EFEK EKSTRAK POMEGRANAT TERHADAP KADAR

MALONDILADEHIDA (MDA) DAN GAMBARAN

MIKROSKOPIK HATI TIKUS STRAIN SPRAGUE DAWLEY

YANG DIPAPARKAN ASAP ROKOK

Laporan Penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

SARJANA KEDOKTERAN

Oleh :

Samsul Komar

NIM : 107103000535

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA

2010 M/1431 H

ii

LEMBAR PERNYATAAN KEASLIAN KARYA

Dengan ini saya menyatakan bahwa:

1. Laporan penelitian ini merupakan hasil karya asli saya yang diajukan

untuk memenuhi salah satu persyaratan memperoleh gelar strata 1 di UIN

Syarif Hidayatullah Jakarta.

2. Semua sumber yang saya gunakan dalam penulisan ini telah saya

cantumkan sesuai dengan ketentuan yang berlaku di UIN Syarif

Hidayatullah Jakarta.

3. Jika di kemudian hari terbukti bahwa karya ini bukan karya asli saya atau

merupakan hasil jiplakan dari karya orang lain, maka saya bersedia

menerima sanksi yang berlaku di UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.

Jakarta, 07 Oktober 2010

Samsul Komar

iii

EFEK EKSTRAK POMEGRANATE TERHADAP KADAR

MALONDILADEHIDA (MDA) DAN GAMBARAN MIKROSKOPIK HATI

TIKUS STRAIN SPRAGUE DAWLEY YANG DIPAPARKAN ASAP

ROKOK

Laporan Penelitian

Diajukan kepada Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran dan

Ilmu Kesehatan untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar

Sarjana Kedokteran (S.ked)

Oleh :

Samsul Komar

NIM : 107103000535

Pembimbing

dr. Francisca A. Tjakradidjaja, MS, SpGK

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH

JAKARTA

1431 H/2010 M

iv

PENGESAHAN PANITIA UJIAN

Laporan Penelitian berjudul EFEK EKSTRAK POMEGRANAT TERHADAP

KADAR MALONDIALDEHIDA (MDA) DAN GAMBARAN

MIKROSKOPIK HATI TIKUS STRAIN SPRAGUE DAWLEY YANG

DIPAPARKAN ASAP ROKOK yang diajukan oleh Samsul Komar

(NIM:107103000535), telah diujikan dalam sidang di Fakultas Kedokteran dan

Ilmu Kesehatan pada 7 November 2010. Laporan penelitian ini telah diterima

sebagai salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Kedokteran (S. Ked) pada

Program Studi Pendidikan Dokter.

Jakarta, 7 Oktober 2010

DEWAN PENGUJI

Pembimbing Penguji

dr. Francisca A. Tjakradidjaja,MS,SpGK Rr. Ayu Fitri Hapsari, M.Biomed

PIMPINAN FAKULTAS

Dekan FKIK UIN Kaprodi PSPD FKIK UIN

Prof. Dr. (hc) dr. MK. Tadjudin, SpAnd DR. dr. Syarief Hasan Lutfie, SpRM

v

RIWAYAT HIDUP

Nama : Samsul Komar

Tempat, Tgl Lahir : Tanjung Tiram, 10 Februari 1989

Jenis Kelamin : Laki-Laki

Agama : Islam

Status : Belum Menikah

Alamat : Jalan Merdeka Simpang 4 No.67

Tanjung Tiram, Kabupaten Batu Bara

Asahan

Telpon/Hp : 0813-7646-7616

Email : samsulkomar_dr@yahoo.com

Riwayat Pendidikan:

- SD : SD Negri 010146 Labuhan Ruku, Asahan

- SMP : SMP Swasta Al-Azhar, Medan

- SMA : SMA Plus swasta Al-Azhar, Medan

- Universitas : Fakultas Kedokteran Dan Ilmu Kesehatan

Universitas Islam Negri Syarif Hidayatullah,

Jakarta Selatan

vi

KATA PENGANTAR

Assalamualaikum wr wb.

Alhamdulillah puji dan syukur kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan

karunia-Nya sehingga laporan riset berjudul Efek Ekstrak Pomegranate

terhadap Kadar Malondialdehida (MDA) dan Gambaran Mikroskopik Hati

Tikus strain Sprague dawley yang Dipaparkan Asap Rokok dapat diselesaikan

dengan baik. Laporan riset ini disusun untuk memenuhi syarat memperoleh gelar

Sarjana Pendidikan Dokter pada Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas

Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah.

Pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terima kasih kepada dr. Francisca

A. Tjakradidjaja,MS,SpGK selaku pembimbing yang telah meluangkan waktu,

tenaga, pikiran, untuk mengarahkan dan membimbing sejak proposal, pelaksanaan

penelitian, hingga penyusunan laporan ini.

Selanjutnya, ucapan terima kasih tak lupa disampaikan kepada kedua orang tua

tercinta yaitu Ayahanda H.Rafa’i dan Ibunda Hj.Syafridah, semua saudara

kandung yang saya sayangi, seluruh staf pengajar atas bekal ilmu pengetahuan,

bimbingan selama masa kuliah, dan teman-teman riset pomegranate serta seluruh

teman-teman pendidikan dokter angkatan 2007 yang telah memberikan dukungan

selama ini, semoga segala bantuan tersebut mendapat balasan dari Allah SWT.

Tak dapat dipungkiri bahwa penulis hanyalah makhluk ciptaan Allah SWT

yang tidak sempurna, maka penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang

membangun untuk penyempurnaan hasil laporan penelitian ini.

Wassalamualaikum wr wb

Jakarta, 7 Oktober 2010

Penulis

vii

ABSTRAK

Samsul Komar. Pendidikan Dokter. EFEK EKSTRAK POMEGRANATE

TERHADAP KADAR MALONDIALDEHIDA (MDA) DAN GAMBARAN

MIKROSKOPIK HATI TIKUS STRAIN SPRAGUE DAWLEY YANG

DIPAPARKAN ASAP ROKOK. 2010

Pomegranat (Punica Granatum L.) merupakan salah satu buah yang mengandung

antioksidan yang tinggi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh

ekstrak pomegranate terhadap kadar MDA dan gambaran mikroskopik hati tikus.

Tikus strain Sprague Dawley dipaparkan asap rokok selama 2-3 jam perhari

selama 2 minggu. Tikus dibagi menjadi 3 kelompok. Kelompok pertama sebagai

kontrol positif, kelompok kedua diberi ekstrak pomegranat sebanyak 5% dan

kelompok ke 3 diberi ekstrak pomegranat sebanyak 10%. Ekstrak pomegranate

diberikan selama 2 minggu. Pengambilan sampel dilakukan pada awal penelitian,

hari ke 8 dan hari ke 15. Hasil analisis menunjukkan bahwa terdapat perbedaan

yang bermakna antara kelompok tikus kontrol dengan kelompok tikus dengan

intervensi pomegranate 5% dan 10% (P< 0,05). Namun, tidak ada perbedaan yang

bermakna antara kelompok tikus dengan intervensi pomeganat 5% dan kelompok

tikus dengan intervensi pomegranate 10% (p>0,05). Gambaran mikroskopik hati

tidak menunjukkan adanya peningkatan proses inflamasi sel hepatosit pada ketiga

kelompok.

