contoh MANAJEMEN LABORATORIUM.docx

7/24/2019 contoh MANAJEMEN LABORATORIUM.docx

1/18

MANAJEMEN LABORATORIUM

Usai Perang Dunia Kedua banyak negara dengan pemerintahan otoriter atau otokratis

berubah menjadi demokratis. Demikian pula lembaga, institusi, organisasi bisnis dan badan

hukum lainnya dalam negera tersebut berubah dari otokratis menjadi demokratis yang

berlandaskan governance, baik participative governance, good governance maupun corporate

governance apalagi dalam era globalisasi, reformasi, demokratisasi, dan desentralisasi atau

otonomi daerah. Dalam makalah ini akan diuraikan organisasi dan tata kerja laboratorium

klinik rumah sakit yang merupakan bagian untuk peningkatan produktivitas pelayanan.

Namun sebelumnya perlu disepakati beberapa istilah yang berkaitan dengan laboratorium

klinik.

1. rganisasi adalah kesatuan atau kelompok kerjasama untuk menggerakkan aktivitas guna

mencapai tujuan. !aboratorium klinik rumah sakit adalah organisasi atau unit rumah sakit

dengan aktivitas pelayanan laboratorium klinik di rumah sakit tersebut. "ergantung dari

status laboratorium dapat juga berfungsi dalam pelayanan, pelatihan, pendidikan dan

penelitian di bidang laboratorium klinik antara lain hematologi, kimia klinik, imunologi,

mikrobiologi klinik, urinalisis dan analisis cairan tubuh lainnya, baik untuk keperluan lab.

klinik sendiri maupun bersama bidang lainnya terutama bidang klinik.

#. rgansiasi laboratorium klinik rumah sakit sebaiknya memperhatikan pilar$pilar

organisasi untuk mencapai tujuan atau sasaran. %edikitnya ada sepuluh pilar yang

perlu dimanfaatkan yaitu nilai &values', struktur &stuctures', kepemimpinan

&leadership', proses manajemen &management pro$cesses', informasi &information',

tata kerja dan kemitraan &procedures and partnership' kompetensi &competences',

penga(asan &controls',kinerja &performance', dan pembayaran &pay'&)'.


2/18

). %esuai dengan judul maka tidak semua pilar dibahas dalam makalah ini.

4.1. Nilai atau Wawasan Organisasi Lab. Klinik

*. Nilai merupakan hal yang mendasar, antara lain berisi visi, misi dan tujuan+sasaran organisasi.

%ejumlah nilai ini tak begitu nampak dalam tata kerja sehari$hari, namun bila ada kesempatan

atau ancaman, nilai tersebut sangat berguna untuk me(ujudkan partisipasi dan kebersamaan

dalam memecahkan permasalahan atau mencapai sasaran.

. %ebagai contoh visi, misi dan sasaran laboratorium klinik rumah sakit secara garis besar adalah

sebagai berikut -

KP/!/ !/0


3/18

P!//N/N, P2!34/5//N /D23N3%"5/%3, KU/N6/N 5K/22D3K,%3%"32, D/N %D2 D/N !63%"3K 3N752/%3 D/N P2/%/5/N

32UN!63 K323/ K!3N3K 42/"!63 8/35/N "U0U4 23K503!63 D/N

D/N !/0. D/N 0/NK U53N/!3%3% D/N P/5/%3" %/2P!3N6 %/"!3" D/5/4

D!!. "!63

Pada contoh ini kepala lab. klinik mengkoordinasi delapan kegiatan, mengimplementasikan

good participative governance untuk pengembangan dan kelestarian lab. klinik, tiga kotak di

atas merupakan sekretariat, sedang lima kotak di ba(ah merupakan kegiatan fungsional lab.

pra$analitik, analitik, pasca$analitik dan pemantapan mutu internal serta eksternal &P23 9

P2'.

!ab satelit yaitu lab. ra(at darurat, lab. intensif dan lab, bank darah.

