

h. Asetosal (Dirjen POM, 1979)

Nama resmi : ACIDUM ACETYLSALICYLICUM

Nama lain : Asetosal

RM/BM : C9H8O4/ 180,16 gr/mol

Struktur :

Pemerian : Hablur tidak berwarna atau serbuk hablur putih,

tidak berbau atau hampir tidak berbau, rasa asam

Kelarutan : Agak sukar larut dalam air, mudah larut dalam

etanol 95 % P, larut dalam kloroform P dan dalam

eter P

Penyimpanan : Dalam wadah tertutup baik

Kegunaan : Analgetik dan antipiretik


10/16

D. Prosedur Kerja

1. Penyiapan lempeng

2. Penyiapan pengembang

3. Penotolan sampel dan zat pembanding

3 gram silica gel

- Dimasukkan ke dalam gelas kimia

- Ditambahkan 6 ml air

- Diaduk

- Dilapiskan pada plat kaca dengan

ketebalan 0,1-0,3 mm

- Dikeringkan

- Dimasukkan ke dalam oven pada suhu

100,5o

C selama 1 jam

Lempeng KLT

Methanol, asam asetat,

dietil eter, dan bensen

- Dimasukkan kedalam chamber

dengan perbandingan 1:18:60:120

-Ditutupkan dan digoyangkan

- Dijenuhkan

Eluen

Poldanmig

- Digerus

- Dimasukkan kedalam gelas kimia

- Dilarutkan dengan kloroform

- Ditotolkan pada lempeng KLT sebanyak

3 kali

- Dikeringkan

- Diulangi pada zat pembanding

Lempeng yang telah ditotol


11/16

4.

Elusi dengan pengembang dan lokasi noda

Rfparasetamol = 0,12

Rfkafein = 0,07

Rfasetosal = 0,5

- Dimasukkan kedalam chamber

- Ditutup

- Dielusi

- Dikeluarkan

- Diamati noda yang terbentuk

dibawah sinar UV

- Disemprot dengan penampak noda

- Dioven

- Diamati noda yang terbentuk

- Dihitung nilai Rf

Lempeng yang telah ditotol


12/16

E. Hasil Pengamatan

1. Gambar hasil pengamatan

2. Perhitungan

Diketahui: Jarak eluen = 4 cm

Jarak Parasetamol = 0,5 cm

Jarak kafein = 0,3 cm

Jarak asetosal = 2 cm

Ditanya: Nilai Rf..?

Jawab:

Rf =

Nilai Rfparasetamol =

=

= 0,12

Nilai Rfkafein =

=

= 0,07

Nilai Rfasetosal =

=

= 0,5


13/16

F. Pembahasan

Kromatografi Lapis Tipis (KLT) merupakan bentuk kromatografi

planar, selain kromatografi kertas dan elektroferesis. Berbeda dengan

kromatografi kolom yang mana fase diamnya diisikan atau dikemas di

dalamnya, pada kromatografi lapis tipis, fase diamnya berupa lapisan yang

seragam (uniform) pada permukaan bidang datar yang didukung oleh

lempeng kaca, pelat aluminium atau pelat plastik. Meskipun demikian,

kromatografi planar ini dapat dikatakan sebagai bentuk terbuka dari

kromatografi kolom.

Percobaan ini bertujuan untuk mengidentifikasi adanya kandungan

senyawa paracetamol, aspirin dan kafein dalam suatu sediaan obat

analgetik antipiretik. Langkah awal dari praktikum ini adalah membuat

lempeng KLT, dengan menggunakan silica gel dan air lalu dipanaskan di

oven selama 1 jam yang kemudian dilapisi pada plat kaca dengan

ketebalan 0,1-0,3 mm. Lempeng KLT ini merupakan silica yang berfungsi

sebagai fase diam yang merupakan lapisan yang memisahkan, yang terdiri

atas bahan berbutir-butir ditempatkan pada penyangga berupa pelat gelas,

logam, atau lapisan yang cocok.

Selanjutnya adalah dibuat larutan pengembang yang nantinya

berfungsi sebagai eluen. Eluen disini berfungsi sebagai fase gerak yang

merupakan medium angkut dan terdiri atas satu atau beberapa pelarut.

Campuran eluen yang digunakan pada praktikum ini terdiri dari methanol,

asam asetat, dietil eter, dan benzen dengan perbandingan 1 : 18 : 60 : 120,

dimana methanol sebanyak 0,1 ml, asam asetat 0,9 ml, dietil eter 3 ml dan

benzen 6 ml, yang kemudian ditutup dan digoyangkan, lalu dilakukan

proses penjenuhan. Eluen yang dihasilkan ini bersifat non polar.

Selanjutnya dilakukan penotolan sampel dengan zat pembanding.

Sebelumnya, sampel terlebih dahulu digerus dan dicampurkan dengan

methanol dan kloroform lalu dikocok, agar dapat terlarut sempurna.

Sedangkan zat pembanding yang digunakan adalah parasetamol, asetosal

dan kafein murni dengan perlakuan yang sama dengan sampel. Penotolan


14/16

dilakukan pada plat KLT, dengan terlebih dahulu memberikan tanda pada

plat tersebut. Penotolan harus dilakukan seteliti mungkin, agar dapat

dicapai hasil yang diinginkan.

