*) Disampaikan pada Bimbingan Teknis PPC dan Analis Benih, tanggal 3 April 2018 di Bogor, Jawa BaratDisusun oleh Endang Murwantini, SP., MP. (PBT Balai Besar PPMB-TPH)

ACUAN

Kepmentan No: 635/HK.150/C/07/2015

tentang Pedoman teknis Pengambilan Contoh

Benih Dan Pengujian/Analisis Mutu BenihTanaman Pangan

Requirements for Sampling ISTA

Rules Chapter 2

The ISTA Handbook on Seed

Sampling

Dokumen Acuan

RUANG LINGKUP (TANAMAN PANGAN)

4

RUANG LINGKUP (ISTA)

Tanaman budidaya (agricutural) dan

sayuran

Tanaman kehutanan dan semak

Tanaman bunga, rempah-rempah,

tanaman obat dan aromatik

benih pellet (pelleted seeds), benih

enscrusted (encrusted seed) dan benih

granules (granules seed)

benih tapes (seed tapes) dan mats

(seed mats)

Pendahuluan

Pengambilan contoh benih adalah tahapan

dasar dan penting dalam suatu rangkaian

pemeriksaan mutu benih, dari mulai

mendapatkan sampel yang mewakili dari lot

benih sampai dengan pengiriman benih.

Karena sebagaimanapun akuratnya pengujian

di laboratorium, hasil hanya menggambarkan

kualitas dari sampel yang dikerjakan analis

ISTA memahami betapa pentingnya proses

pengambilan contoh, sehingga secara jelas ISTA

menyatakan :

“Bahwa pengambilan contoh untuk penerbitan

Orange International Certificate (OIC) atau

sertifikat yang mewakili lot benih hanya dapat

dilakukan oleh petugas yang sudah terlatih secara

khusus, atau lebih jauhnya petugas tersebut sudah

ditunjuk resmi untuk tugas tersebut dan mempunyai

sertifikat pengambil contoh benih sebagai

buktinya”

Tujuan Pengambilan Contoh

Harus bisa mewakili !!

• Mutu contoh = mutu lot

• Rasio bisa lebih dari 1 :

1,000,000

untuk mendapatkan contoh dengan ukuran yang

sesuai untuk pengujian, dan peluang keberadaan

setiap komponen dalam contoh tersebut sama

dengan tingkat keberadaannya di dalam lot benih

(ISTA)

(Kepmentan 635)

Contoh . Dalam suatu lot benih Lolium

multiflorum berukuran 10.000 Kg bisa terdiri dari

25.000.000.000 butir benih

tetapi

• Hanya 150.000 butir yang terdapat

dalam 60gr sampel pengujian other

seed count (1:167.000)

• Hanya 400 butir yang digunakan

dalam pengujian daya

berkecambah (1:62.500.000)

Mengapa pengambilan contoh benih menjadi penting :

1. Pengamatan menyeluruh terhadap suatu populasi

tidak dapat dilakukan

2. Hasil uji lot benih ditentukan oleh

a. Keakuratan pengambilan contoh

b. Keakuratan pengujian laboratorium

3. Sumber keragaman hasil uji berasal dari keragamandalam sampling

• Lot benih :

Volume tertentu dari benih yang dapat diidentifikasi

secara fisik dan unik

• Contoh Primer :

Sejumlah benih yang diambil dari lot benih dengan

satu kali pengambilan pada lot benih.

• Contoh komposit :

Gabungan dan campuran dari semua contoh primer

yang akan digunakan sbg contoh kirim dan contoh

duplikat.

Istilah dan Definisi

Lanjutan...• Contoh kirim :

Suatu contoh untuk dikirim ke laboratorium penguji

benih yang diperoleh dari seluruh contoh komposit

atau sub contoh darinya

• Contoh duplikat :

Contoh benih yang diambil dari contoh komposit

dengan volume, penandaan dan penyegelan sama

dng contoh kirim dan diberi tanda “duplikat”.

• Contoh kerja :

seluruh contoh kirim atau sub contoh darinya

dengan berat minimal untuk suatu uji tertentu

Lanjutan...

