Post on 02-Jan-2016
description
Pemeriksaan tinja
Pemeriksaan tinja untuk diagnosis parasitologi dilakukan untuk mendeteksi: Cacing dewasa Segmen dari cacing pita Ova dan kista Larva Trofozoit Selular eksudat seperti leukosit, sel darah merah, makrofag dan Charcot-Leyden (CL) Kristal
Koleksi sample feses
Minta pasien untuk mengeluarkan sampel tinja langsung ke karton atau cangkir plastik bertutup. Sekitar 20-40 gram atau 5-6 sendok tinja sudah cukup untuk pemeriksaan rutin. Menelan obat (Tetrasiklin, sulfonamid,antiprotozoal agen, pencahar, antasida, minyak jarak, hidroksida
magnesium, barium sulfat, senyawa kaolin bismut dan garam hipertonik dll) sebelum koleksi feses dapat
mengganggu deteksi parasit. Semua spesimen harus diberi label dengan nama pasien, usia, jenis kelamin, dan tanggal
pengumpulan. Spesimen harus mencapai laboratorium dalam waktu 30 menit karena trofozoit amuba mati dan
menjadi sulit dikenali setelah itu.
Catatan Jangan menyimpan spesimen pada suhu hangat. Cobalah untuk menyimpannya dalam sejuk, tempat-
tempat teduh. cegah pengeringan spesimen. cegah kontaminasi dengan urin atau partikel kotoran. Tinja tidak boleh dikumpulkan dari tempat yang mengandung desinfektan.
Transportasi sampel
Jika mencari trofozoit, spesimen tinja harus dikrim segera ke laboratorium untuk menghindari
disintegrasi trofozoit. sampel feses harus diperiksa dalam waktu 30 menit dari koleksi. spesimen feses
tidak boleh dibekukan dan dicairkan atau ditempatkan dalam inkubator karena bentuk parasit
memburuk dengan sangat cepat. Untuk fiksasi permanen dari spesimen tinja, digunakan pengawet 10% formol-garam (dibuat dengan
menambahkan formalin 100 ml hingga 900 ml natrium klorida 0,85%) . Polivinil alkohol (PVA) adalah
juga pengawet yang banyak digunakan
Pemeriksaan makroskopik Berbagai poin yang perlu dicatat adalah:
Konsistensi: Konsistensi tinja bisa padat, lembut, encer atau berair. Kista ditemukan dalam tinja padat
sementara trofozoit umumnya di tinja berair. Adanya darah dan lendir. Adanya cacing bulat, cacing benang atau proglottids cacing pita . Warna dan bau tinja.
Pemeriksaan mikroskopis (preparat basah)
Ini adalah teknik sederhana dan mudah. Dapat dibuat langsung dari material tinja atau dari
spesimen terkonsentrasi. Jenis prweparat basah meliputi: a) Preparat Saline : digunakan untuk mendeteksi telur cacing atau larva, protozoa trofozoit dan
kista. Selain itu dapat mengungkapkan adanya sel darah merah dan leukosit. b) Preparat Yodium : Hal ini digunakan untuk noda glikogen dan inti dari kista.
Prosedur Tempat setetes salin pada kiri slide dan satu tetes yodium di kanan slide. Dengan aplikator ambil sebagian kecil dari spesimen (seukuran pentol korek api) dan campur
dengan salin. Demikian pula jumlah yang sama diambil dan campur dengan setetes yodium. Tutup dengan cover slip dan amati di bawah mikroskop. Ova, kista, trofozoit dan cacing dewasa dapat diidentifikasi sesuai ciri karakteristik mereka (Gambar 1
dan Tabel 1).
Preparat Yodium diperiksa untuk amuba dan kista flagellar .