Kata kunci : asap rokok, pomegranat, malondialdehida, hati, sprague dawley

viii

ABSTRACT

Samsul Komar. Medical Education. EFFECT OF POMEGRANATE EXTRACT

ON MALONDIALDEHYDE LEVEL AND HISTOPATHOLOGICAL

EXAMINATION IN SPRAGUE DAWLEY RAT’S LEVER THAT EXPOSED

TO CIGARETTE SMOKE

Pomegranate (Punica Granatum L.) is one of fruits which contain high level

antioxidant. The aims of this study were to evaluate the effect of pomegranate

extract on malondialdehyde level and histopatological examination in rat’s lever

that exposed to cigarette smoking. Sprague dawley rats were exposed to cigarette

smoke 2-3 hours a day for 2 weeks. The rats divided into 3 groups. First group as

a control group, second group was given 5% pomegranate extract, and the third

group was given 10% pomegranate extract. Measurement of malondialdehyde

level was done in the beginning of research, the 8th

day, and 15th

day. The level of

MDA was significantly higher in control group compared with group that given

pomegranate extract 5% and 10% (P<0,05). The examination of histopatological

didn’t show the increase of hepatocyt cells’ inflammation for the three groups.

Keywords : cigarette smoke, pomegranate, malondialdehyde, lever, Sprague

Dawley.

ix

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ……………………………………………………….. i

LEMBAR PERNYATAAN ........................................................................... ii

LEMBAR PERSETUJUAN .......................................................................... iii

LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................ iv

DAFTAR RIWAYAT HIDUP ....................................................................... v

KATA PENGANTAR .................................................................................... vi

ABSTRAK/ABSTRACT ................................................................................ vii

DAFTAR ISI ................................................................................................... ix

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xi

DAFTAR TABEL .......................................................................................... xii

BAB I. PENDAHULUAN .............................................................................. 1

1.1. Latar Belakang ................................................................................. 1

1.2. Rumusan Masalah ............................................................................ 2

1.3. Hipotesis ………………………………………………………….. 2

1.4. Tujuan Penelitian ............................................................................. 3

1.5. Manfaat Penelitian ........................................................................... 3

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA ................................................................... 4

2.1. Sprague dawley .............................................................................. 4

2.2. pomegranat ..................................................................................... 5

2.3. radikal bebas .................................................................................... 6

2.4. rokok ............................................................................................... 7

2.5. Hepar .............................................................................................. 8

2.6. Kerangka Konsep ............................................................................ 12

BAB III. METODE PENELITIAN .............................................................. 13

x

3.1. Rancangan Penelitian ...................................................................... 13

3.2. Tempat dan Waktu Penelitian ......................................................... 13

3.3. Alat dan Bahan ................................................................................ 13

3.4. Cara Kerja ....................................................................................... 13

3.5. Indikator Matriks ............................................................................. 14

3.6. Prosedur Pengumpulan Data ……………………………………... 14

3.6.1. Pengukuran Kadar MDA ..................................................... 14

3.6.2. Pembuatan Preparat Mikroskopik ....................................... 14

3.7. Variabel ..............…………………………………………………. 16

3.8. Manajemen data ………………………………………………... 16

3.9. Batasan Operasional ……………………………………………… 17

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................... 18

4.1. Hasil Perhitungan Kadar Asupan Ransum ..................................... 18

4.2. Kandungan Zat Makanan ................................................................ 19

4.3. Energi Bruto dan Kadar Pomegranat .............................................. 20

4.2. Hasil Pengukuran Kadar MDA Serum ........................................... 22

4.3. Gambaran Mikroskopik Hati Tikus ................................................ 23

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................... 27

5.1. Kesimpulan ..................................................................................... 28

5.2. Saran ............................................................................................... 28

DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 29

xi

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1. Diagram sel hati dan organel-organelnya ............................... 16

Gambar 4.1. Gambaran mikroskopik hati tikus kontrol dan perlakuan ....... 23

xii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 4.1. Rata-rata asupan ransum tikus pada minggu pertama dan

kedua ........................................................................................

18

18

Tabel 4.2. Kandungan zat makanan pada ransum perlakuan ..................... 19

Tabel 4.3. Energi bruto dan kadar pomegranate yang diberikan ............... 20

Tabel 4.4. Kadar MDA .............................................................................. 22

1

BAB I

PENDAHULUAN

I.1. Latar belakang

Polusi udara di Indonesia sudah menjadi bagian yang tidak terlepaskan

dari kehidupan masyarakat terutama yang tinggal di kota besar. Berbagai

macam polusi udara salah satunya yang disebabkan oleh asap rokok dan

tingginya mobilitas serta gaya hidup yang tidak sehat merupakan beberapa

penyebab tingginya radikal bebas di lingkungan kehidupan. Radikal bebas

adalah substansi kimia yang tidak memiliki pasangan elektron. Radikal bebas

tidak hanya diproduksi dari luar, tetapi dari dalam tubuh. Radikal bebas ini

memiliki efek yang buruk bagi tubuh karena dapat merusak berbagai jaringan

terutama hati yaitu dapat menyebabkan kerusakan sel hepatosit hati yang

fungsinya membantu kerja hati (Supriyanto,2003)

Berbagai efek patologis diatas tidak terlepas dari radikal bebas yang

terdapat dalam asap rokok. Radikal bebas yang terhirup akan menjadi zat

prooksidan yang beracun yang akan menyebabkan stress oksidatif dan

peroksidasi lipid Poly Unsaturated Fatty Acids (PUFA) membran sel sehingga

akan dihasilkan zat hasil akhir peroksidasi lipid yang bersifat toksik yaitu

malondialdehid (MDA). Kadar MDA darah bisa dijadikan sebagai indikator

kerusakan oksidatif dan sekaligus sebagai indikator keberadaan radikal bebas

didalam tubuh (Syaputro,2009; Wiryowidagdo,2009)

Efek dari radikal bebas dapat dicegah dengan mengkonsumsi makanan

atau minuman yang mengandung antioksidan. Masyarakat sekarang sudah

mulai menyadari bahwa pentingnya asupan antioksidan sebagai bentuk

perlindungan terhadap kesehatan terutama antioksidan yang berasal dari

tanaman (Zafar R, 2009)

Salah satu antioksidan yang sedang marak digunakan di masyarakat

adalah sari buah pomegranate atau yang dalam bahasa Indonesia disebut buah

2

delima. Buah ini dipercaya mengandug antioksidan lebih tinggi dibandingkan

dengan vitamin C,E ataupun teh hijau (Zafar R,2009)

Pomegranate (Punica granatum L) adalah tanaman yang sering

digunakan sebagai obat tradisional di masyarakat karena dipercaya memiliki

khasiat untuk mencegah atau menyembuhkan berbagai penyakit seperti diare

dan obstipasi. Baik dalam pengobatan herbal tradisonal ataupun modern

khasiat pomegranat terdapat pada berbagai kandungan senyawa polifenol

yang aktivitas antioksidannya sangat tinggi (Zafar R,2009)

Penelitian ekstrak delima dan minyak biji delima dalam menghambat

pertumbuhan jaringan kanker pada tikus sudah dilakukan terhadap tumor kulit

(Hora,2003), kanker prostat dan payudara (Metha,2004). Sementara itu pada

organ tubuh yang berfungsi sebagai metabolisme seperti hati belum diketahui

efek dari ekstrak pomegranate terhadap perubahan yang terjadi pada sel

hepatosit hati terhadap fungsinya membantu kerja hati yang terjadi akibat

paparan dari asap rokok. Berdasarkan hal di atas penelitian ini bertujuan untuk

mengetahui seberapa besar efek dari ekstrak pomegranate terhadap kadar

MDA dan hubungannya gambaran mikroskopik sel hepatosit hati yang

diberikan pada tikus dan diberi paparan asap rokok.

I.2. Rumusan masalah

Bagaimana efek dari pemberian ekstrak pomegranat terhadap kadar

MDA dan gambaran mikroskopik sel hepatosit hati tikus yang diberi paparan

asap rokok?