• Penyegelan (sealed) :

Wadah yang berisi contoh kirim atau contoh duplikat

disegel(disealed) sehingga tidak dapat dibuka tutup

dengan maksud mengambil benih dan menyebabkan

kerusakan pada segel atau wadah

• Penandaan :

Pemberian identitas yang spesifik pada wadah sesuai

identitas lot benih.

• Petugas Pengambil Contoh benih yang selanjutnyadisebut PPC adalah petugas yang memiliki kompetensidalam pengambilan contoh benih.

zPerlengkapan / Peralatan

z

z

ProdusenBenih

Penyelenggara sertifikasi

Pemeriksaan KelengkapanBerkas hasil kegiatan

Sebelumnya,

PersyaratanTerpenuhi

Pemeriksaan Gudang

Indikasi ketidak

homogenan

Dilakukan Pengambilan

Contoh primer

Tidak

Homogen

ya

PCB ditolak disarankanUji heterogenitas

Prosesing ulang

ya

Tidak

PCB ditolak

Permohonan PCB

Alur Pengambilan Contoh Benih

Hal yang harus diperhatikan saat pengambilancontoh

1. Identitas lot benih

Apakah wadah sudah

diberikan identitas unik ?

Apakah wadah disegel

(sealing) ?

Apakah lot sudah sesuai

dengan identitasnya, seperti :

a. Jumlah wadah

b. Total berat lot

Hal yang harus dicek saat pengambilan contoh

2. Kondisi Lot Benih

• Apakah menggunakan jenis (bahan) wadah dan ukuran

wadah yang sama?

• Apakah semua bagian lot benih dapat diakses/dijangkau

oleh pengambil contoh?

• Apakah membahayakan pengambil contoh, seperti :

a. Bahaya akibat perlakuan kimia:

b. Bahaya akibat listrik

c. Kendaran atau peralatan yang lalu lalang

Susunan lot benih

• Tiap wadah benih memiliki volume yg sama

• Susunan wadah benih memiliki peluang yang sama untuk diambil contoh

• Tidak menempel pada dinding

• Wadah benih disusun pada alas /palet

• Tidak tercampur dg kelompok benih lain

• Mudah dilakukan pcb

• Wadah benih Mudah dihitung

Penyusunan kelompok benih

X

X

X

V

Hal yang harus diperhatikan saat pengambilan contoh

3. Apakah lot cukup homogen

Cek Indikasi ketidak Homogenan :

- dari dokumen (spesies,tgl panen,dll)

- dari wadah

- dari penampakan contoh primer

(seragam atau tidak)

1. Wadah yang berbeda

2. Perbedaan ukuran wadah

3. Perbedaan penandaan atau pelabelan

(atau tidak ada informasi pada wadah)

4. Perbedaan tipe penyegelan

1) Pada saat pertumbuhan dilapangan (Kondisilingkungan, Kondisi tanah, Adanya kompetisi dengangulma, Patogen, Penyakit)

2) Pada saat proses Panen (Kematangan benih saatpanen, Kerusakan akibat alat dan penanganan,Kontaminasi dari alat, Tercampurnya gulma dantanaman lain, Bercak penyakit, serangga)

3) Pada saat proses pasca panen (Kerusakan akibat alatdan penanganan, Kontaminasi dari mesin, Pada saatpengemasan, Pemberian perlakuan benih, Seranggadan hama gudang)

Penyebab heterogenitas lot :

• Apabila kondisi susunanwadah, penandaan danpelabelan didalam gudangatau fasilitas gudang tidaksesuai, maka PPC dapatmenunda pengambilancontoh benih. Dalam halini PPC harus menjelaskankepada pemilik benihmengenai tindakanperbaikan dan membuatjadwal baru pengambilancontoh benih.

Tabel 1

Pengambilan Contoh Benih di Gudang

Jumlah wadah dalam lot Jumlah minimal contoh primer yang diambil

1 – 4 3 contoh primer dari setiap wadah

5 – 8 2 contoh primer dari setiap wadah

9 – 15 1 contoh primer dari setiap wadah

16 – 30 15 contoh primer dari 15 wadah yang berbeda

31 – 59 20 contoh primer dari 20 wadah yang berbeda

60 atau lebih 30 contoh primer dari 30 wadah yang berbeda

Intensitas pengambilan contoh minimal untuk lot benih dalam wadah dengan kapasitas 15 - 100 kg (Tabel 2).

