Post on 27-Nov-2020
PENGARUH MEDIUM LIMBAH ORGANIKTERHADAP AKTIVITAS ENZIM PROTEASEDARI ISOLAT KAPANG TANAH WONOREJO
Ni Wayan Nanik Santika Dewi1510 100 021
TUGAS AKHIR SB091358
Dosen Penguji:Tutik Nurhidayati, S.Si., M.SiDra. Nurlita Abdulgani, M.SiN.D. Kuswytasari, S.Si., M.Si
JURUSAN BIOLOGIFakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Institut Teknologi Sepuluh Nopember Surabaya2014
PENDAHULUANLatar Belakang
“Protein”
ENZIM “PROTEASE”
“KAPANG”
Medium “limbah organik”
KAPANG sbg“AGEN HAYATI
pendegradasiprotein”
Penicillium sp. 3 T3F2 (protease 2.416 U/mL)
Verticulum sp. T3.3 (protease 2.088 U/mL)
Trichoderma sp.1 T2I3 (protease 0.734 U/mL)
(Yusriah, 2013)
Bagaimana aktivitas enzim protease dariPenicillium sp. 3 T3F2, Verticillium sp. T3.3 danTrichoderma sp. 1 T3I2 secara tunggal dankonsorsium, yang optimal dalam mendegradasiprotein pada medium limbah cair organik yangberbeda?
Rumusan Permasalahan
Batasan Masalah
1. Isolat yang digunakan merupakan hasil uji potensi penghasilprotease koleksi Laboratorium Mikrobiologi danBioteknologi Jurusan Biologi ITS yaitu Penicillium sp. 3T3F2, Verticillium sp. T3.3 dan Trichoderma sp. 1 T3I2secara tunggal dan konsorsium.
2. Aktivitas eksoprotease dalam mendegradasi protein diukurdengan parameter konsentrasi fenilalanin, tirosin dantripthofan menggunakan spektrofotometer pada panjanggelombang 275 nm.
Tujuan Penelitian
Mengetahui aktivitas enzim protease dariPenicillium sp. 3 T3F2, Verticillium sp. T3.3 danTrichoderma sp. 1 T3I2 secara tunggal dankonsorsium, yang optimal dalam mendegradasiprotein pada medium limbah organik yang berbeda.
Manfaat Penelitian
Manfaat dari penelitian ini adalahdidapatkan isolat kapang tanah Wonerejosebagai agen hayati pendegradasi protein padalimbah organik.
Waktu dan Tempat PenelitianPenelitian ini dilaksanakan pada bulan Februari
sampai Juni 2014, di Laboratorium Mikrobiologidan Bioteknologi Biologi ITS.
METODOLOGI
ALUR PENELITIANISOLAT
Peremajaan Isolat
Pembuatan KurvaPertumbuhan
Penentuan Usia Starter
Karakterisasi Limbah Cair
Pembuatan Starter
Degradasi protein padamedium limbah organik oleh
isolat terpilih
Aktivitas EnzimProtease
Nilai DegradasiProtein
Pertumbuhan isolat pada Medium PDB :(a)Medium awal ; (b) Penicillium sp. 3 T3F2; (c) Verticillium sp. T3.3; (d) Trichoderma sp. 1 T3I2.
(a) Penicillium sp. 3 T3F2; (b) Verticillium sp. T3.3; (c) Trichoderma sp. 1 T3I2.
Hasil Penelitian dan Pembahasan
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
0 24 48 72 96 120 144 168Trichoderma sp. 0 0,37 0,68 0,73 0,79 0,84 0,79 0,76Verticillium sp. 0 0,09 0,4 0,56 0,7 0,61 0,6 0,6Penicillium sp. 0 0,11 0,5 0,61 0,7 0,8 0,75 0,74
Bio
mas
sa (
g)
Jam ke-
Trichoderma sp. Verticillium sp. Penicillium sp.