I.3. Hipotesis

Pemberian ekstrak promegranat 5% dan 10% dapat mencegah

peningkatan kadar MDA dan mencegah terjadinya proses inflamasi pada sel

hepatosit hati tikus strain Sprague dawley yang diberi paparan asap rokok

selama 15 hari .

3

I.4. Tujuan penelitian

4.1. TujuanUmum

Mengetahui efek pemberian ekstrak pomegranat terhadap kadar MDA

dan gambaran mikroskopik sel hepatosit hati tikus yang telah diberikan

paparan asap rokok.

4.2 Tujuan Khusus

a. Diketahuinya kadar asupan ransum masing-masing kelompok tikus percobaan

pada hari ke-0, 8 dan 15.

b. Diketahuinya rata-rata energi bruto masing-masing kelompok tikus percobaan

pada hari ke-0, 8 dan 15.

c. Diketahuinya kadar MDA masing-masing kelompok tikus percobaan pada

hari ke-0, 8 dan 15.

d. Diketahuinya gambaran inflamasi sel hepatosit pada masing-masing

kelompok tikus percobaan.

I.5 Manfaat penelitian

Hasil penelitian ini diharapkan dapat digunakan untuk:

Untuk masyarakat : hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi sumber

informasi bagi masyarakat tentang kegunaan dari ekstrak pomegranate

terhadap efek negatif dari radikal bebas.

Untuk institusi : hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi data dasar

untuk penelitian lebih lanjut mengenai efek ekstrak pomegranate terhadap

kadar MDA dan gambaran mikroskopik sel hepatosit hati.

Untuk peneliti : sebagai prasyarat untuk menempuh jenjang pendidikan

klinik program studi pendidikan dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah.

4

BAB II

LANDASAN TEORI

II.1 Uraian Teori

1. Rattus Norvegiccus

Rattus norvegiccus atau tikus coklat aslinya berasal dari Cina Utara. Di Asia

habitat Rattus norvegiccus banyak terdapat di hutan dan daerah bersemak,

sekarang habitat mereka mudah ditemukan di daerah berpopulasi penduduk,

hampir disetiap sudut kota tikus jenis ini bisa ditemukan (Soewoto,2001).

Pada familinya Rattus norvegiccus memiliki ukuran cukup besar

dibandingkan yang lainnya dengan panjang badan mencapai 400 mm dan berat

badan 140-500 g, tikus jantan biasanya berukuran lebih besar dari yang betina.

Pada populasi alami tikus ini ditutupi oleh rambut kasar berwarna coklat diseluruh

permukaan tubuhnya kadang terdapat bercak hitam atau putih pada permukaan

dorsal, bagian telinga dan hidungnya botak. Panjang ekornya lebih pendek dari

tubuhnya, panjang telinganya secara khas lebih pendek dari pada jenis spesies

lainnya dan tidak menutupi matanya pada saat menunduk kebawah

(Soewoto,2001)

Sistem perkawinan Rattus norvegiccus disebut sebagai polygynandrous.

Sebagai binatang social Rattus norvegiccus cenderung berkembang biak dalam

kelompok besar. Tikus betina rata-rata bisa melahirkan sebanyak 7 kali pertahun,

fungsi reproduksi seperti ini memungkinkan R. noervegiccus memiliki angka

kelahiran cukup besar dengan kemampuan setiap ekor betina bisa melahirkan anak

tikus sekitar 60 ekor (Soewoto,2001) .

Rattus novegiccus dapat bertahan hidup maksimum sekitar 4 tahun dan di

alam liar diasumsikan memiliki kemampuan hidup rata-rata sekitar 2 tahun.

Rattus norvegiccus adalah binatang yang aktif pada malam hari untuk menggali

liang ataupun mencari makanan selain itu mereka lebih senang tinggal di area

dekat air, tikus ini adalah tikus pencari makan yang menggunakan penciuman dan

5

rabaan mereka. Mampu bertahan hidup dengan mengkonsumsi berbagai macam

makanan, biasanya tikus ini makan sampai 1/3 berat badannya dan makan setiap

24 jam (Soewoto,2001).

Rattus norvegiccus secara luas telah digunakan didalam riset dalam hal

keturunan dan medis. Riset ini telah mendorong kemajuan yang penting dalam

ilmu faal, genetika, imunologi, ilmu penyakit dan epidemiologi. Tikus jenis ini

juga adalah binatang yang populer digunakan dalam penelitian karena kemampuan

mereka untuk belajar dengan cepat dan mudah untuk menyimpan atau memelihara

mereka didalam laboratorium (Soewoto,2001).

2. Pomegranat (Punica granatum L.)

Pomegranat (Punica granatum L.) terkenal di Indonesia dengan nama delima

termasuk pada suku Punicaceae. Tanaman ini berasal dari Timur Tengah dengan

daerah penyebaran tempat tumbuh yang luas dari daerah-daerah subtropik sampai

tropik selain itu juga bisa tumbuh di dataran rendah sampai ketinggian tempat

tumbuh kurang dari 1.000 m di atas permukaan laut (Hargono,1989)

Pomegranat terbagi menjadi beberapa bagian anatomis, yaitu biji, sari buah

(juice), kulit, daun, bunga, kulit kayu, dan akar. Phytochemistry dan efek

farmakologis dari Punica granatum memiliki jangkauan yang luas dalam

penggunaan klinis untuk pengobatan dan pencegahan kanker dan berbagai

penyakit lain yang etiologinya berasal dari inflamasi kronik (Louba,2007)

Bagian dari Punica granatum yang dapat dikonsumsi (80% dari berat total)

terdiri atas 80% sari buah dan 20% biji. Sari buah segar mengandung 85% air,

10% gula, dan 1,5% pektin, asam askorbat, flavonoid. Di dalam sari buah Punica

granatum, terdapat fruktosa dan glukosa dalam jumlah yang sama. Di dalam

pengobatan herbal modern yang telah dikembangkan sebagai obat dari

pomegranate adalah ekstrak buah, ekstrak kulit buah, jus buah, jam buah, jelli

buah, konsentrat jus buah, anggur buah dan minyak biji delima (Louba,2007)

6

Pomegranat merupakan buah yang kaya akan dua jenis polifenol; antosianin

dan tannin. Bagian terlarut polifenol dalam sari buah pomegranat bervariasi antara

0,2% sampai 1% (Louba,2007)

Sari buah pomegranat yang telah difermentasi dan kulitnya memiliki

antioksidan kuat yang secara signifikan jauh lebih banyak dibandingkan dengan

anggur merah dan teh hijau. Di samping memiliki kadar antioksidan tannin dan

flavonoid yang tinggi dalam sari buah dan kulitnya, minyak yang berasal dari biji

pomegranat yang dihancukan dan dikeringkan mengandung kira-kira 80% 18-

karbon asam lemak, atau disebut juga asam punicic. Biji pomegranate

mengandung sejumlah serat, pektin, gula, dan fitoestrogen coumestrol.

Pomegranate merupakan satu dari sedikit buah yang mengandung estrone (Louba,

2007)

3. Antioksidan dan Radikal Bebas

Berbagai reaksi oksidatif di dalam tubuh memproduksi zat-zat yang disebut

radikal bebas (Hassan,2007,Williams,2005). Radikal bebas adalah zat kimia yang

berisi elektron yang sendiri dan tidak mempunyai pasangan. Radikal superoksida

(O2-) dan radikal hidroksida (OH

+) adalah radikal bebas yang sebenarnya. Dua zat

lainnya yang berhubungan, menunjuk pada spesies oksigen non-radikal, adalah

hydrogen peroksida (H2O2) dan oksigen singlet (1O2). Zat-zat ini dikenal sebagai

spesies oksigen reaktif (reactive oxygen species, ROS) (Williams,2005).