8ontoh #-

KP/!/ !/0

%K5"/53%


4/18

%K%3 P5$/N/!3"3K %K%3 /N/!3"3K %K%3 P/%8/ /N/!3"3K

Pada contoh ini Ketua lab. mengkoordinasi : kegiatan atau seksi atau sub unit dalam lab.

ditambah tugas keluar untuk pengembangan lab. Di sini perlu sekretaris yang kuat untuk

kebutuhan fungsional lab. yang mengkordinasi administrasi, keuangan, tarif, informasi,

promosi, pamasaran dan lain$lain.

3. Tata Kr!a "i Lab#rat#riu$ Klinik

"ata kerja menggambarkan sistim aliran kegiatan dalam organisasi dalam hal ini lab. hingga

lab. tersebut berfungsi. /gar fungsi lab. tersebut produktif, perlu diterapkan beberapa

%rinsi%, %r#ss, "skri%si %kr!aan "an alur kr!a.

&rinsi% Tata Kr!a

Prinsip tata kerja tersebut antara lain adalah keamanan &security+safety', kesederhanaan

&simpilcity', efektivitas dan efisiensi &effectiviness and efficiency', keadilan &e;uity', kualitas

&;uality', kelestarian &sustainability', tanggung ja(ab &responsibility' dan kesejahteraan

&(elfare'&


5/18

%implicity - = kesederhanaan prosedur administrasi hingga birokrasi diperpendek dan pro$

sedur tetap tes pra$analitik, analitik, dan pasca analitik.

fficiency 9 ffectiveness- = semua bertanggung ja(ab atas kecepatan prosedur tata kerja

hingga dapat selesai tepat (aktu.

;uity - = keadilan dalamprosedur tata kerja antara lain tak membedakan gender dan kaya

miskin dalam pelayanan.

>uality - = kualitas hasil tata kerja administrasi maupun hasil lab harus baik.

5esponsibility - = tanggung ja(ab semua karya(an sesuai deskripsi pekerjaaan dan tata kerja

sesuai tugasnya.

?elfare - = kesejahteraan karya(an maupun pengguna jasa misalnya memberi kemu$dahan

bagi yang tak mempu untuk tetap meningkatkan kesehatan.

%ustainability - = kelestarian pengembangan fungsi lab. hingga terjadi perbaikan berkelanjutan

&continous improvement'.

&r#ss Tata Kr!a

"ata kerja adalah aturan atau mekanisme fungsi unit, seksi atau sub unit di lab. klinik dengan

prinsip partisipatif, profesional dan kebersamaan kerja untuk mencapai sasaran. Koordinasi

menyeluruh oleh kepala lab. dimulai dari perencanaan, pelaksanaan, penga(asan dan

evaluasi hasil. Untuk jelasnya diberikan pengertian$pengertian sebagai berikut-

1. K##r"inasiadalah suatu upaya+usaha pimpinan untuk menyelaraskan kegiatan masing$

masing petugas dalam organisasi dengan maksud agar supaya semua kegiatan yang terkait

dapat diselesaikan tepat (aktu sesuai rencana dengan hasil tepat sasaran atau target. 4al ini


6/18

dapat dilaksanakan dengan jalan mengadakan rapat$rapat baik formal maupun non formal

yang membahas berbagai hambatan yang dihadapi oleh berbagai petugas atau seksi+sub unit

organisasi. Dalam pembahasan tersebut diharapkan akan mencapai kesepakatan bersama

apa yang harus dilakukan agar dapat mengatasi hambatan$kelemahan dan meningkatkan

kesempatan$kekuatan untuk memperoleh hasil yang memuaskan.

'.&rn(anaanadalah proses atau kegiatan menetapkan apa yang akan kita kerjakan di masa

yang akan datang baik mengenai (aktu, jumlah, dan mutunya dalam rangka mencapai

sasaran tertentu. 0ila perencanaan tersebut dapat dicapai dan diselesaikan dengan lebih baik

dan rinci maka tujuan usaha ini dapat dicapai dan diselesaikan dengan lebih memuaskan

karena dapat diselesaikan menurut urutan tingkatan penting dan yang kurang penting.

