Daya Racun Pestisida

7/21/2019 Daya Racun Pestisida

1/15

Toto Himawan Penilaian Daya Racun Insektisida Page 1

PENILAIAN DAYA RACUN INSEKTISIDA

A. Penilaian Daya Racun

Daya racun insektisida (atau racun lain) terhadap binatang tertentu dinyatakan dengan

nilai LD50 ("median lethal dose"). Nilai tersebut menyatakan jumlah racun persatuan berat

yang dapat mematikan 50% dari sejumlah populasi spesies binatang yang digunakan dalam

pengujian. LD50 biasanya dinyatakan dengan satuan mg racun per kg berat badan binatang uji

(mg/kg), mg per binatang uji (misal mg/lalat betina). Dalam beberapa kasus, dosis secara tepat

yang diberikan pada serangga tak dapat dideterminasi, tetapi konsentrasi insektisida pada atau

dalam media yang justru memungkinkan dapat ditentukan, sehingga dalam hal ini daya racundinyatakan dengan nilai LC50 ("median lethal concentration"). Sebagai contoh, daya racun

insektisida terhadap larva nyamuk atau ikan umumnya dinyatakan sebagai konsentrasi

insektisida dalam air yang dapat mematikan setengah dari populasi binatang uji yang

diperlakukan selama waktu tertentu.

Batasan LT50 seringkali juga digunakan, yaitu menyatakan waktu yang diperlukan

untuk dapat mematikan 50% populasi binatang uji pada dosis atau konsentrasi tertentu. Cara ini

memerlukan binatang uji yang relatif sedikit dan oleh karena itu sering digunakan untuk

pengujian di lapang, yang kemungkinan untuk mendapatkan binatang uji dalam jumlah yang

cukup, relatif terbatas (misal uji standard WHO untuk koloni sejenis lipas). Kriteria atau

batasan lain yang dianggap lebih penting untuk menilai efisiensi insektisida dibandingkan

persentase kematian adalah persentase knockdown yang dinyatakan dengan nilai KD50, KC50,

atau KT50. Dalam hal tertentu, nilai LD atau KD bukan merupakan kriteria yang sesuai untuk

menyatakan efisiensi substansi yang diuji. Misalnya, dalam pengujian kemosterilan tujuannya

bukan mematikan serangga uji tetapi memandulkan serangga tersebut tanpa mengurangi

kekuatannya. Untuk hal tersebut, efisiensi substansi kimia diukur berdasarkan pengaruhnya

terhadap kesuburan dan keperidian serangga uji. Besaran yang digunakan untuk menyatakan

hal tersebut adalah ED50 ("median effective dose") atau EC50 ("median effective

concentration").

B. Uji Daya Racun Insektisida terhadap Serangga dan Invertebrata lain

Perlakuan untuk menguji daya racun insektisida terhadap binatang uji ada beberapa

cara. Cara yang umum digunakan untuk serangga adalah :


2/15


Topical application (perlakuan setempat). Pada cara ini insektisida dilarutkan dalam

bahan yang relatif tidak beracun dan yang mudah menguap, seperti aseton, kemudian

diberikan secara kontak pada bagian tertentu dari permukaan tubuh serangga. Dalam hal ini

biasanya digunakan beberapa macam konsentrasi insektisida dengan jumlah pelarut tetap,

dengan maksud untuk menjaga agar daerah kontak dan juga pengaruh pelarut tetap.

Kelebihan cara ini yaitu hasil yang diperoleh dapat digunakan sebagai petunjuk yang

dipercaya mengenai daya racun kontak relatif suatu insektisida terhadap binatang tertentu.

Kelemahannya yaitu tidak memberikan petunjuk yang cukup mengenai jumlah insektisida

yang sebenarnya memasuki tubuh binatang uji.

Injection method (metode injeksi). Cara ini digunakan bila diperlukan data jumlah

insektisida secara tepat yang terdapat dalam tubuh binatang uji. Disini insektisida biasanya

dilarutkan dalam bahan yang bersifat sebagai "carrier" (pembawa), seperti propilen glikol

atau minyak kacang, dan diinjeksikan ke dalam "body cavity" (rongga tubuh). Untuk

serangga, biasanya dilakukan pada "abdominal sterna" (daerah antar ruas abdomen), di luar

garis tengah membujur agar tidak merusak tali syaraf abdomen. Jarum ditahan selama

beberapa saat kemudian ditarik pelan-pelan untuk mencegah pendarahan akibat tekanan

internal.