Gambar 1: fitur morfologi parasit umum ( telur / ovum / kista)
teknik Konsentrasi Jika jumlah parasit dalam spesimen tinja adalah rendah, pemeriksaan preparat basah direct
tidak dapat mendeteksi mereka, maka tinja harus dikonsentrasi. Telur, kista dan larva utuh
setelah prosedur konsentrasi sedangkan trofozoit bisa hancur selama proses. Hal ini
kenapa pemeriksaan preparat basah direct wajib dikerjakan sebagai tahap awal
pemeriksaan mikroskopis. Prosedur konsentrasi dikelompokkan dalam 2 kategori:
a) Sedimentasi : Di mana telur dan kista menetap di bagian bawah. b) Flotasi: Di mana telur dan kista mengambang di permukaan akibat gradien gravitasi
tertentu. Kelemahan ,mendasar teknik sedimentasi adalah bahwa pemeriksaan sedimen sering sulit
karena banyaknya puing-puing feses yang mungkin menutupi
keberadaan parasit. Kelemahan ,mendasar teknik flotasi adalah bahwa tidak semua telur dan
kista mengapung . Dua macam larutan yang digunakan pada teknik konsentrasi umumnya adalah formalin-eter
dan larutan jenuh garam. teknik Sedimentasi eter -formal
Prosedur
Transfer setengah sendok teh feses dalam 10 ml air dalam wadah kaca dan aduk rata. Saring dengan kain kasa, masukkan filtrate ke dalam tabung centrifuge 15 ml. Centrifuge selama 2 menit pada sekitar 500 g. Buang supernatan dan resuspend sedimen dalam 10 ml garam fisiologis. Centrifuge pada 500
g dan buang supernatan. Resuspend sedimen dalam 7 ml formalin 10% (1 bagian formalin 40% dalam 3 bagian saline). Tambahkan 3 ml eter (atau etil asetat). Tutup tabung dengan stopper dan kocok dengan keras supaya campur. Lepaskan stopper dan
centrifuge di 500g selama 2 menit. Berdirikan tabung. Tampak empat lapisan, lapisan atas terdiri dari eter, kedua adalah plug
puing,ketiga adalah lapisan formalin dan keempat adalah sedimen (Gambar 2). Buang puing debris dengan memiringkan tabung dan dengan menggunakan tongkat
kaca, dan tuangkan cairan hingga menyisakan sejumlah kecil formalin untuk suspensi
sedimen. Dengan pipet, ambil sedimen dan campur dengan setetes yodium. Periksa di bawah
mikroskop.
Gambar 2: teknik sedimentasi Formal eter
Keuntungan
bau Tinja hilang Sensitivitas deteksi kista atau ova meningkat 8-10 kali lipat. Pemeriksaan lebih mudah daripada pemeriksaan preparat basah direct. Ukuran dan bentuk struktur parasit dipertahankan.
murah, mudah dilakukan dan dapat dilakukan pada setiap tingkat sarana kesehatan.
Kekurangan
puing-puing Tinja mungkin menutupi struktur parasit. bentuk Trophozoite tidak terdeteksi dalam metode ini.
teknik flotasi Jenuh garam
Tempatkan sekitar satu mililiter dari feses dalam wadah yang datar dan memiliki diameter
kurang dari 1 ½ inci dan kapasitas sekitar 15-20 ml (Gambar 3). Tambahkan beberapa tetes larutan garam jenuh (berat jenis 1.200) dan aduk hingga
membentuk emulsi Tambahkan larutan garam sehingga kontainer hampir penuh, aduk merata. Buang semua partikel kasar yang mengapung ke atas. Tempatkan wadah pada permukaan yang datar. Tambahkan larutan garam dengan
mwemakai pipet sampai terbentuk meniskus cembung. Sebuah slide kaca 3 "x 2" letakkan di atas wadah secara hati-hati sehingga bagian tengah
slide kontak dengan fluida. Biarkan selama 20 menit, setelah itu angkat slide dengan gerakan cepat, untuk
menghindari tumpahan cairan dan periksa di bawah mikroskop setelah ditutup
dengan coverslip.
Gambar 3: Teknik Flotasi
Kekurangan teknik flotasi
Tidak semua telur trematodal dan larva Strongyloides mengambang dalam larutan garam. Karena berat jenis tinggi dari larutan, kista protozoa dan telur nematoda berdinding tipis
akan rusak dan menjadi terdistorsi dalam penampilan jika dibiarkan selama lebih dari 20
menit.
