HASIL

Produsen gel yang digunakan di kedua pusat adalah sama, meskipun jenis gel tertentu

berbeda Dalam kedua kasus, 250-mL botol tempat gel yang diremas berulang kali diisi ulang

dengan gel dari 5-L botol persediaan. Dalam lembaga di kedua St John dan Calgary, B.

cepacia diisolasi dari botol gel 250 ml digunakan pada probe USG transrectal melalui biopsi

prostat dilakukan pada kasus indeks. Itu tidak diidentifikasi dalam botol persediaan 5-L yang

digunakan untuk yang terakhir mengisi botol yang terlibat dalam kasus indeks.

Kultur

Gel telah dihapus dari banyak bidang kedua lembaga dan dikulturkan. Hasilnya dirangkum

dalam Tabel 1. Empat puluh tiga sampel "digunakan" botol 250 ml yang berkultur dan 35

mengungkapkan pertumbuhan bakteri. Dua organisme yang ditemukan di sebagian besar

sampel: Enterobacter cloacae di 30 (70%) dan B. cepacia pada 16 (37%). Delapan belum

dibuka botol saham 5-L dikultur. Empat (50%) mengandung Enterobacter cloacae (Tabel 1).

PFGE

Sebanyak 12 isolat B. cepacia yang tersedia untuk tujuan subtyping molekul dari studi dan

beban tambahan (American Type Culture Collection [ATCC] 25416) ditambahkan sebagai

kontrol. Empat subtipe utama diidentifikasi, diberi label A sampai D, dan jenis yang

dibedakan baik menggunakan SPEI atau enzim AflII (Gambar; Tabel 2). The Cluster dibagi

menjadi 4 subtipe menggunakan SPEI, sedangkan hanya 2 subtipe diamati dengan enzim

restriksi AflII. Pola A1 adalah bentuk paling dominan dan strain diwakili diisolasi dari darah

kasus 1 (strain SB6, St. John) dan kasus 5 dan 6 (strain CB1 dan CB2, Calgary). Selain itu,

strain dengan pola A juga diisolasi dari gel digunakan selama biopsi pada pasien indeks

(kasus 1 dan 5, strain SB1 dan CB3) ditambah 5 isolat dari botol 250 ml digunakan di bagian

lain dari rumah sakit . B. cepacia ATCC 25416 jelas dilihat dari Pola baik menggunakan

SPEI atau AflII. Dua jenis lainnya ditampilkan sidik jari DNA yang unik, salah satu yang

diisolasi dari darah pasien di Calgary terkait dengan wabah (strain CB5) dan yang lain dari

sampel pernafasan terkait (strain CB6) berlabel tipe D1. Dua belas strain Enterobacter

cloacae pulih dari gel, termasuk yang ditemukan dalam botol belum dibuka saham di St John

dan Calgary, menjadi sasaran PFGE untuk menentukan pola sidik jari mereka. Dua subtipe

diidentifikasi, diberi label A dan B, dengan Pola yang mewakili 11 isolat. Strain dengan pola

sidik jari tidak bisa dibedakan diidentifikasi dari kedua St John dan Calgary (Gambar; Tabel

3).

Degradasi Parabens

B. cepacia regangan SB6 benar-benar terdegradasi 4,7 mM metil paraben dalam waktu

kurang dari 8 hari di TSB. Fenol dan asam 4-hidroksibenzoat, yang intermediet potensial

dalam degradasi metil paraben, terdeteksi hanya dalam jumlah kecil, menunjukkan

mekanisme degradasi yang berbeda dari yang sebelumnya dijelaskan untuk Enterobacter

cloacae.20,23

Strain Enterobacter cloacae SE6 dan SE7 dibedakan oleh pola PFGE mereka sedikit berbeda

dan dengan kemampuan mereka untuk mendegradasi paraben. Kedua strain benar-benar

terdegradasi 4,7-mM solusi metil paraben di TSB dalam waktu kurang dari 1 hari,

menghasilkan sejumlah stochiometric fenol. Contoh gel yang diperoleh dari botol gel 5-L

yang belum dibuka dan tidak tercemar diinokulasi dengan dua strain dan dibudidayakan pada

30 ° C. Hal ini menyebabkan total degradasi metil paraben ini (4,3 mM) dalam waktu kurang

dari 3 hari, dan untuk produksi dalam jumlah stochiometric fenol. Kontrol gel non-

diinokulasi tidak menunjukkan degradasi paraben dalam kondisi yang sama, bahkan setelah

inkubasi selama 1 bulan, menunjukkan bahwa degradasi diamati adalah karena orang-2 strain

dan bukan orang lain, bakteri tidak terdeteksi yang bisa saja hadir dalam gel.

PCR amplifikasi plasmid dan kromosom DNA ini 2 strain Enterobacter cloacae dan strain

SB6 B. cepacia dengan primer Econ dan EcoPep4 khusus untuk gen prbA disajikan dua band

300-bp. Ini berhubungan dengan karakteristik pita 300-bp dari gen prbA di Enterobacter

cloacae ketegangan EM pada elektroforesis agarosa gel.27 Fragmen ini diamati hanya dalam

DNA plasmid dari 2 strain Enterobacter cloacae.