Dipping method (metode celup). Beberapa serangga memiliki cara hidup atau ciri

morfologi tertentu yang tidak sesuai diperlakukan dengan cara-cara baku diatas, sebagaicontoh larva Diptera. Larva tersebut tidak tahan terhadap pelukaan kulit yang ditimbulkan

oleh metode injeksi, sedangkan metoda perlakuan setempat tidak dapat memberikan insektisida

dalam jumlah yang cukup. Untuk kasus-kasus semacam ini maka digunakan metode celup.

Larva dipegang dengan forsep dan dicelupkan dalam adukan jadi insektisida. Adukan jadi

insektisida disini berupa suspensi dalam pelarut seperti aseton atau metil-etil keton atau berupa

emulsi dalam bahan pengemulsi seperti Triton X-100. Hasil pengujian dalam metode celup

biasanya dinyatakan sebagai LC50. LC50 disini mempunyai arti yang agak berbeda dari ujilarva nyamuk, karena binatang uji disini dipindahkan dari adukan jadi insektisida (tidak tetap

tercelup). Dalam metode ini, penentuan kisaran kepercayaan yang tepat merupakan hal

penting. Sebagai contoh, persentase kematian biasanya tidak meningkat setelah mencapai titik

tertentu akibat rendahnya kelarutan insektisida atau keterbatasan jumlah yang dapat

disuspensikan.

Contact/Residual Method (metode kontak/residu). Pada cara ini insektisida dalam

pelarut tertentu diaplikasikan pada wadah atau panel dan kemudian serangga dibiarkan

berjalan-jalan atau beristirahat pada tempat tersebut. Pelarut diuapkan dengan cara memutar


3/15


wadah atau panel sehingga insektisida tersebar merata pada seluruh permukaan. Hasil

pengujian dengan metode ini mempunyai hubungan linier dengan perlakuan setempat. Nilai

LD50 kontak kira-kira 20 kali nilai LD50 perlakuan setempat. Namum demikian, beberapa

insektisida seperti DDVP menunjukkan penyimpangan dari hubungan ini. Insektisida

DDVP diduga mempenetrasi tubuh serangga dalam bentuk uap dan bahkan dengan metode

kontak insektisida dapat terambil dalam jumlah relatif besar tanpa menimbulkan pengaruh yang

nyata pada serangga.

Disamping metode di atas, terdapat beberapa metode lain, yang didasarkan pada cara

pengendalian di lapang dan cara hidup serangga. Sebagai contoh, metoda celup daun untuk

pengujian terhadap sejenis tungau ( Tetranychus sp.), metode fumigasi untuk hama

gudang, dan metode pemberian makanan untuk berbagai jenis larva. Pada ketiga metoda

ini, hasil pengujian bersifat relatif dan hasilnya dibandingkan dengan efikasi insektisida yang

telah diketahui untuk menilai potensi suatu bahan kimia sebagai insektisida baru.

C. Metoda Pendugaan LD50

Kepekaan suatu populasi serangga terhadap bahan racun tertentu dapat dinilai dengan

satuan probit dari persentase kematian yang dipetakan terhadap logaritma dosis. Dalam

proses-proses biokimia dan fisiologi, berdasarkan percobaan, diketahui bahwa peningkatan yang

sama dalam pengaruh terjadi bila rangsangan (stimulus) ditingkatkan secara logaritmik, yaitudengan "proporsi" yang tetap (bukan jumlah yang tetap). Bila logaritma dipetakan

terhadap probit dari persentase ke-matian maka akan menghasilkan garis lurus.

Kepekaan individu suatu populasi serangga terhadap insektisida, diharapkan akan

menunjukkan variasi yang cukup besar. Oleh karena itu perlu adanya suatu cara yang dapat

dipercaya untuk menyatakan efektivitas suatu insektida terhadap populasi serangga secara

keseluruhan. Hal ini sangat penting misalnya apabila seseorang hendak menentukan apakah di

lapang telah timbul populasi yang resisten terhadap insektisida dengan caramembandingkan kepekaannya dengan populasi serangga dari tempat lain. Seperti halnya

sebaran lain mengenai keragaman individu dalam contoh populasi homogen, kepekaan

serangga terhadap insektisida diharapkan membentuk kurva "sebaran normal". Menurut

sebaran normal, jumlah individu yang memberikan tanggapan (misal kematian akibat

peracunan akut) pada LD50 diharapkan paling besar, dan jumlah individu yang mempunyai

tingkat ketahanan atau kepekaan tinggi diharapkan kecil.