Radikal bebas adalah senyawa tidak stabil yang memiliki medan magnet yang

tidak seimbang yang mempengaruhi struktur moleculer dan reaksi-reaksi kimia di

dalam tubuh (Vander,2001). Radikal bebas mungkin sangat reaktif dengan

jaringan di dalam tubuh. Walaupun reaksi oksidatif penting untuk kehidupan,

beberapa oksidasi dapat menyebabkan kerusakan seluler dengan mengoksidasi

lemak unsaturated di membrane seluler dan subseluler. Radikal bebas mungkin

menyebabkan oksidasi yang tidak diinginkan (Williams,2005).

Radikal bebas dapat menyebabkan jejas pada sel melalui tiga reaksi yaitu, (1)

peroksidasi lipid membrane. Ikatan ganda pada lemak tak jenuh (polyunsaturated

7

lipid) membrane mudah terkena serangan radikal bebas berasal dari oksigen.

Interaksi radikal lemak menghasilkan peroksida, yang tidak stabil dan reaktif, dan

terjadi reaksi rantai autokatalitik; (2) fragmentasi DNA. Reaksi radikal bebas

dengan timin pada DNA mitokondria dan nuclear menimbulkan rusaknya untai

tunggal. Kerusakan DNA tersebut telah memberikan implikasi pada pembunuhan

sel dan perubahan sel menjadi ganas; (3) ikatan silang protein. Radikal bebas

mencetuskan ikatan silang protein yang diperantarai sulfhidril, menyebabkan

peningkatan kecepatan degradasi atau hilangnya aktivitas enzimatik. Reaksi

radikal bebas juga bisa secara langsung menyebabkan fragmentasi polipeptida

(Kumar,2005).

Walaupun radikal bebas dapat dibentuk di dalam tubuh, sel-sel tubuh dapat

menghasilkan sejumlah enzim antioksidan seperti superoksida dismutase, glutation

peroksidase dan katalase, yang membantu menetralisir radikal bebas dan

mencegah kerusakan seluler (Williams,2005). Untuk dapat berfungsi dengan baik,

harus berisi nutrisi-nutrisi yang penting seperti copper, zink, selenium. Selain itu

antioksidan ini juga terdapat di dalam vitamin E , C dan beta karoten

(Vander,2001).

4. Rokok

Rokok mempunyai efek yang kurang baik terhadap hampir setiap bagian

dari tubuh, termasuk otak, lambung, mulut dan organ reproduksi. Sebatang rokok

berisi ratusan zat kimia perusak, termasuk aseton ( pembersih pengkilat kuku),

ammonia (pencuci lantai), dan toluene (pelarut industry) (Insel,2004)

Merokok dalam jangka waktu yang panjang dapat menyebabkan berbagai

penyakit seperti penyakit kardiovaskular, paru-paru dan juga pada organ

metabolism seperti hati (Insel,2004; Hahn,2003)

Salah satu penyakit kardiovaskular akibat merokok yaitu penyakit jantung

koroner (PJK). PJK biasanya merupakan akibat dari atherosklerosis yaitu suatu

keadaan dimana terbentuknya deposit lemak yang disebut plak pada dinding dalam

arteri yang menyebabkan arteri tersebut menyempit dan kaku (Lange,2006).

8

Merokok dan paparan rokok dari lingkungan secara permanen mempercepat

akumulasi plak pada arteri koronaria (50% untuk perokok, 25% untuk mantan

perokok, dan 20% untuk orang yang sering terpapar asap rokok). Jika plak tersebut

benar-benar memblok aliran darah ke bagian jantung dapat terjadi serangan

jantung (Insel,2004).

Paru-paru perokok terus menerus terpapar oleh zat kimia berbahaya dan

iritan sehingga mereka harus bekerja lebih keras agar berfungsi dengan adekuat.

Stress pada paru-paru akibat rokok dapat merusak fungsi paru dan menyebabkan

penyakit paru obstruktif kronik (PPOK) (Lange,2006).

Merokok dapat menyebabkan kerusakan pada berbagai organ tubuh tak

terkecuali hati. Efek dari asap rokok dapat menyebabkan kerusakan pada sel

hepatosit hati sehingga dapat menyebabkan gangguan pada kerja hati atau hepar

(Supriyanto,2003)

5. HEPAR

Hati merupakan kelenjar terberat dalam tubuh, beratnya 1,5 kg atau lebih,

konsistensi lunak dan terletak di bawah diafragma dalam rongga abdomen atas.

Dalam keadaan segar warnanya merah tua atau merah coklat, disebabkan oleh

adanya darah yang banyak. Sebagian besar darah berasal dari arteria hepatica yang

merupakan cabang arteri seliaka. Selain itu hati juga menerima pendarahn dari

saluran cerna melalui vena porta. Hati menerima semua bahan yang diserap dari

usus. Di samping itu darah portal juga membawa berbagai bahan toksik kedalam

hati yang kemudian didetoksifikasi dan selanjutnya diekskresikani. Empedu dari

hati mengalir keluar melalui saluran ke dalam duodenum, sebagian merupakan

sekresi karena mengandung garam empedu yang penting untuk pencernaan, dan

sebagian merupakan ekskresi karena mengandung bahan tak berguna dan

berbahaya yang dikeluarkan ke dalam feses (Leeson,1990; Macsween,1994).

Vena porta dan arteri hepatica masuk ke dalam dan saluran empedu keluar

dari hati didaerah yang disebut porta hepatis, suatu celah yang melintang pada

permukaan bawah hati. Hati diliputi oleh simpai jaringan ikat fibrosa dan dari sini

9

membentuk septa jaringan ikat tipis yang masuk ke dalam hati di daerah porta

hepatis dan membagi hati dalam lobus dan lobulus (Leeson,1990; Macsween,1994;

Harlan,2000)

A. Lobulus dan asinus hati

Unsur utama struktur hati adalah sel-sel hati atau hepaosit. Sel-sel ini

berkelompok dalam susunan yang saling berhubungan sedemikian rupa, sehingga

membentuk suatu unit struktural yang terlihat jelas dengan mikroskop cahaya. Unit

struktural ini dinamakan lobulus hati. Lobulus hati berbentuk bangunan prisma

polygonal dengan ukuran sekitar 0,7 µm x 2 µm. Lobulus-lobulus berhubungan

erat satu dengan lainnya pada hampir seluruh permukaannya, sehingga sulit untuk

menentukan batas antara lobulus yang satu dengan yang lainnya. Akan tetapi, pada

beberapa daerah (biasanya di sudut sudut lobulus), lobulus-lobulus dipisahkan oleh

jaringan penyambung dan pembuluh darah. Daerah ini dinamakan segitiga portal

(juga dinamakan saluran portal, celah portal atau trigonum portal). Lobulus hati

mempunyai makna fungsional yaitu merupakan suatu unit structural dengan

pendarahan yang mengalirkan darah ke vena lobular (vena sentralis) (Leeson,1990;

Macsween,1994).

Ada patokan lain untuk menentukan satuan (unit) fungsional dalam hati, yaitu

lobulus portal mempunyai kanal portal sebagai pusatnya, dan terdiri dari jaringan

yang menyalurkan empedu ke dalam duktus biliaris didaerah portal tersebut. Unit

ini pada potongan melintang berbentik segitiga, mengandung bagian-bagian dari

tiga lobulus hati yang berdekatan dan vena sentralis terletak didaerah perifer pada

masing-masing sudutnya (Leeson,1990; Harlan,2000).

