HEMATOLOGI I

Oleh :Nama: Rafta Firmana AdhiemNIM: B0A014014Kelompok : 1Asisten: Liya Maratussalikhah

LAPORAN PRAKTIKUM BIOLOGI DASAR II

KEMENTERIAN PENDIDIKAN DAN KEBUDAYAANUNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMANFAKULTAS BIOLOGIPROGRAM STUDI DIII PENGELOLAAN SUMBERDAYAPERIKANAN DAN KELAUTANPURWOKERTO2015I. PENDAHULUAN1.1. Latar BelakangPengukuran hematologi merupakan pengukuran yang meliputi pengukuran kadar hemoglobin, perhitungan total eritrosit, perhitungan total leukosit dan pengukuran hematokrit. Hematokrit adalah istilah yang menunjukan besarnya volume sel-sel eritrosit seluruhnya di dalam 100 mm3 darah dan dinyatakan dalam persen (%). Nilai Hematrokit adalah suatu istilah yang artinya prosentase berdasarkan volume dari darah, yang terdiri dari sel darah merah (Hoffbrand dan Pettit, 1987).Darah adalah matrik cairan dan merupakan jaringan pengikat terspesialisasi yang dibentuk dari sel-sel bebas (Bryon and Doroth, 1973). Darah terdiri dari komponen cair yang disebutplasmadan berbagai unsur yang dibawa dalam plasma yaitu sel-sel darah. Sel-sel darah terdiri dari eritrosit atau sel darah merah, yaitu sel yang mengangkut oksigen, leukosit atau sel darah putih yaitu sel yang berperan dalam kekebalan dan pertahanan tubuh dan trombosit yaitu sel yang berperan dalam homeostasis (Frandson, 1992).Eritrosit mempunyai peran sebagaimediatransport. Sedangkan leukosit berfungsi sebagai alat pertahanan tubuh sehingga memiliki sifat menembus jaringan tanpa merusak jaringan tersebut.Darah sangat penting bagi organisme, jika kekurangan atau kelebihan sel darah mengakibatkan tidak normalnya proses fisiologis suatu organisme sehingga menimbulkan suatu penyakit (Pearce, 1989).Transportoksigen dalam darah tergantung pada komponen besi dalam pigmen respirasi biasanya haemoglobin. Haemoglobin merupakan bagian dari sel darah merah yang mengikat oksigen. Darah terdiri atas sel-sel dan fragmen-fragmen sel yang terdapat secara bebas dalam medium yang bersifat cair yang disebut plasma darah. Sel-sel dari fragmen sel merupakan unsur darah yang disebut unsur jadi. Sel ini berukuran cukup besar sehingga dapat diamati dengan mikroskop biasa. Plasma darah merupakan bagian yang cair dari darah yang terdiri dari 99 %air dan8-9 % protein (Kimball, 1988).Hemoglobin adalah senyawa organik yang kompleks yang terdiri dari empat pigmen porfirin merah, masing-masing mengandung atom Fe ditambah globulin yang merupakanproteinglobuler yang terdiri atas empat asam amino. Kadar hemoglobin dan kadar glukosa setiap species berbeda-beda, hal ini bergantung pada kebutuhan metabolisme species itu sendiri. Hemoglobin bergabung dengan oksigen paru-paru disebut oksihemoglobin (Hoffbrand dan Pettit, 1987).

1.2 TujuanPercobaan ini dilakukan dengan tujuan memberikan keterampilan pada mahasiswa tentang cara pengambilan darah hewan, mengetahui perbedaan bentuk sel darah pada bebagai hewan, serta cara melakukan perhitungan sel daraah merah, sel darah putih, dan kadar hemoglobin.

II. MATERI DAN CARA KERJA2.1 MateriBahan yang digunakan dalam praktikum pada kali ini adalah darah ikan nilem (Osteochilus hasseti), darah katak (Vejervarya cancrivora), larutan Hayem, larutan Turk, larutan 0,1 N HCl.Alat yang digunakan adalah haemometer, haemositometer, tabung sahli, pipet kapiler, mikroskop, objek gelas, kaca penutup, spuit, dan hand counter.