Dalam uji daya racun biasa, persentase individu yang bertahan hidup (atau yang mati)

dalam populasi serangga yang diuji pada selang waktu atau dosis tertentu lebih mudah


4/15


ditentukan dari pada jumlah (atau persentase) individu yang tergolong dalam kisaran kepekaan

tertentu. Bila persentase yang bertahan atau kematian (data kepekaan secara kumulatif)

dipetakan pada grafik dosis kematian, tanggapan dari populasi serangga (yang seragam dan

menyebar normal) terhadap insektisida akan membentuk kurva sigmoid yang simetris.

Pendugaan LD50 dapat dilakukan dengan metoda grafik. Metoda ini digunakan antara

lain oleh WHO dalam rangka pengendalian malaria. Dalam kebanyakan uji laboratorium,

metoda grafik cukup memadai. Namun demikian, dalam uji yang memerlukan ketelitian yang

lebih besar, LD50 dapat dihitung berdasarkan pendugaan matematik, misalnya dengan

analisa probit.

1. Metoda grafik

Langkah-langkah dalam pendugaan LD50 (atau LC50, dll) dengan menggunakan

metoda grafik adalah sebagai berikut :

Tentukan harga logaritma dari tiap nilai konsentrasi (dosis, atau waktu, dll.) yang

digunakan. Masing-masing persentase kematian dicatat, kemudian dikonversikan/transformasi

ke nilai probit (harga empirik probit dari tabel Fisher dan Yates). Petakan harga-harga tersebut

pada kertas grafik, sehingga didapat garis lurus.

Metoda untuk mendapatkan nilai LD50 secara grafik akan berbeda bila didapatkan

kematian diantara kontrol. Dalam kasus yang demikian maka data harus dianalisa terlebih

dahulu dengan memperhatikan nilai kematian yang disesuaikan (dikoreksi dengan menggunakan

"rumus Abbott") :

X - Y X = persen serangga yang masih x 100 hidup pada kontrol X Y = persen serangga yang masih hidup pada perlakuan

rumus tersebut dapat digunakan bila kematian kontrol kecil (kurang dari 20%) atau dalam

pengujian digunakan serangga uji dalam jumlah besar.

Bila nilai-nilai tersebut sudah dipetakan pada kertas grafik, garis regresi probit dapat

ditarik (digambarkan) melewati titik-titik data yang melewati grafik (dengan mengabaikan

nilai probit untuk kematian 0% dan 100%). Dari garis lurus yang diperoleh nilai LD50 dapat

ditentukan.


5/15


Goodness of Fit (X2 test) dan Confidence Limit . Kesesuaian garis regresi probit

terhadap data yang diperoleh dapat diuji dengan uji-X2, sehingga dengan metoda ini

(kesesuaian garis) akan meningkatkan ketepatan dalam pendugaan nilai LD50.

Perhitungannya sebagai berikut :

Tentukan perbedaan antara persentase kematian sebenarnya dengan persentase kematian

harapan (pada garis) dari grafik probit - log dosis pada masing-masing taraf dosis atau

konsentrasi. Hitung nilai d untuk masing-masing taraf dosis atau konsentrasi dengan rumus:

(% kematian sebenarnya - % kematian harapan) 2

d = (% kematian harapan) x (100 - % kematian harapan)

Hitung 2 dengan rumus :

2 = ( S d) x ( S rata-rata serangga per dosis/konsentrasi)

a) Nilai 2 mengukur kesesuaian garis regresi probit terhadap titik-titik data yang diperoleh.

