ASSALAMUALAIKUM.WR.WB

Nama Kelompok:

Liza Aniatus Zahra (201210070311)

Afirda Khoirun Nisa’ (21210070311)

Yunita Khoirun Nisak

(201210070311120)

May Hastuti Lubis (201210070311129)

PEMBUATAN PREPARAT POLLEN DENGAN METODE

ASETOLISIS

POLLEN MERUPAKAN GAMETOFIT JANTAN PADA TUMBUHAN GYMNOSPERMAE DAN ANGIOSPERMAE, SEDANGKAN SPORA B IASANYA DIHASILKAN TUMBUHAN NON VASKULER SEPERTI ALGA,   JAMUR, LUMUT SERTA TUMBUHAN VASKULER T INGKAT RENDAH YAITU PAKU-PAKUAN. MELALUI PEMBELAHAN MEIOSIS, SEL INDUK MIKROSPORA MEMBELAH MANJADI EMPAT SEL HAPLOID YANG DISEBUT MIKROSPORA ATAU SERING DISEBUT SEBAGAI  BUTIR POLLEN (SERBUK SARI ) DAN SPORA (KAPP,  1969) .  

P E R B E D A A N A N T A R A P O L L E N M O N O K O T I L D A N D I K O T I L A N T A R A L A I N :

1 . B U T I R P O L L E N M O N O K O T I L U M U M N Y A L O N J O N G D I B A N D I N G K A N D I K O T I L . 2 . P A D A M O N O K O T I L B U T I R P O L L E N T E T R A D T U N G G A L Y A N G B I A S A N Y A T E R S U S U N D A L A M S A T U         B I D A N G , S E D A N G K A N D I K O T I L S U S U N A N N Y A B I A S A A N Y A T E T R A H E D R A L

M E T O D E YA N G B I A S A D I G U N A K A N D A L A M M E N G A M A T I P R E PA R A T P O L L E N I A L A H D E N G A N M E T O D E A S E T O L I S I S .   A S E T O L I S I S A D A L A H S A L A H S A T U M E T O D E P E M B U A T A N P R E PA R A T S E R B U K S A R I YA N G M E N G G U N A K A N P R I N S I P M E L I S I S K A N D I N D I N G S E L S E R B U K S A R I D E N G A N A S A M A S E T A T G L A S I A L S E R T A A S A M S U L FA T P E K A T S E B A G A I B A H A N K I M I A F I K S A T I F .   H A L I N I B E R T U J U A N U N T U K M E N D A PA T K A N H A S I L P E N G A M A T A N M O R F O L O G I   D I N D I N G S E R B U K S A R I O R N A M E N T A S I D A R I S E R B U K S A R I T E R S E B U T. S E R B U K S A R I YA N G D I G U N A K A N D A L A M   P E M B U A T A N P R E PA R A T H A R U S L A H M E R U PA K A N S E R B U K S A R I YA N G M A T A N G . S E R B U K S A R I YA N G   M A T A N G D A PA T D I T A N D A I D E N G A N S U D A H T I D A K A D A A I R D A L A M S E R B U K S A R I T E R S E B U T, J I K A S E R B U K   S A R I D I PA T A H K A N M A K A H A N YA A K A N S E P E R T I T E P U N G S A J A . ( H A N D A R I , 2 0 1 1 ) . L A N G K A H - L A N G K A H D A R I P R O S E S A S E T O L I S I S I N I A N T A R A L A I N A D A L A H F I K S A S I , P E M A N A S A N, P E N C U C I A N, P E W A R N A A N ( S T A I N I N G ) , P E N U T U PA N ( M O U N T I N G ) , D A N L A B E L L I N G . ( S U N T O R O, 1 9 8 3 )

Alat

1. Botol Vlakon

2. Pipet tetes

3. Tabung sentrifuge

4. Waterbath

5. Kuas

6. Gelas ukur

7. Batang gelas/ spatula

8. Bunsen

9. Object glass

10. De glass

11. Mikroskop

•A L A T D A N B A H A N

Bahan

 

1. Pollen bunga Hibiscus rosa-

sinensis, Hibiscus tiliaceus,

Passiflora sp, Acacia sp,

Chrysanthemum sp, Jatropha

sp, Lilium sp, Bauhinia

purpurea, Allamanda sp,

Caesalpinia pulcherrima.