Dalam keadaan patologis, kerusakan hati biasanya berhubungan dengan

pendarannya dan suatu susunan unit yang lebih kecil yang sekarang dikenal atas

dasar itu disebut asinus hati.

10

B. Sel-sel hati (hepatosit)

Sel-sel hati (hepatosit) tersusun dalam rangkaian lempeng-lempeng atau

lembaran-lembaran bercabangdan beranastomosis membentuk labirin atau mirip

karet busa, dengan diantaranya terdapat ruangan sinusoid. Lempeng ini secara

radial bermula dari tepi lobulus hati menuju ke vena sentralis sebagai pusatnya

(Leeson,1990).

Sel hati berbentuk polygonal dengan enam atau lebih sisi, berukuran sekitar

20-35 µm, dengan membrane sel yang jelas. Permukaannya sel disampingnya atau

terpisah sebagian dari sel di sampingnya membentuk kanalikuli biliaris. Inti bulat

atau lonjong dengan permukaan teratur dan besarnya bervariasi dari satu sel

dengan lainnya. Kadang-kadang ada sel dengan dua inti. Masing-masing inti

bentuknya vesicular dengan granula kromatin tanpak jelas dan tersebar, dengan

satu atau lebih anak inti (Leeson,1990; Macsween,1994).

Sitoplasma sel hati mengalami perubahan sesuai dengan aktivitas

fungsionalnya terutama sebagai tempat penyimpanan glikogen dan lemak. Kedua

senyawa tersebut biasanya hilang sewaktu dibuat sediaan rutin, dan sebagai

gantinya tampak ruangan-ruangan berbentuk jala yang tak teratur dan vakuol-

vakuol bulat. Sitoplasma tampak berwarna basofil, dengan mitokondria kecil

berwarna dan berjumlah banyak. Aparat Golgi biasanya tampak terletak dekat inti

atau ditepi sel dan dekat kanalikuli biliaris. Retikulum endoplasma yang granular

maupun yang agranular (licin) tampak jelas dalam sitoplasma, dengan bagian yang

tidak terputus-terputus menghubungkan keduanya. Ribosom menempel pada

membrannya, sedangkan polisom ada yang bebas dan adapula yang berhubungan

dengan membrane tersebut. Peroksisom terdapat pada daerah dekat kanalikuli

biliaris, berbentuk bulat dengan garis tengah 0,2-0,8 µm, dan dibatasi oleh

membran. Lisosom juga terdapat, bentuknya berbeda-beda dan dapat mengandung

lipofuksin (Leeson,1990; Macsween,1994; Harlan,2000).

Membran plasma sel hatiyang tebalnya kurang lebih 7,5 nm memperlihatkan

cirri-ciri khas pada daerah tertentu. Berhadapan dengan permukaan sinusoid darah,

sel hati terpisah dari dinding pembuluh darah oleh suatu celah sempit yaitu ruang

11

perisinusoid. Di tempat ini membran plasma sel hati memperlihatkan banyak

mikrovili panjang, banyak vakuola dan gelombang pada sitoplasma dibawahnya

(Leeson,1990).

Kanalikuli biliaris tampak dengan pewarnaan H.E (hematoksilin-eosin)

sebagai rongga kecil di antara sel hati yang bersebelahan. Dengan pewarnaan

khusus, misalnya reaksi gomori untuk fosfatase alkali atau dengan impregnasi

perak, kanalikuli biliaris tampak berbentuk jala-jala tiga dimensi di antara sel-sel

hati. Dinding kanalikuli terdiri atas sel-sel parenkim yang berdampingan. Peralihan

kanalikuli dan duktus biliaris tidak mudah diperlihatkan. Peralihan tersebut melalui

bangunan peralihan yang disebut duktulus atau kanal Hering. Lumen duktulus ini

akhirnya bersatu dengan duktus biliaris di daerah portal (Leeson,1990;

Macsween,1994).

Gambar 1.1 Diagram sel hati dan organel-organelnya (Junquiera,2005;

Carneiro,2005)

12

II.2 Kerangka Konseptual

Kerusakan hati/ fungsi

hati

Inflamasi sel

hepatosit hati

MDA

Stress Oksidatif

Ekstrak Pomegranate

Antioksidan Radikal Bebas

Asap Rokok

13

BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

III.1 Rancangan Penelitian

Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap (RAL)

III.2 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian dilaksanakan selama 2 bulan di Animal House Fakultas

Peternakan Institut Pertanian Bogor, Laboratorium Patologi Anatomi FKUI,

dan Laboratorium FKIK UIN.

III.3 Alat dan Bahan

Alat :

Spektrofotometer, spuit, kapas, mikrotom, oven, waterbath, sentrifuge,

glassware, sonde, dissecting set, timbangan

Bahan :

- Ekstrak pomegranate

- Tikus putih (Rattus norvegicus) jantan dewasa dengan strain Sprague

Dawley berumur sekitar 120 hari dengan rata-rata bobot badan 80 g/ekor

- Kandang

- Ransum standar dan ransum perlakuan

- Pereaksi MDA

III.4 Cara Kerja

Penentuan jumlah tikus tiap kelompok dihitung berdasarkan rumus

Federer : (n-1)(t-1)>15, dimana t menunjukkan jumlah perlakuan dan n

menunjukkan jumlah ulangan dari tiap perlakuan. Tikus dibagi menjadi 3

kelompok yang masing-masing kelompok teridiri dari 10 tikus. Penelitian

menggunakan tikus sebanyak 30 ekor terdiri dari:

1. R0 : tikus sebagai kontrol

14

2. R1 : tikus (pemberian ekstrak 5%)

3. R2 : tikus (pemberian ekstrak 10%)

Pemberian ekstrak melalui oral dicampur dengan ransum dan

berlangsung tiap hari, selama 2 minggu (14 hari). Pengambilan sampel darah

terjadi pada hari ke 0, 8, dan 15.

Tikus dipaparkan dengan polusi udara yang berasal dari asap rokok

setiap harinya selama kurang lebih 2-3 jam.

III.5 Indikator Matriks

Variable Indikator Skala Metode

Kadar MDA KadarMDA Rasio HPLC

Mikroskopik

sel hati

Keadaan sel hepatosit

Nominal Mikroskop

cahaya

III.6 Prosedur Pengumpulan Data

Kadar MDA (Malondialdehid)

Pemeriksaan kadar MDA dilakukan untuk menetapkan kadar

peroksidasi lipid dalam cairan biologis (misalnya darah). Untuk melakukan

tes ini diperlukan hmolisat darah sebanyak 0,25 mL kemudian dicampur

dengan larutan asam trikloroasetat (TCA) 10 % sebanyak 0,50 mL. Kemudian

di kocok, pusing dan ambil supernatannya. Setelah itu tambahkan larutan

TBA 0,67 % sebanyak 0,75 mL. Masukkan ke penangas mendidih selama 10

menit. Kemudian dinginkan dan baca serapan pada panjang gelombang 532

nm. Lalu untuk menghitung kadar MDA digunakan rumus sebagai berikut:

Kadar MDA = A/ε

ε= 153.000 M-1

cm-1

15

Pengumpulan Sampel Darah

Sampel darah diambil pada hari ke 0, 8 dan 15. Pada hari ke 0 dan ke

8, sampel darah diambil dari bagian ekornya. Sedangkan pada hari ke 15

sampel darah di ambil dari bagian jantung.