Makin kecil nilai 2, makin sesuai garis yang diperoleh. Nilai 2-hitung dibandingkan

dengan 2-tabel dengan P(0,05) atau P(0,01). Dengan derajat bebas (n-2) dimana n

adalah jumlah taraf dosis/konsentrasi (tidak termasuuk kontrol). Bila 2-hitung lebih

besar dari pada 2-tabel, garis regresi probit tidak sesuai dengan data sebenarnya. Garis

baru perlu dibuat untuk memperkecil nilai d, dan 2 dihitung kembali. Langkah ini

diulang-ulang sampai nilai 2-hitung lebih rendah dari 2-tabel. Jika data tidak seragam,

kadang-kadang tidak dapat diperoleh garis yang memberikan nilai 2-hitung lebih kecil

dari 2-tabel. Dalam hal tesebut garis yang memberikan nilai 2 terkecil yang digunakan.

Bila garis regresi yang sesuai telah diperoleh, maka nilai LD50 dapat ditentukan dari

garis tersebut.Prosedur menghitung selang kepercayaan (confidence limit) dengan probabilitas 95%

(atau 99%) untuk LD50 adalah sebagai berikut :

Tentukan dari garis regresi probit, nilai LD16 dan LD84

Hitung S, dengan rumus:

LD84/LD50 + LD50/LD16

2S =


6/15


Dari data sebenarnya, tentukan N = jumlah serangga keseluruhan yang diuji pada taraf dosisantara LD16 dan LD84. Hitung faktor (f) untuk menentukan batas atas dan batas bawahdari selang kepercayaan dengan probabilitas 95% bagi LD50 dengan rumus:

Untuk selang kepercayaan dengan probabilitas 99%, gunakan rumus:

b) Tentukan batas atas dan batas bawah dari selang kepercayaan dengan rumus:

Batas atas = LD 50 sebenarnya x f 95 Batas bawah = LD 50 sebenarnya x f 99

2. Analisis Probit

Langkah-langkah dalam pendugaan LD50 (atau LC50, dll) dengan menggunakan

analisis probit adalah sebagai berikut :

1) Masukkan nilai dosis (konsentrasi atau waktu, dll) dalam kolom (i) pada Tabel 1 dengan

urutan dari yang terbesar sampai yang terkecil, termasuk kontrol bila ada.

2) Masukkan jumlah keseluruhan serangga yang digunakan pada tiap dosis dalam kolom (ii),

masukkan persen kematian pada tiap dosis dalam kolom (iii) dengan ketelitian sampai

2 angka desimal (Catatan : mulai kolom (iv) dan seterusnya, untuk dosis kontrol tidak ada

masukan lagi; cantumkan tanda (-) dalam dosis kontrol dari kolom (iv) sampai kolom

(xvi).

3) Hitung persentase kematian terkoreksi untuk memperhitungkan kematian kontrol (atau

kriteria lain , misalnya "knockdown") dengan menggunakan rumus "Abbott" :

X - Y X = persen serangga yang masih ------- x 100 hidup pada kontrol X Y = persen serangga yang masih hidup pada perlakuan atau :

Po - Pc Pt = % kematian terkoreksi Pt = ----------- x 100 Po = % kematian teramati 100 - Pc Pc = % kematian kontrol

3,641 log f 99 = log S

N


7/15


4) Masukkan % kematian terkoreksi dalam kolom (iv). Bila tidak ada kematian kontrol

(kematian kontrol = 0%), maka masukan untuk kolom (iv) sama dengan kolom (iii).

5) Hitung nilai x = logaritma tiap nilai dosis dalam kolom (i), kecuali dosis kontrol, dan

masukkan dalam kolom (v), dengan ketelitian sampai 4 angka desimal. Bila diantara nilai

logaritma tersebut ada yang bertanda negatif, maka tambahkan bilangan bulat tertentu

(I) sehingga x lebih besar dari nol (dalam hal ini x = log dosis + I). Untuk penghitungan

nilai x dapat juga digunakan logaritma alamiah (ln dosis atau log e dosis). Penggunaan

logaritma alamiah akan memberikan "skala yang lebih panjang" dari pada logaritma biasa.

6) Dengan menggunakan Tabel Transformasi Probit, perkiraan probit empirik untuk tiap nilai

dalam kolom (iv) dan masukkan dalam kolom (vi) dengan 2 angka desimal. Untuk nilai

pecahan dari % kematian, tentukan interpolasi linier diantara nilai-nilai probit yang

tercantum dalam Tabel 2, terutama untuk nilai probit yang tinggi dan rendah. Misalnya

nilai probit untuk kematian 66,667% mendekati 5,43. Lihat "catatan" setelah langkah (8).