Kurva Pertumbuhan Isolat
Fase Lag
Fase Log
Fase Stasioner
“JenisLimbah”
(a) (b) (c)
Limbah pH Suhu (◦C) Total protein (mg/mL)
Pencucian Ikan (a) 7 32 0.757
Limbah tangki septik (b) 7 32 0.564
Limbah cair tahu (c) 5 40 0.701
Aktivitas Protease dan Degradasi Protein
Medium Limbah Cair Pencucian Ikan
0,000
0,050
0,100
0,150
0,200
0,250
0
10
20
30
40
50
60
K PN VT TC PN + VT PN + TC VT + TC PN + VT + TC
Akt
ivita
s pro
teas
e (U
/mL
)
Deg
rad
asi p
rote
in (
%)
(K: Kontrol; PN: Penicillium sp. 3 T3F2; VT: Verticillium sp. T3.3 dan TC: Trichoderma sp. 1 T3I2;
(U/mL) 0.083a 0.208c 0.218c 0.214c 0.219c 0.207c 0.214c 0.168b
(%) 11.571 28.370 43.304 33.705 48.394 26.627 41.638 21.109
Medium Limbah Tangki Septik
0,000
0,020
0,040
0,060
0,080
0,100
0,120
0,140
0,160
0,180
0
5
10
15
20
25
30
35
40
K PN VT TC PN + VT PN + TC VT + TC PN + VT + TC
Akt
ivita
s pro
teas
e (U
/mL
)
Deg
rad
asi p
rote
in (
%)
(K: Kontrol; PN: Penicillium sp. 3 T3F2; VT: Verticillium sp. T3.3 dan TC: Trichoderma sp. 1 T3I2).
(U/mL) 0.078a 0.135b 0.132b 0.133b 0.149b 0.148b 0.141b 0.137b
(%) 3.465 12.466 10.580 11.277 31.268 23.210 16.608 14.578
Medium Limbah Cair Tahu
0,000
0,050
0,100
0,150
0,200
0,250
0
10
20
30
40
50
60
K PN VT TC PN + VT PN + TC VT + TC PN + VT + TC
Akt
ivit
as p
rote
ase
(U/m
L)
Deg
rad
asip
rote
in (
%)
(K: Kontrol; PN: Penicillium sp. 3 T3F2; VT: Verticillium sp. T3.3 dan TC: Trichoderma sp. 1 T3I2).
(U/mL) 0.038a 0.197c 0.196c 0.162b 0.222c 0.158b 0.214c 0.207c
(%) 3.053 28.535 22.809 20.993 44.627 14.903 39.081 38.240
Perbandingan Aktivitas enzim Protease
0,000
0,050
0,100
0,150
0,200
0,250
0,300
K PN VT TC PN +VT PN + TC VT + TC PN + VT + TC
Limbah Pencucian Ikan Limbah Tangki Septik Limbah Cair Tahu
K PN VT TC PN+VT PN+TC VT+TC PN+VT+TCLPI 0.083b 0.208f 0.218f 0.214f 0.219f 0.207f 0.214f 0.168e
LTS 0.078b 0.135cd 0.132c 0.133cd 0.149cde 0.148cde 0.141cde 0.137cd
LCT 0.038a 0.197f 0.196f 0.162de 0.222f 0.158cde 0.214f 0.207f
(K: Kontrol; PN: Penicillium sp. 3 T3F2; VT: Verticillium sp. T3.3 dan TC: Trichoderma sp. 1 T3I2)
“Ralat Notasi”
Perbandingan Degradasi Protein
0
10
20
30
40
50
60
K PN VT TC PN +VT
PN + TC
VT + TC
PN + VT + TC
Limbah Pencucian Ikan 11,571 28,370 43,304 33,705 48,394 26,627 41,638 21,109Limbah Tangki Septik 3,465 12,466 10,580 11,277 31,268 23,210 16,608 14,578Limbah Cair Tahu 3,053 28,535 22,809 20,993 44,627 14,903 39,081 38,240
(K: Kontrol; PN: Penicillium sp. 3 T3F2; VT: Verticillium sp. T3.3 dan TC: Trichoderma sp. 1 T3I2)
Kesimpulan dan Saran
Kesimpulan
Medium limbah cair organik dan jenis isolat berpengaruhsignifikan terhadap aktivitas enzim protease dengan nilai Pvalue = 0.000 (<0.005).
Konsorsium isolat Penicillium sp. 3 T3F2 + Verticillium sp.T3.3 memiliki nilai aktivitas enzim protease dan degradasiprotein tertinggi pada ketiga jenis medium. Pada mediumlimbah cair pencucian ikan sebesar 0.219 U/mL; 48.394 %.Medium limbah tangki septik, 0.149 U/mL; 31.268 %.Medium limbah cair tahu 0.222 U/mL; 44.627 %.
Saran
Perlu adanya identifikasi dan karakterisasienzim protease, serta aplikasi di lapangandengan kontrol nutrien pada agen hayati yangdigunakan dalam mendegradasi limbahorganik.
TERIMAKASIH...