RENCANA PENGAMBILAN CONTOH PRIMER

• Untuk Kelompok benih dengan kapasitas wadah

kurang dari 15 kg, wadah dapat digabung menjadi

unit pengambilan contoh benih yang tidak melebihi

100 kg, misal :

@ 5 kg sebanyak 20 wadah digabung menjadi 1 unit,

@ 3 kg sebanyak 33 wadah digabung menjadi 1 unit

@ 1 kg sebanyak 100 wadah digabung menjadi 1 unit

Unit pengambilan contoh benih dianggap sebagai

satu wadah dan pengambilan contoh benih mengikuti

Tabel 2.

Intensitas pengambilan contoh minimal untuk lot benih

dalam wadah dengan kapasitas lebih dari 100 kg (Tabel 3.)

Ukuran lot (kg) Jumlah contoh primer yang diambil

hingga 500 Paling sedikit 5 contoh primer

501 – 3000 1 contoh primer untuk setiap 300 kg, tapi tidak kurang dari 5

3001 – 20 000 1 contoh primer untuk setiap 500 kg, tapi tidak kurang dari 10

20 001 atau lebih

1 contoh primer untuk setiap 700 kg,tapi tidak kurang dari 40

31 – 59 20 contoh primer dari lot benih

• Terdapat permohonan pengambilan

contoh benih dengan volume lot benih

1200 Kg yang terdiri dari 4 kemasan benih

seberat 300 Kg. berapa contoh primer yang

akan diambil?

- 501 – 3.000 Kg : 1 contoh primer setiap 300 Kg,

min. 5

- 1200 ÷ 300 = 4 contoh primer

- 2 contoh primer dari tiap wadah = 8 contoh

primer

Terdapat permohonan pengambilan sampel

dengan berat lotnya 600 Kg yang terdiri dari 3 x

200 Kg berapa contoh primer yang diambil

dan intensitas pengambilan contohnya?

- 501 – 3.000 Kg : 1 contoh primer setiap 300 Kg,

min. 5

- 600 ÷ 300 = 2 contoh primer

- 2 contoh primer dari tiap wadah = 6 contoh

primer

Alat

Menggunakan Tangan

Benih Curah

( E ) S E T E L A H P E N G A M B I L A N S A M P E L G U N A K A N U J U N G T R I E R U N T U K M E N U T U P K E M B A L I W A D A H .

PENGAMBIL AN CONTOH DAL AM WADAH/KEMASAN

Pengambilan Contoh Dengan trier

Prinsip : trier dapat digunakan secara vertikal maupun horisontal

dengan cara ditusukkan dan setelah benih masuk ke dlm trier kmd

di tarik secara perlahan.

TRIER TIPE NOBBE

Trier Nobbe memiliki ujung yang

runcing, harus cukup panjang untuk

mencapai bagian tengah wadah,

dengan lubang berbentuk oval

dibagian dekat ujung runcing.

Besarnya lubang 2 x diameter benih

yang akan diambil contoh dengan

panjang setidaknya 5 x diameter

benih.

Cocok digunakan untuk

pengambilan contoh pada karung

Penggunaan Nobbe Trier

A. Menusuk dan

mendorong trier ke

dalam kantong, dengan

posisi lubang berada

dibawah

B,C & D Memutar trier

sehingga lubang

menghadap atas dan

menariknya perlahan dr

kantong

TRIER TIPE STICK / SLEEVE

Stick trier terdiri dari tabung dalam dan tabung luar. Ukuran

tabung dalam harus sesuai dengan tabung luar agar tabung

dalam bisa digerakkan tetapi benih tidak bisa terselip diantara

celah antara kedua tabung.