Pembuatan preparat mikroskopik sel hati tikus

Setelah 2 minggu diberi perlakuan, ketiga kelompok dianastesi dengan

kloroform dan kemudian dibunuh. Jaringan hati dikeluarkan dan disimpan

dalam cairan formalin 10%.

Untuk membuat preparat mikroskopik, langkah pertama yang

dilakukan adalah organ (Rattus norvegicus) difiksasi oleh larutan Bouin

selama 12-24 jam. Lalu direndam dalam alkohol 70% selama 3 kali @ 10

menit sambil dikocok. Direndam alkohol 70% overnight. Dilanjutkan

perendaman alkohol 80% 3 kali @ 10 menit sambil dikocok. Dilanjutkan pada

konsentrasi 90% dan 96% dengan perlakuan yang sama. Dilanjutkan pada

perendaman dengan alkohol absolut selama 10 menit dan dikocok. Berikutnya

direndam dengan xilol overnight. Dilakukan proses infiltrasi dengan

perbandingan xilol: parafin = 1:1 selama 30 menit pada suhu 52° C.

Dilanjutkan pemberian parafin murni pada suhu 56° C selama 12 menit.

Berikutnya dilakukan proses blocking dan sectioning dengan ukuran 5

mikron. Pita hasil potongan diletakkan pada gelas objek yang telah diberi

mayer albumin lalu diletakkan pada hot plate.

Proses berikutnya adalah pewarnaan preparat. Langkah pertama

dilakukan perendaman pada xilol selama 10 menit. Lalu xilol pada slide

diserap dengan tisu sampai kering. Berikutnya perendaman pada alkohol

absolut dengan konsentrasi 96,90,80,70,60,50,40,30(%). Lalu direndam pada

aquadest, pada hematoxylin selama 30 detik, pada aquadest kembali lalu

dicuci dengan air yang mengalir. Lalu direndam alkohol 30,40,50,60,70(%).

Selanjutnya direndam pada Eosin selama 1-2 menit. Dilanjutkan perendaman

pada alkohol 70, 80, 90, 96(%), absolut. Alkohol pada slide diserap dengan

16

tisu sampai kering. Selanjutnya direndam xilol 10 menit. Lalu diberi entelan

dan selanjutnya dilakukan pengamatan di bawah mikroskop.

Observasi Histopatologi

Observasi mikroskopik jaringan menggunakan mikroskop cahaya.

Observasi dilakukan untuk melihat gambaran sel hepatosit hati dalam satu

lapang pandang besar.

III.7 Variabel

Variabel yang digunakan dalam penelitian ini adalah :

a) Variabel bebas

Ekstrak pomegranate

b) Variable terikat

MDA

Gambaran mikroskopik sel hepatosit hati tikus.

Asupan ransum

Energi bruto

III.8 Manajemen Data

Data yang diperoleh diedit dan dikoding untuk kemudian dimasukkan

dan diolah menggunakan perangakatan lunak Statistical Program for Sosial

Sceiene (SPSS) versi 16. Analisa univariat dilakukan dengan dilakukan

dengan uji normalitas Kolmogrof-Smirnov untuk menentukan data

terdistribusi normal atau tidak. Jika data normal, diolah secara statistik

ANOVA Satu Arah untuk melihat perbedaan antar kelompok. Jika ada

perbedaan yang bermakna antar kelompok perlakuan maka di lanjutkan

dengan uji Bonferroni untuk menentukan kelompok mana yang memberikan

nilai yang berbeda secara signifikan.

17

Batas kemaknaan yang digunakan pada penelitian ini adalah 5%

dengan ketentuan : P<0,05 menunjukan kemaknaan positif dan P>0,05

menunjukan kemaknaan negatif

III.9 Batasan Operasional

9.1 Tikus

Tikus yang digunakan pada penelitian ini adalah tikus putih (Rattus

novergicus) jantan dewasa dengan strain Sprague Dawley berumur sekitar

120 hari dengan bobot rata-rata 80g/ekor

9.2 Paparan asap rokok

Tikus diberi paparan asap rokok setiap hari selama kurang lebih 2-3

jam.

9.3 Ekstrak pomegranate

Ekstral pomegranate 5% dan 10% dicampurkan kedalam ransum.

9.4 Hati tikus

Bagian hati tikus yang akan diteliti yaitu gambaran sel hepatosit pada

jaringan hati.

9.5 Kadar MDA

Kadar MDA diketahui berdasarkan hasil percobaan dari uji

peroksidasi lipid.

18

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4. 1. Asupan Ransum Yang Diberikan

Asupan ransum yang diberikan pada masing-masing kelompok tikus

pada minggu pertama dan kedua berbeda. Rata-rata asupan ransum yang

diberikan selama 2 minggu pada masing-masing kelompok dapat dilihat pada

tabel 4.1

Tabel 4.1 Rata-Rata Asupan Ransum Tikus Pada Minggu Pertama Dan Kedua

Kelompok

Tikus

Rata-Rata Asupan Ransum

Asupan Minggu 1 Asupan Minggu 2

RO 10,4 ± 0,97^ 10,5 ± 0,58*

R1 10,5 ± 0,53^ 11,3 ± 1,70*

R2 10,3 ± 0,48^ 10,7 ± 0,48*

Keterangan : R0= ransum kontrol, R1= R0+ 5% bubuk pomegranat, R2= R0+ 10%

bubuk pomegranat, ^nilai P asupan minggu 1 = 0,814 dibandingkan R0, *nilai P

asupan minggu 2 = 0,236 dibandingkan R0. Data disajikan dengan standar deviasi.

Dari tabel dapat terlihat bahwa tidak ada perbedaan bermakna pada

asupan ransum baik minggu pertama maupun minggu kedua pada ketiga

kelompok tikus. Hasil ini membuktikan bahwa pemberian ekstrak pomegranat

pada kelompok R1 dan R2 yang dicampur dalam ransum tidak mempengaruhi

asupan ransum pada ketiga kelompok tikus karena tidak ada perubahan yang

bermakna baik pada tikus yang diberi pomegranat maupun tikus yang tidak

diberi pomegranate.

19

4. 2. Kandungan Zat Makanan Pada Ransum

Pada asupan ransum yang diberikan pada masing-masing kelompok tikus

mengandung zat makanan yang berbeda jumlahnya. Kandungan zat makanan

pada ransum dari masing-masing kelompok dapat dilihat pada tabel 4.2.

Tabel 4.2 Kandungan Zat Makanan Pada Ransum Perlakuan

Kandungan zat makanan Ransum perlakuan

R0 R1 R2

Bahan kering (%) 89,35 91,50* 91,46*

Abu (%BK) 8,66 8,81^ 8,28^

Protein kasar (%BK) 18,18 17,41^ 18,47^

Serat kasar (%BK) 10,44 11,47^ 15,22^

Lemak kasar (%BK) 3,67 4,14^ 4,20^

Beta N (%BK) 48,60 56,67^ 45,29^

Energi bruto (kkal/gram) 3,88 4,04^ 4,07^

Keterangan : R0 = ransum control, R1 = R0+5% bubuk pomegranate, R2 = R0+10%

bubuk pomegranate, BK = bahan kering, *=p=0,01 dibandingkan R0,

^=p=0,00 dibandingkan dengan R0.

Dari tabel 4.2 didapatkan perbedaan yang bermakna dalam kandungan zat

makanan pada ransum perlakuan antara kelompok tikus R1 dan R2 dengan R0

baik pada asupan bahan kering (p=0,01) maupun kandungan zat makanan ransum

seperti abu, protein kasar, serat kasar, lemak kasar, beta N dan energi

bruto(p=0,00). Perbedaan asupan ini didapatkan dari kandungan ekstrak

pomegranate yang memberikan tambahan jumlah kandungan zat makanan yang

terdapat pada tabel 4.3, sehingga kelompok yang diberi tambahan ekstrak

20

pomegranate R1 dan R2 akan mendapat kan tambahan zat makanan selain dari

ransum standar yang diberikan pada ketiga kelompok tikus.