2.2 Cara Kerja2.2.1 Menghitung jumlah leukosit (pengenceran 10 kali)1. Darah ikan dihisap dengan menggunakan mikropipet hingga menunjukan angka 0,5 kemudian ujungnya dibersihkan dengan kertas isap.2. Larutan Turk dituang kedalam tabung reaksi sampai angka 11.3. Pipa karet diambil dari pipet, kemdian pipet dipegang pada kedua ujungnya dan dikocok selama 2 menit.4. Dibuang 1-2 tetes. Kemudian tetesan berikutnya dipakai untuk perhitungan.5. Bilik hitung disiapkan. Cairan dalam pipet diteteskan sehingga dapat masuk kedalam bilik hitung dengan sendirinya.6. Diamati dibawah mikroskop dari perbesaran terkecil sampai yang terbesar.7. Semua leukosit yang terdapat pada bujur sangkar pjok dihitung. Jadi jumlah dihitung menjadi 4 16 = 64 bujur sangkar denga sisi masing-masing = mm8. Dihitung dengan menggunuakan rumus:Jumlah leukosit per mm3=(L1+L2+L3+L4)= 25 L

2.2.2 Menghitung jumlah eritosit1. Penenceran 100 kali2. Cairan pengencernya yaitu larutan hayem3. Semua eritosit dihitung terdapat pada bujur sangkar kecil dengan sisi 1/20 atau dengan volume masing-masing 1/4000 mm34. Rumus perhitungannya adalah :Jumlah eritosit per mm3= 5000 (E1+E2+E3+E4+E5)= 5000 E2.2.3 Menghitung kadar Hb dengan metode sahli1. Kedalam tabung sahli diteteskan 0,1 N larutan HCl hingga batas 102. Bersihkan jari hingga kering kemudian tusuk dengan lancet sampai darahnya keluar .3. Darah yang keluar dihisap dengan pipet hingga skala 20m. Darah yang tersisa diujujng pipet dibersihkan dengan kapas.4. Darah diteteskan ke tabung sahli yang berisis HCl. Kemudian tabung diletakkan pada kmperator.5. Darah diaduk dengan menggunakan batang pengaduk. Setelah sekitar satu menit diteteskan akuades.6. Penambahan akuades dilakukan tetes demi tetes sampai warna darah sama dengan warna pemmbanding komparator.7. Dicatat hasilnya.

III HASIL DAN PEMBAHASAN3.1 HasilHasil perhitungan hematologiKelompokUji darahKadar Hb (gr/dl)leukosit (sel/mm3)eritosit (sel/mm3)

1Ikan Nilem 371.5751.130.000

2Ikan Nilem4,16.075460.000

3Ikan Nilem 4,54.7502.530.000

4Katak 2,218.8001.355.000

5Katak 3,822.675142.000

Perhitungan kelompok 1 Leukosit L1 = 1241L2 = 533L3 = 486L4 = 603

L = L1+L2+L3+L4= 1241+533+486+603= 2863L= 25 x L= 71.575 sel/mm3 Eritosit E1 = 36E2 = 47E3 = 53E4 = 43E5 = 47

E= E1+E2+E3+E4+E5= 36+47+53+43+47= 226E= 5000 x L= 5000 x 226= 1.130.000 sel/mm3 Kadar Hemoglobin (Hb) pada ikan = 3 gr/dL Hematokrit = 9%

