EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid, [CH2N(CH2CO2H)2]2) adalah antikoagulan yang paling

umum dan banyak digunakan untuk parameter pemeriksaan hematologi. EDTA umumnya tersedia

dalam bentuk garam sodium (natrium) atau potassium (kalium), EDTA dalam bentuk garam

Kalium 15 kali lebih larut dalam air dibandingkan dalam bentuk garam Natrium. EDTA mencegah

koagulasi dengan cara mengikat atau mengkhelasi kalsium, sehingga EDTA memiliki keunggulan

dibanding dengan antikoagulan yang lain, yaitu tidak mempengaruhi sel-sel darah, sehingga ideal

untuk pengujian hematologi, seperti pemeriksaan hemoglobin, hematokrit, KED, hitung lekosit,

hitung trombosit, retikulosit, apusan darah, dsb. Sedangkan untuk pemeriksaan mikrobiologi,

antikoagulan EDTA tidak baik untuk digunakan sebagai pengawet sampel karena dapat

membunuh kuman yang terdapat di dalam darah.

Ada tiga macam EDTA, yaitu dinatrium EDTA (Na2EDTA), dipotassium EDTA (K2EDTA) dan

tripotassium EDTA (K3EDTA). Na2EDTA dan K2EDTA biasanya digunakan dalam bentuk kering,

sedangkan K3EDTA biasanya digunakan dalam bentuk cair. Dari ketiga jenis EDTA tersebut,

K2EDTA adalah yang paling baik dan dianjurkan oleh ICSH (International Council for

Standardization in Hematology) dan CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute). Walaupun

demikian tetapi sampai saat ini Na2EDTA dalam bentuk serbuk masih banyak digunakan di

berbagai laboratorium. Umumnya untuk memudahkan pengukuran maka dibuat menjadi larutan

10%.

Penggunaan EDTA biasanya pada saat darah dimasukkan ke dalam tabung, segera lakukan

pencampuran/homogenisasi dengan cara membolak-balikkan tabung dengan lembut sebanyak 6

kali untuk menghindari penggumpalan trombosit dan pembentukan bekuan darah.

Penggunaan disodium EDTA (Na2EDTA) biasanya dengan konsentrasi 1,4 – 2,0 mg/ml darah,

dipotassium EDTA (K2EDTA) dengan konsentrasi 1,5 – 2,2 mg/ml darah, dan tripotassium EDTA

(K3EDTA) dengan konsentrasi 1,5 - 2.,2 mg/ml darah. Penggunaannya harus tepat. Bila jumlah

EDTA kurang, darah dapat mengalami koagulasi. Sebaliknya, bila EDTA berlebihan, eritrosit

mengalami krenasi, trombosit membesar dan mengalami disintegrasi yaitu trombosit membengkak

sehingga tampak adanya trombosit raksasa yang pada akhirnya mengalami fragmentasi

membentuk fragmen-fragmen yang masih dalam rentang pengukuran trombosit oleh alat hitung

sel otomatis sehingga dapat menyebabkan peningkatan palsu jumlah trombosit.

Padahal saat ini EDTA lazimnya ditambahkan menggunakan pipet Pasteur. Hal ini menyebabkan

ada pemakaian sejumlah EDTA yang berlebih karena 1 tetes pipet Pasteur = 50 μl sedangkan

untuk darah sebanyak 3 ml hanya dibutuhkan 4,5 mg serbuk EDTA atau 45 μl dalam bentuk

larutan 10 %. Sementara itu cara pemipetan yang seharusnya tegak lurus dan dalam keadaan

kosong masih sering diabaikan oleh petugas laboratorium serta ketepatan takaran EDTA dan

volume darah sangat tergantung keterampilan dan ketelitian petugas laboratorium sehingga

variasi hasil yang ditimbulkan akibat ketidaktepatan takaran EDTA dan volume darah sangat

mungkin terjadi. Salah satu cara mengurangi kemungkinan terjadinya kesalahan adalah dengan

menggunakan pipet yang volume tetesannya tepat sesuai dengan takaran EDTA yang diperlukan.

Pipet mikro adalah salah satu solusinya. Volume pipet mikro memakai satuan mikroliter dan

tersedia dalam ukuran mulai dari 1 sampai 500 μl.

Dewasa ini tersedia tabung vacutainer yang sudah berisi antikoagulan EDTA. Tabung EDTA

tersedia dalam bentuk tabung hampa udara (vacutainer tube) dengan tutup lavender (purple) atau

pink seperti yang diproduksi oleh Becton Dickinson. EDTA pada tabung vakum biasanya berupa

K3EDTA yang mempunyai stabilitas yang lebih baik daripada garam EDTA yang lain karena

mempunyai pH mendekati pH darah. Namun demikian, saat ini tabung EDTA yang berisi larutan

K3EDTA sudah tidak diproduksi lagi, penggunaannya digantikan oleh tabung EDTA yang berisi

serbuk K2EDTA, karena direkomendasikan oleh International Council for Standardization in

Haematology. Penggunaan tabung vacutainer ini pada pengambilan darah vena tidak perlu

menggunakan spuit dan kondisi vakum mengontrol jumlah darah yang masuk ke dalam tabung

sampai volume tertentu sehingga perbandingan antara takaran antikoagulan dengan volume

darah dapat dipertanggungjawabkan.

Walaupun demikian, pada penggunaan EDTA vacutainer juga dapat terjadi peningkatan palsu

jumlah trombosit misalnya sebelum tabung vakum berhenti mengisap sudah dilakukan

pencabutan jarum vacutainer sehingga perbandingan antara takaran antikoagulan dan volume

darah sudah tidak tepat lagi. Tabung vacutainer merupakan tabung yang direkomendasikan oleh

National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) untuk pemeriksaan hematologi

karena mempunyai ketepatan perbandingan antikoagulan dan darah yang tepat dibandingkan

cara konvensional, namun demikian memerlukan biaya yang lebih mahal. Dari segi ekonomi

harga EDTA vacutainer per spesimen 4 kali harga EDTA konvensional per spesimen.