7) Dengan menggunakan kertas grafik, petakan nilai-nilai x (=log dosis atau log dosis + I) dan

probit empirik yang bersangkutan pada grafik; log dosis sebagai sumbu-x dan probit

empirik sebagai sumbu-y (gunakan skala sekurang-kurangnya 2 cm persatuan probit untuk

sumbu-y, dan skala sumbu-x yang akan menghasilkan garis dengan sudut sekitar 45 o , yaitu

jarak antara nilai x tertinggi dan terendah pada sumbu-x lebih kurang sama dengan jarak

antara probit empirik tertinggi dan terendah pada sumbu-y). Tarik garis lurus melewati

titik-titik data yang diperoleh pada grafik (tariklah garis sementara ini setepat mungkin;

titik-titik dengan nilai probit terendah biasanya kurang penting, sesuaikan garis melewati

titik-titik dibagian tengah dan bagian atas grafik). Lihat catatan setelah langkah (8).

8) Tariklah garis vertikal dari tiap titik data menuju garis lurus yang diperoleh pada

langkah (7). Nilai Y (probit harapan) dapat ditentukan dari garis lurus untuk tiap nilai x.

Masukkan probit harapan (Y) dalam kolom (vii), sampai 2 angka desimal.

Catatan : Bila % kematian terkoreksi tertinggi dalam kolom (iv) adalah 100%, maka titik ini tak dapat dipetakan pada grafik; probit empirik untuk kematian 100% tidak ada. Dalam hal ini : (a) anggap adanya nilai probit empirik khayal untuk nilai x yang bersangkutan dan

sesuaikan garis yang dibuat dengan titik tersebut, (b) cantumkan tanda (-) untuk probit empirik tersebut dalam kolom (vi). Namun demikian, probit harapan untuk kematian 100%dapat diperkirakan dari garis yang diperoleh. Tarik garis vertikal dari nilai x menuju garis

pada grafik dan nilai Y yang bersangkutan dapat ditentukan. Bila lebih dari satu taraf dosis yang menyebabkan kematian terkoreksi 100%, cara seperti di atas dapat digunakanuntuk menentukan probit harapan untuk semua taraf dosis tersebut.


8/15


9) Untuk tiap nilai probit harapan (Y) dalam kolom (vii), hitung probit pencari (y) dengan

rumus:

y = probit pencari p = % kematian terkoreksi

yo dan k dapat dibaca pada Tabel 3, untuk tiap nilai Y yang bersangkutan. Masukkan nilai

probit pencari (y) dalam kolom (viii). Lihat Catatan setelah langkah (10).

10) Dengan menggunakan Tabel yang sama (Tabel 3), tentukan koefisien pembobot untuk

nilai probit harapan yang bersangkutan. Masukkan nilai koefisien pembobot ini dalam

kolom (ix).

Catatan :Tabel 3 hanya mencantumkan faktor yo, p dan koefisien pembobot untuk nilai Y dengan

penambahan sebesar 0,1 satuan (satu angka desimal). Nilai yo, p dan koefisien pembobot untuk nilai Y dengan 2 angka desimal dapat ditentukan dengan interpolasi linier.

Penggunaan interpolasi ini dapat meningkatkan ketepatan pendugaan persamaan garisregresi. Peningkatan ketepatan ini tampak nyata terutama bila respon dosis tidak kuat (kemiringan garis tidak besar).

11) Gandakan tiap koefisien pembobot (ix) dengan jumlah serangga yang digunakan pada

dosis tersebut kolom (ii) dan masukkan hasilnya (bobot-w) dalam kolom (x).

12) Gandakan tiap nilai x {kolom (v)} dengan nilai w yang bersangkutan {kolom (x)} dan

masukkan hasilnya dalam kolom (xi) sampai 4 angka desimal.

13) Gandakan tiap nilai probit pencari y {kolom (viii)} dengan nilai w yang bersangkutan

{kolom (x)} dan masukkan hasilnya dalam kolom (xii) sampai 4 angka desimal.

14) Gandakan tiap nilai x {kolom (v)} dengan nilai wx yang bersangkutan {kolom (xi)} dan

masukkan hasilnya dalam kolom (xiii) sampai 4 angka desimal.