Dapat digunakan untuk pengambilan contoh secara vertikal atau

horizontal

S T I C K / S L E E V E T R I E R D E N G A N P A R T I S I

STICK/SLEEVE TRIER tanpa

partisi

Penggunaan Stick/Sleeve Trier

1. Stick trier diperiksa dan dibersihkan;

2. Wadah ditusuk dengan posisi stick trier tertutup;

3. Stick trier didorong secara perlahan sehingga ujungnya

tidak menembus sisi yang berlawanan dari wadah;

4. Stick trier dibuka dengan memutar dan menarik tabung

bagian dalam;

5. Stick trier digoyangkan sampai terisi benih;

6. Stick trier ditutup perlahan dan ditarik, stick trier

dikosongkan dengan memasukkan contoh primer ke dalam

wadah.

• Bersihkan tangan dan gulung lengan baju

jika diperlukan

• Masukan tangan kedalam wadah, sesuai

posisi yang diinginkan

• Ambil benih dengan cara digenggam

• Masukan benih kedalam wadah pengumpul

Pengambilan contoh benih dari wadah

dengan tangan

• Merupakan metode yang paling sesuai untuk

benih yang dapat rusak dengan penggunaan

trier, benih berukuran besar dan yang tidak

memungkinkan penggunaan trier. Untuk benih

yang menggunakan perlakuan bahan kimia

dianjurkan menggunakan sarung tangan.

• Pengambilan contoh benih dengan tangan

dapat dilakukan pada wadah benih yang

berisi benih dengan kedalaman maksimal 40

cm dari permukaan benih.

PENGAMBIL AN CONTOH BENIH PRIMER DARI BENIH CURAH • Menggunakan pelican atau automatic sampler. Interval

waktu pengambilan contoh primer harus konstan dan titik

pengambilan contoh benih bervariasi secara acak.

Menggunakan alat manual :

- Pelican sampler : benih jatuh bebas secara vertikal

Menggunakan alat Otomatis

Persyaratan untuk

pengambilan contoh dengan

alat otomatis

* Jenis tanaman

*Warna benih

* Bentuk dan ukuran

* Tingkat kemurnian

Bila terlihat tidak

homogen, verifikasi

pengambilan contoh

primer dgn pemilik benih

*Bila contoh primer dalam kelompok benih

terlihat homogen maka contoh benih tersebut

digabung dalam satu wadah menjadi contoh

komposit. Jika terlihat tidak homogen maka

pengambilan contoh benih dihentikan dan harus

dilakukan uji heterogenitas.

*Contoh kirim diperoleh dari pengurangan contoh

komposit dengan menggunakan salah satu

metode yaitu menggunakan mechanical devider,

metode paruhan yang dimodifikasi atau metode

paruhan tangan. Jumlah contoh kirim sesuai

dengan Tabel 1.

* SKEMA PENGAMBILAN CONTOH BENIH

DIGUDANG

1 2 3 4 5

Contoh Komposit

Contoh Kirim

(Submitted sample)

Contoh Kerja

Di Laboratorium

Pengurangan merata

Pengurangan merata

dst

Contoh u/ Kadar Air

Contoh u/

Kesehatan

METODE PENGURANGAN CONTOH BENIH

Tujuan dari pengurangan contoh benih adalah untuk

mengurangi jumlah contoh komposit dan mendapatkan

contoh kirimBerdasarkan ISTA Rules 2014 Chapter 2 (2.5.2.2) :