Perencanaan biasanya dibagi menjadi jangka panjang misal untuk 1@$#* tahun, jangka

menengah untuk lima tahun dan jangka pendek atau rencana tahunan.

3. Organisasi "an &laksanaanadalah pelaksanaan atau tata kerja berdasarkan organisasi

yang ada atau yang dibentuk, semua kegiatan lab. klinik selama #: jam &lab. pagi, sore dan

malam, lab. ra(at darurat dan lab intensif'. Pelaksanaan kegiatan selalu berlandaskan

efektivitas, efisiensi dan produktifitas.

3.a. E)kti*itas adalah evaluasi atau penilaian tentang apakah kegiatan telah dilakukan sesuai

dengan yang direncanakan baik mengenai (aktu kerja maupun mengenai mutu dan

volume kerja.

3.b. E)isinsi adalah suatu evaluasi terhadap suatu proses atau kegiatan dengan jalan

mengukur masukan &input' dengan keluaran &output', atau antara sumber daya yang

digunakan dengan hasilnya, atau satuan biaya tertentu dengan hasilnya.


7/18

3.(. &r#"ukti*itas dapat didefinisikan dengan efisiensi penggunaan sumber daya tertentu

dalam menghasilkan output. 8ara pengukurannya antara lain adalah sebagai berikut-

$ keluaran+hasil &output' per jam orang.

$ Keluaran+hasil &output per unit modal.

A. &ngawasanadalah segala upaya yang harus dilakukan oleh atasan langsung dengan

maksud agar segala sasaran atau rencana yang ingin dilakukan dapat terlaksana dengan

baik. Upaya$upaya dilakukan dalam penga(asan itu banyak bentuk serta variasinya. /pa

saja yang harus diketahui agar supaya penga(asan dapat dilakukan antara lain adalah

sebagai berikut-

4.a/pa yang harus dikerjakan, misalnya-

1. jumlah dan jenis tes

#. mutu hasil tes

). (aktu yang tersedia

4.b %umber daya yang dipakai untuk pekerjaan atau tes tersebut-

1. tenaga kerja misalnya tenaga administrasi atau analis.

#. bahan$bahan misalnya formulir permintaan dan formulir ja(aban tes.

). peralatan operasional dan telah distandarisasi.

:. fasilitas lainnya misalnya aliran listrik dengan tegangan tetap, air bersih, a.c., dll.

4.(Proses dan progres+kemajuan-


8/18

1. apakah menggunakan sumber daya yang tersedia dengan baik atau apa ada

masalahB

#. apakah dalam (aktu yang tersedia dapat diselesaikan, atau apa ada masalahB

). apakah dengan biaya yang pantas misalnya tes tidak diulang$ulang yang

meningkatkan biayaB

:. apakah hasil tes dengan mutunya sesuai dengan mutu standar misalnya pada

Peman$tapan 2utu ksternal &P2' nilainya baikB

*. 0agaimana cara mengatasi masalah$masalah tersebutB

4." %egera mengetahui bila terjadi hambatan-

1. apa yang terjadi misalnya hasil tes tak cocok dengan penyakitnya.

#. apa sebabnya misalnya aliran listrik dan tegangannya.

). cara mengatasinya misalnya stabilitas aliran listrik dan memisahkan dengan

fungsional lain, standarisasi ulang, gangguan alat dan sebagainya.

4./pa yang dilakukan dalam mengatasi hambatan itu-

1. siapa yang melakukan

#. bagaimana caranya

). berapa biayanya

:. kapan selesainya


9/18

4.)0ila pekerjaan selesai-

1. berapa (aktu penyelesaiannya.

#. bagaimana mutu hasil tes.

). bagaimana biayanya dibandingkan dengan biaya operasionalnya.

4.g 0agaimana pekerjaan dapat lestari-

1. prasarana lab., air, listrik dan lain$lain baik.