15) Gandakan tiap nilai probit pencari y {kolom (viii)} dengan nilai wy yang bersangkutan

{kolom (xii)} dan masukkan hasilnya dalam kolom (xii) sampai 4 angka desimal.

16) Gandakan tiap nilai probit pencari y {kolom (viii)} dengan nilai wx yang bersangkutan

{kolom (xi)} dan masuk-kan hasilnya dalam kolom (xv) sampai 4 angka desimal.

17) Hitung: S w, S wx, S wx2, S wy, S wy2, dan S wxy

18) Hitung:

S wx S wy = ; =

S w S w

y = yo + k.p.

x y


9/15


19) Catat n = jumlah dosis uji (tidak termasuk kontrol), yaitu banyaknya nilai x.

20) Hitung b (arah garis regresi) dengan rumus :

S wxy - S wy b =

S wx2 - S wx21) Hitung a (perpotongan garis regresi dengan sumbu y) dengan rumus:

_ _ a = y - b.x

22) Persamaan garis regresi sementara adalah:

y = a + bx

23) Untuk tiap nilai x dalam kolom (v) hitung nilai y yang bersangkutan dari persamaan

regresi sementara. Masukkan probit regresi ini (y) dalam kolom (xvi) dengan pembulatan

sampai 2 desimal.24) Bandingkan nilai y {kolom (xvi)} dengan nilai probit harapan Y {kolom (vii)}. Bila

perbedaan antara y dan Y lebih besar dari 0,1 maka perhitungan diulangi dari langkah (9).

Nilai y digunakan sebagai penduga yang baru untuk probit harapan Y dan dimasukkan

dalam kolom (vii) pada tabel baru. Masukkan dalam kolom (ii), (iv) dan (v) sama dengan

tabel sebelumnya. Pengulangan ini dilakukan sampai perbedaan antara y dan Y tidak

lebih dari 0,1 (gunakan nilai y terakhir sebagai penduga yang baru bagi Y untuk

pengulangan berikutnya). Persamaan regresi sementara yang diperoleh dari penghitunganterakhir digunakan sebagai persamaan regresi akhir dan penghitungan dilanjutkan ke

langkah (25). Berdasarkan pengalaman, bila data cukup baik dan garis yang diperoleh

pada langkah (6) cukup sesuai, penghitungan satu kali saja biasanya sudah memberikan

kesesuaian yang cukup antara nilai Y dan y (penghitungan tidak perlu diulang).

Catatan:Untuk memperoleh garis yang tepat {diperlukan bila (a) respon dosis tidak kuat, (b) datadigunakan untuk menghitung dosis pembeda dalam pengujian resistensi, atau (c) untuk menentukan penduga bagi nilai LD yang tinggi}, perbedaan nilai Y dan y sebaiknyatidak lebih dari 0,01. Salah satu cara untuk memperoleh ketepatan ini adalah denganmenggunakan interpolasi linier seperti yang dianjurkan pada langkah (9) dan (10).

25) Hitung dosis untuk tingkat % kematian tertentu (misal LD50) dengan menggunakan

persamaan regresi akhir. Gunakan nilai probit untuk % kematian tertentu (p) sebagai nilai

y dalam persamaan regresi untuk menghitung nilai Xp. Cari antilog Xp; bila X = log

dosis + I, kurangi Xp dengan I, kemudian cari antilog (xp-I).

Jadi : yp = probit dari % kematian tertentu

x

x


10/15


p = (yp - a)/b

LDp = antilog (Xp - I)

Catatan: Pada uraian ini LD digunakan sebagai istilah umum untuk "Lethal Dose". Bila 'dosis' yang diuji adalah konsentrasi insektisida pada suatu substrat atau waktu yang diperlukan untuk mematikan binatang uji, maka istilah LD diganti dengan LC ("lethal concentration") atau LT ("lethal time"). Bila dalam pengujian digunakan variabel dankriteria pengaruh akhir yang lain, maka istilah LD perlu diubah dengan istilah yang

sesuai.

26) Bila diperlukan, garis regresi linier dapat digambarkan pada grafik dengan probit

kematian sebagai sumbu-y dan log dosis sebagai sumbu-x.

