21 urease

download 21 urease

of 2

Transcript of 21 urease

Uji Urease Tujuan Menentukan kemampuan mikroorganisme dalam mendegradasi urea oleh enzim urease. Prinsip Uji urease dapat menjadi salah satu cara cepat membedakan genus Vulgaris dari mikroorganisme enterik yang tidak bisa memfermentasi laktosa lain. Urease akan menyerang ikatan karbon dan hidrogen pada senyawa anida. Indikator menggunakan pH fenolmetan. pH akan berubah basa dan mengubah fenol merah menjadi merah muda gelap. Teori Dasar Urease adalah enzim yang mengkatalisis yang hidrolisis dari urea ke karbon dioksida dan amonia. Reaksi terjadi sebagai berikut: (NH 2) 2 CO + H 2 O CO 2 + 2 NH 3 Kaldu berisi dua pH buffer, urea, jumlah yang sangat kecil gizi bagi bakteri, dan pH indikator merah fenol. Fenol berubah menjadi kuning merah dalam lingkungan asam dan fuchsia dalam situasi alkaline. Jika urea dalam kaldu yang terdegradasi dan amonia yang dihasilkan, situasi alkaline dibuat, dan media berubah menjadi merah muda. Banyak enterics dapat menghidrolisis urea, namun hanya beberapa dapat menurunkan urea dengan cepat. Ini dikenal sebagai "urease cepat-positif" organisme. Anggota dari genus Proteus termasuk di antara organisme ini. Kaldu urea diformulasikan untuk menguji cepat organisme urease positif. Urease membatasi jumlah nutrisi ditambah dengan penggunaan pH buffer mencegah semua tapi cepat organisme urease positif dari cukup memproduksi amonia untuk mengubah merah fenol merah muda. Tes ini dilakukan pada saat Gastroskopi. Sebuah biopsi dari mukosa diambil dari antrum dari perut, dan ditempatkan dalam medium yang mengandung urea dan indikator seperti fenol merah. The urease yang dihasilkan oleh H. hydrolyzes pylori urea untuk amonia, yang meningkatkan pH medium, dan perubahan warna spesimen. Alat 1. Pembakar bunsen Bahan

1. Kultur E. Coli, Proteus V, Bakteri A dan B 2. Medium kaldu urea dalam tabung Cara Kerja 1. Inokulasikan media dengan masing-masing bakteri 2. Inkubasi pada 37oC selama 24-48 jam