#. sarana- alat, reagen dan lain$lain tersedia dan diperkirakan tidak kadalu(arsa.

). %D2 terlatih untuk tiap kegiatan tersedia.

4.+ %tabilitas ekonomi, politik dan keamanan yang mendukung fungsi lab. klinik serta

strategi pemasaran yang berhasil untuk pengembangan lab.

,. E*aluasi -asil adalah penilaian hasil kegiatan apakah sesuai dengan perencanaan, apakah

ada hambatan$kelemahan hingga perlu analisis %?" untuk mengurangi hambatan$

kelemahan dan meningkatkan kesempatan kekuatan.

Tknik $#lkulr

%ekarang ini penggunaan metode molekuler telah sangat luas untuk analisis sel dan

penentuan urutan nukleotida dari keseluruhan genom. Pengetahuan mengenai aktivitas DN/

polymerase, enCim restriksi dan DN/ ligase melahirkan teknik$teknik kloning DN/ dan P85

&polymerase chain reaction' yang memungkinkan diisolasinya segmen DN/. Para ilmu(an

juga telah mengembangkan alat dan metode untuk memurnikan protein dan meneliti

fungsinya.

NA

Is#lasi NA


10/18

DN/ adalah molekul yang terdapat pada semua mahluk hidup. 2olekul ini sangat kecil

sehingga tidak dapat dilihat dengan mata. "etapi DN/ dapat diekstrak dari ribuan sel

sehingga DN/ dapat terlihat karena jumlahnya yang sangat banyak. "ahapan dalam ekstraksi

DN/ adalah pemecahan sel, keluarnya DN/ dari nukleus dan pengendapan+presipitasi DN/.

kstraksi DN/ memiliki banyak aplikasi praktis, diantaranya adalah untuk tujuan pemuliaan,

evolusi, sitematik, konservasi, dll.

Dalam ekstraksi DN/ tumbuhan, metode ekstraksi yang sering digunakan adalah berdasarkan

Doyle dan Doyle 1


11/18

ujung lainnya mengikuti. /kibatnya DN/ diatas ukuran tertentu &)@ $*@ kb' bermigrasi

dengan jarak yang sama sehingga tidak dapat diamati pemisahannya. DN/ yang sangat

panjang ini dapat dipisahkan satu sama lainnya dengan jika daerah listrik diaplikasikan dalam

FpulsesG yang berasal secara orthogonal satu sama lainnya. "eknik ini disebut pulsed$field gel

electrophoresis &P76' &6ambar #'.

Pulsed field gel electrophoresis

6ambar #. Pulsed field gel electrophoresis

lektroforesis juga digunakan untuk memisahkan 5N/. %eperti juga DN/, 5N/ memiliki

muatan negative, tetapi molekul 5N/ merupakan molekul utas tunggal dan memiliki struktur

sekunder atau tersier. Untuk mengatasinya, 5N/ diberi perlakuan dengan glyoHal yang

bereaksi dengan 5N/ sehingga menghalangi pembentukan pasangan basa. 5N/ yang ter$

glyoHylasi tidak dapat membentuk struktur sekunder atau tersier sehingga dapat bermigrasi

dengan mobilitas yang proporsional terhadap ukurannya. lektroforesis juga digunakan untuk

memisahkan protein dengan prinsip yang sama.

&$#t#ngan NA "ngan n/i$ rstriksi

Kebanyakan molekul DN/ dalam sel berukuran lebih besar dari yang diperlukan untuk

analisa DN/ di laboratorium. Eika akan mempelajari gen secara individual atau mempelajari

situs individual pada DN/, molekul DN/ berukuran besar di dalam sel harus dipotong ke

dalam fragmen$fragmen yang lebih kecil. Pemotongan DN/ ini dilakukan dengan

menggunakan enCim endonuklease restriksi. Nuklease ini adalah enCim yang memotong

DN/ pada tempat tertentu dengan cara mengenali urutan basa yang spesifik &6ambar )'.

nCim restriksi yang digunakan dalam biologi molekuler umumnya mengenali urutan basa

yang pendek &:$< bp' dan memotong pada posisi tertentu yang telah ditentukan dalam urutan

sekuens DN/ tersebut. 8ontohnya adalah enCim co53 yang ditemukan pada strain

Escherichia colidan merupakan enCim restriksi yang pertama &3' ditemukan pada spesies ini.

nCim ini mengenali urutan DN/ *I$6//""8$)I.