Pada penelitian diberikan ekstrak pomegranat yang kemudian dicampur

dalam ransum makanan kelompok tikus yang diberikan pomegranat 5% (R1) dan

kelompok tikus yang diberikan pomegranat 10% (R2). Kandungan zat makanan

pada bubuk pomegranat dapat dilihat pada tabel 4.3.

Tabel 4.3 Kandungan Zat Makanan Pada Bubuk Pomegranate

Kandungan zat makanan Jumlah

Bahan kering (%) 81,50

Abu (%BK) 4,21

Protein kasar (%BK) 3,96

Serat kasar (%BK) 13,71

Lemak kasar (%BK) 1,07

Beta N (%BK) 58,64

Energi bruto (kkal/gram) 3,86

Keterangan : BK = Bahan kering

Pada tabel diatas menjelaskan tentang persentase zat makanan yang terdapat

dalam ekstrak pomegranate. Sehingga pada kelompok tikus yang mendapat asupan

ekstrak pomegranate R1 dan R2 akan mendapatkan tambahan asupan zat makanan

yang terdapat pada ekstrak pomegranate selain dari asupan ransum yang diberikan

pada ketiga kelompok tikus.

21

4. 3. Energi Bruto dan Kadar Pomegranat yang Diberikan

Pada asupan ransum yang diberikan meghasilkan energi bruto yang

berbeda pada masing-masing kelompok. Selain energi bruto, pada ransum juga

diberikan bubuk pomegranate pada kelompok tikus R1 sebesar 5% dan

kelompok tikus R2 sebesar 10% dari jumlah asupan ransum yang diberikan.

Tabel 4.4 Rata-Rata Energi Bruto dan Kadar Pomegranat Dari Asupan Ransum

Selama 2 Minggu

Kelompok

Tikus

Energi bruto dari Asupan Ransum Kadar Pomegranate

Asupan Minggu

1

Asupan Minggu

2

Asupan

Minggu 1

Asupan

Minggu 2

R0 0,40 ± 0,037^ 0,40 ± 0,020* 0 ± 0⁰ 0 ± 0”

R1 0,42 ± 0,021^ 0,46 ± 0,068* 0,53 ± 0,03⁰ 0,56 ± 0,08”

R2 0,42 ± 0,019^ 0,43 ± 0,019* 1,03 ± 0,05⁰ 1,06 ± 0,05”

Keterangan : R0= ransum kontrol, R1= R0+ 5% bubuk pomegranat, R2= R0+ 10%

bubuk pomegranat, ^nilai P energi bruto asupan minggu 1 = 0,233 dibandingkan R0,

*nilai P energi bruto asupan minggu 2 = 0,054 dibandingkan R0.

⁰nilai P kadar pomegranate asupan minggu 1 = 0,000 dibandingkan R0, “nilai P

kadar pomegranate asupan minggu 2 = 0,000 dibandingkan R0. Data disajikan

dengan standar deviasi.

Dari tabel 4.4 tidak terdapat perbedaan yang bermakna antara asupan

energi bruto minggu pertama dengan asupan energi bruto pada minggu kedua

pada ketiga kelompok. Hal ini berbanding lurus dengan asupan ransum di

minggu pertama dan minggu kedua pada ketiga kelompok.

Selain itu, dari tabel diatas terdapat pula perbedaan yang bermakna

antara kadar asupan pomegranat minggu pertama dengan kadar pomegranate

minggu kedua pada ketiga kelompok.. Hal ini karenakan pada R0 tidak

22

diberikan ekstrak pomegranat, kelompok R1 diberikan pomegranat 5% dan

kelompok R2 diberikan pomegranat 10% sehingga terdapat perbedaan yang

bermakna pada kadar pomegranat pada ketiga kelompok tikus.

4. 4. Hasil Pengukuran malondialdehid (MDA)

Hasil pengukuran kadar MDA hewan uji sebelum perlakuan dan

sesudah perlakuan dapat dilihat pada tabel 4.5.

Kelompok Tikus H0 H8 H15 Nilai P

R0 354 ± 57.63 697,2 ± 92.23 1017,7

± 106.78

0.000^

R1 375,3 ± 56.03*

568,7

± 108.74* 886,4 ± 106.75*

R2 375,3 ± 62.07 ˟ 556,3 ± 74.07˟ 800,2 ± 80.58˟

Keterangan : R0 = kelompok tikus yang tidak diberi pomegranate, R1 = kelompok

tikus yang diberi pomegranate 5 %, R2 = kelompok tikus yang diberi pomegranate 10

%, H0 = pengukuran MDA awal, H8 = pengukuran MDA hari ke-8, H15 =

pengukuran MDA hari ke-1, ^Nilai P dari Uji Anova, *P = 0.022 R1 dibandingkan

dengan R0 dengan uji Bonferoni, ˟P = 0.000 R2 dibandingkan dengan R0 dengan uji

Bonferoni. Data disajikan dengan standar deviasi.

Dari diagram rata-rata hasil pengukuran kadar MDA pada hari ke-0, ke-8 dan

hari ke-15 didapatkan peningkatan pada ketiga kelompok tikus. Tetapi peningkatan

paling tinggi terjadi pada kelompok tikus kontrol, diikuti oleh kelompok tikus dengan

pomegranate 5% dan kelompok tikus dengan pemberian pomegranate 10%..

Peningkatan kadar MDA pada darah disebabkan oleh peningkatan kadar

peroksidasi lipid akibat radikal bebas. Oleh karena itu peningkatan kadar MDA

menunjukkan banyaknya radikal bebas. Paparan asap rokok merupakan salah satu

sumber radikal bebas bagi tubuh. Oleh karena itu jika tubuh sering terpapar oleh asap

rokok maka radikal bebas dalam tubuh akan bertambah banyak yang kemudian

menyebabkan peningkatan kadar MDA dalam tubuh. Hal ini sesuai dengan hasil

23

percobaan yang telah dilakukan. Pada kelompok tikus R0 yang dipaparkan asap

rokok tanpa pemberian ekstrak pomegaranat, terdapat peningkatan kadar MDA yang

lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok tikus R1 dan R2 yang diberikan ekstrak

pomegranat.

Peningkatan kadar MDA akibat radikal bebas dapat dicegah dengan

pemberian antioksidan. Antioksidan akan membantu menetralisir radikal bebas dan

mencegah kerusakan seluler sehingga tidak terjadi proses peroksiadi lipid yang

kemudian mencegah kadar MDA meningkat. Hal ini sesuai dengan hasil percobaan

yang menunjukkan adanya perbedaan perubahan kadar MDA yang bermakna antara

kelompok tikus yang tidak diberi intervensi pomegranat dengan kelompok tikus yang

diberi intervensi pomegranat 5% dan 10%.

Dalam penelitian lain yang dilakukan oleh Turk tahun 2008 selama 7 minggu

tentang pengaruh pemberian jus pomegranat terhadap aktivitas antioksidan juga

didapatkan penurunan dari kadar MDA. Selain itu juga didapatkan peningkatan

aktivitas enzim antioksidan seperti glutation, glutation peroksidase dan katalase.

4.5 Gambaran mikroskopik tikus

Setelah 2 minggu ketiga kelompok tikus diberikan perlakuan yang berbeda,

kemudian diambil jaringan hati tikus untuk mengamati perubahan yang terjadi pada

sel hepatosit secara mikroskopik dengan mikroskop cahaya.