27) Hitung 2 dengan rumus:

2 = ( S wy2 - y S wy) - b( S wxy - x S wy)

derajat bebas = n-2

Bandingkan nilai 2 ini dengan 2 -tabel pada taraf nyata 5% dengan derajat bebas

(n-2). Bila 2 -hitung < 2 -tabel, maka data cukup homogen dan ragam tidak perlu

dikoreksi (faktor koreksi (c)=1,0). Bila 2 -hitung > 2 -tabel, maka data tidak homogen

dan ragam perlu dikoreksi dengan faktor koreksi yang dapat diduga dengan rumus

berikut:

2 -hitung

C = -------------- (n-2)

28) Hitung A: ( S wx) 2

A = { S wx2 - ---------- }S w

29) Hitung B: B = 1/ S w

30) Hitung D: D = 1/b 2

31) Untuk tiap taraf LD, gunakan Xp untuk menghitung Ep :

Ep = (Xp - x) 2

32) Untuk tiap taraf LD, hitung ragam Vp (termasuk faktor-koreksinya)

Vp = D (b + Ep/A)C

Kemudian hitung: Vp


11/15


33) Untuk tiap taraf LD, hitung batas bawah dari selang kepercayaan (95%) bagi Xp:

Xp' = Xp - 1,96 Vp

34) Untuk tiap taraf LD, hitung batas atas dari selang kepercayaan (95%) bagi Xp:

Xp" = Xp + 1,96 Vp

35) Untuk tiap taraf LD, cari antilog Xp' atau antilog (Xp-I) dan antilog Xp" atau antilog

(Xp"-I). Nilai-nilai ini merupakan batas bawah dan batas atas dari selang kepercayaan

95% bagi LDp. Selang ini dapat digambarkan pada grafik sebagai garis mendatar yang

melalui tiap LDp.

D. Pengamatan Gejala

Langkah pertama dalam menilai pengaruh suatu peracunan adalah mengamati tanggap

fisik dan perilaku binatang uji (yang sengaja diracun). Tanggapan tersebut merupakan dasar-

dasar yang penting untuk menyusun klasifikasi insektisida secara farmakologi.

Pada dosis median, racun syaraf secara khas mengakibatkan penampakan gejala dalam

empat tahapan, yaitu : kekalutan (excitation), kekejangan (convulsions),

kelumpuhan (paralysis), dan kematian (death). Untuk jenis fumigan narkotik hanya

mengakibatkan tiga tahapan gejala, yaitu : Kekalutan, kelumpuhan, dan kematian, sedangkan

uap 'irritant' t idak menimbulkan tahapan kelumpuhan.

Gejala pertama keracunan biasanya tampak setelah selang waktu tertentu. Selang waktu

ini disebut periode latent dan umum ditunjukkan oleh racun perut. Periode kekalutan juga

didahului oleh suatu periode, yaitu serangga tampak gelisah. Pada tahap ini serangga seringkali

menunjukkan gerakan pembersihan yang khas, seperti membersihkan antena atau bagian lain

dengan alat mulutnya. Pada larva, periode prakekalutan tidak jelas. Klinger melukiskan gejala

peracunan piretrin pada ulat sebagai berikut: "ulat menunjukkan gerakan-gerakan yang cepat

dan geliah dengan bagian dorsal terangkat, tungkai palsu berpegangan erat, kepala digerak-

gerakkan ke kiri dan ke kanan, mandibel gemeretak dan makanan dimuntahkan". Larva

nyamuk yang dikenai dieldrin menunjukkan gerakan melekuk dan menjulur.

Perioda kekalutan biasanya dapat dikenali dengan adanya serangga yang berlarian atau

beterbangan dalam keadaan kalut. Lebah madu menjadi sangat gelisah setelah dikenai

khlordane atau piretrin dan terbang kian kemari dalam keadaan kalut. Pada akhir periode

kekalutan, lebah madu menunjukkan gejala kehilangan keseimbangan (ataxia), dengan

penerbangan dan gerakan zig-zag. Lipas yang dikenai racun syaraf, pada akhir periode


12/15


kekalutan menunjukkan ketidak seimbangan gerakan. Pengamatan gejala ini memberikan

keterangan yang berharga mengenai sifat peracunan dalam tubuh hewan uji. Sebagai contoh,

periode laten yang berkepanjangan umumnya menunjukkan perubahan metabolik dari senyawa

yang diuji secara in vivo menjadi senyawa yang lebih beracun.