12/18

6ambar ). %itus pengenalan enCim restriksi

Eika molekul DN/ yang sama dipotong dengan enCim restriksi yang berbeda, misalnya oleh4ind333 yang mengenali urutan pb &*I$//68""$)I', atau dipotong dengan co53, maka

molekul DN/ dipotong pada posisi yang berbeda dan menghasilkan fragmen dengan ukuran

yang berbeda &6ambar :'. Eadi sebuah molekul akan menghasilkan sebuah seri karakteristik

pola pemotongan DN/ saat dipotong dengan satu set enCim restriksi yang berbeda.

6ambar :. Pemotongan DN/ dengan co53 menghasilkan fragmen DN/ dengan ukuran

yang bervariasi

nCim restriksi jenis lain seperti %au)/1 yang ditemukan pada bakteri Staphylococcus

aureusmengenali sekuens teramerik &:bp' dengan urutan *I$6/"8$)I sehingga enCim ini

memiliki frekuensi yang lebih tinggi dalam memotong DN/, kira$kira satu kali dalam #*@bp.

Di sisi lain terdapat enCim retriksi yang mengenali sekuens oktamerik &< bp' yaitu enCim Not3

yang mengenali uruta *I$68668868$)I dan rata$rata memotong hanya sekali dalam * kb.

nCim restriksi tidk hanya berbeda dalam urutan basa yang dikenali, tetapi juga pada pada

struktur hasil produk pemotongannya. 0eberapa enCim seperti 4pa3 menghasilkan produk


13/18

dengan ujung tumpul, enCim lain seperti co53, 4ind333 dan Pst3 menghasilkan ujung lengket

&6ambar *'.

6ambar *. Ujung lengket dan ujung tumpul yang merupakan hasil pemotongan DN/ dengan

enCim restriksi

-ibri"isasi NA untuk $ngi"nti)ikasi $#lkul NA 0ang s%si)ik

DN/ yang telah terdenaturasi memiliki kapasitas untuk bergabung kembali &untuk

membentuk kembali pasngan basa di antara utas komplementer'. 4al ini menyebabkanterjadinya pembentukan molekul hybrid saat homolog, DN/ yang terdenaturasi dari dua

sumber yang berbeda bercampur satu sama lain dalam kondisi yang sesuai kekuatan ion dan

temperaturnya. Proses perpasangan basa antara polinukleotida utas tunggal yang

komplementer disebut hibridisasi.

0anyak teknik yang tergantung pada ke$khas$an hibridisasi antara dua molekul DN/ dari

sekuens yang komplementer. %ebagai contoh, hibridisasi merupakan dasar untuk mendeteksi

sekuens spesifik dalam campuran asam nukleat yang kompleks. Dalam hal ini, satu molekul

adalah FprobeG dari sekuens tertentu &dapat berupa sekuens yang dimurnikan atau molekul

DN/ yang disintesis secara kimia. Probe digunakan untuk mencari molekul yang memiliki

sekuens komplementer dalam campuran DN/. DN/ probe harus dilabel, sehingga dapat

dengan mudah diketahui lokasinya saat telah menemukan sekuens targetnya. 8ampuran yang

telah terJprobe dipisahkan berdasarkan ukuran pada gel atau didistribusikan sebagai

perpustakaan klon &library of clones' 6ambar .