Lempeng yang telah ditotol kemudian dimasukkan dalam chamber

dan dielusi. Setelah eluen telah mencapai puncak pada plat, plat kemudian

dimasukkan dalam oven beberapa saat, lalu dikeluarkan dan disemprotkan

penampak noda dan dilihat hasilnya di bawah sinar UV.

Setelah diamati dibawah sinar UV 254 nm, terlihat 5 noda yang

terbentuk yakni 3 noda yang menandakan senyawa pembanding

(parasetamol, asetosal dan kafein) dan 2 noda yang menandakan sampel.

Noda-noda yang menandakan sampel tersebut berada sejajar dengan noda

senyawa pembanding. Hal ini menunjukkan bahwa sampel yang

digunakan mengandung parasetamol, asetosal dan kafein. Noda kafein dan

paracetamol berada pada jarak yang dekat dengan titik penotolan pada plat

KLT. Hal ini menandakan bahwa kedua senyawa tersebut bergerak lambat,

sehingga dapat disimpulkan bahwa kafein dan paracetamol bersifat non

polar sama seperti eluen yang juga bersifat non polar. Sedangkan noda

asetosal berada jauh dari titik pentolan dan menandakan bahwa asetosal

bergerak naik pada plat KLT. Sehingga diperoleh bahwa asetosal bersifat

polar sama seperti jenis plat KLT yangh digunakan yakni silica gel. Dapat

ditarik kesimpulan bahwa metode KLT juga menggunakan prinsip like

dissolve like, dimana polar akan larut pada pelarut polar dan zat non polar

akan larut pada pelarut non polar.

Langkah terakhir adalah penentuan nilai Rf. Nilai Rf didapatkan

dengan mengukur perbandingan ketinggian noda yang ditinggalkan pada

plat yang disebut jarak sampel dengan jarak eluen tersebut. Nilai Rf untuk

paracetamol adalah 0,12, nilai Rf untuk asetosal adalah 0,5, sedangkan

nilai Rf untuk kafein adalah 0,07.


15/16

F. Kesimpulan

Kesimpulan yang dapat diambil dari percobaan ini adalah sediaan obat

yang dipraktekkan positif mengandung paracetamol, asetosal dan kafein.

Dengan nilai Rf paracetamol adalah 0,12, nilai Rf asetosal adalah 0,5, dan nilai

Rf kafein adalah 0,07.


16/16

DAFTAR PUSTAKA

Dirjen POM. 1979.Farmakope Indonesia edisi III. Depkes RI. Jakarta.

Handayani, S., Sunarto, dan Susila, K. 2005. Kromatografi Lapis Tipis Untuk

Penentuan Kadar Hesperidin Dalam Kulit Buah Jeruk. Jurnal Penelitian

Saintek. 10(1).

Hartono, E. 2011. Penetapan Kadar Kafein Dalam Biji Kopi Secara Kromatografi

Cair Kinerja Tinggi.Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi.

Istyastono, EP., Martono, S., dan Supardjan, AM. 2002. Pengaruh Aspirin Pada

Aktivitas Glutation S-Transferase Kelas Hati Tikus. Majalah FarmasiIndonesia. 13(2).

Kusumaningtyas, E., Esti, E., dan Darmono. 2008. Sensitivitas Metode

Bioautografi Kontak dan Agar Overlay dalam Penentuan Senyawa

Antikapang.Jurnal Ilmu Kefarmasian Indonesia. 6(2).

Mulya, M., dan Suherman. 1995. Analisis Instrumen. Airlangga University Press.

Surabaya.

Naid, T., Syaharuddin, K., dan Mieke, P. 2011. Penetapan Kadar Parasetamol

Dalam Tablet Kombinasi Parasetamol Dengan Kofein SecaraSpektrofotometri Ultraviolet-Sinar Tampak. Majalah Farmasi dan

Farmakologi. 15(2).

Nasution, YA. 2009. Penetapan Kadar Kafein Dalam Biji Kopi Secara

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi.

Rachdiati, H., Ricson, PH., dan Erna, R. 2008. Penentuan Waktu Kelarutan

Parasetamol Pada Uji Disolusi.Nusa Kimia Jurnal. 8(1).

Rusmayanti. 2011 . Analisis Berbagai Merk tablet parasetamol 500mg Digunakan

di Maiduguri, Menggunakan Violet Ultra Spektrofotometri dan KinerjaTinggi Liquid kromatografi (HPLC). Internasional Penelitian Jurnal

Farmasi. ISSN 22308407

Sabrina, A., Surjani, W., dan Neena Z. 2011. Perbandingan Metode

Spektrofotometri UV-Vis dan KCKT (Kromatografi Cair Kinerja Tinggi)

pada Analisis Kadar Asam Benzoat dan Kafein dalam Teh Kemasan.

Universitas Negeri Malang.

Susilo, J. 2005. Penetapan Kadar Co-Trimoksazol Yang Dilakukan Dengan

Menggunakan Spektrofotometer Ultraviolet Secara Simultan KLT.Jurnal

Litbang. Universitas Muhammadiyah Semarang.

IDENTIFIKASI SEDIAAN OBAT YANG MENGANDUNG ASPIRIN, KAFEIN DAN PARACETAMOL DENGAN METODE KROMATOGRAFI...

Documents

Transcript of IDENTIFIKASI SEDIAAN OBAT YANG MENGANDUNG ASPIRIN, KAFEIN DAN PARACETAMOL DENGAN METODE KROMATOGRAFI...