3.2 PembahasanBerdasarkan hasil pengamatan, jumlah eritrosit dari sampel darah ikan nilem (Osteochilus hasseti) diperoleh jumlah leukosit 71.575 sel/mm3 dan pada ikan nilem (Osteochilus hasseti) jumlah eritrositnya adalah1.130.000sel/mm3.Jumlah sel eritrosit pada tiap-tiap spesies adalah berbeda satu sama lain (Legler, 1997). Kadar Hemoglobin ikan nilem adalah 3 gr/dL. Hal ini sesuai dengan pustaka karena menurut (Oslon, 1973), jumlah eritrosit pada ikan adalah 50.000 3.000.000 sel/mm3, jumlah leukosit pasa sel darah ikan 20.000 150.000 sel/mm3. Sedangkan kadar Hb berdasarkan pustaka adalah pada betina 1.12 gram/dL dan pada jantan 1,13 gram/dL (Heumann et al., 1983). Hal ini tidak sesuai dengan hasil praktikum yang telah dilakukan.Hasil pengamatan yang diperoleh sesuai dengan pustaka untuk jumlah leukosit dan eritrosit, namun untuk hasil hemoglobin tidak sesuai. Hal in disebabkan karena keterbatasan ketelitian penglihatan dalam menghitung. Berdasarkan hasil pengamatan ternyata ada yang sesuai dan ada yang tidak sesuai dengan pernyataan tersebut. Hal ini disebabkan beberapa faktor diantaranya perbedaan umur, ukuran, dan jenis kelamin masing-masing spesies, fluktuasi dalam jumlah leukosit pada tiap individu cukup besar pada kondisi tertentu, misalnya stress, aktifitas fisiologis, gizi, umur, dan lain-lain (Hadikastowo, 1982).Hematologyberasal dari bahasa Romawihematyang berarti darah yang berarti darah danologyyang berartibelajaratau mempelajari. Hematology adalah ilmuyang mempelajari aspek anatomi, fisiologi dan patologi darah. Komponen darah terdiri plasma dan unsur-unsur pembentuk darah yaitu eritrosit, leukosit dan trombosit (Nurcholiset al.,2013). Darah merupakan sistemtransporyang berfungsi antara lain membawa zat makanan dari saluran pencernaan menuju jaringan, membawa produk akhir metabolismedarisel ke organ ekskresi, serta membawa oksigen dari paru-paru ke jaringan yang mengandung berbagai bahan penyusun sistem imun yang bertujuan mempertahankan tubuh dari berbagai penyakit, sebagai alat pertahanan mikro organisme yang masuk ke dalam tubuh (Handayaniet al, 2013). Darah merupakan sistemtransporyang berfungsi antara lain membawa zat makanan dari saluran pencernaan menuju jaringan, membawa produk akhir metabolismedarisel ke organ ekskresi, serta membawa oksigen dari paru-paru ke jaringan yang mengandung berbagai bahan penyusun sistem imun yang bertujuan mempertahankan tubuh dari berbagai penyakit, sebagai alat pertahanan mikro organisme yang masuk ke dalam tubuh (Handayaniet al,2013).Plasma darah adalah cairan kompleks yang mengandung ion-ion dan molekul organik seta berada dalam keadaan keseimbangan dinamik dengan cairan tubuh lain. Plasma mengandung 90% air, 7-8% protein, 1% elektrolit dan 1-2% zat-zat terlarut lainnya. Eritrosit merupakan tipe sel darah yang berjumlah paling banyak dalam darah. Darah vertebrata memiliki inti yang bentuknya secara umum oval, kecuali pada mamalia, dalam perkembangannya eritrosit akan berbentuk cawan bikonkaf, yang dapat mempercepat pertukaran gas antar sel-sel dan plasma darah (Villeet al., 1984).Eritrosit merupakan sel darah yang berfungsi untuk mengangkut oksigen, karbon dioksida, dan sari-sari makanan (nutrien), berdiameter rata-rata 7,5 mikron, berbentuk cakram yang bikonkaf dengan pinggiran sirkuler ketebalan 1,5 mikron dan pusat yang sangat tipis dan permukaan cakram yang bikonkaf ini relatife lebar untuk jalannya pertukaran