2isalnya genom yeast dipotong dengan enCim co53 dan peneliti ingin mengetahui ukuran

fragmen DN/ yang mengandung gen yang diinginkan. %aat di(arnai dengan etidium

bromida, ribuan fragmen DN/ yang dihasilkan dari pemotongan genom yeast dengan enCim

restriksi berjumlah terlalu banyak sehingga tidak dapat dipisahkan menjadi FbandG DN/ yang

terpisah. 2ereka tampak FsmearG. "eknik yang dianamakan %outhern blot hybridiCation akan

mengidentifikasi ukuran dari fragmen tertentu di antara smear DN/. 6el edirendam dalamlarutan alkamli untuk mendenaturasikan double heliks. 7ragmen ini kemudian ditransfer dari


14/18

gel ke membrane yang bermuatan positif tempat DN/ akan terikat. %etelah DN/ tertransfer

pada membran, membran diinkubasi dengan probe yang mengandung sekuens DN/

komplementer dengan sekuens yang diinginkan. FProbingG dilakukan dalam kondisi

konsentrasi garam dan temperature dekat dengan kondisi denaturasi dan reanturasi asam

nukleat. Dalam kondisi ini DN/ probe akan berhibridisasi dengan kuat hanya dengan

komplementer yang tepat.

2edia film atau media yang sensitif terhadap cahaya atau elektron yang dikeluarkan oleh

DN/ yang dilabel dapat mendeteksi lokasi probe berhibridisasi. %aat $ray film diekspos ke

filter dan di$develop, maka akan menghasilkan autoradiogram dengan pola terekspos sama

dengan lokasi hybrid &6ambar '.

6ambar . 4asil probing DN/

Kl#ning NA

Kemampuan molekul DN/ membentuk rekombinan dan menjaganya dalam sel disebut

kloning DN/. Proses ini melibatkan vektor yang menjadi sarana DN/ untuk memperbanyak

klon DN/ dalam sel dan Finsert DN/G yang disisipkan di dalam vector. Kunci untuk

menghasilkan molekul DNa rekombinan adalah enCim restriksi yang memotong DN/ padatempat spesifik dan enCim lain yang yang menyambung DN/ yang terpotong dengan DN/

lain. Dengan menghasilkan molekul DN/ rekombinan yang dapat diperbanyak pada

organisme inang, fragmen DN/ tertentu dapat dimurnikan dan diamplifikasi untuk

menghasilkan produk dalam jumlah besar.

Kl#ning NA "ala$ %las$i" *kt#r

DNa dipotong dengan enCim restriksi, kemudian dimasukkan ke dalam vektor untuk

diperbanyak. 3nang &host' yang umum digunakan untuk memperbanyak DN/ adalah bakteri

E. coli.

Lektor DN/ memiliki tiga karakteristik yaitu-


15/18

1. 2engandung asal replikasi &origin of replication' yang memungkinkan DN/ bereplikasi

secara independen+bebas dari kromosom inang.

#. 2engandung marker selektif yang menyebabkab sel yang memba(a vector &termasuk

DN/ yang diba(a' dapat diidentifikasi

). 2emiliki situs yang unik+khas untuk satu atau lebih enCim restriksi. 4al ini menyebabkan

fragmen DN/ dapat disisipkan pada tempat tertentu dalam vector sehingga penyisipan tidak

mengganggu kedua fungsi lainnya.

Lektor yang paling umum berukuran kecil &kira$kira ) kb' merupakan molekul DN/ sirkular

disebut plasmid. 2olekul ini biasanya ditemukan pada banyak bakteri. Pada banyak kasus,

DN/ plasmid memba(a gen resistensi terhadap antibiotika.

2emasukkan fragmen DN/ ke dalam vector pada dasarnya merupakan proses yang mudah.

2isalnya plasmid memiliki situs pengenalan untuk co53, maka vector disiapkan dengan

memotongnya dengan co 53. Potongan DN/ yang akan diklon kemudian disambungkandengan bantuan DN/ ligase &6ambar A'.

6ambar A. Kloning DN/ dalam plasmid vektor

kt#r "a%at "i$asukkan k #rganis$ inang $lalui trans)#r$asi

"ransformasi merupakan proses dimana organisme inang mengambil DN/ dari lingkungan.