Metode Pengurangan secara Mekanis

• Soil atau Riffle Devider

• Centrifugal Devider

• Conical Devider

• Rotary Devider

• Variabel Devider

Metode Pengurangan dengan Tangan

• Metode Sendok

• Metode Paruh Tangan

• Modified Halving Method

SOIL ATAU RIFFLE DEVIDER

Cara penggunaan

1. Timbang contoh komposit

2. Letakan devider pada yang stabil, rata dan bersih

3. Bersihkan devider dan ketiga wadah penampung. Tempat kan wadah tepat dibawah lubang saluran

4. Tuang contoh komposit pastikan semua saluran pada devider mendapatkan bagian yang sama

5. Isi dari kedua wadah satukan kembali kedalam wadah contoh komposit

6. Ulangi dahulu 2x proses no. 4-5 untuk menghomogenkan benih, kali ke- 3 baru didapat 2 sub contoh benih

7. Ambil salah satu bagian lalu ulangi proses sampai mendapatkan jumlah contoh benih yang diinginkan

CENTRIFUGAL DEVIDER

1. Timbang contoh komposit

2. Letakan devider pada yang stabil, rata dan bersih

3. Bersihkan devider dan wadah penampung. Tempat kan wadah tepat dibawah lubang saluran

4. Tuang contoh kedalam corong

5. Nyalakan devider

6. Matikan devider jika contoh sudah terbagi

7. Ulangi dahulu 2x proses no. 4-6 untuk menghomogenkan benih, kali ke- 3 tbaru didapat 2 sub contoh benih

8. Ambil salah satu bagian lalu ulangi proses sampai mendapatkan jumlah contoh benih yang diinginkan

1. Bersihkan alat dan wadah

penampung,

2. Tutup katup yang berada tepat di

bawah corong

3. simpan wadah pada posisi

4. Timbang contoh kompositnya

5. Tuang benih kedalam corong

6. Buka katup dengan cepat

7. Untuk menghomogenkan ulangi

langkah 2-6 (1 atau 2 kali)

8. Untuk pengurangan ulangi

langkah 2 – 6

CONICAL DEVIDER

Metode paruh tanganA. Contoh komposit

B. Membuat gundukan pada

meja, homogenkan

C. Memulai membagi dua

gundukan;

D. Mempunyai dua paruhan;

E. Paruhan berikutnya, empat

bagian;

F. menjadi delapan bagian;

G. Delapan bagian yang disusun

dalam dua baris, bagian

pertama dan ketiga dari baris

pertama serta bagian kedua

dan keempat dari baris kedua

(ditandai oleh jari)

dikumpulkan dalam satu

wadah;

H. Sub contoh paruh siap untuk

pengujian atau pengurangan

berikutnya;

CONTOH KIRIM

• Untuk mengidentifikasi contoh kirim, kodeidentifikasi yang unik pada lot harusdimunculkan/disebutkan pada contoh kirim(contoh tertelusur ke lot benih)

• Jenis perlakuan kimia jika ada harus disampaikanpada laboratorium pengujian benih.

• Contoh kirim harus disegel

Penandaan & penyegelan contohkirim :

Terdapat beberapa cara penyegelan, diantaranya :

Penandaan & penyegelan contoh kirim :

1. Penyegelan dengan menggunakan penjepit

2. Penyegelan dengan menggunakan snap-on

3. Penyegelan dengan menggunakan tali

CONTOH KIRIM

Apanya

yang

salah

ya ?

Salah

Benar

Beberapa contoh soal

1. Satu lot benih spinach terdiri dari 100 kantong, yang mana 10 kantong terlihat telah basah

2. Satu lot benih mentimun terdiri dari 20 kantong, dimana 3 kantong tidak punya label.

3. Satu lot benih kol terdiri dari 20 kantong yang ternyata setelah pengambilan sampel, terdiri dari 2 set masing masingnya terdiri dari 10 kantong, masing masing set dari 10 kantong tsb mempunyai berat berbeda.

4. Lot benih buncis terdiri dari 20 kantong, dimana 5 kantong berisi benih dengan bentuk yang sama dengan benih pada 15 kantong lain tetapi seragam kuning-putih bukan putih murni bagus seperti benih dalam 15 kantong lainnya .

5. Lot benih wortel terdiri dari 20 kantong di mana variasi yang pasti dalam ukuran benih dari kecil ke besar ditemukan. Variasinya sama dalam semua kantong.

Jawab

1. Lot dipecah menjadi 2 menjadi 90 kantong

dan 10 kantong

2. 3 kantong dipisahkan dan tidak diambil

contohnya, 17 kantong diambil contoh

benihnya dan dijelaskan bahwa intensitas lot

yang diambil dari 17 kantong.

3. Dijadikan 2 lot, masing-masing 10 kantong,

diambil contoh benihnya

4. Lot dipisah menjadi 2, lot 1 terdiri dari 5

kantong dan lot 2 terdiri dari 15 kantong

5. Lot tersebut bisa diambil contohnya menjadi

satu lot