O2melalui membran (Sutrisno, 1999). Eritrosit memiliki bentuk seperti cakram kecil bikonkaf, cekung pada kedua isinya sehingga apabila dilihat dari samping akan tampak seperti dua buah bulan sabit yang saling bertolak belakang. Struktur eritrosit terdiri dari pembungkus luar atau shoma dan masa hemoglobin. Fungsi utama eritrosit adalahuntuk membawa gas CO2dan O2dan secara garis besar rasio luas permukaannya bergantung pada faktor pertukaran oksigen dan karbondioksida (Pearce, 1989). Eritrosit mempunyai fungsi sebagai penyuplai oksigen dalam darah dan dalam darah terkandung hemoglobin. Hemoglobin adalah suatu senyawa protein yang mengandung pigmen porpirofin merah (heme) yang masing-masing mengandung atom Fe ditambah dengan globin yang merupakan protein globular yang terdiri atas rantai asamamino. Berdasarkan jurnal, rendahnya kadar Hb menyebabkan laju metabolisme menurun dan energi yang dihasilkan menjadi rendah (Esti,2013). Hemoglobin sendiri berfungsi untuk mengatur oksigen pada mamalia dan vertebrata (Kimball, 1991).Leukosit jumlahnya lebih sedikit dari eritrosit, berwarna putih dan mempunyai kemampuan gerak yang independent. Sel ini berperan dalam proses kekebalan tubuh. Bentuk leukosit ini sangat bervariasi sesuai dengan fungsinya masing-masing (Sutrisno, 1999). Leukosit pada hewan vertebratamemiliki beberapa tipe yang semuanya berasal dari sel precursor yang sama. Sel darah putih dapat dibedakan menjadi dua yaitu yang memiliki sitoplasma granular (granulosit) dan yang memiliki sitoplasma non granuler (agranulosit). Granulosit terdiri dari monosit dan limposit. Leukosit ini berperan dalam pertahanan seluler dan hormonal organisme serta melindungi tubuh dengan menimbulkanperadangan di tempat-tempat yang terkena infeksi, memfagositasi mikroba, merusak toksin dan merusak antibody (Villeat al.,1988).Praktikum kali ini banyak menggunakan alat-alat yang memang khusus digunakan untuk perlakuan terhadap darah. Haemositometer fungsinya untuk menghitung sel darah, baik sel darah putih maupun sel darah merah,coverglassdigunakan untuk menutup haemositometer saat melakukan pengamatan di bawah mikroskop, mikroskop digunakan untuk mengamati jumlah eritrosit dan leukosit,pipet thoma sebagai pasangannya berfungsi untuk pengambilan darah. Ada dua jenis pipet thoma, yaitu pipet thoma eritrosit dan pipet thoma leukosit. Haemometer berfungsi untuk menghitung kadar haemoglobin dalam darah. Pipetdigunakan untuk mengambil eritrosit dan larutan HCldan tabung sahli merupakan pasangan atau alat pelengkap dari haemometeryang digunakanuntuk menampung larutan darah saat akan di ukur kadar haemoglobinnya,handcounteruntuk menghitung jumlah eritrosit dan leukosit, spuit digunakan untuk mengambil darah dari hewan uji. Bahan-bahan yang digunakan antara lain darah dari hewan uji (ikan nilem, dan katak), larutan turk digunakan untuk mengencerkan leukosit, larutan hayem digunkan untuk mengencerkan eritrosit, larutan HCl untuk menimbulkan reaksi dan menghasilkan warna senyawa hernatin asam yang berwarna coklat pekat pada hemoglobin, akuades digunakan sebagai pengencer dan larutan EDTA digunakan untuk mengencerkan darah yang menggumpal. Beberapa kepustakaan menyebutkan bahwa penggunaan konsentrasi garam EDTA yang berbedadapat menyebabkan perbedaan kuantitas maupun kualitas hasil pemeriksaan. Lamanya penundaan pemeriksaan juga dapat memberikan hasil yang berbeda untuk parameter tertentu (Aulia, 1988).