Biosafety
Ikuti prinsip-prinsip umum laboratorium untuk Keamanan seperti mencuci tangan,
memakai sarung tangan, desinfesi tempat kerja
Menangani bahan kimia dengan hati-hati. tindakan pencegahan khusus harus dilakukan
untuk menyimpan bahan kimia eksplosif (asam picric dan kristal fenol) dan pelarut mudah
terbakar seperti aseton, eter, benzena, xylene dll Peralatan dan gelas harus ditangani dengan hati-hati untuk meminimalkan risiko cedera dan
produksi aerosol. Buang bahan infeksius pada tempat khusus.
Pembuangan bahan wajar
Setelah dilakukan pemeriksaan. spesimen tinja harus dibakar atau direndam dalam larutan
desinfektan dan kemudian dikubur slide kaca bekas harus dibuang dalam panci yang berisi larutan hipoklorit 1% dan
dibersihkan jika untuk digunakan kembali atau dikubur jika tidak digunakan lagi.
Jaminan Kualitas Perhatian harus diberikan kepada semua analitik, analisis pra dan pasca-analitis Laboratorium harus berpartisipasi dalam penilaian kualitas eksternal.
Pelaporan hasil Laporan tersebut harus mencakup komentar positif / negatif sebagai berikut:
Cacing Dewasa / segmen cacing / larva. Selular Eksudat seperti sel darah merah, leukosit, makrofag dan kristal CL. Trofozoit (hanya pada sample yang segar) Ova dan kista. Saran untuk pemeriksaan lebih lanjut.
Rujukan
Sebagai bagian dari program jaminan kualitas. Dalam hal temuan yang tidak biasa atau keadaan wabah.
Tabel 1: fitur Penting : kista trofozoit, dan telur parasit
Kista / telur /trofozoit
Fitur
Entamoeba histolytica trof
ozoit 12-60 μ, asimetris, motil, inti bulat tunggal, pusat karyosome tunggal , halus
dan kromatin merata .
Entamoeba histolytica Kis
ta Bulat, 10-20 μ kista matang memiliki empat inti terletak di pusat
karyosome; kromatin halus. Beberapa kista mungkin
memiliki chromatoid bar.
Giardia lamblia trofozoit 9-21x5-15 μ, berbentuk pir dengan ujung lancip, motil aktif seperti daun
jatuh, 2 inti di tengah , sitoplasma granular .
Giardia lamblia kista Oval, 8-12 μ panjang dan lebar 7-10 μ, inti memiliki 4 karyosome, cenderung
eccenterically; ruang yang jelas antara dinding sel dan sitoplasma. Memiliki
Empat badan median.
Entamoeba coli Kista 10-35 μ, biasanya berbentuk bola, kista matang mungkin berisi 8 atau 16
inti. kromatin perifer adalah kasar dan granular; heterogen; karyosome
biasanya eksentrik. kromatid bar jarang terlihat.
telur cacing gelang
Subur 60x45 μ, bulat atau bulat telur dengan cangkang tebal; ditutupi
oleh mantel albuminous tebal, warna cokelat.
telur cacing gelang
Terkupas mantel Albuminous hilang. Semua fitur lainnya sama seperti di telur subur.
telur cacing gelang 90x40 μ, memanjang, cangkang sering tipis,
Telur cacing tambang Oval, ellipsoid, μ 60x40. Shell adalah berdinding tipis, halus dan tidak
berwarna.
Threadworm telur Planoconvex, memanjang, telur asimetris, 55x26 μ, shell tipis dan
halus. Penuh larva pada telur.
Telur cacing cambuk Memanjang, berbentuk barel dengan plug hialin pada kutub, 22-54 u, Shell
kuning sampai kecoklatan
Telur cacing pita Bulat, 31-43μ shell tebal dengan striations radial
menonjol. Embrio memiliki 3 pasang kait dalam shell adalah diagnostik
dari genus oncosphere. identifikasi spesies berdasarkan morfologi adalah
tidak mungkin.