REKAYASA GENETIKA BAKTERI

TRANSFER DNA PD BAKTERI

RECOMBINAN GENETIK

ENDONUKLEASE RESTRIKSI

DNA LIGASE:• Enzim yg memperbaiki potongan DNA

& menggabungkan 2 fragmen DNA mjd molekul

double-stranded

TAHAP-TAHAP KLONING

ISOLASI DNA PADA REKAYASA GENETIK

CONTOH BBRP VEKTOR YG DIGUNAKAN PD REKAYASA GENETIK

KLONING PD PLASMID DLM JUMLAH BESAR

KLONING DALAM PLASMID

PENGGUNAAN PLASMID pBR 322 SBG VEKTOR KLONING

FAGA LAMBDA PD JALUR LITIK & LISOGENIK

LIFE CYCLE OF A LYSOGENIC OR TEMPERATE VIRUS

PROSEDUR PENGGUNAANBAKTERIOFAGA LAMBDASBG VEKTOR KLONING

KLONING GEN SOMATOSTATIN DLM E. COLI Lac operon Somatostatin gene Plasmid DNA-----P---O---B-gal- TACwwwwwwwwwwwwACT------

Transcription ↓ ↓ Induction with Lactose Somatostatin mRNA ------AUGwwwwwwwwwwwwUGA-----

↓ ↓Translation B-gal-met-----Somatostatin-----stop

↓ Cyanogen bromide

B-gal-met + -----Somatostatin-----

KLONING GEN INSULIN DLM BACILLUS SUBTILIS

Trp operon Insulin A genePlasmid DNA----P---O---trpE --TACwwwwwwwwwwwwACT------

↓ ↓ Derepression of Transcription Trp operon Insulin A mRNA mRNA------------AUGwwwwwwwwwwwwUGA------

↓ ↓Translation TrpE-met-------Insulin A-------stop

↓ Cyanogen bromide cleavage

TrpE fragments + -------Insulin A-------

KLONING GEN INTERFERON DLM E.COLI

control elements (RPO) Interferon genePlasmid DNA---Beta-lactamase gene--TACwwwwwwwwwwwwACT------

Transcription ↓ ↓

interferon mRNA mRNA------------AUGwwwwwwwwwwwwUGA------

↓Translation met -------interferon-------stop

Cyanogen bromide cleavage ↓ met + -------interferon-------