IV KESIMPULANBerdasarkan hasil dan pembahasan sebelumnya maka dapat diambil kesimpulan bahwa :1. Praktikum Hematologi I sudah dilakukan dengan baik walaupun hasilnya masih kurang sesuai dengan pustaka dan praktikan sudah bisa melakukan pengambilan darah dari masing-masing preparat hewan walaupun pada awalnya mengalami kesulitan.2. Sebagian besar sel darah merah hewan vertebrata berbentuk lonjong dan berinti kecuali mammalia (bulat dan tidak berinti).Sel darah putih memiliki banyak variasi bentuk sesuai fungsinya, namun secara garis besar berbentuk bulat dan berinti besar. Sel darah putih ada yang bergranula dan ada yang tidak bergranula.3. Kadar hemoglobin pada setiap spesies berbeda-beda tergantung pada kebutuhan metabolisme spesies itu sendiri.4. Jumlah eritrosit dan leukosit dipengaruhi oleh kondisi fisiologis seperti kondisi tubuh, keadaan stress, umur, varian harian dan jenis kelamin.

DAFTAR REFERENSIApsari, Ida A. P dan I. M. D. Arta. 2010. Gambaran Darah Ayam buras yang terinfeksi Leucocytozon.Jurnal Veteriner11(2) : 114-118.Aulia, D. 1988. Pengaruh lamanyaPenyimpanan Darah dengan Antikoagulan Tripotassium Ethylene Diamine Tetracetic Acid (K3Edta) dalam Tabung Vacuette terhadap beberapa Parameter Hematologi. Perpustakaan Pusat UI, Jakarta.Bavelender, G. A. dan A. R. Judith. 1979.Dasar-dasar Histologi Edisi 8. Erlangga, Jakarta.Bryon, A. S and Doroth. 1973.Text Book of Physiology. St Burst The Moshy Co Toppon Co Ltd, Japan.Dukes, H. H. 1995.The Phisiology of Domestic Animals.Constock Publishing Associates, New York.Esti, Handayani. 2013. Kandidat Vaksin Potensial Streptococcus agalactiae untuk Pencegahan penyakit Streptococcus pada Ikan Nila (Oreochromis niloticus). Jurnal Veteriner (4): 408-416Frandson, R. D. 1992.Anatomi dan Fisiologi Ternak. UGM Press, Yogyakarta.Hadikastowo. 1982. Zoologi Umum. Alumni, Bandung.Handayani, L., Irianti, N dan Yuwono, E. Pengaruh Pemberian Minyak Ikan Lemuru terhadap Kadar Eritrosit dan Trombosit pada Ayam Kampung.Jurnal Ilmiah Peternakan1(1) : 39-46.Hoffbrand, A. V. dan J. E. Pettit. 1987.Haematologi. Penerbit ECG. Jakarta.Kimball, J. W. 1991.Biologi Jilid 2. Erlangga, Jakarta.Lagler, K. F. 1997.Ichthyology. Jhn Willey and Sons, Canada.Moyle, P. B and J. J Cech. 2001. Fisher and Introduction to Ichtyology 4th. Prentice, Inc. London.Nurcholis, A., Aziz, M. dan Muftuch. 2013. Ekstrasi Fitur Roudness untuk Menghitung Jumlah Eritrosit dalam Citra Sel Darah Ikan.Jurnal EECIS7(1).Pearce, E. 1989.Anatomi dan Fisiologi untuk Paramedis. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.Ramesh, M andM Saravanan. 2008. Haematological and Biochemical Biology responses in a freshwater fishCyprinus carpioexposed to chlorpyrifos.International Journal of Integrative Biology.Soetrisno. 1999. Diktat Fisiologi Ternak. Fakultas Peternakan Unsoed, Purwokerto.Ville, C. A, Walker, W and Barnes, R. D. 1988.Zoologi Umum Edisi 6. Erlangga, Jakarta.