E. Uji Daya Racun pada Golongan Hewan Tingkat Tinggi

Cara pengujian daya racun insektisida pada hewan tingkat tinggi agak berbeda dengan

pada golongan hewan yang lebih rendah mengingat jumlah hewan uji yang tersedia biasanya

terbatas. Sebagai contoh, tidak sulit untuk memperoleh beberapa ribu Drosophila atau Daphnia

untuk digunakan dalam suatu uji daya racun, tetapi tidak ekonomis atau tidak praktis untuk

menggunakan beberapa ratus mamalia (meskipun mamalia kecil, seperti tikus) dalam uji daya

racun tunggal. Cara penentuan LD50 dalam uji daya racun untuk hewan tingkat tinggi tidak

berbeda dengan untuk golongan hewan yang lebih rendah, tetapi pada hewan t ingkat tinggi

penilaian daya racun lebih ditekankan pada aspek kualitatif proses peracunan daripada aspek

kuantitatifnya.

Keterbatasan hewan uji yang tersedia memerlukan beberapa penyesuaian untuk

menyakinkan keabsahan dari hasil pengujian daya racun pada hewan tingkat tinggi. Dalam

banyak hal, hasil pengujian daya racun pada hewan tingkat tinggi digunakan untuk menilai

keamanan suatu insektisida bagi manusia.


13/15


Tabel 1. Perhitungan Persamaan Regresi untuk menentukan LD50, metode Busvine/Nash

(i) (ii) (iii) (iv) (v) (vi) (vii) (viii) (ix) (x) (xi) (xii) (xiii) (xiv) (xv) (xvi)

Dosis Jumlah%

kematian%

kematian log dosis+1 Probit Probit Probit Koefisien Bobotserangga terkoreksi empirik harapan pencari pembobot

uji x Y y w wx wy wx2 wy2 wxy

3.00 40 100.00 100.00 1.4771 - 7.00 7.42 0.1310 5.240 7.7401 38.8808 11.4331 288.4955 57.4317 7.1186

2.00 50 92.00 91.30 1.3010 6.36 6.28 6.36 0.3428 17.140 22.2997 109.0104 29.0125 693.3061 141.8258 6.3650

1.00 83 56.63 52.86 1.0000 5.08 5.08 5.07 0.6346 52.672 52.6720 267.0470 52.6720 1353.9285 2 67.0470 5.0768

0.75 46 30.43 24.38 0.8751 4.31 4.56 4.32 0.5930 27.278 23.8699 117.8410 20.8876 509.0729 103.1181 4.5421

0.50 58 22.41 15.66 0.6990 3.99 3.84 4.01 0.3840 22.272 15.5675 89.3107 10.8812 358.1360 62.4255 3.7886

0.00 50 8.00 - - - - - - - - - - - - -

Jumlah 124.602 122.149 622.090 124.886 3202.939 631.848

x = 0.9803 y = 4.9926b = 4.2794 a = 0.7974

Persamaan regresi sementara :

y = 0.7974 + 4.2794 x


14/15


Tabel 2. Transformasi probit

%

kematian 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

0 - 2.67 2.95 3.12 3.25 3.36 3.45 3.52 3.59 3.66

10 3.72 3.77 3.82 3.87 3.92 3.96 4.01 4.05 4.08 4.12

20 4.16 4.19 4.23 4.26 4.29 4.33 4.36 4.39 4.42 4.45

30 4.48 4.50 4.53 4.56 4.59 4.61 4.64 4.67 4.69 4.72

40 4.75 4.77 4.80 4.82 4.85 4.87 4.90 4.92 4.95 4.97

50 5.00 5.03 5.05 5.08 5.10 5.13 5.15 5.18 5.20 5.23

60 5.25 5.28 5.31 5.33 5.36 5.39 5.41 5.44 5.47 5.50

70 5.52 5.55 5.58 5.61 5.64 5.67 5.71 5.74 5.77 5.81

80 5.84 5.88 5.92 5.95 5.99 6.04 6.08 6.13 6.18 6.23

90 6.28 6.34 6.41 6.48 6.55 6.64 6.75 6.88 7.05 7.33


15/15

Daya Racun Pestisida

Documents

Transcript of Daya Racun Pestisida