2. Asetat Asetat Glasial (AAG)

3. Asam sulfat pekat

4. Safranin 1% dalam aquades

5. Crystal violet

6. Aquades

7. Glyserin Jelly

8. Cutex

Cara kerja:

Hari 1:

1. Menyisir anther dengan menggunakan kuas kecil dan memfiksasi dengan

menggunakan Asam Asetat Glasial (AAG) 45% selama 24 jam.

Hari 2:

2. Memindah bahan ke dalam tabung sentrifuge dan mensentrifugasi dengan

kecepatan 2000 rpm selama ± 10 menit.

3. Mengganti cairan dengan campuran AAG 45% dengan asam sulfat pekat

dengan perbandingan 9:1 (asam sulfat ditambahkan setetes demi setetes ke

dalam AAG).

4. Memanaskan tabung dalam waterbath dengan suhu 65oC selama 3 menit.

5. Mengambil tabung, mendiamkan sampai dingin kemudian mensentrifugasi

selama dengan kecepatan 2000 rpm selama 10 menit..

6. Membuang cairan lalu mencuci dengan aquades, kemudian mensentrifugasi

selama 3 menit dengan kecepatan 3000 rpm.

Melakukan pengulangan sebanyak 2 kali.

7. Memisah bahan menjadi 3 tabung untuk melakukan pewarnaan

menggunakan safranin, crystal violet, dan non warna

Non warna: membuang aquades dan mengganti dengan glyserin

jelly kemudian memasukkan ke dalam waterbath dengan suhu

70oC selama 5 menit. Selanjutnya melakukan mounting. Menuang

bahan pada object glass, menutup dengan de glass, mengolesi

tepi de glass dengan cutex bening. Mengamati di bawah

mikroskop dan memberi label.

Pewarnaan safranin/ crystal violet: mengambil safranin/

crystal violet sebanyak 2 tetes dan mengencerkan dengan

aquades. Kemudian mensentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm

selama 10 menit. Melanjutkan langkah kerja seperti pada

preparat pollen non warna.

POLLEN Jatropha sp (JARAK PAGAR) (40X) NON WARNA

POLLEN Acac ia sp (BUNGA AKASIA) (20X)

POLLEN Acac ia sp (BUNGA AKASIA) (40X)

POLLEN Al lamanda sp (BUNGA ALAMANDA)

POLLEN Bauhinia purpurea (BUNGA KUPU-KUPU)

POLLEN Caesalpinia pulcherima (BUNGA KEMBANG MERAK)

POLLEN Chrysanthemum (BUNGA KRISAN) NO

COLOUR (40X)

POLLEN Hibiscus rosa-sinensis (BUNGA SEPATU)

POLLEN Hibiscus til iaceus (BUNGA WARU) (40X)

SAFRANIN

POLLEN Li l ium sp (BUNGA LILI) (40X)

POLLEN Passifl ora sp (BUNGA MARKISA)(40X)

CRYSTAL VIOLET

POLLEN Passifl ora sp (BUNGA MARKISA) (40X)

NON WARNA

PREPARAT POLLEN Jatropha sp ( JARAK PAGAR)

PERBESARAN 40X (NON WARNA)

Berdasarkan jurnal Palynological Study Of Soil Sample Collected From

An Archaeological Site (Gulabi Bagh) In Lahore, Pakistan disebutkan

bahwa Palynomorph dari Jathropa curcas adalah sebagai berikut: Oblong,

apertura non-porate, memiliki kemungkinan colpate, colporate,

foraminate atau rugate. Terdiri dari 2 sel. Ukuran pollen adalah 31,1μm

dan heteropolar.