24

Gambaran mikroskopik sel hepatosit hati kelompok tikus kontrol (R0) dapat dilihat

pada gambar 4.1

Gambar 4.1 Gambaran mikroskopik sel hepatosit hati tikus kelompok

kontrol (R0) dengan perbesaran 40x10

Dari gambaran mikroskopik hati tikus tanpa perlakuan (R0) tidak didapatkan

adanya reaksi inflamasi pada sel hepatosit hati tikus pada kelompok R0.

25

Gambaran mikroskopik dari jaringan hati pada kelompok tikus yang diberikan

ekstrak pomegranat 5% (R1) dapat dilihat pada gambar 4.2

Gambar 4.2 Gambaran mikroskopik sel hepatosit hati tikus dengan

pomegranate 5 % dengan perbesaran410x10

Dari gambaran mikroskopik hati tikus dengan pemberian ekstrak pomegranat

5% (R1) tidak didapatkan adanya reaksi inflamasi pada sel hepatosit hati tikus pada

kelompok R1.

26

Gambaran mikroskopik dari jaringan hati pada kelompok tikus yang diberi

ekstrak pomegranat 10% (R2) dapat dilihat pada gambar 4.3

Gambar 4.3 Gambaran mikroskopik sel hepatosit hati tikus dengan

pomegranate 10% dengan perbesaran 40x10

Dari gambaran mikroskopik hati tikus dengan pemberian ekstrak pomegranat

10% (R2) tidak didapatkan adanya reaksi inflamasi pada sel hepatosit pada kelompok

R2.

27

Pada pemeriksaan mikroskopik hati tikus dengan mikroskopik cahaya tidak

ditemukan adanya reaksi inflamasi sel hepatosit hati tikus baik pada kelompok

kontrol maupun kelompok yang diberikan ekstrak pomegranat 5% dan 10%.

Pada penelitian yang dilakukan oleh Czekaj (2007) tentang Perubahan pada

paru, plasenta, hati dan ginjal tikus yang sedang hamil yang diberi paparan asap

rokok kretek didapatkan peningkatan inflamasi pada sel hepatosit serta peningkatan

jumlah apoptosis pada sel hepatosit tikus. Hal ini mungkin terjadi karena perbedaan

waktu dalam melakukan penelitian. Penelitian oleh Czekaj dilakukan selama 3

minggu dan diberi paparan asap rokok kretek sekitar 5-6 jam perhari sedangkan

penelitian ini dilakukan selama 2 minggu dan diberi paparan asap rokok sekitar 1-2

jam perhari. Sehingga belum memperlihatkan adanya perubahan pada jaringan hati

tikus secara mikroskopik.

28

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 KESIMPULAN

Berdasarkan hasil penelitian ini, dengan melihat kadar MDA dan gambaran

mikroskopik dapat disimpulkan bahwa:

1. Ekstrak pomegranat berpengaruh terhadap pencegahan peningkatan kadar

MDA secara signifikan antara kelompok kontrol dan kelompok dengan

intervensi pomegranat (P<0,05). Rata-rata kadar MDA terendah pada hari

awal adalah kelompok R0 (354±57,63), hari ke 8 adalah kelompok R2

(556±74,07), hari ke 15 adalah R2 (800±80,58).

2. Pada pemeriksaan mikroskopik hati tidak didapatkan adanya proses inflamasi

pada sel hepatosit hati tikus.

5.2 SARAN

Dari hasil penelitian yang diperoleh ternyata masih perlu dilakukan

penelitian lebih lanjut untuk mendapatkan gambaran yang lebih jelas tentang

pengaruh pemberian ekstrak pomegranat terhadap kadar MDA dan gambaran

hati tikus, antara lain:

1. Meneliti tentang dosis minimal pomegranat yang diberikan untuk mencegah

peningkatan kadar MDA dan perubahan gambaran mikroskopik hati.

2. Menambah masa perlakuan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak

pomegranat dan paparan asap rokok terhadap perubahan gambaran

mikroskopik hati tikus.

29

DAFTAR PUSTAKA

Gartner, Hiatt. (2007) Color Textbook of Histology. 3rd ed. Philadephia :

Saunders/Elsevier. 1-3

Guyton, Arthur.C, John E.Hall. (2007) Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi

11.Jakarta : EGC, 1049-1054

Hahn DB, Payne WA. (2003) Focus on Health. Ed 6. New York: McGraw-Hill, 213

Hargono D. (1989) Vademekum Bahan Obat Alam. Departemen Kesehatan Republik

Indonesia, 66-68.

http://www.americanheart.org/presenter.jhtml?identifier=4452 diakses pada hari

kamis, 9 juli 2009

Insel PM, Roth WT. (2004) Core Concepts in Health. Ed 9. New York: McGraw-Hill,

169-175.

Junquiera LC, Carneiro J. (2005) Basic Histology text & atlas. Ed 11 .New York:

McGraw-Hill.

Kumar V, Abbas AK, Fausto N. (2005) Pathologic Basis Of Disease. ed 7.

Philadelphia : Elsevier Saunders.

Louba, Ben Nun. (2007) What Are the Medical Properties of pomegranate?. J of

Chinese clinical med. 2:9.

P. Czekaj, A. Palasz, T. Lebda-WybornyG, Nowaczyk-Dura, W. Karczewska, E.

Florek, M.Kamin ski.(2002) Morphological changes in lungs, placenta, liver

and kidneysof pregnant rats exposed to cigarette smoke. Diakses 6 july 2002.

30

Radikal Bebas Pada Eritrosit dan Leukosit

www. Cermin Dunia Kedokteran.com diakses : Sabtu, 18 juli 2009

Santoso, Singgih. (2009) Panduan lengkap menguasai statistik dengan SPSS 17.

Jakarta: Kompas Gramedia, 184-6, 277-88.

Sherwood, Lauralee. (2001) Fisiologi manusia dari sel ke sistem. Ed.2. Jakarta: EGC,

412-15.

Soewoto H . (2001) Biokimia Eksperiman Laboratorium. Jakarta: Widya medika,

153.

Syaputro, R Agung. Survey tentang Kadar Malondialdehid (MDA) Darah sebagai

Indikator Terjadinya Stres Oksidatif.

(http://dalilskripsi.com/content/ view/10/ ). Diakses 27 Juli 2009. Abstract.

Turk G, Sonmez M, Aydin M, Yuce A, Gur S, Yuksel M, Aksu E, Aksoy H.(2008)

Effect of pomegranate juice consumption on sperm quality, spermatogenic cell

density, antioxidant activity and testosterone level in male rats. Clinical

Nutrition. 27(2), 289-296. abstract

Williams MH. (2005) Nutrition for Health, Fitness, and Sport. Ed 7. New York:

McGraw-Hill, 251.

Wiryowidagdo, Sumali. Delima (Punica granatum L.) Obat Tradisional Indonesia.

Online (http://www.isfinational.or.id/pt-isfi-penerbitan/126/474 delima-

punica granatum-l-obat-tradisional-indonesia.html). diakses 06 Juli 2009.

www.pomegreat.com/The_Health_Benefits_of_Pomegranate_Juice.pdf

diakses Minggu, 26 Juli 2009

31

Zafar R, Nahid A, Arivarasu NA, Sangeetha R, Meenakshi S, Tariq MH. (2009)

Polyphenolrich pomegranate fruit extract (POMx) suppresses PMACI

induced expression of pro-inflammatory cytokines by inhibiting the activation

of MAP Kinases and NF-κB in human KU812 cells. Journal of Inflammation.

6:1.abstract