0eberapa bakteri, tetapi bukan E. colidapat mengambil DN/ secara alami dan dikatakan

memiliki kompetensi genetik. . coli dapat bersifat kompeten mengambil DN/ melalui

perlakuan dengan ion kalsium. /ntibiotika kemudian ditambahkan dalam medium untuk

menyeleksi pertumbuhan sel yang mengambil DN/ plasmid $ sell ini disebut transforman.

%el yang memba(a plasmid akan dapat tumbuh pada medium, sedang yang tidak memba(a

plasmid, tidak dapat tumbuh &6ambar A'.

&r%ustakaan $#lkul NA 2NA librar0 "a%at "i+asilkan $lalui (l#ning


16/18

Perpustakaan DN/ merupakan populasi vector identik yang masing$masing berisi insert yang

berbeda. Untuk membuat perpustakaan DN/, DN/ target dipotong dengan enCim restriksi

yang memberikan ukuran rata$rata insert yang diinginkan. Ukuran insert dapat berkisar

kurang dari 1@@ bp sampai lebih dari satu megabase. DN/ yang telah terpotong selanjutnya

dicampurkan dengan vector yang sesuai &yang dipotong dengan enCim restriksi yang sama'

dan ditambah ligase. 4al ini menghasilkan koleksi vector dengan insert DN/ yang berbeda&6ambar


17/18

6ambar . Pembentukan cDN/

-ibri"isasi "igunakan untuk $ngi"nti)ikasi kl#n s%si)ik "ari sbua+ librar0

3dentifikasi fragmen dari sebuah gen di antara klon$kon dapat dilakukan dengan

menggunakan DN/ probe yang urutan DN/nya sesuai dengan sebagian dari urutan DN/ gen

yang diinginkan. Proses penggunaan probe dengan DN/ yang dilabel digunakan untuk

melakukan screening terhadap library disebut colony hybridiCation.

cDN/ library akan memiliki ribuan insert yang berbeda dan masing$masing terdapat dalam

vektot umum. %etelah transformasi ke dalam bakteri khusus yang cocok sebagai inang, sel

ditumbuhkan dalam ca(an petri dalam media agar. "iap sel akan tumbuh menjadi koloni dan

tiap sel dalam koloni mengandung vector yang sama dan insert dari library,

membrane filter dengan positive charge digunakan untuk probing. 2embran ditekan di atas

koloni dan cetakan koloni aakan berada pada membrane. %elanjutnya dilakukan probing

terhadap filter. 7ilter yang mengandung sel diberi perlakuan yang memecah sel dan

mengeluarkan DN/ yang kemudian terikat pada filter pada lokasi yang sama dengan sel.

7ilter selajutnya diinkubasi dengan probe.

PCR (polymerase chain reaction)

P85 adalah sebuah teknik biologi molekuler untuk mereplikasikan DN/ dengan

menggunakan enCim "a; polimerase. P85 digunakan untuk mengamplifikasi bagian DN/

yang pendek &sampai 1@ kb'. %ejak ditemukan oleh Kary 2ullis pada tahun 1


18/18

33. DN/ utas tunggal yang pendek &disebut primer' berikatan dengan DN/ cetakan pada

temperature rendah. 3katan preimer terjadi pada utas yang komplementer dengaan cetakan

pada daerah ujung batas sekuen DN/ target.

333. %uhu ditingkatkan menjadi A#8 sehingga enCim DN/ polymerase dapat melakukan

sintesis DN/ membentuk utas ganda DN/ baru.

3L. Utas ganda DN/ yang baru disintesis, didenaturasi pada suhu tinggi dan siklus berulang.

6ambar 1@ menunjukkan proses P85. Produk P85 diamati dengan gel elektroforesis dengan

menggunakan gel agarose ataupun gel poliakrilamida dan diamati dengan uv$transiluminator.

contoh MANAJEMEN LABORATORIUM.docx

Documents

Transcript of contoh MANAJEMEN LABORATORIUM.docx