Selanjutnya berdasarkan jurnal Palynological Studies In Some Jatropha

Species, butir pollen pada takson ini adalah oblate, spherical,

omniaperturate, dilapisis jaringan tebal dengan struktur clivate, yang

membatasi secara reticulate untuk membentuk struktur crotonoid. Exine

biasanya dilapisi dengan struktur globular. Ukuran rata-rata dari butir

pollen yang berhasil ditemukan adalah 38 μm x 39.26 μm. Ornamental

bertipe psilate.

Berdasarkan jurnal Berdasarkan jurnal Palynological Study Of Soil

Sample Collected From An Archaeological Site (Gulabi Bagh) In Lahore,

Pakistan, diketahui bahwa palynomorph dari Acacia sp adalah sebagai

berikut: Polyad dengan jumlah butir pollen sebanyak 16, 8 butir pollen

terletak di tepi dan 8 butir yang lain berada di tengah yang terbagi

menjadi dua bagian, dimana tiap bagian memiliki 4 butir pollen, ukuran

sedang hingga besar. Individual sel berbentuk subglobose. Tipe ornamen

verrucate.

Di bagian tepi dan kotak di bagian tengah, butir pollen memiliki tipe 3

porate, prolate menuju subspherical permukaan pada bagian periferal

melingkar butir pollen. Prilate memiliki tipe granulate, testat, memiliki

ukuran pori yang berbeda, diameter pori 1.8μm, ukuran periferal butir

pollen 8.4μm. Heteropolar, dengan tebal exine 2.8μm.

Berdasarkan jurnal Palynology of Cultivated Plant

Species at Yala Rajabhat University, Thailand,

diketahui hasil dari penelitian palynology dari

Allamanda sp adalah sebagai berikut: rasio P/E : 1.61,

ukuran garis bujur (Polar) 134.40(138.30)142.20 μm

dan diameter garis tengah (Equator)

85.80(85.90)86.00 μm. Morfologi pollen prolate,

tricolporate, isopolar, simetri radial dengan tipe

tectum granulate.

Berdasarkan jurnal A Palynological Study Of Some

Cultivated Trees From Karachi dijelaskan bahwa tipe

apertura butir pollen Caesalpinia pulcherrima adalah

prolate, tricolporate, triangular, panjang colpi 39.9

(45.78) 52.5μm dan memiliki lebar 14.7 (20.58)

25.2μm, membran colpal reticulate. Mesocolpium

23.1(29.61) 33.6μm. Apocolpium 54.6 (58.59) 63μm.

Tebal exine 2.1(2.31) 3.15μm. Sexine lebih tebal

daripada nexine. Tectum bertipe reticulate-rugulate.

Berdasarkan penelitian yang dipublikasikan pada jurnal Pollen

Morphology Of Selected Bee Forage Plants diketahui bahwa butir

pollen pada Chrysanthemum sp memiliki bentuk exine reticulate,

porate, spheroid, spinolous, dengan bentuk simetri radial.

Sedangkan berdasarkan jurnal Palynocontents of Bee-Collected

Pollen Loads of Autumn Season in Bhimal, India ukuran butir

pollen pada Chrysanthemum adalah sekitar 33 x 34 μm, dengan

tipe apertura prolate-spheroidal, memiliki 3-zonocolporate.

Endocolpium bertipe lalongate, oval dengan ukuran 7 x 3 μm.

Ketebalan exine 9 μm. Dibedakan pada bagian zona akar bawah

dan zona kolom distal, permukaan butir pollen berupa spinate

dan memiliki spina sepanjang 6 μm. Tipe ornamen echinate.

Berdasarkan jurnal Palynological Study Of Some Cultivated Species

Of Genus Hibiscus From North West Frontier Province (N.W.F.P.)

Pakistan diketahui bahwa butir pollen pada Hibiscus rosa-sinensis

memiliki bentuk pantoporate, spherical menuju globose, isopolar,

menunjukkan bentuk simetri radial pada potongan membujur dan

bilateral pada potongan melintang. Pollen berbentuk oval hingga bulat.

Dinding serbuk sari terdiri dari dua lapisan, yaitu exine (lapisan luar)

 tersusun atas sporopolenin, dan intine (lapisan dalam) yang tersusun

atas selulosa. Struktur dinding serbuk sari, khususnya bagian exine,

merupakan salah satu karakter yang digunakan dalam

identifikasi. Struktur halus exine dapat dibedakan menjadi tiga tire,

yaitu: tektat, semitektat, dan intektat. Tipe ornamen exine adalah

echinate.

Malvaceae merupakan famili yang cukup pesat

perkembangannya karena memiliki microrelief berupa

echinate atau duri dan karakterbutir pollen

pantoporate (Perveen, 1993). Jumlah, ketinggian, dan

posisi duri ini beragam dalam keluarga tanaman yang

berbeda di mana itu terjadi, dan merupakan karakter

yang paling penting untuk tujuan identifikasi atau

taksonomi (Pope, 1925). Spesies Hibiscus memiliki

bentuk butir pollen apolar dan pantoporate. Tipe

ornamen exine adalah echinate.

Berdasarkan jurnal Contributions to the pollen morphology

and taxonomy of the Liliaceae rincian pollen pada Lilium sp

adalah monosulcate, berbentuk perahu, heteropolar, dan

memiliki bentuk elips pada potongan membujur, 1-3-porate,

hampir bulat dengan panjang diameter khatulistiwa melebihi

100 mm). Sulcus sering lebih sempit di tengah-tengah, luas dan

mendalam dengan ujung bulat, atau jarang sempit. Terdapat

pori dengan dengan batas yang berbeda. Exine pada Lilium sp

ini tectate-columellate atau semitectate. Permukaan exine

berupa macroreticulate. Tipe ornamen psilate.

Menurut Erdtman (1952), ornamentasi merupakan

suatu bentuk hiasan pada permukaan eksin polen

Passiflora edulis adalah retikulat, yaitu ornamen

berbentuk seperti jala. Sedangkan ornamentasi pada

Passiflora foetida berbentuk retikulat. Pada

permukaan yang berlubang yang ukurannya relative

sama antar satu dan yang lainnya dan saling

berkaitan antar satu dan yang lain. Atau dengan kata

lain ornamentasinya bentuk jala.

DAFTAR PUSTAKA

Chelong, Isma-ae. 2011. Palynology of Cultivated Plant Species at Yala

Rajabhat University, Thailand. KKU J. Sci. 39(3), pp.433-446.

Khola, G. and U. Hanif. 2012. Palynological Study Of Soil Sample

Collected From An Archaeological Site (Gulabi Bagh) In Lahore,

Pakistan. The Journal of Animal & Plant Sciences, 22(4), Pp:

1113-1117. ISSN: 1018-7081.

N. Venu and Munirajappa. (2004-2012). Palynological Studies In Some

Jatropha Species. International Journal of Advanced Biological

Research.Vol. 2(2) 2012: 370-372. ISSN: 2250 - 3579

Oktaviana, T. W. 2014. Laporan Resmi Praktikum Mikroteknik.

Surakarta: 2014.

Ozdemir, C & Pelin Balan. 2012. Morphological, anatomical and

cytological investigation on alpine Lamium cymbalariifolium

endemic to Turkey. AJCS 6(3):532-540 (2012).

Samain, dkk. 2010. Verhuellia Is A Segregate Lineage In

Piperaceae: More Evidence From Flower, Fruit And Pollen

Morphology, Anatomy And Development. Annals of Botany

105: 677–688

WASSALAMUALAIKUM. WR.WB